CN111826297A - 一种产琼胶酶菌株的选育方法 - Google Patents
一种产琼胶酶菌株的选育方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111826297A CN111826297A CN201910311086.2A CN201910311086A CN111826297A CN 111826297 A CN111826297 A CN 111826297A CN 201910311086 A CN201910311086 A CN 201910311086A CN 111826297 A CN111826297 A CN 111826297A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- agarase
- culture medium
- type
- producing
- producing strain
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/02—Separating microorganisms from their culture media
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/70—Vectors or expression systems specially adapted for E. coli
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明属于产琼胶酶菌株选育领域,尤其是一种产琼胶酶菌株的选育方法,针对现有的产琼胶酶菌株在琼脂平板上会形成凹陷,同时培养基中的有机营养物含量高,蛋白胨为1%,酵母粉为0.5%,无法纯化产琼胶酶菌株的问题,现提出如下方案,其包括以下步骤:S1:制备三种分离培养基,三种分离培养基分别为I型培养基、II型培养基、III型培养基,S2:挑取凹陷中的菌落与1毫升无菌水,混匀,作为种子液;S3:将种子液梯度稀释,稀释成三种浓度的种子液,然后将三种浓度的种子液涂布于三种分离培养基上,本发明所用培养基为寡营养培养基,有机营养物含量低,能够顺利纯化产琼胶酶菌株,同时能够精准控制人工海水加入量。
Description
技术领域
本发明涉及产琼胶酶菌株选育技术领域,尤其涉及一种产琼胶酶 菌株的选育方法。
背景技术
琼胶是一种亲水性的红藻多糖,琼胶酶能够水解琼胶多糖,因此 琼胶酶在红藻的单细胞分离、酶解破壁制备原生质体等过程中具有重 要的价值,是海藻遗传工程的工具酶。
现有技术中,产琼胶酶菌株在琼脂平板上会形成凹陷,同时培养 基中的有机营养物含量高,蛋白胨为1%,酵母粉为0.5%,无法纯化 产琼胶酶菌株,因此我们提出了一种产琼胶酶菌株的选育方法,用来 解决上述问题。
发明内容
本发明的目的是为了解决现有技术中存在产琼胶酶菌株在琼脂 平板上会形成凹陷,同时培养基中的有机营养物含量高,蛋白胨为 1%,酵母粉为0.5%,无法纯化产琼胶酶菌株的缺点,而提出的一种 产琼胶酶菌株的选育方法。
为了实现上述目的,本发明采用了如下技术方案:
一种产琼胶酶菌株的选育方法,包括以下步骤:
S1:制备三种分离培养基,三种分离培养基分别为I型培养基、 II型培养基、III型培养基,
S2:挑取凹陷中的菌落与1毫升无菌水,混匀,作为种子液;
S3:将种子液梯度稀释,稀释成三种浓度的种子液,然后将三种 浓度的种子液涂布于三种分离培养基上,挑单菌落划线,没能获得纯 种的产琼胶酶菌株;
S4:在制备种子液时添加表面活性剂Tween20,表面活性剂 Tween20的浓度为3%-6%,将种子液涂布于三种分离培养基上,挑单 菌落划线,仍然没能获得纯种的产琼胶酶菌株;
S5:挑单菌落于I型培养基和II型培养基,分别在15℃,28℃, 37℃,45℃的温度条件下培养;
S6:12-24h后,仅在28℃的I型培养基长出了产琼胶酶的菌株, 挑单菌落培养1-2d后,煮沸法提取基因组DNA,并依此为模板PCR扩 增16S rRNA基因片段,与克隆载体连接后,转化大肠杆菌;送测序 公司进行测序;测序成功,获得纯种的产琼胶酶菌株,序列比对结果为:与产琼胶酶菌种Agarivorans litoreus的16S rRNA基因序列相 似性为99.05%。
优选的,所述S1中,称量蛋白胨3-5g,琼脂10-20g,加Na+人 工海水补至1L,即可制得I型培养基。
优选的,所述S1中,称量琼脂10-20g,加Na+人工海水补至1L, 即可制得II型培养基。
优选的,所述S1中,称量蛋白胨1-2g,琼脂10-20g,加Na+人 工海水补至1L,即可制得III型培养基。
优选的,所述S3中,三种浓度的种子液的浓度分别为:10-1、 10-2、10-3。
优选的,所述S4中,在制备种子液时添加表面活性剂Tween20, 表面活性剂Tween20的浓度为6%,将种子液涂布于三种分离培养基 上,挑单菌落划线,仍然没能获得纯种的产琼胶酶菌株。
优选的,所述S6中,24h后,仅在28℃的I型培养基长出了产 琼胶酶的菌株,挑单菌落培养2d后,煮沸法提取基因组DNA,并依此 为模板PCR扩增16S rRNA基因片段,与克隆载体连接后,转化大肠 杆菌;送测序公司进行测序;测序成功,获得纯种的产琼胶酶菌株, 序列比对结果为:与产琼胶酶菌种Agarivorans litoreus的16S rRNA 基因序列相似性为99.05%。
优选的,在加Na+人工海水时,首先将蛋白胨和琼脂放进水箱内, 然后在水箱内设一个浮板,浮板上固定安装一个浮杆,浮杆的顶部固 定安装一个对射型光电传感器,在水箱的顶部再安装一个对射型关电 传感器,两个对射型光电传感器连上同一个控制器,当水箱内的溶液 到达1L时,此时两个对射型光电传感器正好连通,给控制发送信号, 控制器接收到信号关闭电磁阀,停止人工海水的加入,精准控制人工 海水加入量。
本发明中,所述一种产琼胶酶菌株的选育方法所用培养基为寡营 养培养基,有机营养物含量低,蛋白胨为0.5%,酵母粉为0%,在这 种寡营养配养基上顺利纯化了产琼胶酶菌株,同时能够精准控制人工 海水加入量,本发明所用培养基为寡营养培养基,有机营养物含量低, 能够顺利纯化产琼胶酶菌株,同时能够精准控制人工海水加入量。
具体实施方式
下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然, 所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。
实施例一
一种产琼胶酶菌株的选育方法,包括以下步骤:
S1:制备三种分离培养基,三种分离培养基分别为I型培养基、 II型培养基、III型培养基,
S2:挑取凹陷中的菌落与1毫升无菌水,混匀,作为种子液;
S3:将种子液梯度稀释,稀释成三种浓度的种子液,然后将三种 浓度的种子液涂布于三种分离培养基上,挑单菌落划线,没能获得纯 种的产琼胶酶菌株;
S4:在制备种子液时添加表面活性剂Tween20,表面活性剂 Tween20的浓度为3%,将种子液涂布于三种分离培养基上,挑单菌落 划线,仍然没能获得纯种的产琼胶酶菌株;
S5:挑单菌落于I型培养基和II型培养基,分别在15℃,28℃, 37℃,45℃的温度条件下培养;
S6:12h后,仅在28℃的I型培养基长出了产琼胶酶的菌株,挑 单菌落培养1d后,煮沸法提取基因组DNA,并依此为模板PCR扩增16S rRNA基因片段,与克隆载体连接后,转化大肠杆菌;送测序公司进 行测序;测序成功,获得纯种的产琼胶酶菌株,序列比对结果为:与产琼胶酶菌种Agarivorans litoreus的16S rRNA基因序列相似性为 99.05%。
本实施例中,称量蛋白胨3g,琼脂10g,加Na+人工海水补至1L, 即可制得I型培养基;S1中,称量琼脂10g,加Na+人工海水补至1L, 即可制得II型培养基;S1中,称量蛋白胨1g,琼脂10g,加Na+人工 海水补至1L,即可制得III型培养基。
实施例二
一种产琼胶酶菌株的选育方法,包括以下步骤:
S1:制备三种分离培养基,三种分离培养基分别为I型培养基、 II型培养基、III型培养基,
S2:挑取凹陷中的菌落与1毫升无菌水,混匀,作为种子液;
S3:将种子液梯度稀释,稀释成三种浓度的种子液,然后将三种 浓度的种子液涂布于三种分离培养基上,挑单菌落划线,没能获得纯 种的产琼胶酶菌株;
S4:在制备种子液时添加表面活性剂Tween20,表面活性剂 Tween20的浓度为4%,将种子液涂布于三种分离培养基上,挑单菌落 划线,仍然没能获得纯种的产琼胶酶菌株;
S5:挑单菌落于I型培养基和II型培养基,分别在15℃,28℃, 37℃,45℃的温度条件下培养;
S6:18h后,仅在28℃的I型培养基长出了产琼胶酶的菌株,挑 单菌落培养1.5d后,煮沸法提取基因组DNA,并依此为模板PCR扩增 16S rRNA基因片段,与克隆载体连接后,转化大肠杆菌;送测序公 司进行测序;测序成功,获得纯种的产琼胶酶菌株,序列比对结果为: 与产琼胶酶菌种Agarivorans litoreus的16S rRNA基因序列相似性 为99.05%。
本实施例中,称量蛋白胨4g,琼脂15g,加Na+人工海水补至1L, 即可制得I型培养基;S1中,称量琼脂15g,加Na+人工海水补至1L, 即可制得II型培养基;S1中,称量蛋白胨1.5g,琼脂15g,加Na+ 人工海水补至1L,即可制得III型培养基。
实施例三
一种产琼胶酶菌株的选育方法,包括以下步骤:
S1:制备三种分离培养基,三种分离培养基分别为I型培养基、 II型培养基、III型培养基,
S2:挑取凹陷中的菌落与1毫升无菌水,混匀,作为种子液;
S3:将种子液梯度稀释,稀释成三种浓度的种子液,然后将三种 浓度的种子液涂布于三种分离培养基上,挑单菌落划线,没能获得纯 种的产琼胶酶菌株;
S4:在制备种子液时添加表面活性剂Tween20,表面活性剂 Tween20的浓度为6%,将种子液涂布于三种分离培养基上,挑单菌落 划线,仍然没能获得纯种的产琼胶酶菌株;
S5:挑单菌落于I型培养基和II型培养基,分别在15℃,28℃, 37℃,45℃的温度条件下培养;
S6:24h后,仅在28℃的I型培养基长出了产琼胶酶的菌株,挑 单菌落培养2d后,煮沸法提取基因组DNA,并依此为模板PCR扩增16S rRNA基因片段,与克隆载体连接后,转化大肠杆菌;送测序公司进 行测序;测序成功,获得纯种的产琼胶酶菌株,序列比对结果为:与产琼胶酶菌种Agarivorans litoreus的16S rRNA基因序列相似性为 99.05%。
本实施例中,称量蛋白胨5g,琼脂20g,加Na+人工海水补至1L, 即可制得I型培养基;S1中,称量琼脂20g,加Na+人工海水补至1L, 即可制得II型培养基;S1中,称量蛋白胨2g,琼脂20g,加Na+人工 海水补至1L,即可制得III型培养基。
本实施例一、二、三能够顺利纯化产琼胶酶菌株,且实施例三为 最佳实施例。
以上所述,仅为本发明较佳的具体实施方式,但本发明的保护范 围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技 术范围内,根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改 变,都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种产琼胶酶菌株的选育方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1:制备三种分离培养基,三种分离培养基分别为I型培养基、II型培养基、III型培养基,
S2:挑取凹陷中的菌落与1毫升无菌水,混匀,作为种子液;
S3:将种子液梯度稀释,稀释成三种浓度的种子液,然后将三种浓度的种子液涂布于三种分离培养基上,挑单菌落划线,没能获得纯种的产琼胶酶菌株;
S4:在制备种子液时添加表面活性剂Tween20,表面活性剂Tween20的浓度为3%-6%,将种子液涂布于三种分离培养基上,挑单菌落划线,仍然没能获得纯种的产琼胶酶菌株;
S5:挑单菌落于I型培养基和II型培养基,分别在15℃,28℃,37℃,45℃的温度条件下培养;
S6:12-24h后,仅在28℃的I型培养基长出了产琼胶酶的菌株,挑单菌落培养1-2d后,煮沸法提取基因组DNA,并依此为模板PCR扩增16S rRNA基因片段,与克隆载体连接后,转化大肠杆菌;送测序公司进行测序;测序成功,获得纯种的产琼胶酶菌株,序列比对结果为:与产琼胶酶菌种Agarivorans litoreus的16S rRNA基因序列相似性为99.05%。
2.根据权利要求1所述的一种产琼胶酶菌株的选育方法,其特征在于,所述S1中,称量蛋白胨3-5g,琼脂10-20g,加Na+人工海水补至1L,即可制得I型培养基。
3.根据权利要求1所述的一种产琼胶酶菌株的选育方法,其特征在于,所述S1中,称量琼脂10-20g,加Na+人工海水补至1L,即可制得II型培养基。
4.根据权利要求1所述的一种产琼胶酶菌株的选育方法,其特征在于,所述S1中,称量蛋白胨1-2g,琼脂10-20g,加Na+人工海水补至1L,即可制得III型培养基。
5.根据权利要求1所述的一种产琼胶酶菌株的选育方法,其特征在于,所述S3中,三种浓度的种子液的浓度分别为:10-1、10-2、10-3。
6.根据权利要求1所述的一种产琼胶酶菌株的选育方法,其特征在于,所述S4中,在制备种子液时添加表面活性剂Tween20,表面活性剂Tween20的浓度为6%,将种子液涂布于三种分离培养基上,挑单菌落划线,仍然没能获得纯种的产琼胶酶菌株。
7.根据权利要求1所述的一种产琼胶酶菌株的选育方法,其特征在于,所述S6中,24h后,仅在28℃的I型培养基长出了产琼胶酶的菌株,挑单菌落培养2d后,煮沸法提取基因组DNA,并依此为模板PCR扩增16S rRNA基因片段,与克隆载体连接后,转化大肠杆菌;送测序公司进行测序;测序成功,获得纯种的产琼胶酶菌株,序列比对结果为:与产琼胶酶菌种Agarivorans litoreus的16S rRNA基因序列相似性为99.05%。
8.根据权利要求2所述的一种产琼胶酶菌株的选育方法,其特征在于,在加Na+人工海水时,首先将蛋白胨和琼脂放进水箱内,然后在水箱内设一个浮板,浮板上固定安装一个浮杆,浮杆的顶部固定安装一个对射型光电传感器,在水箱的顶部再安装一个对射型关电传感器,两个对射型光电传感器连上同一个控制器,当水箱内的溶液到达1L时,此时两个对射型光电传感器正好连通,给控制发送信号,控制器接收到信号关闭电磁阀,停止人工海水的加入,精准控制人工海水加入量。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201910311086.2A CN111826297A (zh) | 2019-04-18 | 2019-04-18 | 一种产琼胶酶菌株的选育方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201910311086.2A CN111826297A (zh) | 2019-04-18 | 2019-04-18 | 一种产琼胶酶菌株的选育方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN111826297A true CN111826297A (zh) | 2020-10-27 |
Family
ID=72915708
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201910311086.2A Pending CN111826297A (zh) | 2019-04-18 | 2019-04-18 | 一种产琼胶酶菌株的选育方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN111826297A (zh) |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101451113A (zh) * | 2008-11-06 | 2009-06-10 | 国家海洋局第二海洋研究所 | 一种需钠弧菌及采用该菌生产琼胶酶的方法 |
CN102586150A (zh) * | 2012-03-03 | 2012-07-18 | 浙江大学舟山海洋研究中心 | 产生褐藻胶裂解酶的菌株及其发酵方法 |
CN103865850A (zh) * | 2014-03-14 | 2014-06-18 | 福建农林大学 | 一株蝙蝠弧菌及制备琼胶酶的方法 |
CN103898012A (zh) * | 2014-03-14 | 2014-07-02 | 福建农林大学 | 一株海旋菌及制备琼胶酶的方法 |
CN105331597A (zh) * | 2015-11-10 | 2016-02-17 | 福建省金燕海洋生物科技股份有限公司 | 一种高纯度琼胶酶的制备工艺 |
CN105420142A (zh) * | 2015-10-13 | 2016-03-23 | 中国海洋大学 | 一种来源于海洋生物的细菌Pseudoalteromonas.sp.QJ97及用其生产琼胶酶的方法 |
-
2019
- 2019-04-18 CN CN201910311086.2A patent/CN111826297A/zh active Pending
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101451113A (zh) * | 2008-11-06 | 2009-06-10 | 国家海洋局第二海洋研究所 | 一种需钠弧菌及采用该菌生产琼胶酶的方法 |
CN102586150A (zh) * | 2012-03-03 | 2012-07-18 | 浙江大学舟山海洋研究中心 | 产生褐藻胶裂解酶的菌株及其发酵方法 |
CN103865850A (zh) * | 2014-03-14 | 2014-06-18 | 福建农林大学 | 一株蝙蝠弧菌及制备琼胶酶的方法 |
CN103898012A (zh) * | 2014-03-14 | 2014-07-02 | 福建农林大学 | 一株海旋菌及制备琼胶酶的方法 |
CN105420142A (zh) * | 2015-10-13 | 2016-03-23 | 中国海洋大学 | 一种来源于海洋生物的细菌Pseudoalteromonas.sp.QJ97及用其生产琼胶酶的方法 |
CN105331597A (zh) * | 2015-11-10 | 2016-02-17 | 福建省金燕海洋生物科技股份有限公司 | 一种高纯度琼胶酶的制备工艺 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
YASUSHI SUGANO ET AL.: ""Purification and Characterization of a New Agarase from a Marine Bacterium, Vibrio sp. Strain JT0107"", 《APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY》 * |
周钦茂等: ""一株高产琼胶酶海洋细菌的筛选与鉴定"", 《生物技术通报》 * |
王祥红等: ""产琼胶酶海洋细菌的分离、鉴定及其分解琼胶实验"", 《生物学通报》 * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN108220175B (zh) | 酿酒酵母高密度培养方法及其pH调控方法 | |
JP2009516526A (ja) | 組換え酵母におけるリンゴ酸の生産 | |
CN104087560A (zh) | 一种细菌漆酶突变体蛋白、其重组表达质粒、转化的工程菌株及其发酵制备方法 | |
JP7459509B2 (ja) | トリコデルマ属糸状菌の変異株およびタンパク質の製造方法 | |
CN111748480B (zh) | 一种维斯假丝酵母及其应用 | |
CN102321682A (zh) | 一种发酵丁二酸分离过程水循环利用的方法 | |
CN103451201B (zh) | 高效利用碳源生产生物塑料phbv的极端嗜盐古菌工程菌 | |
CN111826308B (zh) | 一株海洋沉积物来源的几丁质高效降解菌及其应用 | |
CN111826297A (zh) | 一种产琼胶酶菌株的选育方法 | |
CN107245451A (zh) | 裂殖壶菌wzyu011及其生产凝乳酶的方法 | |
CN107723300B (zh) | 过表达CgGsh1基因提高产甘油假丝酵母2-苯乙醇耐受性及产量 | |
CN105062981A (zh) | 一种酶活性提高的丙酮酸羧化酶突变体n315f及其应用 | |
CN113293107B (zh) | 一种高有机酸耐受性能的工业生产用酿酒酵母及其构建方法 | |
CN107641604A (zh) | 一株耐高温酿酒酵母菌株及其构建方法 | |
CN113416731A (zh) | 用于筛选vfm群体感应信号淬灭菌和抑制剂的报告系统及其构建方法 | |
CN115418322B (zh) | 低产酸解脂耶氏酵母选育及在赤藓糖醇发酵中的应用方法 | |
CN114507684B (zh) | 一种抑制地中海富盐菌中目的基因表达的方法 | |
CN110904092A (zh) | 一种高产gaba的短乳杆菌复合诱变育种的方法 | |
CN105132388A (zh) | 一种酶活性提高的丙酮酸羧化酶突变体r485p及其应用 | |
CN114958853B (zh) | 一种来源于黑曲霉的低糖响应诱导型启动子、方法及其应用 | |
CN109161565B (zh) | 一种利用乳清生产乙醇的方法 | |
CN104293687B (zh) | 一种提高酿酒酵母菌株乙酸耐受性的方法 | |
CN115044489B (zh) | 一种利用连续发酵分离一体化技术培养酿酒酵母的方法 | |
CN114507611B (zh) | α-酮戊二酸生产用耐高温酵母及发酵方法 | |
CN106085887A (zh) | 一种α‑葡萄糖苷酶基因敲除的黑曲霉菌株及其应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20201027 |
|
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |