CN111795939B - 一种监测磁微粒混悬液分装均匀度的方法 - Google Patents

一种监测磁微粒混悬液分装均匀度的方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种监测磁微粒混悬液分装均匀度的方法，包括以下步骤：a)取空白酶标板，使用酶标仪第一次读数，得到空白值；b)在磁微粒混悬液分装过程中，取分装前的一组作为基准组，再取分装过程中的一组和/或分装后的一组作为监测组，然后将基准组和检测组中的磁微粒混悬液加入酶标板，使用酶标仪第二次读数，分别得到基准组检测值和监测组检测值；c)计算基准组和监测组的均匀度偏差，根据计算结果判断磁微粒混悬液分装均匀度是否正常。与现有技术相比，本发明首次提出采用酶标仪来监测磁微粒混悬液均匀度的方法，该方法操作简单，可现场监测并直接计算出均匀度偏差，检验步骤清晰明了，检验结果真实可靠，具有通用性。

Description

一种监测磁微粒混悬液分装均匀度的方法
技术领域
本发明涉及磁微粒技术领域，更具体地说，是涉及一种监测磁微粒混悬液分装均匀度的方法。
背景技术
磁微粒是指磁性纳米粒子与无机或有机分子结合形成的可均匀分散于一定基液中具有高度稳定性的胶态复合材料。因其具有超顺磁性、较高的比表面积、可修饰功能基团等特性，因此可以将抗原/抗体、酶、核酸、小分子药物等固定在其表面，从而用于生物医学研究领域。
磁微粒化学发光反应是通过磁微粒混悬液上包被的抗原/抗体与标本中抗体/抗原结合，再与酶标抗原/抗体结合，偶联在抗原或抗体上的酶催化发光底物进行的；反应结果以发光值体现，通过换算浓度值来判断标本中待测抗体或抗原的浓度。磁微粒混悬液作为磁微粒化学发光检测实验中最重要的一个组分，其分装均匀度会对反应结果产生影响，从而影响标本中待测抗体或抗原浓度的判断。
但是，磁微粒混悬液放置一段时间，由于磁珠粒径大，沉降速率快，易产生沉降，从而使磁微粒混悬液的分装均匀度超过可控范围，造成批内差异较大，影响产品性能；而磁微粒混悬液瓶间均匀度差别较大，检测结果就不准确，极易引起对结果的误判，从而导致医疗纠纷。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种监测磁微粒混悬液分装均匀度的方法，该方法操作简单，可现场监测并直接计算出均匀度偏差，检验步骤清晰明了，检验结果真实可靠，具有通用性。
本发明提供了一种监测磁微粒混悬液分装均匀度的方法，包括以下步骤：
a)取空白酶标板，使用酶标仪第一次读数，得到空白值；
b)在磁微粒混悬液分装过程中，取分装前的一组作为基准组，再取分装过程中的一组和/或分装后的一组作为监测组，然后将基准组和检测组中的磁微粒混悬液加入酶标板，使用酶标仪第二次读数，分别得到基准组检测值和监测组检测值；
c)计算基准组和监测组的均匀度偏差，根据计算结果判断磁微粒混悬液分装均匀度是否正常。
优选的，步骤a)中所述空白酶标板为96孔空白酶标板。
优选的，步骤a)中所述第一次读数采用酶标仪双波450nm/630nm读数。
优选的，步骤b)中所述将基准组和检测组中的磁微粒混悬液加入酶标板第二次读数前，还包括：
采用移液枪对基准组和检测组中的磁微粒混悬液进行吹打；所述吹打的次数为8次～12次。
优选的，步骤b)中基准组中的磁微粒混悬液加入酶标板4孔～12孔，加入酶标板每孔的量为80μl～120μl。
优选的，步骤b)中监测组中的磁微粒混悬液加入酶标板4孔～12孔，加入酶标板每孔的量为80μl～120μl。
优选的，步骤b)中所述第二次读数采用酶标仪双波450nm/630nm读数。
优选的，步骤c)中所述计算基准组和监测组的均匀度偏差的方式具体为：
c1)将基准组检测值减去对应的空白值，得到基准组吸光度M1；将监测组检测值减去对应的空白值，得到监测组吸光度M2；
c2)当M1＞M2时，基准组和监测组的均匀度偏差＝(M1/M2-1)×100％；
当M1＝M2时，基准组和监测组的均匀度偏差＝0；
当M1＜M2时，基准组和监测组的均匀度偏差＝(M2/M1-1)×100％。
优选的，步骤c)中所述根据计算结果判断磁微粒混悬液分装均匀度是否正常的过程具体为：
基准组和监测组的均匀度偏差在控制范围内，分装均匀度正常；否则，分装均匀度不正常。
优选的，所述控制范围由产品性能要求或公司需求确定。
本发明提供了一种监测磁微粒混悬液分装均匀度的方法，包括以下步骤：a)取空白酶标板，使用酶标仪第一次读数，得到空白值；b)在磁微粒混悬液分装过程中，取分装前的一组作为基准组，再取分装过程中的一组和/或分装后的一组作为监测组，然后将基准组和检测组中的磁微粒混悬液加入酶标板，使用酶标仪第二次读数，分别得到基准组检测值和监测组检测值；c)计算基准组和监测组的均匀度偏差，根据计算结果判断磁微粒混悬液分装均匀度是否正常。与现有技术相比，本发明提供的方法首次提出采用酶标仪来监测磁微粒混悬液均匀度，能够解决由于磁微粒混悬液沉降速度快导致分装均匀度超过可控范围的问题；该方法操作简单，可现场监测并直接计算出均匀度偏差，检验步骤清晰明了，检验结果真实可靠，具有通用性。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明提供了一种监测磁微粒混悬液分装均匀度的方法，包括以下步骤：
a)取空白酶标板，使用酶标仪第一次读数，得到空白值；
b)在磁微粒混悬液分装过程中，取分装前的一组作为基准组，再取分装过程中的一组和/或分装后的一组作为监测组，然后将基准组和检测组中的磁微粒混悬液加入酶标板，使用酶标仪第二次读数，分别得到基准组检测值和监测组检测值；
c)计算基准组和监测组的均匀度偏差，根据计算结果判断磁微粒混悬液分装均匀度是否正常。
本发明首先取空白酶标板，使用酶标仪第一次读数，得到空白值。在本发明中，所述空白酶标板优选为96孔空白酶标板。本发明对所述空白酶标板的来源没有特殊限制，采用本领域技术人员熟知的市售商品即可。
在本发明中，所述第一次读数采用酶标仪双波450nm/630nm读数。本发明对所述酶标仪的来源没有特殊限制，采用本领域技术人员熟知的市售商品即可。
之后，本发明在磁微粒混悬液分装过程中，取分装前的一组作为基准组，再取分装过程中的一组和/或分装后的一组作为监测组，然后将基准组和检测组中的磁微粒混悬液加入酶标板，使用酶标仪第二次读数，分别得到基准组检测值和监测组检测值。本发明对所述磁微粒混悬液的种类和来源没有特殊限制，采用本领域技术人员熟知的磁微粒混悬液即可；在本发明优选的实施例中，所述磁微粒混悬液为磁微粒乙肝病毒核心抗体检测试剂盒中HBcAb磁微粒混悬液。
在本发明中，所述将基准组和检测组中的磁微粒混悬液加入酶标板第二次读数前，优选还包括：
采用移液枪对基准组和检测组中的磁微粒混悬液进行吹打。在本发明中，所述吹打的目的是保证磁微粒混悬液混匀；所述吹打的次数优选为8次～12次，更优选为10次。
在本发明中，基准组中的磁微粒混悬液优选加入酶标板4孔～12孔，更优选加入酶标板8孔；基准组中的磁微粒混悬液加入酶标板每孔的量优选为80μl～120μl，更优选为100μl。
在本发明中，监测组中的磁微粒混悬液优选加入酶标板4孔～12孔，更优选加入酶标板8孔；监测组中的磁微粒混悬液加入酶标板每孔的量优选为80μl～120μl，更优选为100μl。
在本发明中，所述第二次读数采用酶标仪双波450nm/630nm读数。本发明对所述酶标仪的来源没有特殊限制，采用本领域技术人员熟知的市售商品即可。
得到上述空白值、基准组检测值和监测组检测值后，本发明计算基准组和监测组的均匀度偏差，根据计算结果判断磁微粒混悬液分装均匀度是否正常。在本发明中，所述计算基准组和监测组的均匀度偏差的方式优选具体为：
c1)将基准组检测值减去对应的空白值，得到基准组吸光度M1；将监测组检测值减去对应的空白值，得到监测组吸光度M2；
c2)当M1＞M2时，基准组和监测组的均匀度偏差＝(M1/M2-1)×100％；
当M1＝M2时，基准组和监测组的均匀度偏差＝0；
当M1＜M2时，基准组和监测组的均匀度偏差＝(M2/M1-1)×100％。
在本发明优选的实施例中，基准组中的磁微粒混悬液加入酶标板8孔，监测组中的磁微粒混悬液加入酶标板8孔；在此基础上，将每孔基准组检测值减去对应的空白值，得到该孔基准组吸光度，再对8孔基准组吸光度进行平均值计算，得到基准组吸光度平均值作为M1；同理，将每孔监测组检测值减去对应的空白值，得到该孔监测组吸光度，再对8孔监测组吸光度进行平均值计算，得到监测组吸光度平均值作为M2。
在本发明中，所述根据计算结果判断磁微粒混悬液分装均匀度是否正常的过程优选具体为：
基准组和监测组的均匀度偏差在控制范围内，分装均匀度正常；否则，分装均匀度不正常。在本发明中，所述控制范围优选由产品性能要求或公司需求确定。在本发明优选的实施例中，所述控制范围根据产品性能要求确定，控制磁微粒混悬液均匀度偏差在3％以内。
本发明提供的方法首次提出采用酶标仪来监测磁微粒混悬液均匀度，能够解决由于磁微粒混悬液沉降速度快导致分装均匀度超过可控范围的问题；该方法操作简单，可现场监测并直接计算出均匀度偏差，检验步骤清晰明了，检验结果真实可靠，具有通用性。
本发明提供了一种监测磁微粒混悬液分装均匀度的方法，包括以下步骤：a)取空白酶标板，使用酶标仪第一次读数，得到空白值；b)在磁微粒混悬液分装过程中，取分装前的一组作为基准组，再取分装过程中的一组和/或分装后的一组作为监测组，然后将基准组和检测组中的磁微粒混悬液加入酶标板，使用酶标仪第二次读数，分别得到基准组检测值和监测组检测值；c)计算基准组和监测组的均匀度偏差，根据计算结果判断磁微粒混悬液分装均匀度是否正常。与现有技术相比，本发明提供的方法首次提出采用酶标仪来监测磁微粒混悬液均匀度，能够解决由于磁微粒混悬液沉降速度快导致分装均匀度超过可控范围的问题；该方法操作简单，可现场监测并直接计算出均匀度偏差，检验步骤清晰明了，检验结果真实可靠，具有通用性。
为了进一步说明本发明，下面通过以下实施例进行详细说明。本发明以下实施例以磁微粒乙肝病毒核心抗体检测试剂盒中HBcAb磁微粒混悬液为例；所用的酶标仪的生产厂家为郑州安图生物工程股份有限公司，设备型号为PHOMO酶标仪；所用的全自动化学发光测定仪得生产厂家为郑州安图生物工程股份有限公司，设备型号为AutoLumoA2000。
实施例1
(1)取同批次HBcAb磁微粒混悬液7瓶，分别编号为1#-7#，通过稀释或浓缩，制备成1#瓶磁微粒混悬液浓缩30％、2#瓶磁微粒混悬液浓缩10％、3#瓶磁微粒混悬液浓缩3％、4#瓶不变、5#瓶磁微粒混悬液稀释3％、6#瓶磁微粒混悬液稀释10％、7#瓶磁微粒混悬液稀释30％。
(2)取96孔空白酶标板，空白酶标板使用酶标仪双波(450nm/630nm)读数。
(3)将处理后的7瓶磁微粒混悬液用移液枪吹打10下后(保证瓶内磁微粒混悬液混匀)，每瓶用移液枪加8孔到酶标板，每孔加样量100μl；然后采用酶标仪双波(450nm/630nm)读数，并进行数据分析，得到均匀度偏差数据；具体读数及分析结果参见表1所示。
表1本发明实施例1的具体读数及分析结果数据
Figure BDA0002594200520000061
最后根据均匀度偏差数据是否控制在产品性能要求或公司需求内，来确定分装均匀度是否正常；均匀度偏差数据控制在产品性能要求或公司需求内，即为合格，说明本次分装均匀度正常。
均匀度标准确认：将处理后的1#-7#磁微粒混悬液及配套试剂盒使用全自动化学发光测定仪进行发光值测试，分别对试剂盒内磁微粒HBcAb校准品S0-S5进行测试，每个校准品浓度点测试3次；测试结果参见表2所示。
表2本发明实施例1中磁微粒HBcAb发光值测试结果
Figure BDA0002594200520000062
Figure BDA0002594200520000071
续表2：
Figure BDA0002594200520000072
Figure BDA0002594200520000081
由表2可知，根据产品要求，磁微粒HBcAb发光值偏差应≤15％，所以分析发光值数据可知磁微粒混悬液均匀度应在±10％以内，为减少磁微粒均匀度给结果带来的偏差，可控制磁微粒混悬液均匀度在3％以内。
综上所述，采用本发明实施例1提供的监测磁微粒混悬液分装均匀度的方法可监测磁微粒混悬液生产分装过程中的均匀度，避免造成磁微粒混悬液批内浓度偏差过大，从而造成试剂盒检验结果不准确；并且该方法操作简单，可现场监测并直接计算出均匀度偏差，检验步骤清晰明了，检验结果真实可靠，具有通用性。
所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

Claims (6)

1.一种监测磁微粒混悬液分装均匀度的方法，包括以下步骤：
a）取空白酶标板，使用酶标仪第一次读数，得到空白值；所述第一次读数采用酶标仪双波450nm/630nm读数；
b）在磁微粒混悬液分装过程中，取分装前的一组作为基准组，再取分装过程中的一组和/或分装后的一组作为监测组，然后将基准组和检测组中的磁微粒混悬液加入酶标板，使用酶标仪第二次读数，分别得到基准组检测值和监测组检测值；所述第二次读数采用酶标仪双波450nm/630nm读数；所述将基准组和检测组中的磁微粒混悬液加入酶标板第二次读数前，还包括：
采用移液枪对基准组和检测组中的磁微粒混悬液进行吹打；
c）计算基准组和监测组的均匀度偏差，根据计算结果判断磁微粒混悬液分装均匀度是否正常；所述计算基准组和监测组的均匀度偏差的方式具体为：
c1）将基准组检测值减去对应的空白值，得到基准组吸光度M1；将监测组检测值减去对应的空白值，得到监测组吸光度M2；
c2）当M1＞M2时，基准组和监测组的均匀度偏差=(M1/M2-1)×100%；
当M1=M2时，基准组和监测组的均匀度偏差=0；
当M1＜M2时，基准组和监测组的均匀度偏差=(M2/M1-1)×100%。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤a）中所述空白酶标板为96孔空白酶标板。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤b）中所述吹打的次数为8次~12次。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤b）中基准组中的磁微粒混悬液加入酶标板4孔~12孔，加入酶标板每孔的量为80μl~120μl。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤b）中监测组中的磁微粒混悬液加入酶标板4孔~12孔，加入酶标板每孔的量为80μl~120μl。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤c）中所述根据计算结果判断磁微粒混悬液分装均匀度是否正常的过程具体为：
基准组和监测组的均匀度偏差在控制范围内，分装均匀度正常；否则，分装均匀度不正常。
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组装型金磁微粒的制备及其在免疫学检测中的应用;崔亚丽;张连营;苏婧;张彩峰;李琦;崔婷;金伯泉;陈超;;中国科学(B辑:化学)(第02期);全文 *

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CN111795939A (zh) 2020-10-20

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