CN111793701A - 一种用于克氏原螯虾亲子鉴定的双重pcr微卫星引物及应用 - Google Patents

一种用于克氏原螯虾亲子鉴定的双重pcr微卫星引物及应用 Download PDF

Info

Publication number
CN111793701A
CN111793701A CN202010896704.7A CN202010896704A CN111793701A CN 111793701 A CN111793701 A CN 111793701A CN 202010896704 A CN202010896704 A CN 202010896704A CN 111793701 A CN111793701 A CN 111793701A
Authority
CN
China
Prior art keywords
parent
pcr
procambarus
microsatellite
child identification
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202010896704.7A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111793701B (zh
Inventor
沈怀舜
胡亚成
戴天豪
水燕
徐增洪
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Freshwater Fisheries Research Center of Chinese Academy of Fishery Sciences
Original Assignee
Freshwater Fisheries Research Center of Chinese Academy of Fishery Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Freshwater Fisheries Research Center of Chinese Academy of Fishery Sciences filed Critical Freshwater Fisheries Research Center of Chinese Academy of Fishery Sciences
Publication of CN111793701A publication Critical patent/CN111793701A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111793701B publication Critical patent/CN111793701B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
    • C12Q1/6858—Allele-specific amplification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/156—Polymorphic or mutational markers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/16—Primer sets for multiplex assays
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/80—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
    • Y02A40/81—Aquaculture, e.g. of fish

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开了一种用于克氏原螯虾亲子鉴定的双重PCR微卫星引物及应用，属于动物分子遗传学领域。本发明提供了5组克氏原螯虾微卫星标记的双重PCR反应体系。利用本发明可以快速进行个体之间的亲子鉴定，继而确定个体之间的亲缘关系，避免了群体之间近亲繁殖。本发明的扩增结果具有高度的多态性和稳定性，并且本发明所消耗的财力和人力都比传统的PCR反应减少了一半，具有巨大的实用价值。

Description

一种用于克氏原螯虾亲子鉴定的双重PCR微卫星引物及应用
技术领域
本发明涉及一种用于克氏原螯虾亲子鉴定的双重PCR微卫星引物及应用，属于动物分子遗传学领域。
背景技术
克氏原螯虾型似虾而外壳坚硬。体长约5.6-11.9厘米，暗红色，甲壳上部分为黑色，是淡水经济虾类。栖息于永久性溪流和沼泽，临时的栖息地，包括沟渠和池塘。在溪流中它们通常与植物或木质碎屑混交在一起，会破坏和削弱堤岸。在洪水退去的地区，可以在简单的洞穴被发现。生活在水体较浅、水草丰盛的湿地、湖泊和河沟内。小龙虾的繁殖比较特殊，繁殖的大部分过程在洞穴中完成，故在平常的生产中难以见到抱卵虾。卵巢在交配后需2-5个月方最后成熟，并进行排卵受精。受精卵为紫酱色，粘附于腹部游泳肢的刚毛上，抱卵虾经常将腹部贴近洞内积水，以保持卵处于湿润状态。小龙虾的怀卵量较小，根据规格不同，怀卵量一般在100-700粒，平均为300粒。卵的孵化时间约为14-24天，但低温条件下，孵化期可长达4-5个月。小龙虾幼体在发育期间，不需要任何外来营养供给，刚孵出的仔虾需在亲虾腹部停留几个月左右，方脱离母体。若条件不适宜，可在洞穴中不吃不喝数周，当池塘灌水以后，仔虾和亲虾陆续从洞穴中爬出，自然分布在池塘中，有时亲虾会携带幼体进入水体之中，然后释放幼体。克氏螯虾虽然抱卵量较少，但幼体孵化的成活率很高。由于克氏螯虾分散的繁殖习性限制了苗种的规模化生产，给集约性生产带来不利影响。
微卫星标记是目前研究濒危动物保护遗传学中最理想的一类方式，微卫星具有多态性高、共显性遗传、遍布整个基因组等优势，广泛应用于动物遗传性研究。微卫星标记多重PCR是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物，同时扩增出多个核酸片段的PCR反应。多重PCR具有高效性、系统性、经济简便性等优点。有关克氏原螯虾的微卫星标记多重PCR国内外未见报道。
发明内容
本发明的目的是建立克氏原螯虾微卫星双重PCR体系以及利用本发明实现对克氏原螯虾的个体进行亲子鉴定。
技术方案
一种用于克氏原螯虾亲子鉴定的双重PCR微卫星引物，其特征在于，包括如下5组引物序列：
Figure BDA0002658605120000011
Figure BDA0002658605120000021
一种用于克氏原螯虾亲子鉴定的方法，取克氏原螯虾组织待测样品；提取克氏原螯虾样品DNA；利用权利要求1所述的微卫星引物对克氏原螯虾样品DNA进行PCR扩增；把PCR扩增产物在12％的聚丙烯酰胺胶上进行电泳分离；根据分离结果统计每个个体在所有微卫星位点中PCR扩增产物的基因型；根据各个个体的基因分型结果进行个体之间的亲子鉴定。
以上所述的用于克氏原螯虾亲子鉴定的方法，PCR反应体系为：10×PCR Buffer2.5ul，2.5mmol/L dNTP 0.5ul，MgCl2 1.5ul，每组反应体系两对引物的上下游引物各1ul，Taq酶0.4ul，DNA模板3ul，超纯水13.1ul。
4.根据权利要求2所述的用于克氏原螯虾亲子鉴定的方法，其特征在于，PCR反应程序为：95℃预变性3min；95℃变性30s，退火温度56℃复性30s，72℃延伸30s，30个循环；72℃延伸10min；4℃保存。
以上所述的用于克氏原螯虾亲子鉴定的方法，PCR产物用12％的非变性聚丙烯酰胺胶进行电泳。
与现有技术相比，本发明具有以下的优点：
本发明提供了5组克氏原螯虾微卫星标记的双重PCR反应体系。利用本发明可以快速进行个体之间的亲子鉴定，继而确定个体之间的亲缘关系，避免了群体之间近亲繁殖。本发明的扩增结果具有高度的多态性和稳定性，并且本发明所消耗的财力和人力都比传统的PCR反应减少了一半，具有巨大的实用价值。
本发明对反应体系的各参数，包括退火温度、引物浓度、dNTP浓度、循环次数等进行优化，达到通过一个PCR反应同时对两个微卫星引物进行检测。本发明提供的引物组具有高效性，每个位点具有多态性。通过实施例证明本方法可以实现子代精确找到亲本，达到亲子鉴定的目的。本发明首次提出克氏原螯虾的双重PCR用于遗传鉴定的方法，为克氏原螯虾的遗传管理提供了坚实的基础。
附图说明
图1为实施例1中聚丙烯酰胺电泳结果图；
图2为实施例3中聚丙烯酰胺凝胶电泳结果图。
具体实施方式
实施例1
提取克氏原螯虾DNA：
1.取克氏原螯虾，采集克氏原螯虾的尾部肌肉，提取克氏原螯虾的基因组DNA，提取方式采取传统的酚-氯仿抽提途径。
1.1每个个体取0.1g尾鳍放于1.5ml的离心管内，剪碎，加入450μLSTE抽提缓冲液(10mmol/L Tris-HCl，pH8.0；1mmol/L EDTA，pH8.0)、35μL SDS(10％)、15μL蛋白酶K(0.2％)。
1.2将离心管放入放在55℃的水浴锅内水浴1个小时至澄清透明。
1.3在离心管内加入700ul Tris饱和酚，放在震荡机上混匀30分钟，4℃下12000转/min离心10min，将上清液转移入另一个干净的eppendorf管中(注意用尖端剪平的1mL管头吸取上清液，以防混淆下层沉淀)。
1.4在上清液中加入等体积酚仿醇混合物(酚、氯仿、异戊醇比例为25：24：1)，振荡混匀15min后，4℃下12000转/min离心10min，吸上清液于另一新Eppendorf管中。
1.5上清液中加入等体积氯仿，振荡混匀15min后,4℃下12000转/min离10min，吸取上清液。
1.6加入-20℃预冷的无水乙醇1mL沉淀DNA，收集沉淀。
1.7用70％乙醇洗涤沉淀两次，干燥后加入200μL TE(10mmol/LTris-HCl，pH 8.0；0.1mmol/L EDTA，pH 8.0)，室温充分溶解。
实施例2
检验各引物的的等位基因条带大小：
从无锡、杭州、潜江、济南各地分别购买24个体成熟的克氏原螯虾，分别提取这96个个体的DNA，用表1中所述引物测试在这96个个体的等位基因条带的大小，每个引物成一个PCR反应体系，反应体系为：10×PCR Buffer 2.5ul，2.5mmol/L dNTP 0.5ul，MgCl21.5ul，每组反应体系上下游引物各1ul，Taq酶0.3ul，DNA模板3ul，超纯水15.2ul。PCR反应程序为：94℃预变性3min；94℃变性30s，退火温度复性30s，72℃延伸30s，30个循环；72℃延伸10min；4℃保存。PCR产物用10％的聚丙烯酰胺胶进行电泳和银染。用软件BIO-PROFIL判断聚丙烯酰胺胶显示的各个个体的等位基因片段的大小，判断每个引物在所有个体中的等位基因大小的范围，结果如图1所示。得出结论引物1等位基因大小的范围为229–261；引物2等位基因大小的范围为142–178；引物3等位基因大小的范围为210–260；引物4等位基因大小的范围为366–418；引物5等位基因大小的范围为198–232；引物6等位基因大小的范围为324–344；引物7等位基因大小的范围为150–166；引物8等位基因大小的范围为229–239；引物9等位基因大小的范围为144–182；引物10等位基因大小的范围为424–524。
表1用于克氏原螯虾亲子鉴定的双重PCR微卫星引物
Figure BDA0002658605120000041
Figure BDA0002658605120000051
实施例3
随机取24尾克氏原螯虾，提取DNA，用权利要求1所述的引物测试在这24个个体的等位基因，每个组别成一个PCR反应体系，反应体系为：10×PCR Buffer 2.5ul，2.5mmol/LdNTP 0.5ul，MgCl2 1.5ul，每组反应体系两对引物的上下游引物各1ul，Taq酶0.3ul，DNA模板3ul，超纯水13.2ul。PCR反应程序为：94℃预变性3min；94℃变性30s，退火温度复性30s，72℃延伸30s，30个循环；72℃延伸10min；4℃保存。PCR产物用10％的聚丙烯酰胺胶进行电泳和银染。用软件BIO-PROFIL判断聚丙烯酰胺胶显示的各个个体的等位基因片段的大小，看是否引物之间发生连锁反应或者产生二聚体，结果如图2所示。结果显示五个组别的引物相互不发生连锁反应或者产生二聚体，为可用引物组合。
实施例4
本实施例提供一种用于克氏原螯虾双重PCR亲子鉴定的应用：
组建5组克氏原螯虾全同胞家系，每个全同胞家系包括父本、母本和10个子代，父母本分别为A,a,B,b,C,c,D,d,E,e。提取各个个体的DNA，分别做好标记。利用本发明提供的5组克氏原螯虾微卫星标记的双重PCR反应体系中的微卫星引物对上述克氏原螯虾个体的DNA进行PCR反应，PCR反应体系是25ul：10×PCR Buffer 2.5ul，2.5mmol/L dNTP 0.5ul，MgCl2 1.5ul，每组反应体系两对引物的上下游引物各1ul，Taq酶0.3ul，DNA模板3ul，超纯水13.2ul。PCR反应程序为：94℃预变性3min；94℃变性30s，退火温度复性30s，72℃延伸30s，30个循环；72℃延伸10min；4℃保存。PCR产物用10％的聚丙烯酰胺胶进行电泳和银染。
用软件BIO-PROFIL判断聚丙烯酰胺胶显示的各个个体的等位基因片段的大小，根据所有个体在5组双重PCR体系中的等位基因大小，用CERVUS软件计算累计排除概率。初步结果显示，5组双重PCR微卫星引物的单亲累计排除概率为0.998，父权累计排除概率为0.998，双亲累计排除概率为1.000。鉴定结果如表2显示，该实验结果和标记个体亲子关系一致，证明本方法能够进行克氏原螯虾的亲子鉴定。
表2：:50个子代个体亲子鉴定结果
Figure BDA0002658605120000052
Figure BDA0002658605120000061
Figure BDA0002658605120000071

Claims (5)

1.一种用于克氏原螯虾亲子鉴定的双重PCR微卫星引物，其特征在于，包括如下5组引物序列：
Figure FDA0002658605110000011
2.一种用于克氏原螯虾亲子鉴定的方法，其特征在于，取克氏原螯虾组织待测样品；提取克氏原螯虾样品DNA；利用权利要求1所述的微卫星引物对克氏原螯虾样品DNA进行PCR扩增；把PCR扩增产物在12％的聚丙烯酰胺胶上进行电泳分离；根据分离结果统计每个个体在所有微卫星位点中PCR扩增产物的基因型；根据各个个体的基因分型结果进行个体之间的亲子鉴定。
3.根据权利要求2所述的用于克氏原螯虾亲子鉴定的方法，其特征在于，PCR反应体系为：10×PCR Buffer 2.5ul，2.5mmol/L dNTP 0.5ul，MgCl2 1.5ul，每组反应体系两对引物的上下游引物各1ul，Taq酶0.4ul，DNA模板3ul，超纯水13.1ul。
4.根据权利要求2所述的用于克氏原螯虾亲子鉴定的方法，其特征在于，PCR反应程序为：95℃预变性3min；95℃变性30s，退火温度56℃复性30s，72℃延伸30s，30个循环；72℃延伸10min；4℃保存。
5.根据权利要求2所述的用于克氏原螯虾亲子鉴定的方法，其特征在于，PCR产物用12％的非变性聚丙烯酰胺胶进行电泳。
CN202010896704.7A 2019-09-05 2020-08-31 一种用于克氏原螯虾亲子鉴定的双重pcr微卫星引物及应用 Active CN111793701B (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910836427 2019-09-05
CN2019108364278 2019-09-05

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111793701A true CN111793701A (zh) 2020-10-20
CN111793701B CN111793701B (zh) 2023-04-25

Family

ID=72834498

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010896704.7A Active CN111793701B (zh) 2019-09-05 2020-08-31 一种用于克氏原螯虾亲子鉴定的双重pcr微卫星引物及应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111793701B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116042843A (zh) * 2022-09-26 2023-05-02 华中农业大学 一种基于四碱基微卫星标记的克氏原螯虾亲子鉴定的标记套件及应用方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104726554A (zh) * 2015-01-23 2015-06-24 浙江省淡水水产研究所 一种克氏原螯虾ssr引物的制备方法
CN105602946A (zh) * 2015-11-06 2016-05-25 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 一种鉴别克氏原螯虾不同家系的方法
CN108179200A (zh) * 2018-03-06 2018-06-19 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 一种与克氏原螯虾高繁殖力性状连锁的微卫星标记及应用

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104726554A (zh) * 2015-01-23 2015-06-24 浙江省淡水水产研究所 一种克氏原螯虾ssr引物的制备方法
CN105602946A (zh) * 2015-11-06 2016-05-25 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 一种鉴别克氏原螯虾不同家系的方法
CN108179200A (zh) * 2018-03-06 2018-06-19 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 一种与克氏原螯虾高繁殖力性状连锁的微卫星标记及应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JINLONG HUANG: "Microsatellite evidence of dispersal mechanism of red swamp crayfish (Procambarus clarkii) in the Pearl River basin and implications for its management" *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116042843A (zh) * 2022-09-26 2023-05-02 华中农业大学 一种基于四碱基微卫星标记的克氏原螯虾亲子鉴定的标记套件及应用方法
CN116042843B (zh) * 2022-09-26 2024-05-24 华中农业大学 一种基于四碱基微卫星标记的克氏原螯虾亲子鉴定的标记套件及应用方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN111793701B (zh) 2023-04-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Klinbunga et al. Genetic heterogeneity of the giant tiger shrimp (Penaeus monodon) in Thailand revealed by RAPD and mitochondrial DNA RFLP analyses
Ward et al. Microsatellite diversity in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) introduced to Western Australia
CN109852710B (zh) 一种与石斑鱼氨耐受能力相关的snp标记及其用途
Guo et al. A second generation genetic linkage map for silver carp (Hypophthalmichehys molitrix) using microsatellite markers
Ziętara et al. Introgression of distant mitochondria into the genome of Gyrodactylus salaris: Nuclear and mitochondrial markers are necessary to identify parasite strains
CN108179200B (zh) 一种与克氏原螯虾高繁殖力性状连锁的微卫星标记及应用
CN111304337B (zh) 鉴定黄颡鱼、瓦氏黄颡鱼和杂交子一代的srap分子标记、试剂盒和方法及应用
CN102653785B (zh) 团头鲂微卫星家系鉴定方法
CN105441576A (zh) 一种用于长牡蛎亲子鉴定的微卫星多重pcr方法
CN111793701A (zh) 一种用于克氏原螯虾亲子鉴定的双重pcr微卫星引物及应用
Mireku et al. Assessment of genetic variations of Nile Tilapia (Oreochromis niloticus L.) in the Volta Lake of Ghana using microsatellite markers
CN105918184A (zh) 一种杂交选育全雄黄颡鱼优良品种的方法
CN108611405A (zh) 一种翘嘴鲌亲子鉴定微卫星荧光多重pcr的方法
Kang et al. Microsatellite analysis as a tool for discriminating an interfamily hybrid between olive flounder and starry flounder
Shen et al. Construction of genetic linkage maps of guppy (Poecilia reticulata) based on AFLP and microsatellite DNA markers
CN113981103B (zh) 罗氏沼虾微卫星亲子鉴定的微卫星引物对及检测试剂盒和鉴定方法
CN101265504B (zh) 筛查牛瓜氨酸血症携带者的试剂盒
CN110724749B (zh) 一种三疣梭子蟹耐副溶血弧菌的分子标记c104及其应用
CN114134237A (zh) 鉴定大口黑鲈美国北方亚种和优鲈3号亲本的srap分子标记及其应用
CN113621711B (zh) 用于鳙遗传多样性分析的双重pcr微卫星引物及应用
CN102758021B (zh) 水产养殖鲇鱼杂种的rag2分子标记rflp鉴定方法
CN113621709B (zh) 黄河鲤鱼微卫星标记引物及黄河鲤鱼的放流效果评价方法
CN111394478A (zh) 一种pcr微卫星引物及其用于大黄鱼亲子鉴定的方法
CN109337986B (zh) 小体鲟个体鉴定的微卫星标记引物及个体识别的方法
CN110592239A (zh) 基于Cyt b基因鉴别犬牙南极鱼的引物和探针以及方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant