CN111793575A - 一种复合菌剂及其在水产养殖中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及微生物改善水质技术领域，特别涉及一种复合菌剂及其在水产养殖中的应用，包括地衣芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、粪链球菌、巴氏比赤酵母，且配比为(2‑4)：(2‑5)：(1‑4)：(1‑3)：(3‑5)：(1‑2)。该复合菌剂中各菌种配比合理，有效活菌含量高，使用到水体之后，局部活菌浓度高，且各菌种之间具有协同作用，能够很好的发挥菌剂的作用，对底泥及水质起到非常好的改良作用。使用后能够快速沉入水底，直接作用于底泥分解有机质改良底部环境，通过各菌种自身的代谢作用来达到修复养殖水体的目的，有效的将水体中的有机物迅速分解，形成良性循环的微生态链，对水体净化有明显效果。

Description

一种复合菌剂及其在水产养殖中的应用
技术领域
本发明涉及微生物改善水质技术领域，特别涉及一种复合菌剂及其在水产养殖中的应用。
背景技术
微生物制剂又称为微生物调节剂，它是从天然环境中筛选出来的微生物菌体，经培养、繁殖后制成的含有大量有益菌的活菌制剂。目前微生物菌剂已广泛应用于产养殖、污水处理、水改良土壤、堆肥除臭等众多领域。是经过培养、发酵、干燥和加工等特殊工艺研制而成的一类生物活菌制剂，有的还含有它们的代谢产物或添加有益菌的生长促进因子，具有补充、调整和维持动物肠道内微生态平衡、增强动物免疫能力、防治疾病、促进健康、提高饲料利用率和动物生产性能及改善养殖环境等作用。微生态制剂以其无毒、无不良反应、无残留污染、无耐药性、成本低和效果显著等特点受到广大学者和养殖界的重视，已在国内外得到广泛应用。
随着人工水产养殖规模的不断扩大,养殖环境日趋恶化,疾病的暴发日渐频繁,极大地抑制了水产养殖产量的增长和水产贸易的发展。水产养殖污染主要由于过量投饵、残剩饵和大量鱼类排出的粪便缓慢分解向养殖环境不断释放大量的小分子有机物、氨氮、亚硝酸盐及硫化氢等超标，养殖水体中氨态氮及硝态氮浓度提高是使鱼虾致病的直接或间接因素；此外，氮、磷等营养物质浓度升高使藻类大量繁殖，引起藻类及其他浮游生物迅速繁殖，引起水体富营养化，溶解氧量下降，鱼类及其他生物大量死亡，导致水体生态平衡的破坏。养殖水体的水质和产品质量密切相关，氨氮、亚硝酸氮、COD和磷的含量等是评价水质好坏的重要指标。残饵最主要的是蛋白质和淀粉的残留，此外还包括一些脂肪和纤维素残留。这些累积有机污染物经缓慢分解产生大量的小分子有机物和有害无机物等有害物质，影响养殖水体浊度，危害养殖动物的健康和生长。因此，通过微生物使得饵料水产动物生长代谢过程中产生的废物，特别是其中的蛋白质和淀粉等有机污染物的快速降解可以减少残饵累积，加快水产养殖后的残饵和代谢废物的利用转化，缓解养殖环境中的有机污染负荷，对改善养殖状况有积极的影响。
复合菌剂是基于微生态学理论，利用微生物菌群的联合作用，由两种或两种以上有益的且互不措抗的微生物菌种制备的活菌制剂，多种微生物协同共生，更加适合复杂多变的生态环境。目前，微生物制剂已被广泛用于保健品、词料添加剂、污水净化、水产养殖、药物等行业和领域。本发明目的是研究一种用于水产养殖的高效净化的新型复合菌剂，针对水产养殖后的废水进行净化处理。
发明内容
本发明的发明目的在于提供一种复合菌剂及其在水产养殖中的应用，采用本发明提供的技术方案解决了水产养殖后的废水的净化处理问题。
为了解决上述技术问题，本发明提供一种复合菌剂，包括地衣芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、粪链球菌、巴氏比赤酵母。
优选的，所述地衣芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、粪链球菌、巴氏比赤酵母的配比为(2-4)：(2-5)：(1-4)：(1-3)：(3-5)：(1-2)。
优选的，所述复合菌剂中各成分的菌落总数为：地衣芽孢杆菌2×109～3×109cfu/g、沼泽红假单胞菌2×109～4×109cfu/g、枯草芽孢杆菌1×109～3×109cfu/g、植物乳杆菌3×108～4×108cfu/g、粪链球菌2×108～4×108cfu/g、巴氏比赤酵母2×109～5×109cfu/g。
优选的，复合菌剂的制备方法包括以下步骤：
A100：将所述六种菌分别接种于固体培养基上进行活化；
A200：挑取六种活化好的菌种的单菌落分别接种于各自的液体培养基上，在温度37℃条件下培养48小时；
A300：把A200中培养好的菌种按所述配比接种到发酵罐中37℃发酵24小时，制成菌体悬液，pH≤4.0，菌液中活菌数≧6×108-3×1010CFU/mL，即制备完成复合菌菌剂。
优选的，所述沼泽红假单胞菌的制备方法包括以下步骤：
B100:将冷冻储存的沼泽红假单胞菌进行菌种活化后，在透光条件下密封发酵6～10天，培养至红色单菌落出现；
B200:在-15℃～-8℃条件下，6000～7000r/min转速下离心10～12min，取沉淀，再加入与沉淀重量比为1:2～1:1的海藻多糖，保持温度在30～35℃进行密封培养3～5d；
B300:取沉淀进行镜检，镜检无杂菌且沼泽红假单胞菌的数量达到5×108～7×108个，即得到沼泽红假单胞菌。
优选的，所述芽孢杆菌剂的制备方法包括以下步骤：
C100:在无菌的操作台上，芽孢杆菌接种于培养基中，在24～30℃，160rpm/min摇床中培养菌体至菌体浓度达108～109CFU/mL，得到芽孢杆菌种子液；
C200:将5mL芽孢杆菌种子液液加入到发酵培养基中，在28～33℃，160rpm/min摇床中培养，检测发酵菌中菌体数量，待菌体数量达到109CFU/mL时停止发酵，得到芽孢杆菌剂。
优选的，在步骤A300中，发酵罐的营养物质成分包括：蛋白胨8％；牛肉膏5％；糖蜜5％、氯化钠0.5％、柠檬酸氢二铵0.1％、醋酸钠0.5％、硫酸镁0.05％和磷酸二氢钾0.1％。
优选的，一种根据权利要求1-3任一项所述的复合菌剂的应用，其特征在于：净化处理水产养殖尾水的具体方法为：将所述复合菌剂按池塘池水总体积的千分之一量均匀泼洒于池塘上，每周泼洒一次，持续一个月。
优选的，所述沼泽红假单胞菌的液体培养基组成为乙酸钠0.2％、碳酸氢钠0.2％、柠檬酸铵0.1％、磷酸二氢铵0.05％、硫酸镁0.06％、氯化钠0.5％、酵母膏1.0％、其余为蒸馏水，定容后调节pH值至7.0，121℃高温高压灭菌30min；培养条件为70瓦白炽灯照射，温度30℃，静置培养3d。
优选的，所述地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的液体培养基组成为蛋白胨3％、玉米粉1％、葡萄糖2％、磷酸二氢钠0.1％、硫酸镁0.03％、磷酸氢二钠0.05％、硫酸锰0.005％、碳酸钙1.5％、其余为蒸馏水，定容后调节pH值至7.5，115℃高温高压灭菌30min，培养条件为温度35℃，静置培养3天。
由上可知，应用本发明提供的可以得到以下有益效果：
1.该复合菌剂成份中的地衣孢芽杆菌可有效降解底泥中的有机磷，同时对水产养殖中的弧菌、大肠杆菌和杆状病毒等有害细菌有很强的抑制作用，并对水体净化有明显效果。
2.该复合菌剂包含好氧型、兼性厌氧型和严格厌氧型微生物，配方科学，缺一不可，这些微生物能够很好的相互协同，相互之间提供更好的生存环境，有效的将水体中的有机物迅速分解，形成良性循环的微生态链，从而可持续的降低水体中的有机物、氨态氮、硫化氢和亚硝酸盐含量，水溶后即可泼洒，无需活化，保质期长，是一种应用范围广阔的绿色养殖水质调节产品。
3.该复合菌剂中各菌种配比合理，有效活菌含量高，使用到水体之后，局部活菌浓度高，且各菌种之间具有协同作用，能够很好的发挥菌剂的作用，对底泥及水质起到非常好的改良作用。使用后能够快速沉入水底，直接作用于底泥分解有机质改良底部环境，防止底部腐败，抑制底部有害菌的繁殖，有效保护底质。
4.该复合菌剂中的地衣孢芽杆菌、粪链球菌属于低耗氧、不耗氧菌种，一般水体底部含氧量都较低，在这种环境下使用本颗粒型复合微生物菌剂不消耗水体溶氧，且可以使水体环境含氧量增加，为底部水生动物的生存提供了很好的环境。
5.该复合菌剂以益生菌群为功效原料，不添加化学试剂，通过益生菌自身的代谢作用来达到修复养殖水体的目的，不会对水体造成二次污染，从根本上解决和预防养殖水体有机物含量、氨态氮、亚硝酸盐、硫化氢过高的问题，适合全国各地、各类水产品种和养殖阶段的水产养殖场使用。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对本发明实施例或现有技术的描述中所需要使用的附图作简单地介绍。显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一部分实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明实施例制备复合菌剂的流程框图；
图2为本发明实施例制备沼泽红假单胞菌的流程框图；
图3为本发明实施例制备枯草芽孢杆菌的流程框图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
为了解决上述技术问题，本实施例提供一种复合菌剂，包括地衣芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、粪链球菌、巴氏比赤酵母。光合细菌可通过光合作用，利用水中的有机物质作为自身繁殖的营养源，迅速分解水中的氨、硫化氢和酸类等有害物质，并可通过反硝化作用除去水中的亚硝酸铵，稳定水质；能耐较低温度，即使冰冻也不会死亡；能耐较高盐度。芽孢杆菌生长过程中可消耗大量的氧，维持肠道厌氧环境，从而抑制致病菌的生长，维护肠道生态平衡；具有平衡和稳定乳酸杆菌的作用；可作为水质调节剂，净化环境，
其中，光合细菌、芽孢杆菌等在水产养殖中具有良好的水质调节作用，既能将水体的pH调节在适宜的范围内，增加水中溶氧量，又能降低水中的氨氮等有害水质因子水平。地衣孢芽杆菌、粪链球菌属于低耗氧、不耗氧菌种，一般水体底部含氧量都较低，在这种环境下使用本颗粒型复合微生物菌剂不消耗水体溶氧，且可以使水体环境含氧量增加，为底部水生动物的生存提供了很好的环境。
为了实现既能将水体的pH调节在适宜的范围内，增加水中溶氧量，又能降低水中的氨氮等有害水质因子水平，本复合菌剂的地衣芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、粪链球菌、巴氏比赤酵母的配比为4：5：4：1：3：1。其中，复合菌剂中各成分的菌落总数为地衣芽孢杆菌3×109cfu/g、沼泽红假单胞菌2×109cfu/g、枯草芽孢杆菌3×109cfu/g、植物乳杆菌3×108cfu/g、粪链球菌2×108cfu/g、巴氏比赤酵母2×109cfu/g。
具体的，如图1所示，复合菌剂的制备方法包括以下步骤：
A100：将所述六种菌分别接种于固体培养基上进行活化；
将地衣芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、粪链球菌、巴氏比赤酵母分别接种于各自的固体培养基上分别进行活化培养，
A200：挑取六种活化好的菌种的单菌落分别接种于各自的液体培养基上，在温度37℃条件下培养48小时；
分别将六种活化好的菌种的单菌落挑取出，并接种于各自的液体培养基上，在温度37℃条件下培养48小时后得到菌种。
A300：把步骤A200中培养好的菌种按上述配比接种到发酵罐中37℃发酵24小时，制成菌体悬液，pH≤4.0，菌液中活菌数≧6×108-3×1010CFU/mL，即制备完成复合菌菌剂。
将步骤A200中的得到的地衣芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、粪链球菌、巴氏比赤酵母菌种按4：5：4：1：3：1接种到发酵罐中。
其中，发酵罐的营养物质成分包括：蛋白胨8％％、牛肉膏5％、糖蜜5％、氯化钠0.5％、柠檬酸氢二铵0.1％、醋酸钠0.5％、硫酸镁0.05％和磷酸二氢钾0.1％。并将发酵罐放置在37℃的环境中，发酵24小时，制成菌体悬液pH≤4.0，菌液中活菌数≧6×108-3×1010CFU/mL，即制备完成复合菌菌剂。
其中，在步骤A200中，芽孢杆菌的液体培养基的组成为蛋白胨3％、玉米粉1％、葡萄糖2％、磷酸二氢钠0.1％、硫酸镁0.03％、磷酸氢二钠0.05％、硫酸锰0.005％、碳酸钙1.5％，其余为蒸馏水，定容后调节pH值至7.5，115℃高温高压灭菌30min，培养条件为温度35℃，静置培养3天。
沼泽红假单胞菌的液体培养基组成为乙酸钠0.2％、碳酸氢钠0.2％、柠檬酸铵0.1％、磷酸二氢铵0.05％、硫酸镁0.06％、氯化钠0.5％、酵母膏1.0％，其余为蒸馏水，定容后调节pH值至7.0，121℃高温高压灭菌30min；培养条件为70瓦白炽灯照射，温度30℃，静置培养3d；
粪链球菌的液体培养基的组成为蛋白胨3％、酵母粉1％、葡萄糖2％、柠檬酸铵0.1％、氯化镁0.1％、硫酸锰0.005％、碳酸钙1.5％、吐温80 1mL/L，其余为蒸馏水，定容后调节pH值至6.5，115℃高温高压灭菌30min，培养条件为温度30℃，静置培养3天。
巴氏比赤酵母的液体培养基的组成为蛋白胨3％、葡萄糖2％、醋酸钠0.5％，碳酸氢钠0.1％，氯化铵0.03％，磷酸氢二钾0.2％，氯化镁0.1％，山梨酸钾0.5％，氯化钠0.03％，酵母膏0.2％，其余为蒸馏水，定容后调节pH值至7.5，121℃高温高压灭菌30min，培养条件为温度32℃，静置培养3天。
光合细菌、芽孢杆菌等在水产养殖中具有良好的水质调节作用，既能将水体的pH调节在适宜的范围内，增加水中溶氧量，又能降低水中的氨氮等有害水质因子水平。沼泽红假单胞菌为光合细菌的其中一种，为此，沼泽红假单胞菌和芽孢杆菌的需要较严格的制备工艺，本实施例提供沼泽红假单胞菌和芽孢杆菌剂的制备方法，其中，如图2所示，制备沼泽红假单胞菌包括以下步骤：
B100:将冷冻储存的沼泽红假单胞菌进行菌种活化后，在透光条件下的密封培养液中发酵6～10天，培养至红色单菌落出现；
B200:挑取红色单菌落，在-15℃～-8℃条件下，6000～7000r/min转速下离心10～12min，取沉淀，再加入与沉淀重量比为1:2～1:1的海藻多糖，保持温度在30～35℃进行密封培养3～5d；
挑取步骤B100中得到的红色单菌落，在-8℃条件下6000r/min转速下离心10min，取沉淀，再加入与沉淀重量比为1:2的海藻多糖，保持温度在30℃进行密封培养3d。
B300:取沉淀进行镜检，镜检无杂菌且沼泽红假单胞菌的数量达到5×108～7×108个，即得到沼泽红假单胞菌。
如图3所示，芽孢杆菌剂的制备方法包括如下步骤：
C100:在无菌的操作台上将芽孢杆菌接种于培养基中，在24～30℃，160rpm/min摇床中培养菌体至菌体浓度达108～109CFU/mL，得到芽孢杆菌种子液；
C200:将5mL芽孢杆菌种子液液加入到发酵培养基中，在28～33℃，160rpm/min摇床中培养，检测发酵菌中菌体数量，待菌体数量达到109CFU/mL时停止发酵，得到芽孢杆菌。
其中，芽孢杆菌包括地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌，上述芽孢杆菌剂的制备方法适用地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌。地衣孢芽杆菌可有效降解底泥中的有机磷，同时对水产养殖中的弧菌、大肠杆菌和杆状病毒等有害细菌有很强的抑制作用，并对水体净化有明显效果。
实施例2
本实施例提供一种复合菌剂，包括以下配比组分，地衣芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、粪链球菌、巴氏比赤酵母的配比为1：2：1：3：5：2。
其制造方法的步骤同实施例1，得到复合菌剂。
实施例3
本实施例提供一种复合菌剂，包括以下配比组分，地衣芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、粪链球菌、巴氏比赤酵母的配比为2：3：3：2：4：2。
其制造方法的步骤同实施例1，得到复合菌剂。
Figure BDA0002521542160000131
Figure BDA0002521542160000141
表1
如表1所示为实施例1-3的地衣芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、粪链球菌、巴氏比赤酵母的配比。
基于上述实施例1-3的复合菌剂的应用，用于净化处理水产养殖尾水，其具体方法为：将所述实施例1-3中得到复合菌剂按池塘池水总体积的千分之一量均匀泼洒于池塘上，每周泼洒一次，持续一个月。试验设4个处理组:
1、对照池塘，池塘内不投加；
2、将实施例1得到的复合菌剂按池塘池水总体积的千分之一量均匀泼洒于1号池塘上，
3、将实施例2得到的复合菌剂按池塘池水总体积的千分之一量均匀泼洒于2号池塘上，
4、将实施例3得到的复合菌剂按池塘池水总体积的千分之一量均匀泼洒于3号池塘上。
先在4个试验塘上分别取水体表面处，水表面下60cm处，底泥处，每处取1份，每份样品的取样量位500mL，检测4个试验塘的样品中的悬浮物质、硫化物、总余氯、COD、TN、TP，三处样品取平均值得到各个试验塘中悬浮物质、硫化物、总余氯、COD、TN、TP的浓度，此为试验前的初始值浓度。
将所述实施例1-3中得到复合菌剂按池塘池水总体积的千分之一量均匀泼洒于池塘上，每周泼洒一次，持续一个月，一个月后分别在4个试验塘的中间位点进行取样，分别取水体表面处，水表面下60cm处，底泥处，每处取1份，每份样品的取样量位500mL，检测4个试验塘的样品中悬浮物质、硫化物、总余氯、COD、TN、TP的浓度，三处样品取平均值，此为试验后的浓度。
Figure BDA0002521542160000151
表2
如表2所示，为四组试验塘中悬浮物质、硫化物、总余氯、COD、TN、TP浓度的试验前初始值，以及试验后的最终值对比表。
Figure BDA0002521542160000161
表3
如表3所示为淡水水产养殖尾水排放的标准(海南省)。
结合表2和表3可以看出，对照池塘内的尾水杂质在放置一个月后通过自净能力，其含量均有下降，但下降幅度甚微。而1号池塘中所投入实施例1配比的复合菌剂，地衣芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、粪链球菌、巴氏比赤酵母的配比为4：5：4：1：3：1，其中的悬浮物质、硫化物、总余氯、COD、TN、TP的浓度得到显著的下降，其尾水杂质的去除率达到83％-93％。可以看出枯草芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、地衣芽孢杆菌的含量较高，对悬浮物质、硫化物、总余氯、COD、TN、TP有较好的净化效果，使得水产养殖尾水整体上达到一级标准。
而2号池塘中所投入实施例2配比的复合菌剂，地衣芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、粪链球菌、巴氏比赤酵母的配比为1：2：1：3：5：2，其中的悬浮物质、硫化物、总余氯、COD的浓度得到较明显的下降，去除率普遍达到70-90％，但相比于1号池塘，实施例2配比的复合菌剂对TN、TP含量的净化效果较差，实施例2配比的复合菌剂中，地衣芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、枯草芽孢杆菌成分比例的含量较低，可以看出地衣芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、枯草芽孢杆菌对TN、TP含量有显著的清除效果。实施例2配比的复合菌剂中粪链球菌、植物乳杆菌含量较高，COD去除率高达91％，对COD有显著的去除效果。
而3号池塘中所投入实施例3配比的复合菌剂，地衣芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、粪链球菌、巴氏比赤酵母的配比为2：3：3：2：4：2，其中的悬浮物质、硫化物、总余氯、COD的浓度得到较明显的下降，去除率普遍达到80-86％，相比于1号池塘和2号池塘，实施例3配比的复合菌剂的去除率比1号池塘低，比2号池塘高，可以看出实施例3配比的复合菌剂的成分配比比较均衡，去除尾水中悬浮物质、硫化物、总余氯、COD、TN、TP具有较明显的效果，但仍然有提高的空间。
综上所述，在四组试验塘的试验结果可以看出，实施例1配比的复合菌剂，其成分为地衣芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、粪链球菌、巴氏比赤酵母，其配比为4：5：4：1：3：1，对去除水产养殖后的尾水中的悬浮物质、硫化物、总余氯、COD、TN、TP有显著的效果，其尾水杂质的去除率达到83％-93％，通过该复合菌剂可以使得水产养殖后的尾水在整体上达到一级标准，进而形成良性循环的微生态链，水产养殖后的尾水净化后可以下一次养殖应用。
该复合菌剂在水产养殖尾水的净化处理中具有以下有益的效果：
1.该复合菌剂成份中的地衣孢芽杆菌可有效降解底泥中的有机磷，同时对水产养殖中的弧菌、大肠杆菌和杆状病毒等有害细菌有很强的抑制作用，并对水体净化有明显效果。
2.该复合菌剂包含好氧型、兼性厌氧型和严格厌氧型微生物，配方科学，缺一不可，这些微生物能够很好的相互协同，相互之间提供更好的生存环境，有效的将水体中的有机物迅速分解，形成良性循环的微生态链，从而可持续的降低水体中的有机物、氨态氮、硫化氢和亚硝酸盐含量，水溶后即可泼洒，无需活化，保质期长，是一种应用范围广阔的绿色养殖水质调节产品。
3.该复合菌剂中各菌种配比合理，有效活菌含量高，使用到水体之后，局部活菌浓度高，且各菌种之间具有协同作用，能够很好的发挥菌剂的作用，对底泥及水质起到非常好的改良作用。使用后能够快速沉入水底，直接作用于底泥分解有机质改良底部环境，防止底部腐败，抑制底部有害菌的繁殖，有效保护底质。
4.该复合菌剂中的地衣孢芽杆菌、粪链球菌属于低耗氧、不耗氧菌种，一般水体底部含氧量都较低，在这种环境下使用本颗粒型复合微生物菌剂不消耗水体溶氧，且可以使水体环境含氧量增加，为底部水生动物的生存提供了很好的环境。
5.该复合菌剂以益生菌群为功效原料，不添加化学试剂，通过益生菌自身的代谢作用来达到修复养殖水体的目的，不会对水体造成二次污染，从根本上解决和预防养殖水体有机物含量、氨态氮、亚硝酸盐、硫化氢过高的问题，适合全国各地、各类水产品种和养殖阶段的水产养殖场使用。
以上所述的实施方式，并不构成对该技术方案保护范围的限定。任何在上述实施方式的精神和原则之内所作的修改、等同替换和改进等，均应包含在该技术方案的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种复合菌剂，其特征在于：包括地衣芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、粪链球菌、巴氏比赤酵母。
2.根据权利要求1所述的复合菌剂，其特征在于：所述地衣芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、粪链球菌、巴氏比赤酵母的配比为(2-4)：(2-5)：(1-4)：(1-3)：(3-5)：(1-2)。
3.根据权利要求2所述的复合菌剂，其特征在于：所述复合菌剂中各成分的菌落总数为：地衣芽孢杆菌2×109～3×109cfu/g、沼泽红假单胞菌2×109～4×109cfu/g、枯草芽孢杆菌1×109～3×109cfu/g、植物乳杆菌3×108～4×108cfu/g、粪链球菌2×108～4×108cfu/g、巴氏比赤酵母2×109～5×109cfu/g。
4.一种根据权利要求1-3所述的复合菌剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
A100：将地衣芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、粪链球菌、巴氏比赤酵母分别接种于固体培养基上进行活化；
A200：挑取步骤A100中六种活化好的菌种的单菌落分别接种于各自的液体培养基上，在温度37℃条件下培养48小时；
A300：把A200中培养好的菌种按所述配比接种到发酵罐中37℃发酵24小时，制成菌体悬液，pH≤4.0，菌液中活菌数≧6×108～3×1010CFU/mL，即制备完成复合菌菌剂。
5.根据权利要求4所述的复合菌剂的制备方法，其特征在于：所述沼泽红假单胞菌的制备包括以下步骤：
B100:将冷冻储存的沼泽红假单胞菌进行菌种活化后，在透光条件下的密封培养液中发酵6～10天，培养至红色单菌落出现；
B200:挑取红色单菌落，在-15℃～-8℃条件下，6000～7000r/min转速下离心10～12min，取沉淀，再加入与沉淀重量比为1:2～1:1的海藻多糖，保持温度在30～35℃进行密封培养3～5d；
B300:取沉淀进行镜检，镜检无杂菌且沼泽红假单胞菌的数量达到5×108～7×108个，即得到沼泽红假单胞菌。
6.根据权利要求4所述的复合菌剂的制备方法，其特征在于：所述芽孢杆菌剂的制备方法包括以下步骤：
C100:在无菌的操作台上，芽孢杆菌接种于培养基中，在24～30℃，160rpm/min摇床中培养菌体至菌体浓度达108～109CFU/mL，得到芽孢杆菌种子液；
C200:将5mL芽孢杆菌种子液液加入到发酵培养基中，在28～33℃，160rpm/min摇床中培养，检测发酵菌中菌体数量，待菌体数量达到109CFU/mL时停止发酵，得到芽孢杆菌剂。
7.根据权利要求4所述的复合菌剂的制备方法，其特征在于：在步骤A300中，发酵罐的营养物质成分包括：蛋白胨8％％、牛肉膏5％、糖蜜5％、氯化钠0.5％、柠檬酸氢二铵0.1％、醋酸钠0.5％、硫酸镁0.05％和磷酸二氢钾0.1％。
8.根据权利要求4所述的复合菌剂的制备方法，其特征在于：在步骤A200中，所述沼泽红假单胞菌的液体培养基组成为乙酸钠0.2％、碳酸氢钠0.2％、柠檬酸铵0.1％、磷酸二氢铵0.05％、硫酸镁0.06％、氯化钠0.5％、酵母膏1.0％、其余为蒸馏水，定容后调节pH值至7.0，121℃高温高压灭菌30min；培养条件为70瓦白炽灯照射，温度30℃，静置培养3d。
9.根据权利要求4所述的复合菌剂的制备方法，其特征在于：在步骤A200中，所述地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的液体培养基组成为蛋白胨3％、玉米粉1％、葡萄糖2％、磷酸二氢钠0.1％、硫酸镁0.03％、磷酸氢二钠0.05％、硫酸锰0.005％、碳酸钙1.5％、其余为蒸馏水，定容后调节pH值至7.5，115℃高温高压灭菌30min，培养条件为温度35℃，静置培养3天。
10.一种基于权利要求1-3任一项所述的复合菌剂的应用，其特征在于：将所述复合菌剂按池塘池水总体积的千分之一量均匀泼洒于池塘上，每周泼洒一次，持续一个月，用于净化水产养殖的尾水。
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