CN111773183B - 一种Cu(DDC)2纳米核脂质体及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于医药技术领域，涉及一种Cu(DDC)2纳米核脂质体及其制备方法和应用，具体涉及Cu(DDC)2纳米核脂质体及其制备方法和在制备治疗肝癌药物中的应用。所述的Cu(DDC)2纳米核脂质体包含作为内层的Cu(DDC)2纳米粒和包在外层的磷脂层。所述的Cu(DDC)2纳米粒包含：CuCl2、二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)、磷脂，各组分的重量比为：(12‑51)：(17‑68)：(10‑20)。所述的磷脂层包含胆固醇、DSPE‑PEG2000、磷脂，磷脂、胆固醇、DSPE‑PEG2000的质量比为：(10‑20)：(5‑10)：(18‑42)。本发明通过反相微乳聚合法制备内层磷脂包裹的Cu(DDC)2纳米粒，进一步地通过薄膜水化法，包裹外层磷脂。本发明Cu(DDC)2纳米核脂质体能明显延长药物在体内的循环时间，提高Cu(DDC)2的抗肿瘤效果。

Description

一种Cu(DDC)2纳米核脂质体及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于医药技术领域，涉及一种Cu(DDC)2纳米核脂质体及其制备方法和应用，具体涉及Cu(DDC)2纳米核脂质体及其制备方法和在制备治疗肝癌药物中的应用。
背景技术
原发性肝癌是一种多发性肿瘤疾病。发生于患者干细胞或胆管细胞上的恶性肿瘤，发病率非常高，位居癌症发病率的前六位，位居我国发病率第四位、死亡率第三位，其对人类生命健康影响很大，且多发常见，因而具有一定的危害性，严重威胁人们的生命和健康。
从治疗手段来分析，早期原发性肝癌患者偏向于采用手术治疗，术后5年生存率达50％～70％，但肿瘤复发转移率也高达50％～80％。相比于手术治疗，药物治疗是一个不错的选择，临床上的一线治疗肝癌药物—卡铂，骨髓抑制发生率较高、肾毒性较高、胃肠道副反应较为严重，患者顺应性较差，因此制备一种靶向于肝癌细胞的制剂意义重大。
双硫仑，又称为戒酒硫，基于其乙醛脱氢酶(ALDH)抑制剂的特点，半个多世纪以来被FDA批准作为戒酒药
Figure BDA0002017747430000011
在使用，并且具有很高的安全性、很低的毒副作用。研究人员发现双硫仑和铜联用在体外具有良好的抗肿瘤作用。国内外进行了关于双硫仑和铜联用的大量临床试验，即双硫仑和铜错时给药的方式，患者早晨口服葡萄糖酸铜，晚上服用双硫仑。这种给药方式的初衷是让葡萄糖酸铜在肿瘤部位蓄积，给予双硫仑后在肿瘤部位与铜生成Cu(DDC)2从而发挥抗肿瘤作用。
但是这种联用方式并未在临床上取得令人满意的效果，一方面的原因是口服葡萄糖酸铜后，铜离子作为重金属无法被人体有效地吸收，不能和双硫仑共同发挥抗肿瘤作用。另一方面的原因是进入血液的双硫仑会快速被血浆中的血浆蛋白和谷胱甘肽还原酶降解成二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)(二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC))，导致其在血浆中的半衰期仅为4min。二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)会通过葡萄苷酸化、非酶降解、甲基化、氧化等途径进一步代谢。
Cu(DDC)2为双硫仑独特的二硫键结构能够与铜离子螯合形成复合物，研究人员发现Cu(DDC)2能够抑制26S蛋白酶体的活性，从而间接阻断NF-κB通路，抑制NF-κB表达，诱导肿瘤细胞凋亡，同时抑制肿瘤细胞的生存、增殖和转移。但是Cu(DDC)2水溶性极差，溶解度小于1μg/mL，表面活性剂对其增溶作用也不显著，另外Cu(DDC)2脂溶性也较差，这种Cu(DDC)2的理化性质为其制备带来了极大的困难。Cu(DDC)2在体外可以由双硫仑和铜反应生成，也可以由二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)与铜反应生成。
微乳液有别于细乳液和普通乳液，微乳液直径约为10-100nm，细乳液直径约为100-400nm，普通乳液直径为几百至上千纳米，微乳液是一种热力学稳定、光学上透明或半透明的分散体系。反相微乳液为一种不同于常规的微乳液体系，油相占绝大比例，而水相只有很小的比例，反相微乳液的水相在微乳液中形成几十纳米的“微水池”，两个反相微乳液的水相可以在微水池中反应形成粒径可控的产物。利用水溶性的二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)与CuCl2在反相微乳液中生成粒径可控的DOPA包裹的Cu(DDC)2纳米粒，进一步通过薄膜水化法进行磷脂包裹，得到Cu(DDC)2纳米核脂质体，用于Cu(DDC)2的注射给药，以实现比双硫仑和铜联用更好的疗效。
发明内容
本发明的目的是提供一种可用于肝癌治疗的Cu(DDC)2纳米核脂质体及其制备方法，以Cu(DDC)2纳米核脂质体注射给药，提高Cu(DDC)2的抗肿瘤效果。
本发明是通过如下技术方案实现的：
本发明涉及一种可用于肝癌治疗的Cu(DDC)2纳米核脂质体，所述的Cu(DDC)2纳米核脂质体包含作为内层的Cu(DDC)2纳米粒和包在外层的磷脂层。
所述的Cu(DDC)2纳米粒包含：CuCl2、二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)、磷脂，各组分的重量比为：(12-51)：(17-68)：(10-20)。
所述的磷脂为二硬脂酰磷脂酰甘油DSPG，1，2-棕榈酰磷脂酰甘油钠盐DPPG，1，2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸(钠盐)DOPA中的一种或几种。
所述的磷脂层包含胆固醇、DSPE-PEG2000、磷脂，磷脂、胆固醇、DSPE-PEG2000的质量比为：(10-20)：(5-10)：(18-42)。
所述磷脂层中的磷脂为2，3-二油氧基丙基三甲基氯化铵DOTAP，二油酰基卵磷脂DOPC，1，2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸(钠盐)DOPA中的一种或几种，优选为2，3-二油氧基丙基三甲基氯化铵DOTAP。
本发明所述的Cu(DDC)2纳米核脂质体为经过两步制备双层磷脂包裹的Cu(DDC)2纳米核脂质体，通过反相微乳聚合法制备内层磷脂包裹的Cu(DDC)2纳米粒，进一步地通过薄膜水化法，包裹外层磷脂。
本发明的另一个目的在于提供了一种Cu(DDC)2纳米核脂质体制剂的制备方法，其步骤如下：
(一)反相微乳液聚合法制备Cu(DDC)2纳米粒；
(二)Cu(DDC)2纳米粒外层包裹磷脂膜。
步骤(一)所述的反相微乳液包含表面活性剂，油相环己烷，含CuCl2和二乙基二硫代氨基甲酸钠的水相；
所述的表面活性剂为Igepal CO-520、聚乙二醇辛基苯基醚、正己醇、正戊醇中的一种或几种，优选为Igepal CO-520。
反相微乳液中表面活性剂与油相环己烷的体积比例为(20-40)：(60-80)，表面活性剂与油相环己烷的总体积与水相的体积比为(16：1)-(80：1)，水相中药物浓度为300-600mM。
其中CuCl2，二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)加入的摩尔比例为(1:1)-(5:1)。
进一步地，
步骤(一)包括如下步骤：
(1)将油相环己烷与表面活性Igepal CO-520剂置于磁力搅拌下，预先搅拌成均一相；
分别将CuCl2和二乙基二硫代氨基甲酸钠分别溶于水得含药水相；
将CuCl2水溶液加入到油相与表面活性剂组成的均一相中得CuCl2反相微乳液；
将磷脂溶于氯仿中制备磷脂的氯仿溶液；
将二乙基二硫代氨基甲酸钠水溶液、磷脂的氯仿溶液加入到油相与表面活性剂组成的均一相中得二乙基二硫代氨基甲酸钠反相微乳。
(2)将CuCl2反相微乳液加入到二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)反相微乳液中，搅拌；
(3)加入破乳剂后，离心收集Cu(DDC)2纳米粒；
所述步骤(1)中，
表面活性剂Igepal CO-520与环己烷的体积比例为(20-40)：(60-80)，表面活性剂与环己烷的总体积与水相的体积比为(16：1)-(80：1)。
CuCl2与二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)加入的摩尔比例为(1:1)-(5:1)。
优选地，表面活性剂Igepal CO-520与环己烷比例为3：7；
CuCl2和二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)加入的摩尔比例为1：1；
所述磷脂的氯仿溶液的浓度为：10mg/ml-30mg/ml；
水相中CuCl2，二乙基二硫代氨基甲酸钠浓度分别为300-600mM，优选为500mM。
所述步骤(2)中，
CuCl2反相微乳液与二乙基二硫代氨基甲酸钠反相微乳液的体积比为：(1:1)-(5:1)；
所述步骤(3)中，
破乳剂可以为甲醇、乙醇、异丙醇，优选为异丙醇。
离心力为16000g-20000g，时间为30min-1h。
步骤(二)包括如下步骤：
(1)采用异丙醇洗涤Cu(DDC)2纳米粒。
(2)采用氯仿乙醇混合溶液分散磷脂包裹的Cu(DDC)2纳米粒，加入外层磷脂DSPE-PEG2000、胆固醇、磷脂的乙醇溶液。
(3)在65℃旋转蒸发除去有机溶剂成膜，加入65℃预热去离子水进行水化，进行探头超声，得最终Cu(DDC)2纳米核脂质体。
所述步骤(2)中，
氯仿乙醇的混合溶液比例为氯仿：乙醇为(3：7)-(1：4)，优选为1：3，
外层磷脂中磷脂：胆固醇：DSPE-PEG2000的加入的质量比为(10-20)：(5-10)：(18-42)，优选质量比为10：5：18。
所述的磷脂为2，3-二油氧基丙基三甲基氯化铵DOTAP，二油酰基卵磷脂DOPC，1，2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸(钠盐)DOPA中的一种或几种，优选为2，3-二油氧基丙基三甲基氯化铵DOTAP。
所述的磷脂在乙醇中的浓度为7.75mg/ml-23.25mg/ml，优选为15.5mg/ml。
所述步骤(3)中，
超声功率为50W-1000W，优选功率为380W。
与现有技术相比，本发明产品及方法的优点和有益效果在于：
本发明制得的脂质体粒径可控，可根据需求制备出不同粒径大小并且粒径均一的脂质体，粒径范围在150-400nm之间，更优地为180-250nm之间，包封率达60％以上，最优地可以达到70％以上。该方法与现有文献及专利已报道的脂质体不同，该Cu(DDC)2纳米核脂质体具有包封率高、抗肿瘤活性强等特点。
本发明获得的Cu(DDC)2纳米核脂质体制剂可以用于治疗多种实体瘤，不仅可以治疗肝癌，还可用于肺癌、肝癌、乳腺癌等癌症的治疗，本发明制备的Cu(DDC)2纳米核脂质体制剂可经注射途径给药，如静脉、肌肉或腹腔注射给药。经药效实验验证Cu(DDC)2可以使药物浓集在瘤部位，不仅可以减少用药剂量，增强疗效，而且可以降低药物的毒副作用，适用于多种肿瘤疾病的治疗。
附图说明
图1为实施例1所制备的Cu(DDC)2纳米核脂质体的粒径分布图，分布范围为90～250nm。
图2为各实验组对肝癌细胞Hep G2的生长抑制作用。
图3为实施例1所制备的Cu(DDC)2纳米核脂质体给予大鼠静脉注射后血药浓度随时间变化示意图。
具体实施方式
以下实施例中，包封率和载药量的计算公式如下：
包封率＝(脂质体中包封的药物/脂质体中药物总量)×100
实施例1
一种Cu(DDC)2纳米核脂质体制剂，其制备方法步骤如下：
(1)DOPA包裹的Cu(DDC)2纳米粒的制备
150μL 500mM CuCl2水溶液加入到8ml环己烷与Igepal CO-520的混合溶液(70:30,V:V)制备CuCl2反相微乳，150μL 500mM二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)水溶液，320μL20mg/ml DOPA氯仿溶液加入到8ml环己烷与IgepalCO-520的混合溶液(70:30,V:V)制备二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)反相微乳，将CuCl2反相微乳逐滴加入到二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)反相微乳中搅拌24h，加入16ml异丙醇进行破乳，以17500g/30min进行离心收集得到DOPA-Cu(DDC)2纳米粒。采用异丙醇洗涤表面过量的环己烷及表面活性剂，N2吹干异丙醇。
(2)Cu(DDC)2纳米核脂质体的制备
用300μL氯仿和900μL乙醇混合溶液将DOPA-Cu(DDC)2纳米粒重新分散，16000g/10min离心除去大粒子，加入300μL 20mM DOTAP，300μL 20mM胆固醇，150μL 20mM DSPE-PEG2000的乙醇溶液。65℃旋转蒸发除去有机溶剂，形成薄膜，加入5ml 65℃预热去离子水，于380W功率进行探头超声，得最终Cu(DDC)2纳米核脂质体，所得脂质体的包封率为74.39％，平均粒径为187nm。
参考如上制备方法，改变步骤(1)中的内层磷脂及其用量、步骤(2)中的外层磷脂及其用量、步骤(2)中氯仿和乙醇的体积比，制备的Cu(DDC)2纳米核脂质体的粒径和包封率如下：
表1为使用不同磷脂作为内层磷脂对最终得到的Cu(DDC)2纳米核脂质体的粒径及包封率的影响
Figure BDA0002017747430000061
从内层磷脂的筛选结果来看，采用DSPG磷脂虽然包封率高，但是制得的Cu(DDC)2纳米核脂质体粒径为540nm，不符合静脉注射的条件，而采用DPPG磷脂制得的Cu(DDC)2纳米核脂质体包封率仅有22.76％，采用DOPA磷脂得到的Cu(DDC)2纳米核脂质体粒径及包封率符合要求，最终选用DOPA作为内层磷脂。
表2为使用不同磷脂作为外层磷脂对最终得到的Cu(DDC)2纳米核脂质体的粒径及包封率的影响。
Figure BDA0002017747430000071
从外层磷脂的筛选结果来看，采用DOPA磷脂和DOPC磷脂得到的Cu(DDC)2纳米核脂质体包封率较低，仅为14.73％和34.92％，而采用DOTAP磷脂包封率为74.39％，最终选用DOTAP作为外层磷脂。
表3为使用不同比例的氯仿和乙醇混合溶液作为Cu(DDC)2纳米粒分散介质对最终得到的Cu(DDC)2纳米核脂质体的粒径及多分散指数的影响
Figure BDA0002017747430000072
作为Cu(DDC)2纳米粒的分散介质，筛选了不同比例的氯仿和乙醇，在3：7-1：4范围内，均可得到粒径符合要求的纳米核脂质体，而在氯仿和乙醇的体积比为1：3时得到的Cu(DDC)2纳米核脂质体粒径最小，多分散指数最小，增大或减少氯仿的比例都会使得粒径增大。
表4为内层DOPA在氯仿中的浓度最终得到的Cu(DDC)2纳米核脂质体的粒径及多分散指数的影响
Figure BDA0002017747430000081
以DOPA作为内层磷脂，考察了DOPA在氯仿中的浓度对Cu(DDC)2纳米核脂质体粒径及多分散指数的影响，浓度为10mg/ml时，得到的Cu(DDC)2纳米核脂质体粒径偏大，浓度为30mg/ml时，相比于20mg/ml时制备的Cu(DDC)2纳米核脂质体粒径及多分散指数没有改观，DOPA在氯仿中的浓度为10-30mg/ml时，粒径均在符合要求的范围内，但从最小粒径且节省原料的角度考虑，且将DOPA在氯仿中的浓度定为20mg/ml。
表5为外层DOTAP在乙醇中的浓度对最终得到的Cu(DDC)2纳米核脂质体的粒径及多分散指数的影响
Figure BDA0002017747430000082
以DOTAP作为外层磷脂，考察了DOTAP在乙醇中的浓度对Cu(DDC)2纳米核脂质体粒径及多分散指数的影响，DOTAP在乙醇中的浓度为7.75mg/ml和23mg/ml时，得到的Cu(DDC)2纳米核脂质体粒径虽然相对较大，但是基本符合要求，而当浓度为15.5mg/ml时，粒径最小。
实施例2
一种Cu(DDC)2纳米核脂质体制剂，其制备方法步骤如下：
(1)DOPA包裹的Cu(DDC)2纳米粒的制备
150μL 500mM CuCl2水溶液加入到8ml环己烷与Igepal CO-520的混合溶液(70:30,V:V)制备CuCl2反相微乳，150μL 500mM二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)水溶液，200μL20mg/ml DOPA氯仿溶液加入到8ml环己烷与IgepalCO-520的混合溶液(70:30,V:V)制备二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)反相微乳，将CuCl2反相微乳逐滴加入到二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)反相微乳中搅拌24h，加入16ml异丙醇进行破乳，以17500g/30min进行离心收集得到DOPA-Cu(DDC)2纳米粒。采用异丙醇洗涤表面过量的环己烷及表面活性剂，N2吹干异丙醇。
(2)Cu(DDC)2纳米核脂质体的制备
用300μL氯仿和900μL乙醇混合溶液将DOPA-Cu(DDC)2纳米粒重新分散，16000g/10min离心除去大粒子，加入300μL 20mM DOTAP，300μL 20mM胆固醇，150μL 20mM DSPE-PEG2000的乙醇溶液。65℃旋转蒸发除去有机溶剂，形成薄膜，加入5ml 65℃预热去离子水，于380W功率进行探头超声，得最终Cu(DDC)2实心核脂质体，所得脂质体的包封率为73.84％，平均粒径为233nm。
实施例3
一种Cu(DDC)2纳米核脂质体制剂，其制备方法步骤如下：
(1)DOPA包裹的Cu(DDC)2纳米粒的制备
150μL 400mM CuCl2水溶液加入到8ml环己烷与Igepal CO-520的混合溶液(70:30,V:V)制备CuCl2反相微乳，150μL 400mM二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)水溶液，320μL20mg/ml DOPA氯仿溶液加入到8ml环己烷与IgepalCO-520的混合溶液(70:30,V:V)制备二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)反相微乳，将CuCl2反相微乳逐滴加入到二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)反相微乳中搅拌24h，加入16ml异丙醇进行破乳，以17500g/30min进行离心收集得到DOPA-Cu(DDC)2纳米粒。采用异丙醇洗涤表面过量的环己烷及表面活性剂，N2吹干异丙醇。
(2)Cu(DDC)2纳米核脂质体的制备
用300μL氯仿和900μL乙醇混合溶液将DOPA-Cu(DDC)2纳米粒重新分散，16000g/10min离心除去大粒子，加入300μL 20mM DOTAP，300μL 20mM胆固醇，150μL 20mM DSPE-PEG2000的乙醇溶液。65℃旋转蒸发除去有机溶剂，形成薄膜，加入5ml 65℃预热去离子水，于380W功率进行探头超声，得最终Cu(DDC)2实心核脂质体，所得脂质体的包封率为82.83％，平均粒径为240nm。
实施例4
一种Cu(DDC)2纳米核脂质体制剂，其制备方法步骤如下：
(1)DOPA包裹的Cu(DDC)2纳米粒的制备
200μL 400mM CuCl2水溶液加入到8ml环己烷与Igepal CO-520的混合溶液(70:30,V:V)制备CuCl2反相微乳，200μL 400mM二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)水溶液，320μL20mg/ml DOPA氯仿溶液加入到8ml环己烷与IgepalCO-520的混合溶液(70:30,V:V)制备二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)反相微乳，将CuCl2反相微乳逐滴加入到二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)反相微乳中搅拌24h，加入16ml异丙醇进行破乳，以17500g/30min进行离心收集得到DOPA-Cu(DDC)2纳米粒。采用异丙醇洗涤表面过量的环己烷及表面活性剂，N2吹干异丙醇。
(2)Cu(DDC)2纳米核脂质体的制备
用300μL氯仿和900μL乙醇混合溶液将DOPA-Cu(DDC)2纳米粒重新分散，16000g/10min离心除去大粒子，加入600μL 20mM DOTAP，600μL 20mM胆固醇，300μL 20mM DSPE-PEG2000的乙醇溶液。65℃旋转蒸发除去有机溶剂，形成薄膜，加入5ml 65℃预热去离子水，于380W功率进行探头超声，得最终Cu(DDC)2实心核脂质体，所得脂质体的包封率为64.60％，平均粒径为290nm。
实施例5
一种Cu(DDC)2纳米核脂质体制剂，其制备方法步骤如下：
(1)DOPA包裹的Cu(DDC)2纳米粒的制备
250μL 500mM CuCl2水溶液加入到8ml环己烷与Igepal CO-520的混合溶液(70:30,V:V)制备CuCl2反相微乳，250μL 500mM二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)水溶液，320μL20mg/ml DOPA氯仿溶液加入到8ml环己烷与Igepal CO-520的混合溶液(70:30,V:V)制备二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)反相微乳，将CuCl2反相微乳逐滴加入到二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)反相微乳中搅拌24h，加入16ml异丙醇进行破乳，以17500g/30min进行离心收集得到DOPA-Cu(DDC)2纳米粒。采用异丙醇洗涤表面过量的环己烷及表面活性剂，N2吹干异丙醇。
(2)Cu(DDC)2纳米核脂质体的制备
用300μL氯仿和900μL乙醇混合溶液将DOPA-Cu(DDC)2纳米粒重新分散，16000g/10min离心除去大粒子，加入300μL 14mM DOTAP，300μL 14mM胆固醇，150μL 14mM DSPE-PEG2000的乙醇溶液。65℃旋转蒸发除去有机溶剂，形成薄膜，加入5ml 65℃预热去离子水，于380W功率进行探头超声，得最终Cu(DDC)2实心核脂质体，所得脂质体的包封率为60.24％，平均粒径为236nm。
实施例6
一种Cu(DDC)2纳米核脂质体制剂，其制备方法步骤如下：
(1)DOPA包裹的Cu(DDC)2纳米粒的制备
150μL 350mM CuCl2水溶液加入到8ml环己烷与Igepal CO-520的混合溶液(70:30,V:V)制备CuCl2反相微乳，150μL 350mM二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)水溶液，320μL20mg/ml DOPA氯仿溶液加入到8ml环己烷与IgepalCO-520的混合溶液(70:30,V:V)制备二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)反相微乳，将CuCl2反相微乳逐滴加入到二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)反相微乳中搅拌24h，加入16ml异丙醇进行破乳，以17500g/30min进行离心收集得到DOPA-Cu(DDC)2纳米粒。采用异丙醇洗涤表面过量的环己烷及表面活性剂，N2吹干异丙醇。
(2)Cu(DDC)2纳米核脂质体的制备
用300μL氯仿和900μL乙醇混合溶液将DOPA-Cu(DDC)2纳米粒重新分散，16000g/10min离心除去大粒子，加入700μL 20mM DOTAP，700μL 20mM胆固醇，600μL 20mM DSPE-PEG2000的乙醇溶液。65℃旋转蒸发除去有机溶剂，形成薄膜，加入5ml 65℃预热去离子水，于380W功率进行探头超声，得最终Cu(DDC)2实心核脂质体，所得脂质体的包封率为70.39％，平均粒径为187nm。
实施例7
一种Cu(DDC)2纳米核脂质体制剂，其制备方法步骤如下：
(1)DOPA包裹的Cu(DDC)2纳米粒的制备
150μL 500mM CuCl2水溶液加入到8ml环己烷与Igepal CO-520的混合溶液(70:30,V:V)制备CuCl2反相微乳，150μL 500mM二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)水溶液，320μL20mg/ml DOPA的氯仿溶液加入到8ml环己烷与IgepalCO-520的混合溶液(70:30,V:V)制备二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)反相微乳，将CuCl2反相微乳逐滴加入到二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)反相微乳中搅拌24h，加入16ml异丙醇进行破乳，以17500g/30min进行离心收集得到DOPA-Cu(DDC)2纳米粒。采用异丙醇洗涤表面过量的环己烷及表面活性剂，N2吹干异丙醇。
(2)Cu(DDC)2纳米核脂质体的制备
用300μL氯仿和900μL乙醇混合溶液将DOPA-Cu(DDC)2纳米粒重新分散，16000g/10min离心除去大粒子，加入400μL 20mM DOTAP，400μL 20mM胆固醇，200μL 20mM DSPE-PEG2000的乙醇溶液。65℃旋转蒸发除去有机溶剂，形成薄膜，加入5ml 65℃预热去离子水，于380W功率进行探头超声，得最终Cu(DDC)2实心核脂质体，所得脂质体的包封率为75.23％，平均粒径为268nm。
实施例8
一种Cu(DDC)2纳米核脂质体制剂，其制备方法步骤如下：
(1)DSPG包裹的Cu(DDC)2纳米粒的制备
150μL 500mM CuCl2水溶液加入到8ml环己烷与Igepal CO-520的混合溶液(70:30,V:V)制备CuCl2反相微乳，150μL 500mM二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)水溶液，320μL20mg/ml DSPG的氯仿溶液加入到8ml环己烷与IgepalCO-520的混合溶液(70:30,V:V)制备二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)反相微乳，将CuCl2反相微乳逐滴加入到二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)反相微乳中搅拌24h，加入16ml异丙醇进行破乳，以17500g/30min进行离心收集得到DOPA-Cu(DDC)2纳米粒。采用异丙醇洗涤表面过量的环己烷及表面活性剂，N2吹干异丙醇。
(2)Cu(DDC)2纳米核脂质体的制备
用300μL氯仿和900μL乙醇混合溶液将DOPA-Cu(DDC)2纳米粒重新分散，16000g/10min离心除去大粒子，加入400μL 20mM DOTAP，400μL 20mM胆固醇，200μL 20mM DSPE-PEG2000的乙醇溶液。65℃旋转蒸发除去有机溶剂，形成薄膜，加入5ml 65℃预热去离子水，于380W功率进行探头超声，得最终Cu(DDC)2实心核脂质体，所得脂质体的包封率为82.13％，平均粒径为540nm。
实施例9
一种Cu(DDC)2纳米核脂质体制剂，其制备方法步骤如下：
(1)DPPG包裹的Cu(DDC)2纳米粒的制备
150μL 500mM CuCl2水溶液加入到8ml环己烷与Igepal CO-520的混合溶液(70:30,V:V)制备CuCl2反相微乳，150μL 500mM二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)水溶液，320μL20mg/ml DPPG的氯仿溶液加入到8ml环己烷与IgepalCO-520的混合溶液(70:30,V:V)制备二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)反相微乳，将CuCl2反相微乳逐滴加入到二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)反相微乳中搅拌24h，加入16ml异丙醇进行破乳，以17500g/30min进行离心收集得到DOPA-Cu(DDC)2纳米粒。采用异丙醇洗涤表面过量的环己烷及表面活性剂，N2吹干异丙醇。
(2)Cu(DDC)2纳米核脂质体的制备
用300μL氯仿和900μL乙醇混合溶液将DOPA-Cu(DDC)2纳米粒重新分散，16000g/10min离心除去大粒子，加入300μL 20mM DOPA，300μL 20mM胆固醇，150μL 20mM DSPE-PEG2000的乙醇溶液。65℃旋转蒸发除去有机溶剂，形成薄膜，加入5ml 65℃预热去离子水，于380W功率进行探头超声，得最终Cu(DDC)2实心核脂质体，所得脂质体的包封率为22.76％，平均粒径为340nm。
实施例10
一种Cu(DDC)2纳米核脂质体制剂，其制备方法步骤如下：
(1)DOPA包裹的Cu(DDC)2纳米粒的制备
150μL 500mM CuCl2水溶液加入到8ml环己烷与Igepal CO-520的混合溶液(70:30,V:V)制备CuCl2反相微乳，150μL 500mM二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)水溶液，320μL20mg/ml DOPA的氯仿溶液加入到8ml环己烷与IgepalCO-520的混合溶液(70:30,V:V)制备二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)反相微乳，将CuCl2反相微乳逐滴加入到二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)反相微乳中搅拌24h，加入16ml异丙醇进行破乳，以17500g/30min进行离心收集得到DOPA-Cu(DDC)2纳米粒。采用异丙醇洗涤表面过量的环己烷及表面活性剂，N2吹干异丙醇。
(2)Cu(DDC)2纳米核脂质体的制备
用300μL氯仿和900μL乙醇混合溶液将DOPA-Cu(DDC)2纳米粒重新分散，16000g/10min离心除去大粒子，加入300μL 20mM DOPC，300μL 20mM胆固醇，150μL 20mM DSPE-PEG2000的乙醇溶液。65℃旋转蒸发除去有机溶剂，形成薄膜，加入5ml 65℃预热去离子水，于380W功率进行探头超声，得最终Cu(DDC)2实心核脂质体，所得脂质体的包封率为34.92％，平均粒径为280nm。
实施例11
一种Cu(DDC)2纳米核脂质体制剂，其制备方法步骤如下：
(1)DOPA包裹的Cu(DDC)2纳米粒的制备
150μL 500mM CuCl2水溶液加入到8ml环己烷与Igepal CO-520的混合溶液(70:30,V:V)制备CuCl2反相微乳，150μL 500mM二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)水溶液，320μL20mg/ml DOPA的氯仿溶液加入到8ml环己烷与IgepalCO-520的混合溶液(70:30,V:V)制备二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)反相微乳，将CuCl2反相微乳逐滴加入到二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)反相微乳中搅拌24h，加入16ml异丙醇进行破乳，以17500g/30min进行离心收集得到DOPA-Cu(DDC)2纳米粒。采用异丙醇洗涤表面过量的环己烷及表面活性剂，N2吹干异丙醇。
(2)Cu(DDC)2纳米核脂质体的制备
用300μL氯仿和900μL乙醇混合溶液将DOPA-Cu(DDC)2纳米粒重新分散，16000g/10min离心除去大粒子，加入300μL 20mM DOPA，300μL 20mM胆固醇，150μL 20mM DSPE-PEG2000的乙醇溶液。65℃旋转蒸发除去有机溶剂，形成薄膜，加入5ml 65℃预热去离子水，于380W功率进行探头超声，得最终Cu(DDC)2实心核脂质体，所得脂质体的包封率为14.73％，平均粒径为205nm。
实施例12
Cu(DDC)2纳米核脂质体在肝癌Hep G2外毒性研究
实验所用Cu(DDC)2纳米核脂质体为实施例1制备的脂质体。
活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。
实验方法:
接种细胞：取对数生长期的细胞，用胰蛋白酶将细胞消化，用相应的培养液稀释，吹打均匀后加入96孔细胞板中，调整细胞浓度为100000/ml，加入细胞悬浮液100μL/well。细胞板于37℃培养箱中培养24h。
加药：弃去培养液，将一系列不同浓度的受试溶液加入96孔细胞板中，100μL/well，每个浓度平行三次操作。每张板设空白对照组。将细胞于37℃培养箱中培养72h；
显色和比色：细胞加药培养相应时间后，向各孔中加入MTT溶液(5mg/ml)10μL/well，再放回培养箱继续培养4h，取出培养板弃去所有培养液和MTT溶液。然后向所有孔中加入DMSO 100μL/well，震荡5-10min，使结晶充分溶解。使用酶标仪测定其在490nm处的吸光度值。
实验结果：Cu(DDC)2溶液的IC50为8.234μM，而Cu(DDC)2纳米核脂质体的IC50为0.265μM，毒性相比于游离药物显著提高，更好地发挥抗肿瘤作用，也显著高于其余组别。
实施例13
Cu(DDC)2纳米核脂质体大鼠体内药代动力学研究
实验所用Cu(DDC)2纳米核脂质体为实施例1制备的脂质体。
10只体重为200～220g的健康雄性Sprague-Dawley大鼠随机分成2组，每组5只，给药前禁食12h，以相当于Cu(DDC)2 1mg/kg的剂量，分别于尾静脉注射Cu(DDC)2溶液和Cu(DDC)2纳米核脂质体，于预先设计的时间点5min、15min、30min、45min、1h、2h、4h、6h、8h、12h、24h。从眼底静脉丛取血0.15mL置于预先肝素化处理并加入0.35mL稳定剂的1.5mLEP管中。
色谱条件：流动相为10mM醋酸铵水溶液-乙腈系统，BEH C 18色谱柱(50mm×2.1mmi.d.,1.7μm,Waters Corp,Milford,MA,USA)；流速为0.2mL/min，柱温为40℃，进样室温度为10℃，进样量为5μL。
质谱条件：电喷雾电离源(ESI)，正离子模式，多重反应监测方式(MRM)，二级锥孔电压为2.0V，离子桥电压0.1V，毛细管电压为1.5kV，离子源温度为150℃，脱溶剂气温度为450℃，脱溶剂气流速为600L/hr，锥孔反吹气流速为50L/hr。
将冷冻的血浆于室温融化，涡旋混匀。精密移取血浆样品100μL，置于5mL离心管中，加入200ng/mL的内标溶液(苯海拉明)20μL，涡旋1min，混合均匀，然后加入二氯甲烷2mL，涡旋10min，4000r/min离心10min后，取下层二氯甲烷层液体1mL，40℃条件下空气吹干除去溶剂，进样前用0.5mL乙腈溶液复溶，涡旋10min，12000r/min离心10min，取上清液进行UPLC/MS/MS分析测定。
表6为大鼠药物代谢动力学数据总结
Figure BDA0002017747430000161

Claims (15)

1.Cu(DDC)2纳米核脂质体，包含作为内层的Cu(DDC)2纳米粒和包在外层的磷脂层，其特征在于，所述的Cu(DDC)2纳米粒包含：CuCl2、二乙基二硫代氨基甲酸钠、磷脂，各组分的重量比为：12-51：17-68：10-20；所述的外层磷脂层包含胆固醇、DSPE-PEG2000、磷脂，磷脂、胆固醇、DSPE-PEG2000的质量比为：10-20：5-10：18-42；所述的Cu(DDC)2纳米粒中的磷脂为二硬脂酰磷脂酰甘油，1，2-棕榈酰磷脂酰甘油钠盐，1，2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸或其钠盐中的一种或几种；所述的外层磷脂层中的磷脂为2，3-二油氧基丙基三甲基氯化铵，二油酰基卵磷脂，1，2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸或其钠盐中的一种或几种。
2.如权利要求1所述的Cu(DDC)2纳米核脂质体，其特征在于，所述的Cu(DDC)2纳米粒中的磷脂为1，2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸或其钠盐。
3.如权利要求1或2所述的Cu(DDC)2纳米核脂质体，其特征在于，所述的外层磷脂层中的磷脂为2，3-二油氧基丙基三甲基氯化铵。
4.如权利要求1所述的Cu(DDC)2纳米核脂质体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(一)反相微乳液聚合法制备Cu(DDC)2纳米粒；
将CuCl2反相微乳液加入到二乙基二硫代氨基甲酸钠反相微乳液中，搅拌，破乳，离心；
(二)Cu(DDC)2纳米粒外层包裹磷脂膜。
5.如权利要求4所述的Cu(DDC)2纳米核脂质体的制备方法，其特征在于，所述步骤(一)包括如下步骤：
(1)将油相环己烷与表面活性Igepal CO-520剂置于磁力搅拌下，预先搅拌成均一相；
分别将CuCl2和二乙基二硫代氨基甲酸钠分别溶于水得含药水相；
将CuCl2水溶液加入到油相与表面活性剂组成的均一相中得CuCl2反相微乳液；将磷脂溶于氯仿中制备磷脂的氯仿溶液；
将二乙基二硫代氨基甲酸钠水溶液、磷脂的氯仿溶液加入到油相与表面活性剂组成的均一相中得二乙基二硫代氨基甲酸钠反相微乳；
(2)将CuCl2反相微乳液加入到二乙基二硫代氨基甲酸钠反相微乳液中，搅拌(3)加入破乳剂后，离心收集Cu(DDC)2纳米粒。
6.如权利要求5所述的Cu(DDC)2纳米核脂质体的制备方法，其特征在于，
步骤(1)中，
表面活性剂Igepal CO-520与环己烷的体积比例为20-40：60-80，表面活性剂与环己烷的总体积与水相的体积比为16：1-80：1；
所述磷脂的氯仿溶液的浓度为：10mg/ml-30mg/ml；
水相中CuCl2或二乙基二硫代氨基甲酸钠浓度为300-600mM；
CuCl2与二乙基二硫代氨基甲酸钠加入的摩尔比例为1:1-5:1。
7.如权利要求6所述的Cu(DDC)2纳米核脂质体的制备方法，其特征在于，水相中CuCl2或二乙基二硫代氨基甲酸钠浓度为500mM。
8.如权利要求5所述的Cu(DDC)2纳米核脂质体的制备方法，其特征在于，
步骤(2)中，
CuCl2反相微乳液与二乙基二硫代氨基甲酸钠反相微乳液的体积比为：1:1-5:1；步骤(3)中，
破乳剂为甲醇、乙醇、异丙醇；离心力为16000g-20000g，时间为30min-1h。
9.如权利要求8所述的Cu(DDC)2纳米核脂质体的制备方法，其特征在于，破乳剂为异丙醇。
10.如权利要求4所述的Cu(DDC)2纳米核脂质体的制备方法，其特征在于，
步骤(二)包括如下步骤：
(1)采用异丙醇洗涤Cu(DDC)2纳米粒；
(2)采用氯仿乙醇混合溶液分散磷脂包裹的Cu(DDC)2纳米粒，加入外层磷脂DSPE-PEG2000、胆固醇、磷脂的乙醇溶液；
(3)在65℃旋转蒸发除去有机溶剂成膜，加入65℃预热去离子水进行水化，进行探头
超声，得最终Cu(DDC)2纳米核脂质体。
11.如权利要求10所述的Cu(DDC)2纳米核脂质体的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，
氯仿乙醇的混合溶液比例为氯仿：乙醇为3：7-1：4；
外层磷脂中磷脂：胆固醇：DSPE-PEG2000的加入的质量比为10-20：5-10：18-42；所述的磷脂为2，3-二油氧基丙基三甲基氯化铵，二油酰基卵磷脂，1，2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸(钠盐)中的一种或几种；
所述的磷脂在乙醇中的浓度为7.75mg/ml-23.25mg/ml。
12.如权利要求11所述的Cu(DDC)2纳米核脂质体的制备方法，其特征在于，氯仿乙醇的混合溶液比例为1：3。
13.如权利要求11所述的Cu(DDC)2纳米核脂质体的制备方法，其特征在于，所述的磷脂为2，3-二油氧基丙基三甲基氯化铵DOTAP。
14.如权利要求11所述的Cu(DDC)2纳米核脂质体的制备方法，其特征在于，所述的磷脂在乙醇中的浓度为15.5mg/ml。
15.权利要求1-3任何一项所述的Cu(DDC)2纳米核脂质体在制备抗肝癌药物中的应用。
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Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2015151080A2 (en) * 2015-07-04 2015-10-08 Suzhou M-Conj Biotech Co., Ltd Specific conjugation of a cell-binding molecule
CN105878047A (zh) * 2014-12-23 2016-08-24 广州暨南大学医药生物技术研究开发中心 一种包裹细胞生长因子的脂质磷酸钙纳米粒的制备及应用
CN108743559A (zh) * 2018-06-19 2018-11-06 常荷玥 包载双硫仑的具有pH响应性聚乳酸微球的合成制备及其应用

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10195164B2 (en) * 2015-05-13 2019-02-05 Duke University Use of disulfiram for inflammatory breast cancer therapy

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105878047A (zh) * 2014-12-23 2016-08-24 广州暨南大学医药生物技术研究开发中心 一种包裹细胞生长因子的脂质磷酸钙纳米粒的制备及应用
WO2015151080A2 (en) * 2015-07-04 2015-10-08 Suzhou M-Conj Biotech Co., Ltd Specific conjugation of a cell-binding molecule
CN108811499A (zh) * 2015-07-04 2018-11-13 苏州美康加生物科技有限公司 细胞结合分子的特异性偶联
CN108743559A (zh) * 2018-06-19 2018-11-06 常荷玥 包载双硫仑的具有pH响应性聚乳酸微球的合成制备及其应用

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