CN111763597A - 一种沙棘藏白酒的制备方法 - Google Patents
一种沙棘藏白酒的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111763597A CN111763597A CN202010890795.3A CN202010890795A CN111763597A CN 111763597 A CN111763597 A CN 111763597A CN 202010890795 A CN202010890795 A CN 202010890795A CN 111763597 A CN111763597 A CN 111763597A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- tibetan
- liquor
- buckthorn
- sea
- honey
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12G—WINE; PREPARATION THEREOF; ALCOHOLIC BEVERAGES; PREPARATION OF ALCOHOLIC BEVERAGES NOT PROVIDED FOR IN SUBCLASSES C12C OR C12H
- C12G3/00—Preparation of other alcoholic beverages
- C12G3/04—Preparation of other alcoholic beverages by mixing, e.g. for preparation of liqueurs
- C12G3/05—Preparation of other alcoholic beverages by mixing, e.g. for preparation of liqueurs with health-improving ingredients, e.g. flavonoids, flavones, polyphenols or polysaccharides
- C12G3/055—Preparation of other alcoholic beverages by mixing, e.g. for preparation of liqueurs with health-improving ingredients, e.g. flavonoids, flavones, polyphenols or polysaccharides extracted from plants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12G—WINE; PREPARATION THEREOF; ALCOHOLIC BEVERAGES; PREPARATION OF ALCOHOLIC BEVERAGES NOT PROVIDED FOR IN SUBCLASSES C12C OR C12H
- C12G3/00—Preparation of other alcoholic beverages
- C12G3/04—Preparation of other alcoholic beverages by mixing, e.g. for preparation of liqueurs
- C12G3/05—Preparation of other alcoholic beverages by mixing, e.g. for preparation of liqueurs with health-improving ingredients, e.g. flavonoids, flavones, polyphenols or polysaccharides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Botany (AREA)
- Alcoholic Beverages (AREA)
Abstract
本发明涉及保健酒生产技术领域,具体涉及一种沙棘藏白酒的制备方法,所得的沙棘藏白酒包括沙棘提取物、枸杞提取物、灵芝提取物、蜂蜜等活性成分,以不同酒精浓度的藏白酒为酒基进行提取及调配,包括浸提、过滤、混合调配、陈化、冷冻过滤除浊、灌装等步骤。本发明的沙棘藏白酒色泽金黄一致、澄清透明;入口绵甜柔和,落口清爽;酸甜微苦,风味协调,无中药味;调配成高、中、低不同酒精度,适应不同消费人群。具有滋补,养颜、提高免疫力等功效。本发明的制备方法简单,易于生产加工。
Description
技术领域
本发明涉及保健酒生产技术领域,具体涉及一种沙棘藏白酒的制备方法。
背景技术
藏白酒,即青稞白酒,是青稞酒酿好后蒸馏出来的白酒, 不同地方或同一地方的各家做法都有所不同。大致方法如下: 将青稞倒入“初锣”(即口大、腹大、颈细的生铁锅或铝锅里)煮制, 并不断搅拌以免烧糊, 待青稞煮熟、锅内的水煮干后, 将青稞摊在席子上沥干水分。这期间经常翻动, 使温度湿度均匀。熟青稞晾到一定程度后, 加酒曲拌匀并装进 “东龙 ”(陶制的坛子)并捂紧坛口, 塞好坛子下部用于漏酒的孔。之后将坛子埋入糠秕里或用衣物裹起来, 放在灶边或温度高的地方发酵, 酿酒过程的长短取决于气温的高低,一般冬天为一周左右, 夏天只需两三天。将酿好的青稞酒醅倒入由“初锣”、“阿噶”、“阿廓”、“卡初”组成的蒸馏装置中进行蒸馏得到了藏白酒(《中国西藏》, 1995, 10(6):41)。藏白酒同时兼有清香型和凤香型白酒的特点(《酿酒科技》,1996,73(1):67-68)。近二十年来,藏白酒从发酵到蒸馏都实现了工业化生产,但它仍保持独特的口感与香型。
沙棘果实为药食同源材料,营养丰富,其中Vc含量高达到825~1100毫克,被称为Vc之王,此外沙棘还含丰富的黄酮等活性成分。沙棘果实入药具有止咳化痰、健胃消食、 活血散瘀之功效。
枸杞是我国人民钟爱的药食同源滋补品,富含甜菜碱、阿托品、天仙子胺、枸杞多糖、枸杞色素等特殊营养成分,具有养肝,滋肾,润肺等功效。
灵芝又名黑芝、赤芝、紫芝、万年蕈、灵芝草等,据《神农本草经》记载,灵芝具有延年益寿,止咳平喘等多种奇效,灵芝含有多种活性物质,包括多糖类、多肽类、三萜类、生物碱、无机离子等,灵芝多糖和三萜类是灵芝的主要活性物质,近年来,许多学者提出灵芝多糖具有抗肿瘤、抗氧化、抗衰老、提高机体免疫力等功效。
蜂蜜是一种富含多种营养成分的天然食品,是一种成分极为复杂的糖类复合体,含有蛋 白质、氨基酸、矿物质、酶类等180 多种营养物质,能够很好的补充人体内B 族维生素、维生素C 和 钾、钙等矿物质。常服蜂蜜对于心脏病、高血压、肺病、眼病、肝脏病、痢疾、便秘、贫血、神经系 统疾病、胃和十二指肠溃疡病等都有良好的辅助医疗作用。西藏蜂蜜中总黄酮总酚酸含量都高于非西藏地区(《生物化工》, 2019,5(05):1-4)。
目前藏白酒的饮用方式单一,产品的市场辐射不强,调制成保健酒则可以丰富产品类型,满足不同消费需求。而目前市场上多数保健酒中药味浓烈,部分保健酒的酒精度偏高,限制了消费者范围。如CN110358658A公开了一种藏贡酒的制备方法:以酒精度为42~60%vol的青稞酒为酒基,按料液比1:2的比例加入辅料,所述辅料为干燥的黑枸杞:枸杞:桑葚:沙棘:蕨麻=2:2:3:1:1。浸泡100天后过滤、装瓶得到成品,产品酒精度在42%vol以上。
发明内容
为解决上述问题,本发明提供了一种沙棘藏白酒的制备方法。
为实现上述目的,本发明采取的技术方案为:
一种沙棘藏白酒的制备方法,包括如下步骤:
S1、沙棘、枸杞、灵芝浸提:称取适量沙棘、枸杞、灵芝分别粉碎至粒径为0.1~0.3mm的小颗粒后,按重量比为2:6:3的比例混合,用10倍重量的45-55% vol的藏白酒浸提2次,每次15天,合并两次浸提液,经30~50μm的滤膜过滤,得澄清的浸提液;
S2、蜂蜜溶解:称取适量蜂蜜加入10倍重量的45-55% vol的藏白酒中,充分搅拌后静放2天,经30~50μm的滤膜过滤后,得到蜂蜜藏白酒液,备用;
S3、混合调配:
按重量份称取:澄清浸提液5~10份,蜂蜜藏白酒液1~5份,20% vol藏白酒1~10份,纯净水0~10份,混合后,装入陶罐,封口,置于控温贮酒库中,库温调至50~60℃保持4天,之后调至室温保持7天,反复调温4~6次,之后室温贮存,贮酒时间共6个月,得陈化酒;
S5、除浊:向步骤S4中所得陈化酒中加入0.5~1%的皂土,在300~500 r/min下搅拌40~60min后,用石英砂过滤罐进行过滤处理;
S6、将完成除浊处理的混合酒装在250~500ml的玻璃瓶或陶制小坛,即得成品。
进一步地,所述藏白酒为西藏区内酒厂生产的青稞藏白酒。步骤S1中,所述沙棘为拉萨及林芝地区所产的野生沙棘,粉碎前经清洗、烘干至含水率≤11.5%;所述枸杞为宁夏产的枸杞,粉碎前经清洗、烘干至含水率≤11.5%;步骤S1中,所述灵芝为林芝地区所产的野生灵芝,粉碎前经超声波清洗、烘干至含水率≤11.5%;步骤S1中,所述蜂蜜林芝地区所产的纯蜂蜜。
本发明制备方法简便,所得的沙棘藏白酒色泽金黄一致、澄清透明;入口绵甜柔和,落口清爽;酸甜微苦,风味协调,无中药味;调配成高、中、低不同酒精度,适应不同消费人群,且具有抗衰老及提高免疫力等功效。
附图说明
图1为本发明实施例一种沙棘藏白酒的制备方法的工艺流程图。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本发明,但不以任何形式限制本发明。应当指出的是,对本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进。这些都属于本发明的保护范围。
实施例1
一种沙棘藏白酒的制备方法,包括如下步骤:
S1、称取适量沙棘、枸杞、灵芝分别粉碎至粒径0.1~0.3mm的小颗粒,按重量比为2:6:3的比例混合,用10倍重量50-55% vol的藏白酒浸提2次,每次15天,合并两次浸提液,经30~50μm的滤膜过滤后,得澄清的浸提液;
S2、称取适量蜂蜜加入10倍重量的52% vol藏白酒中,充分搅拌后静放2天,经30~50μm的滤膜过滤后,备用;
S3、按重量份称取:沙棘、枸杞、灵芝澄清浸提液7~10份,蜂蜜1~2份,20% vol藏白酒1~2份,混合后,装入陶罐,封口,放入控温贮酒库中,库温调至50~60℃保持4天,之后调至室温保持7天,反复调温4~6次,之后室温贮存,贮酒时间共6个月,得陈化酒;
S4、向所得陈化酒中加入重量0.5~1%的皂土,在300~500 r/min下搅拌40~60 min,用石英砂过滤罐进行过滤处理;
S5、将完成除浊处理的混合酒装在250~500ml的玻璃瓶或陶制小坛,即得成品。
本发明所制得的沙棘藏白酒,产品酒精度48~52%vol,适合嗜好高度酒的消费者。
实施例2
一种沙棘藏白酒的制备方法,包括如下步骤:
S1、称取适量沙棘、枸杞、灵芝分别粉碎至粒径0.1~0.3mm的小颗粒,按重量比例2:6:3混合,用10倍重量48~50% vol的藏白酒浸提2次,每次15天,合并两次浸提液,经30~50μm的滤膜过滤后,得澄清的浸提液;
S2、称取适量蜂蜜加入10倍重量的50% vol藏白酒中,充分搅拌后静放2天,经30~50μm的滤膜过滤后,备用;
S3、按重量份称取:沙棘、枸杞、灵芝澄清浸提液5~7份,蜂蜜2~4份,20% vol藏白酒3~8份,混合后,装入陶罐,封口,放入控温贮酒库中,库温调至50~60℃保持4天,之后调至室温保持7天,反复调温4~6次,之后室温贮存,贮酒时间共6个月,得陈化酒。
S4、向所得陈化酒中加入重量0.5~1%的皂土,在300~500 r/min下搅拌40~60 min,用石英砂过滤罐进行过滤处理。
S5、将所得混合酒装在250~500ml的玻璃瓶或陶制小坛,即得成品。
本发明所制得的沙棘藏白酒,产品酒精度38~42%vol,适合嗜好中度酒的消费者。
实施例3
一种沙棘藏白酒的制备方法,包括如下步骤:
S1、称取适量沙棘、枸杞、灵芝分别粉碎至粒径0.1~0.3mm的小颗粒,按重量比例2:6:3混合,用10倍重量45~48% vol的藏白酒浸提2次,每次15天,合并两次浸提液,经30~50μm的滤膜过滤后,得澄清的浸提液;
S2、称取适量蜂蜜加入10倍重量的45% vol藏白酒中,充分搅拌后静放2天,经30~50μm的滤膜过滤后,备用;
S3、按重量份称取:沙棘、枸杞、灵芝澄清浸提液5~7份,蜂蜜2~4份,20% vol藏白酒8~10份,纯净水2~6份,混合后,装入陶罐,封口,放入控温贮酒库中,库温调至50~60℃保持4天,之后调至室温保持7天,反复调温4~6次,之后室温贮存,贮酒时间共6个月,得陈化酒;
S4、向所得的陈化酒中加入重量0.5~1%的皂土,在300~500 r/min下搅拌40~60 min,用石英砂过滤罐进行过滤处理;
S5、将完成除浊处理的混合酒装在250~500ml的玻璃瓶或陶制小坛,即得成品。
本发明所制得的沙棘藏白酒,产品酒精度22~28%vol,适合嗜好中低度酒的消费者。
实施例4
一种沙棘藏白酒的制备方法,包括如下步骤:
S1、称取适量沙棘、枸杞、灵芝分别粉碎至粒径0.1~0.3mm的小颗粒,按重量比例2:6:3混合,用10倍重量45 %vol的藏白酒浸提2次,每次15天,合并两次浸提液,经30~50μm的滤膜过滤后,得澄清的浸提液;
S2、称取适量蜂蜜加入10倍重量的45 % vol藏白酒中,充分搅拌后静放2天,经30~50μm的滤膜过滤后,备用;
S3、按重量份称取:沙棘、枸杞、灵芝澄清浸提液5~6份,蜂蜜3~5份,20% vol藏白酒3~8份,纯净水5~10份,混合后,装入陶罐,封口,放入控温贮酒库中,库温调至50~60℃保持4天,之后调至室温保持7天,反复调温4~6次,之后室温贮存,贮酒时间共6个月,得陈化酒;
S4、向所得的陈化酒中加入重量0.5~1%的皂土,在300~500 r/min下搅拌40~60 min,用石英砂过滤罐进行过滤处理;
S5、将所得混合酒装在250~500ml的玻璃瓶或陶制小坛,即得成品。
本发明所制得的沙棘藏白酒,产品酒精度15~24%vol,适合嗜好低度酒的消费者。
实验例
实验模型组为小白鼠衰老模型,建模方法为,除空白对照组外其他各组小白鼠均每天颈背部皮下注射5%的D-gal生理盐水溶液,剂量0.025ml·g-1/d。空白对照组每天在颈背部皮下注射等量的生理盐水连续注射36天;阳性对照组为25mg·kg-1/d维生素灌胃给药,实验组用各产品按剂量灌胃给药,空白对照组与单纯模型组用等体积的蒸馏水灌胃,结果见下表,可见,本发明制备的四种不同酒精浓度产品具有一定的抗衰老及提高免疫力活性。
注:脾脏指数的测定:摘取小鼠的脾脏,用滤纸吸干残血后,称重(mg),脾脏指数=脾脏重量(mg)/小鼠体重(g);血清SOD 测定方法:黄镖吟氧化酶法;血清MDA测定方法:硫代巴比妥酸法; 肝脏MAO测定方法:以卞胺为底物,在MAO作用下生成卞醛,以环己烷提取,在242nm下测定吸光度,可测算出MAO的活力。
以上对本发明的具体实施例进行了描述。需要理解的是,本发明并不局限于上述特定实施方式,本领域技术人员可以在权利要求的范围内做出各种变化或修改,这并不影响本发明的实质内容。在不冲突的情况下,本申请的实施例和实施例中的特征可以任意相互组合。
Claims (6)
1.一种沙棘藏白酒的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1、沙棘、枸杞、灵芝浸提:称取适量沙棘、枸杞、灵芝分别粉碎至粒径为0.1~0.3mm的小颗粒后,按重量比为2:6:3的比例混合,用10倍重量的45-55% vol的藏白酒常温浸提2次,每次15天,合并两次浸提液,过滤,得澄清的浸提液;
S2、蜂蜜溶解:称取适量蜂蜜加入10倍重量的45-55% vol的藏白酒中,充分搅拌后静放2天,过滤后,得到蜂蜜藏白酒液,备用;
S3、混合调配:
按重量份称取:澄清浸提液5~10份,蜂蜜藏白酒液1~5份,20% vol藏白酒1~10份,纯净水0~10份,混合后,装入陶罐,封口,置于控温贮酒库中,库温调至50~60℃保持4天,之后调至室温保持7天,反复调温4~6次,之后室温贮存,贮酒时间共6个月,得陈化酒;
S4、除浊:向步骤S3中所得陈化酒中加入0.5~1%的皂土,在300~500 r/min下搅拌40~60min后,用石英砂过滤罐进行过滤处理;
S5、将完成除浊处理的混合酒装在250~500ml的玻璃瓶或陶制小坛,即得成品。
2.根据权利要求1所述的沙棘藏白酒的制备方法,其特征在于,所述藏白酒为西藏区内酒厂生产的青稞藏白酒。
3.根据权利要求1所述的沙棘藏白酒的制备方法,其特征在于,步骤S1中,所述沙棘为拉萨及林芝地区所产的野生沙棘,粉碎前经清洗、烘干至含水率≤11.5%。
4.根据权利要求1所述的沙棘藏白酒的制备方法,其特征在于,步骤S1中,所述枸杞为宁夏产的枸杞,粉碎前经清洗、烘干至含水率≤11.5%。
5.根据权利要求1所述的沙棘藏白酒的制备方法,其特征在于,步骤S1中,所述灵芝为林芝地区所产的野生灵芝,粉碎前经超声波清洗、烘干至含水率≤11.5%。
6.根据权利要求1所述的沙棘藏白酒的制备方法,其特征在于,步骤S1和步骤S2中,采用30~50μm的滤膜过滤。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202010890795.3A CN111763597A (zh) | 2020-08-29 | 2020-08-29 | 一种沙棘藏白酒的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202010890795.3A CN111763597A (zh) | 2020-08-29 | 2020-08-29 | 一种沙棘藏白酒的制备方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN111763597A true CN111763597A (zh) | 2020-10-13 |
Family
ID=72729178
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202010890795.3A Pending CN111763597A (zh) | 2020-08-29 | 2020-08-29 | 一种沙棘藏白酒的制备方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN111763597A (zh) |
Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2057799C1 (ru) * | 1993-03-19 | 1996-04-10 | Георгий Михайлович Горяинов | Композиция ингредиентов для горькой настойки |
CN101696386A (zh) * | 2009-09-25 | 2010-04-21 | 西藏月王生物技术有限公司 | 青稞红曲保健酒及其酿造方法 |
CN101717710A (zh) * | 2009-12-21 | 2010-06-02 | 甘肃天祝藏酒酒业有限公司 | 一种藏香型白酒及其酿造工艺 |
CN101928656A (zh) * | 2009-06-24 | 2010-12-29 | 葛庆有 | 浓香型青稞酒酿造方法及其浓香型青稞酒 |
US20150315533A1 (en) * | 2012-11-22 | 2015-11-05 | Rudolf Wild Gmbh & Co. Kg | Fermentation of juice |
CN109136016A (zh) * | 2018-10-17 | 2019-01-04 | 共和县玉苗产业有限责任公司 | 一种枸杞白酒的酿造方法 |
CN110358658A (zh) * | 2019-05-31 | 2019-10-22 | 青海帝玛尔藏药药业有限公司 | 一种藏贡酒及其制备方法 |
-
2020
- 2020-08-29 CN CN202010890795.3A patent/CN111763597A/zh active Pending
Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2057799C1 (ru) * | 1993-03-19 | 1996-04-10 | Георгий Михайлович Горяинов | Композиция ингредиентов для горькой настойки |
CN101928656A (zh) * | 2009-06-24 | 2010-12-29 | 葛庆有 | 浓香型青稞酒酿造方法及其浓香型青稞酒 |
CN101696386A (zh) * | 2009-09-25 | 2010-04-21 | 西藏月王生物技术有限公司 | 青稞红曲保健酒及其酿造方法 |
CN101717710A (zh) * | 2009-12-21 | 2010-06-02 | 甘肃天祝藏酒酒业有限公司 | 一种藏香型白酒及其酿造工艺 |
US20150315533A1 (en) * | 2012-11-22 | 2015-11-05 | Rudolf Wild Gmbh & Co. Kg | Fermentation of juice |
CN109136016A (zh) * | 2018-10-17 | 2019-01-04 | 共和县玉苗产业有限责任公司 | 一种枸杞白酒的酿造方法 |
CN110358658A (zh) * | 2019-05-31 | 2019-10-22 | 青海帝玛尔藏药药业有限公司 | 一种藏贡酒及其制备方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
秦含章: "白酒春秋――中国蒸馏酒的演变及发展趋向(下)", 《酿酒科技》 * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
AU2018255557B2 (en) | Composition with health preserving effect, health preserving wine prepared therefrom, and preparation method and application of health preserving wine | |
CN103740566B (zh) | 一种刺梨药酒及其制作方法 | |
CN100447231C (zh) | 一种保健醋及其制作方法 | |
CN104877876A (zh) | 一种桑葚黑米酒及其酿造方法 | |
GB2589967A (en) | Chinese yellow rice wine containing ingredients of mulberry leaves (morus alba L.) and silkworm pupae (bombyx mori) and production method thereof | |
CN100396766C (zh) | 一种茶树花酒及其制备方法 | |
CN110777042A (zh) | 具有养肝保健功效的sod白酒及其制备方法、包装结构 | |
CN109735417B (zh) | 一种女贞子酒的制备方法 | |
CN107057990B (zh) | 一种山楂保健酒及其制备方法 | |
CN109439497A (zh) | 一种火龙果甜味干型果酒的酿造工艺 | |
CN106635612A (zh) | 一种注入氮气和二氧化碳的米酒饮品及其制备方法 | |
CN108795684A (zh) | 一种补血降脂红枣养生醋及其制备方法 | |
CN110093239B (zh) | 一种诺丽配制酒及其制备方法 | |
CN107365646A (zh) | 一种改善睡眠的酵素啤酒及其制备方法 | |
CN107254385A (zh) | 一种水土保持树种果实为原料的酸枣酒及其制备方法 | |
CN1036470C (zh) | 食用菌与中草药混合发酵酿造的产品及其方法 | |
CN108208627A (zh) | 一种醋蛋液的配方及制备工艺 | |
CN111763597A (zh) | 一种沙棘藏白酒的制备方法 | |
CN110951569A (zh) | 一种香榧红曲酒及其香榧红曲酒的酿造方法 | |
CN110804518A (zh) | 一种茉莉花香酒的制备方法 | |
CN113105964A (zh) | 一种柚子白酒的制备方法 | |
CN110710624A (zh) | 银耳灵芝复合悬浮饮料及其制备方法 | |
CN103695248B (zh) | 一种含中药液的保健药酒 | |
CN108102845A (zh) | 一种天麻保健酒及其制备方法 | |
CN1036208C (zh) | 猴头酒及其生产方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination |