CN111650326A - 一种中药香包挥发油成分的质量控制方法及质控谱图和构建方法 - Google Patents

一种中药香包挥发油成分的质量控制方法及质控谱图和构建方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种中药香包挥发油成分的质量控制方法及质控谱图和构建方法，属于药物质量控制领域。所述质量控制方法采用GC法同时检测中药香包中当归、枳实、迷迭香和苍术成分，实现了单次测量下对中药香包中多种挥发油成分的同步检出和鉴定，提高了检测效率。进一步的，本发明还对提供的中药香包质控谱图中的特征峰进行了归属和解析，明确了峰1～9的饮片归属，及峰1、峰3、峰5、峰7和峰8的化合物归属，为含有当归、枳实、迷迭香和苍术成分的中药香包的谱效关系构建奠定了基础。

Description

一种中药香包挥发油成分的质量控制方法及质控谱图和构建 方法
技术领域
本发明属于药物质量控制领域，具体涉及一种中药香包挥发油成分的质量控制方法及质控谱图和构建方法。
背景技术
本发明涉及的中药香包由苍术、枳实、当归、迷迭香等13味药材制成。现行药物标准主要是采用薄层色谱法，以单一成分或主斑点的的鉴别模式，实现香包中多味药材的检测鉴定。该模式需要多次按照薄层色谱法对样品进行检测，操作复杂，工作量大，且易受人为影响，检测结果的稳定性和重复性不好。同时，由于中药材中所含成分较为复杂，存在多种药材含有相同挥发油成分的可能，因此，仅以单一成分作为标准无法有效实现中药香包的质量控制。
并且，不同药材的成分性质、极性和酸碱性差异较大，很难在同一条件的色谱谱图中同时体现，而分别对多种成分单独检测，无疑增加了质量控制的复杂程度和检测成本。
考虑到中药香包组分具有挥发性的特点，开发一种可以同时对多种挥发油成分进行鉴定分析的中药香包的质量控制方法及指控谱图和构建方法就成为了本领域技术人员亟需解决的问题。
发明内容
有鉴于此，本发明的第一个目的是针对现有技术中存在的问题，针对中药香包组分中的挥发油成分，提供一种可以同时对多种挥发油成分进行鉴定分析的中药香包的质量控制方法。
为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种中药香包挥发油成分的质量控制方法，所述中药香包主要由人参、大黄、当归、藤茶、枳实、迷迭香、肉桂、苍术、红花、山楂、黄芪、罗布麻和冰片组成，所述质量控制方法包括采用GC法同时检测中药香包中当归、枳实、迷迭香和苍术成分，所述GC法的色谱条件为：以30m×0.32mm×0.5μm的毛细管柱PEG-20M为色谱柱，进样口分流比为50:1，进样口温度为220℃，柱流量为1.0mL/min，吹扫流量为3.0mL/min；且，所述GC法的程序升温条件为：初始温度50℃，保持10min，以2℃/min升温至200℃，保持5min。
进一步的，所述GC法的色谱条件还包括使用250℃的氢火焰离子化检测器采集特征峰信息。
值得说明的是，在该气相色谱条件下，得到的色谱峰分离度好，柱效高，峰形好。
进一步的，所述质量控制方法还包括对中药香包供试品和对照品的GC图谱中各特征峰的保留时间进行比对，确定中药香包供试品的特征峰，并据此构建质控谱图。
更进一步的，所述质量控制方法还包括将待测中药香包产品的GC谱图与中药香包质控谱图进行对比分析，待测中药香包产品的特征峰与质控谱图中9个特征峰中的5个特征峰吻合即为合格产品。
本发明的第二个目的在于提供一种可以同时对多种挥发油成分进行鉴定分析的中药香包质控谱图。
为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种中药香包质控谱图，所述中药香包质控谱图包括按照出峰时间顺序依次编号的9个色谱峰，其中，峰1、2、8来自当归，峰1、2、4、6来自枳实，峰1-6和峰9来自迷迭香，峰1和峰5-7来自苍术。
进一步的，以峰5为参照峰，相对保留时间设定为1，特征峰2、4、6、9的的相对保留时间分别为：0.42±5％、0.51±5％、1.08±5％、2.63±5％。
进一步的，峰1为α-蒎烯，峰3为桉油精，峰5为樟脑，峰7为β-桉叶醇，峰8为藁本内酯。
本发明的第三个目的在于提供一种如上所述的中药香包质控谱图的构建方法。
为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种中药香包质控谱图的构建方法，包括如下步骤：
S1、参照物溶液制备，取α-蒎烯、桉油精、樟脑、β-桉叶醇和藁本内酯对照品适量，分别加环己烷制成5mg/mL的溶液，摇匀，备用；
S2、供试品溶液制备，取中药香包内容物粉末约50g，加500g去离子水，浸泡1h，连接挥发油测定器，向测定器加水至溢入烧瓶，再加入环己烷1mL，加热回流5h，分取环己烷为挥发油溶液，精密吸取100μL，加环己烷稀释至1mL，摇匀，备用；
S3、取步骤S1和步骤S2中制备得到的参照物溶液和供试品溶液各1μL，采用GC法进行检测；
S4、分析比对步骤S3得到的GC谱图，确认对应中药香包供试品的9个特征峰信息，即得所述质控谱图。
值得说明的是，本发明采用相对保留时间标定共有特征峰。根据2批供试样品的GC谱图，比较发现，其中9个色谱法为2批样品共有。确定此9个峰为共有特征峰，以峰5为参照峰，设定其保留时间为1.00，计算其他共有特征峰的相对保留时间，结果见表1。
表1香包共有峰相对保留时间
Figure BDA0002569078380000041
进一步的，所述步骤S3中采用GC法的色谱条件为：以30m×0.32mm×0.5μm的毛细管柱PEG-20M为色谱柱，进样口分流比为50:1，进样口温度为220℃，柱流量为1.0mL/min，吹扫流量为3.0mL/min，使用250℃的氢火焰离子化检测器采集特征峰信息；且，
所述GC法的程序升温条件为：初始温度50℃，保持10min，以2℃/min升温至200℃，保持5min。
与现有技术相比，本发明优点在于：
1、本发明对提供的中药香包挥发油成分的质量控制方法的气相色谱的条件进行了探索与改进，实现了中药香包中所含当归、枳实、迷迭香和苍术成分的同时检出，提高了检测效率；
2、本发明对提供的中药香包质控谱图中的特征峰进行了归属和解析，明确了峰1～9的饮片归属，及峰1、峰3、峰5、峰7和峰8的化合物归属，为含有当归、枳实、迷迭香和苍术成分的中药香包的谱效关系构建奠定了基础。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。
图1为本发明提供的特征谱图。
图2为对比例1得到的GC色谱图。
具体实施方式
下面将结合说明书附图对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明公开了一种可以同时对多种挥发油成分进行鉴定分析的中药香包的质量控制方法，该方法采用GC法同时检测中药香包中当归、枳实、迷迭香和苍术成分。
进一步地，本发明还提供一种可以同时对多种挥发油成分进行鉴定分析的中药香包质控谱图，所述中药香包质控谱图包括按照出峰时间顺序依次编号的9个色谱峰，其中，峰1、2、8来自当归，峰1、2、4、6来自枳实，峰1-6和峰9来自迷迭香，峰1和峰5-7来自苍术。以峰5为参照峰，相对保留时间设定为1，特征峰2、4、6、9的的相对保留时间分别为：0.42±5％、0.51±5％、1.08±5％、2.63±5％。并明确了峰1为α-蒎烯，峰3为桉油精，峰5为樟脑，峰7为β-桉叶醇，峰8为藁本内酯。
更进一步地，本发明还提供了一种中药香包质控谱图的构建方法，该方法采用水蒸气蒸馏法制备供试品溶液，得到的色谱峰个数较多，可以较好地反映样品的成分信息。
为更好地理解本发明，下面通过以下实施例对本发明作进一步具体的阐述，但不可理解为对本发明的限定，对于本领域的技术人员根据上述发明内容所作的一些非本质的改进与调整，也视为落在本发明的保护范围内。
实施例1
一种中药香包挥发油成分的质量控制方法及质控谱图和构建方法：
色谱条件：聚乙二醇20000(PEG-20M)毛细管柱(柱长为30m，内径为0.32mm，膜厚度为0.25μm)；程序升温：初始温度50℃，保持10分钟，以2℃/min的速率升温至200℃，保持5分钟；进样口温度为220℃；检测器温度为250℃，分流进样，分流比50:1。理论板数按樟脑峰计算应不低于10000。
参照物溶液的制备：取α-蒎烯、桉油精、樟脑、β-桉叶醇、藁本内酯对照品适量，精密称量，分别加环己烷制成制成5mg/mL的溶液，摇匀，作为对照品参照物溶液。
供试品溶液的制备：取本品粉末约50g，加500g的水，浸泡1h，连接挥发油测定器，自测定器上端加水使充满刻度部分，并溢入烧瓶时为止，再加入环己烷1mL，加热回流提取5h后，将挥发油测定器中的液体移至分液漏斗中，分取环己烷作为挥发油溶液，精密吸取100μL的上述挥发油，加环己烷稀释至1mL，做为供试品溶液。
测定法：分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各1μL，注入气相色谱仪，测定，即得。
供试品特征图谱(图1)中呈现9个特征峰，其中5个峰应分别与相应的参照物峰溶液的保留时间一致；与樟脑参照物相应的峰为S峰，除1、3、5、7、8号峰外，计算特征峰2、4、6、9号与S峰的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±5％之内，规定值为：0.42(峰2)、0.51(峰4)、1.08(峰6)、2.63(峰9)。
为了进一步验证本发明的优异效果，发明人还进行了如下对比实验：
对比例1
一种中药香包挥发油成分的质量控制方法及质控谱图和构建方法，色谱条件与参照物溶液的制备方法均与实施例1相同，不同之处仅在于供试品溶液的制备方法不同。
供试品溶液的制备：取中药香包内容物粉末约1g，精密称定，精密加入环己烷20mL，称定重量，超声15min，放置室温，再称定重量，用环己烷补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
采用有机溶剂超声法得到的GC色谱图如图2所示，与图1相比较，可以看到，样品通过水蒸气蒸馏法得到的色谱法个数较多，能较好地反映样品的成分信息。
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

Claims (10)

1.一种中药香包挥发油成分的质量控制方法，所述中药香包主要由人参、大黄、当归、藤茶、枳实、迷迭香、肉桂、苍术、红花、山楂、黄芪、罗布麻和冰片组成，其特征在于，所述质量控制方法包括采用GC法同时检测中药香包中当归、枳实、迷迭香和苍术成分，所述GC法的色谱条件为：以30m×0.32mm×0.5μm的毛细管柱PEG-20M为色谱柱，进样口分流比为50:1，进样口温度为220℃，柱流量为1.0mL/min，吹扫流量为3.0mL/min；且，
所述GC法的程序升温条件为：初始温度50℃，保持10min，以2℃/min升温至200℃，保持5min。
2.根据权利要求1所述的一种中药香包挥发油成分的质量控制方法，其特征在于，所述GC法的色谱条件还包括使用250℃的氢火焰离子化检测器采集特征峰信息。
3.根据权利要求2所述的一种中药香包挥发油成分的质量控制方法，其特征在于，所述质量控制方法还包括通过所述GC法色谱条件检测检测对照品，所述对照品包括α-蒎烯、桉油精、樟脑、β-桉叶醇和藁本内酯。
4.根据权利要求3所述的一种中药香包挥发油成分的质量控制方法，其特征在于，所述质量控制方法还包括对中药香包供试品和对照品的GC图谱中各特征峰的保留时间进行比对，确定中药香包供试品的特征峰，并据此构建质控谱图。
5.根据权利要求4所述的一种中药香包挥发油成分的质量控制方法，其特征在于，所述质量控制方法还包括将待测中药香包产品的GC谱图与中药香包质控谱图进行对比分析，待测中药香包产品的特征峰与质控谱图中9个特征峰中的5个特征峰吻合即为合格产品。
6.如权利要求1～5任一所述的中药香包质控谱图，其特征在于，所述中药香包质控谱图包括按照出峰时间顺序依次编号的9个色谱峰，其中，峰1、2、8来自当归，峰1、2、4、6来自枳实，峰1-6和峰9来自迷迭香，峰1和峰5-7来自苍术。
7.根据权利要求6所述的中药香包质控谱图，其特征在于，以峰5为参照峰，相对保留时间设定为1.00，特征峰2、4、6、9的的相对保留时间分别为：0.42±5％、0.51±5％、1.08±5％、2.63±5％。
8.根据权利要求6所述的中药香包质控谱图，其特征在于，峰1为α-蒎烯，峰3为桉油精，峰5为樟脑，峰7为β-桉叶醇，峰8为藁本内酯。
9.如权利要求6～8任一所述的中药香包质控谱图的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、参照物溶液制备，取α-蒎烯、桉油精、樟脑、β-桉叶醇和藁本内酯对照品适量，分别加环己烷制成5mg/mL的溶液，摇匀，备用；
S2、供试品溶液制备，取中药香包内容物粉末约50g，加500g去离子水，浸泡1h，连接挥发油测定器，向测定器加水至溢入烧瓶，再加入环己烷1mL，加热回流5h，分取环己烷为挥发油溶液，精密吸取100μL，加环己烷稀释至1mL，摇匀，备用；
S3、取步骤S1和步骤S2中制备得到的参照物溶液和供试品溶液各1μL，采用GC法进行检测；
S4、分析比对步骤S3得到的GC谱图，确认对应中药香包供试品的9个特征峰信息，即得所述质控谱图。
10.根据权利要求9所述的一种中药香包质控谱图的构建方法，其特征在于，所述步骤S3中采用GC法的色谱条件为：以30m×0.32mm×0.5μm的毛细管柱PEG-20M为色谱柱，进样口分流比为50:1，进样口温度为220℃，柱流量为1.0mL/min，吹扫流量为3.0mL/min，使用250℃的氢火焰离子化检测器采集特征峰信息；且，
所述GC法的程序升温条件为：初始温度50℃，保持10min，以2℃/min升温至200℃，保持5min。
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