CN111617031A - 一种稳定的重组人干扰素α1b滴眼液及其生产方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种稳定的重组人干扰素α1b滴眼液及其生产方法。该滴眼液由重组人干扰素α1b、保护剂和渗透压调节剂和水组成。本发明的重组人干扰素α1b滴眼液，可用于治疗眼部病毒感染性疾病，包括单纯疱疹性眼病：如眼睑单纯疱疹、单疱性结膜炎、角膜炎(树枝状，地图状，盘状，实质性角膜炎)、单疱性虹膜睫状体炎)，带状疱疹性眼病：如眼睑带状疱疹、带状疱疹性角膜炎、巩膜炎、虹膜睫状体炎，腺病毒性结膜角膜炎、流行性出血性结膜炎；本发明的滴眼液，除了活性物质外，虽然只添加了一种保护剂和一种渗透压调节剂，但是2～8℃避光保存下可保存至少24个月，取得了很好的长期保存稳定性。

Description

一种稳定的重组人干扰素α1b滴眼液及其生产方法

技术领域

本发明涉及医药制剂领域，具体涉及一种稳定的重组人干扰素滴眼液及其生产方法。

背景技术

干扰素是一种最初由动物机体产生，具有广谱抗病毒、抗增殖与免疫调节作用的细胞因子类蛋白质药物，根据其产生部位与作用机理的不同可以分为α、γ、β三大的类型，而每种大的类型又可分为若干小的亚型，在几种大的类型中，α型是应用最广的一种，目前临床应用的此型干扰素主要包括干扰素α2a、干扰素α2b、干扰素α1b等。1980年，国外科学家先后从欧洲和美国人体内克隆出干扰素α2a和干扰素α2b的基因，并在大肠杆菌中重组表达，使其作为药物用于临床治疗成为可能。1981年，侯云德院士利用现代分子生物学技术，从健康中国人脐带血白细胞中克隆出了α1型干扰素的基因，后来被国际干扰素命名专业委员会命名为α1b。重组人干扰素α1b和重组人干扰素α2b存在本质区别：虽然都是蛋白质，重组人干扰素α1b是由166个氨基酸残基组成的单链多肽，分子量理论值为19.4KD±1.9KD；而重组人干扰素α2b是由165个氨基酸残基组成的单链多肽，分子量理论值为19.2KD±1.9KD；它们一级结构差一个氨基酸，这也导致了它们有系列的差别。源自中国人基因的干扰素α1b后来被证明是中国人最主要的抗病毒型别。在多种病毒感染的研究中，都发现中国人受到病毒感染后，人体出现最早和产生量最大的抗病毒物质就是干扰素α1b。大量临床实践表明，重组人干扰素α1b最适合中国人使用，不良反应明显低于源自西方人的重组人干扰素α2a和重组人干扰素α2b。

重组人干扰素α1b具有广谱抗病毒作用，它与细胞表面受体结合，通过一系列中间代谢使多种胞浆酶激活，这些酶可抑制病毒在细胞内繁殖，干扰病毒核酸及蛋白的合成。干扰素还能抑制T细胞、B细胞功能，激活巨噬细胞和NK细胞，促进杀伤性T细胞的作用，因此达到抗病毒的作用。

眼部病毒感染性疾病是受病毒致病原感染眼部而引起的炎症，致病原最常见的是单纯疤疹病毒，带状病毒次之。临床上主要分为以下几种疾病：①单纯疱疹性眼病：是由单纯疱疹病毒(herpes simplex virus,HSV)感染眼部所引起，包括如眼睑单纯疱疹、单疱性结膜炎、角膜炎(树枝状，地图状，盘状，实质性角膜炎)、单疱性虹膜睫状体炎等。②带状疱疹性眼病：是由带状疱疹病毒(varicella-zoster virus，VZV)感染眼部所引起，包括如眼睑带状疱疹、带状疱疹性角膜炎、巩膜炎等。③腺病毒性结膜角膜炎。④流行性出血性结膜炎，俗称红眼病。

目前，眼科病毒性角膜炎、病毒性结膜炎等病毒感染的眼病患者非常多，目前市场上的滴眼液品种很多，但多为抗菌素的滴眼液，抗菌素的滴眼液只对细菌感染有效。针对病毒性感染的眼病，有效的抗病毒滴眼液较少。干扰素具有广谱抗病毒、抗肿瘤、调节机体免疫功能的作用，是已经被学者公认的具有良好抗病毒疗效的药物。

干扰素的水溶液存在长时间保存不稳定的问题。CN1724567A公开了一种稳定的重组人干扰素α1b水溶液，其助剂包括氯化钠、枸橼酸、十二水磷酸氢二钠和人血白蛋白，其中氯化钠的优选范围为6.5-7.5g/L。CN101214224A公开了一种重组人干扰素注射剂，其用琥珀酰明胶和吐温80代替人血白蛋白作为稳定剂。CN109010803A公开了一种重组人干扰素α2b滴眼液及其制备方法，其辅料包括玻璃酸钠、组氨酸、依地酸二钠、吐温80、抑菌剂及氯化钠。

眼部是人体最敏感的器官之一，施用于眼睛的滴眼液中的滴眼液，在保证溶液长期稳定的前提下，应尽量少添加化学物质，减少对眼睛的刺激。

发明内容

针对上述问题，本发明将经过发酵、纯化得到的重组人干扰素α1b原液，加入保护剂和渗透压调节剂，混合均匀后经0.22μm滤膜除菌过滤，最后经检定合格后包装制成的重组人干扰素α1b滴眼液。本发明的滴眼液，除了活性物质外，虽然只添加了一种保护剂和一种渗透压调节剂，但是2～8℃避光保存下可保存至少24个月，取得了非常好的长期保存稳定性。

本发明的第一方面在于公开一种稳定的重组人干扰素α1b滴眼液，由重组人干扰素α1b、保护剂和渗透压调节剂和水组成。

在本发明的一些实施方式中，所述重组人干扰素α1b为重组人干扰素α1b原液。

所述的重组人干扰素α1b滴眼液是以重组人干扰素α1b原液为主要活性成分，优选所述重组人干扰素α1b原液的浓度在10～300万IU/ml之间，优先选择在10～100万IU/ml之间。

在本发明的一些实施方式中，所述保护剂为白蛋白中的一种或多种的组合，优选为人血白蛋白。

所述的保护剂选自白蛋白中的一种或几种的组合。白蛋白又称清蛋白，是人或动物血浆中含量最高，能起到维持血浆胶体渗透压、结合和转运物质、协调血管内皮完整性、保护血细胞调节凝血、不激活炎症反应、器官保护、抗氧化、损伤修复等作用的一种天然蛋白质。白蛋白应用到药物制剂中，尤其是生物技术药物注射液制剂中所起的作用主要是帮助维持生物技术药物的生物学活性，降低容器器壁对生物技术药物的吸附，并调节生物技术药物的渗透压。本发明的白蛋白可选择动物血清白蛋白，如牛血清白蛋白或人血清白蛋白。人血清白蛋白通常被认为是一种基本上无毒、无刺激性的物质，一般以0.003％的低浓度用于蛋白处方，使用1％～5％的浓度用作蛋白稳定剂。除恶心、呕吐、唾液分泌增加、发冷、发热反应外，其不良反应不常见，也有风疹和皮疹的报道，可能有变态反应，也包括过敏性震颤。人血白蛋白被用于肠道对于血浆容量置换和治疗严重急性白蛋白的缺失。所以考虑为了降低免疫原性，本发明优先选择人血清白蛋白作为保护剂。本发明人血白蛋白在重组人干扰素α1b原液中的浓度为0.5％～2％(w/v)。

在本发明的一些实施方式中，所述渗透压调节剂为氯化钠或葡萄糖，优选为氯化钠。

所述的渗透压调节剂选自氯化钠、葡萄糖中的一种或几种的组合。本发明优先选择氯化钠用于调节渗透压的溶剂，在重组人干扰素α1b滴眼液制剂的中的浓度优先选择在0.85％～0.9％(w/v)之间。

在本发明的一些实施方式中，所述重组人干扰素α1b原液中重组人干扰素α1b的含量为10～300万IU/ml，优选为10～100万IU/ml。

在本发明的一些实施方式中，所述重组人干扰素α1b的含量为9～11万IU/ml。

在本发明的一些实施方式中，，所述保护剂的浓度为0.5％～2％(w/v)。。

在本发明的一些实施方式中，所述渗透压调节剂的浓度为0.85％～0.9％(w/v)。

本发明的第二方面在于公开第一方面所述的滴眼液的生产方法，包括以下步骤：

S1，将重组人干扰素α1b、人血白蛋白、氯化钠溶液混合；

S2，过滤除菌；

S3，产品分装。

在本发明的一些实施方式中，所述滴眼液在生产过程中还需加入维生素B6，即在所述步骤S1-S2之间，还包括步骤A1-A2，用来添加所述维生素B6：

步骤A1，首先根据以下公式计算所述维生素B6的标准重量份：

其中，WSS代表维生素B6的标准重量份，GRS代表重组人干扰素α1b的重量份，e代表自然常数，lhn代表氯化钠溶液的重量份，DB代表人血白蛋白的重量份，h代表混合容器的高度，s代表混合容器底面积，ρ代表混合容器材料的密度，M代表混合容器的质量，

代表求积分函数；

然后根据以下公式计算所述维生素B6的调整分量：

其中，所述FL代表所述维生素B6的调整分量，T_max代表生产所述滴眼液时所处环境的最高温度，T_min代表生产所述滴眼液时所处环境的最低温度，ln代表以e为底数的对数，ρ_f代表维生素B6的密度，ρ_s代表氯化钠溶液的密度；

最后，根据以下公式确定所述维生素B6的重量份：

Z＝WSS+FL

其中，Z代表所述维生素B6的重量份；

步骤A2，将所述维生素B6的重量份Z与所述重组人干扰素α1b、人血白蛋白及氯化钠溶液混合。

本发明的有益技术效果是：

(1)本发明的重组人干扰素α1b滴眼液，可用于治疗眼部病毒感染性疾病，包括单纯疱疹性眼病：如眼睑单纯疱疹、单疱性结膜炎、角膜炎(树枝状，地图状，盘状，实质性角膜炎)、单疱性虹膜睫状体炎)，带状疱疹性眼病：如眼睑带状疱疹、带状疱疹性角膜炎、巩膜炎、虹膜睫状体炎，腺病毒性结膜角膜炎、流行性出血性结膜炎；

(2)本发明的滴眼液，本发明能够在低温条件下长期保存，保证无菌，产品质量好、具有很好的稳定性，2～8℃避光保存下可保存至少24个月。

(3)本发明的滴眼液，除了活性物质外，只添加了一种保护剂和一种渗透压调节剂本发明中，保护剂白蛋白、渗透压调节剂氯化钠和葡萄糖，都是人体本身含有的物质，没有引入其他物质，最大限度的减少了对眼睛的刺激。

具体实施方式

以下通过特定的具体实例说明本发明的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点与功效。本发明还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离本发明的精神下进行各种修饰或改变。

实施例1：重组人干扰素α1b滴眼液的技术路线

本发明的重组人干扰素α1b滴眼液是利用大肠杆菌表达技术构建含有重组人干扰素α1b液基因的重组质粒，并转化至大肠杆菌中获得稳定的工程菌，工程菌发酵后，经过初提和几步纯化工艺操作去除干扰素中的聚合体等杂质，获得重组人干扰素α1b原液，纯度符合《中华人民共和国药典》三部(2015版)的规定。加入人血白蛋白作为保护剂，氯化钠作为渗透压调节剂，然后经0.22μm滤膜除菌过滤，最后经检定合格后包装成成品。

实施例2：重组人干扰素α1b滴眼液的制备

重组人干扰素α1b原液由本公司(长春生物制品研究所有限责任公司)制备，所用的人血白蛋白和氯化钠均为商购。

(1)组分及比例：

(2)半成品配制(以配制10万IU/ml规格为例)：

各组分用量计算公式：

干扰素原液量＝预配制半成品的总体积(ml)×预配制的半成品规格(1.0×10⁵IU/ml)/原液生物学活性(IU/ml)

人血白蛋白加量(g)＝预配制半成品体积(ml)×1.0％(按人血白蛋白含量折算成体积)

0.9％NaCl溶液量(ml)＝预配制半成品的总体积(ml)-干扰素原液量(ml)-人血白蛋白加入量(ml)

按照上述各组分比例和用量公式计算出重组人干扰素α1b原液量和每个组分的使用量，然后进行称量和配置。用量筒准确量取计算的干扰素原液量，加入到灭菌后的10L瓶中，按计算量在已加入原液的10L瓶中加入所需人血白蛋白。然后转入至600L灭菌罐中的0.9％氯化钠溶液中，开启灭菌罐搅拌功能搅拌混匀。

(3)除菌过滤

1)将两台293滤器串联，把滤器上的螺丝帽拧紧，将滤器进液管道与灭菌罐供液管道连接好。滤出液管道通过无菌操作隔离器的管道孔送入无菌操作隔离器的缓冲舱，密闭管道孔。将连接在50L～100L半成品罐上的进液管道通过无菌操作隔离器的管道孔送入无菌操作隔离器的缓冲舱，密闭管道孔。将样品瓶及瓶栓等物品通过缓冲舱门放入无菌操作隔离器缓冲舱中。打开无菌操作隔离器VHP，灭菌30～40分钟。

2)将连接在滤器上的滤出液管道及连接在50L～100L半成品罐上的进液管道去外包装后通过主舱和缓冲舱之间的管道孔送入无菌操作隔离器主舱，密闭管道孔。样品瓶及瓶栓等物品通过两舱之间的门放入无菌操作隔离器主舱中。去除最内层包装，将两管道卡扣相连。

3)将50L～100L半成品罐放置地秤上清零，打开灭菌罐罐底阀，供液阀，开始除菌过滤。观察滤器的上下滤板处及排气阀，无液体溢出方可进行下一步操作。将蠕动泵调至3档，将灭菌罐中液体滤至灭菌后的50L～100L半成品罐中至所需重量(根据比重将所需配制体积换算成重量)。关闭蠕动泵，用止血钳将滤器滤出液硅胶管夹住，此桶滤过液即为重组人干扰素α1b滴眼液半成品。然后进行半成品检定，合格后方可进行下一步分装。

(4)成品分装

重组人干扰素α1b滴眼液成品分装规格为20万IU/2.0ml/瓶。产品灌装量要求：灌装2.15ml/瓶，保证每瓶的装量不低于标签上所标示的数量。

在灌装开始时要确认灌装间环境，确认灌装间温度、湿度、压差，温度控制在15～26℃，相对湿度控制在30％～70％，灌装间与其它区域应保持一定压差(不小于10Pa)；确认设备：确认滴眼液灌装机、电子天平运行正常；确认内包材经环氧乙烷灭菌；确认灌装用具、振荡斗及跑道经高压灭菌；确认待灌装半成品：灌装前须认真核对待灌装产品名称、批号、待灌装半成品量，检查罐口和罐体是否密封完好，待灌装半成品罐用杀孢子剂喷雾消毒；

以上准备工作确认无误后，依次将连接好的灌装管路与蠕动泵和待灌装半成品罐相连接。将灌装针头固定针头夹上。将灭菌后的瓶振荡斗、内塞振荡斗、外盖振荡斗固定在振荡器上，然后将瓶、瓶塞和瓶盖倒入振荡斗中。打开压缩空气阀。打开灌装主机钥匙，灌装主机通电。打开内塞振荡器和外盖振荡器，并将其调节到合适的速度。打开理瓶电源，开启理瓶振荡器并将其调节到合适的速度，开启理瓶开关。待灌封机上滴眼液瓶、塞、盖入口处备用量充足后，方可准备开机，开始灌装。

在灌装开始时用电子天平进行装量检测，在灌装过程中应经常注意观察装量，每灌装1小时须核对一次装量。要做到装量准确，防止装量不均。灌装速度≤75瓶/分钟。在设备稳定运行的情况下保持55～60瓶/分钟。灌装须24小时内灌装完毕，灌装结束后要打开待灌装半成品罐检查是否有沉淀或其他异物等。灌装过程中应严格注意无菌操作。

灌装阶段内包材物料平衡：

滴眼液瓶物料平衡公式：实际灌装数量+损失数量/领取数量×100％

损失数量＝灌装过程损失+试量损失

滴眼液瓶物料平衡要求：95％～105％

实施例3：重组人干扰素α1b滴眼液的稳定性考察试验

为了进一步确定本发明的配方和制备方法的稳定性，通过检测数据的汇总和分析来判断药品在2～8℃贮藏温度下是否稳定，为产品的包装、运输、贮存条件、有效期的确定提供理论依据，并在稳定期内重新设定产品的有效期。

1)重组人干扰素α1b滴眼液23～27℃加速稳定性考察试验：

根据重组人干扰素α1b的理化性质，结合滴眼液剂型的自身特殊性，对本发明进行了23～27℃加速稳定性考察试验。根据实施例2优化的配方及工艺制备的2013年生产的3批重组人干扰素α1b滴眼液(生产批号：S20130201、S20130202、S20130203)作为考察对象，进行23～27℃加速稳定性考察试验。

考察项目参照中华人民共和国药典(2015版)，选择外观、可见异物、装量、PH值、渗透压摩尔浓度、生物学活性和无菌检查为考察指标，进行了为期6个月的稳定性考察，具体考察检测项目和考察时间见表1。

表1重组人干扰素α1b滴眼液加速稳定性考察

注：表中标“√”为进行检测；“/”为不进行检测。

23～27℃加速稳定性考察结果：通过为期6个月的23～27℃加速稳定性考察试验，外观、可见异物、装量、PH值等理化性状没有改变；无菌检查也都合格；渗透压摩尔浓度略有波动但较为稳定，生物学活性虽有波动现象，但6个月内均在质量标准范围内。具体考察检测结果见表2。

表2重组人干扰素α1b滴眼液23～27℃加速稳定性考察结果

2)重组人干扰素α1b滴眼液2～8℃长期稳定性考察试验：

根据重组人干扰素α1b的理化性质，结合滴眼液剂剂型的自身特殊性，对本发明进行了2～8℃长期稳定性考察试验。根据实施例2优化的配方及工艺制备的2018年生产的3批重组人干扰素α1b滴眼液(生产批号：20180101、20180102、20180103)进行2～8℃长期稳定性考察试验。考察项目参照《中华人民共和国药典》(2015版)，选择鉴别、外观、可见异物、装量、PH值、渗透压摩尔浓度、生物学活性和无菌检查为考察指标，进行了为期24个月的稳定性考察，具体考察检测项目和考察时间见表3。

表3重组人干扰素α1b滴眼液2～8℃长期稳定性考察

注:表中标“√”为进行检测；“/”为不进行检测。

2～8℃长期稳定性考察结果：通过为期24个月的2～8℃长期稳定性考察试验，鉴别、外观、可见异物、装量等理化性状没有改变，无菌检查也没有改变，PH值很稳定，渗透压摩尔浓度虽有微小波动现象，但较为稳定，生物学活性虽有波动现象，但24个月内均在质量标准范围内。具体考察检测结果见表4。

表4重组人干扰素α1b滴眼液2～8℃长期稳定性考察结果

重组人干扰素α1b滴眼液的稳定性考察试验结果分析：对三批重组人干扰素α1b滴眼液剂成品(20180101、20180102、20180103)进行了稳定性考察，从各项检测的数据汇总表中可以观察到，重组人干扰素α1b滴眼液剂成品的稳定性较佳。在监测期内滴眼液剂成品各项检测结果均在《中华人民共和国药典》三部(2015版)规定的合格范围内。检测数据显示，滴眼液剂成品在鉴别、外观、可见异物、装量、无菌检查等项均符合质量标准。PH值很稳定，渗透压摩尔浓度虽略有微小波动现象，但在检测期内较为稳定。由于生物学活性检验操作本身存在系统误差，其误差范围为80％～150％，因此，滴眼液剂的生物学活性在此范围内波动属正常波动，非药品质量不稳定导致。此三批滴眼液剂在监测期内滴眼液剂的生物学活性虽有波动，但均24个月内符合质量标准。

结论：通过重组人干扰素α1b滴眼液的23～27℃加速稳定性考察和2～8℃长期稳定性考察，重组人干扰素α1b滴眼液的各项指标在检测期均无显著变化。因此，可以证明重组人干扰素α1b滴眼液在2～8℃下避光贮藏很稳定，有效使用期限可定为0～24个月。

实施例4：质量控制评价

1)鉴别试验

按《中华人民共和国药典》三部(2015版)免疫斑点法(通则3402)测定，应为阳性。

2)外观检查

应为无色液体。

3)可见异物

按《中华人民共和国药典》三部(2015版)(通则0904)，应合格。

4)装量

按《中华人民共和国药典》三部(2015版)(通则0105)，不得少于标示量。

5)pH值

按《中华人民共和国药典》三部(2015版)(通则0631)，应为6.5～7.5。

6)渗透压摩尔浓度

按《中华人民共和国药典》三部(2015版)(通则0632)，应为260～350mOsmol/kg。

7)生物学活性

按《中华人民共和国药典》三部(2015版)(通则3523)，第一法细胞病变抑制法，应为标示量的80％～150％。

8)无菌检查

按《中华人民共和国药典》三部(2015版)(通则1101)，应无菌生长。

实施例5

一种重组人干扰素α1b滴眼液的生产方法，包括以下步骤：

S1，将重组人干扰素α1b、人血白蛋白、氯化钠溶液混合；

S2，过滤除菌；

S3，产品分装。

滴眼液在生产过程中还需加入维生素B6，即在所述步骤S1-S2之间，还包括步骤A1-A2，

用来添加所述维生素B6：

步骤A1，首先根据以下公式计算所述维生素B6的标准重量份：

其中，WSS代表维生素B6的标准重量份，GRS代表重组人干扰素α1b的重量份，e代表自然常数，lhn代表氯化钠溶液的重量份，DB代表人血白蛋白的重量份，h代表混合容器的高度，s代表混合容器底面积，_ρ代表混合容器材料的密度，M代表混合容器的质量，

代表求积分函数；

然后根据以下公式计算所述维生素B6的调整分量：

其中，所述FL代表所述维生素B6的调整分量，T_max代表生产所述滴眼液时所处环境的最高温度，T_min代表生产所述滴眼液时所处环境的最低温度，ln代表以e为底数的对数，ρ_f代表维生素B6的密度，ρ_s代表氯化钠溶液的密度；

最后，根据以下公式确定所述维生素B6的重量份：

Z＝WSS+FL

其中，Z代表所述维生素B6的重量份；

步骤A2，将所述维生素B6的重量份Z与所述重组人干扰素α1b、人血白蛋白及氯化钠溶液混合。

维生素B6可改善局部神经功能并减轻炎症反应，但是由于不同人员对维生素B6的敏感度不同，所以需要控制所述维生素B6的用量达到增强润眼功效，同时又不会产生任何副作用，而且在上述技术中，对所述维生素B6的用量不仅考虑所述生产时的混合容器的一些基本参数，已经其他材料的重量，同时还考虑了所述温度变化，以及维生素B6的密度和氯化钠溶液的密度，使得能够更精确的获取所述维生素B6的重量份，也更能适应各种环境。

以上对本发明优选的具体实施方式和实施例作了详细说明，但是本发明并不限于上述实施方式和实施例，在本领域技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本发明构思的前提下作出各种变化。

Claims (10)

1.一种稳定的重组人干扰素α1b滴眼液，由重组人干扰素α1b、保护剂和渗透压调节剂和水组成。

2.根据权利要求1所述的滴眼液，其特征在于，所述重组人干扰素α1b为重组人干扰素α1b原液。

3.根据权利要求1或2所述的滴眼液，其特征在于，所述保护剂为白蛋白中的一种或多种的组合，优选为人血白蛋白。

4.根据权利要求1-3任一所述的滴眼液，其特征在于，所述渗透压调节剂为氯化钠或葡萄糖，优选为氯化钠。

5.根据权利要求1-4任一所述的滴眼液，其特征在于，所述重组人干扰素α1b原液中重组人干扰素α1b的含量为10～300万IU/ml，优选为10～100万IU/ml。

6.根据权利要求1-5任一所述的滴眼液，其特征在于，所述重组人干扰素α1b的含量为9～11万IU/ml。

7.根据权利要求1-6任一所述的滴眼液，其特征在于，所述保护剂的浓度为0.5％～2％(w/v)。

8.根据权利要求1-7任一所述的滴眼液，其特征在于，所述渗透压调节剂的浓度为0.85％～0.9％(w/v)。

9.根据权利要求1-8任一所述的滴眼液的生产方法，包括以下步骤：

S1，将重组人干扰素α1b、人血白蛋白、氯化钠溶液混合；

S2，过滤除菌；

S3，产品分装。

10.根据权利要求9所述的滴眼液的生产方法，其特征在于，所述滴眼液在生产过程中还需加入维生素B6，即在所述步骤S1-S2之间，还包括步骤A1-A2，用来添加所述维生素B6：

步骤A1，首先根据以下公式计算所述维生素B6的标准重量份：

其中，WSS代表维生素B6的标准重量份，GRS代表重组人干扰素α1b的重量份，e代表自然常数，lhn代表氯化钠溶液的重量份，DB代表人血白蛋白的重量份，h代表混合容器的高度，s代表混合容器底面积，_ρ代表混合容器材料的密度，M代表混合容器的质量，

代表求积分函数；

然后根据以下公式计算所述维生素B6的调整分量：

其中，所述FL代表所述维生素B6的调整分量，T_max代表生产所述滴眼液时所处环境的最高温度，T_min代表生产所述滴眼液时所处环境的最低温度，ln代表以e为底数的对数，ρ_f代表维生素B6的密度，ρ_s代表氯化钠溶液的密度；

最后，根据以下公式确定所述维生素B6的重量份：

Z＝WSS+FL

其中，Z代表所述维生素B6的重量份；

步骤A2，将所述维生素B6的重量份Z与所述重组人干扰素α1b、人血白蛋白及氯化钠溶液混合。