CN111557992A - 一种中药组合物及其制备方法与用途 - Google Patents

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Abstract

本发明属于中药技术领域，具体涉及一种中药组合物及其制备方法与用途。为提高中药组方优质性、稳定性、安全性和有效性，本发明在经典名方开心散的基础上，提供了一种对抑郁症具有治疗作用的中药组合物，并提供了组合物的制备方法，动物实验结果表明：本发明提供的组合物能明显缩短抑郁症模型小鼠的强迫游泳不动时间及悬尾不动时间，并且能明显延长小鼠进入开放臂的次数及时间百分比。本发明提供的组合物在对抑郁症患者的治疗方面效果显著优于经典名方开心散，并且毒副作用显著降低，具有重要的开发与应用价值。

Description

一种中药组合物及其制备方法与用途
技术领域
本发明属于中药技术领域，具体涉及一种中药组合物及其制备方法与用途。
背景技术
经典名方开心散由远志、人参、茯苓、石菖蒲组成，始见于唐孙思邈《备急千金要方第十四卷(小肠腑)》，为益气养心、安神定志之代表方剂，主要用于治疗心气不足，神志不宁，健忘失眠，心怯怔忡等证。其中人参功能大补元气、安神益志，茯苓健脾化痰、宁心安神、利水渗湿为辅；石菖蒲可化痰开窍，补五脏、醒神明；远志宁心安神、祛痰开窍，既可合菖蒲加强化痰开窍之功，又可合茯苓交通心肾安神益智。综观全方，四药药性平和，且均具有养心安神益智之功，选药准确；全方以补为主，补中兼泻，同时标本兼顾、化痰开窍，配伍严谨，治心气不足、神志不宁、焦虑失眠、抑郁怔忡等中医情志性疾病，类似于西医的抑郁症，是中医益智养心、安神定志的基本方剂。
焦虑和抑郁障碍是严重威胁人们健康的精神疾病，最新的研究资料表明，焦虑障碍在老年人中的发病率高达10％，在普通人群中的发病率也达到2％-5％，抑郁在青少年中的发病率约为2％，而且，随着年龄的增长其发病率在逐渐增加。大多数患者存在焦虑和抑郁共病的状况。每年因这些情绪障碍所造成的经济损失相当惨重，而且会导致自杀等严重社会问题。目前，治疗抑郁症仍以西药为主，而西药从单一的靶点出发，普遍存在抗抑郁谱窄、起效慢、副作用大的弊端。中药以多成分、毒副作用小、多效应、协同作用强和整体调节为特点，在抑郁症治疗中具有独特优势。但由于中药本身的复杂性、科学技术条件、研究思路与方法等因素的局限，不能保证中药组方优质性、稳定性、安全性和有效性。这成为我国中药发挥对疾病治疗作用的关键制约因素。
发明内容
为解决上述中药组方(开心散)在用于疾病治疗时稳定性、安全性和有效性等方面存在的问题，本发明以中医药复方配伍和方证相关理论为指导，基于“成分-药效”内在联系，通过分离提取天然产物，并进行一系列药效学筛选、安全性评价，确定中药复方制剂中有效组分群，提供了一种对抑郁症具有防治作用的中药组合物，此组合物含有如下四种活性成分：人参皂苷元、细叶远志皂苷、石菖蒲水提醇沉液和茯苓微粉。
其中，所述的人参皂苷元为原人参二醇和原人参三醇。
所述的各活性成分按重量分数计为：
人参皂苷元1-10份 细叶远志皂苷1-10份
石菖蒲水提醇沉液10-100份 茯苓微粉200-2000份
优选为：
人参皂苷元 3份 细叶远志皂苷 2份
石菖蒲水提醇沉液40份 茯苓微粉 1200份
组合物中各成分的制备方法如下：
人参皂苷元的制备方法包括如下步骤：
(1)碱解反应
称取人参茎叶总皂苷，按人参茎叶总皂苷(g)：氢氧化钠(g)为1:1-1:4的重量比加入氢氧化钠，放入小钢磨打粉混匀，转移至真空干燥箱，常压100℃-240℃反应4-24h，得碱解反应物，静置冷却；
(2)硅胶拌料
称取物料总量2-10倍的硅胶，加入630ml—4410ml无水乙醇，与步骤(1)中所得碱解反应物拌匀，自然晾干或真空旋转蒸干；
(3)提取
按硅胶拌料(g):乙酸乙酯(ml)为1:5-1:20的量将乙酸乙酯加入步骤(2)中的硅胶拌料中，80℃回流提取1h，共计提取2次，混合后得总提取液；
(4)浓缩干燥
将步骤(3)得到的提取液减压浓缩至干燥，在真空干燥箱干燥得人参皂苷元提取物。
优选地：
人参皂苷元的制备方法包括如下步骤：
(1)碱解反应
称取人参茎叶总皂苷，加入2倍重量的氢氧化钠，放入小钢磨打粉混匀，转移至真空干燥箱，常压设置170℃反应12h，得碱解反应物，静置冷却；
(2)硅胶拌料
称取物料总量7倍的硅胶，加入2000ml无水乙醇，与步骤(1)中所得碱解反应物拌匀，自然晾干或真空旋转蒸干；
(3)提取
按硅胶拌料(g):乙酸乙酯(ml)为1:7的量将乙酸乙酯加入步骤(2)中的硅胶拌料中，80℃回流提取1h，共计提取2次，混合后得总提取液；
(4)浓缩干燥
将步骤(3)得到的提取液减压浓缩至干燥，在真空干燥箱干燥得人参皂苷元提取物。
细叶远志皂苷的制备方法包括如下步骤：
(1)水煎煮提取：称取远志药材，加饮用水提取，合并水提液，浓缩得浓缩液；
(2)碱解：将上述浓缩液加碱进行碱解，得碱解液；
(3)醇沉：用酸将步骤(2)中得到的碱解液调节pH至4-5，用无水乙醇调节醇度70％-90％，过滤，收集滤液；
(4)水沉：将步骤(3)中收集的滤液浓缩至无醇味，加入饮用水进行水沉，离心收集沉淀部分，干燥得细叶远志皂苷粗品；
(5)结晶：将步骤(4)中得到的细叶远志皂苷粗品重结晶，得细叶远志皂苷。
优选地：
细叶远志皂苷的制备方法包括如下步骤：
(1)水煎煮提取：称取远志药材，加入药材10倍量的饮用水提取3次，每次4h，合并水提液，浓缩得浓缩液；
(2)碱解：将步骤(1)中得到的浓缩液加碱至浓度为10％进行碱解3h，得碱解液；
(3)醇沉：用浓盐酸将步骤(2)中得到的碱解液调节pH至4-5。用无水乙醇调节醇度70％-90％，过滤，收集滤液；
(4)水沉：将步骤(3)中收集的滤液浓缩至无醇味，按每公斤药材加入饮用水40L的量加入饮用水进行水沉，离心收集沉淀部分，干燥得细叶远志皂苷粗品；
(5)结晶：将步骤(4)中得到的细叶远志皂苷粗品用无水乙醇进行回流重结晶，得细叶远志皂苷。
石菖蒲水提醇沉液的制备方法包括如下步骤：
(1)提取
称取石菖蒲饮片200g，加入10倍量饮用水2L，回流提取2h，提取2次，提取结束，合并提取液；
(2)浓缩
将步骤(1)中所得提取液浓缩至约0.5g/ml；
(3)醇沉
将步骤(2)中所得浓缩液用食用酒精调节至醇浓度70％，醇沉过夜得醇沉液；
(4)过滤
将步骤(3)中所得醇沉液过滤，留取滤液。
(5)浓缩干燥
减压浓缩步骤(4)所得滤液，并烘干即得石菖蒲提取物，在真空干燥箱干燥。
茯苓微粉的制备方法包括如下步骤：
(1)先将茯苓块用水冲淋洗净，置烘箱内，在40-60℃下干燥后，于高速粉碎机中粉碎，过80目筛，得茯苓粗粉。
(2)将步骤(1)得到的茯苓粗粉在压缩空气压力为0.4-0.6Kpa，进料速度为0.5-10kg/h的条件下用气流粉碎机粉碎，得茯苓微粉，用激光粒度分布仪分析所得茯苓微粉的粒径分布，结果为D90<20um。
对上述中药组合物进行抗抑郁症效果研究，实验结果显示：上述中药组合物能显著缩短抑郁症小鼠的强迫游泳不动时间及悬尾不动时间，组合物中各有效成分在发挥抗抑郁作用时具有显著的协同增效作用，在对抑郁症进行治疗时效果显著好于经典名方开心散对抑郁症的治疗效果。
毒性实验结果显示：与经典名方开心散相比，本发明提供的组合物毒性显著降低，主要表现在动物一般状况良好，显著降低胃肠道出血发生率及动物死亡率。
上述组合物可以制备成药物制剂，药物制剂中除了含有本发明提供的组合物外，还可以含有药学上可接受的辅料。
所述的药物制剂包括但不限于片剂、胶囊剂、颗粒剂或丸剂。
本发明提供的组合物在治疗抑郁症时具有如下优势：
1.与经典名方开心散相比，较之原药材富集了有效活性成分，提高药效物质的生物利用度，对抑郁症的治疗作用显著增强。
2.成分可控、毒副作用少，在对抑郁症进行治疗时各成分间具有显著的协同增效作用。
具体实施例
为了使本领域技术人员充分了解本发明，以下通过具体的实施例进一步说明本发明，但本领域技术人员应该知晓，本发明实施例并不以任何方式限制本发明。
人参皂苷元制备实施例1
(1)碱解反应
称取人参茎叶总皂苷，加入2倍重量的氢氧化钠，放入小钢磨打粉混匀，转移至真空干燥箱，常压设置170℃反应12h，得碱解反应物，静置冷却；
(2)硅胶拌料
称取物料总量7倍的硅胶，加入2000ml无水乙醇，与步骤(1)中所得碱解反应物拌匀，自然晾干或真空旋转蒸干；
(3)提取
按硅胶拌料(g):乙酸乙酯(ml)为1:7的量将乙酸乙酯加入步骤(2)中的硅胶拌料中，80℃回流提取1h，共计提取2次，混合后得总提取液；
(4)浓缩干燥
将步骤(3)得到的提取液减压浓缩至干燥，在真空干燥箱干燥得人参皂苷元提取物。
人参皂苷元制备实施例2
(1)碱解反应
称取人参茎叶总皂苷，加入同等重量的氢氧化钠，放入小钢磨打粉混匀，转移至真空干燥箱，常压设置100℃反应4h，得碱解反应物，静置冷却；
(2)硅胶拌料
称取物料总量2倍的硅胶，加入630ml无水乙醇，与步骤(1)中所得碱解反应物拌匀，自然晾干或真空旋转蒸干；
(3)提取
按硅胶拌料(g):乙酸乙酯(ml)为1:5的量将乙酸乙酯加入步骤(2)中的硅胶拌料中，80℃回流提取1h，共计提取2次，混合后得总提取液；
(4)浓缩干燥
将步骤(3)得到的提取液减压浓缩至干燥，在真空干燥箱干燥得人参皂苷元提取物。
人参皂苷元制备实施例3
(1)碱解反应
称取人参茎叶总皂苷，加入4倍重量的氢氧化钠，放入小钢磨打粉混匀，转移至真空干燥箱，常压设置240℃反应24h，得碱解反应物，静置冷却；
(2)硅胶拌料
称取物料总量10倍的硅胶，加入4410ml无水乙醇，与步骤(1)中所得碱解反应物拌匀，自然晾干或真空旋转蒸干；
(3)提取
按硅胶拌料(g):乙酸乙酯(ml)为1:20的量将乙酸乙酯加入步骤(2)中的硅胶拌料中，80℃回流提取1h，共计提取2次，混合后得总提取液；
(4)浓缩干燥
将步骤(3)得到的提取液减压浓缩至干燥，在真空干燥箱干燥得人参皂苷元提取物。
人参皂苷元制备实施例4
(1)碱解反应
称取人参茎叶总皂苷，加入2倍重量的氢氧化钠，放入小钢磨打粉混匀，转移至真空干燥箱，常压设置240℃反应12h，得碱解反应物，静置冷却；
(2)硅胶拌料
称取物料总量10倍的硅胶，加入3000ml无水乙醇，与步骤(1)中所得碱解反应物拌匀，自然晾干或真空旋转蒸干；
(3)提取
按硅胶拌料(g):乙酸乙酯(ml)为1:7的量将乙酸乙酯加入步骤(2)中的硅胶拌料中，80℃回流提取1h，共计提取2次，混合后得总提取液；
(4)浓缩干燥
将步骤(3)得到的提取液减压浓缩至干燥，在真空干燥箱干燥得人参皂苷元提取物。
细叶远志皂苷制备实施例1
取远志药材，加入药材10倍量的饮用水，加热回流提取4h，共提取3次，提取液合并浓缩成清膏，加入片碱，调至10％，碱解3h，用浓盐酸调节pH＝4.40，加入无水乙醇调节醇度80％，过滤，收集滤液，将滤液浓缩至无醇味(醇度为0)，按每公斤药材加入40L饮用水进行水沉，离心收集沉淀部分，干燥，得细叶远志皂苷粗品，加入无水乙醇反复回流重结晶得细叶远志皂苷。
细叶远志皂苷制备实施例2
取远志药材，加入药材15倍量的饮用水，加热回流提取2h，共提取2次，提取液合并浓缩成清膏，加入片碱，调至5％，碱解2h，用磷酸调节pH＝4.85,加入无水乙醇调节醇度70％，过滤，收集滤液，将滤液浓缩至无醇味(醇度为0)，按每公斤药材加入25L饮用水进行水沉，离心收集沉淀部分，干燥，得细叶远志皂苷粗品，加入甲醇反复回流重结晶得细叶远志皂苷。
细叶远志皂苷制备实施例3
取远志药材，加入药材10倍量的饮用水加热回流提取1h，共提取1次，提取液缩成清膏，加入片碱，调至10％，碱解1h，用醋酸调节p H＝4.30，加入无水乙醇调节醇度80％，过滤，收集滤液，将滤液浓缩至无醇味(醇度为0)，按每公斤药材加入25L饮用水进行水沉，离心收集沉淀部分，干燥物，得细叶远志皂苷粗品，加入无水乙醇反复回流重结晶得细叶远志皂苷。
细叶远志皂苷制备实施例4
取远志药材，加入药材20倍量的饮用水，加热回流提取2h，共提取2次，提取液合并浓缩成清膏，加入片碱，调至1％，碱解3h，用浓盐酸调节p H＝4.0,加入无水乙醇调节醇度90％，过滤，收集滤液，将滤液浓缩至无醇味(醇度为0)，按每公斤药材加入25L饮用水进行水沉，离心收集沉淀部分，干燥，得细叶远志皂苷粗品，加入无水乙醇反复回流重结晶得细叶远志皂苷。
细叶远志皂苷制备实施例5
取远志药材，加入药材20倍量的饮用水，加热回流提取2h，共提取2次，提取液合并浓缩成清膏，加入片碱，调至5％，碱解2h，用浓盐酸调节p H＝5.0,加入无水乙醇调节醇度80％，过滤，收集滤液，将滤液浓缩至无醇味实测醇度为0，按每公斤药材加入30L饮用水进行水沉，离心收集沉淀部分，干燥，得细叶远志皂苷粗品，加入甲醇反复回流重结晶得细叶远志皂苷。
组合物实施例1
人参皂苷元 3份 细叶远志皂苷 2份
石菖蒲水提醇沉液 40份 茯苓微粉 1200份
组合物实施例2
人参皂苷元 1份 细叶远志皂苷 1份
石菖蒲水提醇沉液 10份 茯苓微粉 200份
组合物实施例3
人参皂苷元 10份 细叶远志皂苷 10份
石菖蒲水提醇沉液 100份 茯苓微粉 2000份
组合物实施例4
人参皂苷元 5份 细叶远志皂苷 5份
石菖蒲水提醇沉液100份 茯苓微粉2000份
组合物药效实施例
组合物对抑郁症模型小鼠的治疗作用
1.动物建模及分组
2. 100只昆明小鼠，采取小鼠强迫游泳实验复制抑郁症模型，选取造模成功的84只小鼠随机分为7组，分别为模型组，开心散组，人参皂苷元组，细叶远志皂苷组，石菖蒲水提醇沉液组，茯苓微粉组和组合物组(组合物实施例1)。给药方法及剂量
开心散组(将经典名方开心散中各中药材经高速粉碎机粉粹成粉末)，给药剂量960mg/kg
人参皂苷元组，给药剂量1.5mg/kg
细叶远志皂苷组，给药剂量1.0mg/kg
石菖蒲水提醇沉液组，给药剂量20mg/kg
茯苓微粉组，给药剂量600mg/kg
组合物组，给药剂量622.5mg/kg
上述各组给药体积均为30ml/kg，模型组给予等体积的生理盐水。
各组小鼠按上述给药剂量与给药体积连续灌胃给药两周，于末次给药后在水桶(直径30cm，高60cm)倒入清水，水深40cm，水温为(25±2)℃，将小鼠放入水中适应2min后，测定并累计在4min内的游泳不动时间。将小鼠躯体微蜷，但保持垂自姿势，鼻孔露出水面的时间记为不动时间。每只小鼠实验结束后用毛巾擦干，吹风机吹干。
3.高架十字迷宫实验
3.1实验方法
采用高架十字迷宫，观察实验小鼠行为学变化。高架十字迷宫内壁及底面呈深灰色，距地面高度50cm，由两条相对的开放臂(open arm，长x宽为45cmx15cm)、两条相对的封闭臂(enclosed arm，长x宽×高为45cm x 15cm x 30cm)、一个联结四条臂的中央平台(central platform，15cmx15cm)组成，呈十字行。封闭臂顶部开放，于安静、遮光条件下进行。EPM测试前将待测小鼠放入一个鼠笼内，任其自由探究5min后迅速置于EPM的中央平台处，使其头部正对其中任一开放臂，释放后即开始观察测试。每只大鼠测试5min。取出小鼠后，用毛巾蘸清水及低浓度酒精彻底擦拭箱底，并等待其挥发扩散，避免留有气味而干扰下一只小鼠的观察结果。
3.2观察指标
①进入开放臂次数(open arm entry，OE)；②开放臂停留时间(open arm time，OT)；③进入封闭臂次数(close arm entry，CE)；④封闭臂停留时间(close arm time,CT)；计算进入开放臂和封闭臂的总次数(OE+CE)；进入开放臂次数比例；开放臂停留时间比例。
4.悬尾实验
于末次灌胃后将小鼠尾部用胶布固定于台架边缘，使其呈倒挂状态，头部离台面约5cm,小鼠之间保持一定距离，避免相互干扰。小鼠悬挂2min后，开始观察，持续4min,累计4min内小鼠的不动(空中停止挣扎或仅有细小肢体运动)时间(s)。
5.统计学分析
应用SPSS 17.0软件，进行F检验的单因素方差分析。
6.实验结果
6.1强迫游泳实验结果
表1各组抑郁症小鼠强迫游泳不动时间比较
组别 n 游泳不动时间(s)
模型组 12 232.12土22.13
开心散组 12 180.24土24.12<sup>#</sup>
人参皂苷元组 12 191.56土19.07<sup>#</sup>
细叶远志皂苷组 12 199.27土21.08<sup>#</sup>
石菖蒲水提醇沉液组 12 201.19土18.92<sup>#</sup>
茯苓微粉组 12 194.45土17.01<sup>#</sup>
组合物组 12 159.27土14.89<sup>#﹩</sup>
各给药组与模型组相比，#p<0.05；组合物组与开心散及各单独成分相比，﹩p<0.05。
以上结果表明，与模型组相比，各给药组小鼠强迫游泳不动时间均明显缩短，其中本发明提供的组合物组时间缩短最为显著，并且与开心散组及组合物中各单独成分比较均具有显著性差异(p<0.05)，此结果说明相比于传统名方开心散而言，本发明提供的组合物在对抑郁症患者抑郁情绪的改善方面效果更加显著。
6.2高架十字迷宫实验结果
表2各组抑郁症模型小鼠开放臂次数百分比和开放时间百分比
Figure BDA0002556120950000091
Figure BDA0002556120950000101
各给药组与模型组相比，#p<0.05；组合物组与开心散及各单独成分相比，﹩p<0.05。
结果表明，与模型组相比，各给药组小鼠进入开放臂的次数及时间百分比均明显延长，其中本发明提供的组合物组延长作用最为显著，并且与开心散组及组合物中各单独成分比较均具有显著性差异(p<0.05)，此结果说明相比于经典名方开心散而言，本发明提供的组合物在对抑郁症患者的治疗方面效果显著提高，并且组合物中各成分具有显著的协同增效作用。
6.3悬尾试验
表3组合物对小鼠悬尾不动时间的影响
组别 n 4min内不动时间(s)
模型组 12 121.90土12.18
开心散组 12 80.94土14.62<sup>#</sup>
人参皂苷元组 12 101.35土19.14<sup>#</sup>
细叶远志皂苷组 12 99.38土21.09<sup>#</sup>
石菖蒲水提醇沉液组 12 101.33土18.17<sup>#</sup>
茯苓微粉组 12 94.38土17.22<sup>#</sup>
组合物组 12 59.47土14.39<sup>#﹩</sup>
各给药组与模型组相比，#p<0.05；组合物组与开心散及各单独成分相比，﹩p<0.05。
以上结果表明，与模型组相比，各给药组小鼠悬尾不动时间均明显缩短，其中本发明提供的组合物组时间缩短最为显著，并且与开心散组及组合物中各单独成分比较均具有显著性差异(p<0.05)，此结果说明相比于传统名方开心散而言，本发明提供的组合物在对抑郁症患者抑郁情绪的改善方面效果更加显著。
用药效实施例中的实验方法对组合物实施例1-4中的组合物进行药效学试验，结果表明组合物实施例1-4中的各组合物对抑郁症的治疗效果均显著好于经典名方开心散对抑郁症的治疗效果。
毒性实验
1.实验动物
动物品系 ICR小鼠
性别 雄性
体重/年龄范围 27～30g/5周
数量 30只
供应商 济南朋悦实验动物繁育有限公司
生产许可证号 SCXK(鲁)2019 0003
使用许可证号 SYXK(鲁)2018 0008
2.动物分组
将检疫合格的动物随机分为开心散组，组合物低剂量组及组合物高剂量组，各组给药量及给药频次如表4所示：
表4动物分组及给药情况
Figure BDA0002556120950000111
各组动物按上表中的给药途径连续给药四周。
3.观察指标
3.1一般情况观察
给药过程每天观察并记录动物活动量、毛色、大小便、腹胀情况并称量体重。
3.2胃肠道出血及动物死亡情况
于最后一次给药后麻醉动物并解剖，观察胃肠道出血情况，统计各组动物死亡率。
4.实验结果
4.1一般情况观察
开心散组小鼠活动量明显减少，毛色暗淡，并出现腹胀、大便稀薄及大便带血等情况，而本发明提供的组合物组小鼠只有少数出现上述不良情况，大部分动物情况正常，并且开心散组动物体重显著低于本发明提供的组合物组的动物体重。
4.2胃肠道出血及动物死亡情况
本发明提供的组合物组动物出现胃肠道出血的数量明显少于开心散组，并且无动物死亡现象发生，具体结果见表5。
表5各组动物胃肠道出血及动物死亡情况比较
Figure BDA0002556120950000121

Claims (10)

1.一种中药组合物，其特征在于，所述中药组合物的活性成分由人参皂苷元、细叶远志皂苷、石菖蒲水提醇沉液和茯苓微粉组成。
2.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述的人参皂苷元为原人参二醇和原人参三醇。
3.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述的各活性成分按重量分数计为：
人参皂苷元1-10份 细叶远志皂苷1-10份
石菖蒲水提醇沉液10-100份 茯苓微粉200-2000份
优选为：
人参皂苷元3份 细叶远志皂苷2份
石菖蒲水提醇沉液40份 茯苓微粉1200份。
4.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述的人参皂苷元的制备方法包括如下步骤：
(1)碱解反应
称取人参茎叶总皂苷，按人参茎叶总皂苷(g)：氢氧化钠(g)为1:1-1:4的重量比加入氢氧化钠，放入小钢磨打粉混匀，转移至真空干燥箱，常压100℃-240℃反应4-24h，得碱解反应物，静置冷却；
(2)硅胶拌料
称取物料总量2-10倍的硅胶，加入630ml—4410ml无水乙醇，与步骤(1)中所得碱解反应物拌匀，自然晾干或真空旋转蒸干；
(3)提取
按硅胶拌料(g):乙酸乙酯(ml)为1:5-1:20的量将乙酸乙酯加入步骤(2)中的硅胶拌料中，80℃回流提取1h，共计提取2次，混合后得总提取液；
(4)浓缩干燥
将步骤(3)得到的提取液减压浓缩至干燥，在真空干燥箱干燥得人参皂苷元提取物。
优选为：
(1)碱解反应
称取人参茎叶总皂苷，加入2倍重量的氢氧化钠，放入小钢磨打粉混匀，转移至真空干燥箱，常压设置170℃反应12h，得碱解反应物，静置冷却；
(2)硅胶拌料
称取物料总量7倍的硅胶，加入2000ml无水乙醇，与步骤(1)中所得碱解反应物拌匀，自然晾干或真空旋转蒸干；
(3)提取
按硅胶拌料(g):乙酸乙酯(ml)为1:7的量将乙酸乙酯加入步骤(2)中的硅胶拌料中，80℃回流提取1h，共计提取2次，混合后得总提取液；
(4)浓缩干燥
将步骤(3)得到的提取液减压浓缩至干燥，在真空干燥箱干燥得人参皂苷元提取物。
5.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述的细叶远志皂苷的制备方法包括如下步骤：
(1)水煎煮提取：称取远志药材，加饮用水提取，合并水提液，浓缩得浓缩液；
(2)碱解：将上述浓缩液加碱进行碱解，得碱解液；
(3)醇沉：用酸将步骤(2)中得到的碱解液调节pH至4-5，
用无水乙醇调节醇度70％-90％，过滤，收集滤液；
(4)水沉：将步骤(3)中收集的滤液浓缩至无醇味，加入饮用水进行水沉，离心收集沉淀部分，干燥得细叶远志皂苷粗品；
(5)结晶：将步骤(4)中得到的细叶远志皂苷粗品重结晶，得细叶远志皂苷。
优选为：
(1)水煎煮提取：称取远志药材，加入药材10倍量的饮用水提取3次，每次4h，合并水提液，浓缩得浓缩液；
(2)碱解：将步骤(1)中得到的浓缩液加碱至浓度为10％进行碱解3h，得碱解液；
(3)醇沉：用浓盐酸将步骤(2)中得到的碱解液调节pH至4-5。用无水乙醇调节醇度70％-90％，过滤，收集滤液；
(4)水沉：将步骤(3)中收集的滤液浓缩至无醇味，加入饮用水40L进行水沉，
离心收集沉淀部分，干燥得细叶远志皂苷粗品；
(5)结晶：将步骤(4)中得到的细叶远志皂苷粗品用无水乙醇进行回流重结晶，
得细叶远志皂苷。
6.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述的石菖蒲水提醇沉液的制备方法包括如下步骤：
(1)提取
称取石菖蒲饮片200g，加入10倍量饮用水2L，回流提取2h，提取2次，提取结束，
合并提取液；
(2)浓缩
将步骤(1)中所得提取液浓缩至约0.5g/ml；
(3)醇沉
将步骤(2)中所得浓缩液用食用酒精调节至醇浓度70％，醇沉过夜得醇沉液；
(4)过滤
将步骤(3)中所得醇沉液过滤，留取滤液。
(5)浓缩干燥
减压浓缩步骤(4)所得滤液，并烘干即得石菖蒲提取物，在真空干燥箱干燥。
7.如权利要其1所述的中药组合物，其特征在于，所述的茯苓微粉的制备方法包括如下步骤：
(1)先将茯苓块用水冲淋洗净，置烘箱内，在40-60℃下干燥后，于高速粉碎机中粉碎，过80目筛，得茯苓粗粉；
(2)将步骤(1)得到的茯苓粗粉在压缩空气压力为0.4-0.6Kpa，进料速度为0.5-10kg/h的条件下用气流粉碎机粉碎，得茯苓微粉，用激光粒度分布仪分析所得茯苓微粉的粒径分布。
8.权利要求1-7所述的中药组合物在制备抑郁症防治药物中的用途。
9.如权利要求8所述的用途，其特征在于，所述的药物还可以含有药学上可接受的辅料。
10.如权利要求9所述的用途，其特征在于，所述药物的剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂或丸剂中的任意一种。
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Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101168024A (zh) * 2007-10-25 2008-04-30 陈卫辉 一种治疗抑郁症的中成药及其生产方法
CN102180936A (zh) * 2011-03-28 2011-09-14 南京泽朗农业发展有限公司 一种从远志中提取细叶远志皂苷的方法
CN102311474A (zh) * 2010-07-07 2012-01-11 北京师范大学 应用无溶剂法制备原人参二醇和原人参三醇
EP2952519A1 (en) * 2013-01-31 2015-12-09 Shanghai Innovative Research Center Of Traditional Chinese Medicine Protopanoxadiol derivative, preparation method thereof and application thereof

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100534456C (zh) * 2006-04-25 2009-09-02 成都中医药大学 一种远志提取物及其制备方法和用途
CN101816766B (zh) * 2010-01-27 2011-05-04 湖南时代阳光药业股份有限公司 一种用于治疗抑郁症的中药组合物
CN102895432A (zh) * 2011-07-26 2013-01-30 王登之 开心散新剂型处方工艺及其制备方法
CN103356620A (zh) * 2012-04-06 2013-10-23 北京大学 双苄基异喹啉类化合物或其在药学上可接受的盐治疗和改善抑郁症状的新用途
CN104840527A (zh) * 2015-05-02 2015-08-19 浙江大学 一种含远志糖酯和人参皂苷的组合物及用途

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101168024A (zh) * 2007-10-25 2008-04-30 陈卫辉 一种治疗抑郁症的中成药及其生产方法
CN102311474A (zh) * 2010-07-07 2012-01-11 北京师范大学 应用无溶剂法制备原人参二醇和原人参三醇
CN102180936A (zh) * 2011-03-28 2011-09-14 南京泽朗农业发展有限公司 一种从远志中提取细叶远志皂苷的方法
EP2952519A1 (en) * 2013-01-31 2015-12-09 Shanghai Innovative Research Center Of Traditional Chinese Medicine Protopanoxadiol derivative, preparation method thereof and application thereof

Non-Patent Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
XU LU ET AL.: "UPLC-Q-TOF-MS E analysis of the constituents of Ding-Zhi-Xiao-Wan, a traditional Chinese antidepressant, in normal and depressive rats", 《JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY B》 *
XU LU ET AL.: "UPLC-Q-TOF-MS E analysis of the constituents of Ding-Zhi-Xiao-Wan, a traditional Chinese antidepressant, in normal and depressive rats", 《JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY B》, vol. 1026, no. 2016, 15 June 2016 (2016-06-15), pages 36 *
张晓杰: "《抑郁症研究概要》", 31 July 2018, 湖南科学技术出版社, pages: 282 - 283 *
张虹等: "《全国高职高专药学类专业规划教材 第二轮 中医药学概论 第2版》", 31 August 2019, 中国医药科技出版社, pages: 333 *
李明亚等: "石菖蒲几种粗提取物的抗抑郁作用", 《广东药学院学报》 *
李明亚等: "石菖蒲几种粗提取物的抗抑郁作用", 《广东药学院学报》, vol. 20, no. 02, 25 April 2004 (2004-04-25), pages 142 *
桂卉等: "超微粉碎对茯苓多糖溶出特性的影响", 《时珍国医国药》 *
桂卉等: "超微粉碎对茯苓多糖溶出特性的影响", 《时珍国医国药》, vol. 20, no. 11, 20 November 2009 (2009-11-20), pages 2808 *
梁雪冰等: "运用HPLC和GC-MS研究开心散有效抗抑郁成分大鼠吸收情况", 《辽宁中医杂志》 *
梁雪冰等: "运用HPLC和GC-MS研究开心散有效抗抑郁成分大鼠吸收情况", 《辽宁中医杂志》, vol. 40, no. 02, 18 February 2013 (2013-02-18), pages 365 - 367 *

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