CN111499553B - 一种帕立骨化醇及其注射剂的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种帕立骨化醇的制备方法，采用原料1为起始原料，合成帕立骨化醇。同时提供了一种帕立骨化醇注射剂及其制备方法，所述帕立骨化醇注射剂包括：作为活性成分的帕立骨化醇0.0003‑0.0006％w/v、非离子型活性剂0.05‑0.1％w/v、聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯2‑3％w/v、胆盐0.1‑0.5％w/v、3‑5％v/v的乙醇、1‑3％v/v的丙二醇和余量的注射用水。本发明制备的帕立骨化醇注射剂可以减少有机溶剂的添加量，使用更安全。

Description

一种帕立骨化醇及其注射剂的制备方法

技术领域

本发明涉及医药技术领域，特别涉及一种帕立骨化醇及其注射剂的制备方法。

背景技术

帕立骨化醇，又称为19-去甲-1，25-二羟基维生素D₂，分子式为C₂₇H₄₄O₃，是一种白色的晶体粉末，结构式如下：

帕立骨化醇是一种骨化三醇的维生素D类似物。对骨化三醇侧链的两个基团(D2)和A环(19-nor)进行了修饰，使其能够选择性激活维生素D受体。最早是由雅培公司研发的一种用于预防和治疗慢性肾病患者的继发性甲状旁腺功能亢进症的药物。继发性甲状旁腺功能亢进是末期肾病患者最普遍的并发症之一，缺乏维生素D正是这一病症的重要发病机制。帕立骨化醇能快速有效的抑制血清中的甲状旁腺激素(PTH)，降低高钙和高磷血症的发病几率，抑制甲状旁腺的增生。

CN102131773B提供了一种新的中间体和制备方法，能大规模制备1α-羟基-去甲-维生素D化合物，尤其是制备帕立骨化醇的方法和中间体。使用大量存在的廉价原材料，无需使用昂贵或高毒性试剂即可进行，并且避免对最终产品进行广泛的纯化。CN101880253B用维生素D2为原料进行帕立骨化醇的制备，涉及到区域选择性和立体选择性的反应很少，共需12步反应。

帕立骨化醇在水中不溶，可以溶于多种极性溶剂，化学性质不稳定。最早于1988年以注射制剂(Zemplar)在美国上市。CN103893114A公开了一种稳定的可注射的维生素D受体激动剂药物组合物及其制备方法。制备的帕立骨化醇注射剂，含有非离子增溶剂、有机溶剂和水。有机溶剂对人的血管有一定的刺激性，易引起注射部位疼痛，患者顺应性差。CN107875134A公开了一种帕立骨化醇液体硬胶囊剂，其主要采用硬胶囊壳灌装帕立骨化醇药物组合物。以重量份计，帕立骨化醇药物组合物主要是由0.25-4份帕立骨化醇，720-1500份低级醇溶剂，50000-290000份油性基质和8-20份抗氧剂制成。该胶囊剂含量均匀性好、质量稳定、保质期长且生物利用度高，但是稳定差。CN104162168B为了提高帕立骨化醇的理化性质和溶解性，采用环糊精包合和冷冻干燥联合的制备工艺。帕立骨化醇能够与环糊精形成稳定的复合物，类似于形成了分子胶囊，药物分子分散在低聚糖骨架中，这种结构大大增加了帕立骨化醇的溶解性，且免受光照、氧气和高温的影响。通过冷冻干燥技术，可以解决帕立骨化醇极易吸湿、无法采用常规的方法制备口服制剂的缺陷，且能够保证制剂由于含量均匀度差异导致的药效差异大，无法制备成口服制剂的缺陷。但是环糊精包合物的包合率不易控制。CN103893114B公开一种用于胃肠外给药的药物组合物，所述药物组合物由作为活性成分的帕立骨化醇与有效量的非离子型增溶剂聚乙二醇15羟基硬脂酸酯、乙醇以及注射用水组成，所述非离子型增溶剂使所述组合物物理和化学性质稳定并提供低渗透压，所述非离子型增溶剂聚乙二醇15羟基硬脂酸酯的量占所述药物组合物总体积的0.1％w/v至5％w/v，所述乙醇的含量大于等于20％v/v，且小于50％v/v。虽然可以避免聚乙二醇的加入，但是非离子型增溶剂在灭菌后均易出现浑浊，需要经过震荡后才能变澄清，操作麻烦，不利于工业化大规模生产。

静脉注射是将药物输送至目标部位的最快方式。但是对于帕立骨化醇这种难溶于水的药物来说，通常需要溶解在有机溶剂中。在静脉注射的时候，会导致疼痛、溶血和血栓性静脉炎。帕立骨化醇溶解时，通常选用乙醇、丙醇、丁醇作为共溶剂，有助于帕立骨化醇的增溶，并且可以作为防腐剂。丙二醇多用于不溶于水的药物的溶媒，但是用丙二醇配置难溶于水的药物的注射剂中通常会导致疼痛。因此需要尽量避免或减少有机溶剂的用量，降低注射时对人的副作用。

聚氧乙烯单硬脂酸酯能溶于水、乙醇、四氯化碳、乙醚、丙酮中。在日本药典和美国药典的附编——国定处方集(National Formulary)等出版物规定，其毒性低，在食品中允许每天摄入量为25mg/公斤，另有报道说明可将其用于制备脂溶性维生素A、D、E和醋酸去氧皮质酮等的水性注射剂。

聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯是一种维生素E的水溶性衍生物，由维生素E琥珀酸和聚乙二醇酯化而成，能完全溶于水形成澄清透明溶液。毒理学研究表明，聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯作为药用辅料应用时是很安全的，因此已载入《美国药典》(见参考文献：于永新，等.聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯应用进展.沈阳药科大学学报，2006，23(6)：407-412)。其分子中既有亲脂基团，又有亲水基团，具有较低的临界胶束浓度。可以作为难溶性药物的载体，增加难溶性药物的溶解性和渗透性。胆盐能促进脂溶性维生素的吸收。

发明内容

有鉴于此，本发明旨在提出一种帕立骨化醇的制备方法，以原料1为起始原料，经过合成反应获得帕立骨化醇，起始原料容易获得，反应步骤少，便于规模化生产。

为达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：

一种帕立骨化醇的制备方法，包括如下步骤：

a.以原料1为起始原料加入到溶剂中，并加入羟基保护剂，经TLC检测原料1消失后，经过萃取得到中间体2；

b.将化合物3溶于反应溶剂中，加入正丁基锂搅拌制备化合物3的反应溶剂，将中间体2溶于反应溶剂中后滴加到所述化合物3的反应溶剂中，低温搅拌1-2h后升至室温，经TLC检测中间体2消失后，经过萃取得到油状的中间体4；

c.在氩气保护下升温至40-70℃，将中间体4溶于溶剂中，加入所述脱保护剂，回流至反应结束后得到帕立骨化醇粗品5；

d.将帕立骨化醇粗品5加入去离子水，经过乙酸乙酯萃取后，洗涤、干燥、过滤、减压浓缩得到帕立骨化醇纯品；

步骤a到c具体的反应方程式如下：

其中R基团为羟基保护基。

进一步的，步骤a中，所述溶剂选自四氢呋喃、二氯甲烷、四氯化碳、二甲基甲酰胺中的至少一种，所述羟基保护剂选自TBSCl、TBSOTf中的任意一种。

进一步的，步骤b中，所述反应溶剂选自四氢呋喃、乙二醇二甲醚中的至少一种，反应温度为-80℃～-70℃。

进一步的，步骤c中，所述脱保护剂选自四丁基氟化铵、四丁基氯化铵、四丁基溴化铵、四丁基碘化铵中的至少一种。

相对于现有技术，本发明所述的帕立骨化醇的合成工艺具有以下优势：原料1简单易得，合成工艺步骤少，并且不涉及毒性大的试剂，收率高，便于工业化大规模生产。

同时，本发明的另一方面提出一种帕立骨化醇注射剂及其制备方法。所述帕立骨化醇注射剂组成包括：作为活性成分的帕立骨化醇0.0003-0.0006％w/v、非离子型活性剂0.05-0.1％w/v、聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯2-3％w/v、胆盐0.1-0.5％w/v、3-5％v/v的乙醇、1-3％v/v的丙二醇和余量的注射用水。

进一步的，所述非离子型活性剂为聚氧乙烯单硬脂酸酯、泊洛沙姆中的至少一种。

进一步的，所述胆盐为甘氨胆酸钠、脱氧胆酸钠中的一种或多种组合。

进一步的，本发明所述帕立骨化醇注射剂的制备方法，包括如下步骤：

S1.称取处方量的非离子型活性剂、聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯和胆盐，溶于乙醇中；

S2.将帕立骨化醇分散到步骤S1中的溶液中，搅拌至帕立骨化醇完全溶解，并加入丙二醇混合均匀；

S3.加入注射用水调节体积后，采用活性炭吸附，用微孔滤膜过滤后按照2.15ml/支的量灌装于中硼硅玻璃安瓿中，装罐，灭菌。

将非离子型活性剂、聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯和胆盐分散到乙醇中配置成溶液，在加入帕立骨化醇，而并非是将非离子型活性剂、聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯、胆盐和帕立骨化醇同时全部分散于有机溶剂中，有利于帕立骨化醇更均匀分散到溶液中，提高溶解度。

进一步的，灌装后通入氮气熔封，帕立骨化醇对氧气敏感，暴露于空气中容易被氧化，在制备的过程中通入氮气，防止帕立骨化醇被氧化。

由于帕立骨化醇难溶于水，为了解决溶解问题，市售的注射液中含有50％的有机溶剂：30％的丙二醇和20％的乙醇。有机溶剂含量较多，对注射部位和血管刺激性较大。相对于现有技术，本发明所述的帕立骨化醇注射剂，大大减少了有机溶剂乙醇和丙二醇的添加量，可以减少注射时带给人的疼痛感和溶血现象；长期放置性质稳定，且低温时不会出现析晶。

具体实施方式

需要说明的是，在不冲突的情况下，本发明中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。下述实施例中的数据是由发明人通过大量实验获得，由于篇幅的限制，在说明书中只展示其中的一部分，且本领域普通技术人员可以在此数据下理解并实施本发明，其余数据均具有与下述实验结论相同的趋势并可得出相同的结论，后文不再赘述。

实施例1-3帕立骨化醇的合成

一种帕立骨化醇的制备方法，包括如下步骤：

a.以原料1为起始原料加入到溶剂中，并加入羟基保护剂，经TLC检测原料1消失后，经过萃取得到中间体2，所述溶剂选自四氢呋喃、二氯甲烷、四氯化碳、二甲基甲酰胺中的至少一种，所述羟基保护剂选自TBSCl、TBSOTf中的任意一种；

b.在-80℃～-70℃环境下，将化合物3溶于反应溶剂中，加入正丁基锂搅拌制备化合物3的反应溶剂，将中间体2溶于所述反应溶剂中后滴加到所述化合物3的反应溶剂中，低温搅拌1-2h后升至室温，经TLC检测中间体2消失后，经过萃取得到油状的中间体4，所述反应溶剂选自四氢呋喃、乙二醇二甲醚中的至少一种；

c.在氩气保护下升温至40-70℃，将中间体4溶于溶剂中，加入脱保护剂，回流至经TLC检测中间体4消失后，仅剩下帕立骨化醇斑点，得到帕立骨化醇粗品5，所述脱保护剂选自四丁基氟化铵、四丁基氯化铵、四丁基溴化铵、四丁基碘化铵中的至少一种；

d.将帕立骨化醇粗品5加入去离子水，经过乙酸乙酯萃取后，洗涤、干燥、过滤、减压浓缩得到帕立骨化醇纯品；

步骤a到c具体的反应方程式如下：

其中R基团为羟基保护基。本发明合成帕立骨化醇的方法原料易得，合成操作简便，产率高，可以工业化大规模生产。

实施例1

a.中间体2的制备

将50g的原料1加入到360ml四氢呋喃中，冷却至-5℃，缓慢加入30g TBSCl，不断搅拌，经TLC检测原料1消失后，反应物中加入水并搅拌分液，水相用二氯甲烷萃取，合并有机相，依次用饱和碳酸氢钠水溶液、水溶液、饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠搅拌干燥，过滤合并滤液后减压浓缩至干燥，得到中间体2的化合物。

b.中间体4的制备

在氩气保护下降温至-70℃，将70g化合物3溶于300ml四氢呋喃中，加入8mL正丁基锂搅拌10min。将制备的中间体2溶于500ml四氢呋喃中后，滴加到上述化合物3的溶剂中，搅拌1h后升至室温，经TLC检测中间体2反应完后，反应物中加入饱和氯化铵水溶液、水溶液，搅拌10min后分出水层，经过乙酸乙酯萃取，合并有机层，用饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠搅拌干燥，过滤，用少量乙酸乙酯洗涤，合并滤液和洗液，在P≤0.02MPa的条件下浓缩，得到中间体4。

c.帕立骨化醇粗品的制备

在氩气保护下升温至40℃，将制备的中间体4溶于100mL四氢呋喃中，加入75g四丁基氟化铵三水合物，回流反应7h，经TLC检测中间体4消失。缓慢加入碳酸氢钠搅拌、过滤，滤饼用少量二氯甲烷洗涤。将所得滤液加层析硅胶，在P≤0.02MPa的条件下减压浓缩，然后加入乙酸乙酯、正己烷再次减压浓缩得到干燥的帕立骨化醇粗品5。经过计算，帕立骨化醇粗品的总收率为83.0％。

d.帕立骨化醇纯化

将步骤c制备的帕立骨化醇粗品5和乙酸乙酯加热回流后加入活性炭，保温搅拌15min，过滤，滤液在搅拌状态下自然降温至室温，在冰浴中搅拌析晶，过滤，用少量的乙酸乙酯洗涤后，滤饼真空干燥，制备帕立骨化醇纯品。

实施例2

a.中间体2的制备

将56g的原料1加入到400ml二氯甲烷中，冷却至0℃，缓慢加入48g TBSOTf不断搅拌，经TLC检测原料1消失后，重复实施例1中此处的操作方法，得到中间体2的化合物。

b.中间体4的制备

在氩气保护下降温至-80℃，将77g化合物3溶于350ml乙二醇二甲醚中，加入6.5mL正丁基锂搅拌13min。将制备的中间体2溶于610ml乙二醇二甲醚中后，滴加到上述化合物3的溶剂中，搅拌2h后升至室温，经TLC检测中间体2反应完后，重复实施例1此处的操作方法，得到中间体4。

c.帕立骨化醇粗品的制备

在氩气保护下升温至70℃，将制备的中间体4溶于120mL四氢呋喃中，加入85g四丁基碘化铵三水合物，回流反应8h后，TLC检测中间体4消失，重复实施例1此处的操作方法，得到帕立骨化醇粗品5。经计算，帕立骨化醇粗品的总收率为82.8％。

d.帕立骨化醇纯化

将步骤c制备的帕立骨化醇粗品5和乙酸乙酯加热回流后加入活性炭，保温搅拌15min，过滤，滤液在搅拌状态下自然降温至室温，在冰浴中搅拌析晶，过滤，用少量的乙酸乙酯洗涤后，滤饼真空干燥，制备帕立骨化醇纯品。

实施例3

a.中间体2的制备

将48g的的原料1加入到333ml二甲基甲酰胺中，冷却至-3℃，缓慢加入24g TBSCl不断搅拌，经TLC检测原料1消失后，重复实施例1中此处的操作方法，得到中间体2的化合物。

b.中间体4的制备

在氩气保护下降温至-75℃，将70g化合物3溶于380ml乙二醇二甲醚中，加入7.3mL正丁基锂搅拌15min。将制备的中间体2溶于80ml乙二醇二甲醚中后，滴加到上述化合物3的溶剂中，搅拌2h后升至室温，经TLC检测中间体2反应完后，重复实施例1此处的操作方法，得到中间体4。

c.帕立骨化醇粗品的制备

在氩气保护下升温至50℃，将制备的中间体4溶于100mL四氢呋喃中，加入70g四丁基氯化铵三水合物，回流反应8.5h后，TLC检测中间体4消失，重复实施例1此处的操作方法，得到帕立骨化醇粗品5。经计算，帕立骨化醇粗品的总收率为84.5％。

d.帕立骨化醇纯化

将步骤c制备的帕立骨化醇粗品5和乙酸乙酯加热回流后加入活性炭，保温搅拌15min，过滤，滤液在搅拌状态下自然降温至室温，在冰浴中搅拌析晶，过滤，用少量的乙酸乙酯洗涤后，滤饼真空干燥，制备帕立骨化醇纯品。

实施例4-6帕立骨化醇注射剂的制备

帕立骨化醇注射剂的制备工艺为：

S1.称取处方量的聚氧乙烯单硬脂酸酯、聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯和甘氨胆酸钠，溶于乙醇中；S2.将帕立骨化醇分散到步骤S1的乙醇溶液中并搅拌至帕立骨化醇完全溶解，加入丙二醇搅拌混合均匀；S3.加入注射用水调节体积后，采用活性炭吸附，用微孔滤膜过滤后按照2.15ml/支的量灌装于中硼硅玻璃安瓿中，通入氮气熔封，灭菌。帕立骨化醇对氧气敏感，暴露于空气中容易被氧化，在制备的过程中通入氮气，防止帕立骨化醇被氧化。帕立骨化醇注射剂在制备过程中，灭菌后无浑浊现象出现。

具体的，步骤S3的操作步骤为：S31.加入注射用水调节体积后，加热至40-55℃后，加入活性炭吸附过滤，并使活性炭浓度为0.1-0.2％；S32.再将滤液降温至20-30℃，加入活性炭吸附过滤，并使活性炭浓度为0.05-0.08％；S33.用微孔滤膜过滤后按照2.15ml/支的量灌装于中硼硅玻璃安瓿中，通入氮气熔封，灭菌。

表1为步骤S3的条件不同时，制备的帕立骨化醇注射剂的主药含量和4℃放置5天的结晶情况。注射剂在运输或存放时，低温条件易引起结晶析出，因此低温下的稳定性对注射剂的品质非常重要。

表1

通过控制注射剂制备过程中温度和活性炭吸附的工艺参数，意外的发现可以提高主药的含量，且遇冷无结晶析出。序号5-8制备的帕立骨化醇注射剂采用本申请的制备工艺，主药含量高于序号1-4的样品，4℃放置5天后无结晶出现，更有利于作为注射剂。

实施例4

成分	含量
		帕立骨化醇	0.0003％w/v
聚氧乙烯单硬脂酸酯	0.05％w/v
		聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯	2％w/v
甘氨胆酸钠	0.1％w/v
		乙醇	3％v/v
丙二醇	1％v/v
		注射用水	96％v/v

制备工艺：称取上述处方量的各成分，采用步骤S1至S3的注射剂的制备工艺，其中步骤S3按照序号5的工艺制备帕立骨化醇注射剂。帕立骨化醇注射剂在制备过程中，灭菌后无浑浊现象出现。

实施例5

成分	含量
		帕立骨化醇	0.0006％w/v
泊洛沙姆	0.1％w/v
		聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯	3％w/v
脱氧胆酸钠	0.5％w/v
		乙醇	5％v/v
丙二醇	3％v/v
		注射用水	92％v/v

制备工艺：称取上述处方量的各成分，采用步骤S1至S3的注射剂的制备工艺，其中步骤S3按照序号6的工艺制备帕立骨化醇注射剂。帕立骨化醇注射剂在制备过程中，灭菌后无浑浊现象出现。

实施例6

成分	含量
		帕立骨化醇	0.0005％w/v
聚氧乙烯单硬酯酸酯	0.08％w/v
		聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯	2.5％w/v
脱氧胆酸钠	0.3％w/v
		乙醇	3％v/v
丙二醇	2.5％v/v
		注射用水	94.5％v/v

制备工艺：称取上述处方量的各成分，采用步骤S1至S3的注射剂的制备工艺，其中步骤S3按照序号7的工艺制备帕立骨化醇注射剂。帕立骨化醇注射剂在制备过程中，灭菌后无浑浊现象出现。

市售的帕立骨化醇注射剂为了使帕立骨化醇溶解，乙醇的添加量为20％左右，丙二醇的添加量为30％作用。注射的时候，会造成人疼痛和溶血现象。采用本申请的帕立骨化醇注射剂的制备方法，非离子型增溶剂、聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯和胆盐协同作用，可以促进帕立骨化醇溶解，且乙醇和丙二醇的添加量分别为3-5％v/v和1-3％v/v，大部分溶剂为水。大大减少了有机溶剂的用量，增加安全性，减少刺激性。

对比例1

按照CN103893114B实施例1制备帕立骨化醇溶液。

对比例2

对比例2的操作方法同实施例4，不同之处在于将聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯替换为卵磷脂。

对比例3

对比例3的操作方法同实施例4，不同之处在于将聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯替换为聚乙二醇1000。

对比例4

对比例4的操作方法同实施例4，不同之处在于将聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯替换为维生素E琥珀酸酯。

对比例5

对比例5的操作方法同实施例4，不同之处在于不加入聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯。

实验例热循环和稳定性实验

1、热循环实验：

注射剂在贮藏和使用的过程中通常会遇到温度的变化波动，低温条件下可能会析出结晶。将实施例4-6和对比例1-5制备的帕立骨化醇注射剂，灌封后在冰箱中冷藏(-5～4℃)三天，然后在40℃条件下加速三天，并循环操作三次，观察帕立骨化醇注射剂的澄清度。

2、稳定性实验：

将本发明实施例3-6和对比例1-5的帕立骨化醇制剂按照2015年版中国药典四部通则指导原则中“原料药物与制剂稳定性试验指导原则”进行长期稳定性(温度25℃±2℃，相对湿度60％±10％)考察，稳定性重点考察项目为含量和有关物质。并分别于0和6个月时取样采用HPLC法进行含量和有关物质测定。含量测定色谱条件：色谱柱：十八烷基键合硅胶柱(250mm×4.6mm，5μm)，流动相：甲醇-水(4:1)，检测波长：252nm，流速：2ml/min，进样量：100μl。对照品溶液的配制：取帕立骨化醇对照品适量，用流动相溶解并稀释制成每1ml中含2.0μg的溶液，摇匀，即得。含量测定方法：取实施例3-6和对比例1样品内容物适量，精密称定，用流动相溶解并稀释制成每1ml中约含2μg的溶液，作为供试品溶液。用外标法计算含量。有关物质测定色谱条件：色谱柱：十八烷基键合硅胶柱(250mm×4.6mm，5μm)，流动相A：水-乙腈(体积比为85:15)，流动相B：乙腈，梯度洗脱条件为：0-25min，流动相A 65％-5％，流动相B 35-95％，25-45min，流动相A 5％，流动相B 95％，检测波长：252nm，流速：1ml/min，进样量：100μl。

热循环和稳定性实验结果如表2所示。

表2

由表2可知，经过-5～4℃的低温冷藏后在40℃条件下加速，重复操作三次，本申请实施例4-6的帕立骨化醇注射剂一直保持澄明状态，对比例1-5的帕立骨化醇注射剂出现浑浊。经过6个月的实验，实施例4-6的帕立骨化醇注射剂含量无明显改变，总杂质为0.30-0.41％，对比例1-5的帕立骨化醇注射剂总杂质较多，分别为1.51％、1.33％、2.99％、3.11％和5.21％，且相比0个月的总杂质含量，杂质含量增加较多。实验结果表明，本申请制备的帕立骨化醇注射剂稳定性较好，低温放置后在处于高温中也不会有结晶析出，在25℃±2℃，相对湿度60％±10％的环境下存放6个月，各项指标未见明显变化，产品含量和总杂质与存放初期相比变化不大，有利于作为注射剂，且使用更安全。

本申请人在实验过程中发现，在非离子型活性剂、聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯和胆盐存在的情况下，可以在减少有机溶剂的用量的情况下增加帕立骨化醇的溶解性。且非离子型活性剂和聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯联用，有利于使制备的帕立骨化醇注射剂更稳定，且灭菌后或是存放温度变化都不会出现浑浊或结晶，更适合作为注射剂，可用于大规模生产。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (6)

1.一种帕立骨化醇注射剂的制备方法，其特征在于，

帕立骨化醇的制备方法包括如下步骤：

a.以原料1为起始原料加入到溶剂中，并加入羟基保护剂，得到中间体2；

b.将中间体2与化合物3溶于反应溶剂中反应，得到油状的中间体4；

c.将中间体4与脱保护剂反应，得到帕立骨化醇粗品5；

d.将帕立骨化醇粗品5加入去离子水，经过乙酸乙酯萃取后，洗涤、干燥、过滤、减压浓缩得到帕立骨化醇纯品；

步骤a到c具体的反应方程式如下：

其中R基团为羟基保护基；

帕立骨化醇注射剂组成包括：作为活性成分的帕立骨化醇0.0003-0.0006％w/v、非离子型活性剂：聚氧乙烯单硬脂酸酯和/或泊洛沙姆0.05-0.1％w/v、聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯2-3％w/v、胆盐0.1-0.5％w/v、3-5％v/v的乙醇、1-3％v/v的丙二醇和余量的注射用水；

所述帕立骨化醇注射剂的制备方法，包括如下步骤：

S1.称取处方量的非离子型活性剂、聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯和胆盐，溶于乙醇中；

S2.将帕立骨化醇分散到步骤S1的乙醇溶液中并搅拌至帕立骨化醇完全溶解，加入丙二醇搅拌混合均匀；

S3.加入注射用水调节体积后，采用活性炭吸附，用微孔滤膜过滤后按照2.15ml/支的量灌装于中硼硅玻璃安瓿中，装罐，灭菌。

2.根据权利要求1所述的帕立骨化醇注射剂的制备方法，其特征在于，步骤a中，所述溶剂选自四氢呋喃、二氯甲烷、四氯化碳、二甲基甲酰胺中的至少一种，所述羟基保护剂选自TBSCl、TBSOTf中的任意一种。

3.根据权利要求1所述的帕立骨化醇注射剂的制备方法，其特征在于，步骤b中，所述反应溶剂选自四氢呋喃、乙二醇二甲醚中的至少一种，反应温度为-80℃～-70℃。

4.根据权利要求1所述的帕立骨化醇注射剂的制备方法，其特征在于，步骤c中，所述脱保护剂选自四丁基氟化铵、四丁基氯化铵、四丁基溴化铵、四丁基碘化铵中的至少一种。

5.根据权利要求1所述的帕立骨化醇注射剂的制备方法，其特征在于，所述胆盐为甘氨胆酸钠、脱氧胆酸钠中的一种或多种组合。

6.根据权利要求1所述的帕立骨化醇注射剂的制备方法，其特征在于，灌装后通入氮气熔封。