CN111449233A - 一种促进机体造血与增强免疫力的新生牛骨髓酶解物保健品片剂的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及营养保健品技术领域，特别涉及一种促进机体造血与增强免疫力的新生牛骨髓酶解物保健品片剂的制备方法，优选内蒙古天然牛场新生公牛骨髓，经过脱脂后，利用木瓜蛋白酶进行酶解得到酶解产物，过滤去掉杂质后进行脂质体包被、冷冻干燥，制得骨髓冻干粉，混合以桂圆、枸杞、牡蛎、葛根、维生素c、葡萄糖酸亚铁等辅料制成片剂保健品；选ICR健康小鼠，连续4周喂食低铁饲料与双蒸水，检测血项指标与免疫力指标，建立缺铁贫血模型，将以上步骤制得的片剂每日喂食贫血模型小鼠。结果发现，4周后检测血项指标与免疫力指标，发现小鼠贫血现象显著改善、免疫力显著提高，该保健品对促进机体造血与增强机体免疫力具有显著的效果。
Description
技术领域
本发明涉及营养保健品技术领域，特别涉及促进机体造血与增强免疫力的新生牛骨髓酶解物保健品片剂的制备方法。
背景技术
据世界卫生组织(WHO)统计，全球约有30亿人有不同程度贫血，每年因患贫血导致各类疾病而死亡的人数达上千万，中国患贫血的人口概率高于西方国家，在患贫血的人群中女性明显高于男性，老人和儿童高于中青年。现代城镇居民贫血发生率每年以10％～15％的速度增长。
除营养性贫血外，按发病机理可分为：①造血不良性贫血：如再障；②红细胞过度破坏造成的贫血：如遗传性球形红细胞增多症；③失血过多造成的贫血：如溃疡或肿瘤引起的消化道出血等。按细胞大小形态可分为：①大细胞性贫血，如巨幼红细胞性贫血；②正常细胞性贫血，如溶贫、再障等；③单纯小细胞性贫血如慢性感染性贫血；④小细胞低色素性贫血，如缺铁性贫血等。
目前，对于贫血的治疗方法有如下几种，均存在着不同程度的问题。一、药物治疗。一般治疗，食用补血产品：当归补血膏、桑葚蜜膏、阿胶补血膏、健血冲剂、延年益寿精、养血生发胶囊、归芍地黄丸等。食用水果类：龙眼、荔枝、葡萄、樱桃、苹果、桔子，樱桃等等。食用补血蔬菜类：菠菜、胡萝卜、油菜、黄花菜、莲藕、红萝卜。食用五谷类：黑米、黑豆、紫米、糯米等等。但是现有的补血产品食物，见效慢而且只能作为一种辅助产品，并不能完全解决贫血问题，而且停止食用后复发率更高；输血治疗，红细胞输注。少量输注法仅适用于中间型α和β地贫，不主张用于重型β地贫。对于重型β地贫应从早期开始给予中、高量输血，以使患儿生长发育接近正常和防止骨骼病变，但本法容易导致含铁血黄素沉着症；铁鳌合剂去铁治疗，常用去铁胺，可以增加铁从尿液和粪便排出，但不能阻止胃肠道对铁的吸收偶见过敏反应，长期使用可致白内障和长骨发育障碍，剂量过大可引起视力和听觉减退。二、手术治疗：脾切除，脾切除对中间型β地贫的疗效较好，对重型β地贫效果差。脾切除可致免疫功能减弱；造血干细胞移植，异基因造血干细胞移植是目前能根治重型β地贫的方法。如有HLA相配的造血干细胞供者，应作为治疗重型β地贫的首选方法。但是供者数量和匹配率是目前面临的一大问题。三、其他特殊疗法：基因活化治疗，应用化学药物可增加γ基因表达或减少α基因表达，以改善β地贫的状，已用于临床的药物有经基脲、5-氮杂胞苷(5～AZC)、阿糖胞苷、马利兰、异烟肼等，目前正在探索之中。
以上治疗方法均存在一定的局限性，不能从根本上解决骨髓造血的问题，骨髓是人体造血组织，位于长骨骨腔内，负责红细胞、白细胞和血小板的制造。只要骨髓造血能力强，人体就会全身气血旺盛，精力足，免疫力强。
发明内容
针对上述问题中存在的不足之处，本发明提供了一种促进机体造血与增强免疫力的新生牛骨髓酶解物保健品片剂的制备方法。
本发明所述技术方案如下：
一种促进机体造血与增强免疫力的新生牛骨髓酶解物保健品片剂的制备方法，包括如下步骤：(1)高活性的新生公牛骨髓酶解产物冻干粉的制备：优选内蒙古天然牛场新生公牛骨髓洗净后运用食品级脱脂剂进行脱脂，脱脂后选用木瓜蛋白酶，按照1mg/g-10mg/g(其中优选的，终浓度为5mg/g)的浓度室温下进行酶解6h-10h(其中优选的，最佳酶解时间为8h)，得到酶解产物，用100um滤网过滤去掉杂质，过滤后的酶解产物与等体积小单室脂质体于玻璃试剂瓶中混匀，室温下振摇玻璃瓶，使得脂质体充分包裹牛骨髓水解产物后进行冷冻干燥，制得骨髓酶解产物冻干粉；
(2)高活性的新生公牛骨髓酶解物保健品片剂的制备：按质量百分比取以下原料制成，取步骤(1)所得的5％-15％冻干粉，混合以10％-30％桂圆、10％-30％枸杞、10％-30％牡蛎、10％-30％葛根、1％-10％维生素c、1％-10％葡萄糖酸亚铁用压片机制成片剂；
(3)缺铁性贫血小鼠模型的建立：选ICR健康小鼠28只，雌雄各半，7只为空白对照组，7只为模型组，7只为冻干粉实验组，7只为市场保健品对照组，先用普通饲料适应性喂养一周，第8天分别测定每只小鼠的血红蛋白(Hb)，红细胞数(RBC)、红细胞压积(PVC)，作为正常水平数据，供实验对照；然后按照体重比对非空白对照组小鼠倒尾部放血，每20克体重放血0.5克，放血后即开始进行灌胃喂食低铁饲料和双蒸水，空白对照组不做处理喂食普通饲料与水，每周测定Hb、RBC、PVC指标，经4周的耗竭试验模型组与实验组小鼠各项指标均下降40％以上，达到缺铁性贫血模型的要求，造模成功；
(4)模型组小鼠保健品的喂食与结果检测：将步骤(2)所得的保健品片剂喂食小鼠，4周后检测Hb、RBC、PVC与细胞免疫指标。
优选地，步骤(1)中所述的木瓜蛋白酶的浓度为5mg/g，酶解时间为8h。
优选地，步骤(2)中所述的桂圆、枸杞、牡蛎、葛根均磨成粉过200目筛。
优选地，步骤(2)中所述的冻干粉质量百分比为10％、桂圆质量百分比为20％、枸杞质量百分比为20％、葛根质量百分比为20％、牡蛎质量百分比为20％、维生素c质量百分比为5％、葡萄糖酸亚铁质量百分比为5％。
本发明提供的技术方案带来的有益效果是：
1、通过选择新生小公牛骨髓，该年龄段的小牛骨髓造血最为旺盛，处于生长发育的朝阳阶段，各种造血因子、造血干细胞和造血保姆细胞均旺盛生长。而市面上的中大牛骨髓多已脂肪化，造血功能微乎其微。
2、半酶解工艺，市面许多营养品中多是大分子物质(如牛奶)，很难被人体直接吸收，这也是许多人补充营养时腹泻的主要原因，保健品虽不至于致人体腹泻，但大分子的营养成分正常人也只能吸收很少一部分，肠胃虚弱的人更甚。精选内蒙古天然牛场新生公牛骨髓，经过脱脂后(避免脂类胆固醇含量过高影响三高人群)，利用木瓜蛋白酶水解蛋白质为小分子肽段，直接被小肠绒毛充分吸收，更适合术后和脾胃虚弱人群吸收利用，可迅速增强骨髓造血能力，而且蛋白水解不影响造血相关其它小分子物质活性。
3、脂质体包埋更易吸收，脂质体制备的小牛骨髓冻干粉，从进入到口腔、食道开始就能够高效吸收，吸收效率高。
4、冻干工艺，脱脂水解后的骨髓采用冻干工艺，直接成粉，真空冻干工艺充分保留其原始造血物质，真空过程避免了有效物质的被氧化。
5、最后所得成品不但含有造血相关的多肽、萜类物质、甾类和维生素，更含有小分子核酸类物质可促进造血进程。
6、牡蛎中含有丰富的核苷酸，核苷酸类(嘌呤碱或嘧啶碱基、核糖或脱氧核糖以及磷酸)营养物质通过参与细胞的新陈代谢，改善细胞活力，同时可以促进细胞的再生与修复，为造血干细胞的增殖，血红素与血红蛋白的合成，提供有利条件[5]；枸杞，牡蛎中含丰富的精氨酸、赖氨酸，其为造血干细胞、精原细胞染色体的主要碱性组蛋白，因此有利于造血干细胞的基因复制、精子的生长发育；而精氨酸形成的精胺、精脒，又是细胞增殖促进剂，这不仅有利于造血干细胞增殖，也有助于相应器官的细胞代谢。桂圆中含有丰富的铁元素和氨基酸，牡蛎中还含有大量的甘氨酸，其中甘氨酸参与合成甘氨酰胺合成酶参加嘌呤核苷酸合成，有利于造血干细胞的增殖。
7、糖含量极少，不含脂类物质，糖尿病人可放心服用
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为空白对照组小鼠与模型组小鼠整体照片，A为空白对照小鼠，B为贫血模型小鼠。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合具体实施例对本发明实施方式作进一步地详细描述。
实施例1
1、一种促进机体造血与增强免疫力的新生牛骨髓酶解物保健品片剂的制备方法：
(1)高活性的新生公牛骨髓酶解产物冻干粉的制备：优选内蒙古天然牛场新生公牛骨髓，洗净晾干，用食品级脱脂剂进行脱脂；向脱脂后的骨髓中按照5mg/g的浓度加入木瓜蛋白酶，室温下酶解8h，，得到酶解产物，100um滤网过滤去掉杂质后与等体积小单室脂质体于玻璃试剂瓶中混匀，室温下振摇玻璃瓶，使得脂质体充分包裹牛骨髓水解产物，后进行冷冻干燥，制得骨髓酶解产物冻干粉；
(2)高活性的新生公牛骨髓酶解物保健品片剂的制备：取步骤(1)所得的冻干粉，混合以桂圆、枸杞、牡蛎、葛根、维生素c、葡萄糖酸亚铁等辅料，其中桂圆、枸杞、牡蛎、葛根洗净晾干后均磨成粉过200目筛备；冻干粉、桂圆、枸杞、牡蛎、葛根的配比如下：冻干粉5％-15％(其中优选的，终质量比为10％)、桂圆10％-30％(其中优选的，终质量比为20％)、枸杞10％-30％(其中优选的，终质量比为20％)、葛根10％-30％(其中优选的，终质量比为20％)、牡蛎10％-30％(其中优选的，终质量比为20％)、维生素c1％-10％(其中优选的，终质量比为5％)、葡萄糖酸亚铁1％-10％(其中优选的，终质量比为5％)，按照以上比例将各种材料混合均匀，用压片机制成片剂即得。
2、小鼠缺铁性贫血模型的建立
选ICR健康小鼠36只，雌雄各半，12只为空白对照组，12只为模型组，12只为骨髓酶解物组。
先用普通饲料适应性喂养一周，第8天分别测定每只小鼠的血红蛋白(Hb)，红细胞数(RBC)、红细胞压积(PVC)，作为正常水平数据，供实验对照。
饲养第8天时按照体重比对非空白对照组小鼠倒尾部放血，每20克体重放血0.5克，放血后进行灌胃喂食低铁饲料和双蒸水，空白对照组不做处理喂食普通饲料与水，每周测定Hb、RBC、PVC指标，经4周的耗竭试验模型组与实验组小鼠各项指标均下降40％以上，达到缺铁性贫血模型的要求，造模成功。
3、骨髓酶解物冻干粉保健品对贫血小鼠模型的修复作用
贫血小鼠模型建立成功后，对骨髓酶解物组小鼠喂食本专利所述的骨髓酶解物，按照体重比，喂食的剂量均为0.05g/克体重/天，连续喂食4周；
4、分别测定模型组、实验组和骨髓酶解物组小鼠的Hb、RBC、PVC与CD3+CD4+细胞比例、CD3+CD8+细胞比例、CD4+/CD8+比值等指标的含量，分析数据。
结果显示模型组的小鼠经过喂食骨髓酶解物冻干粉保健品4周后，Hb、RBC、PVC与CD3+CD4+细胞比例、CD4+/CD8+比值等指标较模型组均有很大程度的提高，表明造血能力与细胞免疫有了显著的提高。
如图1所示，可见贫血模型小鼠毛发明显稀疏，出现脱毛现象，而且毛发没有光泽。
表1：空白对照组小鼠与模型组小鼠Hb、RBC、PVC值变化
*p<0.05vs空白对照组，#p<0.05vs模型组D0
表2：空白对照组、模型组和骨髓酶解物组小鼠Hb、RBC、PVC值变化
*p<0.05vs模型组，#p<0.05vs阳性对照组
表3：空白对照组、模型组和骨髓酶解物组小鼠细胞免疫的变化
*p<0.05vs模型组，#p<0.05vs阳性对照组
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (4)
1.一种促进机体造血与增强免疫力的新生牛骨髓酶解物保健品片剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)高活性的新生公牛骨髓酶解产物冻干粉的制备：优选内蒙古天然牛场新生公牛骨髓洗净后运用食品级脱脂剂进行脱脂，脱脂后选用木瓜蛋白酶，按照1mg/g-10mg/g的浓度室温下进行酶解6h-10h，得到酶解产物，用100um滤网过滤去掉杂质，过滤后的酶解产物与等体积小单室脂质体于玻璃试剂瓶中混匀，室温下振摇玻璃瓶，使得脂质体充分包裹牛骨髓水解产物后进行冷冻干燥，制得骨髓酶解产物冻干粉；
(2)高活性的新生公牛骨髓酶解物保健品片剂的制备：按质量百分比取以下原料制成，取步骤(1)所得的5％-15％冻干粉，混合以10％-30％桂圆、10％-30％枸杞、10％-30％牡蛎、10％-30％葛根、1％-10％维生素c、1％-10％葡萄糖酸亚铁用压片机制成片剂；
(3)缺铁性贫血小鼠模型的建立：选ICR健康小鼠28只，雌雄各半，7只为空白对照组，7只为模型组，7只为冻干粉实验组，7只为市场保健品对照组，先用普通饲料适应性喂养一周，第8天分别测定每只小鼠的血红蛋白，红细胞数、红细胞压积，作为正常水平数据，供实验对照；然后按照体重比对非空白对照组小鼠倒尾部放血，每20克体重放血0.5克，放血后即开始进行灌胃喂食低铁饲料和双蒸水，空白对照组不做处理喂食普通饲料与水，每周测定Hb、RBC、PVC指标，经4周的耗竭试验模型组与实验组小鼠各项指标均下降40％以上，达到缺铁性贫血模型的要求，造模成功；
(4)模型组小鼠保健品的喂食与结果检测：将步骤(2)所得的保健品片剂喂食小鼠，4周后检测Hb、RBC、PVC与细胞免疫指标。
2.根据权利要求1所述的一种促进机体造血与增强免疫力的新生牛骨髓酶解物保健品片剂的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述的木瓜蛋白酶的浓度为5mg/g，酶解时间为8h。
3.根据权利要求1所述的一种促进机体造血与增强免疫力的新生牛骨髓酶解物保健品片剂的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述的桂圆、枸杞、牡蛎、葛根均磨成粉过200目筛。
4.根据权利要求1所述的一种促进机体造血与增强免疫力的新生牛骨髓酶解物保健品片剂的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述的冻干粉质量百分比为10％、桂圆质量百分比为20％、枸杞质量百分比为20％、葛根质量百分比为20％、牡蛎质量百分比为20％、维生素c质量百分比为5％、葡萄糖酸亚铁质量百分比为5％。
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