CN111449182A - 桑叶蛋白水解物及其制备方法和用其制备的酵素饮料 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种桑叶蛋白水解物及其制备方法和用其制备的酵素饮料。该桑叶蛋白水解物的制备方法包括：将桑叶制备成桑叶浆料，向所述桑叶浆料中加入生物酶进行酶解；所述生物酶包括纤维素酶、果胶酶以及中性蛋白酶。该桑叶蛋白水解物用于微生物发酵时，能够缩短发酵微生物迟滞期，也能延长发酵微生物对数期，在发酵时间较短的情况下就能获得活性成分含量较高的发酵产物。
Description
技术领域
本发明涉及食品技术领域，特别是涉及一种桑叶蛋白水解物及其制备方法和用其制备的酵素饮料。
背景技术
桑叶富含膳食纤维、蛋白质、维生素、黄酮、以及生物碱等化学成分，具有清肝明目、镇定神经、降低血糖以及减肥清脂等显著功效。
桑叶未经发酵直接做成的饮品(例如茶叶等)，往往存在青臭味浓等问题，主要是因为桑叶中具有青草气味的低级酸类、醛类和醇类物质。桑叶经发酵后部分蛋白质可被水解成谷氨酸、天门冬氨酸、以及精氨酸等物质，这些水解产物能够改善桑叶茶汤的鲜爽度和滋味。桑叶经发酵后，部分纤维素也被分解生成可溶性糖类，这些可溶性糖类可与蛋白质水解产生的游离氨基酸发生非酶褐变反应，从而改善发酵茶色泽和风味。特别是，发酵还有助于桑叶中生物活性物质的释放，如：可使血糖降低的1-脱氧野尻霉素(1-DNJ)和血压降低的γ-氨基丁酸(GABA)含量提高。然而，采用传统方法对桑叶进行发酵，耗费时间长。
发明内容
基于此，本发明的主要目的是提供桑叶蛋白水解物及其制备方法和用其制备的酵素饮料。该桑叶蛋白水解物用于微生物发酵时，能够缩短发酵微生物迟滞期，也能延长发酵微生物对数期，从而在发酵时间较短的情况下就能获得活性成分含量较高的发酵产物。
一种桑叶蛋白水解物的制备方法，所述的制备方法包括：
将桑叶制备成桑叶浆料，向所述桑叶浆料中加入生物酶进行酶解；所述生物酶包括纤维素酶、果胶酶以及中性蛋白酶。
在其中一些实施例中，所述生物酶的加入顺序是：先加纤维素酶，再加果胶酶，最后加中性蛋白酶；或者，先加纤维素酶，再加中性蛋白酶，最后加果胶酶。
在其中一些实施例中，所述纤维素酶的酶解温度为46-53℃，酶解时长为15-25min；或/和，所述果胶酶的酶解温度为36-44℃，酶解时长为35-45min；或/和，所述中性蛋白酶的酶解温度为32-38℃，酶解时长为1.5-2.2h。
在其中一些实施例中，每1mL所述桑叶浆料中加入30-200U所述纤维素酶、50-400U所述果胶酶以及10-150U所述中性蛋白酶。
在其中一些实施例中，所述制备方法还包括：所述酶解结束后，对所述生物酶进行灭活处理。
如上所述的制备方法获得的桑叶蛋白水解物。
如上所述的桑叶蛋白水解物作为发酵调节剂在缩短发酵微生物迟滞期或/和延长发酵微生物对数期中的用途。
一种桑叶酵素饮料，所述桑叶酵素饮料的制备原料包括发酵物料以及发酵微生物，所述发酵物料包含桑叶浆料以及权利要求6所述的桑叶蛋白水解物。
在其中一些实施例中，所述的发酵物料还包括水、碳源、以及风味物质中的至少一种。
在其中一些实施例中，所述水的质量是所述桑叶浆料质量的1-2倍；或/和，所述碳源的质量占所述桑叶浆料质量的1-5％；或/和，所述风味物质占所述桑叶浆料质量的10-40％；或/和，所述桑叶蛋白水解物的质量占所述桑叶浆料、水、碳源以及所述风味物质总质量的5.5-35％；或/和，所述发酵微生物的种子液以0.5-1.5％(v/w)的接种量接种于所述发酵物料，所述种子液的浓度为(5-15)×107CFU/mL。
在其中一些实施例中，所述碳源为单糖或者双糖；或/和，所述风味物质为水果汁或/和蔬菜汁；或/和，所述发酵微生物为乳杆菌。
在其中一些实施例中，所述制备方法包括：采用所述发酵微生物对所述发酵物料进行发酵。
在其中一些实施例中，所述发酵的温度为35-45℃，所述发酵的时间为5-7d。
在其中一些实施例中，所述制备方法还包括：所述发酵结束后，对所述发酵微生物进行灭活处理。
本发明的有益效果包括：
本发明选用纤维素酶、果胶酶以及中性蛋白酶的组合对桑叶浆料进行酶解，得到桑叶蛋白水解物。该桑叶蛋白水解物用于微生物发酵时，能够缩短发酵微生物迟滞期，也能延长发酵微生物对数期，从而在发酵时间较短的情况下就能获得活性成分含量较高的发酵产物。
具体实施方式
为了便于理解本发明，下面将对本发明进行更全面的描述。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。
除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
一种桑叶蛋白水解物的制备方法，所述的制备方法包括：
将桑叶制备成桑叶浆料，向所述桑叶浆料中加入生物酶进行酶解；所述生物酶包括纤维素酶、果胶酶以及中性蛋白酶。
纤维素酶能分解桑叶浆料中的纤维，果胶酶能分解果胶、以及多糖类大分子物质，中性蛋白酶处理能降解桑叶大分子蛋白。该桑叶蛋白水解物用于微生物发酵时，能够缩短发酵微生物迟滞期，也能延长发酵微生物对数期，在发酵时间较短的情况下就能获得活性成分含量较高的发酵产物。
本发明将桑叶制备成桑叶浆料，主要是将其尽可能的粉碎，便于后续与生物酶接触，利于酶解反应。可以理解的，为实现该目的，制备桑叶浆料的方式不受限制，可以采用研磨、破壁等打浆方式。基于不同的打浆方式，为便于打浆，可以在打浆时，向桑叶中添加适量的水。优选地，水的质量是桑叶质量的1-3倍，例如为1倍、1.5倍、2倍、2.5倍、以及3倍等。
优选地，所述生物酶的加入顺序是：先加纤维素酶，再加果胶酶，最后加中性蛋白酶；或者，先加纤维素酶，再加中性蛋白酶，最后加果胶酶。
桑叶作为植物，叶面以纤维为主，纤维素酶酶解表面纤维后，桑叶液才能充分释放。再用果胶酶处理，能使桑叶汁粘稠度降低，经过这两种酶先后处理，桑叶内的果胶、多糖类大分子物质被降解为小分子物质。桑叶富含植物蛋白，最后用中性蛋白酶处理能降解桑叶大分子蛋白变为小分子蛋白。这些小分子成分能为后续微生物发酵提供营养因子，缩短发酵微生物的迟滞期，延长发酵微生物的对数期，实现采用采用较短的发酵时间就能获得活性成分较高的发酵产物。
优选地，所述纤维素酶的酶解温度为46-53℃，酶解时长为15-25min。例如：酶解温度为46℃、酶解时长为25min，酶解温度为53℃，酶解时长为15min，酶解温度为50℃、酶解时长为20min，等。
优选地，所述果胶酶的酶解温度为36-44℃，酶解时长为35-45min。例如：酶解温度为36℃、酶解时长为45min，酶解温度为44℃、酶解时长为35min，酶解温度为40℃、酶解时长为40min，等。
优选地，所述中性蛋白酶的酶解温度为32-38℃，酶解时长为1.5-2.2h。例如：酶解温度为32℃、酶解时长为2.2h，酶解温度为38℃、酶解时长为1.5h，酶解温度为35℃、酶解时长为2h，等。
优选地，每1mL所述桑叶浆料中加入30-200U所述纤维素酶、50-400U所述果胶酶以及10-150U/mL所述中性蛋白酶。
优选地，所述制备方法还包括：所述酶解结束后，对所述生物酶进行灭活处理。
可以理解的是，可以采用任何可行的方式对所述生物酶进行灭活处理。优选地，所述灭活处理的方式包括：将所得酶解产物的pH调成强酸性，再高温加热。进一步地，将所得酶解产物的pH调至3-4.5，高温加热的条件包括：70-80℃恒温5-10min。可以理解的是，为便于后续使用，后续还需要将酶解产物的pH调至中性。
可以理解的是，为了便于后续使用，可以对所得酶解产物进行纯化，纯化的方式包括但不限于：对所得酶解产物进行离心，取上清液。
本发明实施例还提供一种如上所述的制备方法获得的桑叶蛋白水解物。
本发明实施例还提供一种如上所述的桑叶蛋白水解物作为发酵调节剂在缩短发酵微生物迟滞期或/和延长发酵微生物对数期中的用途。
本发明实施例还提供一种桑叶酵素饮料，所述桑叶酵素饮料的制备原料包括发酵物料以及发酵微生物，所述发酵物料包含桑叶浆料以及如上所述的桑叶蛋白水解物。
优选地，所述的发酵物料还包括水、碳源、以及风味物质中的至少一种。
优选地，所述水的质量是所述桑叶浆料质量的1-2倍。加入适量的水，起到稀释的作用，便于发酵物料的混合，也有利于发酵的充分。另外，发酵微生物对发酵物料发酵之后的产物，如果通过喷雾干燥制备固体粉状饮料，水的加入比较有利于喷雾。
优选地，所述碳源的质量占所述桑叶浆料质量的1-5％。
优选地，所述风味物质占所述桑叶浆料质量的10-40％。
优选地，所述桑叶蛋白水解物的质量占所述桑叶浆料、水、碳源以及所述风味物质总质量的5.5-35％。
优选地，所述发酵微生物的种子液以0.5-1.5％(v/w)的接种量接种于所述发酵物料，所述种子液的浓度为(5-15)×107CFU/mL。
优选地，所述碳源为单糖或者双糖。所述的单糖例如葡萄糖等，所述的双塘例如蔗糖等。
优选地，所述风味物质为水果汁或/和蔬菜汁。水果汁可以是一种水果的果汁，也可以多种水果配合的复合果汁，例如选自葡萄汁、火龙果汁、以及桑椹汁种的一种或者几种。蔬菜汁可以是一种蔬菜的蔬菜汁，也可以多种蔬菜配合的复合果汁。
优选地，所述发酵微生物为乳杆菌。进一步地，所述乳杆菌为鼠李糖乳杆菌，或/和植物乳杆菌。
本发明实施例提供如上所述的桑叶酵素饮料的制备方法，所述制备方法包括：采用所述发酵微生物对所述发酵物料进行发酵。
可以理解的是，所述发酵物料中的桑叶蛋白水解物可以一次性加入反应容器中，也可以分批加入反应容器中，例如：部分桑叶蛋白水解物(例如占所述桑叶浆料、水、碳源以及所述风味物质总质量的0.5-5％)与其他制备原料一起投入到发酵容器，接种发酵微生物进行发酵，发酵一段时间之后(例如发酵后第2-3d)，再将剩余部分桑叶蛋白水解物(例如占所述桑叶浆料、水、碳源以及所述风味物质总质量的5-30％)投入发酵容器继续进行发酵。
优选地，所述发酵的温度为35-45℃，所述发酵的时间为5-7d。发酵产物中的菌落总数高于108CFU/mL。
优选地，所述制备方法还包括：所述发酵结束后，对所述发酵微生物进行灭活处理。
可以理解的是，对所述发酵微生物进行灭活处理的方式包括但不限于采用超出发酵微生物的耐受极限的温度对其进行加热。例如将含有发酵微生物的发酵产物至于70-80℃下至少45min。
可以理解的是，本发明实施例提供的桑叶酵素饮料可以是液体饮料，也可以是固体饮料。如果是固体饮料，在发酵结束后，需向发酵产物中加入包埋剂等辅料进行干燥。
实施例1
一、桑叶蛋白水解物的制备
桑叶蛋白水解物制作工艺：桑叶打浆→生物酶酶解→加酸调pH→水浴→离心→上清液为桑叶蛋白水解物。
1、桑叶打浆：桑叶加2倍质量水打浆。
2、生物酶酶解：先添加30-200U/mL纤维素酶50℃下酶解桑叶打浆液20min，后添加50-400U/mL果胶酶40℃下酶解桑叶打浆液40min，最后添加10-150U/mL中性蛋白酶35℃下酶解桑叶打浆液2h。
3、酶灭活：酶解结束后调pH至4.0，75℃恒温8min。
4、调pH至中性。
5、离心，取上清液。
二、饮料制备
1、桑叶预处理：取新鲜桑叶清洗干净并摊放晾干表面水分，切丝后压榨并收集叶液，将压榨后的桑叶和叶液(桑叶浆料)倒入发酵容器中。
2、发酵：在发酵容器中加入1.5倍桑叶浆料重量的水，添加5％桑叶浆料重量的蔗糖和25％桑叶浆料重量的苹果汁；在发酵前添加3％桑叶浆料和水果汁总重量的桑叶蛋白水解物同时分别接种1％(v/w)的5×107CFU/mL鼠李糖乳杆菌和5×107CFU/mL植物乳杆菌，充分混合。40℃下发酵，发酵5-7天，其中在第2天补充20％桑叶浆料和水果汁总重量的桑叶蛋白水解物，菌落总数高于108CFU/mL时可结束发酵。
3、发酵微生物灭活：发酵结束后将液体过滤并加热至75℃，保温45min。
4、制备固体饮料：添加包埋剂后喷雾干燥。
实施例2
一、桑叶蛋白水解物的制备
桑叶蛋白水解物制作工艺：桑叶打浆→生物酶酶解→加酸调pH→水浴→离心→上清液为桑叶蛋白水解物。
1、桑叶打浆：桑叶加2倍质量水打浆。
2、生物酶酶解：先添加30-200U/mL纤维素酶46℃下酶解桑叶打浆液25min，后添加50-400U/mL果胶酶36℃下酶解桑叶打浆液45min，最后添加10-150U/mL中性蛋白酶32℃下酶解桑叶打浆液2.2h。
3、酶灭活：酶解结束后调pH至4.0，70℃恒温10min。
4、调pH至中性。
5、离心，取上清液。
二、饮料制备
1、桑叶预处理：取新鲜桑叶清洗干净并摊放晾干表面水分，切丝后压榨并收集叶液，将压榨后的桑叶和叶液(桑叶浆料)倒入发酵容器中。
2、发酵：在发酵容器中加入1倍桑叶浆料重量的水，添加1％桑叶浆料重量的蔗糖和10％桑叶浆料重量的葡萄汁；在发酵前添加0.5％桑叶浆料和葡萄汁重量的桑叶蛋白水解物同时分别接种1％(v/w)的5×107CFU/mL鼠李糖乳杆菌和5×107CFU/mL植物乳杆菌，充分混合。35℃下发酵，发酵5-7天，其中在第2.5天补充5％桑叶浆料和葡萄汁重量的桑叶蛋白水解物，菌落总数高于108CFU/mL时可结束发酵。
3、发酵微生物灭活：发酵结束后将液体过滤并加热至70℃，保温45min。
4、制备固体饮料：添加包埋剂后喷雾干燥。
实施例3
一、桑叶蛋白水解物的制备
桑叶蛋白水解物制作工艺：桑叶打浆→生物酶酶解→加酸调pH→水浴→离心→上清液为桑叶蛋白水解物。
1、桑叶打浆：桑叶加2倍质量水打浆。
2、生物酶酶解：先添加30-200U/mL纤维素酶50℃下酶解桑叶打浆液20min，后添加50-400U/mL果胶酶40℃下酶解桑叶打浆液40min，最后添加10-150U/mL中性蛋白酶35℃下酶解桑叶打浆液2h。
3、酶灭活：酶解结束后调pH至4.0，80℃恒温5min。
4、调pH至中性。
5、离心，取上清液。
二、饮料制备
1、桑叶预处理：取新鲜桑叶清洗干净并摊放晾干表面水份，切丝后压榨并收集叶液，将压榨后的桑叶和叶液(桑叶浆料)倒入发酵容器中。
2、发酵：在发酵容器中加入2倍桑叶浆料重量的水，添加5％桑叶浆料重量的蔗糖和40％桑叶浆料重量的水果汁(火龙果汁)；在发酵前添加5％桑叶浆料和水果汁重量的桑叶蛋白水解物同时分别接种1％(v/w)的5×107CFU/mL鼠李糖乳杆菌和5×107CFU/mL植物乳杆菌，充分混合。45℃下发酵，发酵5-7天，其中在第3天补充30％桑叶浆料和水果汁重量的桑叶蛋白水解物，菌落总数高于108CFU/mL时可结束发酵。
3、发酵微生物灭活：发酵结束后将液体过滤并加热至80℃，保温45min。
4、制备固体饮料：添加包埋剂后喷雾干燥。
实施例4
本实施例是实施例1的变化例，相对于实施例1的变化之处主要在于“饮料制备”部分的步骤2中，桑叶蛋白水解物是一次性于接种前加入发酵容器。
具体地：
在发酵容器中加入1.5倍桑叶浆料重量的水，添加5％桑叶浆料重量的蔗糖和25％桑叶浆料重量的苹果汁；在发酵前添加23％桑叶浆料和水果汁总重量的桑叶蛋白水解物同时分别接种1％(v/w)的5×107CFU/mL鼠李糖乳杆菌和5×107CFU/mL植物乳杆菌，充分混合。40℃下发酵，发酵5-7天，菌落总数高于108CFU/mL时可结束发酵。
实施例5
本实施例是实施例1的变化例，相对于实施例1的变化之处主要在于“饮料制备”部分的步骤2中，桑叶蛋白水解物是一次性于接种后加入发酵容器。
具体地：
在发酵容器中加入1.5倍桑叶浆料重量的水，添加5％桑叶浆料重量的蔗糖和25％桑叶浆料重量的水果汁(苹果汁)；分别接种1％(v/w)的5×107CFU/mL鼠李糖乳杆菌和5×107CFU/mL植物乳杆菌，充分混合。40℃下发酵，发酵5-7天，其中在第2天加入23％桑叶浆料和水果汁总重量的桑叶蛋白水解物，菌落总数高于108CFU/mL时可结束发酵。
实施例6
本实施例是实施例1的变化例，相对于实施例1的变化之处主要在于“饮料制备”部分的步骤2中，用水代替蔗糖和苹果汁。
实施例7
本实施例是实施例1的变化例，相对于实施例1的变化之处主要在于“桑叶蛋白水解物的制备”部分的步骤2中，3种生物酶是一起加入到桑叶打浆液中，具体地：
先添加100U/mL纤维素酶、100U/mL果胶酶以及100U/mL中性蛋白酶同时添加到桑叶打浆液中，40℃下酶解3h。
对比例1
本对比例是实施例1的对比例，相对于实施例1的主要差别主要在于“饮料制备”部分的步骤2中，没有添加桑叶蛋白水解物。该步骤具体地：
在发酵容器中加入1.5倍桑叶浆料重量的水，添加5％桑叶浆料重量的蔗糖和25％桑叶浆料重量的苹果汁；在发酵前添加3％水同时分别接种1％(v/w)的5×107CFU/mL鼠李糖乳杆菌和5×107CFU/mL植物乳杆菌，充分混合。40℃下发酵，发酵5-7天，其中在第2天补充20％桑叶浆料和水果汁总重量的水，菌落总数高于108CFU/mL时可结束发酵。
对比例2
本对比例是实施例1的对比例，相对于实施例1的主要差别主要在于“桑叶蛋白水解物的制备”部分的步骤2中，采用的生物酶种类不同，具体地：
先添加100U/mL纤维素酶50℃下酶解桑叶打浆液20min，后添加100U/mL果胶酶40℃下酶解桑叶打浆液40min，最后添加100U/mL碱性蛋白酶35℃下酶解桑叶打浆液2h。
对比例3
本对比例是实施例1的对比例，相对于实施例1的主要差别主要在于“桑叶蛋白水解物的制备”部分的步骤2中，采用的生物酶种类不同，具体地：先添加100U/mL半纤维素酶50℃下酶解桑叶打浆液20min，后添加100U/mL果胶酶40℃下酶解桑叶打浆液40min，最后添加100U/mL中性蛋白酶35℃下酶解桑叶打浆液2h。
对比例4
本对比例是实施例1的对比例，相对于实施例1的主要差别主要在于“桑叶蛋白水解物的制备”部分的步骤2中，采用的生物酶种类不同，具体地：先添加100U/mL纤维素酶50℃下酶解桑叶打浆液20min，再添加100U/mL中性蛋白酶35℃下酶解桑叶打浆液2h。
结果测定
1、微生物含量
向发酵物料中接种发酵微生物后，所得发酵体系的初始发酵微生物浓度记作“初始浓度”，发酵一定天数后，检测发酵体系中发酵微生物的浓度，记作“终止浓度”。结果参见下表。
表1
2、γ-氨基丁酸
发酵物料中，除桑叶蛋白水解物之外，其他种类物料混合物中的γ-氨基丁酸浓度记作“起始浓度”，包含桑叶蛋白水解物的发酵物料的浓度记作“添加后浓度”，发酵一定天数后，反应体系中的γ-氨基丁酸的浓度记作“终止浓度”。
结果如下：
表2
| 起始浓度 | 添加后浓度 | 终止浓度 | |
| 实施例1 | 0.30mmol/g | 0.32mmol/g | 发酵第6天：1.38mmol/g |
| 实施例2 | 0.31mmol/g | 0.32mmol/g | 发酵第6天：1.29mmol/g |
| 实施例3 | 0.30mmol/g | 0.31mmol/g | 发酵第6天：1.34mmol/g |
| 实施例4 | 0.30mmol/g | 0.33mmol/g | 发酵第7天：1.02mmol/g |
| 实施例5 | 0.32mmol/g | 0.31mmol/g | 发酵第7天：1.13mmol/g |
| 实施例6 | 0.29mmol/g | 0.31mmol/g | 发酵第8天：1.15mmol/g |
| 实施例7 | 0.32mmol/g | 0.33mmol/g | 发酵第7天：1.17mmol/g |
| 对比例1 | 0.34mmol/g | -- | 发酵第9天：0.72mmol/g |
| 对比例2 | 0.32mmol/g | 0.34mmol/g | 发酵第7天：0.88mmol/g |
| 对比例3 | 0.31mmol/g | 0.31mmol/g | 发酵第8天：0.78mmol/g |
| 对比例4 | 0.31mmol/g | 0.32mmol/g | 发酵第8天：0.78mmol/g |
3、1-脱氧野尻霉素
发酵物料中，除桑叶蛋白水解物之外，其他种类物料混合物中的1-脱氧野尻霉素浓度记作“起始浓度”，包含桑叶蛋白水解物的发酵物料的浓度记作“1-脱氧野尻霉素”，发酵一定天数后，反应体系中的1-脱氧野尻霉素的浓度记作“终止浓度”。结果如下：
表3
| 起始浓度 | 添加后浓度 | 终止浓度 | |
| 实施例1 | 0.11mg/g | 0.12mg/g | 发酵第6天：0.32mg/g |
| 实施例2 | 0.10mg/g | 0.11mg/g | 发酵第6天：0.30mg/g |
| 实施例3 | 0.11mg/g | 0.12mg/g | 发酵第6天：0.32mg/g |
| 实施例4 | 0.09mg/g | 0.10mg/g | 发酵第7天：0.28mg/g |
| 实施例5 | 0.11mg/g | 0.11mg/g | 发酵第7天：0.29mg/g |
| 实施例6 | 0.12mg/g | 0.12mg/g | 发酵第8天：0.25mg/g |
| 实施例7 | 0.10mg/g | 0.11mg/g | 发酵第7天：0.27mg/g |
| 对比例1 | 0.10mg/g | -- | 发酵第9天：0.24mg/g |
| 对比例2 | 0.09mg/g | 0.11mg/g | 发酵第7天：0.1mg/g |
| 对比例3 | 0.10mg/g | 0.11mg/g | 发酵第8天：0.17mg/g |
| 对比例4 | 0.11mg/g | 0.12mg/g | 发酵第8天：0.15mg/g |
与对比例1相比较，实施例1的桑叶酵素固体饮料能提高发酵速率，缩短发酵周期，菌落总数在第6天达到6.9×108CFU/mL，1-脱氧野尻霉素含量0.32mg/g，γ-氨基丁酸含量1.38mmol/g；而对比例1在第9天达到1.6×108CFU/mL，1-脱氧野尻霉素含量0.24mg/g，γ-氨基丁酸含量0.72mmol/g。实施例1在缩短了3天发酵时间的情况下，获得了更高活性的桑叶酵素固体饮料。
同样地，相对于实施例1，对比例2至对比例4的整体发酵效率较低。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (14)
1.一种桑叶蛋白水解物的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包括：
将桑叶制备成桑叶浆料，向所述桑叶浆料中加入生物酶进行酶解；所述生物酶包括纤维素酶、果胶酶以及中性蛋白酶。
2.根据权利要求1所述的桑叶蛋白水解物的制备方法，其特征在于，所述生物酶的加入顺序是：先加纤维素酶，再加果胶酶，最后加中性蛋白酶；或者，先加纤维素酶，再加中性蛋白酶，最后加果胶酶。
3.根据权利要求1或者2所述的桑叶蛋白水解物的制备方法，其特征在于，所述纤维素酶的酶解温度为46-53℃，酶解时长为15-25min；或/和，所述果胶酶的酶解温度为36-44℃，酶解时长为35-45min；或/和，所述中性蛋白酶的酶解温度为32-38℃，酶解时长为1.5-2.2h。
4.根据权利要求1或者2所述的桑叶蛋白水解物的制备方法，其特征在于，每1mL所述桑叶浆料中加入30-200U所述纤维素酶、50-400U所述果胶酶以及10-150U所述中性蛋白酶。
5.根据权利要求1或者2所述的桑叶蛋白水解物的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括：所述酶解结束后，对所述生物酶进行灭活处理。
6.权利要求1至5任一项所述的制备方法获得的桑叶蛋白水解物。
7.权利要求6所述的桑叶蛋白水解物作为发酵调节剂在缩短发酵微生物迟滞期或/和延长发酵微生物对数期中的用途。
8.一种桑叶酵素饮料，其特征在于，所述桑叶酵素饮料的制备原料包括发酵物料以及发酵微生物，所述发酵物料包含桑叶浆料以及权利要求6所述的桑叶蛋白水解物。
9.根据权利要求8所述的桑叶酵素饮料，其特征在于，所述的发酵物料还包括水、碳源、以及风味物质中的至少一种。
10.根据权利要求9所述的桑叶酵素饮料，其特征在于，所述水的质量是所述桑叶浆料质量的1-2倍；或/和，所述碳源的质量占所述桑叶浆料质量的1-5％；或/和，所述风味物质占所述桑叶浆料质量的10-40％；或/和，所述桑叶蛋白水解物的质量占所述桑叶浆料、水、碳源以及所述风味物质总质量的5.5-35％；或/和，所述发酵微生物的种子液以0.5-1.5％(v/w)的接种量接种于所述发酵物料，所述种子液的浓度为(5-15)×107CFU/mL。
11.根据权利要求9或者10所述的桑叶酵素饮料，其特征在于，所述碳源为单糖或者双糖；或/和，所述风味物质为水果汁或/和蔬菜汁；或/和，所述发酵微生物为乳杆菌。
12.权利要8至11任一项所述的桑叶酵素饮料的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：采用所述发酵微生物对所述发酵物料进行发酵。
13.根据权利要求12所述的桑叶酵素饮料的制备方法，其特征在于，所述发酵的温度为35-45℃，所述发酵的时间为5-7d。
14.根据权利要求12或者13所述的桑叶酵素饮料的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括：所述发酵结束后，对所述发酵微生物进行灭活处理。
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2020
- 2020-05-07 CN CN202010376146.1A patent/CN111449182A/zh active Pending
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