CN111448304A - 带吸引管细胞密封用装置及其使用 - Google Patents
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Abstract
带吸引管细胞密封用装置具有：细胞密封用装置，其用于构建对细胞进行培养而成的多细胞结构体，在顶面和底面中的至少一个上具有多孔质膜，在侧面具有框部件；以及吸引管，其具有第一管状部件和第二管状部件，在所述框部件的外周面上形成有分别与所述第一管状部件的一个端部和所述第二管状部件的一个端部连通的第一贯通孔和第二贯通孔，所述第一管状部件在其另一个端部具有与吸引单元连结的连结机构，所述第二管状部件的另一个端部向外部开口。
Description
技术领域
本发明涉及一种带吸引管细胞密封用装置及其使用。具体而言，本发明涉及一种带吸引管细胞密封用装置、带吸引管细胞密封用装置组合以及细胞的密封方法。本申请基于2017年12月12日在日本申请的特愿2017-238105号主张优先权，并在本文中沿用其内容。
背景技术
在与制药和动物实验替代法相关的企业，在从细胞库等购买冷冻细胞后，在进行传代培养并冷冻保存增殖后的细胞的同时，用一部分细胞制作培养模型从而实施开发所需的试验。也就是说，到实施开发所需的试验为止，消耗了巨大的成本和时间。另外，需要的不是单层培养的细胞，而是更接近生物体的“组织型培养模型”。
作为与“组织型培养模型”相关的技术，例如可以举出：各种凝胶包埋培养技术、球状体培养技术(例如、参照专利文献1)、以及各种腔室培养技术(例如、参照专利文献2)等。
在先技术文献
专利文献
专利文献1：日本特开2012-65555号公报专利文献2：国际公开第2008/130025号专利文献3：日本特开2001-149763号公报专利文献4：国际公开第2012/026531号专利文献5：日本特开2012-115262号公报
专利文献6：日本特开2015-035978号公报。
发明内容
发明要解决的技术课题
与专利文献1和2所记载的“组织型培养模型”相关的以往技术都是培养操作较为繁杂，需要成本和时间来构建组织型培养模型。不仅如此，生产再现性未必良好，因此在批次之间也存在差异。此外，球状体培养技术等、细胞处于暴露状态的培养技术的构成三维组织的各个细胞的保护性能未必好。
并且，迄今为止，本发明人开发出了一种用于构建组织型培养模型的细胞密封用装置。虽然使用带留置针导管等将细胞密封在该装置内，但是该操作繁杂并且要求熟练度，因此需要进一步改良。
本发明是鉴于上述情况而完成的，提供一种带吸引管细胞密封用装置，该带吸引管细胞密封用装置能够通过吸引细胞的悬浊液从而简便地密封细胞，细胞保护性能优异、处理也容易、并且能够长期培养细胞。
用于解决课题的方案
即，本发明包括以下的方式。
本发明的第一方式的带吸引管细胞密封用装置具有：细胞密封用装置，其用于构建对细胞进行培养而成的多细胞结构体，在顶面和底面中的至少一个上具有多孔质膜，在侧面具有框部件；以及吸引管，其具有第一管状部件和第二管状部件，在所述框部件的外周面上形成有分别与所述第一管状部件的一个端部和所述第二管状部件的一个端部连通的第一贯通孔和第二贯通孔，所述第一管状部件在其另一个端部具有与吸引单元连结的连结机构，所述第二管状部件的另一个端部向外部开口。
在上述第一方式的带吸引管细胞密封用装置中，所述第一管状部件与所述第二管状部件也可以以隔着所述细胞密封用装置彼此对置的方式配置。
上述第一方式的带吸引管细胞密封用装置能够注入悬浮在培养液中的多细胞，内部容积可以是10mL以下。
在上述第一方式的带吸引管细胞密封用装置中，所述多孔质膜可以是在气相中具有液密性，在液相中具有半透性的半透膜。
在上述第一方式的带吸引管细胞密封用装置中，所述半透膜可以包含具有生物体相容性的材料。
在上述第一方式的带吸引管细胞密封用装置中，具有所述生物体相容性的材料可以是凝胶化的来源于细胞外基质的成分。
在上述第一方式的带吸引管细胞密封用装置中，所述凝胶化的来源于细胞外基质的成分可以是原生胶原蛋白或者去端胶原蛋白。
在上述第一方式的带吸引管细胞密封用装置中，还可以使具有气密性的膜相对于所述多孔质膜的外表面可装卸。
在上述第一方式的带吸引管细胞密封用装置中，所述连结机构也可以具有过滤器。
本发明的第二方式的带吸引管细胞密封用装置组合具有上述第一方式的带吸引管细胞密封用装置和收纳所述带吸引管细胞密封用装置的支架。
在上述第二方式的带吸引管细胞密封用装置组合中，所述支架可以具有U字型的卡止部。
本发明的第三方式的细胞的密封方法是使用上述第一方式的带吸引管细胞密封用装置的方法。
发明效果
根据上述方式的带吸引管细胞密封用装置，能够通过吸引细胞的悬浊液从而简便地密封细胞，细胞保护性能优异、处理也容易、并且能够长期培养细胞。根据上述方式的带吸引管细胞密封用装置组合，能够高效地进行连续的细胞密封用装置的制作。根据上述方式的细胞的密封方法，能够简便地将细胞密封到装置内。
附图说明
图1是示出本实施方式的带吸引管细胞密封用装置的一例的主视图。
图2A是示出本发明的第一实施方式的带吸引管细胞密封用装置的剖面图。
图2B是示出本发明的第二实施方式的带吸引管细胞密封用装置的剖面图。
图2C是示出本发明的第三实施方式的带吸引管细胞密封用装置的剖面图。
图3是示出本实施方式的带吸引管细胞密封用装置组合的一例的立体图和侧视图。
图4A是示出利用制造例1中的带吸引管细胞密封用装置(比特力凝胶(注册商标)-硅环-比特力凝胶(注册商标))吸引培养液的情形的图像。
图4B是示出在制造例1中的带吸引管细胞密封用装置(比特力凝胶(注册商标)-硅环-比特力凝胶(注册商标))上卸下凝胶加载芯片的情形的图像。
图4C是示出将制造例中的带吸引管细胞密封用装置(比特力凝胶(注册商标)-硅环-比特力凝胶(注册商标))沉入24孔板中的情形的图像。
图5A是示出利用制造例2中的带吸引管细胞密封用装置(比特力凝胶(注册商标)-硅环-过滤器)吸引培养液的情形的图像。
图5B是示出在制造例2中的带吸引管细胞密封用装置(比特力凝胶(注册商标)-硅环-过滤器)上将PET膜和凝胶加载芯片卸下的情形的图像。
图5C是示出将制造例2中的带吸引管细胞密封用装置(比特力凝胶(注册商标)-硅环-过滤器)沉入24孔板中的情形的图像。
图6A是示出利用制造例3中的带吸引管细胞密封用装置(过滤器-硅环-过滤器)吸引培养液的情形的图像。
图6B是示出在制造例3中的带吸引管细胞密封用装置(过滤器-硅环-过滤器)上卸下PET膜和凝胶加载芯片的情形的图像。
图6C是示出将制造例3中的带吸引管细胞密封用装置(过滤器-硅环-过滤器)沉入24孔板中的情形的图像。
图7是示出使用通过实施例1中的制造例4得到的细胞密封用装置(塑料制环-过滤器)而制作出的球状体的图像。刻度条表示100μm。
具体实施方式
《带吸引管细胞密封用装置》
下面，一边参照附图一边对本实施方式的带吸引管细胞密封用装置详细地进行说明。
图1是示出本实施方式的带吸引管细胞密封用装置的一例的主视图。
图1所示的带吸引管细胞密封用装置100具有细胞密封用装置10和吸引管20。
细胞密封用装置10中顶面和底面中的至少任意一个上具有多孔质膜10a，并且，在侧面具有框部件10b。并且，细胞密封用装置10是用于构建对细胞进行培养而成的多细胞结构体的装置。
吸引管20具有第一管状部件20a和第二管状部件20b。
在细胞密封用装置10的框部件10b的外周面形成有分别与第一管状部件20a的一个端部1a和所述第二管状部件20b的一个端部2a连通的第一贯通孔和第二贯通孔。
第一管状部件20a在另一个端部1b具有与吸引单元连结的连结机构3。
第二管状部件20b的另一个端部2b向外部开口。
框部件10b上的第一管状部件20a和第二管状部件20b的位置没有特别限定，但是如图1所示，优选第一管状部件20a和第二管状部件20b配置为隔着细胞密封用装置10彼此对置。由此，在将带吸引管细胞密封用装置与吸引机构连结时，能够通过吸引机构的吸引力，简便地吸引细胞悬浊液，并密封到细胞密封用装置内。
并且，第一管状部件20a和第二管状部件20b以下述方式插入框部件10b，即，在将细胞密封到细胞密封用装置10内之后，从框部件10b的外周面的第一贯通孔和第二贯通孔中容易地拔出第一管状部件20a和第二管状部件20b并将贯通孔封堵。
本实施方式的带吸引管细胞密封用装置具有上述构成，从而能够简便地密封细胞。并且，本实施方式的带吸引管细胞密封用装置的细胞保护性能优异，处理也容易，并且能够长期培养细胞。
＜第一实施方式＞
图2A是示出本发明的第一实施方式的带吸引管细胞密封用装置的剖面图。下面，一边参照图2A，一边主要对细胞密封用装置10的结构详细地进行说明。另外，在图2A以后的图中，对于与已经说明过的图中所示的构成要素相同的构成要素，标记与已经说明过的图中相同的标号，并省略其详细说明。并且，在图2A中，为了详细地说明细胞密封用装置10的结构，省略了第一管状部件20a的另一个端部1b的结构。
图2A所示的带吸引管细胞密封用装置200中包含的细胞密封用装置10在框部件10b的顶面上层叠有第一粘接剂层11a，进而在第一粘接剂层11a上层叠有顶面侧的多孔质膜10a-1。对于框部件10b的底面也同样，在框部件10b的底面之下层叠有第二粘接剂层11b，进而在第二粘接剂层11b之下层叠有底面侧的多孔质膜10a-2。即，在图2A所示细胞密封用装置10中，底面侧的多孔质膜10a-2、第二粘接剂层11b、框部件10b、第一粘接剂层11a以及顶面侧的多孔质膜10a-1依次层叠。
在带吸引管细胞密封用装置200中，顶面侧的多孔质膜10a-1和底面侧的多孔质膜10a-2可以彼此由相同材料构成，也可以由不同材料构成。关于多孔质膜的材料，如后述的“多孔质膜”所述。
第一粘接剂层11a和第二粘接剂层11b的材料能够根据作为粘接对象的顶面侧的多孔质膜10a-1、底面侧的多孔质膜10a-2以及框部件10b的各材料而适当地选择。并且，第一粘接剂层11a和第二粘接剂层11b的材料可以彼此由相同的材料构成，也可以由不同的材料构成。关于第一粘接剂层11a和第二粘接剂层11b的材料，如后述的“粘接剂层”所述。
第一粘接剂层11a和第二粘接剂层11b能够对应框部件10b的形状形成。例如，在框部件10b是环状的情况下，第一粘接剂层11a和第二粘接剂层11b在框部件10b上，形成为同心圆状，并且，以环状按照与顶面侧的多孔质膜10a-1或底面侧的多孔质膜10a-2以及框部件10b接触的大小而形成。
＜第二实施方式＞
图2B是示出本发明的第二实施方式的带吸引管细胞密封用装置的剖面图。
图2B所示的带吸引管细胞密封用装置300包含的细胞密封用装置10在上述的带吸引管细胞密封用装置200的基础上，除了具有第三粘接剂层11c和具有气密性的膜12a这一点以外，是与图2A所示的带吸引管细胞密封用装置200相同的构成。即，在图2B所示的细胞密封用装置10中，按照底面侧的多孔质膜10a-2、第二粘接剂层11b、框部件10b、第一粘接剂层11a、顶面侧的多孔质膜10a-1、第三粘接剂层11c以及具有气密性的膜12a的顺序层叠。并且，具有气密性的膜12a借助第三粘接剂层11c相对于顶面侧的多孔质膜10a-1的外表面可装卸。
在带吸引管细胞密封用装置300中，顶面侧的多孔质膜10a-1和底面侧的多孔质膜10a-2的材料与图2A所示的带吸引管细胞密封用装置200相同。
第一粘接剂层11a、第二粘接剂层11b以及第三粘接剂层11c的材料能够根据作为粘接对象的顶面侧的多孔质膜10a-1、底面侧的多孔质膜10a-2、框部件10b以及具有气密性的膜12a的各材料而适当地选择。并且，第一粘接剂层11a、第二粘接剂层11b以及第三粘接剂层11c的材料可以彼此由相同的材料构成，也可以由不同的材料构成。关于第一粘接剂层11a、第二粘接剂层11b以及第三粘接剂层11c的材料，如后述的“粘接剂层”所述。
第一粘接剂层11a和第二粘接剂层11b的形状与图2A所示的带吸引管细胞密封用装置200相同。
第三粘接剂层11c能够对应具有气密性的膜12a的形状形成。例如，在具有气密性的膜12a是圆形状的情况下，第三粘接剂层11c在具有气密性的膜12a上形成为同心圆状、以圆形或环状按照与顶面侧的多孔质膜10a-1和具有气密性的膜12a接触的大小而形成。
＜第三实施方式＞
图2C是示出本发明的第三实施方式的带吸引管细胞密封用装置的剖面图。
图2C所示的带吸引管细胞密封用装置400包含的细胞密封用装置10在上述的带吸引管细胞密封用装置300的基础上，除了具有第四粘接剂层11d和具有气密性的膜12b这一点以外，与图2B所示的带吸引管细胞密封用装置300是相同的构成。即，在图2C所示的细胞密封用装置10中，按照具有气密性的膜12b、第四粘接剂层11d、底面侧的多孔质膜10a-2、第二粘接剂层11b、框部件10b、第一粘接剂层11a、顶面侧的多孔质膜10a-1、第三粘接剂层11c以及具有气密性的膜12a的顺序层叠。并且，具有气密性的膜12a和具有气密性的膜12b分别借助第三粘接剂层11c和第四粘接剂层11d相对于顶面侧的多孔质膜10a-1的外表面和底面侧的多孔质膜10a-2的外表面可装卸。
在带吸引管细胞密封用装置400中，顶面侧的多孔质膜10a-1和底面侧的多孔质膜10a-2与图2A所示的带吸引管细胞密封用装置200相同。
第一粘接剂层11a、第二粘接剂层11b、第三粘接剂层11c以及第四粘接剂层11d的材料能够根据作为粘接对象的顶面侧的多孔质膜10a-1、底面侧的多孔质膜10a-2、框部件10b、具有气密性的膜12a以及具有气密性的膜12b的各材料而适当地选择。并且，第一粘接剂层11a、第二粘接剂层11b、第三粘接剂层11c以及第四粘接剂层11d的材料彼此可以由相同的材料构成，也可以由不同的材料构成。关于第一粘接剂层11a、第二粘接剂层11b、第三粘接剂层11c以及第四粘接剂层11d的材料，如后述的“粘接剂层”所述。
第一粘接剂层11a和第二粘接剂层11b的形状与图2A所示的带吸引管细胞密封用装置200相同。
第三粘接剂层11c的形状与图2B所示的带吸引管细胞密封用装置300相同。
第四粘接剂层11d能够对应具有气密性的膜12b的形状形成。例如，在具有气密性的膜12b是圆形的情况，第四粘接剂层11d在具有气密性的膜12b上形成为同心圆状、以圆形或环状按照与顶面侧的多孔质膜10a-2和具有气密性的膜12b接触的大小而形成。
本实施方式的带吸引管细胞密封用装置并不限于图1和图2A～2C所示的装置，在不损害本实施方式的带吸引管细胞密封用装置的效果的范围内，也可以变更或删除图1和图2A～2C所示的一部分的构成或是在到目前为止所做说明的构成上进一步补充其它构成。
例如，在图1和图2A～2C所示的带吸引管细胞密封用装置中，例示了在顶面和底面具有多孔质膜的装置，但是，也可以在顶面和底面中的至少任意一个上具有多孔质膜。即，可以仅在顶面具有多孔质膜，也可以仅在底面具有多孔质膜。在带吸引管细胞密封用装置仅在顶面或底面中的任意一个上具有多孔质膜的情况，除此以外的部分可以由与框部件相同的材料构成，也可以由与框部件不同的材料构成。
例如，在图1和图2A～2C所示的带吸引管细胞密封用装置中，示出了细胞密封用装置10的形状为圆柱，但是也可以采用其它形状。细胞密封用装置10的形状只要是能够将细胞密封，并且将氧和溶解在培养液中的营养成分均匀地遍布细胞中的形状即可。并且，细胞密封用装置10可以在装置内部充满培养液，也可以不充满培养液而留有气体部分。作为环状的圆柱以外的细胞密封用装置10的形状，具体而言，可以举出：例如，中空线状等的圆柱、圆锥、圆锥台、角锥、角锥台、球、多面体(例如、四面体、五面体、六面体(包括立方体)、八面体、十二面体、二十面体、二十四面体、开普勒泊松立体等)等，但不限于此。
如图1和图2A～2C所示的带吸引管细胞密封用装置中的细胞密封用装置10的形状是环状的圆柱的情况下，细胞密封用装置的内径优选为1mm以上且60mm以下，更优选为3mm以上且35mm以下，进一步优选为5mm以上且26mm以下。
并且，细胞密封用装置10的外径优选为3mm以上且68mm以下，更优选为5mm以上且43mm以下，进一步优选为7mm以上且32mm以下。
并且，细胞密封用装置10的厚度(圆柱的高度)为5μm以上，优选为50μm以上且15mm以下，更优选为100μm以上且10mm以下，进一步优选为200μm以上且2.5mm以下。
另外，在本说明书中，“细胞密封用装置的厚度(圆柱的高度)”意为从细胞密封用装置的顶面的外侧的缘部到底面的外侧的缘部为止的距离。
例如，在图1和图2A～2C所示的带吸引管细胞密封用装置中，示出了细胞密封用装置的顶面和底面是平面的装置，但是顶面和底面也可以是凹部结构或凸部结构。尤其，在顶面和底面是凹部结构时，优选顶面的内侧的凹部的中心部(顶面的内侧的最凹部)不与底面的内侧的凹部的中心部(底面的内侧的最凹部)接触，保持一定的距离(例如、5μm以上)。由此，细胞密封用装置的厚度(圆柱的高度)、即，从细胞密封用装置的顶面的外侧的缘部到底面的外侧的缘部为止的距离变得比从顶面的外侧的凹部的中心部(顶面的外侧的最凹部)到底面的外侧的凹部(底面的外侧的最凹部)的中心部为止的距离长。由此，例如，在从顶面添加药剂的情况下，能够维持所添加的药剂的方向性。此外，由于顶面和底面是凹部结构，因此，能够在顶面和底面的外侧新播种并培养细胞。
例如，在图1和图2A～2C所示的带吸引管细胞密封用装置中，例示了在框部件的外周面的第一贯通孔和第二贯通孔的形状是圆形的装置，但是，只要是易于从贯通孔中拔出第一管状部件和第二管状部件并封堵贯通孔的形状即可，也可以是圆形以外的形状。
作为圆形以外的第一贯通孔和第二贯通孔的形状，例如可以举出多边形(也包含正多边形等)、椭圆形等。
第一贯通孔和第二贯通孔的直径根据细胞培养用装置的厚度(即，框部件的高度)而适当地调整即可，例如能够采用10μm以上且1000μm以下。
例如，在图1和图2A～2C所示的带吸引管细胞密封用装置中，例示了经由粘接剂层粘接多孔质膜和框部件的方法，但是也可以通过其它接合方法来接合多孔质膜和框部件。
作为经由粘接剂层的粘接方法以外的多孔质膜和框部件的接合方法，具体而言，例如可以举出：使用热封器和热板、超声波、激光仪等通过热熔接接合的方法、通过制作榫和榫眼从而接合的榫接的方法等，但不限于此。作为榫接的方法，例如可以举出：带单榫主体、带双榫主体、带三榫主体、带四榫主体、带小根、面腰榫、两张榫、两段榫等。
并且，可以使用这些接合方法中的一种，也可以组合两种以上。
例如，在图1和图2A～2C所示的带吸引管细胞密封用装置中，框部件10b能够具有支承体。框部件10b具有支承体，从而，例如，通过将密封有细胞的细胞密封用装置10固定到大一圈的容器中，从而能够在气相中培养细胞。并且，框部件10b具有支承体，从而，例如使密封有细胞的细胞密封用装置10能够在培养液中通过浮力浮起。并且，图2A～2C所示的细胞密封用装置10那样的具有顶面侧位的多孔质膜10a-1和底面侧的多孔质膜10a-2的情况，也能够设置为顶面与空气接触，底面与培养液接触，因此，能够在气相和液相中培养细胞。
并且，支承体可以是固定于框部件10b的，也可以是可拆卸的。
并且，在本实施方式的带吸引管细胞密封用装置中，各构成(多孔质膜、框部件、吸引管等)的大小和形状能够根据目的而任意地调节。
下面，关于本实施方式的带吸引管细胞密封用装置包含的各个构成详细地进行说明。
＜细胞密封用装置＞
细胞密封用装置在顶面和底面中的至少任意一个上具有多孔质膜、以及在侧面具有框部件。
细胞密封用装置的内部容积只要是能够注入悬浮在培养液中的多细胞，并能够构建在分析细胞的活性的试验等体外试验类型中使用的多细胞结构体的程度的小尺度即可。具体而言，例如，优选为10mL以下，更优选为10μL以上且5mL以下，进一步优选为15μL以上且2mL以下，尤其优选为20μL以上且1mL以下。通过内部容积为上述上限值以下，由此，氧气和培养液的营养成分被充分地供给，能够长期高效地培养细胞。并且，通过内部容积是上述下限值以上，由此，能够获得足够在体外试验系统中使用的细胞数量和细胞密度的细胞。
[多孔质膜]
在本说明书中，“多孔质膜”意为具有多个细孔的膜，也包含具有空隙的膜、具有细孔和空隙的膜。
作为本实施方式的细胞密封用装置使用的多孔质膜，只要是具有密封在内部的细胞不透过到外部的程度的孔的膜即可，没有特别的限定。作为多孔质膜，例如可以举出：滤纸、半透膜(例如、超滤膜等)、无纺布、纱布样网布、各种薄膜过滤器等，但不限于此。
并且，作为多孔质膜的细孔的尺寸，能够设为例如0.01μm以上且1500μm以下，能够设为例如0.01μm以上且1.0μm以下，以及能够设为例如0.01μm以上且0.45μm以下。所述孔的大小根据密封在内部的细胞或后述的小生命个体的大小而适当地选择即可。
多孔质膜的厚度虽然没有特殊限制，但是优选为1μm以上且1000μm以下，更优选为1μm以上且500μm以下，进一步优选为5μm以上且300μm以下，尤其优选为10μm以上且200μm以下。通过多孔质膜的厚度在上述范围内，由此，能够成为可将细胞注入细胞密封用装置内并进行培养的强度。并且，在多孔质膜是半透膜的情况下，通过其厚度在上述范围内，由此，能够将本实施方式的细胞密封用装置作为医疗用细胞移植装置绝佳地使用。
这里，“多孔质膜的厚度”意为多孔质膜整体的厚度，例如，由多层构成的多孔质膜的厚度意为构成多孔质膜的全部的层的总厚度。
其中，本实施方式中的多孔质膜优选为各种薄膜过滤器。由于薄膜过滤器的细孔的尺寸相对较大，因此，虽然不具有液密性，但是氧气透过量较多，能够使密封在内部的细胞高效地增殖。
在顶面和底面中的任意一个的多孔质膜是薄膜过滤器等0.1μm程度以上的细孔的情况下，如图2B和图2C所示的带吸引管细胞密封用装置300和400所示，优选具有后述的具有气密性的膜的构成。这是为了防止因多孔质膜的细孔大到0.1μm程度以上使细胞密封用装置内部不但不能保证气密性而且也不能保证液密性，细胞悬浊液的吸引变得困难。在顶面和底面的任意一个的多孔质膜是薄膜过滤器等0.1μm程度以上的细孔的情况下，通过具有具有气密性的膜，从而一定程度确保细胞密封用装置内部的气密性，能够容易地吸引细胞悬浊液。
例如，在多孔质膜是薄膜过滤器等0.45μm程度以下的细孔，并且将密封有细胞的本实施方式的细胞密封用装置放入包含培养液的容器内的情况下，细胞密封用装置内的细胞不能透过到装置的外部。另一方面，能够使溶解到培养液中的营养成分透过到细胞密封用装置的内部，并且，使包含有溶解到培养液中的代谢物的细胞产物透过到细胞密封用装置的外部。因此，本实施方式的细胞密封用装置能够用于细胞的长期培养。
或者，其中，本实施方式中的多孔质膜优选为在气相中具有液密性，并且在液相中具有半透性的半透膜。由于半透膜在气相中具有液密性，因此，例如在细胞密封用装置的内部包含培养液等液体的情况下，在气相中，液体不泄漏，能够在内部保存。该液密性是由半透膜上的表面张力产生的。另一方面，由于能够通过气体，因此，在内部包含液体的情况下，内部的液体随时间蒸发。
在多孔质膜是半透膜，并具有液密性的情况下，如图2A所示的带吸引管细胞密封用装置200那样，即使是不具有后述的具有气密性的膜的构成，由于细胞密封用装置内部具有一定程度的气密性，因此，也能够容易地吸引细胞悬浊液。
并且，由于用于细胞密封用装置的半透膜在液相中具有半透性，因此，例如，在将密封有细胞的本实施方式的细胞密封用装置放入包含培养液的容器内的情况下，细胞密封用装置内的细胞不透过到装置的外部，另一方面，使溶解到培养液中的营养成分透过细胞密封用装置的内部，并且能够使包含有溶解到培养液中的代谢物的细胞产物透过到细胞密封用装置的外部。因此，本实施方式的细胞密封用装置能够用于细胞的长期培养。
更具体而言，用于本实施方式的细胞密封用装置的半透膜例如是能够透过分子量大约1,000,000以下的高分子化合物的膜即可，例如是能够透过分子量大约200,000以下的分子化合物的膜即可。
在本说明书中，“液密性”意为液体不泄漏的状态。
并且，在本说明书中，“半透性”意为仅一定的分子量以下的分子或离子能够透过的性质，“半透膜”是具有该性質的膜。
作为所述多孔质膜的材料，只要是没有细胞毒性的材料即可，可以是天然高分子化合物，也可以是合成高分子化合物。并且，在所述多孔质膜是半透膜的情况下，作为其材料，优选包含具有生物体相容性的材料，更优选包含具有生物体吸收性的材料。在本实施方式的细胞密封用装置的整体是由具有生物体相容性或生物体吸收性的半透膜构成的情况下，能够作为医疗用细胞移植装置活用。
另外，在本说明书中，“生物体相容性”意为表示生物体组织与材料之间的相容性的评价基准。并且，“具有生物体相容性”意为，材料本身不具有毒性，不具有源于内毒素等微生物的成分，不会物理刺激生物体组织，即使与构成生物体组织的蛋白质和细胞等相互作用也不会被拒绝的状态。并且，在本说明书中，“生物体吸收性”意为，材料在生物体内保持其形状或物性一定时间，然后可通过分解或被吸收从而从导入到生物体内的导入部分消失的性质。
作为所述天然高分子化合物，例如可以举出：凝胶化的来源于细胞外基质的成分、多糖类、甲壳质、聚(3-羟基烷酸酯)(尤其，聚(β-羟基丁酸酯)以及聚(3-羟基辛酸酯))、聚(3-羟基脂肪酸)、纤维蛋白、琼脂、琼脂糖等，但不限于此。作为多糖类，例如可以举出：海藻酸酯、纤维素、葡聚糖、普鲁兰(pullulane)、聚透明质酸以及它们的衍生物等。
所述纤维素中也包括通过合成而改质的纤维素，例如可以举出纤维素衍生物等。作为纤维素衍生物，具体而言，例如可以举出：烷基纤维素、羟基烷基纤维素、纤维素醚、纤维素酯、硝基纤维素、壳聚糖等。作为更加具体的纤维素衍生物，例如可以举出：甲基纤维素、乙基纤维素、羟基丙基纤维素、羟基丙基甲基纤维素、羟基丁基甲基纤维素、醋酸纤维素、丙酸纤维素、醋酸丁酸纤维素、邻苯二甲酸纤维素、羧基甲基纤维素、三乙酸纤维素、纤维素硫酸钠盐等。
其中，作为所述天然高分子化合物，由于具有优异的保水性，因此，优选是凝胶化的来源于细胞外基质的成分、纤维蛋白、琼脂或琼脂糖。
作为凝胶化的来源于细胞外基质的成分，例如可以举出：由胶原蛋白(I型、II型、III型、V型、XI型等)、小鼠EHS肿瘤提取物(包含IV型胶原蛋白、层粘蛋白、硫酸肝素蛋白聚糖等)再构成的基底膜成分(商品名：基质凝胶)、糖胺聚糖、透明质酸、蛋白聚糖、明胶等，但不限于此。能够选择最适合各种凝胶化的盐类等成分、及其浓度、pH等，来制作多孔质膜(尤其是半透膜)。并且，通过组合原料，能够得到模仿了各种生物体内组织的多孔质膜(尤其是半透膜)。
作为所述合成高分子化合物，例如可以举出：聚磷腈、聚(乙烯醇)、聚酰胺(例如、尼龙等)、聚酯酰胺、聚(氨基酸)、聚酐、聚砜、聚碳酸酯、聚丙烯酸酯(丙烯酸树脂)、聚烯(例如、聚乙烯等)、聚丙烯酰胺、聚亚烷基二醇(例如、聚乙烯二醇等)、聚环氧烷(例如、聚环氧乙烷等)、聚对苯二甲酸亚烷基酯(例如、聚对苯二甲酸乙二醇酯等)、聚原酸酯、聚乙烯醚、聚乙烯酯、聚卤乙烯、聚乙烯吡咯烷酮、聚酯、聚硅氧烷、聚氨酯、聚羟基酸(例如、聚乳酸、聚乙醇酸交酯等)、聚(羟基酪酸)、聚(羟基吉草酸)、聚[丙交酯-co-(ε-己内酯)]、聚[乙交酯-co-(ε-己内酯)]等)、聚(羟基烷酸酯)、以及它们的共聚物等，但不限于此。
作为所述聚丙烯酸酯(丙烯酸树脂)，更具体而言，例如可以举出：聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚(甲基丙烯酸乙酯)、聚(甲基丙烯酸叔丁酯)、聚(甲基丙烯酸异丁酯)、聚(甲基丙烯酸己酯)、聚(甲基丙烯酸异癸酯)、聚(甲基丙烯酸月桂酯)、聚(甲基丙烯酸苯酯)、聚(丙烯酸甲酯)、聚(丙烯酸异丙酯)、聚(丙烯酸异丁酯)、聚(丙烯酸十八烷酯)等。
其中，作为所述合成高分子化合物，由于具有生物体吸收性，因此优选为聚羟基酸(例如、聚乳酸、聚乙醇酸交酯等)、聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚(羟基酪酸)、聚(羟基吉草酸)、聚[丙交酯-co-(ε-己内酯)]、聚[乙交酯-co-(ε-己内酯)]等)、聚(羟基烷酸酯)、聚原酸酯、或者它们的共聚物。
多孔质膜的材料可以由上述例示的材料中的一种构成，也可以由两种以上构成。并且，多孔质膜的材料可以由天然高分子化合物或合成高分子化合物中的任意一个构成，也可以由天然高分子化合物和合成高分子化合物两者构成。
并且，当多孔质膜由上述例示的材料中的两种以上构成时，多孔质膜可以由上述例示的材料的混合物构成。或者，多孔质膜也可以层叠两层以上由一种材料构成的多孔质膜而成，并且构成各多孔质膜的材料彼此不同。
其中，在本实施方式中的多孔质膜为薄膜过滤器的情况下，作为其材料，优选合成高分子化合物，更优选聚酰胺，进一步优选尼龙。
其中，在本实施方式中的多孔质膜为半透膜的情况下，作为其材料，优选天然高分子化合物，更优选凝胶化的来源于细胞外基质的成分，进一步优选胶原蛋白。并且，在胶原蛋白中，作为更优选的原料，能够例示出原生胶原蛋白或去端胶原蛋白。
在本实施方式中的多孔质膜的材料是来源于细胞外基质的成分的情况下，优选每单位面积1cm2的多孔质膜(尤其是半透膜)含有0.1mg以上且10.0mg以下的来源于细胞外基质的成分，更优选含有0.5mg以上且5.0mg以下的来源于细胞外基质的成分。尤其，在来源于细胞外基质的成分是去端胶原蛋白的情况下，优选每单位面积1cm2多孔质膜(尤其是半透膜)含有0.5mg以上且10.0mg以下的去端胶原蛋白，更优选每1cm2含有2.5mg以上且5.0mg以下的去端胶原蛋白。
通过使多孔质膜(尤其是半透膜)中的来源于细胞外基质的成分(尤其是去端胶原蛋白)的含量在上述范围内，能够将细胞注入细胞密封用装置内并成为能够进行培养的强度。
另外，“该膜的每单位面积1cm2的质量”是指以膜的厚度为任意，该材料片每1cm2中含有的成分的质量。
并且，本实施方式中的多孔质膜在使用时不会破裂，在实用上非常优异。特别是在用于医疗用细胞移植装置的情况下，多孔质膜(尤其是半透膜)的强度具有能够承受移植操作的强度。
(多孔质膜的制造方法)
1.使用合成高分子化合物的多孔质膜的制造方法
例如，在多孔质膜的构成材料是所述合成高分子化合物的情况下，能够使用公知的方法(例如，参照专利文献3等)来制造。
作为使用所述合成高分子化合物的多孔质膜的制造方法，更具体而言，首先，调制将合成高分子化合物溶解于有机溶剂中的制膜原液。
作为有机溶剂，只要是针对合成高分子化合物的良好溶剂即可，例如可以举出：四氢呋喃、二恶烷、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、N-甲基-2-吡咯烷酮等，但不限于此。
合成高分子化合物与有机溶剂的混合比例可以根据所使用的合成高分子化合物和有机溶剂的种类而适当地调整，例如，合成高分子化合物为15质量％、有机溶剂为85质量％即可。
并且，溶解时的有机溶剂的温度通常为30℃以上且100℃以下即可，优选为50℃以上且80℃以下。
接着，使用从例如喷嘴中喷出已经制备的制膜原液的方法等，使其在凝固液中凝固，从而制作出规定的形状的多孔质膜。
作为凝固液，优选使用有机溶剂和水的混合液。作为用于凝固液的有机溶剂，能够使用与作为用于溶解合成高分子化合物的有机溶剂所例示的有机溶剂相同的溶剂。另外，用于凝固液的有机溶剂可以是与用于溶解合成高分子化合物的有机溶剂相同的种类，也可以是不同的种类。
并且，凝固液中的水的比例例如为30质量％以上且80质量％以下即可。
此外，出于调整凝固速度的目的，可以在凝固液中添加例如甲醇、乙醇、异丙醇、甘油等醇类或乙二醇、丙二醇等二醇类。
得到的多孔质膜用蒸馏水等清洗，此外，通过紫外线照射等进行灭菌然后使用即可。
2.使用水凝胶的多孔质膜的制造方法
并且，例如，在多孔质膜的构成材料是水凝胶的情况下，能够使用公知的方法(例如，参照专利文献4～6等)来制造。
另外，在本说明书中，“水凝胶”表示高分子化合物通过化学键形成网眼结构，在该网眼中保有大量的水的物质。作为水凝胶，更具体而言，意为在天然物高分子化合物或合成高分子化合物的人工原材料中导入交联而使其凝胶化的物质。
水凝胶例如包含：上述的凝胶化的来源于细胞外基质的成分、纤维蛋白、琼脂、琼脂糖、纤维素等天然高分子化合物、以及聚丙烯酰胺、聚乙烯醇、聚环氧乙烷、聚(II-甲基丙烯酸羟乙酯)(poly(II-hydroxyethylmethacrylate))/聚己内酯(polycaprolactone)等合成高分子化合物。
作为使用水凝胶的多孔质膜的制造方法，更具体而言，首先，在铸模上配置未完全凝胶化的状态的水凝胶(以下，有时称为“溶胶”)，然后诱导凝胶化。
在溶胶是胶原蛋白溶胶的情况下，使用使用生理盐水、磷酸盐缓冲盐水PBS(Phosphate Buffered Saline)、汉克斯平衡盐类溶液(Hank's Balanced Salt Solution：HBSS)、基础培养液、无血清培养液、含血清培养液等而制备出的溶胶作为胶原蛋白溶胶具有最合适的盐浓度的溶胶即可。并且，胶原蛋白凝胶化时的溶液的pH只要是例如6以上且8以下即可。
尤其是在使用无血清培养液的情况下，由于能够避免多孔质膜中含有其他动物血清成分中所含的不适于移植的物质(例如抗原、病原因子等)，因此能够得到适合用于医疗用细胞移植装置的多孔质膜(尤其是半透膜)。
并且，胶原蛋白溶胶的制备在例如4℃左右进行即可。之后，凝胶化时的保温只要是比所使用的胶原蛋白的依存于动物种类的胶原蛋白的变性温度低的温度即可，通常通过在20℃以上且37℃以下的温度下保温，能够在几分钟到几小时内进行凝胶化。
并且，用于制作多孔质膜的胶原蛋白溶胶的浓度优选为0.1％以上且1.0％以下，更优选为0.2％以上且0.6％以下。通过使胶原蛋白溶胶的浓度为上述下限值以上，从而凝胶化不会过弱，并且，通过使胶原蛋白溶胶的浓度为上述上限值以下，从而能够得到由均匀的胶原蛋白凝胶构成的多孔质膜(尤其是半透膜)。
此外，也可以将得到的水凝胶干燥，使其成为水凝胶干燥体。通过使水凝胶干燥，能够完全地去除水凝胶内的自由水，进而推进结合水的部分去除。
此外，也可以用PBS或使用的培养液等再水合得到的水凝胶干燥体，形成比特力凝胶(注册商标)。
该玻璃化工序(在完全除去水凝胶内的自由水后，推进结合水的部分去除的工序)的期间越长，在再水合时能够得到透明度、强度越优异的比特力凝胶(注册商标)。另外，也能够根据需要用PBS等清洗短期玻璃化后再水合得到的比特力凝胶(注册商标)，再次玻璃化。
作为干燥方法，例如能够使用风干、在密闭容器内干燥(使容器内的空气循环，始终供给干燥空气)、在放置有二氧化硅凝胶的环境下干燥等各种方法。例如，作为风干的方法，能够例示在10℃、40％湿度下保持无菌的细胞培养箱中干燥2天，或者在无菌状态的洁净工作台内室温干燥一昼夜等方法。
另外，在本说明书中，“比特力凝胶(注册商标)”是指将以往的水凝胶玻璃化(vitrification)后再水合而得到的处于稳定状态的凝胶，由本发明人命名为“比特力凝胶(vitrigel)(注册商标)”。
并且，在本说明书中，在详细地说明由水凝胶构成的多孔质膜的制造工序时，对于紧接在该玻璃化工序之后且未经过再水合工序的水凝胶的干燥体，只作为“水凝胶干燥体”。然后，将在该玻璃化工序之后经过再水合的工序得到的凝胶作为“比特力凝胶(注册商标)”并区别表示。并且，将使该比特力凝胶(注册商标)玻璃化而得到的干燥体作为“比特力凝胶(注册商标)干燥体”。并且，将对比特力凝胶(注册商标)干燥体实施紫外线照射工序而得到的物质作为“实施了紫外线照射处理的比特力凝胶(注册商标)干燥体”。并且，将对“实施了紫外线照射处理的比特力凝胶(注册商标)干燥体”实施再水合的工序而得到的凝胶作为“比特力凝胶(注册商标)材料”。并且，将使比特力凝胶(注册商标)材料玻璃化而得到的干燥体作为“比特力凝胶(注册商标)材料的干燥体”。因此，“比特力凝胶(注册商标)”和“比特力凝胶(注册商标)材料”是水合物。
也就是说，也可以通过将得到的比特力凝胶(注册商标)再次干燥，从而使其再次玻璃化，作为比特力凝胶(注册商标)干燥体。
作为干燥方法，可以举出与上述例示的方法相同的方法。
并且，也可以对得到的比特力凝胶(注册商标)干燥体照射紫外线，作为“实施了紫外线照射处理的比特力凝胶(注册商标)干燥体”。
在紫外线的照射中能够使用公知的紫外线照射装置。
关于比特力凝胶(注册商标)干燥体的紫外线的照射能量，每单位面积的总照射量优选为0.1mJ/cm2以上且6000mJ/cm2以下，更优选为10mJ/cm2以上且4000mJ/cm2以下，进一步优选为100mJ/cm2以上且3000mJ/cm2以下。通过使总照射量在上述范围内，能够使在接下来的再水合工序中得到的比特力凝胶(注册商标)材料的透明度和强度特别令人满意。
并且，对比特力凝胶(注册商标)干燥体的紫外线照射可以反复进行多次。在对比特力凝胶(注册商标)干燥体反复照射紫外线的情况下，优选在进行了第1次紫外线照射之后，对实施了紫外线照射处理的比特力凝胶(注册商标)干燥体进行再水合和再玻璃化的工序，然后再对再玻璃化后的比特力凝胶(注册商标)材料的干燥体进行第2次以后的紫外线照射。
当每单位面积的紫外线总照射量相同时，通过将对比特力凝胶(注册商标)干燥体的紫外线照射分开多次反复进行，从而能够进一步提高在接下来的再水合工序中得到的比特力凝胶(注册商标)材料的透明度和强度。并且，分开的次数越多越好。例如，当对比特力凝胶(注册商标)干燥体的紫外线照射的每单位面积的总照射量在1000mJ/cm2以上且4000mJ/cm2以下的范围内时，优选在该范围内的照射次数为2次以上且10次以下，更优选为2次以上且6次以下。
并且，在反复对比特力凝胶(注册商标)干燥体照射紫外线的情况下，也可以将紫外线的照射部位分为比特力凝胶(注册商标)干燥体的一个表面和另一个表面(上表面和下表面)来进行照射，将其总照射量作为对比特力凝胶(注册商标)干燥体的每单位面积的紫外线总照射量。
通过对比特力凝胶(注册商标)干燥体进行紫外线的照射，从而在接下来的再水合工序中得到的比特力凝胶(注册商标)材料的强度和透明度提高，通常认为其是因为比特力凝胶(注册商标)材料内的高分子化合物彼此通过紫外线交联。也就是说，通常认为通过该操作，能够使比特力凝胶(注册商标)材料维持高透明度和强度。
此外，也可以通过用PBS或将使用的培养液等再水合已得到的实施了紫外线照射处理的比特力凝胶(注册商标)干燥体，作为比特力凝胶(注册商标)材料。
此外，也可以通过将已得到的比特力凝胶(注册商标)材料干燥，从而使其再玻璃化，作为比特力凝胶(注册商标)材料的干燥体。
作为干燥方法，可以举出与上述例示的方法相同的方法。
[框部件]
在细胞密封用装置中，构成多孔质膜以外的部分的部件、即框部件能够采用具有液密性的部件。
并且，框部件可以是具有透气性的部件，也可以是不具有透气性的部件。
在框部件是具有透气性的部件的情况下，氧气透过系数例如可以是100cm3/m2·24hr·atm以上且5000cm3/m2·24hr·atm以下，例如可以是1000cm3/m2·24hr·atm以上且3000cm3/m2·24hr·atm以下，例如可以是1200cm3/m2·24hr·atm以上且2500cm3/m2·24hr·atm以下。此外，二氧化碳透过系数例如可以是1000cm3/m2·24hr·atm以上且20000cm3/m2·24hr·atm以下，例如可以是3000cm3/m2·24hr·atm以上且15000cm3/m2·24hr·atm以下，例如可以是5000cm3/m2·24hr·atm以上且10000cm3/m2·24hr·atm以下。
并且，在框部件是不具有透气性的部件的情况下，氧气透过系数例如可以是100cm3/m2·24hr·atm以下，例如可以是50cm3/m2·24hr·atm以下。此外，二氧化碳透过系数例如可以是1000cm3/m2·24hr·atm以下，例如可以是500cm3/m2·24hr·atm以下。
在细胞密封用装置中，作为框部件的材料，只要是适于细胞的培养的材料即可。作为构成框部件的材料，例如可以举出金属材料、玻璃材料、弹性体材料、包含树枝状聚合物的塑料、共聚物等，但不限于此。
作为金属材料，例如可以举出不锈钢等。
作为玻璃材料，例如可以举出苏打石灰玻璃、派热克斯(注册商标)玻璃、vycol(注册商标)玻璃、石英玻璃等。
作为弹性体材料，例如可以举出：聚氨酯橡胶、丁腈橡胶、硅橡胶、硅树脂(例如聚二甲基硅氧烷)、氟橡胶、丙酸橡胶、异戊二烯橡胶、乙丙橡胶、氯磺化聚乙烯橡胶、表氯醇橡胶、氯丁橡胶、丁苯橡胶、丁二烯橡胶、聚异丁烯橡胶等。
作为树枝状聚合物，例如可以举出：聚(氯乙烯)、聚(乙烯醇)、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚(乙酸乙烯酯-共-马来酸酐)、聚(二甲基硅氧烷)单甲基丙烯酸酯、环状烯烃聚合物、氟碳聚合物、聚苯乙烯、聚丙烯、聚乙烯亚胺等。
作为共聚物，例如可以举出：聚(乙酸乙烯酯-共-马来酸酐)、聚(苯乙烯-共-马来酸酐)、聚(乙烯-共-丙烯酸)、以及它们的衍生物等。
框部件的材料可以由上述例示的材料中的一种构成，也可以由两种以上构成。
并且，在框部件由上述例示的材料中的两种以上构成的情况下，框部件可以由上述例示的材料的混合物构成。或者，框部件也可以是是组合由一种材料构成的框部件而形成的，并且构成各框部件的材料彼此不同。
其中，作为框部件的材料，优选含有弹性体材料、更优选含有硅酮树脂、进一步优选含有聚二甲基硅氧烷。
并且，框部件优选仅由弹性体材料构成，或者由包含树枝状聚合物的塑料与弹性体材料的组合构成。在框部件由塑料与弹性体材料的组合构成的情况下，优选供吸引管插入的部分由弹性体材料构成，其他部分由包含树枝状聚合物的塑料构成。通过上述构成，能够简便地制造本实施方式的带吸引管细胞密封用装置。
并且，框部件的形状可以根据细胞密封用装置的整体形状和构成细胞密封用装置的部分来适当地选择。
并且，框部件也可以实施用于识别各个细胞密封用装置的设计(例如、着色、印字等)。
(框部件的制造方法)
框部件能够根据所使用的材料采用公知的方法来制造。
例如，作为使用弹性体材料或塑料作为框部件的材料时的制造方法，可以举出压缩成形法、注射成形法、挤出成形法等，但不限于此。
并且，例如，作为使用玻璃材料作为框部件的材料时的制造方法，例如可以举出液滴成形法、倒扣法、溢出法、浮动法、吹塑成形法、冲压成形法等，但不限于此。
[粘接剂层]
各粘接剂层的厚度能够采用例如0.1μm以上且1000μm以下。
这里，“各粘接剂层的厚度”意为各粘接剂层整体的厚度，例如，由多层构成的第一粘接剂层的厚度意为构成第一粘接剂层的全部层的总厚度。
作为粘接剂层的材料，只要没有细胞毒性即可。并且，粘接剂层的材料能够根据作为粘接对象的多孔质膜、框部件以及具有气密性的膜的各材料而适当地选择。
并且，具有气密性的膜通过使用“对具有气密性的膜的粘接性低、并且对多孔质膜的粘接性高的粘接剂”、或者“对具有气密性的膜的粘接性高、并且对多孔质膜的粘接性低的粘接剂”，从而相对于多孔质膜的外表面可装卸。
例如，在多孔质膜是薄膜过滤器，并且具有气密性的膜是涂硅的聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)膜的情况下，通过在薄膜过滤器与PET膜的涂硅面的粘接中使用薄的发泡体基材防水双面胶带(Nitto Denko Corporation、No.57210B、Lot No.8328702、厚度：0.1mm)，从而使作为具有气密性的膜的涂硅的PET膜相对于薄膜过滤器可装卸。另外，在这种情况下，在装卸涂硅的PET膜时，薄发泡体基材防水双面胶带的粘接剂会露出到薄膜过滤器的外表面。在后述的实施例中，示出了即使在装卸PET膜时薄型发泡体基材防水双面胶带的粘接剂也不会露出到薄膜过滤器的外表面的使用例。
作为粘接剂层的材料，具体而言，例如可以举出合成化合物的粘接剂、天然化合物的粘接剂、双面胶带等，但不限于此。
作为合成化合物的粘接剂，例如可以举出：氨基甲酸酯系粘接剂、氰基丙烯酸酯系粘接剂、聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)、磷酸钙系粘接剂、树脂系水泥等。
作为天然化合物的粘接剂，例如可以举出纤维蛋白糊、明胶糊等。
作为双面胶带，优选使用在医疗用途中所使用的双面胶带等。
作为双面胶带，例如可以举出是在支承胶带的双面具有层叠有粘合剂的结构的双面胶带等。
作为粘合剂，例如可以举出橡胶系、丙烯酸系、聚氨酯系、硅酮系、乙烯基醚系等公知的粘合剂。
作为双面胶带，更具体而言，例如可以举出：3M日本公司制的皮肤粘贴用双面胶带(产品编号：1510、1504XL、1524等)、日东电工公司制的皮肤用双面粘合胶带(产品编号：ST502、ST534等)、米其邦(nichiban)医药公司制的医疗用双面胶带(产品编号：#1088、#1022、#1010、#809SP、#414125、#1010R、#1088R、#8810R、#2110R等)、DIC公司制的薄型发泡体基材双面粘接胶带(产品编号：#84010、#84015、#84020等)等。
另外，通过将白色或黑色等着色颜色不同的双面粘接胶带(例如、DIC公司制的#84010WHITE和#84010BLACK等)分别用于框部件的顶面和底面，从而在多孔质膜10a是透明或半透明的情况下，能够通过目视而容易地区分出顶面侧和底面侧。
粘接剂层可以由上述例示的材料中的一种构成，也可以由两种以上构成。
并且，在粘接剂层由上述例示的材料中的两种以上构成的情况下，粘接剂层也可以由上述例示的材料的混合物构成。或者，粘接剂层也可以层叠两层以上由一种材料构成的粘接剂层而成，并且构成各粘接剂层的材料彼此不同。
[具有气密性的膜]
具有气密性的膜的厚度能够为例如10μm以上且1000μm以下，能够为例如30μm以上且500μm以下，能够为例如50μm以上且200μm以下。
这里，“具有气密性的膜的厚度”意为具有气密性的膜整体的厚度，例如，由多层构成的具有气密性的膜的厚度意为构成具有气密性的膜的全部的层的总厚度。
作为具有气密性的膜的材料，只要是具有气密性的材料即可。
作为具有气密性的膜的材料，具体而言，可以是有机材料，也可以是无机材料。
作为有机材料，例如可以举出聚酰胺(例如、尼龙等)、聚烯烃系树脂、聚酯系树脂、聚苯乙烯系树脂、聚碳酸酯、聚酰胺系树脂、硅酮树脂等，没有特别限定。
作为无机材料，例如可以举出陶瓷、玻璃等，没有特别限定。
具有气密性的膜可以由上述例示的材料中的一种构成，也可以由两种以上构成。
并且，在具有气密性的膜由上述例示的材料中的两种以上构成的情况下，具有气密性的膜可以由上述例示的材料的混合物构成。或者，具有气密性的膜也可以通过层叠两层以上由一种材料构成的具有气密性的膜而成，并且构成各具有气密性的膜的材料彼此不同。
(具有气密性的膜的制造方法)
具有气密性的膜能够根据使用的材料，使用公知的方法来制造。
例如，作为使用有机材料作为具有气密性的膜的材料时的制造方法，例如可以举出压缩成形法、压延成形法、注射成形法、挤出成形法和吹胀成形法，但不限于此。
并且，例如，作为使用玻璃作为具有气密性的膜的材料时的制造方法，例如可以举出与上述的(部件的制造方法)中例示的方法相同的方法。
并且，例如，作为使用陶瓷作为具有气密性的膜的材料时的制造方法，例如可以举出：干式成形法(例如、模具成形法、冷静水压成形法、热压法、热静水成形法等)、塑性成形法(例如、轮制成型法、挤出成形法、注射成形法)、浇铸成形法(例如，泥浆浇注法、加压浇注法、旋转浇注法等)、胶带成形法等，但不限于此。
[支承体]
作为支承体的材料，可以是有机材料，也可以是无机材料。作为有机材料和无机材料，可以举出与上述的“具有气密性的膜”中例示的材料相同的材料。
并且，支承体的形状例如可以举出片状、棒状等，但不限于此。
并且，也可以对支承体实施用于识别各个细胞密封用装置的设计(例如着色、印字等)。
(支承体的制造方法)
支承体能够根据所使用的材料采用公知的方法来制造。作为具体的制造方法，可以举出与上述“具有气密性的膜的制造方法”中例示的方法相同的方法。
＜吸引管＞
吸引管具有第一管状部件和第二管状部件。第一管状部件和第二管状部件的两端部分别开口。
并且，第一管状部件和第二管状部件的一个端部分别与框部件的第一贯通孔和第二贯通孔连通。
并且，第一管状部件的另一个端部具有与吸引单元连结的连结机构。
作为吸引单元，例如可以举出移液管、注射器、吸移管等。
作为连结机构，例如可以举出：在吸引单元是移液管的情况下，第一管状部件的另一个端部的内部的形状与移液管的前端部的形状一致等。由此，能够通过第一管状部件的另一个端部将本实施方式的带吸引管细胞密封用装置与移液管的前端部连结。
并且，该连结机构可以具有过滤器，用以防止异物混入到吸引单元中。作为过滤器，可以举出气溶胶抗蚀剂芯片或超滤器芯片所具备的公知的过滤器等
作为吸引管的材料，没有特别限定，例如，在作为医疗用细胞移植装置活用细胞密封用装置的情况下，作为所述吸引管的材料，优选是具有生物体相容性的材料。作为具有所述生物体相容性的材料，可以举出在上述的“多孔质膜”中例示的天然高分子化合物和合成高分子化合物。
并且，在将细胞密封用装置用于构建在分析细胞活性的试验等体外试验系统中使用的多细胞结构体的情况下，可以是具有上述生物体相容性的材料，或者也可以是适于细胞培养的材料。作为具有所述生物体相容性的材料，可以举出在上述的“多孔质膜”中例示的天然高分子化合物和合成高分子化合物。作为适于所述细胞的培养的材料，可以举出与上述“部件”中例示的材料相同的材料。
并且，作为适合用作吸引管的物体，更具体而言，例如可以举出凝胶加载芯片、硅化芯片等。
(吸引管的制造方法)
吸引管能够根据所使用的材料使用公知的方法来制造。
作为具体的制造方法，使用在上述的“多孔质膜的制造方法”和“部件的制造方法”中例示的方法相同的方法，以成为管状的方式成形即可。
《带吸引管细胞密封用装置的制造方法》
本实施方式的细胞密封用装置能够通过组装多孔质膜、框部件以及吸引管使之成为所希望形状的方式来制造。并且，根据需要，附加支承体和具有气密性的膜即可。
多孔质膜、框部件、支承体、具有气密性的膜以及吸引管各自的制造方法如上所做说明。
更具体而言，以下对图2C所示的本实施方式的带吸引管细胞密封用装置的制造方法详细地进行说明。
首先，准备所希望的大小的框部件10b。接着，使用注射针等在框部件10b的外周面形成第一贯通孔和第二贯通孔，分别插入第一管状部件20a和第二管状部件20b。接着，使用粘接剂或双面胶带，使第一粘接剂层11a和第二粘接剂层11b形成在框部件10b的顶面和底面上。
接着，准备与框部件10b的顶面和底面相同大小、或比框部件10b的顶面和底面大一圈的两张多孔质膜(10a-1和10a-2)。此时，两张多孔质膜(10a-1和10a-2)彼此可以由相同的材料构成，也可以由不同的材料构成。
接着，以使两张多孔质膜(10a-1和10a-2)分别成为部件10b的顶面和底面的方式经由第一粘接剂层11a和第二粘接剂层11b粘接。
接着，准备与多孔质膜(10a-1和10a-2)相同大小、或比多孔质膜(10a-1和10a-2)大一圈的两张具有气密性的膜(12a和12b)。此时，两张具有气密性的膜(12a和12b)彼此可以由相同的材料构成，也可以由不同的材料构成。
接着，使用粘接剂或双面胶带，使第三粘接剂层11c和第四粘接剂层11d分别形成在准备好的两张具有气密性的膜(12a和12b)上。
接着，使两张具有气密性的膜(12a和12b)分别通过第三粘接剂层11c和第四粘接剂层11d粘接在粘贴于顶面以及底面的多孔质膜(10a-1和10a-2)上。
接着，根据需要，通过实施利用UV照射等的杀菌处理或者利用γ射线照射等的灭菌处理，调整统一多孔质膜10a、框部件10b、第一管状部件20a或者第二管状部件20b的大小，从而能够得到带吸引管细胞密封用装置400。
并且，在细胞密封用装置具有支承体的情况下，可以预先使支承体与框部件10b接合。或者，也可以使支承体与组装后的细胞密封用装置10接合。作为接合方法，可以通过与上述多孔质膜与框部件的接合方法相同的方法来固定，也可以使用固定件等可拆卸地安装。
《带吸引管细胞密封用装置组合》
本实施方式的带吸引管细胞密封用装置组合具有上述实施方式的带吸引管细胞密封用装置和支架。
根据本实施方式的带吸引管细胞密封用装置组合，能够高效地进行连续性的细胞密封用装置的制作。
图3是示出本实施方式的带吸引管细胞密封用装置组合的一例的立体图和侧视图。以下，一边参照图3一边对本实施方式的带吸引管细胞密封用装置组合的结构详细地进行说明。
图3所示的带吸引管细胞密封用装置组合A的多个带吸引管细胞密封用装置100以卡挂在支架110的U字型的卡止部111上的状态收纳。并且，例如，在支架110的盖在如图3的侧视图所示那样开闭的情况下，能够在将带吸引管细胞密封用装置收纳于支架110内的同时，与移液管等吸引单元连结。此外，通过在与吸引单元连结的状态下将带吸引管细胞密封用装置100向正面方向的斜上方提起，能够不损伤细胞密封用装置的多孔质膜地将其取出。因此，即使在连续性的细胞密封用装置的制作中，也能够高效地取出并使用带吸引管细胞密封用装置。
并且，本实施方式的带吸引管细胞密封用装置组合能够在多个带吸引管细胞密封用装置100收纳于支架的状态下，利用γ射线等进行灭菌。
＜支架＞
支架110具有用于收纳带吸引管细胞密封用装置100的卡止部111。卡止部111可以是如图3所示的U字型，也可以是其他的形状。其中，由于能够不损伤带吸引管细胞密封用装置100的多孔质膜地将其取出，因此卡止部111的形状优选为U字型。
支架能够使用通常的与收纳移液管芯片等公知的支架的材料相同的材料。
《细胞的密封方法》
本实施方式的细胞的密封方法是使用上述实施方式的带吸引管细胞密封用装置的方法。
根据本实施方式的密封方法，能够简便地将细胞密封到装置内。
在本实施方式的密封方法中，首先，使吸引单元经由第一管状部件的连结机构与带吸引管细胞密封用装置连结，使细胞的悬浊液吸引到上述实施方式的带吸引管细胞密封用装置内。
作为吸引单元，例如可以举出移液管、注射器、吸移管等。
作为成为密封对象的细胞，例如可以举出：哺乳动物细胞、鸟类细胞、爬虫类细胞、两栖类细胞、鱼类细胞等脊椎动物细胞；昆虫细胞、甲壳类细胞、软体动物细胞、原生动物细胞等无脊椎动物细胞；革兰氏阳性菌(例如芽孢杆菌属等)、革兰氏阴性菌(例如大肠杆菌等)等细菌；酵母、植物细胞以及由这些单一细胞或多个细胞构成的小生命个体等
作为所述小生命个体，例如可以举出：单细胞生物、微小甲壳类动物、涡虫(也包括细切后的再生涡虫)、陆生节肢动物的幼体、线形动物、植物的种子(尤其是发芽种子)、愈伤组织、原生质体、海洋微生物、仔稚鱼、仔稚贝等，但不限于此。作为单细胞生物，例如可以举出：阿米巴、草履虫、新月藻、羽纹硅藻、小球藻、眼虫、扁裸藻等。作为微小甲壳类动物，例如可以举出：水蚤、卤虫的幼体、桡足纲、贝虫亚纲类、鞘甲亚纲的幼体、掠虾亚纲的幼体、囊虾总目类的幼体、红虾总目类的幼体等。作为海洋微生物，例如可以举出海洋细菌、藻类等。作为海洋细菌，例如可以举出：属于弧菌属、假单胞菌属、黄单胞菌属、交替单胞菌属、黄杆菌属、噬纤维菌属、屈挠杆菌属等的细菌等。作为藻类，例如可以举出：蓝藻、隐芽植物藻、涡鞭毛藻、硅藻、针胞藻、金藻、定鞭藻、裸藻、葱绿藻、绿藻等。
例如，在使用本实施方式的细胞密封用装置培养发芽种子的情况下，细胞密封用装置的顶面具有能够供发芽后的芽贯穿的程度的硬度，并且由生物降解性材料构成，由此能够将装入装置内的发芽种子直接植入土壤中，使植物体生长。
另外，本说明书中的“生物降解性材料”意为具有被土壤中或水中的微生物等分解为无机物的性质的材料。
作为所述脊椎动物细胞(尤其是哺乳动物细胞)，例如可以举出：生殖细胞(精子、卵子等)、构成生物体的体细胞、干细胞、前驱细胞、从生物体中分离出来的癌(cancer)细胞、从生物体中分离出来获得永生化而在体外稳定维持的细胞(细胞株)、从生物体中分离出来并人为地进行了基因改变的细胞、从生物体中分离出来并人为地进行了核交换的细胞等，但不限于此。并且，也可以使用这些细胞的细胞块(球状体)。并且，也可以与细胞块同样地使用直接从生物体的正常组织或癌(cancer)组织中分离出的小的组织片。
作为构成生物体的体细胞，例如可以举出：从皮肤、肾脏、脾脏、肾上腺、肝脏、肺、卵巢、胰脏、子宫、胃、结肠、小肠、大肠、膀胱、前列腺、精巢、胸腺、肌肉、结缔组织、骨、软骨、血管组织、血液、心脏、眼、脑、神经组织等任意组织采集的细胞等，但不限于此。作为体细胞，更具体而言，例如可以举出：成纤维细胞、骨髓细胞、免疫细胞(例如、B淋巴球、T淋巴球、中性粒细胞、巨噬细胞、单球等)、红细胞、血小板、骨细胞、骨髓细胞、周皮细胞、树突状细胞、表皮角化细胞(角化细胞)、脂肪细胞、间叶细胞、上皮细胞、表皮细胞、内皮细胞、血管内皮细胞、淋巴管内皮细胞、肝细胞、胰岛细胞(例如、α细胞、β细胞、δ细胞、ε细胞、PP细胞等)、软骨细胞、卵丘细胞、胶质细胞、神经细胞(神经元)、寡突胶质细胞、微胶质细胞、星状胶质细胞、心肌细胞、食道细胞、肌肉细胞(例如、平滑肌细胞、骨骼肌细胞等)、黑色素细胞、单核细胞等，但不限于此。
干细胞是一种兼具自我复制能力和分化为其他多系统细胞能力的细胞。作为干细胞，例如可以举出：胚胎干细胞(ES细胞)、胚胎肿瘤细胞、胚胎生殖干细胞、人工多能干细胞(iPS细胞)、神经干细胞、造血干细胞、间充质干细胞、肝干细胞、胰干细胞、肌干细胞、生殖干细胞、肠干细胞、癌(cancer)干细胞和毛囊干细胞等，但不限于此。
前驱细胞是处于从所述干细胞分化为特定的体细胞或生殖细胞的过程中的细胞。
癌(cancer)细胞是从体细胞派生出来并获得无限增殖能力的细胞，是浸润周围组织或引起转移的恶性新生物。作为癌(cancer)细胞来源的癌，例如可以举出：乳腺癌(例如、浸润性乳管癌、非浸润性乳管癌、炎症性乳腺癌等)、前列腺癌(例如、激素依赖性前列腺癌、激素非依赖性前列腺癌等)、胰腺癌(例如、胰管癌等)、胃癌(例如、乳头腺癌、粘液性腺癌、腺鳞癌等)、肺癌(例如、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、恶性间皮瘤等)、结肠癌(例如消化道间质肿瘤等)、直肠癌(例如、消化道间质肿瘤等)、大肠癌(例如、家族性大肠癌、遗传性非息肉大肠癌、消化道间质肿瘤等)、小肠癌(例如、非霍奇金淋巴瘤、消化道间质肿瘤等)、食道癌、十二指肠癌、舌癌、咽癌(例如、上咽癌、中咽癌、下咽癌等)、头颈部癌、唾液腺癌、脑肿瘤(例如、松果体星细胞肿瘤、睫状体星形细胞瘤、弥漫性星细胞瘤、退化性星细胞瘤等)、神经鞘瘤、肝癌(例如、原发性肝癌、肝外胆管癌等)、肾癌(例如、肾细胞癌、肾盂和尿管转移上皮癌等)、胆囊癌、胰腺癌、子宫内膜癌、宫颈癌、卵巢癌(例如、上皮性卵巢癌、性腺外胚细胞肿瘤、卵巢性胚细胞肿瘤、卵巢低恶性肿瘤等)、膀胱癌、尿道癌、皮肤癌(例如、眼内(眼)黑色素瘤、默克尔细胞癌等)、血管瘤、恶性淋巴瘤(例如、网状细胞肉瘤、淋巴肉瘤、霍奇金病等)、黑色素瘤(恶性黑色素瘤)、甲状腺癌(例如、甲状腺髓样癌等)、副甲状腺癌、鼻腔癌、副鼻腔癌、骨肿瘤(例如、骨肉瘤、尤因肿瘤、子宫肉瘤、软组织肉瘤等)、转移性髓母瘤、血管纤维瘤、隆起性皮肤纤维肉瘤、视网膜肉瘤、阴茎癌、睾丸肿瘤、儿童固体癌(例如、病毒肿瘤、儿童肾肿瘤等)、卡波西肉瘤、起因于AIDS的卡波西肉瘤、上颌窦肿瘤、纤维性组织肉瘤、平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤、慢性骨髓增生性疾病、白血病(例如、急性骨髓性白血病、急性淋巴母细胞性白血病等)等，但不限于此。
并且，在本说明书中，“癌”是在表示诊断名称时使用，“癌(cancer)”是在表示恶性新生物的总称时使用。
细胞株是指在生物体外通过人为操作获得了无限增殖能力的细胞。作为细胞株，例如可以举出：HCT116、Huh7、HEK293(人胎儿肾细胞)、HeLa(人宫颈癌细胞株)、HepG2(人肝癌细胞株)、UT7/TPO(人白血病细胞株)、CHO(中华仓鼠卵巢细胞株)、MDCK、MDBK、BHK、C-33A、HT-29、AE-1、3D9、Ns0/1、Jurkat、NIH3T3、PC12、S2、Sf9、Sf21、High Five、Vero等，但不限于此。
并且，优选细胞在细胞悬浊液的状态下被吸引并密封。作为被用于细胞悬浊液的培养液，在细胞为动物细胞的情况下，只要是包含细胞的生存增殖所需要的成分(无机盐、碳水化合物、激素、必需氨基酸、非必需氨基酸、维生素)等的基础培养液即可，能够根据细胞的种类而适当地选择。作为所述培养液，例如可以举出：杜尔贝科改良伊格尔培养基(Dulbecco's Modified Eagle's Medium；DMEM)、Minimum Essential Medium(MEM)、RPMI-1640、Basal Medium Eagle(BME)、Dulbecco's Modified Eagle's Medium：NutrientMixture F-12(DMEM/F-12)、Glasgow Minimum Essential Medium(Glasgow MEM)等，但不限于此。
并且，关于由细菌、酵母、植物细胞以及它们的单一细胞或者多个细胞构成的小生命个体的培养液，只要制备适于各自生长的组成的培养液即可。
并且，在本实施方式的细胞的密封方法中，也可以在悬浮有细胞的培养液中混合并注入来源于细胞外基质的成分、生理活性物质等。
作为所述细胞基质成分，可以举出与上述“多孔质膜”中例示的成分相同的成分。
并且，作为所述生理活性物质，例如可以举出细胞增殖因子、分化诱导因子、细胞粘附因子等，但不限于此。例如，通过包含分化诱导因子，从而在注入的细胞是干细胞或前驱细胞等的情况下，能够分化诱导该干细胞或前驱细胞，构建再现了所希望的组织的多细胞结构体。
并且，在本实施方式的密封方法中，可以以使细胞密封用装置的容量充满的方式将悬浮有细胞的培养液注入其中，或者也可以注入小于细胞密封用装置的容量的量。
密封有细胞的带吸引管细胞密封用装置能够从框部件上卸下第一管状部件和第二管状部件，成为密封有细胞的细胞密封用装置。
得到的密封有细胞的细胞密封用装置例如能够用于细胞的培养、细胞的搬运、组织型芯片、器官型芯片、器官型芯片系统等。
在本说明书中，所谓“组织”，是表示以基于一种干细胞进行分化的固定谱系的模式集合后的结构单位，作为整体具有一个作用。例如，表皮角化细胞通过存在于表皮的基底层的干细胞经过有棘层分化为构成颗粒层的细胞，最终分化形成角质层，从而发挥着作为表皮的屏障功能。因此，本实施方式的组织型芯片通过包含来自一个细胞谱系的一种细胞而构建多细胞结构体，从而能够再现例如上皮组织、结缔组织、肌组织、神经组织等。
并且，在本说明书中，“器官”由两种以上的组织构成，作为整体承担一个功能。因此，本实施方式的器官型芯片通过包含细胞谱系不同的至少两种细胞而构建多细胞结构体，从而能够再现例如胃、肠、肝脏、肾脏等。
此外，在本说明书中，“器官系统”表示具有相同功能的两个以上的器官、和作为整体承担一系列功能的两个以上器官的整合。因此，本实施方式的器官型芯片系统通过组合多个组织型芯片或器官型芯片，从而能够再现例如消化器官系统、循环器官系统、呼吸器官系统、泌尿器官系统、生殖系统、内分泌系统、感觉器官系统、神经系统、运动器官系统、神经系统等器官系统。另外，生物体通过这些器官系统的相互作用维持稳态。在本实施方式的器官型芯片系统中，由于能够组合多个不同器官系统的器官型芯片，因此也能够解析不同器官系统的器官的相互作用。例如，在以小肠型芯片、肝脏型芯片、神经型芯片的顺序连结的器官型芯片系统中，在向小肠型芯片中添加药剂的情况下，被小肠型芯片吸收的药剂被肝脏型芯片代谢，能够解析被肝脏型芯片排出的药剂的肝代谢物对神经型芯片产生的毒性等。
实施例
以下，通过实施例对本发明进行说明，但本发明不限定于以下的实施例。
[制造例1]带吸引管细胞密封用装置(比特力凝胶(注册商标)-硅环-比特力凝胶(注册商标))的制作
1.硅环的准备
用Φ13mm×Φ8mm的冲切刀(森下制版公司制)冲切硅片(as-1公司(アズワン社)、厚度：2mm、2-9318-01)，从而制作出硅环。接着，在70％乙醇中浸泡10分钟，PBS×3次清洗来进行杀菌。
接着，用24G注射针(TERUMO公司(テルモ社)制、NN-2432R、0.55mm×32mm)在杀菌后的硅环上打孔，插入凝胶加载芯片(as-1公司(アズワン社)、2-4493-06)。在180度对称侧也同样，用24G注射针打孔，然后插入了凝胶加载芯片。
接着，用Φ12mm×Φ8.5mm的冲切刀(森下制版公司制)冲切硅酮橡胶粘接用双面胶带(Nitto Denko Corporation、No.5302A、厚度：0.085mm)，并粘贴到硅环的两面。此时，将双面胶带的硅粘合剂面(剥离纸：透明侧)贴附到硅环上。
2.比特力凝胶(注册商标)的准备以下，有时省略“比特力凝胶(注册商标)”的“注册商标”的记载。在丙烯酸制24孔板(岸本工业公司制)的孔(Φ15mm)内以涂硅面为上的方式设置Φ13mm的涂硅PET膜(藤森工业公司制、厚度：75μm)支承体，在其上滴下0.36mL等量混合了来自牛的原生胶原蛋白溶液(高研公司制、I-AC、胶原蛋白浓度0.5质量％)和培养液后的0.25％胶原蛋白溶胶。接着，在进行了胶原蛋白溶胶的凝胶化、玻璃化、再水合和再玻璃化之后，从孔中取出胶原蛋白比特力凝胶膜干燥体吸附的涂硅PET膜。通过进行两次这一系列的作业，制作出两张Φ13mm的带涂硅PET膜支承体的胶原蛋白比特力凝胶膜干燥体。
3.带吸引管细胞密封用装置(比特力凝胶-硅环-比特力凝胶)的制作接着，在用“1.”制作出的粘贴有双面胶带的硅环上，粘贴上用“2.”制作出的带有涂硅PET膜支承体的状态的胶原蛋白比特力凝胶膜干燥体。在该硅环的相反面也同样粘贴胶原蛋白比特力凝胶膜干燥体。
接着，从胶原蛋白比特力凝胶膜干燥体上剥离PET膜，以仅剩余前端部分的方式切下两根凝胶加载芯片中的一根，然后得到带吸引管细胞密封用装置(比特力凝胶-硅环-比特力凝胶)。
4.培养液的密封
接着，在得到的带吸引管细胞密封用装置(比特力凝胶-硅环-比特力凝胶)中安装移液管。接着，将安装在移液管上的凝胶加载芯片的前端蘸进培养液中并吸起(参照图4A)。
接着，先卸下安装在移液管上的一侧的凝胶加载芯片。接着，卸下相反侧的凝胶加载芯片的前端，得到密封了培养液的细胞密封用装置(比特力凝胶-硅环-比特力凝胶)(参照图4B)。
接着，将得到的密封了培养液的细胞密封用装置(比特力凝胶-硅环-比特力凝胶)沉入孔内含有培养液的24孔板中(参照图4C)。
由以上步骤，可以确定能够容易地将培养液密封在细胞密封用装置(比特力凝胶-硅环-比特力凝胶)中。并且，通过使用细胞密封用装置(比特力凝胶-硅环-比特力凝胶)，对于细胞悬浊液也同样能够容易地密封。
[制造例2]细胞密封用装置(比特力凝胶-硅环-过滤器)的制作
1.硅环的准备
首先，使用与制造例1的“1.”相同的方法准备硅环。
2.比特力凝胶的准备
接着，使用与制造例1的“2.”相同的方法，制作一张Φ13mm的带涂硅PET膜(厚75μm)支承体的胶原蛋白比特力凝胶膜干燥体。
3.过滤器的准备
接着，用冲压机将过滤器(Omnipore(商标)薄膜(水系、溶剂系两用)、JHWP4700、孔径：0.45μm、直径：Φ47mm)冲压成Φ11mm，使其浸透在70％乙醇中10分钟以杀菌，然后干燥。
4.带吸引管细胞密封用装置(比特力凝胶-硅环-过滤器)的制作
在用“1.”制作出的粘贴有双面胶带的硅环上，粘贴上用“2.”制作出的带有涂硅PET膜支承体的状态下的胶原蛋白比特力凝胶膜干燥体。
接着，在粘贴胶原蛋白比特力凝胶膜干燥体的面的相反侧的面上，粘贴用“3.”制作的过滤器。
接着，用Φ12mm×Φ8.5mm的冲切刀分别冲切一块涂硅PET膜(藤森工业公司制，厚度:75μm)和薄发泡体基材防水双面胶带(Nitto Denko Corporation、No.57210B、厚度：0.1mm)。用70％乙醇对得到的环状的涂硅PET膜进行杀菌。干燥后，将环状的PET膜的未涂硅面和环状的薄发泡体基材防水双面胶带贴合在一起。
接着，在一面粘贴有比特力凝胶，另一面粘贴有过滤器的硅环的粘贴有过滤器的面上，以使粘贴有双面胶带的面与过滤器接触的方式粘贴环状的PET膜。
接着，用Φ16mm的冲切刀冲切涂硅PET膜(藤森工业公司制、厚度：75μm)，用Φ12mm×Φ8.5mm的冲切刀冲切薄发泡体基材防水双面胶带(Nitto Denko Corporation、No.57210B、厚度：0.1mm)。用70％乙醇对得到的圆形的涂硅PET膜进行杀菌。干燥后，将圆形的PET膜的未涂硅面和环状的薄发泡体基材防水双面胶带贴合在一起。此时在圆形的PET膜的尽量中央位置粘贴双面胶带。
接着，关于在一面粘贴有比特力凝胶，另一面粘贴有过滤器，并且在过滤器上粘贴环状的PET膜的硅环，以环状的PET膜的涂硅一面和粘贴了双面胶带的圆形的PET膜的粘贴有双面胶带的一面接触的方式粘贴。
接着，从胶原蛋白比特力凝胶膜干燥体上剥离PET膜，以仅剩余前端部分的方式切下两根凝胶加载芯片中的一根，然后得到带吸引管细胞密封用装置(比特力凝胶-硅环-比特力凝胶)。
5.培养液的密封
接着，在得到的带吸引管细胞密封用装置(比特力凝胶-硅环-过滤器)中安装移液管。接着，将安装在移液管上的凝胶加载芯片的前端蘸进培养液中并吸起(参照图5A)。
接着，先卸下安装在移液管上的一侧的凝胶加载芯片。接着，剥离粘贴在过滤器表面上的PET膜。接着，卸下相反侧的凝胶加载芯片的前端，得到密封了培养液的细胞密封用装置(比特力凝胶-硅环-过滤器)(参照图5B)。
接着，将得到的密封了培养液的细胞密封用装置(比特力凝胶-硅环-过滤器)沉入孔内含有培养液的24孔板中(参照图5C)。
由以上步骤，可以确定能够容易地将培养液密封在细胞密封用装置(比特力凝胶-硅环-过滤器)中。并且，通过使用细胞密封用装置(比特力凝胶-硅环-过滤器)，对于细胞悬浊液也同样能够容易地密封。
[制造例3]细胞密封用装置(过滤器-硅环-过滤器)的制作
1.硅环的准备
首先，使用与制造例1的“1.”相同的方法准备硅环。
2.过滤器的准备
接着，用冲压机将过滤器(Omnipore(商标)薄膜(水系、溶剂系两用)、JHWP4700、孔径：0.45μm、直径：Φ47mm)冲切成两块Φ11mm，使其浸透在70％乙醇中10分钟以杀菌，然后干燥。
3.带吸引管细胞密封用装置(过滤器-硅环-过滤器)的制作
在用“1.”制作出的粘贴有双面胶带的硅环上，粘贴用“2.”制作出的过滤器。
接着，用Φ12mm×Φ8.5mm的冲切刀分别冲切涂硅PET膜(藤森工业公司制、厚度：75μm)和薄发泡体基材防水双面胶带(Nitto Denko Corporation、No.57210B、厚度：0.1mm)各两块。用70％乙醇对得到的环状的涂硅PET膜进行杀菌。干燥后，将环状的PET膜的未涂硅面和环状的薄发泡体基材防水双面胶带贴合在一起从而制作出两组。
接着，在两面粘贴有过滤器的硅环的粘贴有过滤器的面上，以使粘贴有双面胶带的面与过滤器接触的方式粘贴环状的PET膜。
接着，用Φ16mm的冲切刀冲切两块涂硅PET膜(藤森工业公司制、厚度：75μm)以及用Φ12mm×Φ8.5mm的冲切刀冲切两块薄发泡体基材防水双面胶带(Nitto DenkoCorporation、No.57210B、厚度：0.1mm)。用70％乙醇对得到的圆形的涂硅PET膜进行杀菌。干燥后，将圆形的PET膜的未涂硅面和环状的薄发泡体基材防水双面胶带贴合从而制作出两组。此时在圆形的PET膜的尽量中央位置粘贴双面胶带。
接着，关于在两面粘贴有过滤器，在过滤器上粘贴有环状的PET膜的硅环的一面，以环状的PET膜的涂硅面和粘贴有双面胶带的圆形的PET膜的粘贴有双面胶带的面接触的方式粘贴。
接着，硅环的相反侧的面也同样地，按照过滤器、环状的PET膜以及Φ16mm的圆形的PET膜的顺序粘贴。
接着，以仅剩余前端部分的方式切下两根凝胶加载芯片中的一根，然后得到带吸引管细胞密封用装置(过滤器-硅环-过滤器)。
4.培养液的密封
接着，在得到的带吸引管细胞密封用装置(过滤器-硅环-过滤器)中安装移液管。接着，将安装在移液管上的凝胶加载芯片的前端蘸进培养液中并吸起(参照图6A)。
接着，先卸下安装在移液管上的一侧的凝胶加载芯片。接着，剥离粘贴在两面的过滤器表面上的PET膜。接着，卸下相反侧的凝胶加载芯片的前端，得到密封了培养液的细胞密封用装置(过滤器-硅环-过滤器)(参照图6B)。
接着，将得到的密封了培养液的细胞密封用装置(过滤器-硅环-过滤器)沉入孔内含有培养液的24孔板中(参照图6C)。
由以上步骤，可以确定能够容易地将培养液密封在细胞密封用装置(过滤器-硅环-过滤器)中。并且，通过使用细胞密封用装置(过滤器-硅环-过滤器)，对于细胞悬浊液也同样能够容易地密封。
[制造例4]细胞密封用装置(过滤器-塑料制环-过滤器)的制作除了使用塑料制环代替硅环以外，使用与制造例3相同的方法制造细胞密封用装置(过滤器-塑料制环-过滤器)。具体而言，细胞密封用装置通过在以不锈钢球为栓塞的带壁面孔路径的塑料制环(内径7.98mm、外径13.0mm、厚度2.0mm)的两面粘贴过滤器(Omnipore(商标)薄膜(水系、溶剂系两用)、JHWP4700、孔径：0.45μm)从而来制作。
[实施例1]球状体的制作
在制造例4中得到的细胞密封用装置(过滤器-塑料制环-过滤器)中密封HepG2细胞(人肝癌细胞株)培养10天。由此，确认了能够制作HepG2细胞的球状体(参照图7)。
产业上的可利用性
根据本实施方式的带吸引管细胞密封用装置，能够简便地密封细胞，细胞保护性能优异，处理也容易，并且，能够长期培养细胞。
标号说明
1a…第一管状部件的一个端部、1b…第一管状部件的另一个端部、2a…第二管状部件的一个端部、2b…第二管状部件的另一个端部、3…与吸引单元连结的连结机构、10…细胞密封用装置、10a…多孔质膜、10a-1…顶面侧的多孔质膜、10a-2…底面侧的多孔质膜、10b…框部件、11a…第一粘接剂层、11b…第二粘接剂层、11c…第三粘接剂层、11d…第四粘接剂层、12a…顶面侧的具有气密性的膜、12b…底面侧的具有气密性的膜、20…吸引管、20a…第一管状部件、20b…第二管状部件、100、200、300、400…带吸引管细胞密封用装置、110…支架、111…卡止部、A…带吸引管细胞密封用装置组合。
Claims (12)
1.一种带吸引管细胞密封用装置，其中，
具有：
细胞密封用装置，其用于构建对细胞进行培养而成的多细胞结构体，在顶面和底面中的至少一个上具有多孔质膜，在侧面具有框部件；
以及吸引管，其具有第一管状部件和第二管状部件，
在所述框部件的外周面上形成有分别与所述第一管状部件的一个端部和所述第二管状部件的一个端部连通的第一贯通孔和第二贯通孔，
所述第一管状部件在其另一个端部具有与吸引单元连结的连结机构，
所述第二管状部件的另一个端部向外部开口。
2.根据权利要求1所述的带吸引管细胞密封用装置，其中，
所述第一管状部件与所述第二管状部件以隔着所述细胞密封用装置彼此对置方式的配置。
3.根据权利要求1或2所述的带吸引管细胞密封用装置，其中，
所述带吸引管细胞密封用装置能够注入悬浮在培养液中的多细胞，内部容积是10mL以下。
4.根据权利要求1至3中的任意一项所述的带吸引管细胞密封用装置，其中，
所述多孔质膜是在气相中具有液密性，在液相中具有半透性的半透膜。
5.根据权利要求4所述的带吸引管细胞密封用装置，其中，
所述半透膜包含具有生物体相容性的材料。
6.根据权利要求5所述的带吸引管细胞密封用装置，其中，
具有所述生物体相容性的材料是凝胶化的来源于细胞外基质的成分。
7.根据权利要求6所述的带吸引管细胞密封用装置，其中，
所述凝胶化的来源于细胞外基质的成分是原生胶原蛋白或者去端胶原蛋白。
8.根据权利要求1至7中的任意一项所述的带吸引管细胞密封用装置，其中，
具有气密性的膜还相对于所述多孔质膜的外表面可装卸。
9.根据权利要求1至8中的任意一项所述的带吸引管细胞密封用装置，其中，
所述连结机构具有过滤器。
10.一种带吸引管细胞密封用装置组合，其中，
具有权利要求1至9中的任意一项所述的带吸引管细胞密封用装置以及收纳所述带吸引管细胞密封用装置的支架。
11.根据权利要求10所述的带吸引管细胞密封用装置组合，其中，
所述支架具有U字型的卡止部。
12.一种细胞的密封方法，其中，
该密封方法使用权利要求1至9中的任意一项所述的带吸引管细胞密封用装置。
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