CN111423475A - 一种从马鞭草中提取马鞭草苷的方法及治疗痛经的药物 - Google Patents

一种从马鞭草中提取马鞭草苷的方法及治疗痛经的药物 Download PDF

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Abstract

本发明提出了一种从马鞭草中提取马鞭草苷的方法及治疗痛经的药物，包括以下步骤：S1：马鞭草用甲醇提取后于旋转蒸发仪上减压浓缩得到粘稠膏状物；S2：将粘稠膏状物用DMSO/水体系重结晶；S3：甲醇、DMF/乙醚体系二次结晶，将得到的白色固体过滤后烘干，即可得到马鞭草苷，本发明采用甲醇粗提取后，二次重结晶，不需要柱层析即可获得纯度大于98％的马鞭草苷，提取方法简单，不需要高温高压，成本低，易操作，适合大规模推广，另外，本发明还提供了一种治疗痛经的药物，具有疗效好，见效快的作用，对于痛经有很好的治疗效果。

Description

一种从马鞭草中提取马鞭草苷的方法及治疗痛经的药物
技术领域
本发明涉及药物技术领域，具体涉及一种从马鞭草中提取马鞭草苷的方法及治疗痛经的药物。
背景技术
马鞭草又叫马鞭梢、铁马鞭、白马鞭、疟马鞭、凤颈草、紫顶龙芽草、野荆芥。全草含马鞭草苷、鞣质、挥发油，根和茎种含水苏糖，叶种含腺苷和B—胡萝卜素。药性：味苦，性寒，归肝、脾经。
马鞭草具有清热解毒，活血散瘀，利水消肿。治外感发热，湿热黄疸，水肿，痢疾，疟疾，白喉，喉痹，淋病，经闭，症瘕，痈肿疮毒，牙疳等诸多功效。
而马鞭草苷作为马鞭草中的主要活性成分，对马鞭草的治疗效果起到主要促进作用，目前马鞭草苷主要是从马鞭草中提取得到，现有的提取方法难以工业化应用，多使用柱层析的手段，费时费力，而且所获得的马鞭草苷纯度低，质量差。
中国专利CN102133302B涉及马鞭草中提取的治疗前列腺炎的马鞭草提取物，可有效解决制备治疗前列腺炎的药物问题，该发明解决的技术方案是，取马鞭草药材，粉碎，用乙醇加热回流提取2次，合并提取液，过滤，减压浓缩，用蒸馏水分散均匀，冷藏静置后过滤，取上清液通过大孔吸附树脂柱，先用蒸馏水洗脱，再用乙醇洗脱，弃去洗脱液，继用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇，浓缩干燥，粉碎成细粉得含马鞭草苷50％以上的马鞭草提取物，该发明采用吸附树脂柱洗脱溶剂消耗量大，而且所得到的提取物中马鞭草苷含量仅为50％，不适于用于提取马鞭草苷。
发明内容
针对上述存在的问题，本发明提出了一种从马鞭草中提取马鞭草苷的方法及治疗痛经的药物，
为了实现上述的目的，本发明采用以下的技术方案：
一种从马鞭草中提取马鞭草苷的方法，包括以下步骤：
S1：将马鞭草清水洗净后自然晾干，转移至烘箱中于50-60℃下干燥至含水率≤10％，用粉碎机粉碎后放入提取釜中，加入甲醇，加热升温至回流，搅拌下进行一次提取，一次提取时间为1-3h，一次提取结束后自然冷却至室温，过滤，收集一次滤液，向一次提取后的马鞭草继续加甲醇，加热升温至回流，搅拌下进行二次提取，二次提取时间1-3h，二次提取结束后冷却至室温，过滤，将二次滤液与一次滤液合并，于旋转蒸发仪上减压浓缩得到粘稠膏状物；
S2：将粘稠膏状物加入到一定量DMSO中，加热升温至50-60℃，保温搅拌5-10h，趁热过滤除去不溶物，向过滤后的溶液中滴加去离子水，滴毕后自然恢复室温，搅拌1-5h后再于0-5℃下搅拌8-15h，过滤，将得到的灰色固体于烘箱中60-80℃干燥5-10h后，再加入到50-100倍于其质量的去离子水中，加热升温至60-80℃搅拌3-8h后过滤，得到的固体于烘箱中60-80℃干燥至含水率≤5％；
S3：再将固体加入到甲醇、DMF组成的混合溶液中，加热升温至40-50℃搅拌1-3h，趁热过滤除去不溶物，再向过滤后的溶液中滴加乙醚，滴毕后自然恢复室温，室温搅拌1-5h后再于0-5℃下搅拌5-10h，将得到的白色固体过滤后烘干，即可得到马鞭草苷。
进一步地，S1中一次提取和二次提取所用甲醇的质量相同，均为马鞭草质量的10-20倍。
进一步地，S2中粘稠膏状物与DMSO的质量比为1：20-40。
进一步地，S2中DMSO与去离子水的体积比为1:5-10。
进一步地，S3中混合溶液中甲醇、DMF的体积比为20-50:1。
进一步地，S3中混合溶液与乙醚体积比为1:5-10。
一种治疗痛经的药物，由以下重量份数的原料组成：上述方法所制备的马鞭草苷5-10份、维生素C1-3份、海藻酸钠30-50份、氯化钙10-15份、蔗糖0.1-1份、β-环糊精5-10份。
进一步地，权利要求1-6任一项方法所制备的马鞭草苷6份、维生素C1份、海藻酸钠50份、氯化钙12份、甜味剂0.6份、β-环糊精8份。
进一步地，所述甜味剂由甜菊糖甙、糖保姆代糖、元贞糖中的任意一种与蔗糖组合而成。
由于采用上述的技术方案，本发明的有益效果是：
现有的提取方法难以工业化应用，多使用柱层析的手段，费时费力，而且所获得的马鞭草苷纯度低，质量差，本发明采用甲醇粗提取后，二次重结晶，不需要柱层析即可获得纯度大于98％的马鞭草苷，由于不需要柱层析，溶剂的用量大大降低，而且二次重结晶所用到的溶剂可以回收再利用，成本再次降低，提取方法简单，不需要高温高压，成本低，易操作，适合大规模推广，另外，本发明还提供了一种治疗痛经的药物，具有疗效好，见效快的作用，对于痛经有很好的治疗效果。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。基于本发明的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1：
一种从马鞭草中提取马鞭草苷的方法，包括以下步骤：
S1：将马鞭草清水洗净后自然晾干，转移至烘箱中于55℃下干燥至含水率≤10％，用粉碎机粉碎后放入提取釜中，加入甲醇，加热升温至回流，搅拌下进行一次提取，一次提取时间为2h，一次提取结束后自然冷却至室温，过滤，收集一次滤液，向一次提取后的马鞭草继续加甲醇，一次提取和二次提取所用甲醇的质量相同，均为马鞭草质量的10倍，加热升温至回流，搅拌下进行二次提取，二次提取时间1h，二次提取结束后冷却至室温，过滤，将二次滤液与一次滤液合并，于旋转蒸发仪上减压浓缩得到粘稠膏状物；
S2：将粘稠膏状物加入20倍于其质量的DMSO中，加热升温至55℃，保温搅拌6h，趁热过滤除去不溶物，向过滤后的溶液中滴加去离子水，DMSO与去离子水的体积比为1:5，滴毕后自然恢复室温，搅拌2h后再于0℃下搅拌12h，过滤，将得到的灰色固体于烘箱中60℃干燥5h后，再加入到100倍于其质量的去离子水中，加热升温至80℃搅拌5h后过滤，得到的固体于烘箱中80℃干燥至含水率≤5％；
S3：再将固体加入到甲醇、DMF组成的混合溶液中，混合溶液中甲醇、DMF的体积比为40:1，加热升温至40℃搅拌1-3h，趁热过滤除去不溶物，再向过滤后的溶液中滴加混合溶液体积10倍的乙醚，滴毕后自然恢复室温，室温搅拌5h后再于0℃下搅拌10h，将得到的白色固体过滤后烘干，即可得到马鞭草苷(HPLC：98.6％)。
一种治疗痛经的药物，由以下重量份数的原料组成：马鞭草苷6份、维生素C1份、海藻酸钠50份、氯化钙12份、甜菊糖甙与蔗糖组合而成的甜味剂0.6份、β-环糊精8份。
实施例2：
一种从马鞭草中提取马鞭草苷的方法，包括以下步骤：
S1：将马鞭草清水洗净后自然晾干，转移至烘箱中于60℃下干燥至含水率≤10％，用粉碎机粉碎后放入提取釜中，加入甲醇，加热升温至回流，搅拌下进行一次提取，一次提取时间为3h，一次提取结束后自然冷却至室温，过滤，收集一次滤液，向一次提取后的马鞭草继续加甲醇，一次提取和二次提取所用甲醇的质量相同，均为马鞭草质量的12倍，加热升温至回流，搅拌下进行二次提取，二次提取时间3h，二次提取结束后冷却至室温，过滤，将二次滤液与一次滤液合并，于旋转蒸发仪上减压浓缩得到粘稠膏状物；
S2：将粘稠膏状物加入40倍于其质量的DMSO中，加热升温至50℃，保温搅拌5h，趁热过滤除去不溶物，向过滤后的溶液中滴加去离子水，DMSO与去离子水的体积比为1:5，滴毕后自然恢复室温，搅拌2h后再于5℃下搅拌10h，过滤，将得到的灰色固体于烘箱中60℃干燥10h后，再加入到80倍于其质量的去离子水中，加热升温至60℃搅拌8h后过滤，得到的固体于烘箱中70℃干燥至含水率≤5％；
S3：再将固体加入到甲醇、DMF组成的混合溶液中，混合溶液中甲醇、DMF的体积比为50:1，加热升温至50℃搅拌2h，趁热过滤除去不溶物，再向过滤后的溶液中滴加混合溶液体积10倍的乙醚，滴毕后自然恢复室温，室温搅拌2h后再于4℃下搅拌8h，将得到的白色固体过滤后烘干，即可得到马鞭草苷(HPLC：99.2％)。
一种治疗痛经的药物，由以下重量份数的原料组成：马鞭草苷8份、维生素C 3份、海藻酸钠30份、氯化钙12份、糖保姆代糖与蔗糖组合而成的甜味剂0.1份、β-环糊精8份。
实施例3：
一种从马鞭草中提取马鞭草苷的方法，包括以下步骤：
S1：将马鞭草清水洗净后自然晾干，转移至烘箱中于55℃下干燥至含水率≤10％，用粉碎机粉碎后放入提取釜中，加入甲醇，加热升温至回流，搅拌下进行一次提取，一次提取时间为1h，一次提取结束后自然冷却至室温，过滤，收集一次滤液，向一次提取后的马鞭草继续加甲醇，一次提取和二次提取所用甲醇的质量相同，均为马鞭草质量的20倍，加热升温至回流，搅拌下进行二次提取，二次提取时间3h，二次提取结束后冷却至室温，过滤，将二次滤液与一次滤液合并，于旋转蒸发仪上减压浓缩得到粘稠膏状物；
S2：将粘稠膏状物加入40倍于其质量的DMSO中，加热升温至60℃，保温搅拌10h，趁热过滤除去不溶物，向过滤后的溶液中滴加去离子水，DMSO与去离子水的体积比为1:5，滴毕后自然恢复室温，搅拌2h后再于5℃下搅拌15h，过滤，将得到的灰色固体于烘箱中80℃干燥10h后，再加入到80倍于其质量的去离子水中，加热升温至60℃搅拌5h后过滤，得到的固体于烘箱中80℃干燥至含水率≤5％；
S3：再将固体加入到甲醇、DMF组成的混合溶液中，混合溶液中甲醇、DMF的体积比为50:1，加热升温至45℃搅拌3h，趁热过滤除去不溶物，再向过滤后的溶液中滴加混合溶液体积10倍的乙醚，滴毕后自然恢复室温，室温搅拌2h后再于0℃下搅拌8h，将得到的白色固体过滤后烘干，即可得到马鞭草苷(HPLC：98.9％)。
一种治疗痛经的药物，由以下重量份数的原料组成：马鞭草苷5份、维生素C1份、海藻酸钠50份、氯化钙10份、甜菊糖甙与蔗糖组合而成的甜味剂1份、β-环糊精10份。
实施例4：
一种从马鞭草中提取马鞭草苷的方法，包括以下步骤：
S1：将马鞭草清水洗净后自然晾干，转移至烘箱中于50℃下干燥至含水率≤10％，用粉碎机粉碎后放入提取釜中，加入甲醇，加热升温至回流，搅拌下进行一次提取，一次提取时间为1h，一次提取结束后自然冷却至室温，过滤，收集一次滤液，向一次提取后的马鞭草继续加甲醇，一次提取和二次提取所用甲醇的质量相同，均为马鞭草质量的10倍，加热升温至回流，搅拌下进行二次提取，二次提取时间1h，二次提取结束后冷却至室温，过滤，将二次滤液与一次滤液合并，于旋转蒸发仪上减压浓缩得到粘稠膏状物；
S2：将粘稠膏状物加入20倍于其质量的DMSO中，加热升温至50℃，保温搅拌5h，趁热过滤除去不溶物，向过滤后的溶液中滴加去离子水，DMSO与去离子水的体积比为1:5，滴毕后自然恢复室温，搅拌1h后再于0℃下搅拌8h，过滤，将得到的灰色固体于烘箱中60℃干燥5h后，再加入到50倍于其质量的去离子水中，加热升温至60℃搅拌3h后过滤，得到的固体于烘箱中60℃干燥至含水率≤5％；
S3：再将固体加入到甲醇、DMF组成的混合溶液中，混合溶液中甲醇、DMF的体积比为20:1，加热升温至40℃搅拌1h，趁热过滤除去不溶物，再向过滤后的溶液中滴加混合溶液体积5倍的乙醚，滴毕后自然恢复室温，室温搅拌1h后再于0℃下搅拌5h，将得到的白色固体过滤后烘干，即可得到马鞭草苷(HPLC：99.4％)。
一种治疗痛经的药物，由以下重量份数的原料组成：马鞭草苷5份、维生素C1份、海藻酸钠30份、氯化钙10份、元贞糖与蔗糖组合而成的甜味剂0.1份、β-环糊精5份。
实施例5：
一种从马鞭草中提取马鞭草苷的方法，包括以下步骤：
S1：将马鞭草清水洗净后自然晾干，转移至烘箱中于60℃下干燥至含水率≤10％，用粉碎机粉碎后放入提取釜中，加入甲醇，加热升温至回流，搅拌下进行一次提取，一次提取时间为3h，一次提取结束后自然冷却至室温，过滤，收集一次滤液，向一次提取后的马鞭草继续加甲醇，一次提取和二次提取所用甲醇的质量相同，均为马鞭草质量的20倍，加热升温至回流，搅拌下进行二次提取，二次提取时间3h，二次提取结束后冷却至室温，过滤，将二次滤液与一次滤液合并，于旋转蒸发仪上减压浓缩得到粘稠膏状物；
S2：将粘稠膏状物加入40倍于其质量的DMSO中，加热升温至60℃，保温搅拌10h，趁热过滤除去不溶物，向过滤后的溶液中滴加去离子水，DMSO与去离子水的体积比为1:10，滴毕后自然恢复室温，搅拌5h后再于5℃下搅拌15h，过滤，将得到的灰色固体于烘箱中80℃干燥10h后，再加入到100倍于其质量的去离子水中，加热升温至80℃搅拌8h后过滤，得到的固体于烘箱中80℃干燥至含水率≤5％；
S3：再将固体加入到甲醇、DMF组成的混合溶液中，混合溶液中甲醇、DMF的体积比为50:1，加热升温至50℃搅拌3h，趁热过滤除去不溶物，再向过滤后的溶液中滴加混合溶液体积10倍的乙醚，滴毕后自然恢复室温，室温搅拌5h后再于5℃下搅拌10h，将得到的白色固体过滤后烘干，即可得到马鞭草苷(HPLC：98.3％)。
一种治疗痛经的药物，由以下重量份数的原料组成：马鞭草苷5-10份、维生素C 3份、海藻酸钠50份、氯化钙15份、甜菊糖甙与蔗糖组合而成的甜味剂1份、β-环糊精10份。
临床试验：
将医院确诊的痛经患者108例，年龄为18.4±12.5，排除全身器质性病变和盆腔阳性发现，根据本人自愿的原则，作为治疗对象，分别用本发明实施例1所制备的药物进行治疗(一日三次，每次0.5mg，时间30日)，依据《中药新药临床研究指导原则》中关于痛经疗效评定标准进行评定。痊愈：治疗后痛经症状积分降至0分，停止治疗后痛经症状无复发者，显效：治疗后痛经症状积分降至实验前积分一半以下，有效：治疗后痛经症状积分降至实验前积分的1/2-3/4，治疗结果如下表1所示：
表1：
人数 痊愈 显效 有效 总有效率/％
治疗后 108 85(78.7％) 12(11.1％) 11(10.2％) 100
由上表1可知，本发明药物对于治疗痛经效果明显，有很好的推广价值。
需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个……”限定的要素，并不排除在包括要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。

Claims (9)

1.一种从马鞭草中提取马鞭草苷的方法，其特征在于：包括以下步骤：
S1：将马鞭草清水洗净后自然晾干，转移至烘箱中于50-60℃下干燥至含水率≤10％，用粉碎机粉碎后放入提取釜中，加入甲醇，加热升温至回流，搅拌下进行一次提取，一次提取时间为1-3h，一次提取结束后自然冷却至室温，过滤，收集一次滤液，向一次提取后的马鞭草继续加甲醇，加热升温至回流，搅拌下进行二次提取，二次提取时间1-3h，二次提取结束后冷却至室温，过滤，将二次滤液与一次滤液合并，于旋转蒸发仪上减压浓缩得到粘稠膏状物；
S2：将粘稠膏状物加入到一定量DMSO中，加热升温至50-60℃，保温搅拌5-10h，趁热过滤除去不溶物，向过滤后的溶液中滴加去离子水，滴毕后自然恢复室温，搅拌1-5h后再于0-5℃下搅拌8-15h，过滤，将得到的灰色固体于烘箱中60-80℃干燥5-10h后，再加入到50-100倍于其质量的去离子水中，加热升温至60-80℃搅拌3-8h后过滤，得到的固体于烘箱中60-80℃干燥至含水率≤5％；
S3：再将固体加入到甲醇、DMF组成的混合溶液中，加热升温至40-50℃搅拌1-3h，趁热过滤除去不溶物，再向过滤后的溶液中滴加乙醚，滴毕后自然恢复室温，室温搅拌1-5h后再于0-5℃下搅拌5-10h，将得到的白色固体过滤后烘干，即可得到马鞭草苷。
2.根据权利要求1所述的从马鞭草中提取马鞭草苷的方法，其特征在于：S1中一次提取和二次提取所用甲醇的质量相同，均为马鞭草质量的10-20倍。
3.根据权利要求1所述的从马鞭草中提取马鞭草苷的方法，其特征在于：S2中粘稠膏状物与DMSO的质量比为1：20-40。
4.根据权利要求1所述的从马鞭草中提取马鞭草苷的方法，其特征在于：S2中DMSO与去离子水的体积比为1:5-10。
5.根据权利要求1所述的从马鞭草中提取马鞭草苷的方法，其特征在于：S3中混合溶液中甲醇、DMF的体积比为20-50:1。
6.根据权利要求1所述的从马鞭草中提取马鞭草苷的方法，其特征在于：S3中混合溶液与乙醚体积比为1:5-10。
7.一种治疗痛经的药物，其特征在于：由以下重量份数的原料组成：权利要求1-6任一项方法所制备的马鞭草苷5-10份、维生素C1-3份、海藻酸钠30-50份、氯化钙10-15份、蔗糖0.1-1份、β-环糊精5-10份。
8.根据权利要求7所述的治疗痛经的药物，其特征在于：权利要求1-6任一项方法所制备的马鞭草苷6份、维生素C1份、海藻酸钠50份、氯化钙12份、甜味剂0.6份、β-环糊精8份。
9.根据权利要求8所述的治疗痛经的药物，其特征在于：所述甜味剂由甜菊糖甙、糖保姆代糖、元贞糖中的任意一种与蔗糖组合而成。
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孟胜男等: "《药剂学 在线学习版》", 31 January 2016, 中国医药科技出版社 *
张涛等: "马鞭草苷现代研究进展", 《中草药》 *
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