CN111387383A - 一种具有减肥降脂功效的高多酚含量益生菌发酵苹果汁及制备方法 - Google Patents

一种具有减肥降脂功效的高多酚含量益生菌发酵苹果汁及制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种具有减肥降脂功效的高多酚含量益生菌发酵苹果汁及制备方法，原料包括复合苹果汁和益生菌，益生菌为德氏乳杆菌乳酸亚种(L4)、戊糖乳杆菌(22160)和两歧双歧杆菌(6169)；益生菌培养得益生菌种子液，所述益生菌种子液接种于复合苹果汁中发酵即得。通过发酵提高益生菌发酵苹果汁中游离态多酚单体含量，增加苹果汁中功能成分含量，得到高多酚含量的益生菌发酵复合苹果汁，使发酵苹果汁具有显著的减肥降脂功效，解决苹果汁加工多元化问题，具有广阔的市场前景。

Description

一种具有减肥降脂功效的高多酚含量益生菌发酵苹果汁及制 备方法
技术领域
本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及具有减肥降脂功效的高多酚含量益生菌 发酵苹果汁及制备方法。
背景技术
苹果中富含多酚、氨基酸、维生素及矿物质等营养物质，其中，多酚作为重要的生物活性物质具有抗氧化、抗菌消炎、抑制肿瘤增殖、预防高血压和心血管疾病等作用。 在苹果中多酚以游离态及结合态的形式存在，结合态多酚往往与膳食纤维结合，如何使 结合态多酚变为游离态多酚，产生更大的功效，一直是研究人员研究的方向。与此同时， 苹果加工产品种类少，产品急需升级，功能化加工是果蔬加工未来发展的方向。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明目的是提供一种具有减肥降脂功效的高多酚含量 益生菌发酵苹果汁及制备方法，通过发酵提高益生菌发酵苹果汁中游离态多酚单体含量， 增加苹果汁中功能成分含量，得到高多酚含量的益生菌发酵复合苹果汁，使发酵苹果汁 具有显著的减肥降脂功效，解决苹果汁加工多元化问题，具有广阔的市场前景。
本发明采取的技术方案为：
一种具有减肥降脂功效的高多酚含量益生菌发酵苹果汁，原料包括复合苹果汁和益 生菌，益生菌为德氏乳杆菌乳酸亚种(L4)、戊糖乳杆菌(22160)和两歧双歧杆菌(6169)；益生菌培养得益生菌种子液，所述益生菌种子液接种于复合苹果汁中发酵即得。
可选的，三种益生菌添加量相同；益生菌种子液由活化后的益生菌菌株于37℃静置 培养24h即得。
可选的，复合苹果汁的质量配比为阿克苏富士汁：秦冠汁：澳洲青苹汁＝4：3：1。
可选的，阿克苏富士果汁，是在阿克苏富士苹果汁中添加果胶酶(450mg/L)、纤 维素酶(500mg/L)和淀粉酶(600mg/L)，于45℃的条件下酶解2h，再于超声波辅助 处理2-3次，过滤得阿克苏富士果汁；秦冠果汁，是在秦冠苹果汁中添加果胶酶(450mg/L)、 纤维素酶(500mg/L)和淀粉酶(600mg/L)，于45℃的条件下酶解2h，再于超声波辅 助处理2-3次，过滤得秦冠果汁；澳洲青苹果汁，是在澳洲青苹果汁中添加果胶酶 (450mg/L)、纤维素酶(500mg/L)和淀粉酶(600mg/L)，于45℃的条件下酶解2h， 再于超声波辅助处理2-3次，过滤得澳洲青苹果汁。
可选的，发酵苹果汁的发酵条件为：益生菌种子液按2V％～3V％接种量接种于复合苹 果汁，37～38℃的温度下发酵16h。
可选的，益生菌种子液按2V％接种量接种于复合苹果汁中，37℃条件下发酵16h。
一种具有减肥降脂功效的高多酚含量益生菌发酵苹果汁的制备方法，苹果汁为上述 具有减肥降脂功效的高多酚含量益生菌发酵苹果汁。
可选的，包括如下步骤：步骤1：苹果汁的制备：在阿克苏富士苹果汁中添加果胶酶(450mg/L)、纤维素酶(500mg/L)和淀粉酶(600mg/L)，于45℃的条件下酶解 2h，再于超声波辅助处理2-3次，过滤得阿克苏富士果汁；在秦冠苹果汁中添加果胶酶 (450mg/L)、纤维素酶(500mg/L)和淀粉酶(600mg/L)，于45℃的条件下酶解2h， 再于超声波辅助处理2-3次，过滤得秦冠果汁；在澳洲青苹果汁中添加果胶酶(450mg/L)、 纤维素酶(500mg/L)和淀粉酶(600mg/L)，于45℃的条件下酶解2h，再于超声波辅 助处理2-3次，过滤得澳洲青苹果汁；步骤2：取步骤1中得到的阿克苏富士果汁、秦 冠果汁和澳洲青苹果汁，按照质量比为4：3：1得到复合苹果汁；步骤3：将体积比为 德氏乳杆菌乳酸亚种(L4)：戊糖乳杆菌(22160)：两歧双歧杆菌(6169)＝1:1:1的 益生菌活化，活化后的益生菌菌株于37℃静置培养24h得到益生菌种子液备用；步骤 4：取步骤3制得的益生菌种子液接种在复合苹果汁并在37℃～38℃条件下发酵16h。
可选的，益生菌种子液按2V％～3V％接种量接种于复合苹果汁中。
可选的，益生菌种子液按2V％接种量接种于复合苹果汁中，37℃条件下发酵16h。
与现有技术相比，本发明的优点为：
(1)本发明制备的具有减肥降脂功效的高多酚含量益生菌发酵苹果汁，采用新型益生菌菌种—德氏乳杆菌乳酸亚种、戊糖乳杆菌及两歧双歧杆菌复合益生菌种子液进行苹果汁发酵，与传统的发酵菌种相比，混菌发酵方式使苹果汁中结合态多酚变为游离态 多酚，明显提高了苹果汁中游离态多酚含量，增加苹果汁中功能成分含量，又叠加了益 生菌的功效，使苹果汁具有显著的减肥降脂功效。
(2)本发明制备的具有减肥降脂功效的高多酚含量益生菌发酵苹果汁，通过德氏乳杆菌乳酸亚种、戊糖乳杆菌及两歧双歧杆菌复合发酵苹果汁可以为苹果汁增加益生菌及高多酚单体的营养价值，可以提高苹果汁的降脂功能等保健作用。
(3)本发明制备的具有减肥降脂功效的高多酚含量益生菌发酵苹果汁，酸甜适口，口感柔和具有减肥降脂功效的多酚单体含量高，是一种多酚含量高且具有一定降脂减肥功效的益生菌发酵复合功能性苹果汁产品，具有广阔的市场前景。
具体实施方式
本发明以鲜榨苹果汁为原料，对德氏乳杆菌乳酸亚种、戊糖乳杆菌及两歧双歧杆菌 复合发酵苹果汁的工艺进行优化，以发酵苹果汁的活菌数、多酚单体含量以及感官评分为评价指标，之后测定在此优化条件下发酵苹果汁的理化指标，分析发酵苹果汁的理化 指标的动态变化，以期调控发酵苹果汁的感官品质。
本发明中的复合苹果汁由至少2种或2种以上的单一苹果汁混合而成。
本发明所用的发酵菌株均为公众能从国内外商业渠道购买的到的菌种，例如可从中 国工业微生物菌种保藏管理中心(CICC)采购获得。其中发酵乳杆菌21828、植物乳杆 菌21805在非专利文献中公开(孟掉琴，吴霞，岳田利，高振鹏，混菌发酵苹果浊汁的 益生菌筛选及其发酵动力学模型构建[J]，食品科学，2019，Vol.40，No.12 153)；申请 人保证自本专利申请日起的20年内向公众发放上述2种菌种。
苹果中富含多酚、氨基酸、维生素及矿物质等营养物质，其中，多酚作为重要的生物活性物质具有抗氧化、抗菌消炎、抑制肿瘤增殖、预防高血压和心血管疾病等作用。 在苹果中多酚以游离态及结合态的形式存在，结合态多酚往往与膳食纤维结合，如何使 结合态多酚变为游离态多酚，产生更大的功效，一直是研究人员研究的方向。益生菌发 酵可通过发酵方式使苹果汁中结合态多酚变为游离态多酚释放出来增加苹果汁中功能 成分含量，又叠加了益生菌的功效，使苹果汁的功能更好，开发保健功能更大的发酵苹 果汁产品，解决苹果汁加工多元化问题。
(1)复合苹果汁制备
a.不同苹果果汁制备
对苹果品种进行筛选，选出多酚含量高的苹果品种(阿克苏苹果、秦冠苹果和澳洲青苹果)。将充分成熟、无腐烂变质的苹果充分清洗、切块，在清水中浸泡15min后分 别破碎、榨汁，然后添加一定量的果胶酶(450mg/L)、纤维素酶(500mg/L)及淀粉 酶(600mg/L)酶解，酶解条件为：酶解温度45℃、酶解时间2h，超声波辅助处理2-3 次，然后粗过滤，得到不同品种的苹果果汁。
b.复合苹果汁
根据前期研究，将不同品种苹果果汁按照一定比例进行复配得到复合苹果汁，具体 质量比为阿克苏富士果汁：秦冠果汁：澳洲青苹果汁＝4：3：1。
(2)菌种选择与活化
选择植物乳杆菌21805、发酵乳杆菌21828以及植物乳杆菌21805：发酵乳杆菌21828＝1：1的体积比例混合菌种，将冷冻保藏的菌种解冻至室温，无菌条件下将菌种 接种到装有8mL MRS液体培养基的试管中，37℃下培养24h。反复活化(2～3)次后， 获得活力良好的菌种，备用。再将活化好的菌液按3V％的接种量取样，经过离心后将 上清液倒去，加入无菌生理盐水重新悬浮混匀后获得发酵用的乳酸菌悬液，接种复合苹 果汁，制备益生菌种子液，于37℃静置培养24h待用。
(3)发酵工艺
用植物乳杆菌21805、发酵乳杆菌21828以及植物乳杆菌21805：发酵乳杆菌21828＝1： 1的体积比例混合菌种发酵苹果果汁，通过优化接种量、发酵温度和发酵时间，获得发酵苹果汁。
研究发现，植物乳杆菌21805按2V％接种量接种于复合苹果汁中，37℃条件下培养箱培养16h，得到的发酵苹果汁中活菌数达到3.8×107CFU/mL，发酵苹果汁中的没食 子酸含量达到25.56mg/L；鞣花酸含量值31.71mg/L；根皮素含量12.50mg/L。
发酵乳杆菌21828按2V％接种量接种于复合苹果汁中，37℃条件下培养箱培养16h， 得到的发酵苹果汁中活菌数达到4.68×107CFU/mL，发酵苹果汁中的没食子酸含量达到 20.93mg/L；鞣花酸含量值57.60mg/L；根皮素含量6.03mg/L。
植物乳杆菌21805：发酵乳杆菌21828＝1：1的混合菌按2V％接种量接种于复合苹果 汁中，37℃条件下培养箱培养16h，得到的发酵苹果汁中活菌数达到5.42×107CFU/mL，发酵苹果汁中的没食子酸含量达到17.69mg/L；鞣花酸含量值29.23mg/L；根皮素含量8.65mg/L。
(4)动物试验功效性验证
对72只昆明小白鼠进行体重初始测量，跟据平均体重随机分为6组，1组空白组即普通饲料组，其余5组为试验组为高脂模型组，每组12只小鼠。且每两组间小鼠的体 重不存在明显差异。所有小鼠适应性喂养1周后，60只高脂模型组的小鼠投喂高脂饲料 而12只空白对照组小鼠投喂普通饲料。喂养14d后对各小鼠体重做准确称量，根据体 重数据，将5组高脂喂食的小鼠分为未发酵果汁、植物乳杆菌发酵苹果汁组、发酵乳杆 菌发酵苹果汁组、植物乳杆菌21805：发酵乳杆菌21828＝1：1的体积比例混合菌发酵 苹果汁组和模型试验组。若任意两组小鼠体重间不存在明显差异即随机分为未发酵果汁、 植物乳杆菌发酵苹果汁组、发酵乳杆菌发酵苹果汁组、混合菌发酵苹果汁组和模型试验 组。
除空白组外，其他各组小鼠每天投喂高脂饲料，在高脂饮食的基础上每天对小鼠灌 胃未发酵果汁或发酵苹果汁。剂量如下：未发酵果汁(100％未发酵苹果汁)、植物乳 杆菌发酵苹果汁、发酵乳杆菌发酵苹果汁组、植物乳杆菌21805：发酵乳杆菌21828＝1： 1的体积比例混合菌发酵苹果汁组，每只小鼠最初灌胃剂量0.8mL，随后根据体重变化 调整灌胃剂量。空白组和高脂模型组灌胃等量的无菌生理盐水，各组小鼠自由饮水、摄 食，每隔1天记录小鼠的体质量。连续给药31天，末次给药后对小鼠禁食不禁水12h。 将小鼠麻醉后断颈处死，摘眼球取血离得血清，放入-20℃冰箱待用；解剖取附睾、肾 脏周围脂肪称重，取其器官称重；取部分肝组织用10％中性福尔马林固定，进行石蜡包 埋，用于后续试验观察。
a.发酵苹果汁对小鼠血脂水平的影响
在灌胃期间，各组小鼠均能正常取食，毛洁白而具光泽，除个别鼠间打架咬伤外无排稀便、呕吐等额外病理现象出现。未发酵果汁、发酵苹果汁灌胃31d后，各组小鼠血 脂生化指标的变化见表1。
表1发酵苹果汁对高血脂症小鼠血脂生化指标的影响
Figure BDA0002406530540000051
注：以普通饲料组对照，a、b极显著P＜0.01,与高脂模型组比较a、b为显著P＜0.05，a、b与c为极显著P＜ 0.01。-为对照组灌胃无浓度差别的0.9％的生理盐水。
由表1可知，采用未发酵果汁、植物乳杆菌发酵苹果汁、发酵乳杆菌发酵苹果汁组、混合菌发酵苹果汁组为灌胃原材料，分四个不同灌胃剂量，经31d的灌胃、同时高脂喂 养试验发现，发酵的苹果汁能降低小鼠血清中TC、LDL-C含量，提升HDL-C含量，但 是效果不明显。
b.发酵苹果汁对小鼠体重、肝脏指数以及AI的影响
对小鼠连续灌胃未发酵果汁、发酵苹果汁31天，对其体重、肝脏指数以及动脉粥样硬化指数值AI的影响情况见表2。
表2各组小鼠脂肪系数、体重和AI值表
Figure BDA0002406530540000061
Figure BDA0002406530540000062
Duncun检验显著性水平(P<0.05)。
由表2可知，一个月的发酵果汁灌胃试验对小鼠体重及脂肪系数间产生了影响，说明发酵苹果汁能有效降低小鼠体重值，使其体重增量较空白对照组数值要低。脂肪系数 上组间差异比较明显，高脂模型组比混合菌发酵苹果汁组的高2.96％，此处验证了发酵 苹果汁能抑制小鼠脂肪系数值。AI值试验组与高脂模型组小鼠比较，说明发酵苹果汁 能使小鼠的AI值降低。上述几种菌种及混合菌发酵苹果汁的作用不明显。
(5)感官评定
发酵苹果汁的感官要保证产品的口感。本试验选择12名受过感官品尝训练的人员组成评定小组，对植物乳杆菌发酵苹果汁、发酵乳杆菌发酵苹果汁、植物乳杆菌21805： 发酵乳杆菌21828＝1：1的体积比例混合菌发酵苹果汁样品的气味、色泽、酸甜度、口 感、组织状态、整体可接受程度进行评价，感官评定参考标准见表3。
表3益生菌发酵苹果汁感官评分标准
Figure BDA0002406530540000063
Figure BDA0002406530540000071
取(4)中得到的植物乳杆菌发酵苹果汁进行感官评定，酸甜度评分在4～6分之间，说明所发酵苹果汁较酸；整体可接受性在6～8分之间，说明所发酵产品还可以。对发 酵乳杆菌发酵苹果汁进行感官评定，酸甜度评分在6～8分之间，说明所发酵苹果汁稍 微偏酸；整体可接受性在6～8分之间，说明所发酵产品还可以。混合菌发酵苹果汁进 行感官评定，酸甜度评分在6～8分之间，说明所发酵苹果汁稍微偏酸；整体可接受性 在6～8分之间，说明所发酵产品还可以。本实施例发酵苹果汁整体还可以，受感官评 定人员的轻微喜欢。
实施例1：
本实施例与具体实施方式相同，不同的是：
(1)菌种选择与活化
选择德氏乳杆菌乳酸亚种(L4)：戊糖乳杆菌(22160)：两歧双歧杆菌(6169) ＝1:1:1的体积比例混合菌株发酵复配。其中德氏乳杆菌乳酸亚种(L4)活菌数为 9.63×109±0.03CFU/mL，戊糖乳杆菌(22160)活菌数为9.82×109±0.04CFU/mL，两歧双 歧杆菌(6169)活菌数为4.68×108±0.01CFU/mL，3种菌株均为公众能从国内外商业渠 道购买的到的菌种，例如可从中国工业微生物菌种保藏管理中心(CICC)采购获得。
将冷冻保藏的菌种解冻至室温，无菌条件下将菌种接种到装有8mL MRS液体培养基的试管中，37℃下培养24h。反复活化(2～3)次后，获得活力良好的菌种，备用。再 将活化好的菌液按3V％的接种量取样，经过离心后将上清液倒去，加入无菌生理盐水 重新悬浮混匀后获得发酵用的乳酸菌悬液，接种复合苹果汁，制备益生菌种子液，于37℃ 静置培养24h待用。
(2)发酵工艺
用混合益生菌发酵苹果果汁，通过优化接种量、发酵温度和发酵时间，获得高多酚含量的发酵苹果汁。
益生菌种子液按2V％接种量接种于复合苹果汁中，37℃条件下培养箱培养16h，得到的发酵苹果汁中活菌数达到8.2×108CFU/mL，发酵苹果汁中的没食子酸含量达到91.88mg/L；鞣花酸含量值275.90mg/L；根皮素含量190.50mg/L。
(3)动物试验功效性验证
对72只昆明小白鼠进行体重初始测量，跟据平均体重随机分为6组，1组空白组即普通饲料组，其余5组为试验组为高脂模型组，每组12只小鼠。且每两组间小鼠的体 重不存在明显差异。所有小鼠适应性喂养1周后，60只高脂模型组的小鼠投喂高脂饲料 而12只空白对照组小鼠投喂普通饲料。喂养14d后对各小鼠体重做准确称量，根据体 重数据，将5组高脂喂食的小鼠分为未发酵果汁、发酵苹果汁灌胃高剂量组、中剂量组、 低剂量组和模型试验组。其中，体重涨幅最大的一组小鼠作为高剂量灌胃组、依次为中、 低剂量组、未发酵果汁，选取体重涨幅最小的一组小鼠为模型试验组。若任意两组小鼠 体重间不存在明显差异即随机分为高、中、低剂量组、未发酵果汁和模型组。
除空白组外，其他各组小鼠每天投喂高脂饲料，在高脂饮食的基础上每天对小鼠灌 胃未发酵果汁或发酵苹果汁。剂量如下：未发酵果汁(100％未发酵苹果汁)、发酵苹 果汁低(25％发酵苹果汁、75％无菌生理盐水)、中(50％发酵苹果汁、50％无菌生理 盐水)、高剂量(纯发酵苹果汁)组，每只小鼠最初灌胃剂量0.8mL，随后根据体重变化 调整灌胃剂量。空白组和高脂模型组灌胃等量的无菌生理盐水，各组小鼠自由饮水、摄 食，每隔1天记录小鼠的体质量。连续给药31天，末次给药后对小鼠禁食不禁水12h。 将小鼠麻醉后断颈处死，摘眼球取血离得血清，放入-20℃冰箱待用；解剖取附睾、肾 脏周围脂肪称重，取其器官称重；取部分肝组织用10％中性福尔马林固定，进行石蜡包 埋，用于后续试验观察。
c.发酵苹果汁对小鼠血脂水平的影响
在灌胃期间，各组小鼠均能正常取食，毛洁白而具光泽，除个别鼠间打架咬伤外无排稀便、呕吐等额外病理现象出现。未发酵果汁、发酵苹果汁灌胃31d后，各组小鼠血 脂生化指标的变化见表4。
表4发酵苹果汁对高血脂症小鼠血脂生化指标的影响
Figure BDA0002406530540000091
注：以普通饲料组对照，a、b极显著P＜0.01,与高脂模型组比较a、b为显著P＜0.05，a、b与c为极显著P＜ 0.01。-为对照组灌胃无浓度差别的0.9％的生理盐水。
由表4可知，采用未发酵果汁、混合益生菌发酵苹果汁为灌胃原材料，分四个不同灌胃剂量，经31d的灌胃、同时高脂喂养试验发现，混合益生菌发酵的苹果汁能有效降 低小鼠血清中TC、LDL-C含量同时显著提升HDL-C含量(P＜0.05)。
d.发酵苹果汁对小鼠体重、肝脏指数以及AI的影响
对小鼠连续灌胃未发酵果汁、发酵苹果汁31天，对其体重、肝脏指数以及动脉粥样硬化指数值AI的影响情况见表5。
表5各组小鼠脂肪系数、体重和AI值表
Figure BDA0002406530540000092
Figure BDA0002406530540000093
Duncun检验显著性水平(P<0.05)。
由表5可知，一个月的发酵果汁灌胃试验对小鼠体重及脂肪系数间产生了显著性影 响(P＜0.05)，高脂模型组小鼠比试验组小鼠平均增重值高7.57g，而一个半月的高脂投喂使模型组小鼠较空白组小鼠平均增重8.38g，说明发酵苹果汁能有效降低小鼠体重值，使其体重增量较空白对照组数值还要低。脂肪系数上组间差异最明显，模型组为高 剂量组的4倍，随着灌胃浓度的减小，小鼠附睾与肾脏间脂肪含量值逐渐增大，此处验 证了发酵苹果汁能显著抑制小鼠脂肪系数值，甚至降低到空白组均值以下。AI值试验 组与空白组小鼠较为接近，说明发酵苹果汁能使小鼠的AI值稳定在正常范围，而模型 组小鼠AI值过高，是正常值的1.42倍。此处验证了发酵苹果汁能一定程度降低小鼠患 动脉粥样硬化的风险。肝脏指数方面组间差异不明显，可能是由于灌胃与饲养时间不够 长，脏器指数这类缓慢变化的指标变化程度不明显。
(4)感官评定
发酵苹果汁的感官要保证产品的口感。本试验选择12名受过感官品尝训练的人员组成评定小组，对样品的气味、色泽、酸甜度、口感、组织状态、整体可接受程度进行 评价，感官评定参考标准见表6。
表6益生菌发酵苹果汁感官评分标准
Figure BDA0002406530540000101
取(4)中得到的发酵苹果汁进行感官评定，酸甜度评分在6～8分之间，说明所发酵苹果汁酸甜度能获得大家认可；整体可接受性在7～9分之间，说明所发酵产品比较 受欢迎。本实施例发酵苹果汁整体比较受感官评定人员的喜爱。
实施例2：
本实施例与实施例1相同，不同的是：
苹果汁的发酵：益生菌种子液按2V％接种量接种于复合苹果汁中，38℃条件下培养 箱培养16h，得到的发酵苹果汁中活菌数达到8.3×108CFU/mL，发酵苹果汁中的没食子酸含量达到94.52mg/L；鞣花酸含量值280.36mg/L；根皮素含量195.32mg/L。
经该实施例饲喂小鼠的体重增长率为21.35％，低于高脂组；该实施例组小鼠血清中的TC、TG、HDL-c值分别为2.42、0.46、4.23，均低于高脂组，具有一定的调脂效 果。
实施例3：
本实施例与实施例1相同，不同的是：
苹果汁的发酵：益生菌种子液按3V％接种量接种于复合苹果汁中，38℃条件下培养 箱培养16h，得到的发酵苹果汁中活菌数达到8.4×108CFU/mL，发酵苹果汁中的没食子酸含量达到92.53mg/L；鞣花酸含量值278.51mg/L；根皮素含量197.54mg/L。
经该实施例饲喂小鼠的体重增长率为21.35％，低于高脂组；该实施例组小鼠血清中的TC、TG、HDL-c值分别为2.49、0.47、4.17，均低于高脂组，具有一定的调脂效 果。
上面对本发明的实施例进行了描述，但是本发明并不局限于上述的具体实施 方式，上述的具体实施方式仅仅是示意性的，而不是限制性的，本领域的普通技 术人员在本发明的启示下，在不脱离本发明宗旨和权利要求所保护的范围情况下， 均属于本发明的保护之内。

Claims (10)

1.一种具有减肥降脂功效的高多酚含量益生菌发酵苹果汁，其特征在于，原料包括复合苹果汁和益生菌，所述益生菌为德氏乳杆菌乳酸亚种(L4)、戊糖乳杆菌(22160)和两歧双歧杆菌(6169)；
益生菌培养得益生菌种子液，所述益生菌种子液接种于复合苹果汁中发酵即得。
2.如权利要求1所述的具有减肥降脂功效的高多酚含量益生菌发酵苹果汁，其特征在于，所述三种益生菌添加量相同；
所述益生菌种子液由活化后的益生菌菌株于37℃静置培养24h即得。
3.如权利要求2所述的具有减肥降脂功效的高多酚含量益生菌发酵苹果汁，其特征在于，所述复合苹果汁的质量配比为阿克苏富士汁：秦冠汁：澳洲青苹汁＝4：3：1。
4.如权利要求3所述的具有减肥降脂功效的高多酚含量益生菌发酵苹果汁，其特征在于，所述阿克苏富士果汁，是在阿克苏富士苹果汁中添加果胶酶(450mg/L)、纤维素酶(500mg/L)和淀粉酶(600mg/L)，于45℃的条件下酶解2h，再于超声波辅助处理2-3次，过滤得阿克苏富士果汁；
所述秦冠果汁，是在秦冠苹果汁中添加果胶酶(450mg/L)、纤维素酶(500mg/L)和淀粉酶(600mg/L)，于45℃的条件下酶解2h，再于超声波辅助处理2-3次，过滤得秦冠果汁；
所述澳洲青苹果汁，是在澳洲青苹果汁中添加果胶酶(450mg/L)、纤维素酶(500mg/L)和淀粉酶(600mg/L)，于45℃的条件下酶解2h，再于超声波辅助处理2-3次，过滤得澳洲青苹果汁。
5.如权利要求1-4任一所述的具有减肥降脂功效的高多酚含量益生菌发酵苹果汁，其特征在于，所述发酵苹果汁的发酵条件为：益生菌种子液按2V％～3V％接种量接种于复合苹果汁，37～38℃的温度下发酵16h。
6.如权利要求5所述的具有减肥降脂功效的高多酚含量益生菌发酵苹果汁，其特征在于，益生菌种子液按2V％接种量接种于复合苹果汁中，37℃条件下发酵16h。
7.一种具有减肥降脂功效的高多酚含量益生菌发酵苹果汁的制备方法，其特征在于，所述苹果汁为权利要求1-6任一所述的具有减肥降脂功效的高多酚含量益生菌发酵苹果汁。
8.根据权利要求7所述的具有减肥降脂功效的高多酚含量益生菌发酵苹果汁的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤1：苹果汁的制备：在阿克苏富士苹果汁中添加果胶酶(450mg/L)、纤维素酶(500mg/L)和淀粉酶(600mg/L)，于45℃的条件下酶解2h，再于超声波辅助处理2-3次，过滤得阿克苏富士果汁；
在秦冠苹果汁中添加果胶酶(450mg/L)、纤维素酶(500mg/L)和淀粉酶(600mg/L)，于45℃的条件下酶解2h，再于超声波辅助处理2-3次，过滤得秦冠果汁；
在澳洲青苹果汁中添加果胶酶(450mg/L)、纤维素酶(500mg/L)和淀粉酶(600mg/L)，于45℃的条件下酶解2h，再于超声波辅助处理2-3次，过滤得澳洲青苹果汁；
步骤2：取步骤1中得到的阿克苏富士果汁、秦冠果汁和澳洲青苹果汁，按照质量比为4：3：1得到复合苹果汁；
步骤3：将体积比为德氏乳杆菌乳酸亚种(L4)：戊糖乳杆菌(22160)：两歧双歧杆菌(6169)＝1:1:1的益生菌活化，活化后的益生菌菌株于37℃静置培养24h得到益生菌种子液备用；
步骤4：取步骤3制得的益生菌种子液接种在复合苹果汁并在37℃～38℃条件下发酵16h。
9.根据权利要求8所述的具有减肥降脂功效的高多酚含量益生菌发酵苹果汁的制备方法，其特征在于，所述益生菌种子液按2V％～3V％接种量接种于复合苹果汁中。
10.根据权利要求9所述的具有减肥降脂功效的高多酚含量益生菌发酵苹果汁的制备方法，其特征在于，所述益生菌种子液按2V％接种量接种于复合苹果汁中，37℃条件下发酵16h。
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