CN111295386B

CN111295386B - 噻吩并吡啶衍生物及含有该衍生物的药物组合物

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Publication number: CN111295386B
Application number: CN201980005460.4A
Authority: CN
Inventors: 李贤浩; 朴骏镐; 许善哲; 文哉喜; 申在植; 洪承佑; 朴胤善; 金照燮; 李玿熙; 金孝珍; 朴慧彬
Original assignee: Weimaike Biology Co ltd
Current assignee: Weimaike Biology Co ltd
Priority date: 2018-03-08
Filing date: 2019-03-08
Publication date: 2022-09-06
Anticipated expiration: 2039-03-08
Also published as: BR112020008663A2; EP3762392A1; US20210317133A1; EP3762392B1; US11447500B2; AU2019237715B2; JP2021500378A; AU2019237715A1; CA3072169C; WO2019182274A1; KR102221689B1; JP6955630B2; CA3072169A1; EP3762392A4; KR20190106802A; CN111295386A

Abstract

式1所示的噻吩并吡啶衍生物化合物或其药学上可接受的盐对蛋白激酶活性具有优异的抑制作用，因此，包含该化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物可有效地用于预防或治疗与蛋白激酶活性相关的疾病。

Description

噻吩并吡啶衍生物及含有该衍生物的药物组合物

技术领域

本发明涉及噻吩并吡啶衍生物及含有该衍生物的药物组合物。更具体地，本发明涉及抑制蛋白激酶活性并因此可用于预防或治疗与蛋白激酶活性有关的疾病的新型噻吩并吡啶衍生物，以及包含该衍生物的药物组合物。

背景技术

蛋白激酶是使其他蛋白质磷酸化以调节蛋白质的活性、位置和功能，从而控制其各种细胞内过程的酶。示例性的蛋白激酶包括Ab1、ACK、ALK、Arg、ARK5、Aurora、Ax1、Bmx、BTK、CDK、CHK、c-Kit、c-MET、c-RAF、c-SRC、EGFR、FAK、Fes、FGFR、Flt3、GSK3、IGF、IKK、JAK、Lck、LIMK、Lyn、MEK、Mer、MK-2、P38alpha、PDGFR、PDK、Pim、PKA、PKB、PKCR、Plk-1/3、Ret、Ron、Ros、Rse、Tie、Trk、Tyro3、VEGFR、YES等。这些蛋白激酶的控制功能异常与诸如癌症、免疫疾病、神经系统疾病、代谢疾病和感染的疾病机制密切相关。

c-MET是胚胎发育和伤口愈合必不可少的细胞膜受体。HGF(肝细胞生长因子)是c-MET受体的配体，并促进肿瘤的生长、血管生成、侵袭和转移(Bottaro DP等,Science1991,251(4995):802-804)。癌细胞中c-MET异常激活与化疗预后的恶化密切相关，并且在多种癌症疾病(如非小细胞肺癌)中观察到c-MET的过度表达和突变。由于肿瘤的侵袭和转移是癌症患者死亡的主要原因，因此抑制c-MET信号传导可能在癌症治疗中有效。

另一方面，RON(recepteur d’origine nantais)是c-MET家族的蛋白质受体，是肝脏分泌的巨噬细胞刺激蛋白(MSP)的受体，可调节巨噬细胞的作用(Zhou YQ et al.,Oncogene 2003,22(2):186-197)。据报道，RON的活性在肿瘤发生、发展和转移中具有重要功能，并且在结直肠癌和乳腺癌中的过表达或过度活跃导致肿瘤浸润和转移并抑制细胞凋亡(Faham N.等.,Cold Spring Harb Symp Quant Biol.2016；Wagh PK等.,Adv CancerRes.2008；Wang MH等,Acta Pharmacologica Sinica.2006；Camp ER等,Ann SurgOncol.2005)。

因此，需要在包括结直肠癌在内的各种类型的癌症中抑制RON激酶活性的基于分子的抗癌剂和抗体抗癌剂。

发明内容

技术问题

本发明的发明人研究了可用作蛋白激酶抑制剂的化合物，并证实了具有特定结构的噻吩并吡啶衍生物可有效抑制蛋白激酶的活性，由此可以有效地用于预防或治疗与此有关的疾病，从而完成了本发明。

因此，本发明的目的是提供新型的噻吩并吡啶衍生物，其可以抑制蛋白激酶的活性，因此可以有效地用于治疗与其相关的疾病，以及包含该衍生物的药物组合物。

解决问题的方案

为了实现上述目的，本发明提供了式1所示的噻吩并吡啶衍生物化合物或其药学上可接受的盐。

本发明还提供了一种药物组合物，其包含式1所示的化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的添加剂。

本发明还提供了一种式1所示的化合物或其药学上可接受的盐在抑制蛋白激酶的活性中的用途及其在制造用于抑制蛋白激酶的活性的药物中的用途。

本发明还提供了一种式1所示的化合物或其药学上可接受的盐在预防或治疗与蛋白激酶活性有关的疾病中的用途，及其在制造用于预防或治疗与蛋白激酶活性有关的疾病的药物中的用途。

本发明还提供了一种抑制蛋白激酶活性的方法，其包括将式1所示的化合物或其药学上可接受的盐给予需要其的受试者。

本发明还提供了一种预防或治疗与蛋白激酶活性有关的疾病的方法，该方法包括将式1所示的化合物或其药学上可接受的盐给予需要其的受试者。

本发明的有益效果

式1所示的噻吩并吡啶衍生物化合物或其药学上可接受的盐对蛋白激酶的活性具有优异的抑制作用，因此，包含其的药物组合物可有效地用于预防或治疗与蛋白激酶的活性相关的疾病。

附图说明

图1和图2是分别显示在RON活化的(KM12C)和RON突变的(HT29)结肠癌细胞系中根据测试化合物的浓度(1μM和5μM)的细胞死亡率(％)的图。

具体实施方式

在下文中，将详细描述本发明。

除非另有说明，本文所用的术语“卤素”是指F、Cl、Br或I。

除非另有说明，术语“烷基”是指直链或支链的饱和烃基。例如，“C_1-10烷基”是指具有由1至10个碳原子组成的骨架的烷基。具体而言，C_1-10烷基可包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、叔戊基、仲戊基、新戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基等。

术语“卤代烷基”是指被一个或多个卤素原子取代的烷基。具体地，卤代烷基可以是被两个或更多个相同种类的卤素原子取代或被两个或更多种类的卤素原子取代的烷基。

术语“杂环”是指具有一个或多个杂原子的芳香族或非芳香族环，其可以是饱和或不饱和的并且可以是单环或多环的。例如，“4至10元杂环”是指包含构成骨架的包括杂原子和碳原子的总共4至10个原子的杂环。具体地，所述4至10元杂环的实例可以包括氮杂环丁烷、二氮杂环丁烷、吡咯烷、吡咯、咪唑啉、咪唑、吡唑烷、吡唑、噁唑烷、噁唑、异噁唑烷、异噁唑、噻唑烷、噻唑、异噻唑烷、异噻唑、哌啶、吡啶、哌嗪、二嗪、吗啉、硫代吗啉、氮杂环庚烷、二氮杂环庚烷等。

术语“杂原子”是指除碳(C)以外的原子，特别是氮(N)、氧(O)或硫(S)原子。

术语“取代”是指用取代基取代分子结构中的氢原子，使得不超过指定原子上的化合价，并且由该取代产生化学稳定的化合物。例如，“基团A被取代基B取代”是指与构成基团A的骨架的原子如碳原子连接的氢原子被取代基B取代，基团A和取代基B形成共价键。

本发明提供了一种式1所示的化合物或其药学上可接受的盐：

[式1]

其中，

R₁和R₂各自独立地为H、卤素、C_1-10烷氧基或卤代C_1-10烷基；

X为-C(-R₃)＝或-N＝；

R₃和R₄各自独立地为H、卤素、C_1-10烷基或C_1-10烷氧基；

R₅为H、卤素或C_1-10烷基；且

R₆和R₇各自独立地为H、C_1-10烷基、或-(CH₂)_n-Y-R₈，或R₆和R₇与它们所连接的N原子一起形成4至10元杂环，

其中，n是0-10的整数；

Y为-O-、-C(＝O)-、-C(＝O)-O-、-S-或-S(＝O)₂-；

R₈是直链或支链的C_1-10烷基，其中R₈是未被取代的或被一个或多个选自由卤素、氨基、羟基和C_1-6烷氧基组成的组的取代基取代；

并且，所述杂环除了与R₆和R₇连接的N原子之外，还任选地包含一个或两个选自由N、O和S组成的组的杂原子，并且所述杂环是未被取代的或被一个或多个选自卤素和C_1-6烷基的取代基取代。

另外，所述C_1-10烷基可包括C_1-6烷基、C_1-3烷基、C_3-10烷基、C_3-6烷基、C_6-10烷基等。另外，所述C_1-10烷氧基可以包括C_1-6烷氧基、C_1-3烷氧基、C_3-10烷氧基、C_3-6烷氧基、C_6-10烷氧基等。另外，所述4至10元杂环可包括4至7元杂环、4至6元杂环、5至7元杂环、5或6元杂环等。

根据一个实施方案，在式1中，R₁和R₂各自独立地为H、卤素、甲氧基或-CF₃，其中所述卤素可以为F、Cl、Br或I。

根据另一个实施方案，在式1中，R₃和R₄各自独立地为H、卤素、甲基、甲氧基或乙氧基，其中，所述卤素可以为F、Cl、Br或I。

根据进一步的实施方案，在式1中，X为-C(-R₃)＝；且R₃和R₄各自独立地为H、卤素、甲基、甲氧基或乙氧基，但不同时为H。

根据更进一步的实施方案，在式1中，X为-N＝；且R₄是卤素、甲基、甲氧基或乙氧基，其中所述卤素可以是F、Cl、Br或I。

根据更进一步的实施方案，在式1中，R₅是H或卤素，其中所述卤素可以是F、Cl、Br或I。

根据更进一步的实施方案，在式1中，R₆和R₇各自独立地为H、C_1-10烷基或-(CH₂)_n-Y-R₈，但不同时为H。

根据更进一步的实施方案，在式1中，R₆和R₇各自独立地为H、C_1-6烷基、-C_1-6烷叉基-O-C_1-10烷基或-C(＝O)-O-C_1-10烷基，但不同时为H。进一步地，所述C_1-6烷叉基(alkylene)可以是-CH₂-、-C₂H₄-、-C₃H₆-、-C₄H₈-、-C₅H₁₀-、-C₆H₁₂-等。另外，所述C_1-10烷基可以是甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、叔戊基、仲戊基、新戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基等。

根据更进一步的实施方案，在式1中，R₆和R₇与它们所连接的N原子一起形成

其中R_a和R_b各自独立地为C_1-3烷叉基(alkylene)，A为-N(-R₉)-或-O-，且R₉为C_1-6烷基。作为具体实例，R₆和R₇与它们所连接的N原子一起可以形成杂环基，例如氮杂环丁烷基、二氮杂环丁烷基、吡咯烷基、吡咯基、咪唑烷基、咪唑基、吡唑烷基、吡唑基、噁唑烷基、噁唑基、异噁唑烷基、异噁唑基、噻唑烷基、噻唑基、异噻唑烷基、异噻唑基、哌啶基、吡啶基、哌嗪基、二嗪基、吗啉-4-基(morpholino)、硫代吗啉-4-基(thiomorpholino)、氮杂环庚基和二氮杂环庚基，它们任选地被C_1-6烷基取代。此外，R_a和R_b可各自独立地为-CH₂-、-C₂H₄-或-C₃H₆-。另外，R₉可以是甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、叔戊基、仲戊基、新戊基、己基等等。

根据更进一步的实施方案，在式1中，R₁和R₂各自独立地为H、卤素、甲氧基或-CF₃；R₃和R₄各自独立地为H、卤素、甲基、甲氧基或乙氧基；R₅是H或卤素；R₆为-C₂H₄-O-CH₃且R₇为H、甲基或叔丁氧羰基，或R₆和R₇连接在一起形成吗啉-4-基或甲基哌嗪基。所述卤素可以是F、Cl、Br或I。

根据一个实施方案，所述式1的化合物可以由以下式1a表示。

[式1a]

其中，R₁至R₇与上式1中的定义相同。

具体地，在上式1a中，R₁和R₂可以各自独立地为H、卤素或-CF₃。进一步地，R₃和R₄可以各自独立地为H、卤素、甲基、甲氧基或乙氧基，但不同时为H。另外，R₅可以为H或卤素。R₆可以是-C_1-6烷叉基-O-C_1-10烷基，且R₇可以是H、C_1-6烷基或-C(＝O)-O-C_1-10烷基。

更具体地，在上式1a中，R₁和R₂可以各自独立地为H、卤素或-CF₃；R₃和R₄可各自独立地为H、卤素、甲基、甲氧基或乙氧基；R₅可以是H或卤素；R₆可以是-C₂H₄-O-CH₃；并且，R₇可以是H、甲基或叔丁氧羰基。

根据另一个实施方案，所述式1的化合物可以由以下式1b表示。

[式1b]

其中，R₁至R₇与上式1中的定义相同。

具体地，在上式1b中，R₁和R₂可以各自独立地为H、卤素或-CF₃。进一步地，R₄可以为卤素、甲基、甲氧基或乙氧基。另外，R₅可以为H或卤素。R₆可以是-C_1-6烷叉基-O-C_1-10烷基，且R₇可以是H、C_1-6烷基或-C(＝O)-O-C_1-10烷基。

更具体地，在上式1b中，R₁和R₂可以各自独立地为H、卤素或-CF₃；R₄可为卤素、甲基、甲氧基或乙氧基；R₅可以是H或卤素；R₆可以是-C₂H₄-O-CH₃；并且，R ₇可以是H、甲基或叔丁氧羰基。

根据更进一步的实施方案，所述式1的化合物可以由以下式1c表示。

[式1c]

其中，R₁至R₅与上式1中的定义相同；R_a和R_b可各自独立地为C_1-3烷叉基；A可以是-N(-R₉)-或-O-；且R₉可以为C_1-6烷基。

具体地，在上式1c中，R₁和R₂可以各自独立地为H、卤素或-CF₃。进一步地，R₃和R₄可以各自独立地为H、卤素、甲基、甲氧基或乙氧基，但不同时为H。另外，R₅可以为H或卤素。进一步地，R_a和R_b可以连接在一起形成吗啉-4-基或甲基哌嗪基。

根据更进一步的实施方案，所述式1的化合物可以由以下式1d表示。

[式1d]

具体地，在上式1d中，R₁和R₂可以各自独立地为H、卤素或-CF₃。进一步地，R₄可为卤素、甲基、甲氧基或乙氧基。另外，R₅可以为H或卤素。进一步地，R_a和R_b可以连接在一起形成吗啉-4-基或甲基哌嗪基。

本发明包括所述式1化合物的药学上可接受的盐。

所述药学上可接受的盐对人应具有低毒性，并且对母体化合物的生物学活性和理化性质不应有任何不利影响。

例如，所述药学上可接受的盐可以是由药学上可接受的游离酸形成的酸加成盐。

作为所述游离酸，可以使用无机酸或有机酸。所述无机酸可以是盐酸、硫酸、硝酸、磷酸、高氯酸、溴酸等。所述有机酸可以是乙酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、富马酸、马来酸、丙二酸、苯二甲酸、琥珀酸、乳酸、柠檬酸、葡糖酸、酒石酸、水杨酸、苹果酸、草酸、苯甲酸、亚甲基双羟萘酸、天冬氨酸、谷氨酸等。

可以通过常规方法获得酸加成盐，例如，通过将所述式1的化合物溶解在过量的酸性水溶液中，并使用与水混溶的有机溶剂(例如甲醇、乙醇、丙酮、或乙腈)使所述的盐析出。

另外，所述药学上可接受的盐可以是碱金属盐(例如钠盐)或碱土金属盐(例如钾盐)。

所述碱金属盐或碱土金属盐可以通过例如将所述式1的化合物溶解在过量的碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物溶液中，滤出不溶解的化合物盐并将所得到的滤液蒸发并干燥而获得。

进一步地，本发明的化合物可以具有手性碳中心，因此可以以R或S异构体、外消旋化合物、单独的对映异构体或其混合物、单独的非对映异构体或其混合物的形式存在。所有这些立体异构体及其混合物都可以落入本发明的范围内。

另外，本发明的化合物可以包括所述式1化合物的水合物和溶剂合物。所述水合物和溶剂合物可以使用已知方法制备，并且优选是无毒的和水溶性的。特别地，所述水合物和溶剂合物可优选分别与1-5个分子的水和醇溶剂(特别是乙醇等)结合。

所述式1化合物的具体实例如下：

1)4-乙氧基-N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

2)N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(4-氟苯基)-4-甲氧基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

3)N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基]吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-4-甲氧基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

4)N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

5)N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基]吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

6){[6-(7-{4-[4-乙氧基-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺基]-2-氟苯氧基}噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基]甲基}(2-甲氧基乙基)氨基甲酸叔丁酯；

7)4-乙氧基-N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

8)1-(4-氯苯基)-4-乙氧基-N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

9)N-(3-氯-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(4-氟苯基)-4-甲氧基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

10)N-(2-氯-4-{[-2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(4-氟苯基)-4-甲氧基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

11)1-(4-氟苯基)-4-甲氧基-N-(4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基)氧基)苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

12)4-乙氧基-N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-2-氧代-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

13)1-(4-氯苯基)-N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-4-甲氧基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

14)4-乙氧基-N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(3-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

15)4-乙氧基-N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(4-甲氧基苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

16)4-乙氧基-N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(3-甲氧基苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

17)N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-甲酰胺；

18)N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-5-甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氢哒嗪-4-甲酰胺；

19)N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-3-氧代-2-苯基-2,3-二氢哒嗪-4-甲酰胺；

20)N-(3-氟-4-[{2-(5-[{(2-甲氧基乙基)氨基}甲基]吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基}氧基]苯基)-2-(4-氟苯基)-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-甲酰胺；

21)N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-6-甲基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

22)N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(4-氟苯基)-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

23)5-溴-N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

24)5-氯-N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

25)N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(4-氟苯基)-4-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

26)N-(2-氯-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-4-乙氧基-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

27)N-(3-氟-4-([2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基)甲基]吡啶-2-基}噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基)氧基]苯基}-1-(4-氟苯基)-5,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

28)N-(3-氟-4-{[-2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-4-甲基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

29)N-(3-氟-4-{[-2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(4-氟苯基)-5-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

30)4-乙氧基-N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)(甲基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

31)4-乙氧基-N-[3-氟-4-({2-[5-(吗啉-4-基甲基)吡啶-2-基]噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基}氧基)苯基]-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

32)4-乙氧基-N-[3-氟-4-({2-[5-(吗啉-4-基甲基)吡啶-2-基]噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基}氧基)苯基]-2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

33)4-乙氧基-N-{3-氟-4-[(2-{5-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]吡啶-2-基}噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基)氧基]苯基}-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

34)4-乙氧基-N-{3-氟-4-[(2-{5-[(-甲基哌嗪-1-基)甲基]吡啶-2-基}噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基)氧基]苯基}-2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

35)1-(4-氯苯基)-4-乙氧基-N-[3-氟-4-({2-[5-(吗啉-4-基甲基)吡啶-2-基]噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基}氧基)苯基]-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

36)N-[3-氯-4-({2-[5-(吗啉-4-基甲基)吡啶-2-基]噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基}氧基)苯基]-4-乙氧基-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；和

37)N-[2-氯-4-({2-[5-(吗啉-4-基甲基)吡啶-2-基]噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基}氧基)苯基]-4-乙氧基-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺。

本发明还提供了制备所述式1化合物的方法。

优选地，所述式1化合物可以通过以下反应方案中所示的方法制备，但是制备方法不限于此。特别地，本领域技术人员将充分认识到，可以使用本领域众所周知的技术通过多种方法来制备本发明所述的式1化合物。

以下反应方案1和2分步骤说明了制备本发明代表性化合物的方法。通过改变在以下制备步骤中使用的试剂和溶剂或改变反应顺序，可以制备本发明的几种化合物。另外，根据以下反应方案的范围内未包括的步骤制备了本发明实施例的一些化合物，这些化合物制备步骤在个别实施例中进行了详细描述。

根据一个实施方案，可以根据以下反应方案1的方法制备式1化合物。

[反应方案1]

在以上反应方案1中，R₁至R₇和X与式1中的定义相同，并且L是离去基团。

上述反应方案1从市售的或通过已知方法制备的醛化合物开始，通过总共五步得到所述式1化合物。

在下文中，将详细描述反应方案1的每个步骤。

在步骤1中，使醛化合物2与取代的胺化合物3进行一般的还原胺化反应以制备胺化合物4。这个反应可以使用碱如三甲胺和二异丙基乙胺进行，但是通常在弱酸性条件下，无需使用碱，使用可商购的氰基硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠等进行。作为反应溶剂，可以使用对反应没有不利影响的1,2-二氯乙烷、二氯甲烷、甲醇、乙醇、异丙醇等。对反应温度没有特别限制，但是通常，所述反应可以在从低温到温暖的温度范围内的温度下进行。优选地，所述反应可以在从低温到室温的温度下进行。

在步骤2中，将上述步骤1中制备的胺化合物4与可商购的噻吩并[3,2-b]吡啶5进行碳-碳偶联反应，以制备噻吩并吡啶化合物6。这个反应可以在可用于常见的碳-碳偶联反应的有机金属催化剂的存在下进行。可用于该目的的有机金属催化剂的实例包括镍(0)、钯(0)等。在该反应中，通常可以将钯(0)用作有机金属催化剂，例如，可以将四(三苯基膦)钯、乙酸钯等单独使用，或者与正丁基锂和氯化锌(II)组合使用来进行所述反应。另外，上述反应可以优选在对反应没有不利影响的溶剂中进行，例如N,N-二甲基甲酰胺、甲苯、乙腈、四氢呋喃等。对反应温度没有特别限制，但是通常，所述反应可以在从冷的温度到温暖的温度范围内的温度下进行。

在步骤3中，在碱如碳酸钾的存在下，将在上述步骤2中制备的噻吩并吡啶化合物6与市售的苯酚化合物反应，以制备苯氧基化合物7。这个反应是酚类化合物的常规醚形成反应，并在可用于该醚形成反应的碱的存在下进行。可以用于该目的的碱的实例包括氢化钠(NaH)、碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、醇钠、醇钾等。另外，上述反应优选在对反应没有不利影响的溶剂中进行，所述溶剂的实例包括二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、乙醚、甲苯、N,N-二甲基甲酰胺、乙腈、二苯醚等。对反应温度没有特别限制，但是通常，所述反应可以在从冷的温度到温暖的温度范围内的温度下进行。优选地，所述反应可以在温暖的温度下进行。

在步骤4中，在铁和氯化铵的存在下，将在上述步骤3中制备的苯氧基化合物7的硝基还原，以制备胺化合物8。这个反应是将硝基化合物还原为胺的反应，并且可以使用各种还原剂如氢、铁、氯化锡(II)、锌等进行还原。另外，上述反应可以优选使用对反应没有不利影响的溶剂例如二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、乙醇、四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺等进行。如果需要，可以将水用作助溶剂。反应温度没有特别限制，但通常，所述反应可以在室温至温暖的温度下进行。优选地，所述反应可以在温暖的温度下进行。

在步骤5中，使用偶联剂，将上述步骤4中制备的胺化合物8与羧酸化合物9进行一般的酰胺化反应制备式1化合物，所述羧酸化合物9可商购或通过已知方法制备。所述偶联剂可以使用市售的1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDCI)、1,3-二环己基碳二亚胺(DCC)、1,1-羰基二咪唑等。该反应可以在不使用碱的情况下进行，但是也可以在可用于酰胺化反应的通用碱的存在下进行，例如4-二甲基氨基吡啶、吡啶、三乙胺、二乙基异丙基胺、N-甲基吗啉、二甲基苯胺等。此外，上述反应可以优选在对反应没有不利影响的溶剂如乙腈、二甲基甲酰胺、二氯甲烷等中进行。对反应温度没有特别限制，但是通常，所述反应可以在从冷的温度到温暖的温度范围内的温度下进行。优选地，所述反应可以在室温下进行。

根据另一个实施方案，可以根据以下反应方案2的方法制备式1化合物。

[反应方案2]

在以上反应方案2中，R₁至R₇和X与式1中的定义相同，并且n是1至3的整数。

上述反应方案2从市售或通过已知方法制备的乙缩醛化合物开始，通过总共五个步骤得到式1化合物。

在下文中，将详细描述反应方案2的每个步骤。

在步骤1'中，使用偶联剂将可以使用国际专利公开号WO 2009/026717的方法容易地制备的乙缩醛-胺化合物10与羧酸化合物9进行酰胺化反应，从而制备乙缩醛-酰胺化合物11。所述反应通常在与上述反应方案1的步骤5中的由胺化合物8制备式1化合物的酰胺化反应相同的条件下进行。

在步骤2'中，将上述步骤1'中制备的缩醛-酰胺化合物11在酸性条件(例如盐酸、三氟乙酸等)下进行有机合成领域中已知的一般的脱保护反应，以制备醛化合物12。

在步骤3'中，使用还原剂将在上述步骤2'中制备的醛化合物12还原为醇化合物13。所述还原剂的实例包括氢化铝锂(LAH)、三乙酰氧基硼氢化钠、硼氢化钠(NaBH₄)、二异丁基氢化铝(DIBAL-H)等，它们是可商购的。所述反应优选在不会不利地影响反应的溶剂中进行。可以用于该目的的溶剂的实例包括四氢呋喃、乙醚、1,2-二氯乙烷、醇等。对反应温度没有特别限制，但是通常，所述反应可以在从冷的温度到温暖的温度范围内的温度下进行。优选地，所述反应可以在室温下进行。

在步骤4'中，使在上述步骤3'中制备的醇化合物13进行卤化反应以制备卤素化合物14。此时，所述卤素化合物的转化通常可以通过使用三溴化磷、四溴甲烷、氯化亚砜等用卤原子代替羟基来进行。此外，所述反应优选可以在不会不利地影响反应的溶剂中进行，例如氯仿、乙腈、二氯甲烷、醇(例如甲醇和乙醇)等。反应温度没有特别限制，但是通常，所述反应可以在从冷的温度到室温的温度下进行。

在步骤5'中，将在上述步骤4'中制备的所述卤素化合物14进行一般的胺化反应以制备式1化合物。通常在胺化反应中使用的示例性碱可以包括有机胺，例如吡啶、三乙胺、二乙基异丙胺等，以及金属盐，例如碳酸钾等。此外，所述反应可以优选在不会对反应产生不利影响的溶剂中进行，例如二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、乙醚、甲苯、N,N-二甲基甲酰胺、乙腈等。对反应温度没有特别限制，但是通常，所述反应可以在从冷的温度到温暖的温度范围内的温度下进行。优选地，所述反应可以在室温至温暖的温度下进行。

可以通过常规方法，例如柱色谱、重结晶等，分离和纯化在上述反应方案中产生的所需化合物。

由于式1的化合物或其药学上可接受的盐具有优异的抑制蛋白激酶活性的作用，因此该化合物或包含该化合物的药物组合物可有效地用于预防或治疗与蛋白激酶活性有关的疾病。

如本文所用，术语“预防”是指抑制或延迟上述疾病的发生、发展和复发的任何行为，并且术语“治疗”是指施用上述化合物后改善或有益地改变上述疾病的症状的任何行为。

本发明提供了一种式1所示的化合物或其药学上可接受的盐在预防或治疗与蛋白激酶活性相关的疾病中的用途。

本发明还提供了一种式1所示的化合物或其药学上可接受的盐在抑制蛋白激酶的活性中的用途。

本发明还提供了一种式1所示的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于预防或治疗与蛋白激酶活性相关的疾病的药物中的用途。

本发明还提供了一种式1所示的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于抑制蛋白激酶活性的药物中的用途。

本发明还提供了一种预防或治疗与蛋白激酶活性相关的疾病的方法，该方法包括将式1所示的化合物或其药学上可接受的盐给予对其有需要的受试者。

本发明还提供了一种抑制蛋白激酶活性的方法，该方法包括将式1所示的化合物或其药学上可接受的盐给予对其有需要的受试者。

本文所用的术语“有需要的受试者”是指已经或可能发展出与蛋白激酶活性相关的疾病的任何动物，例如猴子、牛、马、羊、猪、鸡、火鸡、鹌鹑、猫、狗、小鼠、大鼠、兔子和豚鼠，以及人(患者)；特别地，它可以指哺乳动物。另外，有需要的受试者可以是生物学样品。

本文所用的术语“施用”是指通过任何合适的方法向将预定物质提供给对其有需要的受试者，并且本发明的化合物可以通过任何常见途径来给药，只要其可以到达靶组织即可。

本发明还提供了一种用于抑制蛋白激酶活性的药物组合物，其包含式1所示的化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分。

本发明还提供了一种用于预防或治疗与蛋白激酶的活性相关的疾病的药物组合物，其包含式1所示的化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分。

本发明的化合物和药物组合物可以抑制c-MET家族的酪氨酸激酶，更具体地是RON酪氨酸激酶。此外，本发明的化合物和药物组合物可以抑制2型蛋白激酶ALK、Aurora B、AXL、DDR1、FLT3、KIT、LCK、LTK、MEK、MER、c-MET、RET、VEGFR2、TIE1、Tyro3等(Purnima Wagh等,Adv Cancer Res.2008,100:1-33)。

所述与蛋白激酶活性相关的疾病可以是癌症、牛皮癣、类风湿性关节炎、炎症性肠病或慢性阻塞性肺病。具体而言，所述癌症可以选自由乳腺癌、肺癌、胃癌、前列腺癌、子宫癌、卵巢癌、肾癌、胰腺癌、肝癌、结直肠癌、皮肤癌、头颈癌、和甲状腺癌组成的组。

本发明提供了一种药物组合物，其包含式1所示的化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的添加剂。

所述药物组合物可用于预防或治疗与蛋白激酶活性相关的疾病。或者，所述药物组合物可用于抑制蛋白激酶的活性。

本发明的药物组合物可包含0.1重量％至90重量％，特别是0.1重量％至75重量％，更特别是1重量％至50重量％的式1所示的化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分，基于所述组合物的总重量。

本发明的药物组合物可以包含常规的、无毒的药学上可接受的添加剂，其可以按照常规方法配制成制剂。例如，所述药物组合物可以进一步包含药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

用于本发明的组合物中的添加剂的实例可包括甜味剂、粘合剂、溶剂、增溶剂、润湿剂、乳化剂、等渗剂、吸附剂、崩解剂、抗氧化剂、防腐剂、润滑剂、填充剂、调味剂等。例如，所述添加剂可以是乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露醇、山梨糖醇、纤维素、甘氨酸、二氧化硅、滑石粉、硬脂酸、硬脂酸甘油酯(stearin)、硬脂酸镁、铝硅酸镁、淀粉、明胶、黄蓍胶、海藻酸、海藻酸钠、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、琼脂、水、乙醇、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、氯化钠、氯化钙、桔子香精、草莓香精、香草香精等。

本发明的组合物可以配制成各种制剂形式，用于口服施用(例如，片剂、丸剂、散剂、胶囊剂、糖浆剂或乳剂)或肠胃外施用(例如，肌内、静脉内或皮下注射)。

优选地，本发明的组合物可以配制成口服制剂，为此目的的添加剂的实例包括纤维素、硅酸钙、玉米淀粉、乳糖、蔗糖、右旋糖、磷酸钙、硬脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸钙、明胶、滑石粉、表面活性剂、助悬剂、乳化剂、稀释剂等。

具体地，用于口服的固体制剂包括片剂、丸剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂等。可以通过将至少一种赋形剂例如淀粉、碳酸钙、蔗糖、乳糖、明胶等混合到组合物中来配制这种固体制剂。除了简单的赋形剂，还可以使用润滑剂，例如硬脂酸镁和滑石粉。

此外，用于口服的液体制剂的实例包括混悬剂、溶液剂、乳剂，糖浆剂等。除了通常使用的简单稀释剂水和液体石蜡以外，还可以使用各种赋形剂，例如润湿剂、甜味剂、防腐剂等。

另外，用于肠胃外给药的制剂可包括无菌水溶液、非水溶剂、悬浮液、乳剂、冻干制剂和栓剂。对于非水溶液和悬浮液，可以使用丙二醇、聚乙二醇、植物油如橄榄油、可注射酯如油酸乙酯等。作为栓剂基质，可以使用Witepsol^TM、聚乙二醇、Tween^TM 61、可可脂、月桂脂(laurin fat)、甘油明胶等。另一方面，注射剂可包括常规添加剂，例如增溶剂、等渗剂、助悬剂、乳化剂、稳定剂、防腐剂等。

本发明的化合物或组合物可以以治疗有效量或药学上有效量给予患者。

本文所用的术语“治疗有效量”或“药学上有效量”是指足以预防或治疗对象疾病的化合物或组合物的量，其足以以可用于医学治疗的合理的收益/风险比来治疗疾病，不会引起副作用。所述有效量的水平可以根据包括患者的健康状况、疾病的类型和严重性、药物的活性、患者对药物的敏感性、给药方法、给药时间、给药时间、给药途径、释放速率、治疗时间、配制或共同给药的药物、以及医学领域众所周知的其它因素等来确定。

本发明的化合物或组合物可以作为单独的治疗剂或与其他治疗剂组合施用，可以与常规治疗剂顺序或同时施用，并且可以单剂量或多剂量施用。重要的是要考虑到所有上述因素，并且以能够获得最大效果而没有副作用的最小量进行给药，本领域技术人员可以容易地确定该量。

具体地，本发明组合物中化合物的有效量可以根据患者的年龄、性别和体重而变化，并且通常为每1kg体重0.1mg至1000mg或5mg至200mg，每天或每隔一天。它可以一天一次给药，也可以一天分成三剂给药。但是，所述有效量可以根据给药途径和患者疾病的严重程度、性别、体重、年龄等来增加或减少，因此，本发明的范围不限于此。

优选地，本发明的化合物或组合物可以与化学疗法、放射疗法、免疫疗法、激素疗法、骨髓移植、干细胞替代疗法、其他生物疗法、外科手术干预或其组合联合施用以用于肿瘤治疗。例如，本发明的化合物或组合物可以与长期进行的其他治疗策略一起用作辅助疗法，或者可以用于在肿瘤消退或化学预防疗法后维持重症患者的状况。

优选地，本发明的药物组合物可以进一步包含至少一种活性成分，并且所述进一步的活性成分可以是抗增殖化合物，例如芳香酶抑制剂，抗雌激素，拓扑异构酶I抑制剂，拓扑异构酶II抑制剂，微管活性化合物，烷基化化合物，组蛋白去乙酰化酶抑制剂，诱导细胞分化过程的化合物，环氧化酶抑制剂，MMP抑制剂，mTOR抑制剂，抗肿瘤药，抗代谢药，铂化合物，靶向/降低蛋白质或脂质激酶活性的化合物，抗-血管生成化合物，靶向、降低或抑制蛋白质或脂质磷酸酶活性的化合物，促性腺激素激动剂，抗雄激素，甲硫氨酸氨基肽酶抑制剂，双膦酸盐，生物反应调节剂，抗增殖抗体，乙酰肝素酶抑制剂，Ras致瘤同种型抑制剂，端粒酶抑制剂，蛋白酶体抑制剂，用于治疗血液恶性肿瘤的化合物，靶向、降低或抑制Flt-3活性的化合物、Hsp90抑制剂，纺锤体驱动蛋白抑制剂，MEK抑制剂，亚叶酸，EDG结合剂，抗白血病化合物，核糖核苷酸还原酶抑制剂，S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶抑制剂，止血类固醇，皮质类固醇，其他化疗化合物或光敏化合物，但不限于此。

优选地，所述进一步的活性成分可以是已知的抗癌剂。此类抗癌剂的非限制性实例包括DNA烷基化剂，例如氮芥(mechloethamine)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、苯丙氨酸(phenylalanine)、芥末(mustard)、环磷酰胺(cyclophosphamide)、异环磷酰胺(ifosfamide)、卡莫司汀(carmustine，BCNU)、洛莫司汀(lomustine，CCNU)、链脲佐菌素(streptozotocin)、白消安(busulfan)、塞替派(thiotepa)、顺铂(cisplatin)及卡铂(carboplatin)；抗癌抗生素(anti-cancer antibiotics)，例如放线菌素(dactinomycin，actinomycin D)、多柔比星(doxorubicin，adriamycin)、柔红霉素(daunorubicin)、伊达比星(idarubicin)、米托葸醌(mitoxantrone)、普卡霉素(plicamycin)、丝裂霉素C(mitomycin C)及博来霉素(bleomycin)；以及植物生物碱(plant alkaloids)，例如长春新碱(vincristine)、长春质碱(vinblastine)、紫杉醇(paclitaxel)、多西他赛(docetaxel)、依托泊苷(etoposide)、替尼泊苷(teniposide)、托泊替康(topotecan)及iridotecan等，但并不限定于此。

实施例

在下文中，将参考实施例详细描述本发明。但是，以下实施例仅用于举例说明，并不用于限制本发明的范围。

制备实施例1、4-乙氧基-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸

步骤1：合成4-乙氧基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸乙酯

将原乙酸三乙酯(15mL，0.08mol)和乙酸(1.1mL，0.02mol)按顺序加入到氰乙酸乙酯(4.7mL，0.04mol)中，并将所得混合物在120℃下搅拌12小时以上。将所得反应混合物浓缩，向其中加入N,N-二甲基甲酰胺二乙基缩醛(8mL，0.05mol)，并将所得混合物在70℃下搅拌2小时以上。然后，将35mL乙酸和4mL蒸馏水加入到反应混合物中，并将所得混合物回流12小时以上。将所得反应混合物冷却至室温，并向其中加入饱和碳酸氢钠水溶液和水。将所得混合物用二氯甲烷萃取，所得有机层经无水硫酸镁干燥，然后过滤并减压浓缩。向其中加入20mL乙酸乙酯，并将所得混合物浓缩。过滤所产生的固体以获得标题化合物(2.6g，产率：28％，橙色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ11.64(brs,1H),7.47(d,J＝10Hz,1H),6.21(d,J＝10Hz,1H),4.18-4.10(m,4H),1.26-1.20(m,6H)

步骤2：4-乙氧基-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸乙酯的合成

将4-氟苯硼酸(3.1g，22.7mmol)和无水乙酸铜(II)(2.7g，15.1mmol)溶解在二氯甲烷中，向所得混合物中添加2.4mL吡啶和上述步骤1中所得的化合物(1.6g，7.5mmol)，并将所得混合物在室温下搅拌12小时以上。将所得反应混合物用硅藻土垫过滤，并用水和二氯甲烷萃取。将分离得到的有机层经无水硫酸镁干燥、过滤、并减压浓缩。将所得残余物通过柱色谱纯化，得到标题化合物(1.5g，产率：65％，白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ7.81(d,J＝10.0Hz,1H),7.46-7.43(m,2H),7.36-7.32(m,2H),6.44(d,J＝10.0Hz,1H),4.24-4.16(m,4H),1.28(t,J＝7.5Hz,3H),1.22(t,J＝5.0Hz,3H)

步骤3：合成4-乙氧基-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸

将上述步骤2中所得的化合物(1.5g，4.91mmol)溶于乙醇(15mL)和水(10mL)的混合溶液中，向其中添加氢氧化锂一水合物(0.82g，19.6mmol)，并将所得混合物在70℃下搅拌3小时以上。将所得混合物冷却至室温，减压浓缩，并在0℃下向其中缓慢滴加1N盐酸水溶液以保持pH为2.0。过滤分离所得的固体，用水洗涤，然后干燥，得到标题化合物(1.1g，产率：84％，白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ13.80(brs,1H),7.97(d,J＝5.0Hz,1H),7.52-7.50(m,2H),7.49-7.36(m,2H),6.60(d,J＝5.0Hz,1H),4.30(qt,J＝7.5Hz,2H),1.34(t,J＝7.5Hz,3H)

制备实施例2、4-乙氧基-1-(3-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸

重复制备实施例1的合成路线，不同之处在于，在步骤2中使用3-氟苯硼酸代替4-氟苯硼酸以获得标题化合物(192mg，产率：73％，白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ13.70(brs,1H),7.99(d,J＝10.0Hz,1H),7.60-7.56(m,1H),7.43(dt,J＝10.0,5.0Hz,1H),7.36(td,J＝10.0,5.0Hz,1H),7.30(dd,J＝10.0,5.0Hz,1H),6.61(d,J＝10.0Hz,1H),4.30(qt,J＝5.0Hz,2H),1.34(t,J＝5.0Hz,3H)

制备实施例3、4-乙氧基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-羧酸

重复制备实施例1的合成路线，不同之处在于在步骤2中使用苯硼酸代替4-氟苯硼酸以获得标题化合物(0.7g，产率：80％，白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ13.87(brs,1H),7.98(d,J＝5.0Hz,1H),7.54-7.52(m,2H),7.50-7.49(m,1H),7.44-7.43(m,2H),6.61(d,J＝10.0Hz,1H),4.30(qt,J＝7.5Hz,2H),1.35(t,J＝7.5Hz,3H)

制备实施例4、4-乙氧基-1-(4-氯苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸

重复制备实施例1的合成路线，不同之处在于，在步骤2中使用4-氯苯硼酸代替4-氟苯硼酸以获得标题化合物(121mg，产率：41％，白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ13.71(brs,1H),7.97(d,J＝5.0Hz,1H),7.60(d,J＝10.0Hz,2H),7.48(d,J＝10.0Hz,2H),6.61(d,J＝10.0Hz,1H),4.30(qt,J＝7.5Hz,2H),1.34(t,J＝7.5Hz,3H)

制备实施例5、4-乙氧基-2-氧代-1-[4-(三氟甲基)苯基]-1,2-二氢吡啶-3-羧酸

重复制备实施例1的合成路线，不同之处在于，在步骤2中使用4-三氟甲基苯硼酸代替4-氟苯硼酸，得到标题化合物(381mg，产率：58％，白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ13.80(brs,1H),7.98(d,J＝5.0Hz,1H),7.52-7.49(m,2H),7.39-7.35(m,2H),6.61(d,J＝5.0Hz,1H),4.30(qt,J＝7.5Hz,2H),1.34(t,J＝10Hz,3H)

制备实施例6、4-乙氧基-1-(4-甲氧基苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸

重复制备实施例1的合成路线，不同之处在于，在步骤2中使用4-甲氧基苯硼酸代替4-氟苯硼酸以获得标题化合物(240mg，产率：91％，白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ14.01(brs,1H),7.96(d,J＝10.0Hz,1H),7.36-7.33(m,2H),7.08-7.04(m,2H),6.59(d,J＝10.0Hz,1H),4.30(qt,J＝5.0Hz,2H),3.81(s,3H),1.35(t,J＝5.0Hz,3H)

制备实施例7、4-乙氧基-1-(3-甲氧基苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸

重复制备实施例1的合成路线，不同之处在于，在步骤2中使用3-甲氧基苯硼酸代替4-氟苯硼酸以获得标题化合物(188mg，产率：69％，白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ13.90(brs,1H),7.97(d,J＝10.0Hz,1H),7.43(t,J＝10.0Hz,1H),7.07-7.03(m,2H),6.99(d,J＝10.0Hz,1H),6.60(d,J＝10.0Hz,1H),4.30(qt,J＝5.0Hz,2H),3.79(s,3H),1.34(t,J＝5.0Hz,3H)

制备实施例8、1-(4-氟苯基)-4-甲氧基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸

重复制备实施例1的合成路线，不同之处在于，使用原乙酸三甲酯作为起始原料以获得标题化合物(0.1g，产率：36.8％，白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ13.91(brs,1H),8.04(d,J＝5.0Hz,1H),7.53-7.49(m,2H),7.41-7.36(m,2H),6.65(d,J＝5.0Hz,1H),3.98(s,3H)

制备实施例9、4-甲氧基-1-(4-氯苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸

重复制备实施例8的合成路线，不同之处在于，在步骤2中使用4-氯苯硼酸代替4-氟苯硼酸以获得标题化合物(163mg，产率：41％，白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ13.84(brs,1H),8.03(d,J＝10.0Hz,1H),7.62-7.60(m,2H),7.50-7.48(m,2H),6.64(d,J＝5.0Hz,1H),3.97(s,3H)

制备实施例10、1-甲氧基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-羧酸

重复制备实施例8的合成路线，不同之处在于，在步骤2中使用苯硼酸代替4-氟苯硼酸，得到标题化合物(0.14g，产率：32.4％，白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ13.91(brs,1H),8.05(d,J＝5.0Hz,1H),7.56-7.42(m,5H),6.64(d,J＝10.0Hz,1H),3.98(s,3H)

制备实施例11、1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸

重复制备实施例1的步骤2和3的合成路线，不同之处在于，使用2-羟基烟酸甲酯作为起始原料，获得标题化合物(0.18g，产率：94.7％，白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ14.24(brs,1H),8.50(d,J＝5.0Hz,1H),8.22(d,J＝5.0Hz,1H),7.65-7.60(m,2H),7.45-7.41(m,2H),6.80(t,J＝5.0Hz,1H)

制备实施例12、2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-羧酸

重复制备实施例1的步骤2和3的合成路线，不同之处在于，使用2-羟基烟酸甲酯和苯硼酸作为起始原料，获得标题化合物(0.15g，产率：81.8％，白色固体)

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ14.31(brs,1H),8.50(d,J＝5.0Hz,1H),8.23(d,J＝5.0Hz,1H),7.57-7.54(m,5H),6.80(t,J＝5.0Hz,1H)

制备实施例13、6-甲基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-羧酸

步骤1：3-氧代-3-(苯基氨基)丙酸乙酯的合成

依次将苯胺(98μL，1.07mmol)和三乙胺(0.16mL，1.18mmol)添加到2mL四氢呋喃中。将所得混合物冷却至0℃，向其中添加丙二酰氯单乙酯(0.15mL，0.18mmol)，并将所得混合物在0℃下搅拌30分钟。用1N盐酸水溶液终止反应。将所得混合物用乙酸乙酯萃取，并将分离得到的有机层用无水硫酸钠干燥。滤出溶剂，并将所得滤液减压浓缩。将所得残余物通过柱色谱纯化，得到标题化合物(0.22g，产率：99％，黄色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ9.25(brs,1H),7.55(d,J＝5.0Hz,2H),7.33(t,J＝5.0Hz,2H),7.12(t,J＝10.0Hz,1H),4.25(qt,J＝10.0Hz,2H),3.48(s,2H),1.33(t,J＝5.0Hz,3H)

步骤2：6-甲基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-羧酸的合成

向3-氧代-3-(苯基氨基)丙酸乙酯(220mg，1.06mmol)在3mL乙醇中的溶液中依次添加1,1-二甲氧基-3-丁酮(0.17mL，1.27mmol)和乙醇钠(20wt％在EtOH中，1.2mL)，并将所得混合物在80℃下搅拌3小时。将所得混合物冷却至室温，并减压浓缩。将1N盐酸水溶液缓慢滴加到所得残余物中，然后用二氯甲烷萃取。将分离的有机层用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。将所得残余物用乙酸乙酯：己烷的混合物(1∶1)洗涤，干燥，得到标题化合物(0.15g，产率：62％，棕色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ14.00(brs,1H),8.52(d,J＝5.0Hz,1H),7.65-7.57(m,3H),7.28-7.24(m,2H),6.56(d,J＝5.0Hz,1H),2.17(s,3H)

制备实施例14、6-甲基-2-氧代-1-(4-氟苯基)-1,2-二氢吡啶-3-羧酸

重复制备实施例13的合成路线，不同之处在于，在步骤1中使用4-氟苯胺代替苯胺以获得标题化合物(148mg，产率：67％，棕色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ14.22(brs,1H),8.40(d,J＝5.0Hz,1H),7.53-7.51(m,2H),7.46-7.43(m,2H),2.09(s,3H)

制备实施例15、5-溴-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸

步骤1：5-溴-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸甲酯的合成

将2-羟基烟酸甲酯(500mg，3.27mmol)和N-溴代琥珀酰亚胺(756mg，4.25mmol)溶解在二氯甲烷中，并将所得混合物在50℃下搅拌48小时。将所得混合物冷却至室温，然后减压浓缩。将所得残余物用少量二氯甲烷过滤，得到标题化合物(0.3g，产率：40％，黄色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.07(d,J＝5.0Hz,1H),7.98(d,J＝5.0Hz,1H),3.75(s,3H)

步骤2：5-溴-2-氧代-1-(4-氟苯基)-1,2-二氢吡啶-3-羧酸甲酯的合成

将上述步骤1中制得的化合物(300mg，1.29mmol)溶于二氯甲烷中，向其中依次加入4-氟苯硼酸(543mg，3.88mmol)、无水乙酸铜(II)(469mg，2.58mmol)和吡啶(0.42mL，5.16mmol)。将所得混合物在室温下搅拌24小时。将所得混合物用硅藻土垫过滤，然后用二氯甲烷萃取。将分离的有机层用无水硫酸钠干燥、过滤、并减压浓缩。将所得残余物通过柱色谱纯化，得到标题化合物(0.14g，产率：36％，黄色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.30(s,1H),8.16(s,1H),7.54-7.50(m,2H),7.39-7.34(m,2H),3.76(s,3H)

步骤3：5-溴-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸的合成

重复制备实施例1的步骤3的合成路线，不同之处在于，将上述步骤2中制备的化合物(142mg，0.44mmol)用作起始原料，以获得标题化合物(43.4mg，产率：31％，白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.55(d,J＝5.0Hz,1H),8.42(d,J＝5.0Hz,1H),7.64-7.59(m,2H),7.44-7.39(m,2H)

制备实施例16、5-氯-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸

重复制备实施例15的合成路线，不同之处在于，在步骤1中使用N-氯代琥珀酰亚胺代替N-溴代琥珀酰亚胺以获得标题化合物(53mg，产率：20％，棕色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.53(d,J＝5.0Hz,1H),8.39(s,1H),7.63-7.61(m,2H),7.44-7.40(m,2H)

制备实施例17、4-甲基-2-氧代-1-(4-氟苯基)-1,2-二氢吡啶-3-羧酸

步骤1：2-(4-氟苯胺羰基)-3-甲基-2-丁酸乙酯的合成

将4-氟苯胺(0.20mL，2.05mmol)、亚异丙基丙二酸二乙酯(1.60mL，8.20mmol)和咪唑(139mg，2.05mmol)的混合物在200℃搅拌5小时。将所得混合物冷却至室温，减压浓缩。将所得残余物通过柱色谱纯化，得到标题化合物(151mg，产率：28％，黄色油状)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ10.25(s,1H),7.65-7.62(m,2H),7.17-7.13(m,2H),4.12(qt,J＝5.0Hz,2H),2.16(s,3H),1.88(s,3H),1.16(t,J＝5.0Hz,3H)

步骤2：4-甲基-2-氧代-1-(4-氟苯基)-1,2-二氢吡啶-3-羧酸乙酯的合成

将上述步骤1中制得的化合物(96mg，0.36mmol)和1,1-二甲氧基-N,N-二甲基甲胺(72μL，0.54mmol)的混合物在100℃下搅拌1小时。将所得混合物冷却至室温，并减压浓缩。将所得残余物用柱色谱纯化，得到标题化合物(34mg，产率：34％，棕色固体)。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ7.36-7.33(m,2H),7.27-7.26(m,1H),7.17-7.13(m,2H),6.13(d,J＝5.0Hz,1H),4.39(qt,J＝5.0Hz,2H),2.28(s,3H),1.37(t,J＝5.0Hz,3H)

步骤3：4-甲基-2-氧代-1-(4-氟苯基)-1,2-二氢吡啶-3-羧酸的合成

重复制备实施例1的步骤3的合成路线，不同之处在于，将上述步骤2中制备的化合物(34mg，0.12mmol)用作起始原料，从而获得标题化合物(29mg，产率：100％，黄色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ7.90(d,J＝10.0Hz,1H),7.56-7.52(m,2H),7.42-7.37(m,2H),6.56(d,J＝10.0Hz,1H),2.52(s,3H)

制备实施例18、4-甲基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-羧酸

重复制备实施例17的合成路线，不同之处在于，在步骤1中使用苯胺代替4-氟苯胺以获得标题化合物(121mg，产率：50％，白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ14.52(brs,1H),7.92(d,J＝10.0Hz,1H),7.57-7.54(m,2H),7.52-7.46(m,3H),6.57(d,J＝5.0Hz,1H),2.53(s,3H)

制备实施例19、5-甲基-2-氧代-1-(4-氟苯基)-1,2-二氢吡啶-3-羧酸

步骤1：3-氧代-3-(4-氟苯基氨基)丙酸乙酯的合成

将4-氟苯胺(0.43mL，4.50mmol)和三乙胺(0.69mL，4.95mmol)依次添加到10mL四氢呋喃中。将所得混合物冷却至0℃，向其中加入丙二酰氯单乙酯(0.63mL，4.95mmol)，并将所得混合物在0℃下搅拌30分钟。用1N盐酸水溶液终止反应，将所得混合物用乙酸乙酯萃取，并将分离的有机层用无水硫酸钠干燥。滤出溶剂，并将所得滤液减压浓缩。将所得残余物通过柱色谱纯化，得到标题化合物(0.98g，产率：97％，白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ10.23(brs,1H),7.61-7.56(m,2H),7.18-7.13(m,2H),4.12(qt,J＝5.0Hz,2H),3.44(s,2H),1.20(t,J＝5.0Hz,3H)

步骤2：5-甲基-2-氧代-1-(4-氟苯基)-1,2-二氢吡啶-3-羧酸乙酯的合成

在氮气气氛下，将上述步骤1中制备的化合物(100mg，0.44mmol)溶于0.6mL乙醇中，并加入3-二甲基氨基-2-甲基丙烯醛(0.16mL，1.33mmol)和乙酸(0.04mol)。将所得混合物在80℃下搅拌41小时。将所得混合物冷却至室温，用乙酸乙酯和饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，然后将所得有机层用无水硫酸钠干燥。滤出溶剂，并将所得滤液减压浓缩。将所得残余物通过柱色谱纯化，得到标题化合物(39.1mg，产率：32％，黄色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ7.98(s,1H),7.77(s,1H),7.49-7.46(m,2H),7.37-7.34(m,2H),4.21(qt,J＝5.0Hz,2H),2.09(s,3H),1.25(t,J＝5.0Hz,3H)

步骤3：5-甲基-2-氧代-1-(4-氟苯基)-1,2-二氢吡啶-3-羧酸的合成

重复制备实施例1的步骤3的合成路线，不同之处在于，将上述步骤2中制备的化合物(39mg，0.14mmol)用作起始原料，从而获得标题化合物(26mg，产率：75％，白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ14.51(brs,1H),8.40(s,1H),8.09(s,1H),7.63-7.60(m,2H),7.44-7.41(m,2H),2.20(s,3H)

制备实施例20、1-(4-氟苯基)-5,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸

步骤1：2-甲基-3-氧代丁醛钠盐的合成

将甲醇钠(750mg，13.9mmol)添加到11mL乙醚和0.2mL甲醇中，并在0℃下缓慢滴加2-丁酮(1.42mL，13.9mmol)和甲酸乙酯(1.14mL，14.1mmol)的混合溶液。30分钟后，将所得混合物升温至室温并搅拌12小时。将反应期间形成的固体过滤，用二乙醚洗涤，然后干燥以获得标题化合物(1.29g，产率：76％，白色固体)。

步骤2：4-氟苯基-2-氰乙酰胺的合成

将氰基乙酸乙酯(0.94mL，8.84mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺，向其中加入4-氟苯胺(0.85mL，8.84mmol)，并将所得混合物回流12小时。将所得混合物冷却至室温，向其中缓慢加入过量的水，并将所得固体过滤并干燥以获得标题化合物(800mg，产率：51％，棕色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ10.35(s,1H),7.58-7.54(m,2H),7.20-7.15(m,2H),3.89(s,2H)

步骤3：1-(4-氟苯基)-5,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-腈的合成

将步骤1中制备的化合物(480mg，3.93mmol)和步骤2中制备的化合物(538mg，3.02mmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺中，然后依次加入哌啶(0.06mL，0.60mmol)和乙酸(0.23mL，3.93mmol)。将所得混合物在135℃下搅拌12小时。将所得混合物冷却至室温，并用乙酸乙酯萃取。将分离的有机层用无水硫酸钠干燥，然后减压浓缩。将所得残余物通过柱色谱纯化，得到标题化合物(411mg，产率：56％，橙色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.14(s,1H),7.43-7.36(m,4H),2.10(s,3H),1.94(s,3H)

步骤4：1-(4-氟苯基)-5,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸的合成

向上述步骤3中制备的化合物(100mg，0.41mmol)中加入硫酸水溶液(0.5mL硫酸+0.5mL水)，并将所得混合物在120℃下搅拌1.5小时。将所得混合物冷却至室温，然后向其中加入过量的水。将所得固体过滤以获得标题化合物(80mg，产率：74％，黄色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ14.44(s,1H),8.37(s,1H),7.47-7.45(m,4H),2.23(s,3H),2.03(s,3H)

制备实施例21、2-(4-氟苯基)-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-羧酸

步骤1：(E)-2-[2-(4-氟苯基)肼亚基]乙醛的合成

将1-(4-氟苯基)肼盐酸盐(0.50g，3.0mmol)溶解在水和乙酸中，并向其中加入乙二醛水溶液(40wt％在H₂O中，1.76mL，15.4mmol)。将所得混合物搅拌3小时以上。将所得固体过滤并干燥以获得标题化合物(0.43g，产率：84％，棕色固体)。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ11.76(brs,1H),9.47(d,J＝5.0Hz,1H),7.34(d,J＝5.0Hz,1H),7.23-7.17(m,4H)

步骤2：(E)-5-{2-[2-(4-氟苯基)肼亚基]乙亚基}-2,2-二甲基-1,3-二氧六环-4, 6-二酮的合成

将上述步骤1中制备的化合物(0.43g，2.59mmol)溶解在甲苯中，并向其中添加丙二酸亚异丙酯(0.37g，2.59mmol)。然后，向所得混合物中加入哌啶和乙酸各0.2mL，并将所得混合物在室温下搅拌3小时以上。将所得固体过滤并干燥以获得标题化合物(0.73g，产率：97％，红色固体)。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ8.83(d,J＝10.0Hz,1H),8.29(d,J＝10.0Hz,1H),7.34-7.05(m,4H),1.76(6H,S)

步骤3：2-(4-氟苯基)-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-羧酸的合成

将以上步骤2中获得的化合物(0.73g，2.5mmol)溶解在甲醇中，向其中加入甲醇钠(0.16g，3.0mmol)，并将所得混合物回流2小时以上。将混合物冷却至室温，并将所得固体过滤并溶于纯净水中。所得溶液用1N盐酸水溶液酸化。将所得的重新形成的固体过滤并干燥以获得标题化合物(0.36g，产率：61％，黄色固体)。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ8.31(s,2H),7.66-7.62(m,2H),7.28-7.23(m,2H)

制备实施例22、2-(4-氟苯基)-5-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-羧酸

重复制备实施例21的合成路线，不同之处在于，使用丙酮醛(35～45wt％在H₂O中)作为起始原料，以获得标题化合物(0.12g，产率：15.7％，白色固体)。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ13.84(brs,1H),8.19(s,1H),7.61-7.58(m,2H),7.26-7.19(m,2H),2.54(s,3H)

制备实施例23、5-甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氢哒嗪-4-羧酸

重复制备实施例21的合成路线，不同之处在于，使用丙酮醛(35～45wt％在H₂O中)和苯肼盐酸盐作为起始原料，以获得标题化合物(0.13g，产率：18.6％，棕色固体)。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ13.95(brs,1H),8.20(s,1H),7.59-7.26(m,5H),2.55(s,3H)

制备实施例24、3-氧代-2-苯基-2,3-二氢哒嗪-4-羧酸

重复制备实施例21的合成路线，不同之处在于，使用苯肼盐酸盐作为起始原料，以获得标题化合物(0.07g，产率：10.8％，棕色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ13.76(brs,1H),8.27(d,J＝5.0Hz,1H),7.98(d,J＝5.0Hz,1H),7.58-7.46(m,5H)

实施例1、4-乙氧基-N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

步骤1：N-{(6-溴吡啶-3-基)甲基}-2-甲氧基乙胺的合成

将6-溴吡啶-3-甲醛(5g，26.88mmol)溶解在1,2-二氯乙烷中，依次加入2-甲氧基乙胺(3.5mL，40.32mmol)和乙酸(1.6mL，28.76mmol)，将所得混合物搅拌20分钟。随后，向其中加入三乙酰氧基硼氢化钠(8.5g，40.32mmol)，并将所得混合物在室温搅拌2小时。用1N盐酸水溶液终止反应，用2N氢氧化钠水溶液将pH调节至9，并将所得混合物用二氯甲烷萃取。将所分离的有机层用无水硫酸钠干燥、过滤并减压浓缩。将所得残余物用柱色谱纯化，得到标题化合物(4.05g，产率：70％，浅红色油状物)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.31(d,J＝5.0Hz,1H),7.70(dd,J＝10.0,5.0Hz,1H),7.58(d,J＝10.0Hz,1H),3.69(s,2H),3.37(t,J＝5.0Hz,1H),3.22(s,3H),2.60(d,J＝5.0Hz,2H)

步骤2：[(6-溴吡啶-3-基)甲基](2-甲氧基乙基)氨基甲酸叔丁酯的合成

将以上步骤1中制备的化合物(4.05g，16.52mmol)溶于四氢呋喃，向其中加入二碳酸二叔丁酯(3.9mL，17.02mmol)，并将所得混合物在室温下搅拌30分钟。将所得混合物用乙酸乙酯萃取，将所分离的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将所得残余物通过柱色谱纯化，得到标题化合物(5.52g，产率：97％，无色油状物)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.27(s,1H),7.64-7.59(m,2H),4.40(s,2H),3.40(m,4H),3.21(s,3H),1.42-1.31(m,9H)

步骤3：合成{[6-(7-氯噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-3-基]甲基}(2-甲氧基乙基)氨基甲酸叔丁酯

将7-氯噻吩并[3,2-b]吡啶(5.4g，31.86mmol)溶解在四氢呋喃中，在-78℃下向其中缓慢加入2.5M正丁基锂己烷溶液(2.7mL，31.86mmol)，将所得混合物搅拌30分钟。向其中缓慢加入1M氯化锌乙醚溶液(31.9mL，31.86mmol)，并且在10分钟之后，将温度逐渐升至室温，然后搅拌1小时。依次将四(三苯基膦)钯(920mg，0.79mmol)和在步骤2中制备的化合物(5.5g，15.93mmol)加入到上述混合物中，然后回流2小时。将所得混合物冷却至室温，并减压浓缩。将所得残余物用乙腈过滤、干燥，得到标题化合物(5.2g，产率：75％，类白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.66(d,J＝5.0Hz,1H),8.54(s,1H),8.42(s,1H),8.29(d,J＝5.0Hz,1H),7.82(dd,J＝10.0,5.0Hz,1H),7.59(d,J＝5.0Hz,1H),4.50(s,2H),3.45-3.36(m,4H),3.23(s,3H),1.45-1.34(m,9H)

步骤4：合成{[6-[7-(2-氟-4-硝基苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-3-基] 甲基}(2-甲氧基乙基)氨基甲酸叔丁酯

将步骤3中制备的化合物(2.0g，4.61mmol)溶于二苯醚中，依次向其中加入无水碳酸钾(765mg，5.53mmol)和2-氟-4-硝基苯酚(1.4g，9.22mmol)，并将所得混合物在160℃下搅拌5小时。将混合物冷却至室温，并用乙酸乙酯萃取。将所分离的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。将所得残余物溶于四氢呋喃中，向其中加入二碳酸二叔丁酯(1.06mL，4.61mmol)，并将所得混合物在室温搅拌30分钟。将所得混合物减压浓缩，并将所得残余物通过柱色谱纯化，得到标题化合物(1.2g，产率：46％，类白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.62(d,J＝5.0Hz,1H),8.50-8.48(m,2H),8.39(s,1H),8.28(d,J＝5.0Hz,1H),8.21(d,J＝10.0,5.0Hz,1H),7.80(d,J＝10.0Hz,1H),7.72(t,J＝10.0Hz,1H),6.98(d,J＝5.0Hz,1H),4.48(s,2H),3.43-3.35(m,4H),3.23(s,3H),1.44-1.33(m,9H)

步骤5：合成{[6-[7-(4-氨基-2-氟苯氧基)噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基]吡啶-3-基] 甲基}(2-甲氧基乙基)氨基甲酸叔丁酯

将以上步骤4中制备的化合物(1.2g，2.16mmol)溶于乙醇和水，在室温下依次加入铁(363mg，6.49mmol)和氯化铵(1.16g，21.64mmol)，并将所得混合物加热至100℃并搅拌3小时。反应完成后，将所得反应混合物用硅藻土垫在温暖的状态下过滤，将所得滤液减压浓缩。将所得残余物用二氯甲烷萃取。将所分离的有机层用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，然后用乙醚过滤，得到标题化合物(833mg，产率：73％，类白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.51-8.49(m,2H),8.30(s,1H),8.24(d,J＝5.0Hz,1H),7.78(dd,J＝10.0,5.0Hz,1H),7.13(t,J＝10.0Hz,1H),6.60(d,J＝5.0Hz,1H),6.53(dd,J＝15.0,5.0Hz,1H),6.45(dd,J＝10.0,5.0Hz,1H),5.55(s,2H),4.48(s,2H),3.43-3.33(m,4H),3.23(s,3H),1.44-1.34(m,9H)

步骤6：合成[(6-{7-[4-(4-乙氧基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺基)- 2-氟苯氧基]噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基}吡啶-3-基)甲基](2-甲氧基乙基)氨基甲酸叔丁酯

将制备实施例3的4-乙氧基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-羧酸(0.57g，2.2mmol)，1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.42g，2.2mmol)和羟基苯并三唑(0.3g，2.2mmol)溶解在二氯甲烷中，然后依次加入三乙胺(0.22g，2.2mmol)和步骤5中制备的化合物(0.58g，1.1mmol)，然后将所得混合物在室温搅拌24小时以上。用饱和碳酸氢钠水溶液终止反应后，将所得混合物用二氯甲烷萃取。将所分离的有机层用无水硫酸镁干燥，并减压浓缩。将所得残余物通过柱色谱纯化，得到标题化合物(0.69g，产率：82％，类白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ10.64(brs,1H),8.52-8.51(m,2H),8.33(s,1H),7.95(d,J＝10.0Hz,1H),7.87(d,J＝5.0Hz,1H),7.79(d,J＝10.0Hz,1H),7.56-7.40(m,8H),6.71(d,J＝5.0Hz,1H),6.52(d,J＝10.0Hz,1H),4.48(s,2H),4.27(qt,J＝7.5Hz,2H),3.43-3.36(m,4H),3.23(s,3H),1.14-1.30(m,12H)

步骤7：4-乙氧基-N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基) 噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐的合成

向上述步骤6中制备的化合物(0.69g，0.9mmol)中加入10mL溶于1,4-二氧六环的4M盐酸(0.69g，0.9mmol)，将所得混合物在室温搅拌1小时以上。将所得反应混合物减压浓缩，溶于少量乙醇，并向其中加入乙醚。将得到的固体过滤并干燥以获得标题化合物(0.61g，产率：96％，类白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ10.70(brs,1H),9.50(brs,2H),8.80(s,1H),8.69(d,J＝5.0Hz,1H),8.47(s,1H),8.44(d,J＝5.0Hz,1H),8.22(dd,J＝10.0,5.0Hz,1H),7.99(d,J＝10.0Hz,1H),7.88(d,J＝5.0Hz,1H),7.57-7.40(m,7H),6.97(d,J＝5.0Hz,1H),6.53(d,J＝5.0Hz,1H),4.29-4.25(m,4H),3.65(t,J＝5.0Hz,2H),3.31(s,3H),3.16-3.12(m,2H),1.31(t,J＝5.0Hz,3H)

实施例2、N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(4-氟苯基)-4-甲氧基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例1的合成路线，不同之处在于，使用制备实施例8的1-(4-氟苯基)-4-甲氧基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸作为步骤6的起始原料，以获得标题化合物。

实施例3、N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-4-甲氧基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例1的合成路线，不同之处在于，使用制备实施例10的1-甲氧基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-羧酸作为步骤6的起始原料，以获得标题化合物。

实施例4、N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例1的合成路线，不同之处在于将制备实施例11的1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸用作步骤6的起始原料以获得标题化合物。

实施例5、N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例1的合成路线，不同之处在于，将制备实施例12的2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-羧酸用作步骤6的起始原料以获得标题化合物。

实施例6、{[6-(7-{4-[4-乙氧基-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺基]-2-氟苯氧基}噻吩并[3,2-b]吡啶-2-基)吡啶-3-基]甲基}(2-甲氧基乙基)氨基甲酸叔丁酯

重复实施例1的合成路线，不同之处在于，将制备实施例1的4-乙氧基-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸用作步骤6的起始原料，并且省略步骤7以获得标题化合物。

实施例7、4-乙氧基-N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例1的合成路线，不同之处在于将制备实施例1的4-乙氧基-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸用作步骤6的起始原料，以获得标题化合物。

实施例8、1-(4-氯苯基)-4-乙氧基-N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例1的合成路线，不同之处在于，使用制备实施例4的4-乙氧基-1-(4-氯苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸作为步骤6的起始原料，以获得标题化合物。

实施例9、N-(3-氯-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(4-氟苯基)-4-甲氧基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例2的合成路线，不同之处在于，在步骤4中使用2-氯-4-硝基苯酚代替2-氟-4-硝基苯酚以获得标题化合物。

实施例10、N-(2-氯-4-{[-2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(4-氟苯基)-4-甲氧基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例2的合成路线，不同之处在于，在步骤4中使用3-氯-4-硝基苯酚代替2-氟-4-硝基苯酚以获得标题化合物。

实施例11、1-(4-氟苯基)-4-甲氧基-N-(4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基)氧基)苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例2的合成路线，不同之处在于，在步骤4中使用4-硝基苯酚代替2-氟-4-硝基苯酚以获得标题化合物。

实施例12、4-乙氧基-N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-2-氧代-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐重复实施例1的合成路线，不同之处在于，使用制备实施例5的4-乙氧基-2-氧代-1-[4-(三氟甲基)苯基]-1,2-二氢吡啶-3-羧酸作为步骤6的起始原料以获得标题化合物。

实施例13、1-(4-氯苯基)-N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-4-甲氧基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例1的合成路线，不同之处在于，使用制备实施例9的4-甲氧基-1-(4-氯苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸作为步骤6的起始原料，以获得标题化合物。

实施例14、4-乙氧基-N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(3-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例1的合成路线，不同之处在于，将制备实施例2的4-乙氧基-1-(3-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸用作步骤6的起始原料，以获得标题化合物。

实施例15、4-乙氧基-N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(4-甲氧基苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例1的合成路线，不同之处在于，使用制备实施例6的4-乙氧基-1-(4-甲氧基苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸作为步骤6的起始原料，以获得标题化合物。

实施例16、4-乙氧基-N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(3-甲氧基苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例1的合成路线，不同之处在于，使用制备实施例7的4-乙氧基-1-(3-甲氧基苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸作为步骤6的起始原料，以获得标题化合物。

实施例17、N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-2-(4-氟苯基)-5-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-甲酰胺盐酸盐

重复实施例1的合成路线，不同之处在于，将制备实施例22的2-(4-氟苯基)-5-甲基-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-羧酸用作步骤6的起始原料，以获得标题化合物。

实施例18、N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-5-甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氢哒嗪-4-甲酰胺盐酸盐

重复实施例1的合成路线，不同之处在于，将制备实施例23的5-甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氢哒嗪-4-羧酸用作步骤6的起始原料以获得标题化合物。

实施例19、N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-3-氧代-2-苯基-2,3-二氢哒嗪-4-甲酰胺盐酸盐

重复实施例1的合成路线，不同之处在于，将制备实施例24的3-氧代-2-苯基-2,3-二氢哒嗪-4-羧酸用作步骤6的起始原料以获得标题化合物。

实施例20、N-(3-氟-4-[{2-(5-[{(2-甲氧基乙基)氨基}甲基]吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基}氧基]苯基)-2-(4-氟苯基)-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-甲酰胺盐酸盐

重复实施例1的合成路线，不同之处在于，将制备实施例21的2-(4-氟苯基)-3-氧代-2,3-二氢哒嗪-4-羧酸用作步骤6的起始原料以获得标题化合物。

实施例21、N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-6-甲基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例1的合成路线，不同之处在于，将制备实施例13的6-甲基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-羧酸用作步骤6的起始原料，以获得标题化合物。。

实施例22、N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(4-氟苯基)-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例1的合成路线，不同之处在于，使用制备实施例14的6-甲基-2-氧代-1-(4-氟苯基)-1,2-二氢吡啶-3-羧酸作为步骤6的起始原料，以获得标题化合物。

实施例23、5-溴-N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例1的合成路线，不同之处在于，使用制备实施例15的5-溴-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸作为步骤6的起始原料，以获得标题化合物。

实施例24、5-氯-N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例1的合成路线，不同之处在于，使用制备实施例16的5-氯-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸作为步骤6的起始原料，以获得标题化合物。

实施例25、N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(4-氟苯基)-4-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例7的合成路线，不同之处在于，将制备实施例17的4-甲基-2-氧代-1-(4-氟苯基)-1,2-二氢吡啶-3-羧酸用作步骤6的起始原料，以获得标题化合物。

实施例26、N-(2-氯-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-4-乙氧基-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例7的合成路线，不同之处在于，在步骤4中使用3-氯-4-硝基苯酚代替2-氟-4-硝基苯酚以获得标题化合物。

实施例27、N-(3-氟-4-([2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基)甲基]吡啶-2-基}噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基)氧基]苯基}-1-(4-氟苯基)-5,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例1的合成路线，不同之处在于，将制备实施例20的1-(4-氟苯基)-5,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸用作步骤6的起始原料，以得到标题化合物。

实施例28、N-(3-氟-4-{[-2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-4-甲基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例1的合成路线，不同之处在于，将制备实施例18的4-甲基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-羧酸用作步骤6的起始原料以获得标题化合物。

实施例29、N-(3-氟-4-{[-2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(4-氟苯基)-5-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例1的合成路线，不同之处在于，将制备实施例19的5-甲基-2-氧代-1-(4-氟苯基)-1,2-二氢吡啶-3-羧酸用作步骤6的起始原料，以获得标题化合物。

上述实施例2至29的化合物的化学结构、产率和NMR光谱数据汇总在下表1中。

[表1]

实施例30、4-乙氧基-N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)(甲基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

将实施例7的4-乙氧基-N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐(34mg，0.05mmol)溶解在1mL甲醇中，向其中滴加甲醛(0.02mL，0.28mmol)。搅拌1小时后，向其中加入氰基氢化钠(12mg，0.19mmol)，并将所得混合物搅拌12小时。反应完成后，将所得反应混合物用二氯甲烷萃取，并用饱和氯化钠水溶液洗涤。所得有机层经无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将所得残余物通过柱色谱纯化，并使用0.2mL 4M盐酸的1,4-二氧六环溶液，得到标题化合物(17.5mg，产率：50.5％，类白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.67(s,1H),10.51(brs,1H),8.80(s,1H),8.60(d,J＝5.0Hz,1H),8.48(s,1H),8.43(d,J＝10.0Hz,1H),8.21(d,J＝5.0Hz,1H),7.96(d,J＝15.0Hz,1H),7.88(d,J＝10.0Hz,1H),7.52-7.45(m,4H),7.39-7.36(m,2H),6.83(d,J＝5.0Hz,1H),6.53(d,J＝10.0Hz,1H),4.51-4.36(m,2H),4.27(q,J＝5.0Hz,2H),3.73(t,J＝5.0Hz,2H),3.38-3.29(m,2H),3.32(s,3H),2.75(d,J＝5.0Hz,3H)

实施例31、4-乙氧基-N-[3-氟-4-({2-[5-(吗啉-4-基甲基)吡啶-2-基]噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基}氧基)苯基]-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

步骤1：N-[4-({2-[5-(1,3-二氧戊环-2-基)-吡啶-2-基]噻吩并[3,2-b]吡啶-7- 基}氧基)-3-氟苯基]-4-乙氧基-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺的合成

重复实施例1的步骤6的步骤，不同之处在于，以可以通过国际专利公开号WO2009/026717的方法容易制备的4-({2-[5-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基]噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基}氧基)-3-氟苯胺为起始原料以获得标题化合物(135mg，产率：64％，类白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ10.63(s,1H),8.70(s,1H),8.52(d,J＝5.0Hz,1H),8.41(s,1H),8.32(d,J＝5.0Hz,1H),7.99(dd,J＝10.0,5.0Hz,1H),7.94(d,J＝10.0Hz,1H),7.87(d,J＝10.0Hz,1H),7.50-7.45(m,4H),7.39-7.35(m,2H),6.71(d,J＝5.0Hz,1H),6.52(d,J＝5.0Hz,1H),5.90(s,1H),4.27(qt,J＝5.0H,2H),4.12-4.07(m,2H),4.04-3.99(m,2H),1.31(t,J＝5.0Hz,3H)

步骤2：4-乙氧基-N-{3-氟-4-[2-(5-甲酰基吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7- 基]氧基苯基}-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺的合成

将步骤1中制备的化合物(100mg，0.15mmol)溶于丙酮和水的混合溶液中，然后在室温下向其中滴加2mL的三氟乙酸。将所得混合物在60℃下搅拌12小时，然后冷却至室温。减压滤出所产生的固体，用水和乙醚洗涤，干燥，得到标题化合物(82mg，产率：88％，类白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ10.64(s,1H),10.14(s,1H),9.15(s,1H),8.59-8.58(m,2H),8.52(d,J＝5.0Hz,1H),8.39(d,J＝10.0Hz,1H),7.95(d,J＝10.0Hz,1H),7.87(d,J＝10.0Hz,1H),7.51-7.45(m,4H),7.39-7.36(m,2H),6.78(d,J＝5.0Hz,1H),6.53(d,J＝10.0Hz,1H),4.27(qt,J＝5.0H,2H),1.31(t,J＝5.0Hz,3H)

步骤3：4-乙氧基-N-[3-氟-4-({2-[5-(羟甲基)吡啶-2-基]噻吩并[3,2-b]吡啶- 7-基}氧基)苯基]-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺的合成

将步骤2中制备的化合物(82mg，0.13mmol)溶解在1,2-二氯乙烷中，向其中加入三乙酰氧基硼氢化钠(83mg，0.39mmol)，然后在室温下搅拌12小时。用饱和碳酸氢钠水溶液终止反应，并将所得混合物用二氯甲烷萃取。所分离的有机层用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。将所得残余物通过柱色谱纯化，得到标题化合物(53mg，产率：64％，白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ10.63(s,1H),8.58(s,1H),8.51(d,J＝5.0Hz,1H),8.33(s,1H),8.25(d,J＝10.0Hz,1H),7.94(d,J＝10.0Hz,1H),7.89-7.86(m,2H),7.50-7.45(m,4H),7.39-7.36(m,2H),6.69(d,J＝5.0Hz,1H),6.52(d,J＝5.0Hz,1H),5.43(t,J＝5.0Hz,1H),4.59(d,J＝5.0Hz,2H),4.27(qt,J＝5.0H,2H),1.31(t,J＝5.0Hz,3H)

步骤4：N-[4-({2-[5-(氯甲基)吡啶-2-基]噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基}氧基)-3-氟苯基]-4-乙氧基-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺的合成

将步骤3中制备的化合物(296mg，0.49mmol)溶于二氯甲烷，向其中加入氯化亚砜(0.07mL，0.97mmol)，并将所得混合物在室温搅拌3小时。在0℃下用饱和碳酸氢钠水溶液终止反应，并将所得混合物用二氯甲烷萃取。所分离的有机层用无水硫酸钠干燥，并减压浓缩，得到标题化合物(240mg，产率：78％，黄色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ10.63(s,1H),8.72(s,1H),8.52(d,J＝5.0Hz,1H),8.40(s,1H),8.32(d,J＝10.0Hz,1H),8.04(dd,J＝10.0,5.0Hz,1H),7.94(d,J＝15.0Hz,1H),7.87(d,J＝10.0Hz,1H),7.50-7.46(m,4H),7.39-7.36(m,2H),6.71(d,J＝5.0Hz,1H),6.53(d,J＝10.0Hz,1H),4.88(s,2H),4.27(qt,J＝5.0H,2H),1.31(t,J＝5.0Hz,3H)

步骤5：4-乙氧基-N-[3-氟-4-({2-[5-(吗啉-4-基甲基)吡啶-2-基]噻吩并[3,2- b]吡啶-7-基}氧基)苯基]-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐的合成

将步骤4中制得的化合物(40mg，0.06mmol)溶于乙腈，向其中加入吗啉(0.01mL，0.12mmol)和碳酸钾(13mg，0.09mmol)，将所得混合物在80℃下搅拌5小时。冷却至室温后，将所得混合物减压浓缩，然后用二氯甲烷和少量甲醇萃取。将所分离的有机层用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。将所得残余物通过柱色谱纯化，并使用0.2mL的4M盐酸的1,4-二氧六环溶液获得标题化合物(16.6mg，产率：30％，类白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ10.66(s,1H),8.81(s,1H),8.60(d,J＝5.0Hz,1H),8.48(s,1H),8.43(d,J＝5.0Hz,1H),8.23(d,J＝5.0Hz,1H),7.96(d,J＝15.0Hz,1H),7.87(d,J＝5.0Hz,1H),7.52-7.45(m,4H),7.39-7.36(m,2H),6.83(d,J＝5.0Hz,1H),6.53(d,J＝10.0Hz,1H),4.44(s,2H),4.26(qt,J＝5.0H,2H),3.96-3.94(m,2H),3.77(t,J＝10.0Hz,2H),3.32-3.30(m,2H),3.14(qt,J＝10.0 2H),1.31(t,J＝5.0Hz,3H)

实施例32、4-乙氧基-N-[3-氟-4-({2-[5-(吗啉-4-基甲基)吡啶-2-基]噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基}氧基)苯基]-2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例31的合成路线，不同之处在于，在步骤1中将制备实施例3的4-乙氧基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-羧酸用作起始原料，以获得标题化合物。

实施例33、4-乙氧基-N-{3-氟-4-[(2-{5-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]吡啶-2-基}噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基)氧基]苯基}-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例31的合成路线，不同之处在于，在步骤5中使用N-甲基哌嗪代替吗啉以获得标题化合物。

实施例34、4-乙氧基-N-{3-氟-4-[(2-{5-[(-甲基哌嗪-1-基)甲基]吡啶-2-基}噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基)氧基]苯基}-2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例32的合成路线，不同之处在于，在步骤5中使用N-甲基哌嗪代替吗啉以获得标题化合物。

实施例35、1-(4-氯苯基)-4-乙氧基-N-[3-氟-4-({2-[5-(吗啉-4-基甲基)吡啶-2-基]噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基}氧基)苯基]-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例31的合成路线，不同之处在于，在步骤1中将制备实施例4的4-乙氧基-1-(4-氯苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-羧酸用作起始原料以获得标题化合物。

实施例36、N-[3-氯-4-({2-[5-(吗啉-4-基甲基)吡啶-2-基]噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基}氧基)苯基]-4-乙氧基-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例31的合成路线，不同之处在于，以通过国际专利公开号WO 2009/026717的方法可以容易地制备的4-({2-[5-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基]噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基}氧基)-3-氯苯胺为起始原料以获得标题化合物。

实施例37、N-[2-氯-4-({2-[5-(吗啉-4-基甲基)吡啶-2-基]噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基}氧基)苯基]-4-乙氧基-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺盐酸盐

重复实施例31的合成路线，不同之处在于，以可以通过国际专利公开号WO2009/026717的方法容易地制备的4-({2-[5-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基]噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基}氧基)-2-氯苯胺为起始原料以获得标题化合物。

上述实施例32至37的化合物的化学结构、产率和NMR光谱数据汇总在下表2中。

[表2]

另外，使用以下已知化合物进行比较。

对比例1

US 8,536,200 B2的化合物1，N-{4-[((2-氨基-3-氯-4-吡啶基)氧基]-3-氟苯基}-4-乙氧基-1-(4-氟苯基)-2-氧代-1,2-二氢-3-吡啶甲酰胺，其是一种众所周知的RON抑制剂BMS-777607。

对比例2

US 8,088,794 B2的实施例73的化合物，N-(3-氟-4-(7-甲氧基喹啉-4-基氧基)苯基)-1-(2-羟基-2-甲基丙基)-5-甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氢-1H-吡唑-4-甲酰胺。

对比例3

US 8,030,302 B2的实施例1的化合物，N-(3-氟-4-(1-甲基-6-(1H-吡唑-4-基)-1H-吲唑-5-基氧基)苯基)-1-(4-氟苯基)-6-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺。

实验例1、噻吩并吡啶衍生物的酶抑制活性的测定

噻吩并吡啶衍生物的酶抑制活性(IC50)使用FRET(荧光共振能量转移)技术测量。将RON激酶(Carna Bioscience)用激酶测定缓冲液(50mM HEPES pH 7.5、1mM EGTA，10mMMgCl₂、2mM DTT和0.01％Tween-20)稀释至2x(0.4nM)最终反应浓度并将所得稀释液以5μL/孔的量添加到384孔板中。

使用在本发明的实施例中合成的化合物和对比例的化合物作为样品化合物。将样品化合物分别溶解在100％DMSO中以获得1mM储备溶液，然后将其进行八次10倍系列稀释。用激酶测定缓冲液将样品化合物稀释至4x最终反应浓度，然后将所得稀释液以2.5μL/孔的量添加到384孔板中。将板在室温孵育15分钟。

接下来，用激酶反应缓冲液将0.25M ATP溶液(Sigma Aldrich)稀释至4x(60μM)最终反应浓度，并在其中将酪氨酸肽底物(Perkin-Elmer)稀释至4x(400nM)最终反应浓度。将所得稀释液以2.5μL/孔的量添加到384孔板中。

然后，将384孔板在室温下孵育，并使反应进行60分钟。60分钟后，用TR-FRET检测缓冲液(Perkin-Elmer)将EDTA(Sigma Aldrich)稀释至4x(40mM)最终反应浓度。

将铕标记的抗磷酸酪氨酸抗体(Perkin-Elmer)在上述EDTA稀释液中稀释至4x(8nM)最终反应浓度，以制备RON激酶反应的终止溶液。将终止溶液以10μL/孔的量加入到384孔板中以终止反应，并将板在室温下孵育60分钟。

之后，在Victor X5酶标仪(Perkin-Elmer)上读板。此时，激发波长为340nm，发射波长为620nm和665nm。使用GraphPad Prism^TM 5通过将665nm处的发射能量表示为样品化合物浓度的函数来确定样品化合物的IC₅₀值。结果示于表3。

[表3]

如上表3所示，实施例的化合物对RON酪氨酸激酶具有非常优异的抑制活性。

实验例2、根据噻吩并吡啶衍生物的浓度测量其细胞杀伤效力

在6孔板中分别制备了5x 10⁴个细胞/孔的两种结肠癌细胞系，RON激活的KM12C(80015，KCLB，MEM+10％FBS)和RON突变(△160)HT-29(30038，KCLB，RPMI+10％FBS)。24小时后，在更换新鲜培养基的同时，将样品化合物以1μM或5μM的浓度添加到孔中，并将板静置48小时。

使用在本发明的实施例中合成的化合物和对比例的化合物作为样品化合物。

48小时后，收集细胞悬液并离心(1,500rpm，4分钟)以获得细胞，并通过台盼蓝(15250-061，Gibco)排除试验对活细胞和死细胞进行定量(n＝2)。使用Microsoft的Excel^TMT检验进行统计分析。

所测量的对比例1至3和实施例1的化合物的细胞死亡率(％)示于图1和2。

分别测量实施例和对比例的化合物的细胞死亡率，结果以与对比例1的相对比例示于表4中。

[表4]

如表4和图1和图2所示，与常规化合物相比，实施例的化合物在RON激活的(KM12C)和RON突变的(HT29)结肠癌细胞系中显示出相对较高的抗癌功效。

实验例3、使用MTS测定法确认噻吩并吡啶衍生物的细胞毒性

为了确认药物的特异性细胞毒性，将所培养的细胞用0.05％胰蛋白酶/EDTA(0.5％胰蛋白酶EDTA(10X)，产品号：15400-054，GIBCO)处理，以使其脱离培养皿，并将3,000个细胞(KM12C)或2,000个细胞(HT29，Colo 320HSR)分配到每个孔中。

24小时后，将样品化合物溶于DMSO(产品编号：D8418-250ML，SIGMA)中，制成10mM储备溶液。使用在本发明的实施例中合成的化合物和对比例的化合物作为样品化合物。

将储备溶液分别用DMSO稀释至从10mM开始以1/10为因子的八种浓度(对于KM12C)和从10mM开始的以1/2为因子的9种浓度(对于HT29)，稀释的样品化合物具有基于最高浓度的100μM的浓度。用样品化合物稀释液处理细胞，并在37℃的5％CO₂培养箱中培养72小时。

之后，将20μL MTS溶液(CellTiter^TM 96AQueous单溶液细胞增殖试验，产品编号：G3581，Promega)分配到每个孔中并充分混合，然后将细胞在37℃下于5％CO₂培养箱中孵育1-4小时。然后，使用Victor X5酶标仪(Perkin-Elmer)在490nm的波长处测量吸光度，并由此计算IC₅₀值。结果示于表5。

[表5]

如表5所示，与常规化合物相比，实施例化合物在RON激活的(KM12C)和RON突变的(HT29)结肠癌细胞系中显示出相对较高的抗癌功效。

Claims

1.式1所示的化合物或其药学上可接受的盐：

[式1]

其中，

X为-C(-R₃)＝或-N＝；

R₃和R₄各自独立地为H、卤素、C_1-10烷基或C_1-10烷氧基；

R₅为H、卤素或C_1-10烷基；且

R₆和R₇与它们所连接的N原子一起形成4至10元杂环，或R₆为-C₂H₄-O-CH₃且R₇为H、甲基或叔丁氧羰基；

并且，

所述杂环除了与R₆和R₇连接的N原子之外，还任选地包含一个或两个选自由N、O和S组成的组的杂原子，并且是未被取代的或被一个或多个选自卤素和C_1-6烷基的取代基取代。

2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R₁和R₂各自独立地为H、卤素、甲氧基或-CF₃。

3.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R₃和R₄各自独立地为H、卤素、甲基、甲氧基或乙氧基。

4.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中X为-C(-R₃)＝；且R₃和R₄各自独立地为H、卤素、甲基、甲氧基或乙氧基，但不同时为H。

5.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中X为-N＝；且R₄为卤素、甲基、甲氧基或乙氧基。

6.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R₅是H或卤素。

7.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R₆和R₇与它们所连接的N原子一起形成

其中R_a和R_b各自独立地为C_1-3烷叉基，A为-N(-R₉)-或-O-，且R₉为C_1-6烷基。

8.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R₁和R₂各自独立地为H、卤素、甲氧基或-CF₃；R₃和R₄各自独立地为H、卤素、甲基、甲氧基或乙氧基；R₅是H或卤素；并且R₆为-C₂H₄-O-CH₃且R₇为H、甲基或叔丁氧羰基，或R₆和R₇结合在一起形成吗啉-4-基或甲基哌嗪基。

9.如下所示的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物选自由以下化合物组成的组：

11)1-(4-氟苯基)-4-甲氧基-N-(4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

21)N-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基]吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-6-甲基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氢吡啶-3-甲酰胺；

10.一种药物组合物，其包含如权利要求1-9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的添加剂。

11.根据权利要求10所述的药物组合物，其用于预防或治疗与蛋白激酶活性相关的疾病。

12.根据权利要求11所述的药物组合物，其中所述与蛋白激酶活性相关的疾病是癌症、银屑病、类风湿性关节炎、炎性肠病或慢性阻塞性肺病。

13.一种根据权利要求1-9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于预防或治疗与蛋白激酶活性相关的疾病的药物中的用途。

14.根据权利要求13所述的用途，其中所述与蛋白激酶活性相关的疾病是癌症、银屑病、类风湿性关节炎、炎性肠病或慢性阻塞性肺病。

15.根据权利要求14所述的用途，其中所述癌症选自由乳腺癌、肺癌、胃癌、前列腺癌、子宫癌、卵巢癌、肾癌、胰腺癌、肝癌、结直肠癌、皮肤癌、头颈癌和甲状腺癌组成的组。

16.一种根据权利要求1-9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备蛋白激酶抑制剂的用途。

17.根据权利要求16所述的用途，其中所述蛋白激酶是RON酪氨酸激酶。