KR20120046505A - 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 이상세포 성장 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 - Google Patents

신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 이상세포 성장 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR20120046505A
KR20120046505A KR1020100108192A KR20100108192A KR20120046505A KR 20120046505 A KR20120046505 A KR 20120046505A KR 1020100108192 A KR1020100108192 A KR 1020100108192A KR 20100108192 A KR20100108192 A KR 20100108192A KR 20120046505 A KR20120046505 A KR 20120046505A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
compound
cancer
methyl
triazolo
formula
Prior art date
Application number
KR1020100108192A
Other languages
English (en)
Other versions
KR101254546B1 (ko
Inventor
김형래
류재욱
이종국
하재두
조성윤
이정옥
한선영
정희정
Original Assignee
한국화학연구원
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 한국화학연구원 filed Critical 한국화학연구원
Priority to KR1020100108192A priority Critical patent/KR101254546B1/ko
Publication of KR20120046505A publication Critical patent/KR20120046505A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR101254546B1 publication Critical patent/KR101254546B1/ko

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/5025—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/04—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 이상세포 성장 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것으로, 본 발명에 따르면 이상세포 성장 질환의 치료에 유용한 단백질 키나아제인 c-Met에 대하여 우수한 억제효과를 나타내므로 이상세포 성장 질환의 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
[화학식 1]
Figure pat00055

(상기 화학식 1에서 R1, R2, R3 및 R4는 본 명세서에서 정의된 바와 같다.)

Description

신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 이상세포 성장 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물{Novel triazolopyridazin derivatives substituted with methylisoquinolinone, pharmaceutically acceptable salt thereof, preparation method thereof and pharmaceutical composition for the prevention and treatment of abnormal cell growth diseases containing the same as an active ingredient}
본 발명은 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 이상세포 성장 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.
단백질 키나아제(PK)는 단백질의 티로신, 세린 및 트레오닌 잔사 상의 하이드록시 그룹의 인산화를 촉매하는 효소이다. 상기 단백질 키나아제는 세포 성장, 분화 및 증식을 야기하는 성장 인자 신호 전달에 중요한 역할을 한다. 따라서 단백질 키나아제의 활성은 세포 생명의 거의 모든 양태에 영향을 미친다.
단백질 키나아제의 돌연변이나 과발현에 의한 세포신호전달체계의 이상은 건선과 같이 비교적 생명에 위협적이지 않은 질환에서부터 암과 같은 생명에 치명적인 질환에 밀접한 영향을 미친다.
단백질 키나아제는 티로신 키나아제(TK) 및 세린-트레오닌 키나아제(STK)로 분류할 수 있다.
티로신 키나아제(TK)는 다시 수용체 티로신 키나아제(RTK: receptor tyrosine kinase)와 비수용체 티로신 키나아제 또는 세포성 티로신 키나아제(CTK: cytosolic tyrosine kinase)로 불리우는 특정 계열의 완전한 세포내 TK로 분류한다. 수용체 티로신 키나아제 및 비수용체 티로신 키나아제와 관련된 병원성 질환은 건선, 간경변, 당뇨병, 혈관형성, 재발 협착증, 안과질환, 류마티스성 관절염, 자가면역 질환, 죽상경화증, 신장 장애 등이 포함된다.
항암제 타겟으로 연구되고 있는 RTK 중에서도 간세포 성장인자(Hepatocyte Growth Factor/Scatter Factor, HGF/SF) 수용체인 c-Met(Hepatocyte Growth Factor Receptor: HGFR)을 타겟으로 하는 항암제가 많이 개발되고 있다(J. G. Christensen, J. Burrows et al., Cancer Letters, 2005, 225, 1-26; WO 2004/076412; WO 2006/021881 A; WO 2006/021886; WO 2007/064797).
c-Met은 종양 형성, 증대된 세포 운동성 및 침입성 하에서의 종양 진행, 및 전이에 수반되는 폐암, 위암, 피부암, 신장암, 직장암, 췌장암 등의 많은 인간 암에서 과발현 또는 활성화되어 있다(J. G. Christensen et al., Cancer Letters, 2005, 225, 1-26; W. G. Jiang et al., Critical Reviews in Oncology/Hematology, 2005, 53, 35-69). c-Met 및 이의 리간드인 HGF는 많은 조직에서 발현되지만, 정상적으로는 주로 상피 및 간엽 기원의 세포 각각으로 한정되어 발현된다. c-Met 및 HGF/SF는 정상적인 포유동물의 발육에 필요하며, 세포 전이, 세포 증식 및 생존, 형태 형성성 분화 및 3-차원적 관상 구조물(신 세뇨관 세포, 선 형성 등)의 조직화에서 중요한 것으로 밝혀졌다. HGF/SF는 신생혈관생성 인자이며, 상피 세포에서의 c-Met 신호전달은 신생혈관생성에 필수적인 세포 반응(증식, 운동성, 침입성 등)을 유도한다.
또한 c-Met 및 이의 리간드인 HGF는 다양한 인간 암에서 증가된 수준으로 공-발현되는 것으로 밝혀졌다. 그러나, 수용체 및 리간드는 통상적으로 상이한 세포 유형에 의해 발현되기 때문에, c-Met 신호전달은 대부분 보편적으로 종양-기질 (tumor-stroma) 상호작용에 의해 조절된다.
또한, c-Met의 유전자 증폭, 돌연변이 및 재배열이 다양한 인간 암에서 관찰되었다. c-Met 키나아제를 활성화시키는 생식계 돌연변이를 갖는 부류는 다중 신장 종양 및 다른 조직의 종양에 걸리기 쉽다.
c-Met 및/또는 HGF/SF의 발현은 상이한 유형의 암(폐, 결장, 유방, 전립선, 간, 췌장, 뇌, 신장, 난소, 위, 피부, 뼈 등의 암)의 질환 진행 상태와 연관되어 있으며, c-Met 또는 HGF/SF의 과발현은 폐, 간, 위 및 유방을 포함한 많은 주요 인간 암에서 나쁜 예후 및 질환 결과와 상관되는 것으로 밝혀졌다. 또한, c-Met은 췌장암, 신경교종 및 간세포암과 같은 성공적인 치료법이 없는 암에 직접 관련되어 있다고 보고되었으며, c-Met이 과발현되면서 ERBB3 신호전달체계 활성화로 야기된 폐암이 게피티니브(Gefitinib; 이레사(상품명:Irresa))에 내성을 갖게 된다고 보고되었다 (J. A. Engelman, K. Zejnullahu et. al. Science, 2007, 316, 1039-1043).
HGF/SF는 c-Met의 세포외 도메인에 결합하여 c-Met을 활성화시키며, c-Met의 활성화는 각각 Gab1 및 Grb2 매개된 PI3-키나제 및 Ras/MAPK 활성화를 통한 티로신 포스포릴화 및 다운스트림 시그널화를 이끌어, 세포 운동성 및 증식을 유도한다.
c-Met은 수용체 활성화, 형질전환 및 침습을 이끄는 다른 단백질과 상호작용하는 것으로 밝혀졌고, 또한 c-Met은 초점부착(focal adhesion)을 형성하는 α6β4 인테그린(Integrin:라미닌과 같은 세포외 기질(ECM) 성분에 대한 수용체)과 상호작용하여 HGF/SF 의존적 침습적 성장을 촉진하는 것으로 보고되었다.
이에, 본 발명자들은 단백질 키나아제 억제제를 개발하기 위한 연구를 수행하던 중, 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체가 이상세포 성장 질환과 관련된 c-Met 키나아제 등에 대한 우수한 억제효과를 나타내므로, 이상세포 성장 질환의 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있음을 알아내고 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적은 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조방법을 제공하는 데 있다.
본 발명의 또 다른 목적은 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 이상세포 성장 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 데 있다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다.
[화학식 1]
Figure pat00001
(상기 화학식 1에서,
상기 R1, R2, R3 및 R4는 본 명세서에서 정의된 바와 같다.)
또한, 본 발명은 상기 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 제조방법을 제공한다.
나아가, 본 발명은 상기 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 이상세포 성장 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 이상세포 성장 질환과 관련된 단백질 키나아제 예를 들면, c-Met 등에 대한 우수한 저해 활성을 나타내므로, 이상세포 성장 질환의 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.
Figure pat00002
(상기 화학식 1에서,
R1 및 R2는 각각 수소, 할로겐, C1-C10의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고;
R3는 C1-C10의 직쇄 또는 측쇄 알킬; 하이드록시; C1-C10의 직쇄 또는 측쇄 알콕시, 나이트로, 할로겐, 시아노; 하이드록시 C1-C10의 직쇄 또는 측쇄 알킬; 비치환 또는 할로겐, C1-C10의 직쇄 또는 측쇄 알킬, C1-C10의 직쇄 또는 측쇄 알콕시, 하이드록시, 나이트로 및 시아노로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 이상의 치환기로 치환된 C5-C12 아릴; 비치환 또는 C1-C10 직쇄 또는 측쇄 알킬, 하이드록시 C1-C10 직쇄 또는 측쇄 알킬 및 고리 내 N 원자를 포함하는 C5-C8의 헤테로 사이클로 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 1 이상의 치환기로 치환된 고리내 1 이상의 N,O 또는 S원자를 포함하는 5-15원의 헤테로 아릴; 및 고리 내 1개 이상의 헤테로 원자를 갖는 5-8원의 헤테로 사이클로 알킬로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 이상의 치환기이되, 상기 R3이 2 이상의 치환기인 경우 상기 치환기들은 고리를 형성할 수 있고;
R4는 H, C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬, 5-8원의 아릴 C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬 또는 5-8원의 아릴이다.)
바람직하게는, 상기 R1 및 R2는 각각 H, F, C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고;
R3는 C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬; 하이드록시; C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알콕시, 나이트로, 할로겐, 시아노; 하이드록시 C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬; 비치환 또는 할로겐, C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬, C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알콕시, 하이드록시, 나이트로 및 시아노로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 이상의 치환기로 치환된 C5-C12 아릴; 비치환 또는 C1-C4 직쇄 또는 측쇄 알킬, 하이드록시 C1-C4 직쇄 또는 측쇄 알킬 및 고리 내 N 원자를 포함하는 C5-C6의 헤테로 사이클로 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 1 이상의 치환기로 치환된 고리내 1 이상의 N,O 또는 S원자를 포함하는 5-15원의 헤테로 아릴; 및 고리 내 1개 이상의 헤테로 원자를 갖는 5-8원의 헤테로 사이클로 알킬로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 이상의 치환기이되, 상기 R3이 2 이상의 치환기인 경우 상기 치환기들은 고리를 형성할 수 있고;
R4는 수소, C1-C3의 직쇄 또는 측쇄 알킬, 5-6원의 아릴 C1-C3의 직쇄 또는 측쇄 알킬 또는 5-6원의 아릴이다.
더욱 바람직하게는,
상기 R1 및 R2는 각각 H 또는 F이고;
R3는
Figure pat00003
,
Figure pat00004
,
Figure pat00005
,
Figure pat00006
,
Figure pat00007
,
Figure pat00008
,
Figure pat00009
,
Figure pat00010
,
Figure pat00011
,
Figure pat00012
,
Figure pat00013
,
Figure pat00014
,
Figure pat00015
,
Figure pat00016
,
Figure pat00017
또는
Figure pat00018
이고;
R4는 수소, 메틸 또는 에틸이다.
본 발명의 화학식 1로 표시되는 신규 메틸이소퀴놀린 치환된 트리아졸로피리다진 유도체의 구체적인 화합물은 하기와 같다.
1) 5-((6-(3-플루오로페닐)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
2) 5-((6-페닐-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
3) 5-((6-(2-클로로페닐)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
4) 5-((6-(3-클로로페닐)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
5) 5-((6-o-톨릴-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
6) 5-((6-(3-하이드록시페닐)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
7) 5-((6-(3-메톡시페닐)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
8) 5-((6-(2,5-디플루오로페닐)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
9) 5-((6-(3-니트로페닐)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
10) 3-(3-((1-옥소-1,2-디하이드로이소퀴놀린-5-일)메틸)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-6-일)벤조나이트릴;
11) 5-((6-(피리딘-3-일)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
12) 5-((6-(싸이오펜-3-일)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
13) 5-((6-(1H-피라졸-4-일)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
14) 5-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
15) 5-((6-(디벤조[b,d]퓨란-4-일)-1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
16) 5-((6-(벤조[b]싸이오펜-3-일)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
17) 5-((6-(피페리딘-1-일)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
18) 5-((6-(피롤리딘-1-일)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
19) 5-((6-(3-플루오로페닐)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)-2-메틸이소퀴놀린-1(2H)-온;
20) 2-에틸-5-((6-(3-플루오로페닐)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸이소퀴놀린-1(2H)-온;
21) 5-((6-(1-(2-히드록시에틸)-1H-피라졸-4-일)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온; 및
22) 5-((6-(1-(피페리딘 4-일)-1H-피라졸-4-일)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진 -3-일) 메틸) 이소퀴놀린-1(2H)-온.
본 발명의 상기 화학식 1로 표시되는 신규 메틸이소퀴놀린 치환된 트리아졸로피리다진 유도체는 약학적으로 허용 가능한 염의 형태로 사용할 수 있으며, 염으로는 약학적으로 허용가능한 유리산(free acid)에 의해 형성된 산부가염이 유용하다. 약학적으로 허용가능한 염이란 표현은 환자에게 비교적 비독성이고 무해한 유효작용을 갖는 농도로서 이 염에 기인한 부작용이 화학식 1의 염기 화합물의 이로운 효능을 떨어뜨리지 않는 화학식 1의 염기 화합물의 어떠한 유기 또는 무기 부가염을 의미한다. 이들 염은 유리산으로는 무기산과 유기산을 사용할 수 있으며, 무기산으로는 염산, 브롬산, 질산, 황산, 과염소산, 인산 등을 사용할 수 있고, 유기산으로는 구연산, 초산, 젖산, 말레산, 푸마린산, 글루콘산, 메탄설폰산, 글리콘산, 숙신산, 타타르산, 갈룩투론산, 엠본산, 글루탐산, 아스파르트산, 옥살산, (D) 또는 (L) 말산, 말레산, 메테인설폰산, 에테인설폰산, 4-톨루엔술폰산, 살리실산, 시트르산, 벤조산 또는 말론산 등을 사용할 수 있다. 또한, 이들 염은 알칼리 금속염(나트륨염, 칼륨염 등) 및 알칼리 토금속염(칼슘염, 마그네슘염 등) 등을 포함한다. 예를 들면, 산부가염으로는 아세테이트, 아스파테이트, 벤즈에이트, 베실레이트, 바이카보네이트/카보네이트, 바이설페이트/설페이트, 보레이트, 캄실레이트, 시트레이트, 에디실레이트, 에실레이트, 포메이트, 퓨마레이트, 글루셉테이트, 글루코네이트, 글루큐로네이트, 헥사플루오로포스페이트, 하이벤제이트, 하이드로클로라이드/클로라이드, 하이드로브로마이드/브로마이드, 하이드로요오디드/요오디드, 이세티오네이트, 락테이트, 말레이트, 말리에이트, 말로네이트, 메실레이트, 메틸설페이트, 나프틸레이트, 2-나프실레이트, 니코티네이트, 나이트레이트, 오로테이트, 옥살레이트, 팔미테이트, 파모에이트, 포스페이트/수소 포스페이트/이수소 포스페이트, 사카레이트, 스테아레이트, 석시네이트, 타르트레이트, 토실레이트, 트리플루오로아세테이트, 알루미늄, 알기닌, 벤자틴, 칼슘, 콜린, 디에틸아민, 디올아민, 글라이신, 라이신, 마그네슘, 메글루민, 올아민, 칼륨, 나트륨, 트로메타민, 아연염 등이 포함될 수 있으며, 이들 중 하이드로클로라이드 또는 트리플루오로아세테이트가 바람직하다.
또한, 본 발명의 상기 화학식 1로 표시되는 신규 메틸이소퀴놀린 치환된 트리아졸로피리다진 유도체는 약학적으로 허용되는 염뿐만 아니라, 통상의 방법에 의해 제조될 수 있는 모든 염, 이성질체, 수화물, 용매화물을 모두 포함한다.
본 발명에 따른 부가염은 통상의 방법으로 제조할 수 있으며, 예를 들면 화학식 1의 화합물을 수혼화성 유기용매, 예를 들면 아세톤, 메탄올, 에탄올, 또는 아세토니트릴 등에 녹이고 과량의 유기산을 가하거나 무기산의 산 수용액을 가한 후 침전시키거나 결정화시켜서 제조할 수 있다. 이어서 이 혼합물에서 용매나 과량의 산을 증발시킨 후 건조시켜서 부가염을 얻거나 또는 석출된 염을 흡인 여과시켜 제조할 수 있다.
본 명세서에서 이성질체는 동일한 화학식 또는 분자식을 가지지만 광학적 또는 입체적으로 다른 본 발명의 화합물 또는 그것의 염을 의미하며, 상기 이성질체 및 이들의 혼합물 역시 본 발명의 범위에 포함된다.
또한, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 바와 같이,
출발물질인 화학식 2의 화합물을 화학식 3의 화합물과 헥(Heck) 반응시켜 화학식 4의 화합물을 제조하는 단계(단계 1);
상기 단계 1에서 제조된 화학식 4의 화합물을 화학식 5의 화합물과 커플링(coupling)시켜 화학식 6의 화합물을 제조하는 단계(단계 2);
상기 단계 2에서 제조된 화학식 6의 화합물을 고리화 반응시켜 화학식 7의 화합물을 제조하는 단계(단계 3);
상기 단계 3에서 제조된 화학식 7의 화합물을 치환반응시켜 화학식 8의 화합물을 제조하는 단계(단계 4);
상기 단계 4에서 제조된 화학식 8의 화합물을 아지드화 반응시켜 화학식 9의 화합물을 제조하는 단계(단계 5);
상기 단계 5에서 제조된 화학식 9의 화합물을 고리화 반응시켜 화학식 10의 화합물을 제조하는 단계(단계 6);
상기 단계 6에서 제조된 화학식 10의 화합물을 스즈키 커플링 반응 또는 치환반응시켜 화학식 1A의 화합물을 제조하는 단계(단계 7)를 포함하는 신규 메틸이소퀴놀린 치환된 트리아졸로피리다진 유도체의 제조방법을 제공한다.
[반응식 1]
Figure pat00019
.
(상기 반응식 1에서,
R1, R2 및 R3는 상기 화학식 1에서 정의한 바와 같고,
상기 화학식 1A는 상기 화학식 1에 포함된다.)
이하, 본 발명에 따른 제조방법을 단계별로 상세히 설명한다.
단계 1
본 발명에 따른 상기 단계 1은 출발물질인 화학식 2의 화합물을 화학식 3의 화합물과 헥 반응시켜 화학식 4의 화합물을 제조하는 단계이다.
상기 출발물질인 화학식 2의 화합물은 시판되는 것을 사용하거나 당업계에 알려진 방법으로 합성하여 얻을 수 있다.
상기 단계 1의 반응은 유기화학 분야에서 통상적으로 널리 알려져 있으며, 반응 용매, 반응 온도, 반응 시간 등의 조건은 반응물질 및 생성물질 등을 고려하여 적절히 선택할 수 있다. 일례로 본 발명에서는 반응 용매로서 1,4-디옥산을 사용하였고, 팔라듐 아세테이트 촉매를 사용하여 12시간 환류시켜 상기 화학식 4의 화합물을 수득할 수 있다.
단계 2
본 발명에 따른 상기 단계 2는 상기 단계 1에서 제조된 화학식 4의 화합물을 용매하에 화학식 5의 피리다진 화합물과 반응시켜 화학식 6의 화합물을 제조하는 단계이다.
구체적으로는 상기 화학식 4의 화합물과 화학식 5의 피리다진 화합물, N-(3-디메틸아미노프로필)-N-에틸카보다이이미드 염산염을 무수 메틸렌클로라이드에 넣고 0 ℃에서 실온으로 온도를 올려가며 교반하여 화학식 6의 화합물을 수득할 수 있다.
단계 3
본 발명에 따른 상기 단계 3은 상기 단계 2에서 제조된 화학식 6의 화합물을 용매 및 산 촉매 하에서 화학식 7의 화합물로 전환하는 단계이다.
구체적으로는 상기 화학식 6의 화합물과 파라톨루엔 설폰산을 테트라하이드로퓨란에 녹이고 60 ℃에서 밤새 교반하여 화학식 7의 화합물을 수득할 수 있다.
단계 4
본 발명에 따른 상기 단계 4는 상기 단계 3에서 제조된 화학식 7의 화합물을 용매하에서 아크릴릭 산인 화학식 8의 화합물로 전환하는 단계이다.
구체적으로 상기 화학식 7의 화합물과 트리플루초산을 메틸렌클로라이드에 녹인 후 실온에서 2시간 동안 교반하여 화학식 8의 화합물을 수득할 수 있다.
단계 5
본 발명에 따른 상기 단계 5는 상기 단계 4에서 제조된 화학식 8의 화합물을 염기와 용매 하에서 소디움 아자이드와 반응시켜 화학식 9의 화합물을 제조하는 단계이다.
구체적으로 상기 화학식 8의 화합물과 트리에틸 아민을 아세톤에 넣고 0 ℃로 온도를 낮춘 후 에틸클로로포메이트를 천천히 넣어준다. 소디움 아자이드를 추가하고 교반하여 화학식 9의 화합물을 수득할 수 있다.
단계 6
본 발명에 따른 상기 단계 6은 상기 단계 5에서 제조된 화학식 9의 화합물을 염기 및 용매 하에서 반응시켜 화학식 10의 화합물을 제조하는 단계이다.
구체적으로 상기 화학식 9의 화합물과 트리부틸아민을 디페닐 에테르에 넣고 140 ℃에서 20분, 210 ℃에서 50분간 교반하여 화학식 10의 화합물을 수득할 수 있다.
단계 7
본 발명에 따른 상기 단계 7은 상기 단계 6에서 제조된 화학식 10의 화합물을 스즈키 커플링 또는 화학식 10의 화합물의 클로라이드 기를 R3기로 치환하여 화학식 1A의 목적 화합물을 제조하는 단계이다.
또한, 본 발명은 하기 반응식 2에 나타낸 바와 같이 화학식 1A의 화합물을 알킬화 반응을 통해 화학식 1의 화합물을 제조하는 단계(단계 8)를 더 포함할 수 있다.
[반응식 2]
Figure pat00020
.
(상기 반응식 2에서,
R1, R2, R3 및 R4는 화학식 1에서 정의한 바와 같으나, 단 R4는 H를 제외한다.)
나아가, 본 발명의 화학식 1A의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 보호기를 수반하는 경우, 하기 반응식 3 또는 반응식 4에 표시되는 바와 같이 탈보호 반응을 추가로 수행할 수 있다.
[반응식 3]
Figure pat00021
.
[반응식 4]
Figure pat00022
.
(상기 반응식 3 또는 4에서,
R1 및 R2는 상기 화학식 1에서 정의한 바와 같다.)
상기 탈보호 반응은 당업계에서 통상적으로 사용되는 방법을 이용하여 수행할 수 있다.
나아가, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 이상세포 성장 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 c-Met 키나아제를 억제하여 세포의 증식을 억제하는 이상세포 성장 질환의 예방 및 치료에 이용될 수 있다.
또한, 상기 이상세포 성장 질환은 폐암, 뼈암, 췌장암, 피부암, 두경부암, 피부 또는 안구내 흑색종, 자궁암, 난소암, 직장암, 항문 주위 암, 위암, 결장암, 유방암, 자궁암, 나팔관 암, 자궁내막 암, 자궁경부암, 질암, 외음부암, 포지킨병, 식도암, 소장암, 내분비계암, 갑상선암, 부갑상선암, 부신암, 연조직 육종, 요도암, 음경암, 전립선암, 만성 또는 급성 백혈병, 림프구 림프종, 방광암, 신장 또는 수뇨관 암, 신세포암, 신우암, 중추 신경계(CNS) 종양, 1차 CNS 림프종, 척수 종양, 뇌간 신경교종 및 뇌하수체 선종 등이 바람직하다.
나아가, 상기 이상세포 성장 질환은 건선, 양성 전립선 비대 또는 망막증인 것이 바람직하다.
또한, 상기 이상세포 성장질환은 양성 증식성 질환인 것이 바람직하며, 상기 양성 증식성 질환은 섬유선종, 경화성 선질환 또는 유두종 등이 바람직하다.
상기 화학식 1로 표시되는 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 용매화물 및 수화물은 c-Met 단백질 키나아제를 억제할 수 있다.
c-Met은 항암제 타겟으로 연구되고 있는 간세포 성장인자(HGF/SF) 수용체로서, 이를 타겟으로 하는 항암제가 많이 보고되고 있다(J. G. Christensen, J. Burrows et al., Cancer Letters, 2005, 225, 1-26; WO 2004/076412; WO 2006/021881 A; WO 2006/021886; WO 2007/064797).
c-Met은 종양 형성, 증대된 세포 운동성 및 침입성 하에서의 종양 진행, 및 전이에 수반되는 폐암, 위암, 피부암, 신장암, 직장암, 췌장암 등의 많은 인간 암에서 과발현 또는 활성화되어 있다(J. G. Christensen et al., Cancer Letters, 2005, 225, 1-26; W. G. Jiang et al., Critical Reviews in Oncology/Hematology, 2005, 53, 35-69). c-Met 및 이의 리간드인 HGF는 많은 조직에서 발현되지만, 정상적으로는 주로 상피 및 간엽 기원의 세포 각각으로 한정되어 발현된다. c-Met 및 HGF/SF는 정상적인 포유동물의 발육에 필요하며, 세포 전이, 세포 증식 및 생존, 형태 형성성 분화 및 3-차원적 관상 구조물(신 세뇨관 세포, 선 형성 등)의 조직화에서 중요한 것으로 밝혀졌다. HGF/SF는 신생혈관생성 인자이며, 상피 세포에서의 c-Met 신호전달은 신생혈관생성에 필수적인 세포 반응(증식, 운동성, 침입성 등)을 유도한다.
또한 c-Met 및 이의 리간드인 HGF는 다양한 인간 암에서 증가된 수준으로 공-발현되는 것으로 밝혀졌다. 그러나, 수용체 및 리간드는 통상적으로 상이한 세포 유형에 의해 발현되기 때문에, c-Met 신호전달은 대부분 보편적으로 종양-기질(tumor-stroma) 상호작용에 의해 조절된다.
또한, c-Met은 유전자 증폭, 돌연변이 및 재배열이 다양한 인간 암에서 관찰되었다. c-Met 키나아제를 활성화시키는 생식계 돌연변이를 갖는 부류는 다중 신장 종양 및 다른 조직의 종양에 걸리기 쉽다.
본 발명에 따른 화학식 1의 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 c-Met 키나아제 활성 실험에서 IC50가 2 μM 이하의 c-Met 키나아제 저해 활성을 갖는 결과를 나타내었다.
또한, 본 발명에 따른 화학식 1의 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 암세포 증식억제 실험에서 GI50가 Hs746T, MKN45에 대해서 10 μM 이하의 암세포 증식억제 활성을 갖는 결과를 나타내었다.
따라서, 본 발명에 따른 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적인 염을 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물은 c-Met의 발현으로부터 유도되는 상술한 각종 암을 치료하는데 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명의 화합물은 임상 투여시에 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있으며, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 제조된다.
경구투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환자, 산제, 과립제, 캡슐제, 트로키제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 하나 이상의 본 발명의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose) 또는 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 또는 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁용제, 유제, 동결건조제제, 좌제 등이 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤, 젤라틴 등이 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 화합물의 인체에 대한 효과적인 투여량은 환자의 나이, 몸무게, 성별, 투여형태, 건강상태 및 질환 정도에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로 약 0.001-100 mg/kg/일이며, 바람직하게는 0.01-35 mg/kg/일이다. 몸무게가 70 ㎏인 성인 환자를 기준으로 할 때, 일반적으로 0.07-7000 mg/일이며, 바람직하게는 0.7-2500 ㎎/일이며, 의사 또는 약사의 판단에 따라 일정시간 간격으로 1일 1회 내지 수회로 분할 투여할 수도 있다.
이하, 본 발명을 실시예에 의하여 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
하기 실시예에서, "Et"는 에틸을 의미하고, "Me"는 메틸을 의미하고, "t-Bu"는 3급-부틸을 의미하고, "THP"는 테트라하이드로피라닐을 의미하고, "EtOAc"는 에틸 아세테이트를 의미하고, "NEt3" 또는 "Et3N"은 트리에틸아민을 의미하고, "Et2O"는 디에틸에테르를 의미하고, "MeOH"는 메탄올을 의미하고, "DMSO"는 디메틸설폭사이드를 의미하고, "CDCl3"는 중수소화 클로로폼을 의미하고, "CH2Cl2"는 메틸렌클로라이드(이염화탄소)를 의미하고, "DMF"는 디메틸 폼아마이드를 의미하고, "Na2CO3"는 탄산나트륨를 의미하고, "K2CO3"는 탄산칼륨을 의미하고, "MgSO4"는 황산마그네슘을 의미한다.
< 제조예 1> 5-((6- 클로로 -[1,2,4] 트리아졸로 [4,3-b] 피리다진 -3-일) 메틸 )이소퀴놀린-1(2H)-온(10)의 제조
단계 1: (E)-2-(2-(3-t- 부톡시 -3- 옥소프로피 -1- 에닐 ) 페닐 )초산(4)의 제조
Figure pat00023
무수 1,4-디옥산 80 mL에 2-브로모페닐초산(10.0 g, 46.5 mmol), t-부틸 아크릴레이트(13.5 mL, 93 mmol), 3-o-톨릴인산(2.1 g, 7 mmol), 트리부틸아민(22.2 mL, 93 mmol) 및 팔라듐 아세테이트(0.5 g, 2.2 mmol)를 넣고 120 ℃에서 12시간 동안 무수조건에서 환류시켰다. 셀라이트에서 여과한 후 여액을 5% 염산 수용액으로 씻어주고 무수 황산 마그네슘에서 건조 후 감압 농축하여 화학식 4의 화합물(11.5 g, 94.3%)을 얻었다.
1H NMR(CDCl3) δ 1.50(s, 9H), 3.71(s, 2H), 6.30(d, 1H), 7.16-7.34(m, 3H), 7.6(d, 1H), 7.85(d, 1H).
단계 2: (E)-t-부틸 3-(2-(2-(2-(6- 클로로피리다진 -3-일) 히드라지닐 )-2- 옥소 에틸) 페닐 ) 아크릴레이트 (6)의 제조
Figure pat00024
상기 단계 1에서 얻은 화학식 4의 화합물 8.2 g(31 mmol) 과 3-클로로-6-히드라진일피리다진(5.0 g, 34 mmol)을 100 mL의 무수 메틸렌클로라이드에 녹인 후 0 ℃로 냉각하였다. N-(3-디메틸아미노프로필)-N-에틸카르보디이미드 염산(7.8 g, 40 mmol)을 5분에 걸쳐 추가하고 30분 동안 온도를 유지하여 교반한 후 실온으로 올려 1시간 동안 더 교반하였다. 물(100 mL)을 넣고 유기 층을 분리한 후 무수 황산마그네슘으로 건조 후 감압 농축하여 화학식 6의 화합물을 9.64 g(79.3%) 얻었다.
1H NMR(CDCl3) δ 1.51(s, 9H), 3.80(s, 2H), 6.33(d, 1H), 6.89(d, 1H), 7.16(d, 1H), 7.24-7.31(m, 4H), 7.60(d, 1H), 7.87(d, 1H), 8.1(s, 1H).
단계 3: (E)-t-부틸 3-(2-((6- 클로로 -[1,2,4] 트리아졸로 [4,3-b] 피리다진 -3-일) 메틸 ) 페닐 ) 아크릴레이트 (7)의 제조
Figure pat00025
상기 단계 2에서 수득한 화학식 6의 화합물(9.6 g, 24.7 mmol)과 파라톨루엔 설폰산(0.47 g, 2.5 mmol)을 100 mL의 테트라히드로퓨란에 녹인 후 용액의 온도를 60 ℃로 올려 교반하였다. 밤새 교반 후 포화 탄산수소나트륨 용액(30 mL) 및 에틸아세테이트(100 mL)를 추가하였다. 유기 층을 추출한 후 소금물(50 mL)로 씻고 무수 황산마그네슘으로 건조하고 농축하여 7.45 g(79.3%)의 화학식 7의 화합물을 얻었다.
1H NMR(CDCl3) δ 1.52(s, 9H), 4.65(s, 2H), 6.30(d, 1H), 7.09(d, 1H), 7.26-7.33(m, 3H), 7.52-7.60(m, 1H), 8.05(d. 1H), 8.13(d, 1H).
단계 4: (E)-3-(2-((6- 클로로[1,2,4]트리아졸로 [4,3,b] 피리다진 -3-일) 메틸 )페닐) 아크릴릭 산(8)의 제조
Figure pat00026
상기 단계 3에서 수득한 화학식 7의 화합물 6.4 g(17.2 mmol) 및 트리플루초산 10 mL을 메틸렌클로라이드 50 mL에 녹인 후 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 용액을 농축한 후 100 mL의 에틸에테르로 씻고 흰 고체의 화학식 8의 화합물 5.14 g(96.4%)을 얻었다.
1H NMR(DMSO-d6) δ 4.61(s, 2H), 6.4(d, 1H), 7.35(m, 3H), 7.5(m, 1H), 7.75(m, 1H), 8.0(d, 1H), 8.45(d, 1H)
단계 5: (E)-3-(2-((6- 클로로 -[1,2,4] 트리아졸로 [4,3-b] 피리다진 -3-일) 메틸 )페닐)아크릴로일 아자이드 (9)의 제조
Figure pat00027
상기 단계 4에서 수득한 화학식 8의 화합물 3.3g(10.5 mmol) 및 트리에틸아민 1.92 mL(13.8 mmol)를 60 mL의 아세톤에 가하여 온도를 0 ℃로 낮춘 후 에틸 클로로포메이트 1.29 mL(13.5 mmol)을 5분에 걸쳐 천천히 주입하였다. 10분 후 30 mL의 물에 녹인 소디움 아자이드 1.38 g(21 mmol)을 10분 동안 천천히 적하하였다. 10분 동안 교반하여 생성된 고체를 여과하고 얼음물 100 mL로 씻어 주었다. 생성된 고체를 50 mL의 메틸렌디클로라이드에 녹인 후 무수 황산마그네슘으로 건조 후 감압 농축하여 화학식 9의 화합물을 2.97 g(83.4%) 흰 고체로 얻었다.
m.p: 124-125 ℃.
1H NMR(CDCl3) δ 4.66(s,2H), 6.36(d, 1H), 7.10(d, 1H), 7.26-7.46(m, 3H), 7.59(d, 1H), 8.05(d, 1H), 8.34(d, 1H).
단계 6: 5-((6- 클로로 -[1,2,4] 트리아졸로 [4,3-b] 피리다진 -3-일) 메틸 )이소퀴놀린-1(2H)-온(10)의 제조
Figure pat00028
상기 단계 5에서 수득한 화학식 9의 화합물 2.3 g(6.7 mmol) 및 트리부틸아민 1.62 mL(5.8 mmol)을 디페닐 에테르에 섞은 용액을 140 ℃에서 20분간 교반하고 210 ℃에서 50분 동안 재교반시켰다. 반응액을 실온으로 식힌 후 50 mL의 노말 헥산을 넣고 생성된 고체를 여과하였다. 100 mL의 에틸에테르로 씻어준 후 실리카젤 컬럼 크로마토그래피를 하여 백색 고체의 화학식 10의 화합물 1.0 g(47.4%)을 얻었다.
1H NMR(DMSO-d6) δ 4.70(s,2H), 6.77(d, 1H), 7.2(m, 1H), 7.04-7.51(m, 2H), 7.59(d, 1H), 8.15(d, 1H), 8.44(d, 1H), 11.33(bs, 1H).
< 실시예 1> 5-((6-(3- 플루오로페닐 )-[1,2,4] 트리아졸로 [4,3-b] 피리다진 -3-일) 메틸 )이소퀴놀린-1(2H)-온의 제조
Figure pat00029
상기 제조예 1에서 얻은 화학식 10의 화합물 220 mg(0.7 mmol), 3-플루오로페닐 보로닉산 128 mg(0.8 mmol), 세슘카보네이트 690 mg(2 mmol) 및 [1,1'-비스(디페닐포스피노) 페로센]디클로로팔라듐(II)을 20 mL의 디메톡시에탄과 4 mL의 물의 혼합용매에 투입하고 80 ℃의 질소 환경하에서 밤새 가열하였다. 20 mL의 에틸아세테이트를 첨가한 후 셀라이트에서 필터하고 유기층을 건조하고 농축하였다. 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 목적 화합물 160 mg(61.1%)을 흰색 고체로 얻었다.
1H NMR (DMSO-d6) δ 4.88(s, 2H), 6.91(d, 1H), 7.21(t, 1H), 7.45(m, 2H), 7.63(m, 1H), 7.77(d, 1H), 7.95(m, 3H), 8.14(d, 1H), 8.44(d, 1H), 11.34(bs, 1H).
<실시예 2~16>
상기 3-플루오로 페닐 보로닉산 대신 다양한 보로닉산을 이용한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일한 방법을 수행하여 목적 화합물을 제조하였다.
제조된 화합물은 하기 표 1에 나타내었다.
Figure pat00030
실시예 명칭 R1- 수율(%) 1H NMR (DMSO-d6)
2 5-((6-페닐-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온
Figure pat00031
 72.9 4.84(s, 1H), 6.89(d, 1H), 7.20(t, 1H), 7.43(t, 1H), 7.5(s, 3H),7.74(d, 1H),7.93(d, 1H), 8.06-8.13(m, 3H), 8.40(d, 1H), 11.30(bs, 1H)
3 5-((6-(2-클로로페닐)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온
Figure pat00032
 50.0 4.76(s, 1H), 6.78(d, 1H), 7.14(t, 1H), 7.37(t, 1H), 7.49-7.66(m, 6H), 8.10(d, 1H), 8.40(d, 1H), 11.38(bs, 1H)
4 5-((6-(3-클로로페닐)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온
Figure pat00033
 40.1 4.90(s, 2H), 6.91(d, 1H), 7.21(t, 1H), 7.45-7.6(m, 4H), 7.63(m, 1H), 7.8(m, 2H), 8.14(d, 1H), 8.39(d, 1H), 11.34(bs, 1H)
5 5-((6-o-톨릴-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온
Figure pat00034
 40.0 4.72(s, 2H), 6.76(d, 1H), 7.12(t, 1H), 7.32-7.52(m, 7H), 8.07(d, 1H), 8.34(d, 1H), 11.27(bs, 1H)
6 5-((6-(3-하이드록시페닐)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온
Figure pat00035
 39.0 4.82(s, 2H), 6.87-6.98(m, 1H), 7.17-7.22(m, 1H), 7.33-7.50(m, 4H), 7.73(d, 1H), 7.85(d, 1H), 8.13(d, 1H), 8.36(d, 1H), 9.83(bs, 1H), 11.2(bs, 1H)
7 5-((6-(3-메톡시페닐)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온
Figure pat00036
 16.2 3.88(s, 3H), 4.95(s, 2H), 7.14(m, 2H), 7.22(d, 1H), 7.44-7.60(m, 4H), 7.84-7.91(m, 2H), 8.25(m, 2H)
8 5-((6-(2,5-디플루오로페닐)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온
Figure pat00037
 20.0 4.91(s, 2H), 7.22-7.34(m, 3H), 7.41-7.52(m, 3H), 7.6(m, 1H), 7.87(d, 1H), 8.16(d, 1H), 8.37(d, 1H)
9 5-((6-(3-니트로페닐)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온
Figure pat00038
 72.1 4.79(s, 2H), 6.83(d, 1H), 7.11(t, 1H), 7.37(t, 1H), 7.72-8.06(m, 4H), 8.32-8.42(m, 3H), 8.76(s, 1H), 11.2(bs, 1H)
10 3-(3-((1-옥소-1,2-디하이드로이소퀴놀린-5-일)메틸)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-6-일)벤조나이트릴
Figure pat00039
 76.2 4.82(s, 2H), 6.81(d, 1H), 7.13(t, 1H), 7.37(m, 2H), 7.75-8.06(m, 5H), 8.33-8.50(m, 2H), 11.2(bs, 1H)
11 5-((6-(피리딘-3-일)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온
Figure pat00040
 18.5 4.53(s, 2H), 7.0-7.1(m, 3H), 7.16-7.33(m, 2H), 7.46(d, 2H), 8.10(d, 1H), 8.29(d, 1H), 8.56s, 1H), 8.69(t, 1H), 10.06(bs, 1H)
12 5-((6-(싸이오펜-3-일)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온
Figure pat00041
 72.9 4.80(s, 2H), 6.88(d, 1H), 7.185(t, 1H), 7.4(m, 1H), 7.73-7.96(m, 4H), 8.10(d, 1H), 8.33(d, 1H), 8.49(s, 1H), 11.28(bs, 1H)
13 5-((6-(1H-피라졸-4-일)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온
Figure pat00042
 45.5 4.79(s, 2H), 6.92(d, 1H), 7.21(t, 1H), 7.46(t, 1H), 7.72(d, 1H), 7.83(d, 1H), 8.13(d, 1H), 8.18(s, 1H), 8.31(t, 1H), 8.60(s, 1H), 11.3(bs, 1H), 13.42(bs, 1H)
14 5-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온
Figure pat00043
 75.0 3.32(s, 3H), 4.78(s, 2H), 6.91(d, 1H), 7.23(d, 1H), 7.45(t, 1H), 7.66(d, 1H), 7.80(d, 1H), 8.13(m, 2H), 8.31(d, 1H), 8.51(s, 1H), 11.3(bs, 1H)
15 5-((6-디벤조[b,d]퓨란-4-일)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온
Figure pat00044
 63.3 4.82(s, 2H), 6.86(d, 1H), 7.13(t, 1H), 7.37(m, 2H), 7.42-7.71(m, 4H), 7.99-8.18(m, 4H), 8.33-8.50(m, 2H), 11.2(bs, 1H)
16 5-((6-(벤조[b]싸이오펜-3-일)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온
Figure pat00045
 25.6 4.78(s, 2H), 6.91(d, 1H), 7.20(t, 1H), 7.47(m, 3H), 7.82(d, 1H), 7.91(d, 2H), 8.07(m, 3H), 8.41(t, 2H), 11.29(bs, 1H)
< 실시예 17> 5-((6-(피페리딘-1-일)-[1,2,4] 트리아졸로 [4,3-b] 피리다진 -3-일) 메틸 )이소퀴놀린-1(2H)-온의 제조
Figure pat00046
상기 제조예 1에서 수득한 화학식 10의 화합물 50 mg(0.16 mmol) 및 피페리딘 1 mL를 질소 환경하의 100 ℃에서 2시간 동안 교반 하였다. 실온으로 식힌 후 감압 농축하고 PTLC(preparativie thin layer chromatography)하여 22 mg(38.1%)의 노란빛깔의 목적 화합물을 얻었다.
1H NMR(DMSO-d6) δ 1.67(m, 6H), 3.41(m, 4H), 4.67(s, 2H), 6.94(d, 1H), 7.06(m, 1H), 7.36-7.45(m, 2H), 7.76-7.80(m, 2H), 8.31(m, 1H), 10.8(bs, 1H).
< 실시예 18> 5-((6-( 피롤리딘 -1-일)-[1,2,4] 트리아졸로 [4,3-b] 피리다진 -3-일) 메틸 )이소퀴놀린-1(2H)-온의 제조
Figure pat00047
피페리딘 대신 피롤리딘을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 17과 동일한 방법으로 수행하여 목적 화합물(52%)을 얻었다.
1H NMR(DMSO-d6) δ 2.05(m, 4H), 3.48(m, 4H), 4.68(s, 2H), 6.70(d, 1H), 7.04-7.13(m, 2H), 7.40(t, 1H), 7.76(d, 1H), 7.83(d, 1H), 8.30(d, 1H), 10.48(bs, 1H).
< 실시예 19> 5-((6-(3- 플루오로페닐 )-[1,2,4] 트리아졸로 [4,3-b] 피리다진 -3-일) 메틸 )-2- 메틸이소퀴놀린 -1(2H)-온(1-1)의 제조
Figure pat00048
무수 N,N-디메틸포름알데히드에 소듐하이드라이드 14 mg(60%, 0.36 mmol)을 질소 환경하에서 투입하고 온도를 0 ℃로 낮춘다. 실시예 1에서 제조된 5-((6-(3-플루오로페닐)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1-(2H)-온 66 mg( 0.18mmol)을 추가하여 실온에서 30분간 교반시킨 후 요오드메틸 48 mg(0.8mmol)을 넣고 30분간 더 교반하였다. 실온으로 온도를 올린 후 1시간 동안 더 교반 시키고 2 mL의 물과 10 mL의 에틸아세테이트를 넣고 유기 층을 추출한 후 감압농축하고 PTLC(preparativie thin layer chromatography)하여 목적 화합물 20 mg(29.2%)을 흰색 고체로 얻었다.
1H NMR(MeOH-d4) 3.61(s, 3H), 4.94(s, 2H), 6.96-7.19(m, 3H), 7.24-7.65(m, 5H), 7.85(d, 1H), 7.86-8.4(m, 2H).
< 실시예 20> 2-에틸-5-((6-(3- 플루오로페닐 )-[1,2,4] 트리아졸로 [4,3-b] 피리다진 -3-일) 메틸이소퀴놀린 -1(2H)-온(1-2)의 제조
Figure pat00049
메틸요오드 대신 에틸요오드를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 19와 동일한 방법으로 수행하여 목적 화합물(15%)을 얻었다.
1H NMR(DMSO-d6) δ 1.20(t, 3H), 4.0(q, 2H), 4.92(s, 2H), 7.0-7.67(m, 8H), 7.85(d, 1H), 8.29(m, 1H), 8.40(d. 1H).
< 실시예 21> 5-((6-(1-(2- 히드록시에틸 )-1H- 피라졸 -4-일)-[1,2,4] 트리아졸로 [ 4,3-b]피리다진 -3-일) 메틸 )이소퀴놀린-1(2H)-온의 제조
Figure pat00050
3-플루오로페닐 보로닉산 대신 140 mg의 1-(2-(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)에틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)-1H-피라졸을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 5-((6-(1-(2-(테트라히드로-2H-피란-2-일옥시)에틸) -1H- 피라졸-4-일)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이조퀴놀린-1(2H)-온 15 mg을 얻었다. 수득한 화합물을 3 mL의 메틸렌클로라이드에 녹인 후 1.0 M 염산(에틸에테르용액) 0.5 mL를 추가하고 실온에서 2시간 동안 반응시켰다. 감압 농축하고 PTLC하여 5 mg의 목적 화합물을 얻었다.
1H NMR(DMSO-d6) δ 3.95(m, 2H), 4.30(m, 2H), 4.84(s, 2H), 6.96-7.16(m, 2H), 7.32-7.51(m, 2H), 7.84(d, 1H), 8.00-8.08(m, 3H), 8.31(d, 1H).
< 실시예 22> 5-((6-(1-(피페리딘 4-일)-1H- 피라졸 -4-일)-[1,2,4] 트리아졸 로[ 4,3-b]피리다진 -3-일) 메틸 ) 이소퀴놀린-1(2H)- 온염산염의 제조
Figure pat00051
54 mg의 t-부틸 (4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2- 디옥사보로란-2-일)-1H-피라졸-1-일) 피페리딘-1-카르복실레이트를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 t-부틸-4-(4-(3-((1-옥소-1,2-디하이드로이소퀴놀린-5-일)메틸)-[1,2,4] 트리아졸로[4,3-b]피리다진-6-일)-1H- 피라졸-1-일)피퍼리딘-1-카르복실레이트 30 mg을 얻었다. 상기 화합물을 3 mL의 메틸렌클로라이드에 녹인후 1.0 M 염산 (에틸에테르용액) 0.5 mL를 추가하고 실온에서 2시간 반응시킨 후 감압 농축하여 생성된 고체를 에틸에테르로 씻어 10 mg의 화학식 14의 화합물을 얻었다.
1H NMR(DMSO-d6) δ 1.8-2.2(m, 4H), 2.8-3.0(m, 2H), 4.2-4.4(m, 3H), 4.84(s, 2H), 6.91(d, 1H), 7.23(d, 1H), 7.45(t, 1H), 7.66(d, 1H), 7.84(d, 1H)7.82(s, 1H), 8.0(s, 1H), 8.03(d, 1H), 8.35(d, 1H), 11.3(bs, 1H).
< 실험예 1> c- Met 키나아제 억제활성 실험
본 발명에 따른 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 이상세포의 증식 억제활성을 세포단계에서 측정하기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였다.
c-Met 키나아제에 대한 저해활성을 시간분해형광도(Time-resolved fluorescence, TRF)의 일종인 분리 증강된 란탄족플루오로 면역 분석(Dissociation Enhanced Lanthanide Fluoro Immuno Assay, DELFIA; Perkin Elmer)을 이용하여 분석하였다.
그레이너 96웰 V형 바닥 플레이트에 시험 화합물(10 μL)을 가하고 c-Met 효소를 섞은 티로신 키나아제 버퍼(20 μL)를 가한 후, 상기 효소 및 화합물의 혼합물을 15분 동안 혼합하여 배양하였다. 여기에 ATP용액(10 μL)을 가하여 상온에서 30분 동안 키나아제 반응을 시킨 후, 50 mM 에틸렌다이아민테트라아세트산 용액(EDTA, 40 μL)을 가하여 반응을 중지시켰다. 스트렙트아비딘이 코팅된 플레이트에 반응물을 옮기고 진탕하에 배양하고 2시간 후 PBS-T 완충액(PBS 0.05% 트윈20)으로 3회 세척하였다.
유로퓸이 붙은 항-포스포타이로신 항체를 1:2,500으로 희석시켜 웰 당 100 μL씩 가하고 진탕하에 배양하고 1시간 후, PBS-T 완충액(PBS 0.05% 트윈20)으로 5회 세척하였다.
개선제(enhancement solution, 100 μL)를 가하고 5분 동안 진탕배양한 후, 왈락 인비전 2103(Wallac Envision 2103) 기기로 615/665 nm의 파장 범위에서 판독하였다.
상기 실험을 수행한 화합물의 IC50는 2개씩의 데이터 세트로 결정하였고 프리즘(버전 5.01, 그래프패드) 소프트웨어를 이용하여 구하였다.
c-Met 키나아제 효소활성을 50%로 감소시키는 상기 화합물의 IC50는 하기 표 2에 나타내었다.
c- Met 키나아제에 대한 저해활성분석[IC 50 (μM)]
실시예 c-Met IC50 (μM) 실시예 c-Met IC50 (μM)
1 0.003 12 0.004
2 0.003 13 0.005
3 0.044 14 0.002
4 0.007 15 1.4
5 0.072 16 0.014
6 0.003 17 0.029
7 0.005 18 0.027
8 0.077 19 0.073
9 0.004 20 0.072
10 0.003 21 0.002
11 0.005 22 0.027
표 2에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 화합물의 IC50가 1.5 μM 이하로 측정되었으며, 특히 실시예 1, 2, 4, 6, 7, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 21 의 화합물은 IC50 값이 0.01 μM 이하로 측정되었다. 이로부터 본 발명에 따른 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 c-Met 키나아제에 대한 우수한 억제효과가 있음을 알 수 있다.
< 실험예 2> 암세포 증식억제 실험
본 발명에 따른 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 암세포 증식 억제능을 알아보기 위해 하기와 같은 실험을 수행하였다.
<2-1> 실험 재료
시약
세포배양액인 RPMI 1640 배지, FBS(fetal bovine serum) 및 트립신은 Gibco 사(Grand Island, NY)로부터 구입하였으며, 탄산수소나트륨, 암포테리신 B 및　겐타마이신은 시그마케미컬 제품을 사용하였다.
또한, 세포독성 측정 실험에 사용한 시약인 SRB(sulforhodamine) B, 트리스마 염기(trisma base), 트리클로로아세트산(TCA) 등의 시약은 시그마케미컬사로부터 구입하였다. MTS assay를 위해서는 CellTiter 96R AQueous Non-Radioactive Cell Proliferation Assay 제품을 프로메가(Promega)사로부터 구입하였다.
또한, 세포배양을 위해 사용한 T-25 배양용기,　96-웰(well) 플레이트 및 기타 세포배양에 사용한 일회용 초자류는 팔콘사(Lincoln Park, NJ) 제품을 사용하였다.
사용기기
세포독성 측정을 위한 엘라이자 리더기(microplate reader)는 Molecular Devices사(Sunnyvale, CA)의 E-max나 SpectraMax250 기종을 사용하였다.
<2-2> 실험방법
실험약물의 조제
실험에 사용한 약물은　시험에 원하는 농도까지 실험용 배지로서 희석하여　사용하였고, 최종 다이메틸설폭사이드 농도는 0.5% 이하가 되도록 하였다.
세포배양
실험에 사용한 암세포주는 모두 인체기원 암세포주들로서, 위암 세포주인 Hs746T, MKN-45를 사용하였다.
배양액으로는 10% FBS(fetal bovine serum)가 첨가된 RPMI 1640 배지를 사용하여 37 ℃ 및 5% 이산화탄소 인큐베이터에서 배양하였고, 3~4일에 한번 씩 계대 유지하였다.　
세포독성 실험
　96 웰(well) 평평한 바닥 마이크로플레이트(flat-bottom microplate)의 각 웰(well)에 Hs746T는 5×103 cells을 분주하고, MKN45는 1×104 cells를 분주하고, 세포가 바닥면에 부착하도록 24시간 동안 배양한 후, 배양액을 제거하고, 여기에 실시예 1, 2, 12, 13, 14의 화합물이 각각 포함된 배양액을 가하고 72시간 동안 배양하였다. 상기 화합물과의 배양이 종료된 후, 세포독성의 측정은 단백질 염색 시약인 SRB를 이용하여 측정하거나 MTS assay법을 이용하여 측정하였다.
구체적으로, 실시예 1, 2, 12, 13, 14의 화합물과의 배양이 종료된 후, 배양액을 제거하고 각 웰(well)에 차가운 TCA 용액을 처리하고 4 ℃에서 1시간 동안 방치하여 세포들을 고정시켰다. 상기 TCA 용액을 제거하고 실온에서 건조시킨 후, 1% 아세트산 용액에 0.4% SRB를 녹인 염색용액을 가하여 실온에서 30분 동안 방치하여 세포를 염색하였다. 세포와 결합하지 않은 여분의 SRB를 1% 아세트산 용액으로 세척하여 제거하고, 염색된 세포들에 pH 10.3~10.5의 10 mM 트리스 완충용액(Trisma base; unbuffered)을 가하여 SRB를 용출시켰다. 각 웰(well)의 흡광도는 엘라이자 리더기(microplate reader)를 이용하여 520 nm의 파장 범위에서 측정하였다.
약물을 가하지 않은 웰(well)(C)과 약물을 가한 각 웰(well)(T) 및 약물을 처음 가할 때의 웰(well)(Tz)의 OD값으로부터,
Tz=T인 경우에는 [(T-Tz)/(C-Tz)]×100의 수식에 의해; 또는
Tz＞T인 경우에는 [(T-Tz)/(Tz)×100 의 수식에 의해 약물의 세포독성을 계산하였다.
MTS assay 법을 이용한 암세포 증식억제 측정은 다음과 같이 실험하였다. 구체적으로, 실시예 1, 2, 12, 13, 14의 화합물과의 배양이 종료된 후, Promega사의 CellTiter 96R AQueous Non-Radioactive Cell Proliferation Assay 제품을 구성하고 있는 PMS 용액과 MTS 용액을 섞은 후 well당 20 μL를 넣어주었다. 4시간 동안 배양기에 놓아둔 후 꺼내어 상온에서 10분간 방치하였다. Molecular Device사의 SpectraMax250 기종을 이용하여 490 nM에서의 흡광도를 측정한 후 GI50 값을 계산하였다.
암세포(Hs746T, MKN-45) 증식을 50%로 억제하는 상기 화합물의 GI50는 하기 표 3에 나타내었다.
암세포( Hs746T 및 MKN -45) 증식 억제 분석[GI 50 (μM)]
실시예 Hs746T의 GI50 (μM) MKN-45의 GI50 (μM)
1 0.019 0.012
2 0.031 0.018
12 0.021 0.029
13 2.0 0.168
14 0.207 0.096
표 3에 나타난 바와 같이, 암세포인 Hs746T 및 MKN-45에 대한 실시예 1, 2, 12, 13, 14의 화합물의 GI50 값은 모두 2 μM 이하로 나타났으며, 특히 실시예 1, 2, 12의 화합물은 0.1 μM 이하의 낮은 값을 나타내었다. 이로부터 본 발명에 따른 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 암세포 등의 증식을 억제하는 우수한 효과가 있음을 알 수 있다.
하기에 본 발명의 조성물을 위한 제제예를 예시한다.
< 제제예 1> 약학적 제제의 제조
<1-1> 산제의 제조
메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 2 g
유당 1 g
상기의 성분을 혼합한 후, 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
<1-2> 정제의 제조
메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 100 ㎎
옥수수전분 100 ㎎
유 당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
<1-3> 캡슐제의 제조
메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 100 ㎎
옥수수전분 100 ㎎
유 당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
<1-4> 주사액제의 제조
메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 10 ㎍/㎖
묽은 염산 BP pH 3.5로 될 때까지
주사용 염화나트륨 BP 최대 1 ㎖
적당한 용적의 주사용 염화나트륨 BP 중에 본 발명에 따른 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체를 용해시키고, 생성된 용액의 pH를 묽은 염산 BP를 사용하여 pH 3.5로 조절하고, 주사용 염화나트륨 BP를 사용하여 용적을 조절하고 충분히 혼합하였다. 용액을 투명 유리로 된 5 ㎖ 타입 I 앰플 중에 충전시키고, 유리를 용해시킴으로써 공기의 상부 격자하에 봉입시키고, 120 ℃에서 15 분 이상 오토클래이브시켜 살균하여 주사액제를 제조하였다.

Claims (12)

  1. 하기 화학식 1로 표시되는 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    [화학식 1]
    Figure pat00052

    (상기 화학식 1에서,
    R1 및 R2는 각각 수소, 할로겐, C1-C10의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고;
    R3는 C1-C10의 직쇄 또는 측쇄 알킬; 하이드록시; C1-C10의 직쇄 또는 측쇄 알콕시, 나이트로, 할로겐, 시아노; 하이드록시 C1-C10의 직쇄 또는 측쇄 알킬; 비치환 또는 할로겐, C1-C10의 직쇄 또는 측쇄 알킬, C1-C10의 직쇄 또는 측쇄 알콕시, 하이드록시, 나이트로 및 시아노로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 이상의 치환기로 치환된 C5-C12 아릴; 비치환 또는 C1-C10 직쇄 또는 측쇄 알킬, 하이드록시 C1-C10 직쇄 또는 측쇄 알킬 및 고리 내 N 원자를 포함하는 C5-C8의 헤테로 사이클로 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 1 이상의 치환기로 치환된 고리내 1 이상의 N,O 또는 S원자를 포함하는 5-15원의 헤테로 아릴; 및 고리 내 1개 이상의 헤테로 원자를 갖는 5-8원의 헤테로 사이클로 알킬로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 이상의 치환기이되, 상기 R3이 2 이상의 치환기인 경우 상기 치환기들은 고리를 형성할 수 있고;
    R4는 H, C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬, 5-8원의 아릴 C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬 또는 5-8원의 아릴이다.)
  2. 제 1항에 있어서,
    상기 R1 및 R2는 각각 H, F, C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고;
    R3는 C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬; 하이드록시; C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알콕시, 나이트로, 할로겐, 시아노; 하이드록시 C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬; 비치환 또는 할로겐, C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알킬, C1-C4의 직쇄 또는 측쇄 알콕시, 하이드록시, 나이트로 및 시아노로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 이상의 치환기로 치환된 C5-C12 아릴; 비치환 또는 C1-C4 직쇄 또는 측쇄 알킬, 하이드록시 C1-C4 직쇄 또는 측쇄 알킬 및 고리 내 N 원자를 포함하는 C5-C6의 헤테로 사이클로 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되는 1 이상의 치환기로 치환된 고리내 1 이상의 N,O 또는 S원자를 포함하는 5-15원의 헤테로 아릴; 및 고리 내 1개 이상의 헤테로 원자를 갖는 5-8원의 헤테로 사이클로 알킬로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 이상의 치환기이되, 상기 R3이 2 이상의 치환기인 경우 상기 치환기들은 고리를 형성할 수 있고;
    R4는 수소, C1-C3의 직쇄 또는 측쇄 알킬, 5-6원의 아릴 C1-C3의 직쇄 또는 측쇄 알킬 또는 5-6원의 아릴인 것을 특징으로 하는 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  3. 제 1항에 있어서, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은
    1) 5-((6-(3-플루오로페닐)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
    2) 5-((6-페닐-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
    3) 5-((6-(2-클로로페닐)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
    4) 5-((6-(3-클로로페닐)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
    5) 5-((6-o-톨릴-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
    6) 5-((6-(3-하이드록시페닐)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
    7) 5-((6-(3-메톡시페닐)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
    8) 5-((6-(2,5-디플루오로페닐)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
    9) 5-((6-(3-니트로페닐)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
    10) 3-(3-((1-옥소-1,2-디하이드로이소퀴놀린-5-일)메틸)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-6-일)벤조나이트릴;
    11) 5-((6-(피리딘-3-일)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
    12) 5-((6-(싸이오펜-3-일)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
    13) 5-((6-(1H-피라졸-4-일)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
    14) 5-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
    15) 5-((6-(디벤조[b,d]퓨란-4-일)-1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
    16) 5-((6-(벤조[b]싸이오펜-3-일)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
    17) 5-((6-(피페리딘-1-일)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
    18) 5-((6-(피롤리딘-1-일)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온;
    19) 5-((6-(3-플루오로페닐)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)-2-메틸이소퀴놀린-1(2H)-온;
    20) 2-에틸-5-((6-(3-플루오로페닐)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸이소퀴놀린-1(2H)-온;
    21) 5-((6-(1-(2-히드록시에틸)-1H-피라졸-4-일)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진-3-일)메틸)이소퀴놀린-1(2H)-온; 및
    22) 5-((6-(1-(피퍼리딘 4-일)-1H-피라졸-4-일)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-b]피리다진 -3-일) 메틸) 이소퀴놀린-1(2H)-온으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  4. 하기 반응식 1에 나타난 바와 같이,
    출발물질인 화학식 2의 화합물을 화학식 3의 화합물과 헥(Heck) 반응시켜 화학식 4의 화합물을 제조하는 단계(단계 1);
    상기 단계 1에서 제조된 화학식 4의 화합물을 화학식 5의 화합물과 커플링(coupling)시켜 화학식 6의 화합물을 제조하는 단계(단계 2);
    상기 단계 2에서 제조된 화학식 6의 화합물을 고리화 반응시켜 화학식 7의 화합물을 제조하는 단계(단계 3);
    상기 단계 3에서 제조된 화학식 7의 화합물을 치환반응시켜 화학식 8의 화합물을 제조하는 단계(단계 4);
    상기 단계 4에서 제조된 화학식 8의 화합물을 아지드화 반응시켜 화학식 9의 화합물을 제조하는 단계(단계 5);
    상기 단계 5에서 제조된 화학식 9의 화합물을 고리화 반응시켜 화학식 10의 화합물을 제조하는 단계(단계 6);
    상기 단계 6에서 제조된 화학식 10의 화합물을 스즈키 커플링 반응 또는 치환반응시켜 화학식 1A의 화합물을 제조하는 단계(단계 7)를 포함하는 제 1항의 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 제조방법:
    Figure pat00053
    .
  5. 제 4항에 있어서, 하기 반응식 2에 나타난 바와 같이, 상기 단계 7에서 제조된 1A의 화합물을 알킬화 반응시켜 화학식 1의 화합물을 제조하는 단계(단계 8)를 더 포함하는 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조방법:
    [반응식 2]
    Figure pat00054
    .
    (상기 반응식 2에서,
    R1, R2, R3 및 R4는 제 1항에서 정의한 바와 같다.)
  6. 제 4항에 있어서, 상기 1A의 화합물 또는 이의 염이 보호기를 수반하는 경우, 탈보호 반응을 추가로 수행하는 것을 특징으로 하는 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조방법.
  7. 제 1항의 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 이상세포 성장 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  8. 제 7항에 있어서, 상기 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 c-Met 키나아제를 억제하여 세포의 증식을 억제하는 이상세포 성장 질환의 예방 및 치료용 약학적 조성물.
  9. 제 8항에 있어서, 상기 이상세포 성장 질환은 폐암, 뼈암, 췌장암, 피부암, 두경부암, 피부 또는 안구내 흑색종, 자궁암, 난소암, 직장암, 항문 주위 암, 위암, 결장암, 유방암, 자궁암, 나팔관 암, 자궁내막 암, 자궁경부암, 질암, 외음부암, 포지킨병, 식도암, 소장암, 내분비계암, 갑상선암, 부갑상선암, 부신암, 연조직 육종, 요도암, 음경암, 전립선암, 만성 또는 급성 백혈병, 림프구 림프종, 방광암, 신장 또는 수뇨관 암, 신세포암, 신우암, 중추 신경계(CNS) 종양, 1차 CNS 림프종, 척수 종양, 뇌간 신경교종 및 뇌하수체 선종으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 이상세포 성장 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  10. 제 7항에 있어서, 상기 이상세포 성장질환은 건선, 양성 전립선 비대 또는 망막증인 것을 특징으로 하는 이상세포 성장 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  11. 제 7항에 있어서, 상기 이상세포 성장질환은 양성 증식성 질환인 것을 특징으로 하는 이상세포 성장 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  12. 제 11항에 있어서, 양성 증식성 질환은 섬유선종, 경화성 선질환 또는 유두종인 것을 특징으로 하는 이상세포 성장 질환의 예방 및 치료용 약학적 조성물.
KR1020100108192A 2010-11-02 2010-11-02 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 이상세포 성장 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 KR101254546B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020100108192A KR101254546B1 (ko) 2010-11-02 2010-11-02 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 이상세포 성장 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020100108192A KR101254546B1 (ko) 2010-11-02 2010-11-02 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 이상세포 성장 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20120046505A true KR20120046505A (ko) 2012-05-10
KR101254546B1 KR101254546B1 (ko) 2013-04-19

Family

ID=46265582

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020100108192A KR101254546B1 (ko) 2010-11-02 2010-11-02 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 이상세포 성장 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR101254546B1 (ko)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2017503770A (ja) * 2013-12-09 2017-02-02 ユーシービー バイオファルマ エスピーアールエル Ｔｎｆ活性のモジュレーターとしてのトリアゾロピリダジン誘導体

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8198448B2 (en) * 2006-07-14 2012-06-12 Amgen Inc. Fused heterocyclic derivatives and methods of use

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2017503770A (ja) * 2013-12-09 2017-02-02 ユーシービー バイオファルマ エスピーアールエル Ｔｎｆ活性のモジュレーターとしてのトリアゾロピリダジン誘導体

Also Published As

Publication number Publication date
KR101254546B1 (ko) 2013-04-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101034351B1 (ko) 신규 벤즈옥사졸로 치환된 피리딘 유도체 또는 이의약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를유효성분으로 함유하는 이상세포 성장 질환의 예방 및치료용 약학적 조성물
RU2537945C2 (ru) Триазиновые, пиримидиновые и пиридиновые аналоги и их применение в качестве терапевтических агентов и диагностических проб
KR102089239B1 (ko) Dna-pk 억제제
US7491829B2 (en) RAF inhibitor compounds and methods
KR101256018B1 (ko) 단백질 키나아제 저해활성을 갖는 1,3,6-치환된 인돌 화합물
CN105555782B (zh) 喹唑啉衍生物及其制备方法
CN103958497B (zh) 作为AXL和c‑MET激酶抑制剂的尿嘧啶衍生物
JP5770281B2 (ja) ｃ−ＭＥＴチロシンキナーゼ阻害薬として有用な新規な縮合複素環式誘導体
US20070049603A1 (en) Raf inhibitor compounds and methods of use thereof
CN114269735A (zh) 二氢或四氢喹唑啉类化合物及其中间体、制备方法和应用
EP3119760A1 (en) Piperidine-dione derivatives
JP2010540458A (ja) チアゾロピリミジンｐｉ３ｋ阻害剤化合物および使用方法
KR20130115997A (ko) 단백질 키나제의 조절제로서의 신규한 3,5-디치환-3ｈ-이미다조[4,5-ｂ]피리딘 및 3,5- 디치환 -3ｈ-[1,2,3]트리아졸로[4,5-ｂ] 피리딘 화합물
CN105315285A (zh) 2,4-二取代7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶衍生物、其制法与医药上的用途
JP2010538094A (ja) チロシンキナーゼ阻害剤としてのピラゾロピリジン類
EP4085055A1 (en) Aminopyrimidine compounds
CN103080109A (zh) 氘代杂环化合物激酶抑制剂
JP7190755B2 (ja) オキサジノキナゾリンおよびオキサジノキノリン系化合物、ならびに調製方法およびその使用
KR101254546B1 (ko) 신규 메틸이소퀴놀리논 치환된 트리아졸로피리다진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 이상세포 성장 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
CN105541792B (zh) 多环类pi3k抑制剂
KR101869534B1 (ko) 신규한 트리아졸로 피리다진 유도체 및 그의 용도
JP2022551180A (ja) イソクエン酸デヒドロゲナーゼ（ｉｄｈ）阻害剤
CN111072640A (zh) 喹唑啉类衍生物及其制备方法和应用
KR20230156767A (ko) 퀴나졸린계 화합물, 조성물 및 퀴나졸린계 화합물의 적용
KR20210122192A (ko) 벤조티아졸 유도체 화합물

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20160411

Year of fee payment: 4

LAPS Lapse due to unpaid annual fee