CN111228178A - 一种皮肤屏障功能蛋白促进剂及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种皮肤屏障功能蛋白促进剂及其应用。本发明的皮肤屏障功能蛋白促进剂为枸杞提取物，可以显著提高具有表皮稳态调节作用的角蛋白结合蛋白丝聚合蛋白FLG和具有维持皮肤屏障功能的角质化套膜蛋白内披蛋白INV和兜甲蛋白LOR的表达量，可将丝聚合蛋白的表达量提高至3557.14～4391.25pg/mL，内披蛋白的表达量提高至79.03％～84.35％，兜甲蛋白的表达量提高至1256.23～1498.53ng/mL，还能将经皮失水率降低至13.5～45.1g/m2h，显著降低经皮失水率，同时修复皮肤屏障功能损伤，可广泛应用于修复或预防紫外线照射引发的皮肤屏障功能损伤的化妆品或美容产品中。

Description

一种皮肤屏障功能蛋白促进剂及其应用
技术领域
本发明涉及化妆品技术领域，更具体地，涉及一种皮肤屏障功能蛋白促进剂及其应用。
背景技术
皮肤是人体最大的器官，皮肤的角质层覆盖着生物体并进行着水分的保持及防护外界异物的入侵。皮肤的天然屏障指由角质层细胞和细胞之间的“脂质”和“天然保湿因子”组成的“砖墙结构”，其表面附有“皮脂膜”，由此共同形成了一道人体天然保护屏障。皮肤屏障不仅阻止了病原体的入侵，而且对角质层、角质形成细胞结构组成及免疫细胞抗原的介导进行了整合。皮肤的屏障功能具有双向性，一方面保护机体内各种器官和组织免受外界环境中机械、物理、化学和生物的有害因素的侵袭而引发疾病，另一方面防止体内的各种营养物质、水分、电解质和其他物质的丧失，维持皮肤的含水量，使皮肤滋润。在能够影响皮肤屏障功能因素中，长期慢性的紫外线照射(ultraviolet irradiation，UVR)引起了大家的广泛关注。天然保湿因子作为皮肤屏障中的“灰浆”，是一种具有保水作用的吸附性水溶性物质，担负着皮肤保湿的重要任务。然而，最小红斑量UVB的照射即可完全抑制角质形成细胞中天然保湿因子的代谢，使角质层含水量下降，下调人皮肤角质细胞AQP3表达，造成甘油吸收减少，引发皮肤水化能力下降，进而造成皮肤屏障功能受损。皮肤屏障功能的形成和维持是一个极其复杂的过程，体内外多种因素均可直接或间接地影响其形成和稳定。为了保持皮肤健康并且不受外部环境变化的大气干燥、紫外线损伤及各种有害物质的影响，必须使得修复皮肤角质层和防止皮肤组织水分流失的屏障功能得到强化。角质形成细胞是构成表皮的主要细胞，角质细胞套膜的形成标志着角质形成细胞分化的终末产物—角质形成细胞的产生，是表皮作为一种防御屏障的基础。角质形成细胞分化蛋白包括丝聚合蛋白(filaggrin，FLG)、内披蛋白(involucrin，INV)、兜甲蛋白(loricrin，LOR)等。
枸杞(Lycium barbarum),又称枸杞子、红耳坠，是茄科小灌木枸杞的成熟子实。枸杞子药食同源的历史悠久，是驰名中外的名贵中药材，早在《神农本草经》中就被列为上品，有延衰抗老的功效。枸杞子的营养成分丰富，含有多种氨基酸，多糖以及丰富的胡萝卜素、多种维生素、钙、铁等。枸杞具有很高的营养价值，还具有药用功效，能提高视力、抗衰老、抗肿瘤、抗疲劳、调节血脂、降血糖、降血压、抗氧化和调节免疫能力以及抗衰老，并且对肝脏的脂质过氧化损伤有明显的保护和修复作用。公开技术中也有将其应用于皮肤屏障的修复，CN109394583A公开了一种枸杞滋养的去黄凝胶面膜及其制备方法，其凝胶面膜包括凝胶基质、面膜液I和面膜液II，按重量份计，所述凝胶基质包括瓜尔豆胶2-3份、N-异丙基丙烯酰胺单体14-15份、角叉菜胶1-2份、交联剂0.006-0.007份、引发剂0.3-0.4份和高纯水90-100份；所述面膜液I包括金溶胶0.5-0.8份和壳聚糖溶液3-6份；所述面膜液II包括枸杞精油2-5份；醇水溶液60-75份、尼泊尔金酯0.2-0.3份、保湿剂4-8份、去黄剂1～2份、美白剂2-4份、玫瑰精油3-4份、维生素B21-2份、异亮氨酸1-2份。其所公开的枸杞发酵液具有保湿，美白，延缓衰老的功效，但对于皮肤屏障修复中修复皮肤角质层和防止皮肤组织水分流失的屏障功能得到强化问题，尤其是促进皮肤屏障功能蛋白FLG、INV、LOR的产生，并未给出相关的技术启示。
发明内容
本发明要解决的技术问题是克服现有皮肤屏障修复制剂中缺乏具有促进相关角质层的FLG、INV和LOR蛋白产生的皮肤屏障修复制剂的缺陷和不足，提供一种皮肤屏障功能蛋白促进剂。
本发明的另一目的在于提供一种皮肤屏障功能蛋白促进剂在制备促进丝聚合蛋白产生的制剂中的应用。
本发明的另一目的在于提供一种皮肤屏障功能蛋白促进剂在制备促进内披蛋白产生的制剂中的应用。
本发明的另一目的在于提供一种皮肤屏障功能蛋白促进剂在制备促进兜甲蛋白产生的制剂中的应用。
本发明的另一目的在于提供一种皮肤屏障功能蛋白促进剂在制备同时促进丝聚合蛋白、内披蛋白和兜甲蛋白产生的制剂中的应用。
本发明的另一目的在于提供一种皮肤屏障功能蛋白促进剂在制备修复或预防紫外线照射引发的皮肤屏障功能损伤的化妆品和/美容产品中的应用。
本发明的又一目的在于提供一种修复或预防紫外线照射引发的皮肤屏障功能损伤的化妆品或美容产品。
本发明上述目的通过以下技术方案实现：
一种皮肤屏障功能蛋白促进剂，所述皮肤屏障功能蛋白促进剂为枸杞提取物。
丝聚合蛋白FLG是已知存在于哺乳动物表皮细胞中的角蛋白结合蛋白，在表皮稳态调节中起重要作用，INV和LOR是重要的终末分化蛋白，它们参与坚韧的角质化套膜构成，在维持皮肤屏障功能中发挥着重要作用，这些蛋白广泛交叉连接，并受到角质形成细胞转谷氨酰胺酶(transglutaminase keratinocyte，TGK/TG1)的调节，在保留表皮水分方面起着重要作用。一旦丝聚合蛋白、内披蛋白和兜甲蛋白的表达产生异常的变化，直接影响表皮屏障的通透性，导致皮肤屏障结构的破坏和天然保湿因子流失，皮肤的保湿作用也会相应下降。
现有技术中公开了枸杞的功能应用，本发明发现将枸杞提取物作为皮肤外用剂使用时对皮肤没有刺激性，能很好地改善皮肤的水通透屏障，维持皮肤组织水合完整，且能明显提高丝聚合蛋白FLG、内披蛋白INV、兜甲蛋白LOR的表达，能优异地修复皮肤屏障功能损伤，并具有保湿的效果，可以显著降低经皮失水率，将经皮失水率降低至13.5～45.1g/m2h。
基于本发明的目的，无特指的情况下，术语“枸杞提取物”表示一种或多种化合物。更特别地，可以是天然存在于形成枸杞的一种植物材料，果实、叶子等，特别是果实中的化合物的混合物，通常通过萃取从中分离枸杞提取物。
本发明的枸杞选自枸杞属的宁夏枸杞和中国枸杞，优选宁夏枸杞。
优选地，所述枸杞提取物通过如下方法制备得到：
将枸杞粉末按1:5～1:20的重量比加入到70％的乙醇水溶液中提取，提取温度为20℃～60℃，提取后过滤的一次滤液，冷却后通过1～5μm滤膜过滤得二次滤液，二次滤液通过0.1～0.65μm滤膜过滤，三次滤液浓缩、干燥得到枸杞提取物。
本发明所提供的乙醇提取获得枸杞提取物的方法中，控制枸杞粉末的加入量为每1g粉碎的枸杞加入5g～20g的70％乙醇水溶液，主要是为了使得枸杞粉末中有效成分能更充分地溶解，提取率过低，当枸杞粉末加入量过多时，则导致枸杞粉末不能充分浸泡溶解不完全；当枸杞粉末加入量过少时，则容易造成溶剂的浪费及损失。
本发明的枸杞乙醇提取物经过三次过滤，
一次过滤的目的为：除去剩余药渣。
二次过滤采用1～5μm滤膜过滤的目的为：过滤掉较大颗粒杂质，
三次过滤采用0.1～0.65μm滤膜过滤的目的为：滤除一般细菌微生物。
其中需要说明如下：
本发明的枸杞粉末为将将枸杞烘干后采用粉碎机对枸杞进行粉碎得到，优选细度在10目以下的枸杞粉末。
本发明的乙醇水溶液中的水优选为蒸馏水。
本发明所述干燥为真空冷冻干燥。
优选地，将枸杞粉末按1:10的重量比加入到70％的乙醇水溶液中提取。
优选地，二次滤液过滤采用5μm滤膜，三次滤液过滤采用0.25μm滤膜。
上述皮肤屏障功能蛋白促进剂在制备促进丝聚合蛋白产生的制剂中的应用也在本发明的保护范围之内。
采用本发明的皮肤屏障功能蛋白促进剂可以将丝聚合蛋白的表达量提高至3557.14～4391.25pg/mL，对于丝聚合蛋白的表达具有较好的促进作用。
上述皮肤屏障功能蛋白促进剂在制备促进内披蛋白产生的制剂中的应用也在本发明的保护范围之内。
采用本发明的皮肤屏障功能蛋白促进剂，相比空白组，可以将内披蛋白的表达量提高至79.03％～84.35％，对于内披蛋白的表达具有较好的促进作用。
上述皮肤屏障功能蛋白促进剂在制备促进兜甲蛋白产生的制剂中的应用也在本发明的保护范围之内。
采用本发明的皮肤屏障功能蛋白促进剂可以将兜甲蛋白的表达量提高至1256.23～1498.53ng/mL，对于兜甲蛋白的表达具有较好的促进作用。
上述皮肤屏障功能蛋白促进剂在制备同时促进丝聚合蛋白、内披蛋白和兜甲蛋白产生的制剂中的应用也在本发明的保护范围之内。
上述皮肤屏障功能蛋白促进剂在制备修复或预防紫外线照射引发的皮肤屏障功能损伤的化妆品和/美容产品中的应用也在本发明的保护范围之内。
本发明同时还保护一种修复或预防紫外线照射引发的皮肤屏障功能损伤的化妆品或美容产品，所述化妆品或美容产品中包含所述皮肤屏障功能蛋白促进剂和其他可接受的载体或可配伍的化合物。
其中所述载体优选为缓释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、吸附载体、表面活性剂和润滑剂中的至少一种。
所述可配伍的化合物指其它天然产物或化学药品。
本发明的化妆品或美容产品的制剂可以为现有的各种制剂形态，优选为膏体或液体，使用方法优选为外用涂抹或口服。
优选地，所述皮肤屏障功能蛋白促进剂的质量含量为0.1～20％。
例如可以为化妆品或美容产品中皮肤屏障功能蛋白促进剂的质量含量为0.1％；
化妆品或美容产品中皮肤屏障功能蛋白促进剂的质量含量为0.42％；
或化妆品或美容产品中皮肤屏障功能蛋白促进剂的质量含量为1％；
或化妆品或美容产品中皮肤屏障功能蛋白促进剂的质量含量为4.2％
或化妆品或美容产品中皮肤屏障功能蛋白促进剂的质量含量为10％；
或化妆品或美容产品中皮肤屏障功能蛋白促进剂的质量含量为20％
更优选地，所述皮肤屏障功能蛋白促进剂的质量含量为4.2％。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明公开了的皮肤屏障功能蛋白促进剂为枸杞提取物，可以显著提高具有表皮稳态调节作用的角蛋白结合蛋白丝聚合蛋白FLG和具有维持皮肤屏障功能的角质化套膜蛋白内披蛋白INV和兜甲蛋白LOR的表达量，可将丝聚合蛋白的表达量提高至3557.14～4391.25pg/mL，相比空白组，内披蛋白的表达量提高至79.03％-84.35％，兜甲蛋白的表达量提高至1256.23～1498.53ng/mL，还能很好地改善皮肤的水通透屏障，维持皮肤组织水合完整，将经皮失水率降低至13.5～45.1g/m2h，显著降低经皮失水率，同时修复皮肤屏障功能损伤。
附图说明
图1为经皮失水率TEWL分析。
图2为皮肤组织丝聚合蛋白免FLG的表达量。
图3为200倍显微镜下不同实验组的FLG视野图。
图4为表皮丝聚合蛋白免疫组化图(200*)与FLG的相对含量。
图5为皮肤组织兜甲蛋白LOR的表达量。
图6为200倍显微镜下不同实验组的INV视野图。
图7为表皮内披蛋白免疫组化图(200*)与INV的相对含量。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明作进一步的说明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非另有说明，本发明实施例采用的原料试剂为常规购买的原料试剂。
实施例1
一种皮肤屏障功能蛋白促进剂，皮肤屏障功能蛋白促进剂为枸杞提取物，通过如下方法制备得到：
将枸杞粉末按1:10的重量比加入到70％的乙醇水溶液中提取，提取温度为60℃，提取后过滤的一次滤液，冷却后通过5μm滤膜过滤得二次滤液，二次滤液通过0.25μm滤膜过滤得到三次滤液，三次滤液浓缩、干燥得到枸杞提取物。
一种修复或预防紫外线照射引发的皮肤屏障功能损伤的化妆品，具体制备如下：
称取1.25g枸杞提取物冻干粉，加入12.5mL甘油和12.5mL水，混匀，配制成枸杞提取物高剂量的甘油水溶液(164mM或4.2％w/w)，取其中部分溶液，用甘油水溶液稀释至枸杞提取物低剂量的甘油水溶液(16.4mM或0.42％w/w)，再称取维生素C125mg，加入12.5mL甘油和12.5mL水，混匀，配制成维生素C甘油水溶液(15mM或0.42％w/w)，备用。
经皮失水率检测实验：
实验对象：SPF级昆明小鼠，雌性6～7周龄(广东中医药大学购入，18-22g)25只，5只一组，分成正常组、紫外照射组、维生素C防护组、枸杞提取物防护高剂量组和枸杞提取物低剂量防护组，共5组。
实验方法：
每组小鼠背部皮肤脱毛，用6％w/w硫化钠水溶液除去绒毛，正常组每日只使用甘油水溶液涂抹背部皮肤，除了正常组外，其余各组每日进行UVA/UVB联合照射(UVA/UVB剂量比10:1)，模拟日光照射：
第一周UV的起始强度为最小红斑剂量1MED(UVB 100mj/cm2和UVA 1J/cm2)，光源约高10cm，5次/周(除周六、日外)。每周增加0.5MED，持续到第4周，即UVB 250mj/cm2和UVA2.5J/cm2，5次/周，在5-9周，照射剂量恒定为UVB250mj/cm2和UVA 2.5J/cm2；
实验周期为9周，辐射总剂量：UVB 9.75J/cm2和UVA 97.5J/cm2。
照射前2h，按分组随即于背部涂抹100L/1次/天，枸杞提取物剂量浓度分别为4.2％w/w、0.42w/w，维生素C组涂抹剂量浓度为15mM(或0.42％w/w)，正常对照组和紫外照射组涂抹100L相同甘油和水溶剂。
进行TEWL检测分析：
TEWL检测的方法为：
75％乙醇清洁小鼠背部皮肤后，每只在相同部位随机采用Tewameter TM300探头测量，使仪器与待测部位皮肤完全接触，并尽量保持垂直。测试接触测量部位20s皮肤表面水分所蒸发的浓度(单位：g/m2h)。同一测试部位重复测量3次，取平均值。
TEWL分析表明经过紫外线损伤后，小鼠皮肤角质层水分散失严重，枸杞提取物组能很好地改善皮肤的水通透屏障功能(图1)。
实施例2
一种皮肤屏障功能蛋白促进剂，皮肤屏障功能蛋白促进剂为枸杞提取物，通过如下方法制备得到：
将枸杞粉末按1:10的重量比加入到70％的乙醇水溶液中提取，提取温度为60℃，提取后过滤的一次滤液，冷却后通过5μm滤膜过滤得二次滤液，二次滤液通过0.25μm滤膜过滤得到三次滤液，三次滤液浓缩、干燥得到枸杞提取物。
一种修复或预防紫外线照射引发的皮肤屏障功能损伤的化妆品，具体制备如下：
称取1.25g枸杞提取物冻干粉，加入到28.25g膏霜基质(包含如下按质量百分比计的组分：硬脂酸20.0％，氢氧化钾(80％w/w)1.25％，甘油10.0％，去离子水68.75％)中，混匀，配制成高剂量的枸杞提取物膏霜(4.2％w/w)，取其中部分，用空白膏霜配制成低剂量的枸杞提取物膏霜(0.42％w/w)，再称取维生素C125mg，加入到29.38g膏霜基质，配制成维生素C膏霜(0.42％w/w)备用。
丝聚合蛋白、内披蛋白和兜甲蛋白表达检测实验：
实验对象：
SPF级昆明小鼠，雌性6～7周龄(广东中医药大学，18-22g)25只，5只一组，分成正常组、紫外照射组、维生素C防护组、枸杞提取物高剂量防护组和枸杞提取物低剂量防护组，共5组。
实验方法：
每组小鼠背部皮肤脱毛，用6％w/w硫化钠水溶液除去绒毛，正常组每日只使用甘油水溶液涂抹背部皮肤，除了正常组外，其余各组每日进行UVA/UVB联合照射(UVA/UVB剂量比10:1)，模拟日光照射：
第一周UV的起始强度为最小红斑剂量1MED(UVB 100mj/cm2和UVA1 J/cm2)，光源约高10cm，5次/周(除周六、日外)。每周增加0.5MED，持续到第4周，即UVB 250mj/cm2和UVA2.5J/cm2，5次/周，在5-9周，照射剂量恒定为UVB 250mj/cm2和UVA 2.5J/cm2。
实验周期为9周，辐射总剂量：UVB 9.75J/cm2和UVA 97.5J/cm2。
照射前2h，按分组随即于背部涂抹118mg/1次/天，枸杞提取物组剂量浓度分别为4.2％w/w、0.42w/w，维生素C组涂抹剂量浓度为0.42w/w，正常对照组和模型组涂抹118mg相同膏霜。
酶联免疫吸附实验(Elisa)测试：取放置在-80℃的适量皮肤组织，冰上冻融。按每100mg皮肤组织加入1mL预冷的磷酸缓冲溶液，使用组织研磨仪进行组织研磨处理，在4℃以10000g离心10分钟，总上清液按照小鼠FLG、LOR因子酶联免疫试剂盒(江苏酶标)说明进行含量测量。评估酶联免疫所有测试样品均采用二喹啉甲酸(BCA)法进行蛋白质统一标定。
免疫组化测试：新鲜皮肤组织固定于4％多聚甲醛24h后进行常规石蜡包埋，制成4μm的组织切皮。切好的石蜡切片用羊抗兔的抗体丝聚合蛋白(FLG)、兜甲蛋白(INV)抗体进行免疫组化染色，DAB显色试剂盒显色，光学显微镜下拍照、观察。苏木素染细胞核为蓝色，DAB显出的阳性表达为棕黄色。
制片后在200倍显微镜下随机选取视野拍照。使用Image J软件处理免疫组化染色图片，计算其平均光密度(随机选定区域光密度/区域面积)，6个随机区域/图片，以空白组的平均光密度为1个单位，对每组小鼠的背部皮肤进行计算，所有数值均用均数±标准误
Figure BDA0002401676360000081
计算方式如下：
Figure BDA0002401676360000082
Figure BDA0002401676360000091
测定结果：
针对丝聚合蛋白(FLG)分别采用皮肤组织酶联免疫吸附法(Elisa)、皮肤组织免疫组化进行测试。结果如图2～图3，枸杞提取物可以明显提高FLG的表达。
图2为显示枸杞提取物可以提高皮肤组织的FLG的表达，图3为200倍显微镜下不同实验组的FLG视野图。各组间差异比较用单因素方差分析(One-Way ANOVA)，与空白组相比：###p＜0.001；与模型组相比：*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001；
图4为为表皮丝聚合蛋白免疫组化图(200*)与FLG的相对含量，图4显示枸杞提取物可以提高表皮中FLG表达。各组间差异比较用单因素方差分析(One-Way ANOVA)，与空白组相比：###p＜0.001；与模型组相比：*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001。
采用酶联免疫分析法测定皮肤组织中丝聚合蛋白的含量，从图2可以看出，对照组的丝聚合蛋白表达量为4457.50pg/mL，紫外组的丝聚合蛋白表达量为3026.88pg/mL，维生素C组的丝聚合蛋白表达量为3752.5pg/mL，枸杞提取物低剂量组的丝聚合蛋白表达量为3795pg/mL，枸杞提取物高剂量组的丝聚合蛋白表达量为4391.25pg/mL。
采用皮肤组织免疫组化的方法标记小鼠表皮从丝聚合蛋白的表达量，结果如图4，相比空白组，模型组下调丝聚合蛋白表达，蛋白量表达为52.94％，但是维生素C组、枸杞提取物可以上调丝聚合蛋白表达，蛋白表达量分别为69.37％、71.53％、84.35％。
图5显示枸杞提取物可以提高皮肤组织的LOR的表达。各组间差异比较用单因素方差分析(One-Way ANOVA)，与空白组相比：###p＜0.001；与模型组相比：*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001。
图6为200倍显微镜下不同实验组的INV视野图，图7为枸杞提取物可以提高表皮中INV的表达。各组间差异比较用单因素方差分析(One-Way ANOVA)，与空白组相比：###p＜0.001；与模型组相比：*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001。
采用酶联免疫分析法测定皮肤组织中兜甲蛋白的含量，从图5可以看出，对照组的兜甲蛋白LOR的表达量为1590.88ng/mL，紫外组的兜甲蛋白LOR表达量为982.94ng/mL，维生素C组的兜甲蛋白LOR表达量为1258.97ng/mL，枸杞提取物低剂量组的兜甲蛋白LOR表达量为1357.35ng/mL，枸杞提取物高剂量组的兜甲蛋白LOR表达量为1498.53ng/mL。
采用皮肤组织免疫组化的方法标记小鼠表皮层内披蛋白的表达量，从图7可以看出，相比空白组，模型组下调内披蛋白蛋白表达，蛋白量表达为47.02％，但是维生素C组、枸杞提取物均可以上调丝聚合蛋白表达，蛋白表达量分别为72.41％、79.03％、84.35％。
如图5和图7所示，枸杞提取物对皮肤中LOR和INV的表达的增加，很好地改善皮肤的屏障功能，对皮肤的屏障功能具有很好的保护作用。
实施例3
一种皮肤屏障功能蛋白促进剂，皮肤屏障功能蛋白促进剂为枸杞提取物，通过如下方法制备得到：
将枸杞粉末按1:5的重量比加入到70％的乙醇水溶液中提取，提取温度为60℃，提取后过滤的一次滤液，冷却后通过5μm滤膜过滤得二次滤液，二次滤液通过0.25μm滤膜过滤得到三次滤液，三次滤液浓缩、干燥得到枸杞提取物。
一种修复或预防紫外线照射引发的皮肤屏障功能损伤的化妆品，具体制备如下：
称取1.25g枸杞提取物冻干粉，加入到28.25g膏霜基质(包含如下按质量百分比计的组分：硬脂酸20.0％，氢氧化钾(80％w/w)1.25％，甘油10.0％，去离子水68.75％)中，混匀，配制成高剂量的枸杞提取物膏霜(4.2％w/w)，取其中部分，用膏霜基质配制成低剂量的枸杞提取物膏霜(0.42％w/w)。
实施例4
一种皮肤屏障功能蛋白促进剂，皮肤屏障功能蛋白促进剂为枸杞提取物，通过如下方法制备得到：
将枸杞粉末按1:20的重量比加入到70％的乙醇水溶液中提取，提取温度为60℃，提取后过滤的一次滤液，冷却后通过5μm滤膜过滤得二次滤液，二次滤液通过0.25μm滤膜过滤得到三次滤液，三次滤液浓缩、干燥得到枸杞提取物。
一种修复或预防紫外线照射引发的皮肤屏障功能损伤的化妆品，具体制备如下：
称取1.25g枸杞提取物冻干粉，加入到28.25g膏霜基质(包含如下按质量百分比计的组分：硬脂酸20.0％，氢氧化钾(80％w/w)1.25％，甘油10.0％，去离子水68.75％)中，混匀，配置成高剂量的枸杞提取物膏霜(4.2％w/w)，取其中部分，用膏霜基质配制成低剂量的枸杞提取物膏霜(0.42％w/w)。
实施例5
一种皮肤屏障功能蛋白促进剂，皮肤屏障功能蛋白促进剂为枸杞提取物，通过如下方法制备得到：
将枸杞粉末按1:10的重量比加入到70％的乙醇水溶液中提取，提取温度为60℃，提取后过滤的一次滤液，冷却后通过5μm滤膜过滤得二次滤液，二次滤液通过0.25μm滤膜过滤得到三次滤液，三次滤液浓缩、干燥得到枸杞提取物。
一种修复或预防紫外线照射引发的皮肤屏障功能损伤的化妆品，化妆品中皮肤屏障功能蛋白促进剂的质量含量为0.1％。
具体制备与实施例2相同。
实施例6
一种皮肤屏障功能蛋白促进剂，皮肤屏障功能蛋白促进剂为枸杞提取物，通过如下方法制备得到：
将枸杞粉末按1:10的重量比加入到70％的乙醇水溶液中提取，提取温度为60℃，提取后过滤的一次滤液，冷却后通过5μm滤膜过滤得二次滤液，二次滤液通过0.25μm滤膜过滤得到三次滤液，三次滤液浓缩、干燥得到枸杞提取物。
一种修复或预防紫外线照射引发的皮肤屏障功能损伤的化妆品，化妆品中皮肤屏障功能蛋白促进剂的质量含量为10％。
具体制备与实施例2相同。
实施例7
一种皮肤屏障功能蛋白促进剂，皮肤屏障功能蛋白促进剂为枸杞提取物，通过如下方法制备得到：
将枸杞粉末按1:10的重量比加入到70％的乙醇水溶液中提取，提取温度为60℃，提取后过滤的一次滤液，冷却后通过5μm滤膜过滤得二次滤液，二次滤液通过0.25μm滤膜过滤得到三次滤液，三次滤液浓缩、干燥得到枸杞提取物。
一种修复或预防紫外线照射引发的皮肤屏障功能损伤的化妆品，化妆品中皮肤屏障功能蛋白促进剂的质量含量为20％。
具体制备与实施例2相同。
结果检测
对实施例3-7的经皮失水率进行检测，检测结果如下表1(详见附图)。
对实施例3-7的蛋白丝聚合蛋白FLG、内披蛋白INV和兜甲蛋白LOR的表达量进行检测，检测结果如下表2。
表1经皮失水率检测
Figure BDA0002401676360000121
Figure BDA0002401676360000131
表2角质层蛋白丝聚合蛋白FLG、内披蛋白INV和兜甲蛋白LOR的表达量
Figure BDA0002401676360000141
显然，本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明权利要求的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种皮肤屏障功能蛋白促进剂，其特征在于，所述皮肤屏障功能蛋白促进剂为枸杞提取物。
2.如权利要求1所述皮肤屏障功能蛋白促进剂，其特征在于，所述枸杞提取物通过如下方法制备得到：
将枸杞粉末按1:5～1:20的重量比加入到70％的乙醇水溶液中提取，提取温度为20℃～60℃，提取后过滤的一次滤液，冷却后通过1～5μm滤膜过滤得二次滤液，二次滤液通过0.1～0.65μm滤膜过滤得到三次滤液，三次滤液浓缩、干燥得到枸杞提取物。
3.权利要求1或2所述皮肤屏障功能蛋白促进剂在制备促进丝聚合蛋白产生的制剂中的应用。
4.权利要求1或2所述皮肤屏障功能蛋白促进剂在制备促进内披蛋白产生的制剂中的应用。
5.权利要求1或2所述皮肤屏障功能蛋白促进剂在制备促进兜甲蛋白产生的制剂中的应用。
6.权利要求1或2所述皮肤屏障功能蛋白促进剂在制备同时促进丝聚合蛋白、内披蛋白和兜甲蛋白产生的制剂中的应用。
7.权利要求1或2所述皮肤屏障功能蛋白促进剂在制备修复或预防紫外线照射引发的皮肤屏障功能损伤的化妆品和/美容产品中的应用。
8.一种修复或预防紫外线照射引发的皮肤屏障功能损伤的化妆品或美容产品，其特征在于，所述化妆品或美容产品中包含权利要求1或2所述皮肤屏障功能蛋白促进剂和其他可接受的载体或可配伍的化合物。
9.如权利要求8所述修复或预防紫外线照射引发的皮肤屏障功能损伤的化妆品或美容产品，其特征在于，所述皮肤屏障功能蛋白促进剂的质量含量为0.1～20％。
10.如权利要求9所述修复或预防紫外线照射引发的皮肤屏障功能损伤的化妆品或美容产品，其特征在于，所述皮肤屏障功能蛋白促进剂的质量含量为4.2％。
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