CN111183932A - 一种提高石斑鱼苗种抗病、抗逆的培育方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种提高石斑鱼苗种抗病、抗逆的培育方法，包括以下步骤：1)放苗前2天，将骨条藻引种到育苗池中；2)放苗后7天内，每天投喂SS型轮虫；3)放苗第8～15天，每天投喂丰年虫无节幼体和LS型轮虫；4)放苗第16～25天，每天投喂丰年虫无节幼体；5)放苗第26～35天，每天投喂丰年虫无节幼体和配合饲料。本发明通过对鱼种不同时期的营养调节，提高鱼苗免疫力，提高石斑鱼的抗逆、抗病能力。经试验，在盐度36‰条件下存活率仍达到68％以上，盐度42‰条件下，存活率仍保持30％左右，感染溶藻弧菌2周后，成活率保持70％以上。

Description

一种提高石斑鱼苗种抗病、抗逆的培育方法
技术领域
本发明涉及鱼类养殖技术领域，特别涉及一种提高石斑鱼苗种抗病、抗逆的培育方法。
背景技术
石斑鱼养殖过程中，常见的疾病有弧菌病、肠炎病、指环虫病和刺激隐核虫病等，其中弧菌病等细菌性疾病是石斑鱼主要疾病之一，主要由溶藻弧菌所引起。弧菌病的常见防治方法是泼洒五倍子或饲料中伴三黄粉等，目前主要以病后的治疗形式为主，少见能够通过鱼苗的培育有效提高苗种抗病能力的方法。
石斑鱼培育过程中，鱼苗培育一定时期后，需要转移至室外生态池塘养殖，此过程中环境变化较大，常常发生石斑鱼的应激反应，严重时导致石斑鱼大量死亡，因此，探寻一种抗逆能力强的的鱼苗培育方法也是极为重要的。
发明内容
鉴于此，本发明提供了一种提高石斑鱼苗种抗病、抗逆的培育方法。
本发明的技术方案是：
一种提高石斑鱼苗种抗病、抗逆的培育方法，包括以下步骤：
1)放苗前2天，将骨条藻引种到育苗池中，骨条藻接种浓度为3×103～4×103个/L；
2)放苗后7天内，每天投喂SS型轮虫，轮虫个体长度小于120um、宽度小于60um，保持水中轮虫密度为1～2万个/L；
3)放苗第8～15天，每天投喂丰年虫无节幼体和LS型轮虫，轮虫长度不大于220um、宽度不大于120um；保持水体中轮虫密度为1～2万个/L，水体中丰年虫无节幼体的密度为2000～3000个/L；
4)放苗第16～25天，每天投喂丰年虫无节幼体，保持水体中丰年虫无节幼体密度为8000～10000个/L；
5)放苗第26～35天，每天投喂丰年虫无节幼体和配合饲料，保持水中丰年虫无节幼体密度为1000～3000个/L，配合饲料每次投喂量为鱼体中的2～3％，每天投喂3～4次；
所述配合饲料包括以下重量份成分：
磷虾粉24～32份、枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌发酵粉7～10份、卵磷脂10～12份、玉米淀粉2.2～3.9份、紫菜粉3～7份、维生素B12 2～3份和粘合剂2～4份；制成软颗粒。
放苗时控制光照强度为500～900lx，以后每天提高100Lx，最终控制光照强度为2500～2800Lx；
优选的，轮虫通过以下方式培养：将轮虫以初始密度2～5个/mL接种于海水中；海水的盐度为28‰、pH为7.8、溶解氧大于5mg/L，水温为26～28℃；水中还含有密度5×107～6×107cell/mL的小球藻、7～10mg/L枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌发酵粉、2～3mg/L L-精氨酸和1～1.5mg/L苏氨酸，培养8～12h。
优选的，丰年虫无节幼体通过以下方式培养：将丰年虫无节幼体以初始密度为2～5个/mL引入海水中；海水的盐度为28‰、pH为7.8、溶解氧大于5mg/L，水温为26～28℃；海水中还含有8～10mg/L枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌发酵粉、15～20mg/L蛋氨酸和3.5×107～4.0×107cell/mL小球藻，培养时间2～4小时。
优选的，所述枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌发酵粉通过以下方法制得：将枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌活化后，分别制成108～109CFU/mL菌液，分别按3％～5％(w/w)接种量接种到同一发酵培养基中，在温度25～30℃条件下发酵培养22～24h，发酵结束后，干燥，过筛60～100目，即得；发酵培养基中各成分质量比为：15～18％多甲藻粉、10～12％链状裸甲藻粉、5～7％芭蕉叶粉、5～7％玉米粉、0.05～0.07％硫酸铵、0.2～0.4％磷酸二氢钾，余下是水。
经试验，本发明方法特别适用于老虎斑。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明通过对鱼种不同时期的营养调节，提高鱼苗免疫力，提高石斑鱼的抗逆、抗病能力。经试验，在盐度36‰条件下石斑鱼存活率仍达到68％以上，盐度42‰条件下，石斑鱼存活率仍保持30％左右，感染溶藻弧菌2周后，成活率仍在70％以上。
本发明发酵粉中以多甲藻和链状裸甲藻等石斑鱼养殖过程中的有害藻类作为发酵原料，实现了有害藻种的有效利用，避免了资源的浪费，节约生产成本。
具体实施方式
为了更好理解本发明技术内容，下面提供具体实施例，对本发明做进一步的说明。
实施例1
一种提高石斑鱼苗种抗病、抗逆的培育方法，包括以下步骤：
1)水质要求：pH7.8～8.5、氨氮0.5mg/g以下、盐度28～31‰、水温25～28℃，水中溶氧大于5mg/L；
2)放苗种：将规格25m3，池深1.2米的培育池清洗、消毒后放入老虎斑初孵仔鱼，放苗密度为3万尾/m3；
放苗前2天，将骨条藻引种到育苗池中，骨条藻接种浓度为4×103个/L；
放苗后7天内，每天投喂SS型轮虫，轮虫个体长度小于120um、宽度小于60um，保持水中轮虫密度为1万个/L；
放苗第8～15天，每天投喂丰年虫无节幼体和LS型轮虫，轮虫长度不大于220um、宽度不大于120um；保持水体中轮虫密度为1万个/L，水体中丰年虫无节幼体的密度为3000个/L；
放苗第16～25天，每天投喂丰年虫无节幼体，保持水体中丰年虫无节幼体密度为10000个/L；
放苗第26～35天，每天投喂丰年虫无节幼体和配合饲料，保持水中丰年虫无节幼体密度为1000个/L，配合饲料每次投喂量为鱼体中的2～3％，每天投喂4次；
所述配合饲料包括以下重量份成分：
磷虾粉24份、枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌发酵粉10份、卵磷脂10份、玉米淀粉3.9份、紫菜粉7份、维生素B12 3份和粘合剂2份；制成软颗粒。
放苗时控制光照强度为900lx，以后每天提高100Lx，最终控制光照强度为2800Lx；
放苗后7天内不换水，7天后每2～3天换水一次，换水量为总体积的15～30％。
轮虫通过以下方式培养：将轮虫以初始密度5个/mL接种于海水中；海水的盐度为28‰、pH为7.8、溶解氧大于5mg/L，水温为26～28℃；水中还含有密度6×107cell/mL的小球藻、10mg/L枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌发酵粉、2mg/L L-精氨酸和1mg/L苏氨酸，培养8h。
丰年虫无节幼体通过以下方式培养：将丰年虫无节幼体以初始密度为5个/mL引入海水中；海水的盐度为28‰、pH7.8、溶解氧大于5mg/L，水温为26～28℃；海水中还含有10mg/L枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌发酵粉、15mg/L蛋氨酸和4.0×107cell/mL小球藻，培养时间4小时。
所述发酵粉：将枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌活化后，分别制成109CFU/mL菌液，分别按3％(w/w)接种量接种到同一发酵培养基中，在温度30℃条件下发酵培养24h，发酵结束后，干燥，过筛60目，即得；发酵培养基中各成分质量比为：18％多甲藻粉、10％链状裸甲藻粉、5％芭蕉叶粉、7％玉米粉、0.05％硫酸铵、0.4％磷酸二氢钾，余下是水。
实施例2
一种提高石斑鱼苗种抗病、抗逆的培育方法，包括以下步骤：
1)水质要求：pH7.8～8.5、氨氮0.5mg/g以下、盐度28～31‰、水温25～28℃，水中溶氧大于5mg/L；
2)放苗种：将规格25m3，池深1.2米的培育池清洗、消毒后放入老虎斑初孵仔鱼，放苗密度为3万尾/m3；
放苗前2天，将骨条藻引种到育苗池中，骨条藻接种浓度为3×103个/L；
放苗后7天内，每天投喂SS型轮虫，轮虫个体长度小于120um、宽度小于60um，保持水中轮虫密度为2万个/L；
放苗第8～15天，每天投喂丰年虫无节幼体和LS型轮虫，轮虫长度不大于220um、宽度不大于120um；保持水体中轮虫密度为2万个/L，水体中丰年虫无节幼体的密度为2000个/L；
放苗第16～25天，每天投喂丰年虫无节幼体，保持水体中丰年虫无节幼体密度为8000个/L；
放苗第26～35天，每天投喂丰年虫无节幼体和配合饲料，保持水中丰年虫无节幼体密度为3000个/L，配合饲料每次投喂量为鱼体中的2～3％，每天投喂3次；
所述配合饲料包括以下重量份成分：
磷虾粉32份、枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌发酵粉7份、卵磷脂12份、玉米淀粉2.2份、紫菜粉3份、维生素B12 2份和粘合剂4份；制成软颗粒。
放苗时控制光照强度为500lx，以后每天提高100Lx，最终控制光照强度为2500Lx；
放苗后7天内不换水，7天后每2～3天换水一次，换水量为总体积的15～30％。
轮虫通过以下方式培养：将轮虫以初始密度2个/mL接种于海水中；海水的盐度为28‰、pH为7.8、溶解氧大于5mg/L，水温为26～28℃；水中还含有密度5×107cell/mL的小球藻、7mg/L枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌发酵粉、3mg/L L-精氨酸和1.5mg/L苏氨酸，培养12h。
丰年虫无节幼体通过以下方式培养：将丰年虫无节幼体以初始密度为2个/mL引入海水中；海水的盐度为28‰、pH为7.8、溶解氧大于5mg/L，水温为26～28℃；海水中还含有8mg/L枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌发酵粉、20mg/L蛋氨酸和3.5×107cell/mL小球藻，培养时间2小时。
所述枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌发酵粉：将枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌活化后，分别制成108CFU/mL菌液，分别按5％(w/w)接种量接种到同一发酵培养基中，在温度25℃条件下发酵培养22h，发酵结束后，干燥，过筛100目，即得；发酵培养基中各成分质量比为：15％多甲藻粉、12％链状裸甲藻粉、7％芭蕉叶粉、5％玉米粉、0.07％硫酸铵、0.2％磷酸二氢钾，余下是水。
实施例3
本实施例与实施例1的区别是：
轮虫通过以下方式培养：将轮虫以初始密度5个/mL接种于海水中；海水的盐度为28‰、pH为7.8、溶解氧大于5mg/L，水温为26～28℃；水中还含有密度6×107cell/mL的小球藻、10mg/L枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌发酵粉、2mg/L谷氨酸和1mg/L蛋氨酸，培养8h。
丰年虫无节幼体通过以下方式培养：将丰年虫无节幼体以初始密度为5个/mL引入海水中；海水的盐度为28‰、pH为7.8、溶解氧大于5mg/L，水温为26～28℃；海水中还含有10mg/L枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌发酵粉、20mg/L L-精氨酸和4.0×107cell/mL小球藻，培养时间4小时。
所述发酵粉：将枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌活化后，分别制成109CFU/mL菌液，分别按3％(w/w)接种量接种到同一发酵培养基中，在温度30℃条件下发酵培养24h，发酵结束后，干燥，过筛60目，即得；发酵培养基中各成分质量比为：28％小球藻粉、5％芭蕉叶粉、7％玉米粉、0.05％硫酸铵、0.4％磷酸二氢钾，余下是水。
对比例1
本对比例与实施例1的区别是：
所述配合饲料包括以下重量份成分：
磷虾粉24份、枯草芽孢杆菌发酵粉10份、卵磷脂10份、玉米淀粉3.9份、紫菜粉7份、维生素B12 3份和粘合剂2份；制成软颗粒。
所述发酵粉：将枯草芽孢杆菌活化后，制成109CFU/mL菌液，按3％(w/w)接种量接种到发酵培养基中，在温度30℃条件下发酵培养24h，发酵结束后，干燥，过筛60目，即得；发酵培养基中各成分质量比为：18％多甲藻粉、10％链状裸甲藻粉、5％芭蕉叶粉、7％玉米粉、0.05％硫酸铵、0.4％磷酸二氢钾，余下是水。
对比例2
本对比例与实施例1的区别是：
一种提高石斑鱼苗种抗病、抗逆的培育方法，包括以下步骤：
1)水质要求：pH7.8～8.5、氨氮0.5mg/g以下、盐度28～31‰、水温25～28℃，水中溶氧大于5mg/L；
2)放苗种：将规格25m3，池深1.2米的培育池清洗、消毒后放入初孵仔鱼，放苗密度为3万尾/m3；
放苗前2天，将小球藻引种到育苗池中，骨条藻接种浓度为4×103个/L；
放苗后7天内，每天投喂SS型轮虫，轮虫个体长度小于120um、宽度小于60um，保持水中轮虫密度为3万个/L；
放苗第8～20天，每天投喂丰年虫无节幼体和LS型轮虫，轮虫长度不大于220um、宽度不大于120um；保持水体中轮虫密度为3万个/L，水体中丰年虫无节幼体的密度为1000个/L；
放苗第21～25天，每天投喂丰年虫无节幼体，保持水体中丰年虫无节幼体密度为5000个/L；
放苗第26～35天，每天投喂丰年虫无节幼体和配合饲料，保持水中丰年虫无节幼体密度为5000个/L，配合饲料每次投喂量为鱼体中的2～3％，每天投喂4次；
所述配合饲料包括以下重量份成分：
磷虾粉32份、枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌发酵粉2份、卵磷脂15份、玉米淀粉4.5份、紫菜粉10份、维生素B12 1份和粘合剂4份；制成软颗粒。
放苗时控制光照强度为500～900lx，以后每天提高100Lx，最终控制光照强度为2500～2800Lx。
试验例1：抗逆性试验
各实施例和对比例苗种培育35天后，捕收鱼苗，将鱼苗投入培育池(水深2m)中养殖，放养密度为20尾/m3，投喂市售天马牌石斑鱼配合饲料，投喂量为鱼体重2％，每天投喂3次。海水pH7.8～8.3，盐度28～32‰，溶氧大于5mg/L。对各组石斑鱼进行不同盐度(盐度30‰、36‰、42‰)的抗逆性试验，8h后记录石斑鱼的死亡数，统计存活率，结果见表1。
表1
盐度30‰ 盐度36‰ 盐度42‰
实施例1 98±1.2％ 82±1.5％ 34±0.5％
实施例2 97±1.7％ 78±1.4％ 37±1.3％
实施例3 98±1.4％ 68±2.2％ 28±1.2％
对比例1 96±1.3％ 49±4.2％ 11±1.5％
对比例2 98±0.8％ 55±3.6％ 18±2.2％
结果显示，在盐度30‰条件下，各组均能正常生长，在盐度36‰条件下，实施例组的存活率仍达到68％以上，而对比例组的存活率仅为50％左右，在盐度42‰条件下，实施例组仍保持30％左右的存活率，而对比例组的存活率仅为10％左右，可见，实施例组的存活率显著高于对比例组，本发明方法可有效提高育苗的抗逆性。
试验例2：人工感染试验
各实施例和对比例苗种培育35天后，捕收鱼苗，将鱼苗投入培育池(水深2m)中养殖，放养密度为20尾/m3，投喂市售天马牌石斑鱼配合饲料，投喂量为鱼体重2％，每天投喂3次。海水水体pH7.8～8.3，盐度30‰，溶氧大于5mg/L。养殖1月后，取实施例和对比例各20尾鱼进行人工感染试验，于腹腔注射溶藻弧菌(浓度1×105cfu/mL)，注射量为50uL/尾，对照组为实施例1鱼苗注射同等剂量的PBS溶液。做好标记后放回养殖池继续养殖，2周后，记录各组死亡数，统计存活率。结果见表2。
表2
存活率
实施例1 83±2.4％
实施例2 85±0.7％
实施例3 71±1.2％
对比例1 53±1.5％
对比例2 64±1.8％
对照组 98±1.1％
结果显示，感染溶藻弧菌2周后，实施例组石斑鱼的成活率保持70％以上，对比例组石斑鱼的成活率显著低于实施例组。可见，本发明方法可有效提高石斑鱼的抗病性。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种提高石斑鱼苗种抗病、抗逆的培育方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)放苗前2天，将骨条藻引种到育苗池中，骨条藻接种浓度为3×103～4×103个/L；
2)放苗后7天内，每天投喂SS型轮虫，轮虫个体长度小于120um、宽度小于60um，保持水中轮虫密度为1～2万个/L；
3)放苗第8～15天，每天投喂丰年虫无节幼体和LS型轮虫，轮虫长度不大于220um、宽度不大于120um；保持水体中轮虫密度为1～2万个/L，水体中丰年虫无节幼体的密度为2000～3000个/L；
4)放苗第16～25天，每天投喂丰年虫无节幼体，保持水体中丰年虫无节幼体密度为8000～10000个/L；
5)放苗第26～35天，每天投喂丰年虫无节幼体和配合饲料，保持水中丰年虫无节幼体密度为1000～3000个/L，配合饲料每次投喂量为鱼体中的2～3％，每天投喂3～4次；
所述配合饲料包括以下重量份成分：
磷虾粉24～32份、枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌发酵粉7～10份、卵磷脂10～12份、玉米淀粉2.2～3.9份、紫菜粉3～7份、维生素B12 2～3份和粘合剂2～4份；制成软颗粒。
放苗时控制光照强度为500～900lx，以后每天提高100lx，最终控制光照强度为2500～2800lx；
2.根据权利要求1所述的提高石斑鱼苗种抗病、抗逆的培育方法，其特征在于，
轮虫通过以下方式培养：将轮虫以初始密度12～15个/L接种于海水中；海水的盐度为28‰、pH7.8、溶解氧大于5mg/L，水温为26～28℃；水中还含有密度5×107～6×107cell/mL的小球藻、7～10mg/L枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌发酵粉、2～3mg/L L-精氨酸和1～1.5mg/L苏氨酸，培养8～12h。
3.根据权利要求1所述的提高石斑鱼苗种抗病、抗逆的培育方法，其特征在于，
丰年虫无节幼体通过以下方式培养：将丰年虫无节幼体以初始密度为12～15个/L引入海水中；海水的盐度为28‰、pH7.8、溶解氧大于5mg/L，水温26～28℃；海水中还含有8～10mg/L枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌发酵粉、15～20mg/L蛋氨酸和3.5×107～4.0×107cell/mL小球藻，培养时间2～4小时。
4.根据权利要求1所述的提高石斑鱼苗种抗病、抗逆的培育方法，其特征在于，
所述枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌发酵粉通过以下方法制得：将枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌活化后，分别制成108～109CFU/mL菌液，分别按3％～5％(w/w)接种量接种到同一发酵培养基中，在温度25～30℃条件下发酵培养22～24h，发酵结束后，干燥，过筛60～100目，即得；发酵培养基中各成分质量比为：15～18％多甲藻粉、10～12％链状裸甲藻粉、5～7％芭蕉叶粉、5～7％玉米粉、0.05～0.07％硫酸铵、0.2～0.4％磷酸二氢钾。
5.根据权利要求1所述的提高石斑鱼苗种抗病、抗逆的培育方法，其特征在于，所述石斑鱼为老虎斑。
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