CN111068067A - 一种用于防治登革热病毒的药物组合物及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种用于防治登革热病毒的药物组合物及其制备方法，属于药物制备技术领域，本发明提供的一种用于防治登革热病毒的药物组合物，按质量百分比计，包括以下原料：三氮唑核苷20~50%、超细淀粉颗粒10~30%、抗菌杀菌辅料5~20%、缩合剂1~5%、引发剂0.1~2%，其余为水。该药物组合物中所述的药物由超支化三氮唑核苷聚合物和医学上可接受的辅料组成，本发明制备的药物组合物对I型登革热病毒的复制具有强烈的防治和抑制效果，该药物组合物主要制成注射剂、口服液或喷剂。

Description

一种用于防治登革热病毒的药物组合物及其制备方法
技术领域
本发明属于药物制备领域，涉及一种用于防治登革热病毒的药物组合物及其制备方法。
背景技术
登革热病毒(dengue virus)在分类上属黄病毒科、黄病毒属，包括4个不同血清型，即Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型登革热病毒。登革热主要通过蚊虫传播病毒，入侵人体细胞，通过病毒和蛋白受体产生反应，使人体出现免疫系统疾病。尤其是近些年，随着全球气候持续变暖，蚊媒扩散速度加快、分布范围变广，致使登革热疾病在世界范围内迅速蔓延。目前，全世界每年约有0.5亿～1亿人感染登革病毒，中国的广东、海南和台湾等地都曾有过登革热的发生和大流行。由于感染登革热的死亡率很高，造成的危害已成为一个严重的公共卫生问题，越来越引起世界各国卫生部门的高度重视。因此，防治登革病毒感染与传播已成为医学界当务之急。由于登革病毒的致病机制并未阐明，尚无用于人体的疫苗及有效的治疗药物，寻找一种有效治疗登革热的药物迫在眉睫。
登革热是黄病毒科的一种，其包括RNA病毒，其人类病原体还包括西尼罗病毒、黄热病毒、日本脑炎病毒以及蜱传脑炎病毒等。目前，已有很多研究单位分别从中药和西药方面在防治和治疗登革热病毒领域开展研究。发明专利CN106038535 B公开了一种抗登革热病毒的化学成分七叶内酯，其在药物中分量为10~60%，具有可有效抵抗II型登革热病毒的作用。发明专利CN103608020 B公开了一种核苷化合物在制备用于治疗登革热的药物中的用途，该核苷化合物能够有效抑制登革热病毒的复制。文献（张磊，姚江雄，纪洵敏，等. 夏桑菊颗粒体外抗I型登革热病毒的作用，广东化工，2019, 40: 1250-1254）指出利巴韦林和夏桑菊均能够抑制病毒RNA的复制，但二者均存在明显的剂量依赖性，并且均不具有长时间缓释功能。综上所述，目前治疗登革热的药物存在的问题是：（1）生物相容性较差，直接采用中药或西药成分作为预防或治疗登革热病毒的药物，部分药物进入人体后会在特定的实际应用中引起适当的宿主反应，容易使人体免疫系统对外异物产生排斥作用，耐受能力下降。（2）药效时间短，采用中药或西药成分直接制成片剂、注射液或口服液形式，在人体内分解释放速度快，加快了给药频率，且不利于降低患者的顺应性或降低药物的副作用。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种用于防治登革热病毒的药物组合物及其制备方法。
一种用于防治登革热病毒的药物组合物，按质量百分比计，包括以下原料：三氮唑核苷20~50%、超细淀粉颗粒10~30%、抗菌杀菌辅料5~20%、缩合剂1~5%、引发剂0.1~2%，其余为水。
优选的，按质量百分比计，包括以下原料：三氮唑核苷30~40%、超细淀粉颗粒20~30%、抗菌杀菌辅料10~15%、缩合剂1~5%、引发剂0.4~1.5%，其余为水。
本发明还提供了一种用于防治登革热病毒的药物组合物的制备方法，包括上述原料，所述制备方法包括以下步骤：
（1）将三氮唑核苷、超细淀粉颗粒和水混合，保持温度在25~40℃下并强力搅拌0.5~1h，然后在辅助超声分散0.5~1 h，直至溶液分散均匀；
（2）向步骤（1）中加入引发剂，升温至60~90℃，反应3~12 h，滴加缩合剂溶液，使三氮唑核苷和超细淀粉发生超支化缩合聚合反应，制得超支化抗病毒高分子；
（3）将步骤（2）获得的超支化抗病毒高分子与具有抗菌杀菌辅料复配混合，经烘干、冷却、研磨，即可制得一种用于防治登革热病毒的药物组合物。
优选的，步骤（1）中所述超细淀粉颗粒的粒径范围为10nm~1μm。
优选的，步骤（1中）超声仪器频率为50~100kHz，功率为50~200W。
优选的，步骤（2）中所述引发剂包括：
过氧化二苯甲酰、过氧化二碳酸二异丙酯、偶氮二异丁氰以及过硫酸铵中的一种或几种。
优选的，所述的缩合剂为浓硫酸。
优选的，步骤（3）所述的抗菌杀菌辅料包括：
夏枯草、金银花以及桑叶中的一种或几种。
本发明的优点及积极效果为：本发明提供的用于防治登革热病毒的药物组合物是通过超细淀粉和三氮唑核苷的缩合聚合反应，具体反应方程式如下：
Figure 86147DEST_PATH_IMAGE001
一方面利用三氮唑核苷的强抗病毒作用来抑制登革热病毒RNA的复制，另一方面利用超支化淀粉的生物相容性和长时间缓释作用，来延长药物组合物的药效作用。同时，该药物组合物成分中的抗菌和杀菌组分能够保证药物所处环境中细菌的滋生。本发明制备方法简单、成本低，对I型登革热病毒的复制具有强烈的防治和抑制效果，并且能够提供药物组合物所需的无菌环境。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面结合具体实施例对本发明作进一步描述。
实施例1
本发明实施例提供的一种用于防治登革热病毒的药物组合物的组份及其质量比例为：三氮唑核苷20份、超细淀粉颗粒20份、浓硫酸2份、过氧化苯甲酰0.5份、水47.5份。经过缩合聚合反应生成超支化抗病毒高分子，然后与10份夏枯草和金银花辅料复配，即可得一种防治登革热病毒药物组合物。
本发明实施例提供的一种用于防治登革热病毒的药物组合物，其制备方法包括：
（1）将20份三氮唑核苷、20份超细淀粉颗粒和47.5份水加入烧瓶中，升高温度，25℃下强力搅拌0.5h，然后辅助超声分散1h，直至溶液分散均匀；
（2）向步骤（1）中加入0.5份过氧化苯甲酰，升温至60℃，同时滴加2份浓硫酸溶液，保持温度反应3h，使三氮唑核苷和超细淀粉发生超支化缩合聚合反应，制得超支化抗病毒高分子；
（3）将步骤（2）获得的超支化抗病毒高分子与10份夏枯草和金银花复合物辅料复配混合，经烘干、冷却、研磨，即可制得一种用于防治登革热病毒的药物组合物。
实施例2
本发明实施例提供的一种用于防治登革热病毒的药物组合物的组份及其质量比例为：三氮唑核苷30份、超细淀粉颗粒20份、浓硫酸3份、过氧化二碳酸二异丙酯1份、水41份。经过缩合聚合反应生成超支化抗病毒高分子，然后与5份夏枯草和桑叶复合物辅料复配，即可得一种防治登革热病毒药物组合物。
本发明实施例提供的一种用于防治登革热病毒的药物组合物，其制备方法包括：
（1）将30份三氮唑核苷、20份超细淀粉颗粒和41份水加入烧瓶中，升高温度，在30℃下强力搅拌1h，然后辅助超声分散0.5h，直至溶液分散均匀；
（2）向步骤（1）中加入1份过氧化二碳酸二异丙酯，升温至80℃，同时滴加3份浓硫酸溶液，保持温度反应6h，三氮唑核苷和超细淀粉发生超支化缩合聚合反应，制得超支化抗病毒高分子；
（3）将步骤（2）获得的超支化抗病毒高分子与5份抗菌、杀菌辅料复配混合，经烘干、冷却、研磨，即可制得一种用于防治登革热病毒的药物组合物。
实施例3
本发明实施例提供的一种用于防治登革热病毒的药物组合物的组份及其质量比例为：三氮唑核苷50份、超细淀粉颗粒20份、浓硫酸5份、过硫酸胺2份、水13份。经过缩合聚合反应生成超支化抗病毒高分子，然后与10份金银花辅料复配，即可得一种防治登革热病毒药物组合物。
本发明实施例提供的一种用于防治登革热病毒的药物组合物，其制备方法包括：
（1）将50份三氮唑核苷、20份超细淀粉颗粒和13份水加入烧瓶中，升高温度，在35℃下强力搅拌0.5h，然后辅助超声分散1h，直至溶液分散均匀；
（2）向步骤（1）中加入2份过硫酸胺，升温至70℃，同时滴加5份浓硫酸溶液，保持温度反应8h，三氮唑核苷和超细淀粉发生超支化缩合聚合反应，制得超支化抗病毒高分子；
（3）将步骤（2）获得的超支化抗病毒高分子与10份金银花辅料复配混合，经烘干、冷却、研磨，即可制得一种用于防治登革热病毒的药物组合物。
实施例4
本发明实施例提供的一种用于防治登革热病毒的药物组合物的组份及其质量比例为：三氮唑核苷40份、超细淀粉颗粒30份、浓硫酸4份、过氧化二碳酸二异丙酯和偶氮二异丁氰混合物1份、水20份。经过缩合聚合反应生成超支化抗病毒高分子，然后与5份夏枯草、金银花和桑叶混合物辅料复配，即可得一种防治登革热病毒药物组合物。
本发明实施例提供的一种用于防治登革热病毒的药物组合物，其制备方法包括：
（1）将40份三氮唑核苷、30份超细淀粉颗粒和20份水加入烧瓶中，升高温度，在40℃下强力搅拌1h，然后辅助超声分散1h，直至溶液分散均匀；
（2）向步骤（1）中加入1份过氧化二碳酸二异丙酯和偶氮二异丁氰，升温至90℃，同时滴加4份浓硫酸溶液，保持温度反应12h，三氮唑核苷和超细淀粉发生超支化缩合聚合反应，制得超支化抗病毒高分子；
（3）将步骤（2）获得的超支化抗病毒高分子与5份夏枯草、金银花和桑叶混合物辅料复配混合，经烘干、冷却、研磨，即可制得一种用于防治登革热病毒的药物组合物。
实施例5
本发明实施例提供的一种用于防治登革热病毒的药物组合物的组份及其质量比例为：三氮唑核苷20份、超细淀粉颗粒30份、浓硫酸3份、偶氮二异丁氰2份、水25份。经过缩合聚合反应生成超支化抗病毒高分子，然后与20份夏枯草作用辅料复配，即可得一种防治登革热病毒药物组合物。
本发明实施例提供的一种用于防治登革热病毒的药物组合物，其制备方法包括：
（1）将20份三氮唑核苷、30份超细淀粉颗粒和25份水加入烧瓶中，升高温度，在70℃下强力搅拌0.5h，然后辅助超声分散0.5h，直至溶液分散均匀；
（2）向步骤（1）中加2份偶氮二异丁氰，升温至70℃，同时滴加3份浓硫酸溶液，保持温度反应6h，三氮唑核苷和超细淀粉发生超支化缩合聚合反应，制得超支化抗病毒高分子；
（3）将步骤（2）获得的超支化抗病毒高分子与20份夏枯草辅料复配混合，经烘干、冷却、研磨，即可制得一种用于防治登革热病毒的药物组合物。
本发明是通过采用细胞病变抑制率法测定实施例1~5制备得到的药物组合物对登革热I型病毒的抑制作用，采用半数有毒浓度（CC50）和半数最大效用浓度（EC50）两个参数来表征，具体试验方法和结果如下：
1.1 实验材料：包括实施例1~5药物组合物、对照组（利巴韦林）。
1.2 实验动物：KM小鼠肾细胞，由广东省医学实验动物中心提供，本室冻存保种。
1.3病毒株：登革I型病毒引自中国疾病预防控制中心传染病预防控制所。
1.4 试验方法与结果
1.4.1小鼠肾细胞上毒性浓度的测定：将密度为5× 104cell/ml肾细胞接种于96孔细胞培养板中，每孔100μL。生长24h细胞成片贴壁后备用。将药物用细胞维持培养液(含2％血清)稀释6倍，每孔加入所配制的药液100μL，设正常细胞对照，每孔加入100μL细胞维持培养液，并于37℃的5％CO2培养箱中培养。加药培养48h后加入含100μL10％CCK-8试剂的培养基，在37℃孵育1h。按照下面方法计算：细胞活率(％)＝(药物组-空白对照)/(细胞对照-空白对照)× 100％。将培养板置于培养箱中培养12～18h，待细胞在96孔板中长成单层后，吸去培养液，每孔加入100ul的不同稀释浓度的药物和100uL的100TCID50病毒液，每一药物浓度设置3个复孔，同时设置空白对照组、正常细胞对照组、病毒对照组和阳性对照组，计算药物的病毒抑制率。按照下面方法计算：病毒抑制率（%）＝(试验组平均OD值-病毒对照组平均OD值)/(细胞对照组平均OD值-病毒对照组平均OD值)× 100％。
1.4.2 实验结果
表1.药物毒性结果
Figure 98228DEST_PATH_IMAGE002
表2. 药物对病毒抑制率的测定结果
Figure 2599DEST_PATH_IMAGE003
由表1可以得到：对于实施例1~5，随着药物组合物浓度的降低，小鼠肾细胞的平均细胞存活率逐渐增大，CC50值为726.8；而由表2可以得到：对于实施例1~5，随着药物组合物浓度的降低，小鼠肾细胞的平均细胞存活率逐渐降低，EC50值为6.91，其选择指数SI为108.66；同时，相同药物浓度下与对照组相比较，本发明也具有一定的毒性和较优的抑制病毒的效果。可见，本发明的药物组合物具有低毒高效作用，能够有效抑制登革热I型病毒。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种用于防治登革热病毒的药物组合物，其特征在于，按质量百分比计，包括以下原料：三氮唑核苷20~50%、超细淀粉颗粒10~30%、抗菌杀菌辅料5~20%、缩合剂1~5%、引发剂0.1~2%，其余为水。
2.如权利要求1所述的用于防治登革热病毒的药物组合物，其特征在于，按质量百分比计，包括以下原料：三氮唑核苷30~40%、超细淀粉颗粒20~30%、抗菌杀菌辅料10~15%、缩合剂1~5%、引发剂0.4~1.5%，其余为水。
3.一种用于防治登革热病毒的药物组合物的制备方法，包括上述原料，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
（1）将三氮唑核苷、超细淀粉颗粒和水混合，保持温度在25~40℃下并强力搅拌0.5~1h，然后在辅助超声分散0.5~1 h，直至溶液分散均匀；
（2）向步骤（1）中加入引发剂，升温至60~90℃，反应3~12 h，滴加缩合剂溶液，使三氮唑核苷和超细淀粉发生超支化缩合聚合反应，制得超支化抗病毒高分子；
（3）将步骤（2）获得的超支化抗病毒高分子与具有抗菌杀菌辅料复配混合，经烘干、冷却、研磨，即可制得一种用于防治登革热病毒的药物组合物。
4.如权利要求3所述的一种用于防治登革热病毒的药物组合物的制备方法，其特征在于，步骤（1）中所述超细淀粉颗粒的粒径范围为10nm~1μm。
5.如权利要求3所述的一种用于防止登革热病毒的药物组合物的制备方法，其特征在于，步骤（1中）超声仪器频率为50~100kHz，功率为50~200W。
6.如权利要求3所述的一种用于防治登革热病毒的药物组合物的制备方法，其特征在于，步骤（2）中所述引发剂包括：
过氧化二苯甲酰、过氧化二碳酸二异丙酯、偶氮二异丁氰以及过硫酸铵中的一种或几种。
7.如权利要求3所述的一种用于防止登革热病毒的药物组合物的制备方法，其特征在于，所述的缩合剂为浓硫酸。
8.如权利要求3所述的一种用于防治登革热病毒的药物组合物的制备方法，其特征在于：步骤（3）所述的抗菌杀菌辅料包括：
夏枯草、金银花以及桑叶中的一种或几种。
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