CN111057746B - 一种肌酸激酶同工酶测定试剂盒 - Google Patents

一种肌酸激酶同工酶测定试剂盒 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种肌酸激酶同工酶测定试剂盒，涉及生物检测技术领域。包括彼此独立的试剂R1和试剂R2，其成分为：试剂R1：咪唑醋酸；D‑葡萄糖；醋酸镁L；己糖激酶；N‑乙酰半胱氨酸；二磷酸腺苷(ADP)；氧化型辅酶Ⅱ(NADP+)；叠氮钠；乙二胺四乙酸(EDTA)；葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶；腺苷5’‑一磷酸双钠盐(AMP)；二腺苷五磷酸盐(P1P5‑diAP)；试剂R2：磷酸肌酸；叠氮钠；抗人CK‑M抗体。本发明在实施过程中控制各组分之间的浓度比在本发明公开的范围内时试剂盒的稳定性、准确性和精密性都明显提高，并且操作简单、制备成本低，适宜于推广使用。

Description

一种肌酸激酶同工酶测定试剂盒
技术领域
本发明涉及生物检测技术领域，具体涉及一种肌酸激酶同工酶测定试剂盒。
背景技术
肌酸激酶(Creatine Kinase，CK)是细胞能量代谢的关键酶，其活性测定是临床骨骼肌疾病、心肌疾病的诊断依据。CK由M、B亚基组成，有三种亚基(同工酶)组合CK-MM、CK-MB、CK-BB，肌肉型(MM)主要存在于各种肌肉细胞中，脑型(BB)主要存在于脑细胞中，杂化型(MB)主要存在于心肌细胞中，肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)是心肌酶谱中最有特异性的酶。
肌酸激酶的同工酶在临床诊断中有十分重要的意义，在各种病变包括肌肉萎缩和心肌梗塞发生时，人的血清中肌酸激酶水平迅速提高，认为在心肌梗塞的诊断中测定肌酸激酶的活性比做心电图更为可靠。心肌梗死时，肌酸激酶在起病6小时内升高，24小时达高峰，3-4日内恢复正常。其中肌酸激酶的同工酶CK-MB诊断的特异性最高。肌酸激酶因其具有重要的生理功能和临床应用价值已引起人们广泛的重视和深入的研究。
临床上用于检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)的方法有免疫比浊法、酶联免疫吸附法和免疫抑制法等。酶联免疫吸附法检测耗时且操作复杂，不适用于大批量快速检测。胶乳增强免疫比浊法反应后会产生胶乳颗粒物的沉淀，不利于仪器的清洗，且检测精度差。
目前，常规的CK-MB的测定主要采用的是免疫抑制法，它测定的是CK-MB的活力。CK-BB在正常人体内的含量微乎其微，因此该法忽略CK-BB的存在，假设血清中只有CK-MM和CK-MB。在试剂中加入抗CK-M亚单位的多克隆抗体，从而抑制CK-MM和CK-MB中M亚单位活性，测得结果相当于CK-MB中B亚单位活性，将结果乘以2即相当于CK-MB活力。此方法迅速、简洁、省时、有较高的敏感性，但是在检测过程中影响因素较多，因此如何对试剂盒进行改进从而更好的发挥此方法的便捷性，成为研究的重要方向。
中国专利申请201610359612.9中公开了一种测定肌酸激酶同工酶(CK-MB)的试剂盒。该发明针对现有技术中检测肌酸激酶同工酶存在过程复杂、不适用于大批量快速检测的问题，提出以下的解决方案：一种测定肌酸激酶同工酶(CK-MB)的试剂盒，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，其中试剂R1含有缓冲液20-180mmol/L、葡萄糖10-60mmol/L、ADP 0.1-4.0mmol/L、NADP 1-7mmol/L、NAC 5-35mmol/L、HK 0.01-4.00KU/L、G-6-PD0.01-3.00KU/L、其余为纯化水；其中试剂R2包含缓冲液20-180mmol/L、CrP 10-50mmol/L、防腐剂0.01-1.0g/L、抗CK-M抗体>2100U/L、其余为纯化水。该发明具有准确度高、操作方便等优点，该试剂盒中所含试剂种类较多，因此会导致试剂盒稳定性较差，试剂盒的稳定性是评价试剂盒的重要性能之一，而本发明并没有对试剂盒的稳定性进行研究。
中国专利申请201811323078.1中公开了一种肌酸激酶及其同工酶测定试剂及其试剂盒，肌酸激酶及其同工酶测定试剂含有离子液体1-乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐，用于CK或者CK同工酶测定的试剂盒由离子液体1-乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐、活化剂、螯合剂、防腐剂、缓冲液及CK或者CK同工酶活性测定试剂组成。该发明可用于全自动生化分析仪检测，操作简便，可在CK及其同工酶测定试剂长期保存后仍保证试剂测定的准确性，可显著延长试剂使用期限，但是由于离子液体的存在会使检测试剂盒中存在多种离子，因此会在一定程度上影响检测的精密性。
因此，开发一种准确度高、精密度好、稳定性强的肌酸激酶同工酶测定试剂盒，成为本领域研究的重中之重，本发明在实施过程中意外地发现控制试剂盒中各组分之间的质量比可以在不减弱试剂盒检测准确性以及试剂稳定性的前提下，提高了检测的精密性。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是在不减弱试剂盒检测准确性以及试剂稳定性的前提下，提高了检测的精密性，因此提供了一种准确度高、精密度好、稳定性强的肌酸激酶同工酶测定试剂盒。
本发明解决上述技术问题提供的技术方案是：本发明公开了一种肌酸激酶同工酶测定试剂盒，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2，其的成分及相应含量为：
试剂R1：
优选地，所述的肌酸激酶同工酶测定试剂盒，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2，其成分及相应含量为：
试剂R1：
试剂R2：
磷酸肌酸 25-40mmol/L；
叠氮钠 0.8-1g/L；
抗人CK-M抗体 1500-2000μg/L。
再优选地，所述的肌酸激酶同工酶测定试剂盒，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2，其成分及相应含量为：
试剂R2：
磷酸肌酸 30-40mmol/L；
叠氮钠 0.9-1g/L；
抗人CK-M抗体 1600-1800μg/L。
本发明在实施过程中意外地发现控制试剂盒中各组分之间的质量比可以在不减弱试剂盒检测准确性以及试剂稳定性的前提下，提高了检测的精密性，本发明提供的试剂盒不需要添加其他稳定剂，从而在一定程度上消除了添加的组分对试剂盒稳定性的影响。
其中，所述的己糖激酶与葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的浓度比为1-3：1，优选为1-2：1，再优选为2：1。
所述的N-乙酰半胱氨酸与腺苷5’-一磷酸双钠盐的浓度比为2-14：1，优选为4-10：1；再优选为4-6：1，再优选为5：1。
所述的醋酸镁和乙二胺四乙酸的浓度比为1-5：1；优选为1-3：1，再优选为3：1。
优选地，所述的肌酸激酶同工酶测定试剂盒，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2，其成分及相应含量为：
试剂R1：
试剂R2：
磷酸肌酸 35mmol/L；
叠氮钠 1g/L；
抗人CK-M抗体 1800μg/L。
另一方面，本发明还提供了上述肌酸激酶同工酶测定试剂盒的使用方法：
本试剂盒适用于杜邦AR、日立7080/7170/7600/7180、迈瑞BS320、迪瑞CS600、雅培C8000/16000、东芝TBA40FR/2000FR/FX8、奥林巴斯AU2700、贝克曼AU5800/DXC800、西门子ADVIA2400、罗氏C501/701/702、罗氏P800等全自动生化分析仪。
该测定试剂盒的测定方法为速率法，反应方向为升反应
(1)将200μL试剂R1和10μL待测样本混合均匀，37℃孵育5min后得到反应液1，测定吸光度A1，测定主波长为340nm、次波长为546nm；
(2)加入50μL试剂R2混合均匀，反应2min，得到反应液2，测定吸光度A2，测定主波长为340nm、次波长为546nm；
(3)按照步骤(1)-(2)，对不同浓度的肌酸激酶同工酶标准品的吸光度进行测定，得到吸光度A空白和A标准；
(4)以标准品的吸光度变化值ΔA(A标准-A空白)为纵坐标，以相应的标准品浓度c为横坐标，绘制标准曲线，得到标准曲线方程；
(5)计算样本的吸光度变化值ΔA(A2-A1)，根据标准曲线方程，得到样本中肌酸激酶同工酶含量。
本发明与现有技术相比，本发明的有益效果有：
(1)本发明在实施过程中控制己糖激酶与葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的浓度比，使得试剂盒的准确性和精密性显著增加；
(2)本发明提供的肌酸激酶同工酶测定试剂盒准确度高，理论浓度与实测浓度的线性相关系数R≧0.9990；
(3)本发明在实施过程中控制各组分之间的浓度比在本发明公开的范围内时试剂盒的稳定性明显提高。
(4)本发明提供的试剂盒灵敏度高，操作简单、制备成本低，适宜于推广使用。
附图说明
图1本发明实施例1与对比例1-4制备的试剂盒在2℃条件下的稳定性检测结果；
图2本发明实施例2与对比例1-4制备的试剂盒在2℃条件下的稳定性检测结果；
图3本发明实施例3与对比例1-4制备的试剂盒在2℃条件下的稳定性检测结果；
图4本发明实施例4与对比例1-4制备的试剂盒在2℃条件下的稳定性检测结果；
图5本发明实施例5与对比例1-4制备的试剂盒在2℃条件下的稳定性检测结果。
具体实施方式
为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施例，进一步阐明本发明，但下述实施例仅仅为本发明的优选实施例，并非全部。基于实施方式中的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得其它实施例，都属于本发明的保护范围。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
测试条件与方法：
仪器：日立7080全自动生化分析仪
参数：
主波长 340nm 样品 10μL
次波长 546nm 试剂1 200μL
反应温度 37℃ 试剂2 50μL
反应方向 反应类型 速率法
操作步骤：
实施例1
本实施例的肌酸激酶同工酶测定试剂盒组分及其浓度如下：
实施例2
本实施例的肌酸激酶同工酶测定试剂盒组分及其浓度如下：
实施例3
本实施例的肌酸激酶同工酶测定试剂盒组分及其浓度如下：
实施例4
本实施例的肌酸激酶同工酶测定试剂盒组分及其浓度如下：
实施例5
本实施例的肌酸激酶同工酶测定试剂盒组分及其浓度如下：
对比例1
与实施例5的区别在于：己糖激酶与葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的浓度比为5：1，即己糖激酶的浓度为5000U/L，葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的浓度为1000U/L。
对比例2
与实施例5的区别在于：己糖激酶与葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的浓度比为0.5：1，即己糖激酶的浓度为1000U/L，葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的浓度为5000U/L。
N-乙酰半胱氨酸与腺苷5’-一磷酸双钠盐的浓度比为1：1；即N-乙酰半胱氨酸的浓度为10mmol/L，腺苷5’-一磷酸双钠盐的浓度为10mmol/L。
对比例3
与实施例5的区别在于：N-乙酰半胱氨酸与腺苷5’-一磷酸双钠盐的浓度比为20：1；即N-乙酰半胱氨酸的浓度为20mmol/L，腺苷5’-一磷酸双钠盐的浓度为1mmol/L。
对比例4
中国专利申请201811323078.1的试剂盒。
试验例1线性关系验证试验
选取肌酸激酶同工酶含量为1000U/L的样本，用生理盐水进行系列稀释，配制6个不同浓度的样本，浓度依次为1000U/L、800U/L、600U/L、400U/L、200U/L、0U/L。分别利用实施例1-5以及对比例1-6试剂进行检测，每个浓度的样本分别测定三次，分别取平均值，检测结果如表1和表2所示。
表1
表2
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如上表1和2所示，实施例1-5检测结果相关系数均大于0.999，且实施例5试剂检测结果的相关系数最高为0.9998，说明本发明制备的试剂盒的线性关系好，准确性高，对比例1-4的检测结果相关系数明显低于实施例，表明改变本发明试剂盒中试剂的浓度比不在本发明公开地范围内时，会明显影响试剂盒检测的准确性，以上数据表明本发明实施例试剂具有更好的线性相关性。
试验例2精密度试验
将实施例1-5以及对比例1-4所制得的肌酸激酶同工酶的测定试剂盒对含量为200U/L的同一待测样本进行的多次反复测定，对所得的结果进行SD和CV的计算，检测数据如表3和表4。
表3
次数 实施例1 实施例2 实施例3 实施例4 实施例5
1 205.2 203.4 197.2 194.2 196.9
2 202.5 207.6 196.4 196.3 198.5
3 197.9 205.5 202.5 202.7 203.0
4 196.2 197.5 205.4 205.9 202.9
5 211.5 196.2 198.4 195.6 196.2
6 205.5 208.0 192.6 197.2 205.9
7 206.2 195.4 192.4 205.4 202.3
8 197.4 205.2 204.1 196.6 194.5
9 196.3 198.4 202.5 204.2 205.5
10 205.5 203.0 196.8 203.0 204.8
SD 5.22 4.75 4.61 4.52 4.17
CV％ 2.28 2.35 2.32 2.26 2.07
表4
次数 对比例1 对比例2 对比例3 对比例4
1 210.4 212.5 193.1 191.2
2 212.2 217.4 191.5 196.3
3 192.6 215.7 212.6 215.7
4 190.1 192.5 215.7 213.2
5 211.3 196.8 198.1 191.5
6 215.5 218.5 190.5 192.7
7 216.1 192.3 188.3 215.2
8 193.9 215.9 214.4 192.8
9 192.5 198.4 212.5 214.7
10 215.6 206.5 193.1 213.0
SD 10.79 12.27 12.81 11.42
CV％ 5.27 5.91 6.34 5.61
由上表3和表4的检测数据可知，本发明实施例1-5所制得的测定肌酸激酶同工酶的试剂盒的精密度明显高于对比例，而且由表3可知，实施例5制备的试剂盒的精密度最高，为最优的选择。
试验例3稳定性试验
在2℃、无腐蚀性气体的避光环境中贮存肌酸激酶同工酶含量为200U/L的样本试剂，检测实施例1-5及对比例1-4试剂的稳定性。每月1号分别用实施例和对比例组的试剂测定同一混合血清样本，测定五次取平均值，检测结果如图1-5所示。
由图1-5可知，随着时间的延长试剂的检测结果会出现一定程度的偏差，但实施例1-5的试剂稳定性明显优于对照组1-4，且实施例5制备的试剂盒的稳定性最好，说明按照本发明实施例试剂盒试剂稳定性明显提高，试剂盒在2℃、无腐蚀性气体的避光环境中存放15个月依然具有很高的稳定性。
试验例4灵敏度试验
对实施例1-5制备的5个试剂盒采用日立7080全自动生化分析仪进行测试,测试结果见表5。
表5
根据上表5的测定结果可知实施例1-5制备的试剂盒具有良好的灵敏度，实施例5制备的试剂盒灵敏度最高为0.95ng/mL。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (6)

1.一种肌酸激酶同工酶测定试剂盒，其特征在于：包括彼此独立的试剂R1和试剂R2，分别由以下相应含量的成分组成：
试剂R1：
试剂R2：
磷酸肌酸20-50mmol/L；
叠氮钠0.5-2g/L；
抗人CK-M抗体1000-3000μg/L；
所述的试剂R1中：
己糖激酶与葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的浓度比为2：1；
N-乙酰半胱氨酸与腺苷5’-一磷酸双钠盐的浓度比为2-14：1；
醋酸镁和乙二胺四乙酸的浓度比为1-5：1。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：包括彼此独立的试剂R1和试剂R2，由以下相应含量的成分组成：
试剂R1：
试剂R2：
磷酸肌酸25-40mmol/L；
叠氮钠0.8-1g/L；
抗人CK-M抗体1500-2000μg/L。
3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：包括彼此独立的试剂R1和试剂R2，由以下相应含量的成分组成：
试剂R2：
磷酸肌酸30-40mmol/L；
叠氮钠0.9-1g/L；
抗人CK-M抗体1600-1800μg/L。
4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述的N-乙酰半胱氨酸与腺苷5’-一磷酸双钠盐的浓度比为5：1。
5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述的醋酸镁和乙二胺四乙酸的浓度比为3：1。
6.根据权利要求1-5任一项所述的试剂盒，其特征在于：所述的肌酸激酶同工酶测定试剂盒，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2，由以下相应含量的成分组成：
试剂R1：
试剂R2：
磷酸肌酸35mmol/L；
叠氮钠1g/L；
抗人CK-M抗体1800μg/L。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
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Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102154443A (zh) * 2011-03-25 2011-08-17 浙江东瓯诊断产品有限公司 一种肌酸激酶mb同工酶活性测定试剂及其制备方法
CN103173519A (zh) * 2011-12-20 2013-06-26 上海复星医药（集团）股份有限公司 酶法检测肌酸激酶试剂盒及其制备方法
CN104374925A (zh) * 2014-11-28 2015-02-25 山东博科生物产业有限公司 一种肌酸激酶同工酶检测试剂
CN107236785A (zh) * 2017-07-19 2017-10-10 王贤俊 一种肌酸激酶检测试剂盒
CN107641642A (zh) * 2017-10-25 2018-01-30 武汉生之源生物科技股份有限公司 一种肌酸激酶同工酶双试剂及其制备方法
CN107957495A (zh) * 2017-11-17 2018-04-24 南通伊仕生物技术股份有限公司 一种ck-mb检测试剂盒及其使用方法
CN108548926A (zh) * 2018-03-22 2018-09-18 北京九强生物技术股份有限公司 一种肌酸激酶同工酶检测试剂盒
CN109517879A (zh) * 2018-11-08 2019-03-26 东软威特曼生物科技(南京)有限公司 一种肌酸激酶及其同工酶测定试剂及其试剂盒
CN109943623A (zh) * 2019-03-28 2019-06-28 曾宪亮 一种肌酸激酶检测试剂盒

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102154443A (zh) * 2011-03-25 2011-08-17 浙江东瓯诊断产品有限公司 一种肌酸激酶mb同工酶活性测定试剂及其制备方法
CN103173519A (zh) * 2011-12-20 2013-06-26 上海复星医药（集团）股份有限公司 酶法检测肌酸激酶试剂盒及其制备方法
CN104374925A (zh) * 2014-11-28 2015-02-25 山东博科生物产业有限公司 一种肌酸激酶同工酶检测试剂
CN107236785A (zh) * 2017-07-19 2017-10-10 王贤俊 一种肌酸激酶检测试剂盒
CN107641642A (zh) * 2017-10-25 2018-01-30 武汉生之源生物科技股份有限公司 一种肌酸激酶同工酶双试剂及其制备方法
CN107957495A (zh) * 2017-11-17 2018-04-24 南通伊仕生物技术股份有限公司 一种ck-mb检测试剂盒及其使用方法
CN108548926A (zh) * 2018-03-22 2018-09-18 北京九强生物技术股份有限公司 一种肌酸激酶同工酶检测试剂盒
CN109517879A (zh) * 2018-11-08 2019-03-26 东软威特曼生物科技(南京)有限公司 一种肌酸激酶及其同工酶测定试剂及其试剂盒
CN109943623A (zh) * 2019-03-28 2019-06-28 曾宪亮 一种肌酸激酶检测试剂盒

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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刘沛 ; .肌酸激酶同工酶CK-MB试剂盒抗干扰性能的评估.中国医药指南.2016,(22),19-23. *

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