CN111004750B - 一种耐高温链霉菌、微生物土壤还原剂及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于土壤还原剂制备技术领域，具体涉及一种微生物土壤还原剂及其制备方法和应用。本发明提供了一种能够改善土壤酸碱度失衡的微生物土壤还原剂及其制备方法和应用，本发明提供的微生物土壤还原剂包括以下体积份的微生物：热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌；所述热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌的有效活菌数量比为5～7：7～9：4～6。本发明提供的微生物土壤还原剂耐高温菌，不仅能够调节土壤养分平衡，改良土壤酸碱度，还可以抑制土传病害，促进作物生长，提高作物品质。

Description

一种耐高温链霉菌、微生物土壤还原剂及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于土壤还原剂技术领域，具体涉及一种耐高温链霉菌、微生物土壤还原剂及其制备方法和应用。
背景技术
近年来，随着人们对蔬菜需求的不断增长，设施农业也得到了快速发展，成为蔬菜供应最主要的方式。但在设施农业发展的过程中也逐渐改变了土壤原有的生态环境，随着复种指数提高，出现了土传病害严重、土壤养分失调、作物品质降低等问题，这些问题极大制约了蔬菜安全发展。
国内外研究表明，目前解决设施农业的土壤出现的问题主要靠化学防治，但化学防治毒性高、残留多，且防效不稳定。
此外，物理防治中的高温闷棚技术也是常用的措施之一，高温闷棚一般在每年夏季6～7月，以塑料薄膜封闭日光温室，利用光照提高温室内温度，从而有效杀灭有害病菌，其效果较为稳定的。但传统高温闷棚所用的时间较长，一般需要一个月左右才能闷棚彻底，因此，常使用一些化学辅助剂进行辅助高温闷棚，使得闷棚时间降低在15～20天左右，但长期采用化学辅助闷棚的方法会导致残留、土壤酸碱度失衡，降低作物品质。
因此，提供一种能够改善土壤酸碱度失衡的微生物土壤还原剂辅助闷棚成为我们的研究方向。
发明内容
本发明的目的在于提供一种能够改善土壤酸碱度失衡的微生物土壤还原剂及其制备方法和应用，本发明提供的微生物土壤还原剂耐高温菌，不仅能够调节土壤养分平衡，改良土壤酸碱度，还可以抑制土传病害，促进作物生长，提高作物品质。
为了实现上述目的，本发明提供了以下技术方案；
本发明提供了一种耐高温链霉菌，其特征在于，所述耐高温链霉菌为热普通链霉菌(Streptomyces thermovulgaris)；
所述热普通链霉菌为热普通链霉菌三炬-11菌株，保藏编号为CCTCCM2015312。
本发明提供了一种微生物土壤还原剂，包括以下微生物：热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌；
所述热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌的有效活菌数量比为5～7：7～9：4～6。
优选的，所述灰略红链霉菌为灰略红链霉菌三炬-09菌株，保藏编号为CGMCC10247；所述枯草芽孢杆菌包括枯草芽孢杆菌三炬-07菌株，保藏编号为CGMCC 10248。
本发明提供了上述的微生物土壤还原剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)将热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌分别接种于活化培养基；
(2)将活化后的热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌分别接种于各自种子培养基中，摇床培养，分别得到热普通链霉菌种子液、灰略红链霉菌种子液和灰略红链霉菌种子液；
(3)将步骤(2)所得热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌的种子液分别接种于液体发酵培养基中发酵，得到发酵液；
(4)将步骤(3)所得热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌的发酵液混合得到微生物土壤还原剂。
优选的，步骤(1)所述活化培养基的类型根据菌的不同进行调整，具体为：
当菌为热普通链霉菌或灰略红链霉菌时，所述培养基为高氏一号培养基；
当菌为枯草芽孢杆菌时，所述培养基为牛肉膏蛋白胨培养基；
所述热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌的培养时间分别为36～48h、36～48h、24～48h。
优选的，步骤(2)所述种子培养基的类型根据菌的不同进行调整，具体为：
当菌为热普通链霉菌或灰略红链霉菌时，所述培养基为不含琼脂的高氏一号培养基；
当菌为枯草芽孢杆菌时，所述培养基为不含琼脂的牛肉膏蛋白胨培养基；
所述摇床培养的条件为37～45℃、150～200rpm。
优选的，步骤(3)中不同种子液与液体培养基的体积比独立地为5～10：100；
所述液体发酵培养基由包括以下含量的组分组成：
热普通链霉菌和灰略红链霉菌液体发酵培养基：玉米粉25～35g/L、熟黄豆饼粉5～10g/L、甘油10～15g/L、麸皮浸液25～40g/L、NaNO31.0～1.5g/L、CaCO31.5～3.0g/L、K2HPO42.5～3.0g/L、MgSO40.3～0.5g/L、FeSO4·7H2O0.05～0.1g/L；
枯草芽孢杆菌液体发酵培养基：淀粉25～30g/L，蔗糖4～8g/L，豆粉12～17g/L，磷酸氢二钾2.0～3.0g/L，硫酸锰0.1～0.5g/L，酵母膏0.8～1.5g/L；
所述发酵的条件为37～45℃、150～200rpm；发酵时间为48～72h。
优选的，步骤(4)所述混合中热普通链霉菌发酵液、灰略红链霉菌发酵液和枯草芽孢杆菌发酵液的体积比为5～7：7～9：4～6。
本发明还提供了上述的微生物土壤还原剂或上述制备方法制备的得到的微生物土壤还原剂在土壤调节中的应用
本发明提供了一株热普通链霉菌(Streptomyces thermovulgaris)三炬-11，保藏编号为CCTCC M2015312；本发明提供的微生物菌株为耐高温菌，在高温闷棚条件下，仍有腐熟作用，可以有效预防作物病害，提高作物品质。
本发明提供的微生物土壤还原剂同时使用的三种特定种微生物无毒无害无残留，与常规的化学辅助剂相比安全环保；而三种菌配合使用，具有调节氢离子和氧离子的机能，能够自动中和土壤的酸碱值，且其产生的酶能够使得土壤pH达到平衡。实施例的结果表明，本发明提供的微生物土壤还原剂耐高温菌，不仅能够调节土壤养分平衡，改良土壤酸碱度，还可以抑制土传病害，促进作物生长，提高作物品质。
生物保藏说明
热普通链霉菌(Streptomyces thermovulgaris)三炬-11，保藏地点为中国典型培养物保藏中心，具体地址为中国武汉武汉大学，保藏时间为2015年5月18日，保藏编号为CCTCC NO.M2015312。
灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens)三炬-09，保藏地点为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，具体地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏时间为2014年12月29日，保藏编号为CGMCC NO.10247。
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)三炬-07，保藏地点为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，具体地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏时间为2014年12月29日，保藏编号为CGMCC NO.10248。
具体实施方式
本发明提供了一株热普通链霉菌(Streptomyces thermovulgaris)三炬-11；所述热普通链霉菌三炬-11的保藏编号为CCTCC M2015312。本发明提供的热普通链霉菌三炬-11具有优异的耐高温性。
本发明提供了一种微生物土壤还原剂，包括以下微生物：热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌；
所述热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌的有效活菌数量比为5～7：7～9：4～6。
以数量份计，本发明提供的微生物土壤还原剂包括5～7份热普通链霉菌，优选为6～7份；所述热普通链霉菌优选包括前述的热普通链霉菌三炬-11。
以数量份计，本发明提供的微生物还原剂包括7～9份灰略红链霉菌，优选为7～8份；所述灰略红链霉菌优选包括灰略红链霉菌三炬-09，保藏编号为CGMCC 10247。本发明所述灰略红链霉菌三炬-09可购自中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。
以数量份计，本发明提供的微生物还原剂包括4～6份枯草芽孢杆菌，优选为5～6份；所述枯草芽孢杆菌优选包括枯草芽孢杆菌三炬-07，保藏编号为CGMCC 10248。本发明所述枯草芽孢杆菌三炬-07可购自中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。本发明提供的微生物土壤还原剂中的微生物菌株均为耐高温菌，在高温闷棚条件下，仍有腐熟作用，可以有效预防作物病害，提高作物品质，所用的三种微生物无毒无害无残留、安全环保；且三种菌均具有调节氢离子和氧离子的机能，能够自动中和土壤的酸碱值，且其产生的酶能够使得土壤pH达到平衡。热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌联合使用能够缩短闷棚时间、提高抑菌效果和提高抑菌率。
本发明提供了上述技术方案所述的微生物土壤还原剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌分别接种于活化培养基培养；(2)将活化的热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌，分别接种于各自种子培养基中，摇床培养，分别得到热普通链霉菌种子液、灰略红链霉菌种子液和灰略红链霉菌种子液；(3)将步骤(2)所得热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌的种子液分别接种于液体发酵培养基中，发酵，得到发酵液；(4)将步骤(3)所得热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌的发酵液混合得到微生物土壤还原剂。
本发明将热普通链霉菌接种于活化培养基培养。在本发明中，所述热普通链霉菌的活化培养基优选为高氏一号培养基，所述高氏一号培养基优选包括：可溶性淀粉20g/L、氯化钠0.5g/L、硝酸钾1g/L、磷酸氢二钾0.5g/L、硫酸镁0.5g/L、硫酸亚铁0.01g/L、琼脂粉20g/L、蒸馏水1L，高氏一号培养基的pH优选为7.2～7.4。所述热普通链霉菌的培养时间优选为36～48h，最优选为48h。热普通链霉菌活化培养基的作用是活化热普通链霉菌，提高热普通链霉菌的活性。
本发明将灰略红链霉菌接种于活化培养基培养。在本发明中，所述灰略红链霉菌的活化培养基优选为高氏一号培养基，具体组成与前文一致，在此不再赘述。所述灰略红链霉菌的培养时间优选为36～48h，最优选为48h。
本发明将枯草芽孢杆菌接种于活化培养基培养。在本发明中，所述枯草芽孢杆菌的培养基优选为牛肉膏蛋白胨培养基，所述牛肉膏蛋白胨培养基优选包括：蛋白胨10g/L、牛肉膏3g/L、氯化钠5g/L、琼脂粉20g/L、蒸馏水1L，牛肉膏蛋白胨培养基的pH优选为7.4～7.6。所述枯草芽孢杆菌的培养时间优选为24～48h，最优选为36h。枯草芽孢杆菌活化培养基的作用是活化枯草芽孢杆菌，提高枯草芽孢杆菌的活性。
本发明对活化培养基原料的来源并没有特殊限定，利用本领域的常规市售产品即可。
本发明将菌株接种于活化培养基培养，使得菌株活化，本发明对所述接种的方法并没有特殊限定，利用本领域的常规接种方法即可。
本发明将活化后的热普通链霉菌接种于种子培养基中。在本发明中，所述热普通链霉菌的种子培养基优选为不含琼脂的高氏一号培养基；摇床培养的条件为37～45℃、150～200rpm。
本发明将活化后的灰略红链霉菌接种于种子培养基中。在本发明中，所述热普通链霉菌的种子培养基优选为不含琼脂的高氏一号培养基；摇床培养的条件为37～45℃、150～200rpm。
本发明将活化后的枯草芽孢杆菌接种于种子培养基中。在本发明中，所述枯草芽孢杆菌的种子培养基优选为不含琼脂的牛肉膏蛋白胨培养基；摇床培养的条件为37～45℃、150～200rpm。
分别得到热普通链霉菌种子液、灰略红链霉菌种子液和灰略红链霉菌种子液。
得到热普通链霉菌种子液、灰略红链霉菌种子液和灰略红链霉菌种子液后，本发明将热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌的种子液分别接种于液体发酵培养基中发酵，得到发酵液。
本发明将热普通链霉菌种子液接种于液体发酵培养基中，发酵，得到热普通链霉菌发酵液。在本发明中，所述接种的量优选为种子液与液体培养基的体积比独立地优选为5～10：100，最优选为8：100；所述液体发酵培养基优选由包括以下含量的组分组成：玉米粉25～35g/L、熟黄豆饼粉5～10g/L、甘油10～15g/L、麸皮浸液25～40g/L、NaNO31.0～1.5g/L、CaCO31.5～3.0g/L、K2HPO42.5～3.0g/L、MgSO40.3～0.5g/L、FeSO4·7H2O 0.05～0.1g/L，进一步优选包括：玉米粉28～32g/L、熟黄豆饼粉7～8g/L、甘油12～13g/L、麸皮浸液30～35g/L、NaNO31.2～1.4g/L、CaCO32～2.5g/L、K2HPO42.7～2.8g/L、MgSO40.4g/L、FeSO4·7H2O0.07～0.08g/L。所述发酵的条件优选为37～45℃、150～200rpm，进一步优选为40℃、150rpm；发酵时间优选为48～72h，进一步优选为72h。热普通链霉菌液体发酵培养基的组分不仅能够满足热普通链霉菌的生长，还能为土壤提供作物所需的氮、磷、钾、有机质等营养物质。
本发明将灰略红链霉菌种子液接种于液体发酵培养基中，发酵，得到灰略红链霉菌发酵液。在本发明中，用于接种灰略红链霉菌种子液的液体发酵培养基与前文所述用于接种热普通链霉菌种子液的液体培养基的组成范围一致，在此不再赘述。所述发酵的条件优选为37～45℃、150～200rpm，进一步优选为40℃、150rpm；发酵时间优选为48～72h，进一步优选为72h。
本发明将枯草芽孢杆菌种子液接种于液体发酵培养基中，发酵，得到枯草芽孢杆菌发酵液。在本发明中，用于接种枯草芽孢杆菌种子液的发酵培养基优选包括：淀粉25～30g/L，蔗糖4～8g/L，豆粉12～17g/L，磷酸氢二钾2.0～3.0g/L，硫酸锰0.1～0.5g/L，酵母膏0.8～1.5g/L，进一步优选包括：淀粉27～28g/L，蔗糖5～7g/L，豆粉14～15g/L，磷酸氢二钾2.4～2.6g/L，硫酸锰0.2～0.4g/L，酵母膏1.0～1.3g/L。所述发酵的条件优选为37～45℃、150～200rpm，进一步优选为40℃、150rpm；发酵时间优选为48～72h，进一步优选为72h。枯草芽孢杆菌的发酵培养基的组分不仅能够满足枯草芽孢杆菌的生长，还能为土壤提供作物所需的氮、磷、钾、有机质等营养物质。
得到热普通链霉菌发酵液、灰略红链霉菌发酵液和枯草芽孢杆菌发酵液后，本发明将所述热普通链霉菌发酵液、灰略红链霉菌发酵液和枯草芽孢杆菌发酵液混合得到微生物土壤还原剂。在本发明中，所述混合中热普通链霉菌发酵液、灰略红链霉菌发酵液和枯草芽孢杆菌发酵液的体积比优选为5～7：7～9：4～6，进一步优选为6～7：7～8：5～6，最优选为6：8：5。
本发明还提供了上述微生物土壤还原剂在土壤调节中的应用。在本发明中，所述微生物土壤还原剂能够适用于40～70℃温度的土壤条件，能够用于闷棚过程中土壤的调节，有效预防作物病害，提高作物品质。
本发明对微生物土壤还原剂的使用方法没有特殊限制，利用本领域的常规土壤还原剂的使用方法即可。
下面结合实施例对本发明提供的一种微生物土壤还原剂及其制备方法和应用进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
(1)菌种活化：将热普通链霉菌三炬-11和灰略红链霉菌三炬-09分别接种于高氏一号培养基，枯草芽孢杆菌三炬-07接种于牛肉膏蛋白胨培养基进行活化。
(2)种子液制备：将活化的热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌与各自的种子液培养基分别按体积比为10％、10％、10％的比例接种于各自活化培养基中，40℃、150rpm摇床下培养，热普通链霉菌和灰略红链霉菌培养48h，枯草芽孢杆菌培养36小时，分别得到热普通链霉菌种子液、灰略红链霉菌种子液和灰略红链霉菌种子液。
(3)液体发酵扩培：将种子发酵液按体积百分含量为8％的接种量接种于液体发酵培养基中。
接种热普通链霉菌和灰略红链霉菌的液体发酵培养基(g/L)：玉米粉30、熟黄豆饼粉10、甘油10、麸皮浸液40、NaNO31.0、CaCO33.0、K2HPO43.0、MgSO40.3、FeSO4·7H2O 0.05；
接种枯草芽孢杆菌的液体发酵培养基(g/L)：淀粉30g，蔗糖5g，豆粉15g，磷酸氢二钾2.5g，硫酸锰0.2g，酵母膏1g。各菌株分别于40℃、150rpm条件下发酵96h。
(4)菌液混合：热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌的发酵液按热普通链霉菌32份、灰略红链霉菌42份和枯草芽孢杆菌26份的体积混合得到微生物土壤还原剂。
实施例2
试验设计：试验设9个棚，每3个作为1个处理，共分为3个处理，采用随机区组排列，四周设保护行。
处理A空白对照；
处理B常规灌水高温闷棚；
处理C高温闷棚+按实施例1的制备方法制备的微生物土壤还原剂；
施肥管理：于2017年7月20日进行闷棚处理，处理A不做任何处理；处理B进行常规灌水闷棚；处理C为按照2L/666.7m2用量施用实施例1所得微生物土壤还原剂，稀释400倍后进行喷施。闷棚15天后种植黄瓜，待黄瓜成熟时，检测发病率、及生长情况。采用失重法测定闷棚期间的秸秆腐熟效果，取样时间为10d、20d和30d。
试验结果：
(1)不同处理在黄瓜抗病增质上的使用效果如表1所示，从表1可以看出，喷施实施例1的微生物土壤还原剂后进行高温闷棚的防病效果优于常规灌水高温闷棚，实施例1的微生物土壤还原剂能够提高作物品质。
表1不同处理在黄瓜抗病增质上的使用效果
检测项 处理A 处理B 处理C
得病率/％ 47.2 23.8 16.8
平均单瓜质量/g 76.3 106.0 113.2
平均瓜长/cm 29.8 30.9 32.1
基部茎粗/cm 0.6 0.7 0.8
(2)不同处理对棚内秸秆腐熟效果的影响如表2所示，从表2的试验结果看，添加微生物土壤还原剂比常规闷棚方法的腐熟效果好，说明微生物土壤还原剂具有促进腐熟，提高闷棚效率的效果。
表2不同处理对棚内秸秆腐熟效果的影响
取样时间 处理A 处理B 处理C
10d 4.7％ 16.4％ 21.7％
20d 14.3％ 24.6％ 34.2％
30d 23.7％ 47.1％ 59.6％
实施例3
试验设计：试验设12个大棚，每3个作为1个处理，共分为4个处理，采用随机区组排列，四周设保护行。
处理A 空白对照
处理B 常规灌水高温闷棚
处理C 高温闷棚+生石灰
处理D 高温闷棚+按实施例1的制备方法制备的微生物土壤还原剂施肥管理：于2018年7月20日进行闷棚处理，处理A不做任何处理；处理B按常规高温闷棚进行灌水高温闷棚；处理C按100kg/666.7m2的使用量添加生石灰后，进行高温闷棚；处理D为按照2L/666.7m2的用量将实施例1所得微生物土壤还原剂，稀释400倍后进行喷施。闷棚20天后，检测土壤中氮、磷、钾等养分和土壤EC值。不同处理对土壤状况的影响的试验结果如表3所示，从试验结果可以看出，使用实施例1中的微生物土壤还原剂可以调节土壤pH值，改良土壤酸碱度；使用实施例1中的微生物土壤还原剂对土壤EC值的变化与其它处理无明显差异。但在氮磷钾总养分上具有显著提高的作用，原因是将有益微生物施入土壤中，其代谢产物中含有作物所需的养分。
表3不同处理对土壤状况的影响
检测项 处理A 处理B 处理C 处理D
全氮/g/kg 0.68A 0.70A 0.76B 0.94C
速效磷/mg/kg 55A 64B 66B 76C
速效钾/mg/kg 131A 145B 147B 159C
EC值/μs/cm 280A 285A 293A 295A
pH 5.2 5.5 6.0 6.8
注：每列数据后大写字母代表差异显著性(P<0.01)
实施例4
试验选择福建省漳州市华安县的菜地，于8月10日进行高温闷棚。
处理一：高温闷棚期间同时辅以喷洒市售还原剂产品(有益活菌≥80亿/mL)；
处理二：高温闷棚期间同时辅以喷洒实施例1产品(有益活菌≥10亿/mL)。
使用量均为2L/666.7m2，使用前进行400倍稀释。闷棚温度最高温度达到78℃。通过土壤的外观及棚内秸秆腐熟情况判断是否闷棚完全。记录腐熟时间及腐熟完成后的微生物数量。
施用肥料前，通过五点取样法采取土样，检测放线菌、细菌和真菌的数量，分别为9.1×107CFU/g、5.6×107CFU/g、1.9×105CFU/g。闷棚完成后，分别测放线菌、细菌和真菌数量，记录后进行对比。以热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌为益生菌检测对象，按照农业部的检测微生物菌剂标准GB20287-2006检测。
试验结果如表4所示，从表4可以看出，使用本发明实施例1产品进行闷棚，闷棚时间比市售产品缩短了4天，市售产品闷棚后土壤中的真菌数量高于本发明产品，本发明实施例1产品闷棚后土壤中的细菌和放线菌的数量均高于市售产品，其中土壤中的有益微生物约占总微生物数量的78％。使用市售产品的土壤中有益微生物约占土壤总微生物数量的14％，说明本发明产品与市售还原剂相比，具有缩短闷棚时间和降低土壤中病菌的特点，其次产品中的有益微生物还具有耐高温的特点。
表4不同生物土壤还原剂的闷棚效果
产品 完成闷棚时间/d 放线菌CFU/g 细菌CFU/g 真菌CFU/g
市售产品 19 3.2×10<sup>6</sup> 2.1×10<sup>6</sup> 2.5×10<sup>4</sup>
本发明 15 8.3×10<sup>5</sup> 7.8×10<sup>5</sup> 3.7×10<sup>3</sup>
综上，本发明提供了一种能够提高作物品质的微生物土壤还原剂及其制备方法和应用，本发明提供的微生物土壤还原剂耐高温菌，不仅能够调节土壤养分平衡，改良土壤酸碱度，还可以抑制土传病害，促进作物生长，提高作物品质。
尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述，但它仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部实施例，人们还可以根据本实施例在不经创造性前提下获得其他实施例，这些实施例都属于本发明保护范围。

Claims (8)

1.一株热普通链霉菌(Streptomyces thermovulgaris)三炬-11，其特征在于，所述热普通链霉菌(Streptomyces thermovulgaris)三炬-11保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO.M2015312。
2.一种微生物土壤还原剂，其特征在于，由以下微生物组成：权利要求1所述热普通链霉菌三炬-11、灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens)和枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)；
所述权利要求1所述热普通链霉菌三炬-11、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌的有效活菌数量比为5～7：7～9：4～6；
所述灰略红链霉菌为灰略红链霉菌三炬-09，保藏编号为CGMCC NO.10247；
所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌三炬-07，保藏编号为CGMCC NO.10248。
3.权利要求2所述的微生物土壤还原剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌分别接种于活化培养基；
(2)将活化后的热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌分别接种于各自种子培养基中，摇床培养，分别得到热普通链霉菌种子液、灰略红链霉菌种子液和灰略红链霉菌种子液；
(3)将步骤(2)所得热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌的种子液分别接种于液体发酵培养基中发酵，得到发酵液；
(4)将步骤(3)所得热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌的发酵液混合得到微生物土壤还原剂。
4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述活化培养基的类型根据菌的不同进行调整，具体为：
当菌为热普通链霉菌或灰略红链霉菌时，所述培养基为高氏一号培养基；
当菌为枯草芽孢杆菌时，所述培养基为牛肉膏蛋白胨培养基；
所述热普通链霉菌、灰略红链霉菌和枯草芽孢杆菌的培养时间分别为36～48h、36～48h、24～48h；
所述高氏一号培养基包括：可溶性淀粉20g/L、氯化钠0.5g/L、硝酸钾1g/L、磷酸氢二钾0.5g/L、硫酸镁0.5g/L、硫酸亚铁0.01g/L、琼脂粉20g/L、蒸馏水1L，高氏一号培养基的pH为7.2～7.4；
所述牛肉膏蛋白胨培养基包括：蛋白胨10g/L、牛肉膏3g/L、氯化钠5g/L、琼脂粉20g/L、蒸馏水1L，牛肉膏蛋白胨培养基的pH为7.4～7.6。
5.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述种子培养基的类型根据菌的不同进行调整，具体为：
当菌为热普通链霉菌或灰略红链霉菌时，所述培养基为不含琼脂的高氏一号培养基；
当菌为枯草芽孢杆菌时，所述培养基为不含琼脂的牛肉膏蛋白胨培养基；
所述摇床培养的条件为37～45℃、150～200rpm。
6.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中不同种子液与液体培养基的体积比独立地为5～10：100；
所述液体发酵培养基由包括以下含量的组分组成：
热普通链霉菌和灰略红链霉菌液体发酵培养基：玉米粉25～35g/L、熟黄豆饼粉5～10g/L、甘油10～15g/L、麸皮浸液25～40g/L、NaNO31.0～1.5g/L、CaCO31.5～3.0g/L、K2HPO42.5～3.0g/L、MgSO40.3～0.5g/L、FeSO4·7H2O 0.05～0.1g/L；
枯草芽孢杆菌液体发酵培养基：淀粉25～30g/L，蔗糖4～8g/L，豆粉12～17g/L，磷酸氢二钾2.0～3.0g/L，硫酸锰0.1～0.5g/L，酵母膏0.8～1.5g/L；
所述发酵的条件为37～45℃、150～200rpm；发酵时间为48～72h。
7.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)所述混合中热普通链霉菌发酵液、灰略红链霉菌发酵液和枯草芽孢杆菌发酵液的体积比为5～7：7～9：4～6。
8.权利要求2所述的微生物土壤还原剂或权利要求3～7任一项所述制备方法制备的得到的微生物土壤还原剂在土壤调节中的应用。
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