CN111000794B - 一种白及多糖/生物玻璃温敏凝胶剂及其制备方法和应用 - Google Patents

一种白及多糖/生物玻璃温敏凝胶剂及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种白及多糖/生物玻璃温敏凝胶剂及其制备方法和应用。该凝胶制剂的原料配方由主药白及多糖和生物活性玻璃、温敏凝胶基质泊洛沙姆、稳定剂甘油、皮肤吸收促进剂DMSO、防腐剂羟苯乙酯和注射用水组成。本发明将白及多糖/生物玻璃与温敏型原位凝胶结合应用于糖尿病足溃疡的治疗。该凝胶在体外呈现液体状态，给药到溃疡创面后迅速凝胶变为凝胶状半固体，使药物能够长时间滞留在溃疡表面，改善创面特殊的病理环境，同时结合白及多糖和生物活性玻璃的修复作用，达到愈合创面的目的。

Description

一种白及多糖/生物玻璃温敏凝胶剂及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种白及多糖/生物玻璃温敏凝胶剂及其制备方法和应用。
背景技术
糖尿病可导致不同系统的严重并发症，15％-25％的糖尿病患者最终发展为慢性非治愈性糖尿病足溃疡(diabetic foot ulcers，DFUs)。DFUs分为缺血型、神经型和混合型，是由于患者足部的神经病变、微血管和大血管病变导致患者下肢动脉灌注降低，足部微循环障碍而引起溃疡和坏疽状态，是糖尿病最常见的并发症之一，主要表现为患者下肢的麻木、发凉、感觉异常、溃疡和坏疽形成，溃疡经久难愈，易发感染。一旦形成DFUs，伤口恶化的风险进一步增加，其下肢截肢风险要较正常人高出40倍，据统计，超过85％的截肢由DFUs引起，DFUs对患者的生活质量造成极大影响，甚至危及生命，给患者家庭和公共医疗卫生事业造成沉重的负担。
临床治疗DFUs面临如下问题：①清创术(如自溶清创、机械清创、蛆虫生物清创)能清除坏死、感染组织并刺激新生肉芽组织生长，但清创术各有优缺点，临床医师不易掌握其适应和禁忌症。②血管介入治疗可使糖尿病足下肢血管的血流灌注得到有效改善，但介入治疗也存在血管内膜增生、血栓形成而再度狭窄闭塞的问题。③干细胞移植术可再生糖尿病足患者缺血患肢的血管，改善患肢血供、促进溃疡创面愈合，国外已初具疗效，但国内开展的较少。④有学者提出了“五环疗法”：即控制血糖、活血、消炎、换药、对症支持治疗。目前大多数研究集中在利用生物活性物质(抗菌剂、蛋白质药物、活细胞等)来促进糖尿病创面愈合，已开发的治疗产品，很少考虑到糖尿病创面特殊的病理环境，治疗效果仍然欠佳。
因此，寻找适宜的产品及剂型，使药物能够长时间滞留在溃疡部位，以改变糖尿病足溃疡创面特殊的病理环境，提高生长因子在DFUs患者创面区域的表达或活性，是治疗糖尿病足溃疡面临的主要问题。
发明内容
为解决上述技术问题，本发明提供一种白及多糖/生物玻璃温敏凝胶剂，将白及多糖/生物玻璃与温敏型原位凝胶结合应用于糖尿病足溃疡的治疗。该凝胶在体外呈现液体状态，给药到溃疡创面后迅速将凝胶变为凝胶状半固体，使药物能够长时间滞留在溃疡表面，改善创面特殊的病理环境，同时结合白及多糖和生物活性玻璃的修复作用，达到愈合创面的目的。
本发明的技术方案之一，一种白及多糖/生物玻璃温敏凝胶剂，胶凝温度为32±2℃；以质量百分比计，其原料成分包括：白及多糖4.0-7.0％，生物活性玻璃0.5％，温敏凝胶基质19-28％，稳定剂0.5-5％，皮肤吸收促进剂0.1％、防腐剂0.01％，注射用水余量。
优选的，所述温敏型凝胶基质选择泊洛沙姆、壳聚糖、聚N-异丙基丙烯酰胺中的一种或任意组合。
优选的，所述泊洛沙姆为由泊洛沙姆407和泊洛沙姆188组成；其中，以质量百分比计，泊洛沙姆407所占的质量百分比为18-24％，泊洛沙姆188所占的质量百分比为1-4％。
优选的，所述稳定剂为甘油，皮肤吸收促进为DMSO，防腐剂为羟苯乙酯，注射用水为纯化水、生理盐水、pH为3～8的缓冲溶液中的一种或任意组合。
优选的，所述白及多糖的制备方法，其包括如下步骤：将白及块茎粉碎，过筛，加入蒸馏水搅拌均匀，放置过夜，超声提取后水浴加热，取溶液下层沉淀加水，再次于水浴加热，合并两次溶液，离心，收集上清液，抽滤，上清液减压浓缩，醇沉两次，合并滤渣，烘干后溶于水，微孔滤膜过滤，滤液浓缩冷冻干燥，得白及多糖。
优选的，所述白及多糖的制备方法，具体包括如下步骤：将干燥白及块茎粉碎，过筛，加入蒸馏水搅拌均匀，放置过夜，次日加蒸馏水至物料比为1：20，室温下超声提取30min，平均功率80W，然后直接于70℃水浴加热1.5h，取溶液下层沉淀加水至1000ml，再次于70℃水浴加热1h，合并两次溶液，以4000rpm离心25min，收集上清液，抽滤，将上清液在70℃减压浓缩至原体积1/3成粘稠状约600ml，加入3倍体积的85％乙醇，放置4℃下过夜，次日抽滤，醇沉两次，合并滤渣，于50℃烘箱内烘干，烘干后溶于水，用0.22μm微孔滤膜过滤，将滤液浓缩冷冻干燥，得白及多糖。
本发明的技术方案之二，上述白及多糖/生物玻璃温敏凝胶剂的制备方法，包括如下步骤：
将温敏型凝胶基质，白及多糖与1/3的注射用水混匀，置于冰箱中冷藏放置，完全溶解充分溶胀作为第一混合物；将生物玻璃于稳定剂中研磨均匀，以增加生物玻璃的润湿性，避免沉淀，得第二混合物；将第一混合物，第二混合物和皮肤吸收促进剂、防腐剂与剩余的注射用水混匀，即得到白及多糖/生物玻璃温敏凝胶剂。
优选的，冷藏条件0-4℃，冷藏时间24h。
本发明的技术方案之三，上述的白及多糖/生物玻璃温敏凝胶剂的应用，所述白及多糖/生物玻璃温敏凝胶剂用于糖尿病足溃疡的治疗的药物。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
(1)本发明以白及多糖为主药，加入一定量的生物活性玻璃、稳定剂、皮肤吸收促进剂、防腐剂结合温敏型凝胶基质制备出一种白及多糖/生物玻璃温敏凝胶剂，该凝胶的胶凝温度为32±2℃，在体外呈现液体状态，给药到溃疡创面后迅速凝胶变为凝胶状半固体，使药物能够长时间滞留在溃疡表面，改善创面特殊的病理环境，同时结合白及多糖和生物活性玻璃的修复作用，达到愈合创面的目的。
(2)白及多糖(BSPS)为白及块茎经水提醇沉得到的葡萄糖配甘露聚糖，具有以下药理活性：①促进生长因子的表达及活性和创面愈合。创面愈合修复是各种细胞增殖分化、活动迁移、凋亡消失的过程，涉及止血，炎症，增殖和组织重塑等阶段。一旦表皮和真皮的保护性障碍被破坏，生理伤口愈合过程立即进行。BSPS能够促进人类脐静脉内皮细胞生长，促进血管内皮细胞生长因子的表达，其作用机制与刺激巨噬细胞产生诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、TNF-α、白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA水平增加相关，并且能够增加这些细胞因子的产生。促进表皮生长因子表达，缓和炎症反应，促进伤口愈合。BSPS能剂量依赖性的促进大鼠血管内皮细胞和成纤维细胞的增生，提高创面组织中伤口巨噬细胞的数量，升高羟脯氨酸含量，增强细胞生长因子的活性，使细胞外基质蛋白质的分泌增加，促进创面的愈合。②治疗糖尿病溃疡。BSPS显著促进链脲佐菌素致大鼠糖尿病模型溃疡创面愈合，能够有效刺激炎症细胞浸润，促进上皮组织形成、纤维细胞增殖(FB)以及胶原的合成，增加羟脯氨酸(OHP)的合成和释放，从而促进糖尿病溃疡创面愈合。③治疗烧烫伤。BSPS能明显缩短深Ⅱ度烫伤创面模型大鼠创面愈合时间；用药一周后，大鼠血清中脂多糖、肿瘤坏死因子-α、白介素6水平显著降低，大鼠外周血中Toll样受体4阳性表达率显著降低。④治疗胃肠溃疡。BSPS对冷水应激小鼠胃黏膜损伤、乙醇诱导的小鼠胃黏膜损伤及结扎型大鼠胃黏膜损伤均具有保护作用，能剂量依赖性的抑制大鼠应激性胃溃疡，其抗胃溃疡的机制可能与增强胃粘膜屏障和防御功能、减少攻击因子对胃粘膜损伤、促进溃疡局部胃粘膜上皮细胞增生，加强损伤组织修复有关。BSPS能明显降低无水乙醇致小鼠胃溃疡；BSPS能降低乙酸致大鼠胃溃疡；降低溃疡大鼠血清中MDA含量，提高SOD含量。BSPS对大鼠幽门结扎致急性胃溃疡、乙酸致慢性溃疡及乙醇引起的胃黏膜损伤，都有促进溃疡愈合的作用，其机制可能与调节核转录因子κB(NF-κB)p65蛋白表达有关，也可能与抑制肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和核转录因子κB(NF-κB)，上调白细胞介素-10(IL-10)水平有关。BSPS促进恶唑酮诱导复制溃疡性结肠炎模型小鼠肠黏膜修复、抑制机体炎症和恢复免疫平衡的作用，其作用机制可能与抑制TNF-α和NF-κB，上调IL-10水平有关。⑤止血作用。BSPS是白及凝血的药效物质基础，机制可能为通过升高血小板聚集率、增加纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)含量、降低纤溶酶原激活剂t-PA/PAI-1比值、改善肺和胃组织的病变，综合发挥止血作用。另外，BSPS质地粘稠，黏附在出血创面上与创面融合，产生物理阻塞止血的作用，还可促进血小板聚集，加速止血，止血效果和止血时间与凝血酶相似，对全身凝血机能无影响,无明显不良反应，可作为局部止血药物治疗消化道出血和应激性溃疡出血。⑥抑制细菌生长。BSPS对金黄色葡萄球菌有明显的抗菌作用，用于治疗烧伤，能够减少烧伤出血，同时抑制葡萄球菌生长，可以促进烧伤创面的愈合。BSPS易溶于热水，具有强黏性。无毒副作用，具有良好的生物降解性和生物相容性。
(3)生物活性玻璃是一种与骨组织和软组织均有良好的结合能力的特种玻璃，由Hench教授于1969年研制成功，主要成分包括SiO2、CaO、Na2O和P2O5。生物活性玻璃可显著促进创伤的愈合，其机理为：在体液环境中，材料表面活性大的离子如Na+、Ca2+等首先溶出，与体液中的H+发生离子交换，Si-O-Si化学键断裂，无规则网络被溶解，玻璃表面形成Si-OH，可溶性硅以硅醇形式被放出形成富含SiO2的凝胶层，体液中可溶性Ca2+和PO4 3-被SiO2凝胶层吸附后，经结晶化过程形成羟基磷灰石胶结层。可溶性硅有分子水平结缔组织的代谢作用和结构作用，生物玻璃溶解后，局部Si浓度的升高可促进细胞新陈代谢的细胞内部响应，激发促创伤愈合因子的自分泌反应，参与创伤修复的所有细胞在促创伤愈合因子的自分泌反应，参与创伤修复的所有细胞在促创伤愈合因子的刺激下加速生长和分裂，并聚集于材料表面形成的羟基磷灰石胶结层，使新生组织能在整个创面顺利爬移和覆盖。
(4)本发明所制得的白及多糖/生物玻璃温敏型原位凝胶剂中，甘油为稳定剂，增加制剂的黏度，增加生物活性玻璃的润湿性，防止生物活性玻璃的沉降。
(5)原位凝胶是一类以溶液状态给药后，响应环境的改变，在用药部位发生相转变，形成非化学交联的半固体凝胶制剂。它融合了溶液剂与凝胶剂的优点，还兼具制备工艺简单，使用方便，黏膜组织亲和力强，可作为药物储库延长在给药部位的滞留时间等优点，泊洛沙姆407具有表面活性，能够增加白及多糖的溶解度，其独特的PEO-PPO-PEO三嵌段结构，使其在方便应用的同时延长白及多糖在给药部位的驻留时间，有利于提高生物利用度和疗效。本发明将泊洛沙姆407和泊洛沙姆188作为原位凝胶载体材料，以一定的比例进行复配后与注射用水进行一定比例的混合，使其凝胶温度在32±2℃，使药物能够长时间滞留在溃疡表面，改善创面特殊的病理环境，同时结合白及多糖和生物活性玻璃的修复作用，达到愈合创面的目的从而使药剂在体外呈现液体状态，给药到溃疡创面后在体表温度下迅速凝胶变为凝胶状半固体，使药物能够长时间滞留在溃疡表面，改善创面特殊的病理环境，同时结合白及多糖和生物活性玻璃的修复作用，达到愈合创面的目的。
附图说明
图1为实施例1制备的白及多糖/生物活性玻璃温敏凝胶以及实施例3制备的白及多糖溶液的累积释放图；
图2为葡萄糖对照品标准曲线图；
图3为实施例1所制备的白及多糖/生物活性玻璃温敏凝胶和实施例2、3、4温敏凝胶用于糖尿病大鼠溃疡面愈合情况观察结果图。
具体实施方式
现详细说明本发明的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本发明的限制，而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本发明。另外，对于本发明中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料，但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。
在不背离本发明的范围或精神的情况下，可对本发明说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本发明的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见得的。本申请说明书和实施例仅是示例性的。
关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。
实施例1
(1)白及多糖的制备：将50g干燥白及块茎粉碎，过筛，加入蒸馏水搅拌均匀，放置过夜，次日加蒸馏水至物料比为1：20，室温下超声提取30min，平均功率80W，然后直接于70℃水浴加热1.5h，取溶液下层沉淀加水至1000ml，再次于70℃水浴加热1h，合并两次溶液，以4000rpm离心25min，收集上清液，抽滤，将上清液在70℃减压浓缩至原体积1/3成粘稠状约600ml，加入3倍体积的85％乙醇，放置4℃下过夜，次日抽滤，醇沉两次，合并滤渣，于50℃烘箱内烘干，烘干后溶于水，用0.22μm微孔滤膜过滤，将滤液浓缩冷冻干燥，得白及多糖。
(2)取泊洛沙姆40720g，泊洛沙姆1882g，白及多糖5克均匀分散于60g纯化水表面，充分搅拌后静置于0-4℃冰箱中冷藏放置24h，完全溶解充分溶胀作为第一混合物。
(3)将生物活性玻璃0.5g、甘油3g搅拌溶解，作为第二混合物；
(4)将第二混合物边搅拌边加入第一混合物中，加入DMSO 0.1g、羟苯乙酯0.01g，最后加纯化水至100g，搅匀即得到用于治疗糖尿病足溃疡的温敏凝胶。
实施例2
同实施例1，区别在于未加入白及多糖；
实施例3
同实施例1，区别在于未加入生物活性玻璃；
实施例4
同实施例1，区别在于未加入生物活性玻璃和白及多糖，只加入温敏凝胶基质泊洛沙姆。
效果例1
用8％Na2S溶液脱去小鼠腹部的毛发，24h后将小鼠处死，剥离腹部皮肤，用生理盐水洗净，置生理盐水中，于4℃保存，制备离体皮肤。将离体皮肤固定于改良Franz扩散池的供给室与接收室之间，将实施例1、3制备的产物分别均匀涂布于皮肤表面，接收池加10％乙醇-磷酸盐缓冲液，排净气泡使真皮一侧与接收液完全接触。水浴温度32℃，磁力搅拌速度200r/min。分别于1、3、6、9、12、15、18、24、30h，取出接收介质2mL，同时补加等量的新鲜接收介质。取出的接收介质经0.45μm微孔滤膜滤过后，按照“多糖含量测定”方法测定并计算白及多糖的透皮量，按标准曲线换算浓度并计算释放率。其结果如图1所示，由图1可见，本发明的白及多糖/生物活性玻璃温敏凝胶的释放率明显小于溶液，显示出了明显的缓释效果。本发明的白及多糖/生物玻璃温敏凝胶剂能够实现皮肤给药和长期释药。采用皮肤给药方式，使药物在用药部位发挥很好的缓释作用，并能够防止药物外渗，长时间释药。
多糖含量测定：
标准曲线的绘制
准确称取葡萄糖标准品0.0054g,加水溶解,并定容至50mL,混匀。得0.108mg/ml标准葡萄糖溶液。取8支10ml洁净试管分别加入0.10ml、0.20ml、0.30ml、0.40ml、0.50ml、0.60ml、0.8ml、1.0ml标准葡萄糖溶液,用蒸馏水补至1.00ml,向各试管中加硫酸蒽酮溶液3.00ml，小心充分摇匀后置于100℃沸水中水浴10min,取出试管并冷却至室温。以空白溶液为参比，在620nm波长测定吸光度。以葡萄糖浓度为横坐标，以吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线,见图2。其回归方程为A＝0.38C-0.0103，R2＝0.9992，葡萄糖浓度在0.27-2.7μg/mL范围内，线性关系良好。
多糖含量测定
取洁净试管加入0.50ml接收液,用蒸馏水补至1.00ml,向各试管中加硫酸蒽酮溶液3.00ml，小心充分摇匀后置于100℃沸水中水浴10min,取出试管并冷却至室温。以空白溶液为参比，在620nm波长测定吸光度。并计算白及多糖的透皮量，按标准曲线换算浓度并计算释放率。
应用例1
取健康SD大鼠60只，适应性喂养1周后，禁食14h，通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ，50mg·kg-1)建立糖尿病模型。72h后，随机血糖值大于≥16.7mmol·L-1，即认为造模成功。4周后，进行糖尿病溃疡模型制作：在戊巴比妥钠35mg·kg-1麻醉下剃除背部毛，消毒后用特制致伤器在背部切割4个直径1.8cm的圆形全层皮肤创面，深至皮下，止血后自然暴露，每只大鼠注射5mL林格试液，用于大鼠复苏。糖尿病溃疡模型制造后，创面分别用凝胶基质、生物活性玻璃凝胶、白及多糖凝胶和白及多糖/生物活性玻璃凝胶进行干预，于伤后3，7，14d同一时间点对创面愈合面积、成纤维细胞(FB)增殖情况含量进行观察与检测。给药后糖尿病大鼠创面愈合情况如图3所示。给药后第3d，白及多糖/生物活性玻璃温敏凝胶创面即开始愈合，第7d创面较对照组明显减小；经过14d的治疗，白及多糖/生物活性玻璃温敏凝胶大鼠创面基本愈合，白及多糖温敏凝胶组未完全愈合。对创面FB增殖的影响如表1所示，结果表明，白及多糖/生物活性玻璃温敏凝胶组促进糖尿病溃疡创面成纤维细胞增长，3，7d显著高于白及多糖温敏凝胶组；14d时，白及多糖/生物活性玻璃温敏凝胶组成纤维细胞呈现减少情况。
表1白及多糖/生物活性玻璃温敏凝胶对糖尿病溃疡大鼠创面FB增殖情况影响(x±s，n＝6)
Figure BDA0002329055940000081
Figure BDA0002329055940000091
根据本发明实施例的制备白及多糖/生物玻璃温敏凝胶的方法所得凝胶在冰箱储存冷藏时是液体，在给药到达溃疡表面时，由于P407，P188为温敏材料，温度在达到32℃迅速凝胶变为凝胶状半固体，使药物能够长时间滞留在溃疡表面，改善创面特殊的病理环境，同时结合白及多糖和生物活性玻璃的修复作用，达到愈合创面的目的。
实施例4
同实施例1，区别在于未加入白及多糖，将其采用同应用例1相同的方法验证其对于糖尿病足溃疡的治疗效果时，发现，14d后纯基质组创伤面仍有大块创伤面存在；单独加入生物活性玻璃，用药后创伤面表现开始愈合；单独加入白及多糖，用药后仅有少许创面未愈合；由此证明，生物活性玻璃和白及多糖单独使用时，对糖尿病足溃疡的治疗效果不如混合使用，实施例1具有良好的治疗效果是由白及多糖、生物活性玻璃以及温敏凝胶协同作用达到的效果。

Claims (5)

1.一种白及多糖/生物玻璃温敏凝胶剂，其特征在于，胶凝温度为32±2℃；以质量百分比计，其原料成分包括：白及多糖3.0-7.0％，生物活性玻璃0.5％，温敏凝胶基质19-28％，稳定剂0.5-5％，皮肤吸收促进剂0.1％、防腐剂0.01％，注射用水余量；
所述温敏凝胶基质由泊洛沙姆407和泊洛沙姆188组成；其中，以质量百分比计，泊洛沙姆407所占的质量百分比为18-24％，泊洛沙姆188所占的质量百分比为1-4％；
所述稳定剂为甘油，皮肤吸收促进剂为DMSO，防腐剂为羟苯乙酯，注射用水为纯化水、生理盐水、pH为3～8的缓冲溶液中的一种或任意组合；
将温敏型凝胶基质，白及多糖与1/3的注射用水混匀，置于冰箱中冷藏放置，完全溶解充分溶胀作为第一混合物；将生物玻璃于稳定剂中研磨均匀，得第二混合物；将第一混合物，第二混合物和皮肤吸收促进剂、防腐剂与剩余的注射用水混匀，即得到白及多糖/生物玻璃温敏凝胶剂。
2.根据权利要求1所述的白及多糖/生物玻璃温敏凝胶剂，其特征在于，所述白及多糖的制备方法，其包括如下步骤：将白及块茎粉碎，过筛，加入蒸馏水搅拌均匀，放置过夜，超声提取后水浴加热，取溶液下层沉淀加水，再次于水浴加热，合并两次溶液，离心，收集上清液，抽滤，上清液减压浓缩，醇沉两次，合并滤渣，烘干后溶于水，微孔滤膜过滤，滤液浓缩冷冻干燥，得白及多糖。
3.根据权利要求2所述的白及多糖/生物玻璃温敏凝胶剂，其特征在于，所述白及多糖的制备方法，具体包括如下步骤：将干燥白及块茎粉碎，过筛，加入蒸馏水搅拌均匀，放置过夜，次日加蒸馏水至料液比为1：20，室温下超声提取30min，平均功率80W，然后直接于70℃水浴加热1.5h，取溶液下层沉淀加水至1000ml，再次于70℃水浴加热1h，合并两次溶液，以4000rpm转速离心25min，收集上清液，抽滤，将上清液在70℃条件下减压浓缩至原体积1/3成粘稠状约600ml，加入3倍体积的85％乙醇，置于4℃下过夜，次日抽滤，醇沉两次，合并滤渣，于50℃烘箱内烘干，烘干后溶于水，用0.22μm微孔滤膜过滤，将滤液浓缩冷冻干燥，得白及多糖。
4.根据权利要求1所述的白及多糖/生物玻璃温敏凝胶剂，其特征在于，冷藏条件0-4℃，冷藏时间24h。
5.一种权利要求1-4任一项所述的白及多糖/生物玻璃温敏凝胶剂在制备糖尿病足溃疡的治疗药物中的应用。
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