CN110988242A - 一种血液样本中阿莫西林和克拉维酸同时检测的定量分析方法 - Google Patents

一种血液样本中阿莫西林和克拉维酸同时检测的定量分析方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种血液样本中阿莫西林和克拉维酸同时检测的定量分析方法，采用液相‑质谱联用系统对阿莫西林和克拉维酸进行定量分析。本发明的检测方法可以同时检测血液中阿莫西林和克拉维酸的含量，且精准度高，专属性好，检出限低，能满足阿莫西林和克拉维酸的体内药代动力学检测。

Description

一种血液样本中阿莫西林和克拉维酸同时检测的定量分析 方法
技术领域
本发明涉及定量分析技术领域，尤其涉及一种血液样本中阿莫西林和克拉维酸同时检测的定量分析方法。
背景技术
阿莫西林为半合成广谱青霉素类药，抗菌谱及抗菌活性与氨苄西林基本相同，但其耐酸性较氨苄西林强，其杀菌作用较后者强而迅速，但不能用于脑膜炎的治疗。半衰期约为61.3分钟。阿莫西林在酸性条件下稳定，胃肠道吸收率达90％，较氨苄西林吸收更迅速完全，除对志贺菌效果较氨苄西林差以外，其余效果相似。阿莫西林杀菌作用强，穿透细胞壁的能力也强。口服后药物分子中的内酰胺基立即水解生成肽键，迅速和菌体内的转肽酶结合使之失活，切断了菌体依靠转肽酶合成糖肽用来建造细胞壁的唯一途径，使细菌细胞迅速成为球形体而破裂溶解，菌体最终因细胞壁损失，水份不断渗透而胀裂死亡。对大多数致病的G+菌和G-菌(包括球菌和杆菌)均有强大的抑菌和杀菌作用。其中对肺炎链球菌、溶血性链球菌等链球菌属、不产青霉素酶葡萄球菌、粪肠球菌等需氧革兰阳性球菌，大肠埃希菌、奇异变形菌、沙门菌属、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌等需氧革兰阴性菌的不产β内酰胺酶菌株及幽门螺杆菌具有良好的抗菌活性。
克拉维酸为广谱β-内酰胺酶抑制剂，本身仅有微弱的抗菌活性，但对各种β-内酰胺酶有强抑制作用，可与大多数的β-内酰胺酶牢固结合，生成不可逆的结合物，从而使不耐酶的青霉素类或头孢菌素类抗生素免遭酶的破坏，增强抗菌活性并扩展抗菌谱。与青霉素类及头孢菌素类药物合用，可大大减少这些药物的剂量。
阿莫西林和克拉维酸联合使用时，由于克拉维酸的存在，可使阿莫西林免遭β-内酰胺酶的破坏，从而使已对阿莫西林耐药并产生β-内酰胺酶的细菌，仍然对阿莫西林敏感。
阿莫西林克拉维酸钾有片剂、干混悬剂等多种剂型，适用于敏感菌引起的各种感染，如：上呼吸道感染：鼻窦炎、扁桃体炎、咽炎、中耳炎等。下呼吸道感染：急性支气管炎、慢性支气管炎急性发作、肺炎、肺脓肿和支气管扩张合并感染等。泌尿系统感染：膀胱炎、尿道炎、肾盂肾炎、前列腺炎、盆腔炎、淋球菌尿路感染及软性下疳等。皮肤和软组织感染：疖、脓肿、蜂窝组织炎、伤口感染、腹内脓毒症等。其他感染：骨髓炎、败血症、腹膜炎和手术后感染等。
基于阿莫西林和克拉维酸药用价值广泛，对于阿莫西林和克拉维酸的研究一直受到国内外学者的广泛关注。关于阿莫西林和克拉维酸的检测，目前以高效液相色谱法为主，检测下限不能够满足较小给药量时阿莫西林和克拉维酸在生物体内的含量测定。且阿莫西林和克拉维酸联合使用的情况非常常见，能够用一种方法同时检测阿莫西林和克拉维酸显得尤为重要，但由于克拉维酸的酸不稳定性，阿莫西林和克拉维酸的理化性质差异等情况，阿莫西林和克拉维酸在生物样本的同时检测更为困难和复杂。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于克服现有技术中的检测方法无法实现阿莫西林和克拉维酸同时检测且在体内较低浓度水平的精准定量检测的缺陷，提供了一种血液样本中阿莫西林和克拉维酸同时检测的定量分析方法。本发明提供的方法为阿莫西林和克拉维酸体内药代动力学的检测提供了简便的分析方法。该方法操作简单，分析快速，且能满足阿莫西林和克拉维酸在体内较低浓度水平的精准定量。
本发明提供了一种血液样本中阿莫西林和克拉维酸同时检测的定量分析方法，采用液相-质谱联用系统对阿莫西林和克拉维酸进行定量分析。
进一步地，所述的检测方法包括以下步骤：
标准样品制备：取空白血液样品，加入系列浓度的标准阿莫西林溶液，得系列阿莫西林标准样品；取空白血液样品，加入系列浓度的标准克拉维酸溶液，得系列克拉维酸标准样品；
待测样品制备：实验对象口服阿莫西林克拉维酸钾混悬剂前后，静脉采血，得到待测样品；
样品检测：将系列阿莫西林标准样品、系列克拉维酸标准样品和待测样品进行前处理后，采用液相-质谱联用系统进行样品检测；其中，液相检测条件为：流动相A为0.1-1％的乙酸水溶液；流动相B为甲醇溶液，梯度洗脱，流速0.5-1.0mL/min，进样量5-20uL；质谱检测条件为：检测方式为多反应监测MRM，扫描方式为负离子扫描；
制作标准曲线：根据系列阿莫西林标准样品的液相-质谱检测结果，绘制阿莫西林标准曲线，得到阿莫西林标准曲线方程，根据系列克拉维酸标准样品的液相-质谱检测结果，绘制克拉维酸的标准曲线，得到克拉维酸标准曲线方程；
待测样品定量结果计算：将待测样品的检测结果，代入阿莫西林标准曲线方程，得到待测样品中阿莫西林的含量；将待测样品的检测结果，代入克拉维酸标准曲线方程，得到待测样品中克拉维酸的含量。
进一步地，所述系列浓度的标准阿莫西林溶液的配制方法为：采用DMSO超声溶解阿莫西林，得到一定浓度的阿莫西林DMSO溶液，然后采用一定浓度的甲醇水溶液将一定浓度的阿莫西林DMSO溶液稀释至系列浓度；
所述系列浓度的标准克拉维酸溶液的配制方法为：采用DMSO超声溶解克拉维酸，得到一定浓度的克拉维酸DMSO溶液，然后采用一定浓度的甲醇水溶液将一定浓度的克拉维酸DMSO溶液稀释至系列浓度。
进一步地，所述前处理包括如下步骤：将系列阿莫西林标准样品、系列克拉维酸标准样品和待测样品分别转移至样品处理管中，加入一定量的内标溶液和蛋白沉淀剂，离心分离，获得上清液。
进一步地，所述内标溶液为阿莫西林-d4溶液或舒巴坦溶液，所述蛋白沉淀剂为甲醇乙腈混合物，所述离心条件为：离心力范围为10000-16000g，离心时间范围为8-12分钟，离心温度为0-8摄氏度。
进一步地，液相检测中，所述梯度洗脱条件包括如下三个阶段：
第一阶段：起始流动相比例：A:B＝98:2；
第二阶段：流动相比例：A:B＝20:80；
第三阶段：流动相比例：A:B＝98:2，至结束；
且第二阶段时间应大于或等于1.5min；
质谱条件如下：
检测方式：多反应监测MRM；
扫描方式：负离子扫描；
离子喷雾电压：-4000～-4500V；
气帘气：10-30Psi；
雾化气：50-70Psi；
辅助气：50-70Psi；
离子源温度：550-650℃；
碰撞气种类：N2；
碰撞气压力：12MPa；
内标物：阿莫西林内标为阿莫西林-d4，克拉维酸内标为舒巴坦。
进一步地，梯度洗脱条件为：
起始流动相比例：A:B＝98:2；
步骤①：0～1.00min，A:B＝98:2；
步骤②：1.00～2.00min，流动相比例由A:B＝98:2匀速上升至A:B＝20:80；
步骤③：2.00～3.50min，A:B＝20:80；
步骤④：3.50～3.51min，流动相比例由A:B＝20:80迅速下降至A:B＝98:2；
步骤⑤：3.51～5.00min，A:B＝98:2；
其中步骤③的时间应大于等于1.5min；
质谱条件如下：
检测方式：多反应监测MRM；
扫描方式：负离子扫描；
离子喷雾电压：-4500V；
气帘气：20Psi；
雾化气：60Psi；
辅助气：60Psi；
离子源温度：600℃；
碰撞气种类：N2；
碰撞气压力：12MPa。
进一步地，液相色谱仪的型号为Agilent 1100、Agilent 1200、Agilent 1260、Agilent 1290、岛津LC-20A和岛津LC-30A中的任意一种；液相色谱柱为Phenomenex LunaC8、Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18、Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C8、AgilentZORBAX Eclipse Plus-C18、Agilent ZORBAX Eclipse Plus-C8、Agilent ZORBAX SB-C18、Waters SunFire C18、Waters SunFire C8、AgelaVenusil XBP C18和AgelaVenusil XBPC8中的任意一种。
进一步地，液相色谱柱的柱温为30-50℃；质谱仪的型号为API 4000、API 3200、API5000、4500QTRAP、5500QTRAP或6500QTRAP，其中，所使用的离子源为电喷雾离子源。
进一步地，还设有质控样品，并通过所述前处理后以所述液相-质谱条件分别检测质控样品。。
与现有技术相比，本发明的积极进步效果在于：本发明的检测方法克服了现有技术中的检测方法无法实现阿莫西林和克拉维酸同时检测且在体内较低浓度水平的精准定量检测的缺陷，而提供了一种血液样本中阿莫西林和克拉维酸同时检测的定量分析方法。本发明的检测方法精准度高，专属性好，检出限低，能满足阿莫西林和克拉维酸的体内药代动力学检测。
附图说明
图1为本发明实施例中标准样品中阿莫西林的色谱图；
图2为本发明实施例中标准样品中克拉维酸的色谱图；
图3为本发明实施例中标准样品中内标阿莫西林-d4的色谱图；
图4为本发明实施例中标准样品中内标舒巴坦的色谱图；
图5为本发明实施例中阿莫西林的标准曲线；
图6为本发明实施例中克拉维酸的标准曲线。
具体实施方式
为了使本技术领域的人员更好地理解本发明的技术方案，下面将结合本发明实施例及实施例附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分的实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明保护的范围。
下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。
下述实施例中，所使用的的液相-质谱联用系统中，所使用的液相色谱为高压液相色谱，其具体条件如下：
液相色谱仪型号：岛津LC-20A；
液相色谱柱型号：ZORBAX SB C18 4.6*150mm,3.5μm,Agilent；
流动相：流动相A：0.5％乙酸水溶液；流动相B：甲醇，所述百分比为质量百分比；
梯度洗脱条件：
起始流动相比例：A:B＝98:2；
步骤①：0～1.00min，A:B＝98:2；
步骤②：1.00～2.00min，流动相比例由A:B＝98:2匀速上升至A:B＝20:80；
步骤③：2.00～3.50min，A:B＝20:80；
步骤④：3.50～3.51min，流动相比例由A:B＝20:80迅速下降至A:B＝98:2；
步骤⑤：3.51～5.00min，A:B＝98:2；
柱温：40℃；
流速：1.0mL/min；
进样量：5μL；
下述实施例中，所使用的质谱参数如下：
质谱仪型号：API 4000；
源参数：
离子源 CAD CUR(psi) Gas1(psi) Gas2(psi) IS(V) TEM(℃)
TurboIonspay 12 20 60 60 -4500 600
上表中，对于各术语的解释说明如下：
CAD——碰撞活化解离气(N2)；CUR——气帘气；Gas1——雾化气；Gas2——辅助气；IS——离子喷雾电压；TEM——离子源温度。
化合物参数：
Figure BDA0002322243120000071
上表中，对于各术语的解释说明如下：
Q1——母离子；Q3——子离子；Dwell time——驻留时间；DP——去簇电压；EP——射入电压；CE——碰撞能量；CXP——碰撞室射出电压。
实施例
本实施例提供了一种血液样本中阿莫西林和克拉维酸同时检测的定量分析方法，其基本步骤和条件如下：
(1)标准溶液的配制
阿莫西林标准溶液配制：DMSO(二甲基亚砜)超声溶解阿莫西林，得到阿莫西林DMSO溶液浓度为1mg/mL，80％甲醇水溶液稀释上述溶液至阿莫西林浓度分别为200ng/mL、2000ng/mL、20000ng/mL和200000ng/mL；
克拉维酸标准溶液配制：DMSO(二甲基亚砜)超声溶解克拉维酸，得到克拉维酸DMSO溶液浓度为1mg/mL，80％甲醇水溶液稀释上述溶液至克拉维酸浓度分别为100ng/mL、1000ng/mL、10000ng/mL和100000ng/mL。
(2)质控溶液的配制
阿莫西林质控溶液配制：DMSO超声溶解阿莫西林至1mg/mL，用80％甲醇水溶液稀释制成阿莫西林浓度为400ng/mL、16000ng/mL和160000ng/mL的质控溶液；
克拉维酸质控溶液配制：DMSO超声溶解克拉维酸至1mg/mL，用80％甲醇水溶液稀释制成克拉维酸浓度为200ng/mL、8000ng/mL和80000ng/mL的质控溶液。
(3)标准样品及质控样品配制
阿莫西林标准样品配制：取标准溶液10μL平行加入到190μL空白血液样本中，制得阿莫西林浓度为10ng/mL、30ng/mL、100ng/mL、500ng/mL、1000ng/mL、2000ng/mL、5000ng/mL、10000ng/mL的阿莫西林标准样品；
阿莫西林质控样品配制：取质控溶液10μL平行加入到190μL空白血液样本中，制得阿莫西林浓度为为20ng/mL、800ng/mL和8000ng/mL的阿莫西林质控样品；
克拉维酸标准样品配制：取标准溶液10μL平行加入到190μL空白血液样本中，制得克拉维酸浓度为5ng/mL、15ng/mL、50ng/mL、250ng/mL、500ng/mL、1000ng/mL、2500ng/mL和5000ng/mL的克拉维酸标准样品；
克拉维酸质控样品配制：取质控溶液10μL平行加入到190μL空白血液样本中，制得克拉维酸浓度为10、400和4000ng/mL的克拉维酸质控样品。
上述阿莫西林标准样品、阿莫西林质控样品、克拉维酸标准样品和克拉维酸质控样品经前处理后，即可进行液相-质谱联用检测。
所述前处理如下：将样品100μL转移至样品处理管中，加入20μL内标溶液(2.5ug/mL阿莫西林-d4和2.5ug/mL舒巴坦，溶剂：0.1％甲酸甲醇)和蛋白沉淀剂(甲醇:乙腈＝1:2(v:v))，离心(离心力：15400g，时间10分钟，温度4℃)分离上清液，待检测。
(4)待测样品配制
实验对象(分为001、002和003三组)口服阿莫西林克拉维酸钾混悬剂后，静脉采血，血液样本中添加抗凝剂肝素钠，延缓血液样本的凝结。
采血时间：给药前(0h，服药前1h内)和给药后0.50h、0.75h(45min)、1.00h、1.25h(1h15min)、1.50h、1.75h(1h45min)、2.00h、2.33h(2h20min)、2.66h(2h40min)、3.00h、3.50h、4.00h、5.00h、6.00h、8.00h、10.00、12.00h。
待测样本配制完成后，通过与步骤(3)相同的前处理后进样分析，得到待测样品上清液，待检测。
(5)LC-MS/MS方法检测
采用LC-MS/MS方法对于标准样品、质控样品和待测血液样本分别进行检测。
(6)色谱图获得
经过上述步骤进样分析得到阿莫西林和克拉维酸及内标的色谱图(分别见图1～图4)。图1中，停留时间为3.27min的峰为阿莫西林的峰，其余为基质峰，图2中停留时间为3.31min的峰为克拉维酸的峰，其余为基质峰，图3中，停留时间为3.26min的峰为内标阿莫西林-d4的峰，图4中，停留时间为3.49min的峰为内标舒巴坦的峰。
(7)标准曲线绘制及标准曲线方程
基于标准样品的待测物与内标的峰面积比，通过归一化法得到标准曲线(图5～图6)。其中，横坐标是待测物的浓度(单位ng/mL)，纵坐标是待测物与内标的峰面积比。1/X2表示权重。图5中，具体线性关系为y＝0.00257x-0.00255，r＝0.9987。图6中，具体线性关系为y＝0.000819x+0.00038，r＝0.9986。
(8)定量结果计算
通过标准曲线定量得到血液样本中阿莫西林和克拉维酸的浓度。具体方法为：将待测样品按照LC-MS/MS方法检测得到的与阿莫西林/克拉维酸标准样品相同保留时间的色谱峰的峰面积与相对应内标的峰面积比值，代入阿莫西林/克拉维酸标准曲线，得到待测样品中阿莫西林和克拉维酸的含量。
其中，阿莫西林和克拉维酸质控样品的浓度计算结果见表1～表2。从表1和表2中可以看出，本发明的测试方法精准度高。
待测样品中阿莫西林和克拉维酸待测样本的药物浓度测定结果见表3和表4。表3和表4中的时间点是指给药到采血的时间间隔，BLOQ的含义是低于定量下限。从表3和表4中可以看出，本实施例提供的定量分析方法具有较低的检出限。
表1阿莫西林质控样品的检测结果
Figure BDA0002322243120000101
表2克拉维酸质控样品的检测结果
Figure BDA0002322243120000102
表3待测样本中阿莫西林药物浓度测定结果
Figure BDA0002322243120000103
Figure BDA0002322243120000111
表4待测样本中克拉维酸药物浓度测定结果
Figure BDA0002322243120000112
本发明实施例具有如下优点：
本发明实施例的定量分析检测方法采取了简单的有机溶剂蛋白沉淀法对血液样本进行前处理，基于待测物与内标的峰面积比，通过加权平均法得到标准曲线，从而定量得到血液样本中阿莫西林和克拉维酸的浓度。本发明实施例提供的定量分析检测方法精准度高、专属性好、检出限低，能满足阿莫西林和克拉维酸的体内药代动力学检测。
以上实施例对本发明做了详尽的描述，其目的在于让熟悉此领域技术的人士能够了解本发明的内容并加以实施，并不能以此限制本发明的保护范围，凡根据本发明的精神实质所作的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围内。

Claims (10)

1.一种血液样本中阿莫西林和克拉维酸同时检测的定量分析方法，其特征在于，采用液相-质谱联用系统对阿莫西林和克拉维酸进行定量分析。
2.如权利要求1所述的阿莫西林和克拉维酸同时检测的定量分析方法，其特征在于，所述的检测方法包括以下步骤：
标准样品制备：取空白血液样品，加入系列浓度的标准阿莫西林溶液，得系列阿莫西林标准样品；取空白血液样品，加入系列浓度的标准克拉维酸溶液，得系列克拉维酸标准样品；
待测样品制备：实验对象口服阿莫西林克拉维酸钾混悬剂前后，静脉采血，得到待测样品；
样品检测：将系列阿莫西林标准样品、系列克拉维酸标准样品和待测样品进行前处理后，采用液相-质谱联用系统进行样品检测；其中，液相检测条件为：流动相A为0.1-1%的乙酸水溶液；流动相B为甲醇溶液，梯度洗脱，流速0.5-1.0mL/min，进样量5-20uL；质谱检测条件为：检测方式为多反应监测MRM，扫描方式为负离子扫描；
制作标准曲线：根据系列阿莫西林标准样品的液相-质谱检测结果，绘制阿莫西林标准曲线，得到阿莫西林标准曲线方程，根据系列克拉维酸标准样品的液相-质谱检测结果，绘制克拉维酸的标准曲线，得到克拉维酸标准曲线方程；
待测样品定量结果计算：将待测样品的检测结果，代入阿莫西林标准曲线方程，得到待测样品中阿莫西林的含量；将待测样品的检测结果，代入克拉维酸标准曲线方程，得到待测样品中克拉维酸的含量。
3.如权利要求2所述的阿莫西林和克拉维酸同时检测的定量分析方法，其特征在于，所述系列浓度的标准阿莫西林溶液的配制方法为：采用DMSO超声溶解阿莫西林，得到一定浓度的阿莫西林DMSO溶液，然后采用一定浓度的甲醇水溶液将一定浓度的阿莫西林DMSO溶液稀释至系列浓度；
所述系列浓度的标准克拉维酸溶液的配制方法为：采用DMSO超声溶解克拉维酸，得到一定浓度的克拉维酸DMSO溶液，然后采用一定浓度的甲醇水溶液将一定浓度的克拉维酸DMSO溶液稀释至系列浓度。
4.如权利要求2所述的阿莫西林和克拉维酸同时检测的定量分析方法，其特征在于，所述前处理包括如下步骤：将系列阿莫西林标准样品、系列克拉维酸标准样品和待测样品分别转移至样品处理管中，加入一定量的内标溶液和蛋白沉淀剂，离心分离，获得上清液。
5.如权利要求4所述的阿莫西林和克拉维酸同时检测的定量分析方法，其特征在于，所述内标溶液为阿莫西林-d4溶液或舒巴坦溶液，所述蛋白沉淀剂为甲醇乙腈混合物，所述离心条件为：离心力范围为10000-16000 g，离心时间范围为8-12分钟，离心温度为0-8摄氏度。
6.如权利要求2所述的阿莫西林和克拉维酸同时检测的定量分析方法，其特征在于，液相检测中，所述梯度洗脱条件包括如下三个阶段：
第一阶段：起始流动相比例：A:B=98:2；
第二阶段：流动相比例：A:B=20:80；
第三阶段：流动相比例：A:B=98:2，至结束；
且第二阶段时间应大于或等于1.5 min；
质谱条件如下：
检测方式：多反应监测MRM；
扫描方式：负离子扫描；
离子喷雾电压：-4000~-4500 V；
气帘气：10-30 Psi；
雾化气：50-70 Psi；
辅助气：50-70 Psi；
离子源温度：550-650℃；
碰撞气种类：N2；
碰撞气压力：12MPa；
内标物：阿莫西林内标为阿莫西林-d4，克拉维酸内标为舒巴坦。
7.如权利要求1所述的阿莫西林和克拉维酸同时检测的定量分析方法，其特征在于，梯度洗脱条件为：
起始流动相比例：A:B=98:2；
步骤①：0~1.00 min，A:B=98:2；
步骤②：1.00~2.00min，流动相比例由A:B=98:2匀速上升至A:B=20:80；
步骤③：2.00~3.50 min，A:B=20:80；
步骤④：3.50~3.51 min，流动相比例由A:B=20:80迅速下降至A:B=98:2；
步骤⑤：3.51~5.00 min，A:B=98:2；
其中步骤③的时间应大于等于1.5min；
质谱条件如下：
检测方式：多反应监测MRM；
扫描方式：负离子扫描；
离子喷雾电压：-4500 V；
气帘气：20 Psi；
雾化气：60 Psi；
辅助气：60 Psi；
离子源温度：600℃；
碰撞气种类：N2；
碰撞气压力：12MPa。
8.如权利要求1所述的阿莫西林和克拉维酸同时检测的定量分析方法，其特征在于，液相色谱仪的型号为Agilent 1100、Agilent 1200、Agilent 1260、Agilent 1290、岛津 LC-20A和岛津 LC-30A中的任意一种；液相色谱柱为Phenomenex Luna C8、Agilent ZORBAXEclipse XDB-C18、Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C8、Agilent ZORBAX Eclipse Plus-C18、Agilent ZORBAX Eclipse Plus-C8、Agilent ZORBAX SB-C18、Waters SunFire C18、Waters SunFire C8、AgelaVenusil XBP C18和AgelaVenusil XBP C8中的任意一种。
9.如权利要求8所述的阿莫西林和克拉维酸同时检测的定量分析方法，其特征在于，液相色谱柱的柱温为30-50℃；质谱仪的型号为API 4000、API 3200、API5000、4500 QTRAP、5500 QTRAP或6500 QTRAP，其中，所使用的离子源为电喷雾离子源。
10.如权利要求2所述的阿莫西林和克拉维酸同时检测的定量分析方法，其特征在于，还设有质控样品，并通过所述前处理后以所述液相-质谱条件分别检测质控样品。
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