CN104345100A - 同时测定阿莫西林克拉维酸钾血药浓度的方法 - Google Patents
同时测定阿莫西林克拉维酸钾血药浓度的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104345100A CN104345100A CN201410434466.2A CN201410434466A CN104345100A CN 104345100 A CN104345100 A CN 104345100A CN 201410434466 A CN201410434466 A CN 201410434466A CN 104345100 A CN104345100 A CN 104345100A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- potassium
- amoxicillin
- clavulanate
- amoxicillin sodium
- potassium clavulanate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本发明公开了一种同时测定阿莫西林钠克拉维酸钾血药浓度的方法，该方法该方法采用对乙酰氨基酚为内标，将人血浆样品用甲醇沉淀蛋白后高速离心进样，以C18为色谱柱，以乙腈-0.05mmol/L磷酸盐缓冲液作为流动相，紫外检测波长为220nm，得出阿莫西林钠和克拉维酸钾的最低检测浓度。本发明简便、准确、灵敏、特异性强、重现性好，可作为阿莫西林钠-克拉维酸钾的生物利用度和生物等效性研究的血药浓度测定方法。
Description
技术领域
本发明是涉及医药生产领域，具体地，涉及一种同时测定阿莫西林克拉维酸钾血药浓度的方法及其制备方法。
背景技术
阿莫西林克拉维酸钾是由β-内酰胺抑制剂克拉维酸钾与半合成青霉素阿莫西林组成的复方制剂。阿莫西林是杀菌性广谱抗生素，克拉维酸钾是不可逆的广谱β-内酰胺酶抑制剂，可有效地抑制耐药菌产生的β-内酰胺酶。临床上已经取得了满意的疗效。
人血浆中阿莫西林和克拉维酸钾浓度测定方法有微生物法、HPLC-MS法，但是微生物测定法虽然不需特殊设备，但灵敏度较低，干扰因素多，不能满足阿莫西林克拉维酸钾动力学研究及生物等效性实验要求。HPLC-MS法灵敏度高，但仪器昂贵且不稳定。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种同时测定阿莫西林克拉维酸钾血药浓度的方法，该方法采用对乙酰氨基酚为内标，将人血浆样品用甲醇沉淀蛋白后高速离心进样，以C18为色谱柱，以乙腈-0.05mmol/L磷酸盐缓冲液作为流动相，紫外检测波长为220nm，得出阿莫西林钠和克拉维酸钾的最低检测浓度，本方法渐变、准确、灵敏、特异性腔、重现性好，能够达到同时测定人血浆中阿莫西林钠克拉维酸钾浓度的方法。
本发明解决上述问题所采用的技术方案是：
同时测定阿莫西林克拉维酸钾血药浓度的方法，
（1） 配制阿莫西林钠-克拉维酸钾标准储备液：含阿莫西林钠88.3微克/ml和克拉维酸钾45.3微克/ml；
（2） 配制对乙酰氨基酚内标溶液和磷酸二氢钾缓冲液；
（3） 样品预处理：取阿莫西林钠-克拉维酸钾标准储备液于离心管中，加入空白血浆至215微升，精密加入10微升内标对乙酰氨基酚，漩涡振荡10s，再精密加入200微升甲醇，漩涡振荡15s后，4000r/min在4℃离心6min后，取上清液备用；
（4） 取步骤（3）的上清液进入色谱柱为C18，以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液10:90作为流动相，流速：1ml/min，紫外检测波长22nm的HPLC仪器中进行分析；
（5） 制备阿莫西林钠-克拉维酸钾回归标准曲线：配制系列浓度阿莫西林钠-克拉维酸钾溶液照步骤（3）处理后取各系列浓度等量体积的上清液按照步骤（4）进样分析，得阿莫西林钠的标准曲线回归方程为：C=8.946Y-1.362；克拉维酸钾的标准曲线回归方程为：C=8.946Y-1.475，其中Y为阿莫西林钠、克拉维酸钾与内标物峰面积比，且Y为横坐标。
磷酸二氢钾缓冲液为0.05mmol/L，且pH为2.0-2.5。
照步骤（5）中的标准回归曲线，稀释加入空白人血浆的阿莫西林钠-克拉维酸钾标准储备液得到阿莫西林钠、克拉维酸钾最低检测浓度。
综上，本发明的有益效果是：本发明方法简便、准确、灵敏、特异性强、重现性好，可作为阿莫西林钠-克拉维酸钾的生物利用度和生物等效性研究的血药浓度测定方法。
具体实施方式
下面结合实施例，对本发明作进一步地的详细说明，但本发明的实施方式不限于此。
实施例1：
同时测定阿莫西林克拉维酸钾血药浓度的方法，包括以下步骤：
（1） 配制阿莫西林钠-克拉维酸钾标准储备液：含阿莫西林钠88.3微克/ml和克拉维酸钾45.3微克/ml；
（2） 配制对乙酰氨基酚内标溶液和磷酸二氢钾缓冲液；
（3） 样品预处理：取阿莫西林钠-克拉维酸钾标准储备液于离心管中，加入空白血浆至215微升，精密加入10微升内标对乙酰氨基酚，漩涡振荡10s，再精密加入200微升甲醇，漩涡振荡15s后，4000r/min在4℃离心6min后，取上清液备用；
（4） 取步骤（3）的上清液进入色谱柱为C18，以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液10:90作为流动相，流速：1ml/min，紫外检测波长22nm的HPLC仪器中进行分析；
（5） 制备阿莫西林钠-克拉维酸钾回归标准曲线：配制系列浓度阿莫西林钠-克拉维酸钾溶液照步骤（3）处理后取各系列浓度等量体积的上清液按照步骤（4）进样分析，得阿莫西林钠的标准曲线回归方程为：C=8.946Y-1.362；克拉维酸钾的标准曲线回归方程为：C=8.946Y-1.475，其中Y为阿莫西林钠、克拉维酸钾与内标物峰面积比，且Y为横坐标。
磷酸二氢钾缓冲液为0.05mmol/L，且pH为2.0-2.5。
照步骤（5）中的标准回归曲线，稀释加入空白人血浆的阿莫西林钠-克拉维酸钾标准储备液得到阿莫西林钠、克拉维酸钾最低检测浓度。
Claims (3)
1.同时测定阿莫西林克拉维酸钾血药浓度的方法，其特征在于，
配制阿莫西林钠-克拉维酸钾标准储备液：含阿莫西林钠88.3微克/ml和克拉维酸钾45.3微克/ml；
配制对乙酰氨基酚内标溶液和磷酸二氢钾缓冲液；
样品预处理：取阿莫西林钠-克拉维酸钾标准储备液于离心管中，加入空白血浆至215微升，精密加入10微升内标对乙酰氨基酚，漩涡振荡10s，再精密加入200微升甲醇，漩涡振荡15s后，4000r/min在4℃离心6min后，取上清液备用；
取步骤（3）的上清液进入色谱柱为C18，以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液10:90作为流动相，流速：1ml/min，紫外检测波长22nm的HPLC仪器中进行分析；
制备阿莫西林钠-克拉维酸钾回归标准曲线：配制系列浓度阿莫西林钠-克拉维酸钾溶液照步骤（3）处理后取各系列浓度等量体积的上清液按照步骤（4）进样分析，得阿莫西林钠的标准曲线回归方程为：C=8.946Y-1.362；克拉维酸钾的标准曲线回归方程为：C=8.946Y-1.475，其中Y为阿莫西林钠、克拉维酸钾与内标物峰面积比，且Y为横坐标。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，磷酸二氢钾缓冲液为0.05mmol/L，且pH为2.0-2.5。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，照步骤（5）中的标准回归曲线，稀释加入空白人血浆的阿莫西林钠-克拉维酸钾标准储备液得到阿莫西林钠、克拉维酸钾最低检测浓度。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410434466.2A CN104345100A (zh) | 2014-08-29 | 2014-08-29 | 同时测定阿莫西林克拉维酸钾血药浓度的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410434466.2A CN104345100A (zh) | 2014-08-29 | 2014-08-29 | 同时测定阿莫西林克拉维酸钾血药浓度的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104345100A true CN104345100A (zh) | 2015-02-11 |
Family
ID=52501156
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410434466.2A Pending CN104345100A (zh) | 2014-08-29 | 2014-08-29 | 同时测定阿莫西林克拉维酸钾血药浓度的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN104345100A (zh) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105784876A (zh) * | 2016-05-12 | 2016-07-20 | 东北农业大学 | 一种采用高效液相色谱法检测乳中克拉维酸的方法及应用 |
| CN106645481A (zh) * | 2016-12-23 | 2017-05-10 | 东药集团沈阳施德药业有限公司 | 一种测试速释剂型药物阿莫西林克拉维酸钾分散片的溶出曲线的方法 |
| CN107505403A (zh) * | 2016-06-14 | 2017-12-22 | 株洲千金药业股份有限公司 | 妇科千金片与抗生素联合应用中生物利用度的评价方法 |
| CN110988242A (zh) * | 2019-12-17 | 2020-04-10 | 哈尔滨舒曼德医药科技开发有限公司 | 一种血液样本中阿莫西林和克拉维酸同时检测的定量分析方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1809348A (zh) * | 2003-06-16 | 2006-07-26 | 葛兰素集团有限公司 | 含有阿莫西林和克拉维酸盐的药物制剂 |
| CN101776675A (zh) * | 2008-08-27 | 2010-07-14 | 广州联创思远利生物科技有限公司 | 一种新的注射用复方阿莫西林钠克拉维酸钾的检测方法 |
-
2014
- 2014-08-29 CN CN201410434466.2A patent/CN104345100A/zh active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1809348A (zh) * | 2003-06-16 | 2006-07-26 | 葛兰素集团有限公司 | 含有阿莫西林和克拉维酸盐的药物制剂 |
| CN101776675A (zh) * | 2008-08-27 | 2010-07-14 | 广州联创思远利生物科技有限公司 | 一种新的注射用复方阿莫西林钠克拉维酸钾的检测方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| KYUNG-HWAN YOON ET AL.: "Simultaneous determination of amoxicillin and clavulanic acid in human plasma by HPLC–ESI mass spectrometry", 《JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY B》 * |
| 刘孟斯 等: "反相高效液相色谱法检测阿莫西林-克拉维酸钾（8:1）干混悬剂血药浓度及生物等效性研究", 《中南药学》 * |
| 林祖文 等: "高效液相色谱法同时测定人血阿莫西林钠/克拉维酸钾血药浓度", 《南方医科大学学报》 * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105784876A (zh) * | 2016-05-12 | 2016-07-20 | 东北农业大学 | 一种采用高效液相色谱法检测乳中克拉维酸的方法及应用 |
| CN107505403A (zh) * | 2016-06-14 | 2017-12-22 | 株洲千金药业股份有限公司 | 妇科千金片与抗生素联合应用中生物利用度的评价方法 |
| CN106645481A (zh) * | 2016-12-23 | 2017-05-10 | 东药集团沈阳施德药业有限公司 | 一种测试速释剂型药物阿莫西林克拉维酸钾分散片的溶出曲线的方法 |
| CN106645481B (zh) * | 2016-12-23 | 2019-02-26 | 东药集团沈阳施德药业有限公司 | 一种测试速释剂型药物阿莫西林克拉维酸钾分散片的溶出曲线的方法 |
| CN110988242A (zh) * | 2019-12-17 | 2020-04-10 | 哈尔滨舒曼德医药科技开发有限公司 | 一种血液样本中阿莫西林和克拉维酸同时检测的定量分析方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Carlier et al. | Assays for therapeutic drug monitoring of β-lactam antibiotics: a structured review | |
| CN104345100A (zh) | 同时测定阿莫西林克拉维酸钾血药浓度的方法 | |
| CN113341012B (zh) | 一种同时检测同型半胱氨酸代谢通路上多种代谢物的方法、试剂盒及其应用 | |
| Tippa et al. | Development and validation of stability indicating HPLC method for simultaneous estimation of amoxicillin and clavulanic acid in injection | |
| CN102072942A (zh) | 一种离子对色谱法测定吡咯并喹呤醌含量的分析方法 | |
| CN104965041A (zh) | 一种帕瑞昔布钠异构体的高效液相色谱检测方法 | |
| CN104232739A (zh) | 枸橼酸原料中细菌内毒素的检测方法 | |
| CN107015003A (zh) | 一种用于定量检测同型半胱氨酸、半胱氨酸和甲硫氨酸的试剂盒 | |
| CN104215697B (zh) | 一种检测注射用哌拉西林钠舒巴坦钠中有关物质的方法 | |
| CN105510482B (zh) | 一种替格瑞洛原料中异构体杂质含量的检测方法 | |
| Acharya et al. | Development and validation of RP-HPLC method for simultaneous estimation of cefpodoxime proxetil and dicloxacillin sodium in tablets | |
| CN109212048A (zh) | 一种伏立康唑中杂质含量的检测方法 | |
| Marwada et al. | Ultraviolet spectrophotometry (dual wavelength and chemometric) and high performance liquid chromatography for simultaneous estimation of meropenem and sulbactam sodium in pharmaceutical dosage form | |
| Pekamwar et al. | Validated UV-Visible spectrophotometric method for simultaneous estimation of cefixime and moxifloxacin in pharmaceutical dosage form | |
| Patil et al. | HPLC analysis of cephalosporins and study of different analytical parameters | |
| CN103645151B (zh) | 一种快速测定大观霉素发酵液或成品中大观霉素含量的方法 | |
| Zhang et al. | Pharmacokinetics study of amoxycillin and clavulanic acid (8: 1)-A new combination in healthy Chinese adult male volunteers using the LC–MS/MS method | |
| Zhou et al. | A rapid and simple high‐performance liquid chromatography method for the determination of human plasma levofloxacin concentration and its application to bioequivalence studies | |
| Locatelli et al. | High performance liquid chromatography determination of prulifloxacin and five related impurities in pharmaceutical formulations | |
| CN106706770A (zh) | 一种蝉花的检测方法 | |
| Locatelli et al. | Stability study of Prulifloxacin and Ulifloxacin in human plasma by HPLC–DAD | |
| CN204188621U (zh) | 一种动态显色法真菌葡聚糖检测鲎试剂盒 | |
| Dincel et al. | A high-performance liquid chromatographic method for the determination of meropenem in serum | |
| Shirkhedkar et al. | Quantitative determination of levofloxacin hemihydrate in bulk and tablets by UV-spectrophotometry and first order derivative methods. | |
| CN203965445U (zh) | 一种动态显色法内毒素检测鲎试剂盒 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20150211 |