CN110987912A - 一种生乳中尿素含量的分析测试方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及化学检测领域,具体公开了一种快速检测尿素含量的试纸及其应用。本发明所述试纸浸泡液包括硫氰酸钾、对二甲氨基苯甲醛、酒石酸盐、抗坏血酸。试纸在光电测色仪上的检测波长为420~450 nm,反应时间为5~15min。本发明具有反应灵敏、便于操作等优点,检测准确度和灵敏度较高。
Description
技术领域
本发明涉及生乳检测领域,具体涉及生乳中尿素含量快速检测试纸的制备方法。
背景技术
尿素是蛋白质代谢的最终产物,存在于哺乳动物的乳汁中,部分不良商家为谋取高昂利润,常在生乳中掺入尿素,严重影响牛乳的营养价值,故需要简便、成本低、准确度高的检测方法对牛乳中的尿素含量进行检测。目前国内外乳品行业应用的生乳中尿素含量的的检测方法有亚硝酸盐—格里斯试剂法和丁二酮肟光度法等。其中亚硝酸盐-格里斯试剂法反应所需时间长;而丁二酮肟光度法操作繁琐,且需要专业的技术人员操作。
发明内容
本发明的目的是为了解决现有的生乳中尿素含量的分析测试方法中存在的耗时长、操作繁琐且需要专业的技术人员进行操作的问题,提供一种新的检测生乳中尿素含量的方法。
实现上述目的的本发明的技术方案为,一种生乳中尿素含量分析测试方法,该方法包括以下步骤:
(1)配制反应试剂:分别配制5%~15%的硫酸氢钾溶液、1%~5%的对二甲氨基苯甲醛溶液、0.05%~0.2%的酒石酸盐溶液和0.05%~0.2%的抗坏血酸溶液;
(2)试纸的制作及使用操作:将中厚度耐酸性吸水纸分别在步骤(1)配制的硫酸氢钾溶液中浸泡5~15分钟,完全浸透后在50~70℃的干燥箱中加热干燥,10~30分钟后取出,再将取出的吸水纸立即浸渍在对二甲氨基苯甲醛溶液10~30 分钟,然后放置于50~70 ℃的干燥箱中,10~30分钟后取出。在依次浸入0.05%~0.2%的酒石酸盐溶液和0.05%~0.2%的抗坏血酸溶液5~15分钟,干燥后制成反应试纸,干燥保存,备用。取备用的试纸条若干,滴加待测的样液10~30 μL,反应5~15分钟后,放入光电测色仪中,在420~450 nm下测定其反光值。
(3)标准的建立:通过大批采集乳样,按照(2)步骤,用光电测色仪测定其反光值。用分光光度计法测定乳样尿素含量,以反光值为纵坐标,尿素含量为横坐标,建立反光值-尿素含量之间固定的函数关系曲线,作为检测标准。
(4)检测:按照步骤(2)使待测生乳与试纸进行反应,将测定的反光值与步骤(3)获得的检测标准进行比较,获得所测生乳中的尿素含量。
本发明具有以下优点:
1、检测速度快,可快速定量测定生乳中尿素含量;
2、环境要求低,检测操作简便,建立好标准后,之后的检测仅需使用制备好的试纸与生乳反应即可,操作人员无需专门培训,易普及。
3、检测费用低,检测结果准确,性价比高。
具体实施方式
实施例一 本实施方式按照以下步骤进行:
(1)配制反应试剂:称取10.0 g硫酸氢钾,用去离子水溶解并定容至100 mL混匀;称取1.0 g对二甲氨基苯甲醛,用丙酮溶解并定容至100mL,混匀;称取0.1 g酒石酸钾钠,用去离子水溶解并定容至100 mL混匀,称取0.1 g抗坏血酸,用去离子水溶解并定容至100 mL混匀。
(2)试纸的制作及使用操作:将中厚度耐酸性吸水纸分别在步骤(1)配制的10 %硫酸氢钾溶液中浸泡10分钟,完全浸透后在65℃的干燥箱中加热干燥,20分钟后取出,再将取出的吸水纸立即浸渍在1%对二甲氨基苯甲醛溶液20 分钟后放置于65℃的干燥箱中,20分钟后取出。在依次浸入0.1%的酒石酸盐溶液和0.1%的抗坏血酸溶液10分钟,干燥后制成反应试纸,将干燥后的试纸黏贴在PV胶版上,裁成2 cm×0.5 cm的小条,放置在有干燥剂的密闭瓶中保存,备用。取备用的试纸条若干,滴加待测的样液20 μL,反应10分钟后,试纸显色,放入光电测色仪中,在430 nm下测定其反光值。
实施例二 本实施方式按照以下步骤进行:
(1)配制反应试剂:称取10.0 g硫酸氢钾,用去离子水溶解并定容至100 mL混匀;称取2.0 g对二甲氨基苯甲醛,用丙酮溶解并定容至100mL,混匀;称取0.1 g酒石酸钾钠,用去离子水溶解并定容至100 mL混匀,称取0.1 g抗坏血酸,用去离子水溶解并定容至100 mL混匀。
(2)试纸的制作及使用操作:将中厚度耐酸性吸水纸分别在步骤(1)配制的10%硫酸氢钾溶液中浸泡10分钟,完全浸透后在65℃的干燥箱中加热干燥,20分钟后取出,再将取出的吸水纸立即浸渍在2 %对二甲氨基苯甲醛溶液20分钟后放置于65 ℃的干燥箱中,10分钟后取出。在依次浸入0.1%的酒石酸盐溶液和0.1%的抗坏血酸溶液10分钟,干燥后制成反应试纸,将干燥后的试纸黏贴在PV胶版上,裁成2 cm×0.5 cm的小条,放置在有干燥剂的密闭瓶中保存,备用。取备用的试纸条若干,滴加待测的样液20 μL,反应10分钟后,试纸显色,放入光电测色仪中,在430 nm下测定其反光值。
实施例三 本实施方式按照以下步骤进行:
(1)配制反应试剂:称取10.0 g硫酸氢钾,用去离子水溶解并定容至100 mL混匀;称取1.0 g对二甲氨基苯甲醛,用丙酮溶解并定容至100mL,混匀;称取0.1 g酒石酸钾钠,用去离子水溶解并定容至100 mL混匀,称取0.1 g抗坏血酸,用去离子水溶解并定容至100 mL混匀。
(2)试纸的制作及使用操作:将中厚度耐酸性吸水纸分别在步骤(1)配制的10 %硫酸氢钾溶液中浸泡10分钟,完全浸透后在65℃的干燥箱中加热干燥,20分钟后取出,再将取出的吸水纸立即浸渍在1%对二甲氨基苯甲醛溶液20 分钟后放置于65℃的干燥箱中,20分钟后取出。在依次浸入0.1%的酒石酸盐溶液和0.1%的抗坏血酸溶液10分钟,干燥后制成反应试纸,将干燥后的试纸黏贴在PV胶版上,裁成2 cm×0.5 cm的小条,放置在有干燥剂的密闭瓶中保存,备用。取备用的试纸条若干,滴加待测的样液20 μL,反应10分钟后,试纸显色,放入光电测色仪中,在420 nm下测定其反光值。
实施例四 本实施方式按照以下步骤进行:
(1)配制反应试剂:称取10.0 g硫酸氢钾,用去离子水溶解并定容至100 mL混匀;称取2.0 g对二甲氨基苯甲醛,用丙酮溶解并定容至100mL,混匀;称取0.1 g酒石酸钾钠,用去离子水溶解并定容至100 mL混匀,称取0.1 g抗坏血酸,用去离子水溶解并定容至100 mL混匀。
(2)试纸的制作及使用操作:将中厚度耐酸性吸水纸分别在步骤(1)配制的10%硫酸氢钾溶液中浸泡10分钟,完全浸透后在65℃的干燥箱中加热干燥,20分钟后取出,再将取出的吸水纸立即浸渍在2 %对二甲氨基苯甲醛溶液20分钟后放置于65 ℃的干燥箱中,10分钟后取出。在依次浸入0.1%的酒石酸盐溶液和0.1%的抗坏血酸溶液10分钟,干燥后制成反应试纸,将干燥后的试纸黏贴在PV胶版上,裁成2 cm×0.5 cm的小条,放置在有干燥剂的密闭瓶中保存,备用。取备用的试纸条若干,滴加待测的样液20 μL,反应10分钟后,试纸显色,放入光电测色仪中,在420 nm下测定其反光值。
实施例五 检测生乳中尿素含量的试纸条的性能评价:
1.精密度试验
选取尿素含量不同的5份乳样进行试验。分别检测其反光值,每个样品重复测定6次,求得尿素的含量及其平均值。 计算其相对标准偏差来评价方法的精密度。结果如表1所示,应用试纸法测定尿素含量的相对标准偏差在0.96%~2.44%之间,即相对标准偏差均不超过3%,说明该法具有较好的精密度。
表1 精密度计算结果(n=6)
2.对比分析试验
采用3种方法对生乳中尿素含量进行测定,结果见表2。由表2可见:3种检测方法测定结果基本相同,误差也较小。经方差分析可知:3种方法的测定结果之间差异无统计学意义(p>0.05),说明该试纸法在实际应用中是可行的。
表2 本实施方法检测值与其他两种方法检测结果对比
Claims (7)
1.一种生乳中尿素含量的分析测试方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
(1)配制反应试剂:分别配制5%~15%的硫酸氢钾溶液、1%~5%的对二甲氨基苯甲醛溶液、0.05%~0.2%的酒石酸盐溶液和0.05%~0.2%的抗坏血酸溶液;
(2)试纸的制作及使用操作:将中厚度耐酸性吸水纸分别在步骤(1)配制的硫酸氢钾溶液中浸泡5~15分钟,完全浸透后在50~70℃的干燥箱中加热干燥,10~30分钟后取出,再将取出的吸水纸立即浸渍在对二甲氨基苯甲醛溶液10~30 分钟后放置于50~70 ℃的干燥箱中,10~30分钟后取出,在依次浸入0.05%~0.2%的酒石酸盐溶液和0.05%~0.2%的抗坏血酸溶液5~15分钟,干燥后制成反应试纸,干燥保存,备用,取备用的试纸条若干,滴加待测的样液10~30 μL,反应5~15分钟后,放入光电测色仪中,在420~450 nm下测定其反光值,
(3)标准的建立:通过大批采集乳样,按照(2)步骤,用光电测色仪测定其反光值,用分光光度计法测定乳样尿素的含量,以反光值为纵坐标,尿素含量为横坐标,建立反光值-尿素含量之间固定的函数关系,作为检测标准,
(4)检测:按照步骤(2)使待测生乳与试纸进行反应,将测定的反光值与步骤(3)获得的检测标准进行比较,获得所测生乳中的尿素含量。
2.根据权利要求1所述的生乳中尿素含量的分析测试方法,其特征在于步骤(1)中,反应试剂硫酸氢钾的浓度为5%~15%,对二甲氨基苯甲醛溶液的浓度为1%~5%,酒石酸盐溶液的浓度为0.05%~0.2%,抗坏血酸溶液的浓度为0.05%~0.2%。
3.根据权利要求1所述的生乳中尿素含量的分析测试方法,其特征在于步骤(2)中,在样液中,除了尿素外,还含有大量的氨,氨能和显色剂中的酸反应,改变显色剂的酸性体系进而干扰测定,因此加入硫酸氢钾排除氨对比色的影响。
4.根据权利要求1所述的生乳中尿素含量的分析测试方法,其特征在于步骤(2)中,因硫酸氢钾溶液为呈酸性,故选择耐酸性吸水纸,将吸水纸浸泡在硫酸氢钾溶液中浸泡5~15分钟后在在50~70℃的干燥箱中加热干燥,10~30分钟后取出,再将取出的吸水纸立即浸入对二甲氨基苯甲醛溶液中5~15分钟后放置于50~70 ℃的干燥箱中,10~30分钟后取出。
5.根据权利要求1所述的生乳中尿素含量的分析测试方法,其特征在于步骤(2)中,酒石酸盐的作用为助显色剂,在酸性条件下反应,而酸度的控制对于本发明对应测试样品生乳或复原乳的稳定影响很大,因此采用酒石酸盐,在对体系酸度影响不大的情况下,促进显色反应发生。
6.根据权利要求1所述的生乳中尿素含量的分析测试方法,其特征在于步骤(2)中,该测试存在Fe3+的干扰,Fe3+在水溶液中显黄色, 其色度会对测试结果产生影响, 可以借助还原剂抗坏血酸溶液将Fe3+还原为Fe2+消除其影响。
7.根据权利要求1所述的生乳中尿素含量的分析测试方法,其特征在于步骤(3)中,所述反应试纸的使用方法是取10~30μL样液滴加到试纸上,反应时间为5~15分钟,用光电测色仪在420~450 nm下测定试纸的反光值。
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CN114062353A (zh) * | 2020-07-30 | 2022-02-18 | 重庆康巨全弘生物科技有限公司 | 母乳检测设备 |
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