CN110974737A - 包含葛根提取物或由此衍生的化合物的改善皮肤用组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及包含葛根提取物或由此衍生的化合物的改善皮肤用组合物。本发明的组合物的减少黑色素、抗炎、促进胶原蛋白合成、抗糖化效果出色,可以有效地用于皮肤美白、改善痤疮、增强皮肤弹性或者改善皱纹、抗氧化、皮肤保湿用途。因此,本发明的组合物可以用作对皮肤安全且改善皮肤状态的效果优秀的化妆料组合物、食品组合物、医药部外品组合物。
Description
技术领域
本发明涉及作为有效成分包含葛根或葛根花提取物、或者从上述提取物衍生的化合物的化妆料组合物、食品组合物或者医药部外品组合物。
具体地,涉及将上述物质作为有效成分包含的皮肤美白用、改善痤疮用、增强皮肤弹性或者改善皱纹用、抗氧化用、或者皮肤保湿用组合物。
背景技术
人类的皮肤颜色根据黑素细胞(melanocyte)的活动性、血管分布、皮肤厚度、人体内外的色素包含与否等各种原因而定,尤其是,黑素细胞中在酪氨酸酶(tyrosinase)等酶的作用下产生的被称为黑色素的黑色色素非常重要。黑色素存在于皮肤,起到保护身体免受紫外线等的影响的重要功能,但是,公知为:在过量产生时,促进色素沉着以及皮肤老化,在引发皮肤癌方面也起到主要作用。
为了治疗或者减轻过度的黑色素沉着,以往开始将具有抗坏血酸(ascorbicacid)、曲酸、熊果素(arbutin)、对苯二酚(hydroquinone)、谷胱甘肽(glutathione)、酪氨酸酶阻碍活性的物质配合于化妆料或医药品中来进行了使用。但是,由于美白效果不足、对皮肤的安全性问题、搭配在化妆料时的安全性问题等,这些物质的使用受到了限制。
此外,最近,环境污染带来的紫外量的增加、洋化的生活习惯、压力等威胁皮肤健康的要素逐渐增加。这些要素引发皮肤污染、干燥、敏感、皮肤免疫系统异常等,最终,导致皮肤炎、粗糙、急剧老化等。
尤其是,增加体内活性氧类的浓度,这样的活性氧类攻击作为细胞构成成分的脂质、蛋白质、糖以及DNA等,引发过氧化反应,从而存在促进皮肤老化的问题。由此,要求开发出具有抑制活性氧类的产生的抗氧化效果、由此实现的抗老化(防止皮肤老化)效果的化妆料组合物。
另一方面,为了保护皮肤而使用化妆品,但是,公知为:表面活性剂、防腐剂、香料、防晒剂、色素等各种成分在皮肤产生炎症或粉刺、浮肿等各种敏感(Maibach.H.I.,ContactDermatitis,6.369-404,1980)。此外,从太阳发射出来的紫外线也引发皮肤炎症,从体内排出的皮脂、汗、化妆品成分中的脂肪酸、蛋白质等由于存在于皮肤的皮肤常居菌被分解为毒性较强的物质,从而有可能引导皮肤炎症。
炎症反应是保护生物体免受细菌等外部物质的进入和机械损伤的影响的生理反应,引起泛红、刺痛、火辣、肿胀、组织变化等现象,有时对相邻组织细胞和非细胞成分带来有害的损伤。因此,在引发炎症的原因不消失的情况下,最终引起慢性炎症,带来更加严重的组织损伤。由此,迫切需要开发出通过抗炎效果在开始即可抑制痤疮的化妆料组合物。
胶原蛋白是在皮肤的成纤维细胞(fibroblast)中产生的主要基质蛋白质,执行如下功能:维持皮肤的机械坚固性和组织的结合力,细胞粘附的支撑、细胞分化的引导等。由于年龄的增加以及紫外线照射带来的光老化,胶原蛋白减少,由于分解胶原蛋白的胶原酶酶活性,促进胶原蛋白的减少。公知为:这与皮肤皱纹的形成也有紧密的关联。此外,胶原蛋白以及弹性纤维在保持真皮层内的水分起到重要的作用,据报道还参与通过皮肤保湿来维持皮肤弹力。
目前,作为增强皮肤弹性以及改善皱纹的化妆料,公知有视黄醇、腺苷、小球藻提取物等。公知为:视黄醇促进胶原蛋白合成且抑制弹性蛋白酶的物质,但是因不稳定且在应用于皮肤时出现刺激、出疹子等安全性问题,使用量受到了限制,小球藻提取物等由于保湿效果微弱,实质上难以期望增强皮肤弹性以及改善皱纹效果。
此外,在身体内部发生葡萄糖或者果糖等单糖在蛋白质所具有的蛋白质或者脂肪形成共价键的非酶反应,将其称为糖化(glycation)。被糖化的胶原蛋白使得在真皮层的细胞外基质胶原蛋白无法形成适当的结构,从而失去皮肤弹力,促进皱纹的产生。此外,通过糖化产生的最终糖化产物(Advanced glycation endproducts;AGEs)是呈褐色的物质,随着皮肤老化的进展,沉积在真皮层上部,减少在皮肤反射的反射光。因此,最终糖化产物被视为随着皮肤老化的进展而其量增加,造成脸色逐渐变黄变灰暗的物质之一(Hiroshi,O.et al,Skin Research and Technology,15,p.496,2009)。
作为抑制糖化的物质,公知有氨基胍(Aminoguanidine)、吡哆胺(Pyridoxamine)、阿司匹林(Aspirin)等,但是,由于对皮肤的安全性问题,这些物质的使用量受到了限制,或者效果微弱,因此存在实质上难以期望效果的问题。
在如上所述的背景下,本发明的发明人们对天然存在的天然资源中皮肤美白、改善痤疮(skin trouble)、增强皮肤弹性或者改善皱纹、抗氧化以及皮肤保湿效果出色的物质进行了研究,发现包含葛根或者葛根花提取物或者由该提取物衍生的化合物的组合物具有减少黑色素、抗炎症、促进胶原蛋白合成、抗糖化效果,从而完成了本发明。
发明内容
要解决的课题
本发明的目的在于提供作为有效成分包含葛根或葛根花提取物、或者从上述提取物衍生的化合物的化妆料组合物。
具体地,提供将上述物质作为有效成分包含的皮肤美白用、改善痤疮用、增强皮肤弹性或者改善皱纹用、抗氧化用或者皮肤保湿用化妆料组合物。
本发明的另一目的在于提供作为有效成分包含葛根或葛根花提取物、或者从上述提取物衍生的化合物的食品组合物。
本发明的又一个目的在于提供作为有效成分包含葛根或葛根花提取物、或者从上述提取物衍生的化合物的医药部外品组合物。
解决课题的手段
本发明的一方面提供作为有效成分包含葛根或葛根花提取物、或者从上述提取物衍生的化合物的化妆料组合物。
在本发明中,“葛根”表示甘葛藤(Pueraria thomsonii),具体地,表示甘葛藤的块根。是圆柱形状、四角锥形状或者半圆柱形状等形状,长度为12cm~15cm,直径为4cm~8cm。外表面呈黄白色或者浅褐色,没有去除外皮时为灰褐色,截面是白色。重且坚硬,切断面为粉状,纵截面具有由纤维构成的多条纵向纹理。韩医学中用于消化不良、头痛、贫血、痢疾、腹痛、酒精中毒、感冒、呕吐和便血等的治疗。
在本发明中,“葛根花”表示甘葛藤(甘葛藤)的花部位,具体地,表示花蕾或者刚开始开的花。韩医学中主要用在了便血的治疗,有独特的甜味,解除酒精中毒,保证肠胃健康。
在本发明中,葛根或者葛根花可以购买商业销售中的来使用或者可以使用自然采取或者栽培的。
鸢尾苷(tectorigenin)、射干苷(tectoridin)以及鸢尾苷-7-O-木糖葡萄糖苷(tectorigenin 7-O-xylosylglucoside)均在甘葛藤(Pueraria thomsonii)中被发现,但是,没有发现包括这三种成分全部的其它种。
在本发明中,“提取物”包括如通过葛根或葛根花的提取处理得到的提取液、上述提取液的稀释液或浓缩液、干燥上述提取液得到的干燥物、上述提取液的调和物或净化物、或者它们的混合物等提取液本身、以及利用提取液可以形成的所有剂型的提取物。上述提取物可以从葛根或葛根花的天然、杂交种或者变种植物提取,还可以从植物组织培养物提取。
在本发明中,不特别限定提取葛根或葛根花提取物的方法,可以按照本领域通常使用的方法进行提取。包括热水提取法、超声波提取法、过滤法、回流提取法等,可以单独采用这些方法或者同时采用两种以上的方法来进行,但是不限定于此。
在本发明中,不特别限定提取中使用的提取溶剂的种类,可以使用本领域公知的任意溶剂。作为提取溶剂,可以使用水(或者蒸馏水);甲醇、乙醇、丙醇、丁醇等的碳数为1至4的低级醇;甘油、丁二醇、丙二醇等多价醇;以及醋酸甲酯、醋酸乙酯、丙酮、苯、己烷、二乙醚、二氯甲烷等烃系溶剂;或者它们的混合物,优选地,可以使用C1-C4醇或者以C1-C4醇和水的混合物(混合溶剂)提取得到的溶剂。具体地,C1-C4醇可以是甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇或者丁醇,优选地,可以是乙醇和水的混合溶剂。此外,可以使用上述溶剂将葛根或葛根花提取一次以上来制备溶剂提取物,还可以制备将上述溶剂提取物减压蒸馏之后冷冻干燥或者喷雾干燥得到的干燥提取物。
在本发明的一实施例中,使用水(或者蒸馏水)制备葛根以及葛根花提取物后确认了改善皮肤效果。
在本发明中,葛根或葛根花提取物可以以其分馏物、其加工物、包含其的动植物、其提取物的方式包括。
在本发明中,“分馏物”表示为了从包括多种不同的构成成分的混合物分离出特定成分或者特定成分组而进行分馏得到的结果物。
在本发明中,不特别限定得到分馏物的分馏方法,可以按照本领域常规使用的方法进行。作为上述分馏方法的非限定性例子有在提取葛根或葛根花得到的提取物进行预定的溶剂处理,从而从上述提取物得到分馏物的方法,但是不限定于此。
不特别限定上述分馏中使用的溶剂的种类,可以使用本领域公知的任意的溶剂。作为上述分馏溶剂可以使用水、醇等极性溶剂;己烷(Hexane)、醋酸乙酯(Ethylacetate)、氯仿(Chloroform)、二氯甲烷(Dichloromethane)等非极性溶剂,可以单独使用这些溶剂或者混合两种以上使用,但是不限定于此。
具体地,在本发明中,从葛根或葛根花提取物衍生的化合物可以是下面的化学式1至化学式3表示的化合物中的一种。
[化学式1]
[化学式2]
[化学式3]
以化学式1表示的化合物是鸢尾苷-7-O-木糖葡萄糖苷(tectorigenin7-O-xylosylglucoside),是分子式为C27H30O15、分子量为594.5的化合物。以化学式2表示的化合物是射干苷(tectoridin),是分子式为C22H22O11、分子量为462.4的化合物。以化学式3表示的化合物是鸢尾苷(tectorigenin),是分子式为C16H12O6、分子量为300.26的化合物。
上述三种化合物是异类黄酮系化合物的一种,公知为可以从葛根或葛根花提取物获取。
在本发明中,不特别限定上述化合物的获取途径,可以按照本领域公知的方法化学合成、或者从葛根或葛根花提取物或者其它种类的天然物分离、或者购买销售中的物质来使用。
具体地,本发明的化妆料组合物可以是皮肤美白用、改善痤疮用、增强皮肤弹性或者改善皱纹用、抗氧化用、或者皮肤保湿用。
在本发明中,“皮肤美白”是指阻碍黑色素的合成而提亮肤色,改善紫外线、荷尔蒙或者遗传导致的黄褐斑或雀斑等皮肤色素沉着过多。这样的美白效果可以通过例如减少黑色素总量来实现,但是,本发明不限定于这样的作用机理。
在本发明中,“痤疮(skin trouble)改善”是指抑制或者阻碍皮肤出现敏感或者缓解已经出现的敏感,可以通过抗炎来实现,但是,本发明不限定于这样的作用机理。
上述痤疮表示由于在巨噬细胞中的过量的一氧化氮的生成引发的炎症而导致可能发生的皮肤疾病。只要是与炎症有关的皮肤疾病,则与其种类无关而全部包括其中,上述与炎症有关的皮肤疾病包括特发性皮肤炎、牛皮癣、因放射线、化学物质、烧伤等引发的红斑性疾病、酸烧伤、水泡性皮肤病、苔癣类疾病、过敏带来的瘙痒、脂溢性湿疹、玫瑰痤疮、寻常型天疱疮、多形渗出性红斑、结节性红斑、龟头炎、外阴炎、斑秃等炎症性脱发、皮肤T-细胞淋巴瘤等,具体地,可以是皮肤出疹子、青春痘、粉刺、酒渣鼻(红鼻头),但是不限定于此。
上述抗炎表示抑制在皮肤发病的炎症,可以通过抑制过量的一氧化氮(nitricoxide;NO)的生成来实现。尤其是,本发明的组合物可以具有通过抗炎效果改善青春痘等痤疮的效果。
在本发明中,“增强皮肤弹性”是指使皮肤下垂或松弛的程度变得缓慢。此外,“改善皱纹”是指抑制或者阻碍皮肤出现皱纹或者缓解已经出现的皱纹。
在本发明中,“抗氧化”是指抑制根据细胞内代谢或者紫外线的影响带来的氧化压力由高反应性的自由基(free radical)或者活性氧种(reactive oxygen species)带来的细胞氧化,包括去除自由基或者活性氧而减少自由基或者活性氧带来的细胞损伤。
在本发明中,“皮肤保湿”是指向皮肤增加湿润感,维持滋润状态。在提高皮肤保湿效果时,也可以给改善皮肤皱纹、增强弹力带来有利的影响。
具体地,本发明的组合物可以具有减少黑色素效果、抗炎效果、促进胶原蛋白合成效果、抗糖化效果。在本发明的一实施例中,葛根提取物、葛根花提取物、以化学式1至化学式3表示的化合物分别抑制黑色素产生,抑制NO生成,促进第一型胶原蛋白(type Ⅰcollagen)的合成,具有抗氧化效果以及抗糖化效果(表1至表5),从而发现本发明的组合物可以有效地使用于皮肤美白、改善痤疮、增强皮肤弹性或者改善皱纹、抗氧化和/或皮肤保湿用途。
本发明的化妆料组合物可以制备成选自由溶液、外用软膏、霜、泡沫、营养化妆水、柔性化妆水、面膜、柔化水、乳液、隔离霜、精华液、皂、液体洗涤料、入浴剂、防晒霜、防晒油、悬浮液、乳浊液、糊、凝胶、润肤液、粉、皂、含表面活性剂的清洁剂、油、粉末状粉底、乳浊液粉底、肤蜡粉底、贴片以及喷雾构成的群的剂型,但是不限定于此。
此外,本发明的化妆料组合物还可以包括一种以上的配合于一般的皮肤化妆料中的化妆品学上能够允许的载体,作为通常的成分,例如可以适当地配合油分、水、表面活性剂、保湿剂、低级醇、增稠剂、螯合剂、色素、防腐剂、香料等,但是不限定于此。包含在本发明的化妆料组合物中的化妆品学上能够允许的载体根据剂型而不同。
在本发明的剂型是软膏、糊、霜或者凝胶时,作为载体成分可以利用动物性油、植物性油、蜡、石蜡、淀粉、黄蓍胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅酮、膨润土、二氧化硅、滑石、氧化锌或者它们混合物,但是不限定于此。
在本发明的剂型是粉或者喷雾时,作为载体成分可以利用乳糖、滑石、二氧化硅、氢氧化铝、硅酸钙、聚酰胺粉或者它们混合物,尤其是,在喷雾时,还可以包括氯氟烃、丙烷/丁烷或者二甲醚等推进剂,但是不限定于此。
在本发明的剂型是溶液或者乳浊液时,作为载体成分利用溶剂、溶解剂或者乳浊剂,例如可以使用水、乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、醋酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁基乙二醇油,尤其是,可以利用棉籽油、花生油、玉米籽油、橄榄油、蓖麻油以及麻油、甘油脂肪族酯、聚乙二醇或者脱水山梨糖醇的脂肪酸酯,但是不限定于此。
在本发明的剂型是悬浮液时,作为载体成分可以利用水、乙醇或者丙二醇等液相的稀释剂、乙氧基异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇酯以及聚氧乙烯山梨糖醇酐酯等悬浮剂、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂或者黄蓍胶等,但是不限定于此。
在本发明的剂型是皂时,作为载体成分可以利用脂肪酸的碱金属盐、脂肪酸半酯盐、脂肪酸蛋白质水解物、羟乙基磺酸盐、羊毛脂衍生物、脂肪族醇、植物性油、甘油、糖等,但是不限定于此。
本发明的其它方面提供作为有效成分包含葛根或葛根花提取物、或者从上述提取物衍生的化合物的食品组合物。
具体地,在本发明中,从葛根或葛根花提取物衍生的化合物可以是以下面的化学式1至化学式3表示的化合物中的一种。
[化学式1]
[化学式2]
[化学式3]
具体地,本发明的食品组合物可以是皮肤美白用、改善痤疮用、增强皮肤弹性或者改善皱纹用、抗氧化用、或者皮肤保湿用。
葛根、葛根花、化学式1至化学式3、皮肤美白、改善痤疮、增强皮肤弹性或者改善皱纹、抗氧化、皮肤保湿如上所述。
上述食品组合物可以以保健功能食品方式使用,但是不限定于此。此外,本发明的食品组合物除了葛根或葛根花提取物、或者从上述提取物衍生的化合物之外,还可以包括食品学上允许的食品辅助添加剂。
在本发明中,“食品辅助添加剂”表示可以辅助性地添加于食品中的构成元素,在制备各剂型的保健功能食品时添加的添加剂,本领域技术人员可以适当地选择使用。作为食品辅助添加剂的例子包括各种营养剂、维生素、矿物质(电解质)、合成调味剂以及天然调味剂等调味剂、着色剂以及填充剂、果胶酸及其盐、海藻酸及其盐、有机酸、保护性胶体增稠剂、pH调节剂、稳定剂、防腐剂、甘油、醇、碳酸饮料中使用的碳酸化剂等,但是不限定于此。
本发明的食品组合物中可以包括保健功能食品。上述保健食品是指使用具有对人体有用的功能性的原材料或成分,制备以及加工成片剂、胶囊、粉末、颗粒、液状以及丸等形态的食品。其中,功能性是指针对人体的结构以及功能调节营养素或者在生理学作用等保健用途中得到有用的效果。本发明的保健功能食品可以通过本领域通常使用的方法制备,在上述制备时,可以添加本领域中通常添加的原材料以及成分来制备。此外,对于上述保健功能食品的剂型,只要是被认为是保健功能食品的剂型,则可以制备成任何剂型。本发明的食品组合物可以被制备多种形态的剂型,与一般的药品不同,是以食品作为原材料,所以具有没有长期服用药品时有可能出现的副作用等的优点,携带性出色,因此,本发明的保健功能食品可以作为用于皮肤美白、改善痤疮、增强皮肤弹性或者改善皱纹、抗氧化、增强皮肤保湿效果的辅助剂摄入。
本发明的保健功能食品可采取的形态不受限制,可以包括通常意义的所有食品,可以与功能性食品等本领域公知的术语混合使用。而且,本发明的保健功能食品还可以混合根据本领域技术人员的选择可以包含在食品中的恰当的其它辅助成分和公知的添加剂来制备。作为可添加的食品的例子有包括肉类、肠、面包、巧克力、糖果类、点心类、饼干类、比萨、方便面、其它面类、口香糖类、冰淇淋类的乳制品、各种汤、饮料、茶、口服液、含酒精饮料以及维生素复合物等,可以添加于以根据本发明的提取物作为主要成分制备的汁、茶、软糖以及果汁等中制备。此外,还包括作为给动物的饲料使用的食品。
本发明的又一个方面提供作为有效成分包含葛根或葛根花提取物、或者从上述提取物衍生的化合物或者药学上能够允许的该化合物的盐的医药部外品(Quasi-drug)组合物。
具体地,在本发明中,从葛根或葛根花提取物衍生的化合物可以是以下面的化学式1至化学式3表示的化合物中的一种。
[化学式1]
[化学式2]
[化学式3]
具体地,本发明的医药部外品组合物可以是皮肤美白用、改善痤疮用、增强皮肤弹性或者改善皱纹用、抗氧化用、或者皮肤保湿用。
葛根、葛根花、化学式1至化学式3、皮肤美白、改善痤疮、增强皮肤弹性或者改善皱纹、抗氧化、皮肤保湿如上所述。
本发明的医药部外品组合物中除了葛根或葛根花提取物、或者从上述提取物衍生的化合物之外,根据需要还可以包括药学上能够允许的载体、赋形剂或者稀释剂。在不影响本发明的效果的情况下,不限定上述药学上能够允许的载体、赋形剂或者稀释剂,例如可以包括填充剂、增量剂、结合剂、湿润剂、崩解剂、表面活性剂、润滑剂、甜味剂、芳香剂、保存剂等。
本发明的药学上能够允许的载体、赋形剂或者稀释剂的代表性的例子有乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、木糖醇、麦芽糖醇、淀粉、明胶、甘油、阿拉伯胶、海藻酸盐、磷酸钙、碳酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸镁、矿物油、丙二醇、聚乙二醇、植物油、可注射的酯、合成脂肪酸酯(witepsol)、聚乙二醇、twin 61、可可脂、树脂(laurinum)等,但是不限定于此。
作为本发明的医药部外品组合物可以例举消毒清洁剂、淋浴泡沫、软膏液、湿纸巾、涂布剂等,但是不限定于此,医药外用品的制剂化方法、用量、利用方法、构成成分等可以从本领域公知的通常的技术适当地选择。
此外,本发明的组合物中包含的以化学式1至化学式3表示的化合物可以以化妆品学、食品学或者药学上能够允许的盐的方式包括。这表示作为阳离子和阴离子通过静电引力结合的物质的盐中、在化妆品学、食品学或者药学上可以使用的形态的盐,且表示其具有对使用者较为无毒且无害的有效作用的浓度,该盐引发的副作用不会降低化合物的有利功效的任意的所有有机或者无机附加盐。作为这样的盐有通过游离酸(free acid)形成的酸附加盐或者通过盐基形成的金属盐。
作为游离酸,可以使用有机酸和无机酸,作为有机酸,可以使用甲磺酸、对甲苯磺酸、醋酸、三氟乙酸、马来酸(maleic acid)、琥珀酸、草酸、苯甲酸、酒石酸、延胡索酸(fumaric acid)、扁桃酸、丙酸(propionic acid)、柠檬酸(citric acid)、乳酸(lacticacid)、乙醇酸(glycollic acid)、葡萄糖酸(gluconic acid)、半乳糖醛酸、谷氨酸、戊二酸(glutaric acid)、葡萄糖醛酸(glucuronic acid)、天冬氨酸、抗坏血酸、羧酸、香草酸、氢碘酸(hydroiodic acid)等,作为无机酸,可以使用盐酸、磷酸、硫酸、硝酸、酒石酸等,但是不限定于此。
此外,可以使用盐基制备化妆品学或者药学上能够允许的金属盐。碱金属盐或者碱土金属盐例如通过将化合物溶解于过量的碱金属氢氧化物或者碱土金属氢氧化物溶液中,过滤非溶解化合物盐之后蒸发并干燥过滤液。这时,在化妆品学上,作为金属盐特别适合制备钠、钾或者钙盐,但是不限定于此。此外,与其对应的银盐可以通过将碱金属或者碱土金属盐与适当的银盐(例如,硝酸银)反应而得到。
本发明的以化学式1至化学式3表示的化合物或者其盐除了包括水合物、乙醇化物等形态的溶剂化的形态之外,还可以以非溶剂化(unsolvated)形态存在。此外,本发明的以化学式1至化学式3表示的化合物或者其盐可以以结晶型或者非晶型形态存在,这样的所有的物理形态均包括在本发明的保护范围内。
本发明的化妆料组合物、食品组合物、医药部外品组合物还可以追加包含呈现相同或者相似的功能的一种以上的有效成分。例如,可以包含在本发明所属技术领域中公知的皮肤美白、改善痤疮、增强皮肤弹性或者改善皱纹、抗氧化和/或皮肤保湿成分。通过上述追加成分,进一步增强本发明的组合物的皮肤美白、改善痤疮、增强皮肤弹性或者改善皱纹、抗氧化和/或皮肤保湿效果。本领域技术人员根据复合使用时的皮肤安全性、剂型化难易度、有效成分的稳定性等可以适当地调节追加成分的含量范围。
而且,本发明提供包括将葛根或葛根花提取物、或者从上述提取物衍生的化合物涂覆在个体皮肤上的步骤的皮肤美白、改善痤疮、增强皮肤弹性或者改善皱纹、抗氧化、或者皮肤保湿方法。上述个体可以包括但不限定于鼠、家畜、人等的哺乳动物。
发明效果
本发明的组合物具有出色的减少黑色素、抗炎、促进胶原蛋白合成、抗糖化效果,可以有用地使用于皮肤美白、改善痤疮、增强皮肤弹性或者改善皱纹、抗氧化、皮肤保湿用途。因此,本发明的组合物可以用作对于皮肤安全且皮肤状态改善效果出色的化妆料组合物、食品组合物、医药部外品组合物。
具体实施方式
下面,通过实施例进一步详细说明本发明。这些实施例用于进一步具体说明本发明,本发明的保护范围并不限定于这些实施例。
实施例1:葛根提取物的制备
对葛根进行充分干燥并细切,之后将干燥重量100g放入烧瓶内利用1000g的提取溶剂(蒸馏水)冷浸3天,进行了提取。将冷浸后的提取物利用具有0.2μm的气孔大小的过滤器进行过滤,制备了葛根提取物。
实施例2:葛根花提取物的制备
对葛根花和花蕾进行充分干燥并细切,之后将干燥重量100g放入烧瓶内利用1000g的提取溶剂(蒸馏水)冷浸3天,进行了提取。将冷浸后的提取物利用具有0.2μm的气孔大小的过滤器进行过滤,制备了葛根花提取物。
实施例3:化合物的准备
对于化合物1至3的获得途径不加以特别限定,可以按照本领域公知的方法化学合成或者使用销售中的物质用于实验。
实验例1:基于抑制黑色素生成的美白效果
将实施例1以及实施例2、化合物1至3添加在鼠的黑色素瘤细胞(B-16mousemelanoma cell)的培养液,测量细胞级别的黑色素总量,从而确认了美白效果(Lotan R.,Lotan D.Cancer Res.40:3345-3350,1980)。实验之前,对鼠的黑色素瘤细胞进行了毒性评价,选择无毒的浓度进行了美白评价。
使得培养液的最终浓度达到10ppm或者100ppm,作为对照群的熊果素在培养基添加至达到100ppm,分别对B-16黑色素瘤细胞进行处理,培养了3天。之后,对细胞进行胰蛋白酶(trypsin)处理,从培养容器取出并离心分离之后,提取了黑色素。对于取出的细胞,添加氢氧化钠溶液(1N浓度)1mL,煮10分钟,融化黑色素,之后利用分光光度计,在400nm测量了吸光度,从而测量了所产生的黑色素的量。
黑色素量按照表示单位细胞数(1×106cell)的吸光度的方法测量,计算相对于对照群的相对的黑色素总量作为阻碍率(%),表1中整理出了其结果。
【表1】
试料 | 黑色素总量阻碍率(%) |
对照群 | - |
阳性对照群(熊果素,100ppm) | 47.76 |
实施例1(100ppm) | 50.41 |
实施例2(100ppm) | 52.78 |
化合物1(10ppm) | 48.31 |
化合物2(10ppm) | 63.08 |
化合物3(10ppm) | 32.72 |
从上述表1的结果可以得知,葛根提取物(实施例1)以及葛根花提取物(实施例2)、化合物1至3在低浓度下也均表现出优秀的黑色素减少效果,确定出可以用于皮肤美白用途。
实验例2:基于抑制NO生成的抗炎效果
为了确认实施例1以及实施例2、化合物1至3的抗炎效果以及改善痤疮效果,按照利用RAW264.7细胞株(ATCC number:CRL-2278)的GRIESS方法,实施了一氧化氮(nitricoxid:NO)形成抑制力实验。
具体地,将鼠的巨噬细胞、即RAW264.7细胞传代培养数次,在24-目板上各放入3×105个,之后培养了24小时。接着,更换为将最终浓度稀释成10或者100ppm的浓度的细胞培养基。这时,将作为抑制NO生成物质的L-NMMA(L-NG-monomethylarginine)作为阳性对照群一同进行处理,培养了30分钟,作为刺激源,分别处理LPS(lipopolysaccharide:脂多糖)1μg,培养了24小时。各取出上层液体100μl,转移到96-目板,分别添加GRIESS溶液100μL,在常温下使其反应10分钟。通过测量540nm中的吸光度,从而计算出NO生成阻碍率(%),表2示出了其结果。
【表2】
试料 | NO生成阻碍率(%) |
对照群(DMSO,10ppm) | - |
阳性对照群(L-NMMA,10ppm) | 30.58 |
实施例1(100ppm) | 24.41 |
实施例2(100ppm) | 26.86 |
化合物1(100ppm) | 99.51 |
化合物2(100ppm) | 99.52 |
化合物3(10ppm) | 51.94 |
从上述表2的结果可以得知,葛根提取物(实施例1)以及葛根花提取物(实施例2)、化合物1至3均表现出出色的阻碍NO生成的效果,确定出可以用于改善痤疮用途。此外,在与其它的抗炎物质一同使用时还可以期待提升效果。
实验例3:在源于人体的成纤维细胞中促进第一型胶原蛋白(type Ⅰ collagen)合
成的效果
将实施例1以及实施例2、化合物1至3添加在源于人体成纤维细胞的培养液,在细胞水平上确认了促进第一型胶原蛋白合成效果。合成的胶原蛋白的测量是利用PICP EIAkit(Procollagen TypeⅠC-Peptide Enzyme Immuno Assay KIT)确定数量。为了测量胶原蛋白合成量,将实施例1以及实施例2、化合物1至3添加在成纤维细胞的培养基(DMEM培养基)培养了48小时,之后,采取培养液,以PICP EIA试剂盒,在低浓度,利用分光光度计在450nm测量了第一型胶原蛋白合成程度。为了对比效果,对于未处理试料的成纤维细胞的培养培养基(阴性对照群)和将维生素C(阳性对照群)添加至最终浓度达到52.85μg/mL的试料,按照相同的方法测量了胶原蛋白合成程度。作为胶原蛋白生成增加率(%),计算相对于对照群的相对胶原蛋白生成量的比率,表3示出了其结果。
【表3】
从上述表3的结果可以得知,葛根提取物(实施例1)以及葛根花提取物(实施例2)、化合物1至3均促进胶原蛋白合成,可以得知可以用于增强皮肤弹性或者改善皱纹、皮肤保湿用途。尤其是,发现化合物1至3即使以比阳性对照群更低的浓度使用,表现出相似或者更加出色的胶原蛋白合成效果。
实验例4:基于消除自由基的抗氧化效果
为了确认实施例1以及实施例2、化合物1至3的抗氧化作用,测量了消除自由基的活性。利用DPPH测量了消除自由基的活性。DPPH是从西格玛(Sigma Co.,Ltd,美国)购买使用。首先,制备了1.5mM(0.06㎎/mL)的标准DPPH乙醇溶液。之后,利用三次蒸馏水制备1000μg/mL维生素C溶液之后,每次稀释1/2,连续稀释,制备出1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625、7.8125、3.90625、1.953125、0.9765625、0.48828125μg/mL浓度的维生素C试料。此外,实施例1以及2从1000000μg/mL浓度起准备了化合物的稀释液,化学式1至3以与维生素C相同的浓度准备了化合物的稀释液。之后,将上述试料和标准DPPH溶液按照相同的比例添加后搅拌均匀,之后在37℃,反应30分钟,在520nm测量了吸光度。作为自由基消除性,求出去除50%的无添加对照群的自由基所需的维生素C以及化学式1的化合物的浓度IC50,表5示出了其结果。
【表4】
试料 | IC50(%w/v) |
阳性对照群(维生素C) | 0.0005 |
实施例1 | 0.0040 |
实施例2 | 0.0042 |
化合物1 | 0.0015 |
化合物2 | 0.0024 |
化合物3 | 0.0012 |
从上述表4的结果可以得知,葛根提取物(实施例1)以及葛根花提取物(实施例2)、化合物1至3均表现出优秀的消除自由基的活性,确定出可以用于抗氧化用途。此外,在皮肤美白、增强皮肤弹性或者改善皱纹、皮肤保湿用途中也可以期待与其它物质一起表现出提升效果。
实验例5:抗糖化(anti-glycation)效果
为了确认阻碍糖化功效,;利用L-arginine和葡萄糖,测量了阻碍糖化的活性。
首先,利用1M磷酸盐缓冲剂(pH 7.4),融化1M L-精氨酸(arginine)、1M葡萄糖,利用1M磷酸盐缓冲剂,将试料稀释至50ppm、100ppm。将1M L-精氨酸和1M磷酸盐缓冲剂按照1:4比例混合,之后在96-目板上分别分株80μl。在其中分别添加了100μL的分别稀释成10ppm、100ppm的试料和作为阳性对照群使用的0.01M氨基胍(aminoguanidin)。将这些试料均匀搅拌后,最后,添加了利用1M磷酸盐缓冲剂稀释成葡萄糖的最终浓度为0.1M的葡萄糖。在70℃,反应4小时。利用分光光度计,在420nm测量了96-目板的吸光度,从而测量了糖化程度。
下面式的Glycation实验群是投入1M L-精氨酸和1M葡萄糖引发糖化的实验群,为了测量试料本身的吸光度,没有放入葡萄糖,仅放入1M L-精氨酸和试料,在420nm测量了吸光度。按照下面的公式计算糖化阻碍率(%),表5示出了其结果。
【表5】
试料 | 糖化阻碍率(%) |
对照群(DMSO,50ppm) | - |
阳性对照群(Aminoguanidine,55ppm) | 48.12 |
实施例1(100ppm) | 41.28 |
实施例2(100ppm) | 40.08 |
化合物1(10ppm) | 41.67 |
化合物2(10ppm) | 38.95 |
化合物3(10ppm) | 34.75 |
从上述表5的结果可以得知,发现葛根提取物(实施例1)以及葛根花提取物(实施例2)、化合物1至3均表现出优秀的抗糖化效果。此外,在皮肤美白、增强皮肤弹性或者改善皱纹、皮肤保湿用途中也可以期待与其它的物质一起表现出提升效果。
基于以上说明,本发明所属技术领域的技术人员可以理解在没有脱离本发明的技术思想或者变更必要的特征的情况下本发明还可以以其它的具体方式实施。对此,以上说明的实施例在所有的方面仅为示例性的,应该理解为不是用于限定本发明的。应该解释为本发明的保护范围包括权利要求书的意思以及范围和从等同概念导出的所有的变更或者变形的方式,而不应该上述的详细说明。
Claims (15)
1.一种化妆料组合物,其中,
作为有效成分包含葛根或葛根花提取物、或者从上述提取物衍生的化合物。
3.根据权利要求1所述的化妆料组合物,其中,
上述组合物是皮肤美白用组合物。
4.根据权利要求1所述的化妆料组合物,其中,
上述组合物是改善痤疮用组合物。
5.根据权利要求1所述的化妆料组合物,其中,
上述组合物是增强皮肤弹性或者改善皱纹用组合物。
6.根据权利要求1所述的化妆料组合物,其中,
上述组合物是抗氧化用组合物。
7.根据权利要求1所述的化妆料组合物,其中,
上述组合物是皮肤保湿用组合物。
8.根据权利要求1至7中的任意一项所述的化妆料组合物,其中,
上述组合物具有减少黑色素、抗炎、促进胶原蛋白合成或者抗糖化效果。
9.根据权利要求1至7中的任意一项所述的化妆料组合物,其中,
上述组合物具有选自由溶液、外用软膏、霜、泡沫、营养化妆水、柔性化妆水、面膜、柔化水、乳液、隔离霜、精华液、皂、液体洗涤料、入浴剂、防晒霜、防晒油、悬浮液、乳浊液、糊、凝胶、润肤液、粉、皂、含表面活性剂的清洁剂、油、粉末状粉底、乳浊液粉底、肤蜡粉底、贴片以及喷雾构成的群的剂型。
10.一种食品组合物,其中,
作为有效成分包含葛根或葛根花提取物、或者从上述提取物衍生的化合物。
12.根据权利要求10或者11所述的食品组合物,其中,
上述组合物是皮肤美白用食品组合物、改善痤疮用食品组合物、增强皮肤弹性或者改善皱纹用食品组合物、抗氧化用食品组合物、或者皮肤保湿用食品组合物。
13.一种医药部外品组合物,其中,
作为有效成分包含葛根或葛根花提取物、或者从上述提取物衍生的化合物。
15.根据权利要求13或14所述的医药部外品组合物,其中,
上述组合物是皮肤美白用医药部外品组合物、改善痤疮用医药部外品组合物、增强皮肤弹性或者改善皱纹用医药部外品组合物、抗氧化用医药部外品组合物、或者皮肤保湿用医药部外品组合物。
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