CN110946099A - 一种提高双壳贝类苗种繁育产量的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种通过添加脂类营养物提高双壳贝类繁育产量的方法，即将亲本性腺发育和幼贝生长发育所缺的必需脂类营养物质乳化，直接投喂给促熟阶段的亲本或附着后的幼贝。根据本发明提供的乳化方法，双壳贝类亲本和幼贝所需的脂类营养物质能被乳化为可滤食的脂滴微颗粒，而且根据本发明提供的投喂策略，投喂该乳化后的脂类可以明显提高亲贝类产卵量和附着后幼贝的生长速度。

Description

一种提高双壳贝类苗种繁育产量的方法

技术领域

本发明属于水产养殖亲本和幼体营养与投喂技术领域，具体涉及一种提高双壳贝类苗种繁育产量的方法。

背景技术

双壳贝类中许多种类(牡蛎、缢蛏、泥蚶和青蛤等)具有较高经济价值，在我国海水养殖业中占有重要的地位。双壳贝类主要以滤食水体中的微藻为食，人工配合饲料一直无法适用于双壳贝类，这严重制约了双壳贝类的工厂化繁育。

在贝类繁育生产中，亲本性腺发育欠成熟、幼贝生长缓慢是目前苗种培育普遍问题。生产中通常采用投喂人工培养饵料微藻来促进亲本性腺发育和幼贝生长，然微藻大规模培养成本高、培养成败受环境影响大、且其营养组成不易人为控制，效果随饵料微藻品种不同而差异较大。

发明内容

本发明的目的是提供一种提高双壳贝类苗种繁育产量的方法，从而提高双壳贝类苗种繁育质量和产量的方法，从而弥补现有技术的不足。

本发明首先提供一种促进双壳贝类亲本性腺发育，是在培养贝类亲本时，投喂用乳化剂进行乳化处理的高不饱和脂肪酸、磷脂和脂溶性的维生素E；

所述的高不饱和脂肪酸，优选为二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)；

所述的乳化剂，包含有蔗糖脂肪酸酯、聚甘油脂肪酸酯和吐温20；其一种具体的比例为5：3：2；

本发明还提供一种促进双壳贝类幼贝发育的方法，是在培养的过程中投喂用乳化剂进行乳化处理的高不饱和脂肪酸和磷脂；

所述的高不饱和脂肪酸，优选为二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)；

所述的幼贝为发育至变态附着后的幼贝。

上述的方法，是将乳化的营养物质微颗粒泼洒到培养水体中，投喂的乳化微颗粒密度控制在10粒·μL^-1左右。

本发明通过在亲贝促熟阶段和幼贝培育阶段投喂乳化的营养物质，可使亲贝性腺快速成熟，幼贝生长速度加快。与单独投喂饵料微藻相比，增加投喂本发明的营养物质能明显提高亲本性腺质量和发育速度，幼贝生长优于单独投喂饵料微藻。本发明亦可在饵料微藻缺乏和不足时，部分替代饵料微藻。与现有技术相比，本发明的方法可精确操控贝类摄入所需营养物质的种类和含量，实现贝类繁育阶段所需脂类营养素的精确补充，无需饵料微藻培养所需环境条件和设备，不受应用环境条件限制，能够满足规模化贝类苗种繁育的需求。

附图说明

图1为本发明所制备的乳化营养物质颗粒。

图2亲贝摄食所制备营养物质30min后消化道解剖图。

图3幼贝摄食所制备营养物质30min后显微观察图，箭头所示红色为幼贝消化道内营养物质。

具体实施方式

本发明在室内亲贝催熟和苗种培育水泥池内，根据亲贝和幼贝发育过程中的营养需求，有针对性的投喂能够促进亲本性腺发育和幼贝生长发育的乳化营养物。其中针对亲本性腺发育主要投喂高不饱和脂肪酸EPA和DHA以及维生素E，而针对幼贝主要投喂EPA、DHA和磷脂；其投喂的乳化微颗粒密度保持在10粒·μL^-1左右，投喂期间关闭充气设备，投喂后1h进行换水，投喂频率为3-4天/次。对于本发明所用的乳化剂均为食品级安全，营养物质为常规饲料添加剂，成本能为苗种繁育企业接受，乳化步骤和所需设备简单。

以下结合实施案例进一步说明本发明的方法技术内容和效果。

实施例1

在6个60m³(8m长，3m宽，高2.5m)的贝类苗种培育池(分别标记为1#-6#)内，加入自然盐度为20的沙滤海水，每池放入收购的泥蚶亲贝100kg左右。

其中1#-6#池每天分两次投喂角毛藻和金藻(金藻和角毛藻比例1：1，细胞密度100～120cell·μL^-1)进行亲贝促熟，每3～4d换新鲜水。

4#-6#除了投喂金藻和角毛藻外，每次换水之前投喂EPA、DHA和维生素E(比例为4：4：2)混合的乳化脂类。

为了确定最佳的乳化剂种类、乳化剂配比和乳化条件，选取蔗糖脂肪酸酯、聚甘油脂肪酸酯、吐温80和吐温20，根据各乳化剂的亲水亲油平衡值(HLB)，调节各乳化剂配比使HLB为13左右。选取HLB值13左右的乳化剂组合，以乳化剂：脂类等于5％，20％，35％，分别在水温60℃、75℃和100℃，均质0、1、2和4min的条件下进行乳化，乳化冷却至室温后静置1h，观察其分层情况，同时显微镜下观察其乳化颗粒大小和均匀程度。最终确定本实施例的最佳的乳化操作为：分别取蔗糖脂肪酸酯、聚甘油脂肪酸酯和吐温20三种乳化剂0.5g、0.3g和0.2g于容器中，同时称取2g EPA油、2g DHA油和1g维生素E与乳化剂混匀。加入75℃左右的温水，磁力搅拌搅拌1min，均质2min，磁力搅拌冷却至室温。显微镜下可见乳化颗粒大小合适且均一(图1)。

为了确定乳化脂类微颗粒乳化条件和投喂条件，在乳化过程中向脂类中加入油红O脂类染色剂以示踪脂类被摄食情况。乳化后在显微镜下观察可见染色的脂类颗粒直径从几微米到几十微米不等。将染色后的乳化脂类在充气或不充气的条件下投喂亲贝，分别在投喂后10min、30min和1h取亲贝解剖观察其肠道是否存在染色的脂类颗粒。结果在30min和1h亲贝肠道能观察明显的红色脂滴，充气组肠道红色脂滴少于不充气组，说明该乳化条件下得到的脂滴颗粒直径能够贝亲贝摄食，充气可快速使乳化脂滴聚集形成油膜，减少亲贝对脂类颗粒的摄食(图2)。同时，通过投喂不同浓度和不同频率脂滴颗粒比较发现，在浓度为10粒·μL^-1左右，每3-4天投喂1次效果最佳。投喂浓度和频率过高对亲本活力造成不利影响。

按照上述确定的投喂条件，将冷却的乳化脂类直接泼洒至亲本培育池，保持乳化脂滴颗粒浓度10粒·μL^-1左右，投喂期间停止充气，投喂1h后进行换水，投喂周期与换水周期保持一致，无需额外换水。在22～27℃自然温度下对泥蚶亲本进行18天的养殖促熟，解剖观察亲贝性腺成熟情况，可见4#-6#池亲贝性腺较1#-3#池更加饱满。结束后取30kg亲本进行干露应激催产，显微镜下血球计数板下计数产卵密度，每池平行计数3次，结果取均值(表1)。

表1乳化脂类投喂对泥蚶亲贝产卵密度的影响(

粒/mL)

由表1的结果可见，本发明的方法能显著促进泥蚶亲贝性腺发育，提高产卵量。

实施例2

在9个60m³(8m长，3m宽，高2.5m)的贝类苗种培育池(分别标记为1#-9#)中进行缢蛏幼贝培养试验。培养时，盐度13的自然海水经沙滤后入池，加入经200℃高温烘干并经200目(直径75μm)尼龙筛绢过滤后的海泥，使池底的海泥达1～2mm厚。每口池投放平均大小0.5mm的缢蛏幼贝1kg左右，培养过程中连续充气。以每次投喂前水体中藻类基本被缢蛏幼贝滤食清为参考，每天2次足量投喂金藻和角毛藻(细胞密度100～120cell·μL^-1)，在温度20～25℃下培养9天。

为证实幼贝能摄食乳化脂类微粒，在5L的塑料盆中，加入贝类苗种培育池的沙滤海水，放入苗池同等规格大小的缢蛏幼贝1g左右，投喂经油红O染色的乳化脂类微粒，30min后显微镜下观察，发现显微镜下可见幼贝肠道呈油红色，说明幼贝能摄食乳化脂类(图3)。

为了比较本发明方法对缢蛏幼贝培养的培养效果，分别取蔗糖脂肪酸酯、聚甘油脂肪酸酯和吐温20三种乳化剂1g、0.6g和0.4g与3g EPA油、3g DHA油和4g磷脂混匀。加入75℃左右的温水，磁力搅拌搅拌1min，均质2min，磁力搅拌脂类乳液冷却至室温制备A乳化脂颗粒。同时，按照实施例1的条件对2g EPA油、2g DHA油和1g维生素E经行乳化制备B乳化脂颗粒。在缢蛏幼贝培养的第3天和第6天泼洒投喂A乳化脂颗粒给4#-6#池幼贝，B乳化脂颗粒给7#-9#池。投喂期间关闭充气阀，投喂后1h进行翻池换水。培养9天后随机取样计算成活率，同时取20粒苗测量壳长，每个苗种培育池平行测量3次,结果取均值(表2)。

表2乳化脂类投喂(9d)对缢蛏幼贝存活和生长的影响(壳长，mm)

表2结果可见，在足量投喂金藻和角毛藻的基础上，额外投喂A乳化营养物质能够显著提高缢蛏幼贝的生长率，而投喂实施例1中用于促进性腺发育的B乳化营养物质对缢蛏幼贝生长无显著促进作用。

Claims (9)

1.一种促进双壳贝类亲本性腺发育的方法，其特征在于，所述的方法是在培养贝类亲本时，投喂用乳化剂进行乳化处理的高不饱和脂肪酸、磷脂和脂溶性的维生素E。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的高不饱和脂肪酸，为二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的乳化剂，包含有蔗糖脂肪酸酯、聚甘油脂肪酸酯和吐温20。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的乳化剂中蔗糖脂肪酸酯、聚甘油脂肪酸酯和吐温20的比例为5：3：2。

5.一种促进双壳贝类幼贝发育的方法，其特征在于，所述的方法是在双壳贝类幼贝培养的过程中投喂用乳化剂进行乳化处理的高不饱和脂肪酸和磷脂。

6.权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的高不饱和脂肪酸，为二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸。

7.权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的幼贝为发育至变态附着后的幼贝。

8.如权利1-7任一项所述的方法，其特征在于，所述的方法是将乳化的营养物质微颗粒泼洒到培养水体中。

9.如权利8所述的方法，其特征在于，所述的方法中投喂的乳化微颗粒密度控制在10粒·μL^-1左右。

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