CN112841456B - 促进脊尾白虾性腺发育的虾配合饲料及其制法与用途 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种促进脊尾白虾性腺发育的虾配合饲料，其原料质量百分比组成为：鱼粉30%；豆粕12~20%；花生麸5%；高筋面粉26.695~29.7%；磷脂1%；虾粉5%；鱿鱼内脏粉3%；鱼油2.8%；氯化胆碱0.5%；复合预混料1%；海藻酸钠2%；裂壶藻粉0.1~9%；紫球藻粉0.1~2%；5‑羟色胺肌酸酐硫酸盐0.001~0.01%。本发明还公开了虾配合饲料的制法与用途。本虾配合饲料粗蛋白含量高，使用裂壶藻粉、紫球藻粉和5‑羟色胺肌酸酐硫酸盐配合使用可以显著促进脊尾白虾性腺短期内（3天）快速发育。其制法中先混合干物质，再混合油脂和水分，可以确保原料的混合更加均匀，且制作工艺简单。

Description

促进脊尾白虾性腺发育的虾配合饲料及其制法与用途
技术领域
本发明专利涉及一种配合饲料，特别涉及一种促进脊尾白虾性腺发育的虾配合饲料；本发明还涉及该虾配合饲料的制备方法与用途。
背景技术
优质的苗种是虾类养殖业健康发展的前提，也是增产增收的必要保证。优质苗种的特征除了要求个体健康有活力之外，大小规格的统一也是一项非常重要的检测指标，尤其是对于虾类等可以互相残杀的生物而言，大小体格一致可以显著降低互相之间的残杀率。性腺发育成熟度是否一致，不仅影响虾类的繁殖性能，更是直接决定着虾类是否可以实现同步抱卵、同步产卵和同步孵化，因此这一指标在虾类苗种的培育中至关重要。
脊尾白虾（Exopalaemon carinicauda），分类上隶属于节肢动物门、甲壳纲、十足目、长臂虾科、长臂虾属、白虾亚属，主要分布于中国大陆沿海和朝鲜半岛西岸的浅海低盐水域。尤以黄海、渤海产量最高，是我国特有的3种经济虾类之一。脊尾白虾环境适应性强，生长快、肉质好、经济价值高，近年来养殖面积日益扩大，苗种需求日益增加，完善和发展脊尾白虾的人工苗种繁育技术迫在眉睫。
目前脊尾白虾苗种规模化繁育技术尚未建立，其原因主要是：
1、脊尾白虾个体偏小，单尾雌虾抱卵量在200-2000个，与日本囊对虾（Penaeus japonicus）、中国对虾（Fenneropenaeus chinensis）和凡纳滨对虾（Litopenaeus Vannamei）等对虾类单个个体的抱卵量即可达10余万相比，存在着育苗布池困难的问题（需要很多性腺发育同步个体才能完成一个育苗池的布池）；
2、脊尾白虾个体发育成熟度参差不齐，春季的个体性腺成熟期可以从3月一直延续到6月，因此短期内很难把大量具有相同性腺发育成熟度的个体搜集在一起。目前脊尾白虾养殖苗种主要通过自然海区纳苗或直接在养殖池放养抱卵虾自繁等获得，这对苗种数量和质量的影响很大，存在一定的不稳定性。
配合饲料具有营养全面、成本低廉、污染较小等优点，是虾类养殖的首选。如果可以通过投喂饲料的方式，在保证虾类正常营养摄入的同时，促进脊尾白虾性腺发育，使性腺发育时期基本同步，那么这对脊尾白虾的人工苗种繁育有着很大的帮助作用。在此背景下，亟待需要一种可以促使脊尾白虾性腺发育同步化的人工配合饲料。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种可以促使脊尾白虾性腺发育水平基本同步，在3天左右的时间即可启动性腺发育，且具有较高发育率的虾配合饲料。
本发明所要解决的另一个技术问题是提供了前述虾配合饲料的一种制备方法。
本发明所要解决的再一个技术问题是提供了前述虾配合饲料的用途。
本发明所要解决的技术问题是通过以下的技术方案来实现的。本发明是一种促进脊尾白虾性腺发育的虾配合饲料，其特点是，其原料质量百分比组成为：
鱼粉30%； 豆粕12~20%； 花生麸5%； 高筋面粉26.695~29.7%；
磷脂1%； 虾粉5%； 鱿鱼内脏粉3%； 鱼油2.8%；
氯化胆碱0.5%；复合预混料1%；海藻酸钠2%； 裂壶藻粉0.1~9%；
紫球藻粉0.1~2%；5-羟色胺肌酸酐硫酸盐0.001~0.01%。
本发明所述的虾配合饲料技术方案，其最优选的原料质量百分比组成为：
鱼粉30%； 豆粕16%； 花生麸5%； 高筋面粉26.698%；
磷脂1%； 虾粉5%； 鱿鱼内脏粉3%；鱼油2.8%；
氯化胆碱0.5%；复合预混料1%；海藻酸钠2%；裂壶藻粉6%；
紫球藻粉1%、5-羟色胺肌酸酐硫酸盐0.0025%。
本发明虾配合饲料技术方案中，所述的复合预混料可以采用市售的虾用复合预混料，虾用复合预混料以维生素、矿物质、微量元素等为原料。优选的虾用复合预混料方案是：在每1000g虾配合饲料中复合预混料的组成为：维生素A乙酸酯450 000IU；维生素D3 100000IU；d1-α-生育酚乙酸酯5g；甲萘醌0.5g；硝酸硫胺0.5g；核黄素0.7mg；盐酸吡哆醇0.6g；氰钴胺0.002g；D-泛酸钙2g；烟酰硫胺3.5g；叶酸0.15g；D-生物素0.006mg；L-抗坏血酸-2-磷酸脂10g；肌醇8mg；硫酸镁20g；硫酸亚铁2g；硫酸锌7.5g；硫酸锰2g；硫酸铜1.5g；氯化钴0.08g；亚硒酸钠0.01g；碘酸钙0.01g；以及适量的植酸酶、抗氧化剂和沸石粉。
本发明还公开了上述虾配合饲料的制备方法，其步骤如下：
①将原料干料按比例放入饲料搅拌机中混匀；
②加入油类原料混匀，加入5-羟色胺硫酸盐水溶液混匀得湿物料；
③将湿物料送入成型机内制成直径1.2mm的颗粒；
④用18~20目筛网将制成的颗粒饲料筛去碎粒及粉末，碎粒和粉末收集后再次重复步骤③；
⑤将颗粒平铺，自然条件下晾干，使饲料含水率保持在8%～11%；
⑥用18~20目筛网将干燥后的颗粒饲料筛去碎粒及粉末；包装即得；碎粒和粉末收集经浸湿后可再次重复步骤④进行回收利用。
发明人在促进脊尾白虾性腺发育方法的研究过程中，筛选出三种可以一定程度促进性腺发育的物质，即裂壶藻、紫球藻和5-羟色胺，通过一定组合方式的优化筛选，将这三种物质添加到饲料中，以期为脊尾白虾的性腺发育提供帮助。
裂壶藻，即裂殖壶菌（Schizochytrium），属于网粘菌门、网粘菌纲、破囊壶菌目、破囊壶菌科的一类海洋真菌，单细胞、球形。该菌可通过异养繁殖生产，其生产不受季节影响，无毒物污染，成分稳定；该菌可以合成二十二碳六烯酸（DHA），其被认为是一种极具实现工业化生产二十二碳六烯酸潜力的微生物。裂壶藻可以为虾类提供性腺发育所需的DHA，进一步加快虾类的性腺发育。
紫球藻，是紫球藻科、紫球藻属的一种淡水藻类植物。紫球藻中含有丰富的花生四烯酸（ARA）和二十碳五烯酸（EPA），ARA作为前列腺素的前体，可间接刺激内源性睾酮的产生，可间接促进甲壳类的性腺发育。
5-羟色胺肌酸酐硫酸盐，主成分为5-羟色胺（5-HT），是一种吲哚衍生物，又名血清素。参与甲壳动物色素迁移、生殖活动、蜕皮活动、骨骼肌收缩、血糖浓度等多项生理过程。有研究指出，5-HT能促进蜕皮抑制激素的释放，能促进促性腺激素的释放。应用于虾体内可以增加性腺指数、卵母细胞直径等，同时对虾类的生长、消化以及免疫方面也会产生一定的影响。
本发明在饲料中添加以上三种物质，可以对脊尾白虾的性腺发育起到良好的促进作用，实现性腺发育的同步化。
与现有的虾配合饲料相比，本发明具有以下突出优点和技术效果：
1、本虾配合饲料使用裂壶藻粉、紫球藻粉和5-羟色胺肌酸酐硫酸盐，其中裂壶藻粉、紫球藻粉中有丰富的ARA和DHA，可以增加虾饲料中脂肪酸的含量，进而促进脊尾白虾的生长和营养积累，裂壶藻粉、紫球藻粉和5-羟色胺肌酸酐硫酸盐共同作用下可以显著促进脊尾白虾性腺短期内（3天）快速发育。
2、本虾配合饲料粗蛋白含量为36.73%左右，粗脂肪含量为8.72%左右，可用于脊尾白虾的精养。
3、本虾配合饲料通过添加鱿鱼内脏粉和虾粉来改善饲料适口性，促进脊尾白虾摄食。
4、在本虾配合饲料的制作方法中先混合干物质，再混合油脂和水分，可以确保原料的混合更加均匀，且制作工艺简单。
附图说明
图1为试验期间卵巢未发育的脊尾白虾（下）与卵巢发育到Ⅰ期的脊尾白虾（上）对比图；
图2为试验期间卵巢发育到Ⅱ期的脊尾白虾图；
图3为试验期间卵巢发育到Ⅲ期的脊尾白虾图；
图4为试验期间试验组S10中发育至Ⅲ期的卵巢图；
图5为不同饲料投喂条件下脊尾白虾的卵巢发育率图；
图6为不同饲料投喂条件下脊尾白虾的卵巢相对长度图；
图7为不同饲料投喂条件下脊尾白虾血淋巴中促性腺激素释放激素（GnRH）含量图；
图8为不同饲料投喂条件下脊尾白虾血淋巴中雌二醇（E2）含量图。
具体实施方式
以下实施例将为本发明提供进一步的说明。
一、以下给出试验的材料和方法：
试验在江苏海洋大学江苏省海洋生物技术重点实验室进行，试验材料取自本实验室，初始规格为体长5.12±0.46cm，体重为1.93±0.44cm，每组挑选30尾性腺并未发育的雌虾，设置3个平行，养殖时间为15天，养殖箱规格为55×40×30cm。期间每天早晚按虾体重的3%各投喂一次饲料，投喂时把饲料直接均匀撒入养殖池塘即可；每两天换水一次，定期检测水中氨氮和亚硝酸盐氮的含量，根据含量数值及时调控水质。养殖水体温度用加热棒恒温控制在22℃，盐度控制在24-26的范围内，pH控制在7.8-8.1，对温度、盐度、pH每天进行监测记录。每5天随机取样每个养殖箱3只，每组9只虾用以测量卵巢相对长度。实验结束测定存活率，特定生长率和蜕皮率，以及血淋巴中雌二醇（E2）和促性腺激素释放激素（GnRH）的水平。
发明人将三种添加物设置了不同的浓度梯度，设计了三因素四水平的正交试验，饲料均为等氮等脂，配方如下表。
表1 测试饲料配方的配比表
Figure DEST_PATH_IMAGE002
以下为实验过程中监测的具体数据指标的含义：
存活率（%）=存活虾数量/初始虾数量*100%
特定生长率（%·d-1）=（ln虾末重-ln虾初重）/养殖天数*100%
蜕壳率（%·d-1）=蜕壳数/虾总数/养殖天数
卵巢发育率（%）=卵巢发育的虾数量/存活虾数量
卵巢相对长度=卵巢长度/虾体长
卵巢生长率（d-1）=卵巢相对长度/养殖天数
血淋巴中促性腺激素释放激素（RnGH）和雌二醇（E2）测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。
二、以下给出的是实验结果和分析的初步数据：
1、针对表1中不同饲料配方下获得的监测指标情况见表2。
表2 不同饲料投喂条件下脊尾白虾的存活率、特定生长率和蜕壳率
Figure DEST_PATH_IMAGE003
由表2中可以看出，综合各项数值来看，S10组的存活（88.89±10.18）和特定生长率（1.42±0.15）最高，S4组蜕壳率最高（5.19 ± 1.12 %·d-1）。
进一步考察各组配方对脊尾白虾性腺发育的影响情况，见图1-5。
由图1可知，S6组、S3组和S10组的脊尾白虾个体再投喂饲料3天后，性腺便开始发育，与对照（图1中下面的个体）相比，饲料投喂个体（图1中上面的个体）性腺已经明显可见（发育到Ⅰ期）。继续投喂饲料分别经5天和10天，卵巢可以继续发育到Ⅱ期（图2）和Ⅲ期（图3）；图4进一步展示了发育到Ⅲ期的卵巢形态。
继续投喂15后，由图5可知，S6组的卵巢发育率最高为86.31±1.03%，其次是S3组（81.35±5.63%）、S10组（80.37±2.80%），生长和存活较好的S13组（50.23±4.20%）在卵巢发育率方面却较差。
为了进一步对图5中的数据进行补充说明，直观获得不同配方组合对脊尾白虾性腺发育程度（大小）的影响，对性腺发育长度进行了测量，结果见图6。从图6中可以看出，所有实验组的卵巢发育长度总体呈现上升趋势，但S10组的卵巢相对长度三次测量值均大于其他各组。由此可知，S10组饲料对卵巢发育速率有较大的提升，同时在表2中我们也可以看出，S10组在存活率、特定生长率和脱壳率等指标上的数值也相对较高。
三、以下给出的是最佳适宜性腺发育配方条件的筛选结果：
进一步通过正交试验结果分析，筛选促进性腺发育的最优化条件如下（见表3）：
表3 正交分析影响脊尾白虾的卵巢相对长度的因素
Figure DEST_PATH_IMAGE004
注：K1、K2、K3、K4分别为各因素水平下指标的平均值，R为同一因素不同水平下的极差。
通过表3中的极差可以看出影响卵巢相对长度因素的影响程度由大到小分别为：紫球藻粉、裂壶藻粉、5-羟色胺肌酸酐硫酸盐。
进一步根据这些因素的重要性，对具体最优配方结果的筛选见表4。由表4可知，本发明配合饲料对脊尾白虾卵巢相对长度影响的最优组合为紫球藻粉1%，裂壶藻粉6%（表4中标黄色的数值最大）；同时，结合表2、表3的结果，进一步分析得出5-羟色胺肌酸酐硫酸盐的最适浓度为0.0025%。最终获得的最优配方组合为：紫球藻粉1%，裂壶藻粉6%和5-羟色胺肌酸酐硫酸盐浓度0.0025%。该组合配方也是表1中所示S10组的配方组合。
表4 交互分析影响脊尾白虾的卵巢相对长度因素的最适水平
Figure DEST_PATH_IMAGE005
四、以下给出的是最佳配方组合（即表1中S10组）下，相应内在机制的分析
进一步对表1中各组脊尾白虾体内与性腺发育相关的激素水平进行检测，检测的指标是促性腺激素释放激素（GnRH）和雌二醇（E2）的含量水平，以说明饲料配方是如何影响性腺发育机制的。促性腺激素释放激素能够促进虾的黄体生成素和卵泡激素细胞合成；雌二醇是甾体雌激素，能促进雌虾发情，进而促进雌虾性腺的形成和发育；这两种激素在虾的性腺发育的过程中有至关重要的作用，在一定范围内含量越高，对卵巢发育的刺激作用就越强。
由图7可知，S10组中促性腺激素释放激素含量最高(1228.99±196.79 ng/L)；由图8可知，S10组中雌二醇的含量也是最高的（198.87±14.18 ng/L）。
因此可以得出结论，配合饲料中添加1%紫球藻粉、6%裂壶藻粉和0.0025%的5-羟色胺肌酸酐硫酸盐，可以显著促进性腺发育激素的释放，从而促进脊尾白虾性腺快速发育，实现性腺发育的同步化。

Claims (1)

1.一种促进脊尾白虾性腺发育的虾配合饲料，其特征在于，其原料质量百分比组成为：
鱼粉30%； 豆粕16%； 花生麸5%； 高筋面粉26.6975%；
磷脂1%； 虾粉5%； 鱿鱼内脏粉3%；鱼油2.8%；
氯化胆碱0.5%；复合预混料1%；海藻酸钠2%；裂壶藻粉6%；
紫球藻粉1%、5-羟色胺肌酸酐硫酸盐0.0025%；
在每1000g虾配合饲料中复合预混料的组成为：维生素A乙酸酯450 000IU；维生素D3100 000IU；d1-α-生育酚乙酸酯5g；甲萘醌0.5g；硝酸硫胺0.5g；核黄素0.7mg；盐酸吡哆醇0.6g；氰钴胺0.002g；D-泛酸钙2g；烟酰硫胺3.5g；叶酸0.15g；D-生物素0.006mg；L-抗坏血酸-2-磷酸脂10g；肌醇8mg；硫酸镁20g；硫酸亚铁2g；硫酸锌7.5g；硫酸锰2g；硫酸铜1.5g；氯化钴0.08g；亚硒酸钠0.01g；碘酸钙0.01g；以及适量的植酸酶、抗氧化剂和沸石粉；
所述的虾配合饲料的制备方法步骤如下：
①将原料干料按比例放入饲料搅拌机中混匀；
②加入油类原料混匀，加入5-羟色胺硫酸盐水溶液混匀得湿物料；
③将湿物料送入成型机内制成直径1.2mm的颗粒；
④用18~20目筛网将制成的颗粒饲料筛去碎粒及粉末，碎粒和粉末收集后再次重复步骤③；
⑤将颗粒平铺，自然条件下晾干，使饲料含水率保持在8%～11%；
⑥用18~20目筛网将干燥后的颗粒饲料筛去碎粒及粉末，包装即得；碎粒和粉末收集经浸湿后可再次重复步骤④进行回收利用。
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