CN110940747B - 一种马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定方法 - Google Patents

一种马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种马铃薯及其制品中α‑茄碱和α‑卡茄碱的测定方法，其步骤主要包括：制备α‑茄碱和α‑卡茄碱待测液、绘制标准曲线、获取样品检测结果，本发明通过采用在基层检验机构中易推广普及的液相色谱仪，来测定马铃薯及其制品中α‑茄碱和α‑卡茄碱的含量，检测方法与液相色谱‑串联质谱仪法的检测结果相比，相对偏差小于10％，检测方法操作简便，准确度高，可以大范围在基层检验机构中普及，极大的方便了基层检验检测机构。

Description

一种马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定方法
技术领域
本发明涉及α-茄碱和α-卡茄碱检测领域，具体涉及一种马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定方法。
背景技术
马铃薯又名土豆、洋芋，是继水稻、小麦、玉米的第四大粮食作物，马铃薯和其它茄科植物一样，植株和块茎中普遍含有一类甾族生物碱的配糖衍生物，通称为龙葵素的物质，它的主要成份为α-茄碱和α-卡茄碱，龙葵素是一类有毒性的生物碱，通常情况下，含量较低，不会影响其食用品质，但当马铃薯因储藏不当，发芽变绿时，会导致龙葵素含量大幅度升高，如若人畜服食0.2g即可出现中毒症状，严重者会出现死亡的危险。马铃薯消费量巨大，但其检测方法与技术存在许多问题，一定程度上阻碍了马铃薯的安全预警和质量监管。
α-茄碱和α-卡茄碱是龙葵素类化合物中含量较高的一种化合物，检测α-茄碱和α-卡茄碱的含量基本能反映马铃薯中龙葵素化合物的含量，马铃薯的主要食用部分是肉，少有食用皮和芽。国内外有大量科研学者对龙葵素的提取和检测进行了研究，目前常见的提取方法有浸提法、索氏提取法、回流提取法、超声波提取法、微波提取法、有机试剂萃取共6种方法，常见的检测方法有液相法、液-质法，但是在实际应用过程中存在提取困难、峰型差、检测误差大等问题；在2018年7月国家市场监督管理局发布的，土豆及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定补充检验方法，α-茄碱和α-卡茄碱的提取、净化过程使用酸化乙腈、无水硫酸镁和无水乙酸钠，三种试剂相结合后对样品的吸水能力无法达到最佳状态，即样品中的含水量还没有达到最低，致使α-茄碱和α-卡茄碱提取效果不理想，同时检测方法使用液相色谱-串联质谱仪，其价格较为昂贵，后期的运行和维护费用是液相色谱仪的3～5倍，在基层检验机构中对于此补充方法的推广普及较为困难，因此，迫切需要建立一种提取完全、处理简单、且易于普遍推广的方法来检测马铃薯肉中α-茄碱和α-卡茄碱的含量。
发明内容
本发明旨在提供一种提取完全、检测准确、普遍推广，适合基层检验机构的马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定方法。
为了解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：一种马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定方法，包括以下步骤：
(1)制备α-茄碱和α-卡茄碱待测液
精确称取一定量的马铃薯的芽、绿皮或肉及其制品试样置于具塞定量离心管中，向其中加入适量蒸馏水，涡旋混匀2min，用酸化甲醇定容，再进行涡旋混匀1min；然后再加入无水硫酸钠、无水乙酸镁，手动剧烈摇动1min后再涡旋混匀1min，将所述具塞定量离心管放入到离心机中离心，吸取上清液；
当所述试样为马铃薯芽、绿皮时，取所述上清液置于容量瓶中，然后加入甲醇水溶液定容至刻度，过尼龙微孔滤膜后，即可得所述马铃薯芽、绿皮试样的α-茄碱和α-卡茄碱待测液；
当所述试样为马铃薯肉及其制品时，取所述上清液置于试管中，放到氮吹浓缩仪上浓缩近干，然后加入甲醇水溶液复溶，过尼龙微孔滤膜后，即可得所述马铃薯肉及其制品试样的α-茄碱和α-卡茄碱待测液；
(2)绘制标准曲线
精确吸取α-茄碱和α-卡茄碱标准品溶液，配制形成一系列具有相同体积、不同浓度的α-茄碱和α-卡茄碱标准液，并将该系列α-茄碱和α-卡茄碱标准液分别注入液相色谱仪中，测定相应的峰面积，以所述系列α-茄碱和α-卡茄碱标准液的质量浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，获得α-茄碱和α-卡茄碱的标准曲线；
(3)获取样品检测结果
将步骤(1)中制备的所述α-茄碱和α-卡茄碱待测液注入液相色谱仪中，得到峰面积，根据标准曲线得到待测液中α-茄碱和α-卡茄碱的质量浓度，进而换算得到待测试样中α-茄碱和α-卡茄碱的含量。
进一步，所述液相色谱仪的检测条件为：C18液相色谱柱，规格为250mm×4.6mm，粒径5μm；流动相A为0.02mol/L磷酸二氢钾溶液，流动相B为乙腈，且流动相A+流动相B＝7+3；流速为0.2ml/min；柱温为30℃；检测波长为195nm；进样量为10μL。
进一步，所述试样的制备方法为：将马铃薯芽、绿皮或肉及其制品放入均质器中充分打碎混匀，放入封装容器中，密封并标记，将其置于-20℃下冷冻存放。
进一步，所述试样与所述蒸馏水的添加比例为1.0g：3.0ml。
进一步，所述马铃薯芽、绿皮试样与所述无水硫酸钠、无水乙酸镁的质量比为1:1:1，所述马铃薯肉及其制品试样与所述无水硫酸钠、无水乙酸镁的质量比为1:2:1。
进一步，所述酸化甲醇包括1％甲酸和99％甲醇，所述甲醇水溶液体积浓度为40％。
进一步，所述α-茄碱和α-卡茄碱标准品溶液的配制方法为：精确称取α-茄碱和α-卡茄碱各0.0100g标准品置于10mL烧杯中，加入适量甲醇搅拌使之溶解后，转移至10mL容量瓶中用甲醇定容。
进一步，所述α-茄碱标准品为纯度≥99.9％的C45H73NO15，所述α-卡茄碱标准品为纯度≥99.9％的C45H73NO14。
进一步，所述尼龙微孔滤膜的孔径为0.22μm。
进一步，离心条件为在12000r/min下持续4min。
本发明与现有技术相比具有以下优点：
(1)本发明在制备α-茄碱和α-卡茄碱待测液过程中，使用酸化甲醇、无水硫酸钠和无水乙酸镁，与国家市场监督管理局发布的土豆及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱含量测定补充方法(BJS201806)中的酸化乙腈、无水硫酸镁和无水乙酸钠相比，α-茄碱和α-卡茄碱易溶于本发明中的酸化甲醇，且结构不易被破坏，同时无水硫酸钠与无水乙酸镁相结合后的吸水能力比无水硫酸镁与无水乙酸钠相结合的吸水能力要好，酸化甲醇、无水硫酸钠和无水乙酸镁三种试剂的配合使用，使检测样品中的含水量较低，α-茄碱和α-卡茄碱易被提取，且提取含量高。
(2)本发明通过采用在基层检验机构中易推广普及的液相色谱仪，来测定马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的含量，检测方法与液相色谱-串联质谱仪法的检测结果相比，相对偏差小于10％，同时液相色谱仪价格低，维护成本少，检测方法操作简便，准确度高，可以大范围在基层检验机构中普及，极大的方便了基层检验检测机构。
(3)本发明方法可以做为马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱含量测定的补充方法，为基本检验机构检测马铃薯质量安全提供了先进技术支撑，可有效防止马铃薯储存过程中因α-茄碱和α-卡茄碱含量的增高而引起中毒事件，为广大人民群众安全食用马铃薯起到及时保障作用。
附图说明
图1是试样为马铃薯芽、绿皮时α-茄碱的标准曲线图；
图2是试样为马铃薯芽、绿皮时α-卡茄碱的标准曲线图；
图3是待测试样为马铃薯芽时的α-茄碱和α-卡茄碱的色谱图；
图4是待测试样为马铃薯绿皮时的α-茄碱和α-卡茄碱的色谱图；
图5是试样为马铃薯肉、及其制品时α-茄碱的标准曲线图；
图6是试样为马铃薯肉、及其制品时α-卡茄碱的标准曲线图；
图7是待测试样为马铃薯肉时的α-茄碱和α-卡茄碱的色谱图；
图8是待测试样为马铃薯制品时的α-茄碱和α-卡茄碱的色谱图。
具体实施方式
下面结合具体实施例进行进一步描述，但本发明的保护范围并不限于此。
本发明实施例所用高效液相色谱仪(配二极管阵列检测器)为LC-20AT(二极管阵列)，波长范围：190nm-810nm。
本发明实施例所用离心机为TG16型台式高低速离心机，测量范围：0～16000rpm，0～99min。
本发明实施例所用pH计为梅特勒FE20型酸度计，分度值＞0.1pH。
本发明实施例所用电子分析天平为赛多利斯SQP型电子天平，测量范围：0.1mg～220g。
本发明实施例所用涡旋混合器为IKA MS3，测量范围：600～3000rpm。
本发明实施例所用均质机为IKA T10basic，测量范围：8000～30000rpm。
本发明实施例所用甲酸(HCOOH)、甲醇(CH3OH)、乙腈(CH3CN)、磷酸二氢钾(KH2PO4)的纯度为色谱纯，无水硫酸钠(Na2SO4)、无水乙酸镁((CH3COO)2Mg)的纯度为分析纯，所用α-茄碱标准品(C45H73NO15)的纯度≥99.9％，所用α-卡茄碱标准品(C45H73NO14)的纯度≥99.9％，所用水为蒸馏水。
实施例1：马铃薯芽、绿皮中α-茄碱和α-卡茄碱的测定方法
(1)制备α-茄碱和α-卡茄碱待测液
精确称取100g马铃薯芽、绿皮，使用均质器(IKA T10basic)将其充分打碎混匀，得到试样均浆，然后将试样均浆放入分装容器中，置于-20℃下冷冻存放；精确称取1.000g试样均浆，置于50ml具塞定量离心管中，向具塞定量离心管中加入3.00ml蒸馏水，使用涡旋混合器(IKA MS3)涡旋混匀2min，加入25.0ml酸化甲醇(1％甲酸+99％甲醇)，再使用涡旋混合器(IKA MS3)进行涡旋混匀1min；向所述具塞定量离心管中加入1.0g无水硫酸钠、1.0g无水乙酸镁，加盖手动剧烈摇动1min后再使用涡旋混合器(IKA MS3)涡旋混匀1min，将所述具塞定量离心管放入到离心机(TG16)中用12000r/min离心4min，取盖后从具塞定量离心管中取1ml上清液置于10ml容量瓶中，加入甲醇水溶液(40％甲醇)定容至刻度，取1ml所述溶液过0.22μm尼龙微孔滤膜后，即可得所述马铃薯芽、绿皮试样的α-茄碱和α-卡茄碱待测液；
(2)绘制标准曲线
精确称取各0.010g的α-茄碱、α-卡茄碱置于10mL烧杯中，加入适量甲醇，搅拌使之溶解后，转移至10mL容量瓶中用甲醇定容，得到浓度为1mg/mL的α-茄碱、α-卡茄碱标准品溶液；取8支容量瓶，依次编号为1#、2#、3#、4#、5#、6#、7#、8#，分别精确吸取0.00μL、2μL、20μL、100μL、200μL、500μL、1000μL、2000μLα-茄碱和α-卡茄碱标准品溶液置于上述8支容量瓶中，并在8支容量瓶中均加入甲醇，使其全部定容至10mL，配制成质量浓度分别为0.00μg/mL、0.20μg/mL、2.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL、50.0μg/mL、100.0μg/mL、200.0μg/mL的一系列具有相同体积、不同浓度的α-茄碱和α-卡茄标准液，并将该系列α-茄碱和α-卡茄碱标准液分别注入液相色谱仪中，测定相应的峰面积，以该系列α-茄碱和α-卡茄碱标准液的质量浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，获得α-茄碱和α-卡茄碱的标准曲线，如图1、图2所示；
(3)获取样品检测结果
①将液相色谱仪(LC-20AT二极管阵列)设定为如下检测条件：C18液相色谱柱，规格为250mm×4.6mm，粒径5μm；流动相A为0.02mol/L磷酸二氢钾溶液，流动相B为乙腈，且流动相A+流动相B＝7+3；流速为0.2ml/min；柱温为30℃；检测波长为195nm；进样量为10μL；
②将步骤(1)中制备的α-茄碱和α-卡茄碱待测液注入已设定好检测条件的液相色谱仪(LC-20AT二极管阵列)中，得到峰面积，根据步骤(2)得到的标准曲线，可得到待测液中α-茄碱和α-卡茄碱的质量浓度，如图3、图4所示；
③将②获得的待测液中α-茄碱和α-卡茄碱的质量浓度代入式(1)中，即可得到待测液中α-茄碱和α-卡茄碱的含量
进而换算得到待测试样中α-茄碱和α-卡茄碱的含量(X),按式(1)计算：
Figure GDA0002350197340000071
式(1)中：
X—试样中待测组分α-茄碱和α-卡茄碱的含量，单位为毫克每千克(mg/kg)；
C—由标准曲线得出的试样液中α-茄碱和α-卡茄碱的质量浓度，单位为微克每毫升(μg/mL)；
V—α-茄碱和α-卡茄碱待测液的最终定容体积，单位为毫升，本实施例中为10mL；
m—试样的质量，单位为克(g)；
f—稀释倍数；
1000—换算因子；
结果保留3位有效数字。
④精密度控制：在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10％。
根据测定的浓度，将数值代入公式(1)计算得到马铃薯芽、绿皮待测液中α-茄碱和α-卡茄碱的含量(试样为1.0g时的含量数值)，如表1所示：
表1·马铃薯芽、绿皮待测液中α-茄碱和α-卡茄碱的含量值
Figure GDA0002350197340000081
实施例2：马铃薯肉及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定方法
(1)制备α-茄碱和α-卡茄碱待测液
精确称取100g马铃薯肉，使用均质器(IKA T10basic)将其充分打碎混匀，得到试样均浆，然后将试样均浆放入分装容器中，置于-20℃下冷冻存放；精确称取2.000g试样均浆，置于50ml具塞定量离心管中，向具塞定量离心管中加入6.00ml蒸馏水，使用涡旋混合器(IKA MS3)涡旋混匀2min，加入25.0ml酸化甲醇(1％甲酸+99％甲醇)，再使用涡旋混合器(IKA MS3)进行涡旋混匀1min；向所述具塞定量离心管中加入2.0g无水硫酸钠、1.0g无水乙酸镁，加盖手动剧烈摇动1min后再使用涡旋混合器(IKA MS3)涡旋混匀1min，将所述具塞定量离心管放入到离心机(TG16)中用12000r/min离心4min，取盖后从具塞定量离心管中取5ml上清液置于10ml试管中，放到氮吹浓缩仪上在40℃氮吹下浓缩近干，然后向试管中加入1ml甲醇水溶液(40％甲醇)复溶，过0.22μm尼龙微孔滤膜后，即可得α-茄碱和α-卡茄碱待测液；
(2)绘制标准曲线
精确称取各0.010g的α-茄碱、α-卡茄碱置于10mL烧杯中，加入适量甲醇溶液，搅拌使之溶解后，转移至10mL容量瓶中用甲醇定容，得到浓度为1mg/mL的α-茄碱、α-卡茄碱标准品溶液；取8支容量瓶，依次编号为1#、2#、3#、4#、5#、6#、7#、8#，分别精确吸取0.00μL、20μL、60μL、100μL、200μL、400μL、600μL、1000μLα-茄碱和α-卡茄碱标准品溶液置于上述8支容量瓶中，并在8支容量瓶中均加入甲醇，使其全部定容至10mL，配制成质量浓度分别为0.00μg/mL、2.00μg/mL、6.00μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL、40.0μg/mL、60.0μg/mL、100.0μg/mL的一系列具有相同体积、不同浓度的α-茄碱和α-卡茄标准液，并将该系列α-茄碱和α-卡茄碱标准液分别注入液相色谱仪中，测定相应的峰面积，以该系列α-茄碱和α-卡茄碱标准液的质量浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，获得α-茄碱和α-卡茄碱的标准曲线，如图5、图6所示；
(3)获取样品检测结果
①将液相色谱仪(LC-20AT二极管阵列)设定为如下检测条件：C18液相色谱柱，规格为250mm×4.6mm，粒径5μm；流动相A为0.02mol/L磷酸二氢钾溶液，流动相B为乙腈，且流动相A+流动相B＝7+3；流速为0.2ml/min；柱温为30℃；检测波长为195nm；进样量为10μL；
②将步骤(1)中制备的α-茄碱和α-卡茄碱待测液注入已设定好检测条件的液相色谱仪(LC-20AT二极管阵列)中，得到峰面积，根据步骤(2)得到的标准曲线，可得到待测液中α-茄碱和α-卡茄碱的质量浓度，如图7、图8所示；
③将②获得的待测液中α-茄碱和α-卡茄碱的质量浓度代入式(1)中，即可得到待测液中α-茄碱和α-卡茄碱的含量
进而换算得到待测试样中α-茄碱和α-卡茄碱的含量(X),按式(1)计算：
Figure GDA0002350197340000091
式(1)中：
X—试样中待测组分α-茄碱和α-卡茄碱的含量，单位为毫克每千克(mg/kg)；
C—由标准曲线得出的试样液中α-茄碱和α-卡茄碱的质量浓度，单位为微克每毫升(μg/mL)；
V—α-茄碱和α-卡茄碱待测液的最终定容体积，单位为毫升，本实施例中为1.0mL；
m—试样的质量，单位为克(g)；
f—稀释倍数；
1000—换算因子；
结果保留3位有效数字。
④精密度控制：在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10％。
根据测定的浓度，将数值代入公式(1)计算得到马铃薯肉及其制品待测液中α-茄碱和α-卡茄碱的含量(试样为2.0g时的含量数值)，如表2所示：
表2·马铃薯肉、及其制品待测液中α-茄碱和α-卡茄碱的含量值
Figure GDA0002350197340000101
实施例3：使用不同溶剂和吸水剂对马铃薯芽中α-茄碱和α-卡茄碱的含量提取对比
马铃薯芽均质后称取等量的六份样品，分别编号①②③④⑤⑥，每个样品按照实施例1所述的方法，选用不同的α-茄碱和α-卡茄碱溶剂及吸水剂对6个试样中α-茄碱和α-卡茄碱提取，每个试样按照实施例1中所述的方法步骤(2)、(3)液相色谱法进行α-茄碱和α-卡茄碱含量的检测，得到不同溶剂及吸水剂对α-茄碱和α-卡茄碱提取效果的对比结果如表3所示：
表3不同溶剂和吸水剂在马铃薯芽试样中对α-茄碱和α-卡茄碱提取效果的对比
Figure GDA0002350197340000111
从表3数据中可以明显看出在马铃薯芽试样中，α-茄碱、α-卡茄碱的前处理提取方法酸化甲醇+无水硫酸钠+无水乙酸镁的效果最佳，优于酸化乙腈+无水硫酸镁+无水乙酸钠、酸化乙腈+无水硫酸钠+无水乙酸镁，远远超越了现有文献中报道的前处理提取方法。
实施例4：使用不同溶剂和吸水剂对马铃薯肉中α-茄碱和α-卡茄碱的含量提取对比
马铃薯肉均质后称取等量的六份样品，分别编号⑦⑧⑨⑩
Figure GDA0002350197340000112
每个样品按照实施例2所述的方法，选用不同的α-茄碱和α-卡茄碱溶剂及吸水剂对6个试样中α-茄碱和α-卡茄碱提取，每个试样按照实施例2中所述的方法步骤(2)、(3)液相色谱法进行α-茄碱和α-卡茄碱含量的检测，得到不同溶剂及吸水剂对α-茄碱和α-卡茄碱提取效果的对比结果如表4所示：
表4不同溶剂和吸水剂在马铃薯肉试样中对α-茄碱和α-卡茄碱提取效果的对比
Figure GDA0002350197340000121
从表4数据中可以明显看出在马铃薯肉试样中，α-茄碱、α-卡茄碱的前处理提取方法酸化甲醇+无水硫酸钠+无水乙酸镁的效果最佳，优于酸化乙腈+无水硫酸镁+无水乙酸钠、酸化乙腈+无水硫酸钠+无水乙酸镁，远远超越了现有文献中报道的前处理提取方法。
实施例5：马铃薯肉、马铃薯白芽、马铃薯绿芽三个样品中α-茄碱和α-卡茄碱含量的检测
选取马铃薯肉、马铃薯白芽、马铃薯绿芽三个样品，分别编号为样品A、B、C；
马铃薯肉样品分别称取等量的2个平行样，即：A1、A2；样品A1按照实施例2中所述的方法步骤(1)、(2)、(3)进行α-茄碱和α-卡茄碱的提取、测定，样品A2按照2018年7月国家市场监督管理局发布的，土豆及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定补充方法中液相色谱-串联质谱仪法(BJS201806)进行提取、测定；
马铃薯白芽、马铃薯绿芽样品分别称取等量的2个平行样，即：B1、B2、C1、C2；样品B1、C1按照实施例1中所述的方法步骤(1)、(2)、(3)进行α-茄碱和α-卡茄碱的提取、测定，样品B2、C2按照2018年7月国家市场监督管理局发布的，土豆及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定补充方法中液相色谱-串联质谱仪法(BJS201806)进行提取、测定；
三种样品得到液相色谱法与液相色谱-串联质谱仪法检测结果对比如表5所示：
表5三种样品分别使用液相色谱法与液相色谱-串联质谱仪法检测结果对比
Figure GDA0002350197340000131
由表5可以看出：在三种样品检测结果中，采用本发明方法与土豆及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定补充方法中液相色谱-串联质谱仪法(BJS201806)测得的α-茄碱和α-卡茄碱浓度值的相对偏差小于10％，本发明方法的检测浓度级为μg/ml，而土豆及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定补充方法中液相色谱-串联质谱仪法(BJS201806)的浓度级为ng/ml，两种方法溶液浓度相差1000倍的稀释倍数，后经稀释倍数换算，还可以达到相对偏差均小于10％，足以证明本发明方法的准确度是非常高的。
需要说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制。尽管参照实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应该理解，对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，都不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

Claims (8)

1.一种马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定方法，其特征在于：包括以下步骤：
（1）制备α-茄碱和α-卡茄碱待测液
精确称取马铃薯的芽、绿皮或肉及其制品试样置于具塞定量离心管中，向其中加入适量蒸馏水，涡旋混匀2min，用酸化甲醇定容，再进行涡旋混匀1min；然后再加入无水硫酸钠、无水乙酸镁，手动剧烈摇动1min后再涡旋混匀1min，将所述具塞定量离心管放入到离心机中离心，吸取上清液；
当所述试样为马铃薯芽、绿皮时，取所述上清液置于容量瓶中，然后加入甲醇水溶液定容至刻度，过尼龙微孔滤膜后，即可得所述马铃薯芽、绿皮试样的α-茄碱和α-卡茄碱待测液；
当所述试样为马铃薯肉及其制品时，取所述上清液置于试管中，放到氮吹浓缩仪上浓缩近干，然后加入甲醇水溶液复溶，过尼龙微孔滤膜后，即可得所述马铃薯肉及其制品试样的α-茄碱和α-卡茄碱待测液；
所述马铃薯芽、绿皮试样与所述无水硫酸钠、无水乙酸镁的质量比为1:1:1，所述马铃薯肉及其制品试样与所述无水硫酸钠、无水乙酸镁的质量比为1:2:1；
所述酸化甲醇包括1％甲酸和99％甲醇；
（2）绘制标准曲线
精确吸取α-茄碱和α-卡茄碱标准品溶液，配制形成一系列具有相同体积、不同浓度的α-茄碱和α-卡茄碱标准液，并将该系列α-茄碱和α-卡茄碱标准液分别注入液相色谱仪中，测定相应的峰面积，以所述系列α-茄碱和α-卡茄碱标准液的质量浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，获得α-茄碱和α-卡茄碱的标准曲线；
（3）获取样品检测结果
将步骤（1）中制备的所述α-茄碱和α-卡茄碱待测液注入液相色谱仪中，得到峰面积，根据标准曲线得到待测液中α-茄碱和α-卡茄碱的质量浓度，进而换算得到待测试样中α-茄碱和α-卡茄碱的含量；
所述液相色谱仪的检测条件为：C18液相色谱柱，规格为250mm×4.6mm，粒径5μm；流动相A为0.02mol/L磷酸二氢钾溶液，流动相B为乙腈，且流动相A+流动相B＝7+3；流速为0.2mL/min；柱温为30℃；检测波长为195nm；进样量为10μL。
2.根据权利要求1所述的一种马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定方法，其特征在于：所述试样的制备方法为：将马铃薯的芽、绿皮或肉及其制品放入均质器中充分打碎混匀，放入封装容器中，密封并标记，将其置于-20℃下冷冻存放。
3.根据权利要求1所述的一种马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定方法，其特征在于：所述试样与所述蒸馏水的添加比例为1.0g：3.0mL。
4.根据权利要求1所述的一种马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定方法，其特征在于：所述甲醇水溶液体积浓度为40％。
5.根据权利要求1所述的一种马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定方法，其特征在于：所述α-茄碱和α-卡茄碱标准品溶液的配制方法为：精确称取α-茄碱标准品和α-卡茄碱标准品各0.0100g置于10mL烧杯中，加入适量甲醇搅拌使之溶解后，转移至10mL容量瓶中用甲醇定容。
6. 根据权利要求5所述的一种马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定方法，其特征在于：所述α-茄碱标准品为纯度≥99.9％的C45H73NO15，所述α-卡茄碱标准品为纯度≥99.9％的C45H73NO14。
7.根据权利要求1所述的一种马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定方法，其特征在于：所述尼龙微孔滤膜的孔径为0.22μm。
8.根据权利要求1所述的一种马铃薯及其制品中α-茄碱和α-卡茄碱的测定方法，其特征在于：离心条件为在12000r/min下持续4min。
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