CN110938219A - 一种交联度可调的紫外光固化透明质酸水凝胶的制备方法及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种交联度可调的紫外光固化透明质酸水凝胶的制备方法。通过控制交联剂的含量,可以有效地调节水凝胶的交联度和吸水率。对制备的水凝胶进行了流变试验和压缩试验。结果表明,水凝胶经紫外光引发后可迅速固化,机械强度达70kpa,与血管强度相近。此外,该水凝胶具有较高的成型精度,可以完美复刻微米尺度流道。该透明酸水凝胶在促进血管内皮生长因子VEGF释放方面也非常有效。
Description
技术领域
本发明涉及一种交联度可调的紫外光固化透明质酸水凝胶的制备方法及其应用。
背景技术
生物质水凝胶以其降解性、绿色来源和较高的生物相容性等优点,在伤口愈合、组织支架和药物释放等方面得到了很大的发展。然而,其他化学分子的引入和复杂的制备过程将不可避免地导致小分子的残留。这些分子很难清除,而且其中大多数对细胞是有毒的。此外,传统的生物质水凝胶聚合速度慢,成型精度低,微米尺寸难以有效控制,限制了其在生物学中的广泛应用。
透明质酸是一种广泛存在于细胞外基质(ECM)中的生物材料。它是一种可降解和高度生物兼容的天然线性聚合物,可促进皮肤修复和伤口愈合。它在组织工程、药物交付和免疫调节等各种生物过程中也起着非常重要的作用。此外,透明质酸具有优良的保水性能,由此制备的水凝胶具有含水率高、透明度好、生物相容性好等优点。全生物源、高精度生物质水凝胶的快速成型是目前生物材料发展的趋势。
发明内容
本发明目的是提供一种完全生物源,可完全生物降解而且交联度可调的紫外光固化透明质酸水凝胶的制备方法及其应用,利用硫醇点击化学快速聚合制备了交联度可调的高精度透明质酸水凝胶。
本发明采用的技术方案是:
一种交联度可调的紫外光固化透明质酸水凝胶的制备方法,所述方法包括以下步骤:
(1)将分子量为100000的透明质酸溶于去离子水(1~3wt%),形成均匀透明的溶液,加入1~1.5倍体积的DMF,机械搅拌,冷却至3~4℃,并保持该搅拌及温度条件;取摩尔比为1.2~1.5倍的甲基丙烯酸酐的缓慢滴加,每秒1~3滴;之后用0.4~0.6M氢氧化钠溶液调节混合物的pH值至8~9;反应10~12h后,然后加入0.5M氯化钠固体继续搅拌0.5~1h;以乙醇为沉淀剂,得到白色絮凝沉淀;沉淀物用水和乙醇混合物洗涤,水和乙醇的体积比1/9~3/7,洗涤时体积比依次递减;最后,将产品溶解在去离子水(1~2wt%)中,透析2~4天,冷冻干燥,得到白色海绵状固体,即甲基丙烯酸化透明质酸(HAMA);
(2)将N-乙酰-L-半胱氨酸溶于去离子水中(0.01~0.1mol/L),加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.0001~0.001mol/L)和季戊四醇(0.002~0.005mol/L),加入4-二甲基氨基吡啶
(0.005~0.01g),持续反应6~12小时,重结晶后得到四臂巯基交联剂(PE(NAC)4);
(3)将步骤(1)所得的甲基丙烯酸化透明质酸溶于去离子水中,加入步骤(2)制备的四臂巯基交联剂(0.5~5wt%)和0.1wt%的光引发剂(Irgacure 2959);然后在紫外光(405nm,5cm)下固化一段时间,得到透明质酸水凝胶;加入不同质量分数的四臂巯基交联剂得到不同交联度的水凝胶(HAMA/PE(NAC)4)。
进一步,所述的四臂巯基交联剂是一种水性交联剂。
所述步骤(2)中,将N-乙酰-L-半胱氨酸溶于去离子水中(0.01~0.1mol/L),加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.0001~0.001mol/L)和季戊四醇(0.002~0.005mol/L),加入4-二甲基氨基吡啶(0.005~0.01g),持续反应6~12小时,重结晶后得到四臂巯基交联剂(PE(NAC)4);
所述的四臂巯基交联剂由半胱氨酸衍生物和季戊四醇经过酯化反应制备所得。
所述步骤(3)中,甲基丙烯酸化透明质酸和水性四臂巯基交联剂在紫外光下经过硫醇点击化学快速固化,将甲基丙烯酸化透明质酸溶于去离子水中(2~4%),加入四臂巯基交联剂(0.5~5wt%)和光引发剂(Irgacure 2959,0.01~0.1wt%),然后在紫外光(405nm,5cm)下固化15~150s,得到吸水倍率为20~60的透明质酸水凝胶。
通过控制水性四臂交联剂的用量控制交联程度,从而控制吸水倍率和力学强度。
所述的透明质酸水凝胶可以达到微米级高精度成型。
所述的透明质酸水凝胶应用于促进血管内皮生长因子的释放。
本发明制备了完全生物来源的透明质酸水凝胶。通过控制交联剂的含量,可以有效地调节水凝胶的交联度和吸水率。对制备的水凝胶进行了流变试验和压缩试验。结果表明,水凝胶经紫外光引发后可迅速固化,机械强度达70kpa,与血管强度相近。此外,该水凝胶具有较高的成型精度,可以完美复刻微米尺度流道。该透明酸水凝胶在促进血管内皮生长因子VEGF释放方面也非常有效。
本发明的有益效果主要体现在:
1、该水凝胶可以经紫外光快速固化,引发速度快,交联度可控,继而其吸水倍率和强度可控。
2、该水凝胶为完全生物来源,可完全生物降解,透明度高,生物相容性好。
3、该水凝胶可以用于高精度的微米级成型,在生物支架精细化方面具有潜在应用。
4、该水凝胶可以有效促进血管内皮生长因子的释放。
附图说明
图1是制备流程图。(A:透明质酸(HA)和甲基丙烯酸酐(AMA)合成甲基丙烯酸透明质酸(HAMA)的反应;B:N-乙酰-L-半胱氨酸和季戊四醇合成四臂巯基交联剂(PE(NAC)4的反应;C:透明质酸水凝胶的制备及透明立方水凝胶样品的电子照片)。
图2是不同交联度的透明质酸水凝胶的扫描电镜SEM图(a:HAMA/PE(NAC)4-0.5%;b:HAMA/PE(NAC)4-1%;c:HAMA/PE(NAC)4-5%)。
图3是三种不同交联度的透明质酸水凝胶(HAMA/PE(NAC)4)的流变性能表征。(a:透明质酸水凝胶在1Hz和1%应变下的时间扫描评估。紫外线辐照开始于第二分钟,并持续到最大储存模量;b:透明质酸水凝胶(0.1%~1000%)在1Hz频率下的应变扫描评估)。
图4是三种不同交联度的透明质酸水凝胶(HAMA/PE(NAC)4)的压缩性能表征;(a:透明质酸水凝胶在50Hz频率下的压缩性能曲线;b:透明质酸水凝胶压缩破裂时的最大抗压强度和应变(n=3))。
图5是三种不同交联度的透明质酸水凝胶(HAMA/PE(NAC)4)在37℃的透明质酸酶作用下的降解情况;
图6是实施例3的透明质酸水凝胶(HAMA/PE(NAC)4-5%)的高精度成型倒置显微镜照片;
图7是应用实施例1的透明质酸水凝胶用于促进血管内皮生长因子释放表征。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述,但本发明的保护范围并不仅限于此:
实施例1:
一种交联度可调的紫外光固化透明质酸水凝胶的制备方法,所述方法包括以下步骤:
(1)将分子量为100000的透明质酸溶于去离子水(1wt%),形成均匀透明的溶液,加入1倍体积的DMF,机械搅拌,冷却至3℃,并保持该搅拌及温度条件;取摩尔比为1.2倍的甲基丙烯酸酐的缓慢滴加(每秒1滴);之后用0.4M氢氧化钠溶液调节混合物的pH值至8;反应10h后,然后加入0.5M氯化钠固体继续搅拌0.5h;以乙醇为沉淀剂,得到白色絮凝沉淀;沉淀物用水和乙醇混合物(3/7,1/4,1/9体积比)洗涤;最后,将产品溶解在去离子水(1wt%)中,透析2天,冷冻干燥,得到白色海绵状固体,即甲基丙烯酸化透明质酸(HAMA);
(2)将N-乙酰-L-半胱氨酸溶于去离子水中(0.01mol/L),加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.0001mol/L)和季戊四醇(0.002mol/L),加入4-二甲基氨基吡啶(0.005g),持续反应6小时,重结晶后得到四臂巯基交联剂(PE(NAC)4);
(3)将步骤(1)所得的甲基丙烯酸化透明质酸溶于去离子水中,加入步骤(2)制备的四臂巯基交联剂(0.5wt%)和0.1wt%的光引发剂(Irgacure 2959);然后在紫外光(405nm,5cm)下固化一段时间,得到交联程度为0.5%的透明质酸水凝胶(HAMA/PE(NAC)4)-0.5%。
实施例2:
一种交联度可调的紫外光固化透明质酸水凝胶的制备方法,所述方法包括以下步骤:
(1)将分子量为100000的透明质酸溶于去离子水(2wt%),形成均匀透明的溶液,加入1.2倍体积的DMF,机械搅拌,冷却至3.5℃,并保持该搅拌及温度条件;取摩尔比为1.4倍的甲基丙烯酸酐的缓慢滴加(每秒2滴);之后用0.5M氢氧化钠溶液调节混合物的pH值至8.5;反应11h后,然后加入0.5M氯化钠固体继续搅拌0.8h;以乙醇为沉淀剂,得到白色絮凝沉淀;沉淀物用水和乙醇混合物(3/7,1/4,1/9体积比)洗涤;最后,将产品溶解在去离子水(1.5wt%)中,透析3天,冷冻干燥,得到白色海绵状固体,即甲基丙烯酸化透明质酸(HAMA);
(2)将N-乙酰-L-半胱氨酸溶于去离子水中(0.05mol/L),加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.0005mol/L)和季戊四醇(0.004mol/L),加入4-二甲基氨基吡啶(0.008g),持续反应9小时,重结晶后得到四臂巯基交联剂(PE(NAC)4);
(3)将步骤(1)所得的甲基丙烯酸化透明质酸溶于去离子水中,加入步骤(2)制备的四臂巯基交联剂(0.5wt%)和0.1wt%的光引发剂(Irgacure 2959);然后在紫外光(405nm,5cm)下固化一段时间,得到交联程度为0.5%的透明质酸水凝胶(HAMA/PE(NAC)4)-0.5%。
实施例3:
一种交联度可调的紫外光固化透明质酸水凝胶的制备方法,所述方法包括以下步骤:
(1)将分子量为100000的透明质酸溶于去离子水(3wt%),形成均匀透明的溶液,加入1.5倍体积的DMF,机械搅拌,冷却至4℃,并保持该搅拌及温度条件;取摩尔比为1.5倍的甲基丙烯酸酐的缓慢滴加(每秒3滴);之后用0.6M氢氧化钠溶液调节混合物的pH值至9;反应12h后,然后加入0.5M氯化钠固体继续搅拌1h;以乙醇为沉淀剂,得到白色絮凝沉淀;沉淀物用水和乙醇混合物(3/7,1/4,1/9体积比)洗涤;最后,将产品溶解在去离子水(2wt%)中,透析4天,冷冻干燥,得到白色海绵状固体,即甲基丙烯酸化透明质酸(HAMA);
(2)将N-乙酰-L-半胱氨酸溶于去离子水中(0.1mol/L),加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.001mol/L)和季戊四醇(0.005mol/L),加入4-二甲基氨基吡啶(0.01g),持续反应12小时,重结晶后得到四臂巯基交联剂(PE(NAC)4);
(3)将步骤(1)所得的甲基丙烯酸化透明质酸溶于去离子水中,加入步骤(2)制备的四臂巯基交联剂(0.5wt%)和0.1wt%的光引发剂(Irgacure 2959);然后在紫外光(405nm,5cm)下固化一段时间,得到交联程度为0.5%的透明质酸水凝胶(HAMA/PE(NAC)4)-0.5%。
实施例4:
一种交联度可调的紫外光固化透明质酸水凝胶的制备方法,所述方法包括以下步骤:
(1)将分子量为100000的透明质酸溶于去离子水(1wt%),形成均匀透明的溶液,加入1倍体积的DMF,机械搅拌,冷却至3℃,并保持该搅拌及温度条件;取摩尔比为1.2倍的甲基丙烯酸酐的缓慢滴加(每秒1滴);之后用0.4M氢氧化钠溶液调节混合物的pH值至8;反应10h后,然后加入0.5M氯化钠固体继续搅拌0.5h;以乙醇为沉淀剂,得到白色絮凝沉淀;沉淀物用水和乙醇混合物(3/7,1/4,1/9体积比)洗涤;最后,将产品溶解在去离子水(1wt%)中,透析2天,冷冻干燥,得到白色海绵状固体,即甲基丙烯酸化透明质酸(HAMA);
(2)将N-乙酰-L-半胱氨酸溶于去离子水中(0.01mol/L),加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.0001mol/L)和季戊四醇(0.002mol/L),加入4-二甲基氨基吡啶(0.005g),持续反应6小时,重结晶后得到四臂巯基交联剂(PE(NAC)4);
(3)将步骤(1)所得的甲基丙烯酸化透明质酸溶于去离子水中,加入步骤(2)制备的四臂巯基交联剂(1wt%)和0.1wt%的光引发剂(Irgacure 2959);然后在紫外光(405nm,5cm)下固化一段时间,得到交联程度为1%的透明质酸水凝胶(HAMA/PE(NAC)4)-1%。
实施例5:
一种交联度可调的紫外光固化透明质酸水凝胶的制备方法,所述方法包括以下步骤:
(1)将分子量为100000的透明质酸溶于去离子水(2wt%),形成均匀透明的溶液,加入1.2倍体积的DMF,机械搅拌,冷却至3.5℃,并保持该搅拌及温度条件;取摩尔比为1.4倍的甲基丙烯酸酐的缓慢滴加(每秒2滴);之后用0.5M氢氧化钠溶液调节混合物的pH值至8.5;反应11h后,然后加入0.5M氯化钠固体继续搅拌0.8h;以乙醇为沉淀剂,得到白色絮凝沉淀;沉淀物用水和乙醇混合物(3/7,1/4,1/9体积比)洗涤;最后,将产品溶解在去离子水(1.5wt%)中,透析3天,冷冻干燥,得到白色海绵状固体,即甲基丙烯酸化透明质酸(HAMA);
(2)将N-乙酰-L-半胱氨酸溶于去离子水中(0.05mol/L),加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.0005mol/L)和季戊四醇(0.004mol/L),加入4-二甲基氨基吡啶(0.008g),持续反应9小时,重结晶后得到四臂巯基交联剂(PE(NAC)4);
(3)将步骤(1)所得的甲基丙烯酸化透明质酸溶于去离子水中,加入步骤(2)制备的四臂巯基交联剂(1wt%)和0.1wt%的光引发剂(Irgacure 2959);然后在紫外光(405nm,5cm)下固化一段时间,得到交联程度为1%的透明质酸水凝胶(HAMA/PE(NAC)4)-1%。
实施例6:
一种交联度可调的紫外光固化透明质酸水凝胶的制备方法,所述方法包括以下步骤:
(1)将分子量为100000的透明质酸溶于去离子水(3wt%),形成均匀透明的溶液,加入1.5倍体积的DMF,机械搅拌,冷却至4℃,并保持该搅拌及温度条件;取摩尔比为1.5倍的甲基丙烯酸酐的缓慢滴加(每秒3滴);之后用0.6M氢氧化钠溶液调节混合物的pH值至9;反应12h后,然后加入0.5M氯化钠固体继续搅拌1h;以乙醇为沉淀剂,得到白色絮凝沉淀;沉淀物用水和乙醇混合物(3/7,1/4,1/9体积比)洗涤;最后,将产品溶解在去离子水(2wt%)中,透析4天,冷冻干燥,得到白色海绵状固体,即甲基丙烯酸化透明质酸(HAMA);
(2)将N-乙酰-L-半胱氨酸溶于去离子水中(0.1mol/L),加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.001mol/L)和季戊四醇(0.005mol/L),加入4-二甲基氨基吡啶(0.01g),持续反应12小时,重结晶后得到四臂巯基交联剂(PE(NAC)4);
(3)将步骤(1)所得的甲基丙烯酸化透明质酸溶于去离子水中,加入步骤(2)制备的四臂巯基交联剂(1wt%)和0.1wt%的光引发剂(Irgacure 2959);然后在紫外光(405nm,5cm)下固化一段时间,得到交联程度为1%的透明质酸水凝胶(HAMA/PE(NAC)4)-1%。
实施例7:
一种交联度可调的紫外光固化透明质酸水凝胶的制备方法,所述方法包括以下步骤:
(1)将分子量为100000的透明质酸溶于去离子水(1wt%),形成均匀透明的溶液,加入1倍体积的DMF,机械搅拌,冷却至3℃,并保持该搅拌及温度条件;取摩尔比为1.2倍的甲基丙烯酸酐的缓慢滴加(每秒1滴);之后用0.4M氢氧化钠溶液调节混合物的pH值至8;反应10h后,然后加入0.5M氯化钠固体继续搅拌0.5h;以乙醇为沉淀剂,得到白色絮凝沉淀;沉淀物用水和乙醇混合物(3/7,1/4,1/9体积比)洗涤;最后,将产品溶解在去离子水(1wt%)中,透析2天,冷冻干燥,得到白色海绵状固体,即甲基丙烯酸化透明质酸(HAMA);
(2)将N-乙酰-L-半胱氨酸溶于去离子水中(0.01mol/L),加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.0001mol/L)和季戊四醇(0.002mol/L),加入4-二甲基氨基吡啶(0.005g),持续反应6小时,重结晶后得到四臂巯基交联剂(PE(NAC)4);
(3)将步骤(1)所得的甲基丙烯酸化透明质酸溶于去离子水中,加入步骤(2)制备的四臂巯基交联剂(5wt%)和0.1wt%的光引发剂(Irgacure 2959);然后在紫外光(405nm,5cm)下固化一段时间,得到交联程度为5%的透明质酸水凝胶(HAMA/PE(NAC)4)-5%。
实施例8:
一种交联度可调的紫外光固化透明质酸水凝胶的制备方法,所述方法包括以下步骤:
(1)将分子量为100000的透明质酸溶于去离子水(2wt%),形成均匀透明的溶液,加入1.2倍体积的DMF,机械搅拌,冷却至3.5℃,并保持该搅拌及温度条件;取摩尔比为1.4倍的甲基丙烯酸酐的缓慢滴加(每秒2滴);之后用0.5M氢氧化钠溶液调节混合物的pH值至8.5;反应11h后,然后加入0.5M氯化钠固体继续搅拌0.8h;以乙醇为沉淀剂,得到白色絮凝沉淀;沉淀物用水和乙醇混合物(3/7,1/4,1/9体积比)洗涤;最后,将产品溶解在去离子水(1.5wt%)中,透析3天,冷冻干燥,得到白色海绵状固体,即甲基丙烯酸化透明质酸(HAMA);
(2)将N-乙酰-L-半胱氨酸溶于去离子水中(0.05mol/L),加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.0005mol/L)和季戊四醇(0.004mol/L),加入4-二甲基氨基吡啶(0.008g),持续反应9小时,重结晶后得到四臂巯基交联剂(PE(NAC)4);
(3)将步骤(1)所得的甲基丙烯酸化透明质酸溶于去离子水中,加入步骤(2)制备的四臂巯基交联剂(5wt%)和0.1wt%的光引发剂(Irgacure 2959);然后在紫外光(405nm,5cm)下固化一段时间,得到交联程度为5%的透明质酸水凝胶(HAMA/PE(NAC)4)-5%。
实施例9:
一种交联度可调的紫外光固化透明质酸水凝胶的制备方法,所述方法包括以下步骤:
(1)将分子量为100000的透明质酸溶于去离子水(3wt%),形成均匀透明的溶液,加入1.5倍体积的DMF,机械搅拌,冷却至4℃,并保持该搅拌及温度条件;取摩尔比为1.5倍的甲基丙烯酸酐的缓慢滴加(每秒3滴);之后用0.6M氢氧化钠溶液调节混合物的pH值至9;反应12h后,然后加入0.5M氯化钠固体继续搅拌1h;以乙醇为沉淀剂,得到白色絮凝沉淀;沉淀物用水和乙醇混合物(3/7,1/4,1/9体积比)洗涤;最后,将产品溶解在去离子水(2wt%)中,透析4天,冷冻干燥,得到白色海绵状固体,即甲基丙烯酸化透明质酸(HAMA);
(2)将N-乙酰-L-半胱氨酸溶于去离子水中(0.1mol/L),加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.001mol/L)和季戊四醇(0.005mol/L),加入4-二甲基氨基吡啶(0.01g),持续反应12小时,重结晶后得到四臂巯基交联剂(PE(NAC)4);
(3)将步骤(1)所得的甲基丙烯酸化透明质酸溶于去离子水中,加入步骤(2)制备的四臂巯基交联剂(5wt%)和0.1wt%的光引发剂(Irgacure 2959);然后在紫外光(405nm,5cm)下固化一段时间,得到交联程度为5%的透明质酸水凝胶(HAMA/PE(NAC)4)-5%。
实施例10:应用实施例1
将制备的四臂巯基交联剂含量为0.5wt%的透明质酸水凝胶用于血管内皮生长因子(VEGF)的释放。在37℃,5%CO2条件下,在24孔板(n=3)中培养VEGF过表达的微粒(1000万个293t细胞/mL)。在不同的时间点,将培养液收集并测定其中VEGF含量。用夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定VEGF的释放,并以体外表达VEGF的速率表示。
实施例11:应用实施例2
其他与实施例10相同,不同之处在于将制备的四臂巯基交联剂含量为1wt%的透明质酸水凝胶用于血管内皮生长因子(VEGF)的释放。
实施例12:应用实施例3
其他与实施例10相同,不同之处在于将制备的四臂巯基交联剂含量为5wt%的透明质酸水凝胶用于血管内皮生长因子(VEGF)的释放。
Claims (8)
1.一种交联度可调的紫外光固化透明质酸水凝胶的制备方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
(1)将分子量为100000的透明质酸溶于去离子水(1~3wt%),形成均匀透明的溶液,加入1~1.5倍体积的DMF,机械搅拌,冷却至3~4℃,并保持该搅拌及温度条件;取摩尔比为1.2~1.5倍的甲基丙烯酸酐的缓慢滴加,每秒1~3滴;之后用0.4~0.6M氢氧化钠溶液调节混合物的pH值至8~9;反应10~12h后,然后加入0.5M氯化钠固体继续搅拌0.5~1h;以乙醇为沉淀剂,得到白色絮凝沉淀;沉淀物用水和乙醇混合物洗涤,水和乙醇的体积比1/9~3/7,洗涤时体积比依次递减;最后,将产品溶解在去离子水(1~2wt%)中,透析2~4天,冷冻干燥,得到白色海绵状固体,即甲基丙烯酸化透明质酸(HAMA);
(2)将N-乙酰-L-半胱氨酸溶于去离子水中(0.01~0.1mol/L),加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.0001~0.001mol/L)和季戊四醇(0.002~0.005mol/L),加入4-二甲基氨基吡啶(0.005~0.01g),持续反应6~12小时,重结晶后得到四臂巯基交联剂(PE(NAC)4);
(3)将步骤(1)所得的甲基丙烯酸化透明质酸溶于去离子水中,加入步骤(2)制备的四臂巯基交联剂(0.5~5wt%)和0.1wt%的光引发剂(Irgacure 2959);然后在紫外光(405nm,5cm)下固化一段时间,得到透明质酸水凝胶;加入不同质量分数的四臂巯基交联剂得到不同交联度的水凝胶(HAMA/PE(NAC)4)。
2.如权利要求1所述的一种交联度可调的紫外光固化透明质酸水凝胶的制备方法,其特征在于,所述的四臂巯基交联剂是一种水性交联剂。
3.如权利要求1或2所述的一种交联度可调的紫外光固化透明质酸水凝胶的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中,将N-乙酰-L-半胱氨酸溶于去离子水中(0.01mol/L),加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.0001mol/L)和季戊四醇(0.002mol/L),加入4-二甲基氨基吡啶(0.005g),持续反应6小时,重结晶后得到四臂巯基交联剂(PE(NAC)4)。
4.如权利要求1或2所述的一种交联度可调的紫外光固化透明质酸水凝胶的制备方法,其特征在于,所述的四臂巯基交联剂由半胱氨酸衍生物和季戊四醇经过酯化反应制备所得。
5.如权利要求1或2所述的一种交联度可调的紫外光固化透明质酸水凝胶的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)中,甲基丙烯酸化透明质酸和水性四臂巯基交联剂在紫外光下经过硫醇点击化学快速固化,将甲基丙烯酸化透明质酸溶于去离子水中(2~4%),加入四臂巯基交联剂(0.5~5wt%)和光引发剂(Irgacure 2959,0.01~0.1wt%),然后在紫外光(405nm,5cm)下固化15~150s,得到吸水倍率为20~60的透明质酸水凝胶。
6.如权利要求5所述的一种交联度可调的紫外光固化透明质酸水凝胶的制备方法,其特征在于,通过控制水性四臂交联剂的用量控制交联程度,从而控制吸水倍率和力学强度。
7.如权利要求5所述的一种交联度可调的紫外光固化透明质酸水凝胶的制备方法,其特征在于,所述的透明质酸水凝胶可以达到微米级高精度成型。
8.一种如权利要求1所述的交联度可调的紫外光固化透明质酸水凝胶的制备方法得到的透明质酸水凝胶,其特征在于,所述的透明质酸水凝胶应用于促进血管内皮生长因子的释放。
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