CN110923161A - 一种除臭益生菌制剂及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及除臭益生菌制剂及其制备方法和应用，具体来说涉及一种新型除臭益生菌制剂用于养鸡场除臭的生物工艺。所述除臭益生菌制剂以甲基营养型芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）GBacillus‑9菌株为主要成分，具有绿色、安全、无污染、无残留、无公害、效果稳定的优点；可以减少鸡粪对环境的危害，减少蚊蝇、疫情的传播；可以提升鸡生长环境舒适度，增加鸡产值。有利于鸡养殖业发展，具有良好的社会效益和经济效益。
Description
技术领域
本发明涉及除臭益生菌制剂及其制备方法和应用，具体来说涉及一种新型除臭益生菌制剂用于养鸡场除臭的生物工艺。
背景技术
禽类养殖场时常会因为动物粪便，而产生恶臭并带有严重污染问题。鸡场恶臭是由于禽类肠道较短，而为使禽类能快速生长更具营养价值，禽类饲料中往往含有大量蛋白类物质。但较短的肠道无法将饲料中的蛋白完全分解，因此禽类的粪便当中往往含有大量未被消化的蛋白类物质。这些蛋白经生物自然发酵后，会产生氨气这种剧毒，有特殊臭味的气体。因此养鸡场这种禽类高度集中的场所就会散发出恶臭，并因此污染附近水土及空气。而目前市面上主要使用化学制剂除臭，不稳定且易造成二次污染。
条纹斑竹鲨（Chiloscylliumplagiosum）俗称狗鲨、犬鲨，属于软骨鱼纲（Chondrichthyes）、须鲨目（Orectolformes）须鲨科（Orectolebidea）、斑竹鲨属（Chiloscyllium），是一种小型底栖颌类脊椎动物，早在5.3亿年前便存在，是硬骨鱼类的祖先。它具有软骨鱼类和硬骨鱼类共有的特性，即复杂的生理系统、适应性免疫系统和加压循环系统，条纹斑竹鲨具有较强的免疫系统。条纹斑竹鲨的肠道杆菌历经几亿年进化、筛选，能够稳定地存在并高效率地分解蛋白。因此我们分离出条纹斑竹鲨肠道杆菌，并利用生物工程技术将其作发酵处理，从而使其可以更好地应用到养鸡场生物除臭当中去。
发明内容
本发明的目的在于提供一种一种除臭益生菌制剂，益生菌制剂以甲基营养型芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）GBacillus-9菌株为主要成分，所述菌种来源于条纹斑竹鲨肠道菌群。
所述的甲基营养型芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）GBacillus-9菌株来源于CN106957805A公开的菌株，于2016年11月24日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为CGMCC No. 13337。
优选的除臭益生菌制剂，液体状态；进一步优选的，所述益生菌制剂为甲基营养型芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）GBacillus-9菌株的发酵液。
本发明的另一个目的在于提供一种除臭益生菌制剂的制备方法，优选的，将甲基营养型芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）GBacillus-9菌株在pH 为3-10，发酵温度为16-40℃条件下，将接种量为0.5-3%接种至装液量为发酵罐体积的60%～70%的发酵罐，发酵时间5-10小时，获得甲基营养型芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）GBacillus-9菌株发酵液作为益生菌制剂。
所述的除臭益生菌制剂的制备方法，优选的甲基营养型芽孢杆菌（Bacillusmethylotrophicus）GBacillus-9菌株接种至发酵罐中的pH 为7，发酵温度为37℃，发酵时间为6h。
所述的除臭益生菌制剂的制备方法，优选的甲基营养型芽孢杆菌（Bacillusmethylotrophicus）GBacillus-9菌株的接种量为1%。
所述的除臭益生菌制剂的制备方法，优选的甲基营养型芽孢杆菌（Bacillusmethylotrophicus）GBacillus-9菌株发酵过程中发酵罐转速为220rpm。
所述的除臭益生菌制剂的制备方法，优选的益生菌制剂为甲基营养型芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）GBacillus-9菌株发酵后将发酵液直接进行装罐密封形成除臭剂。
本发明的另一个目的在于提供一种除臭益生菌制剂用于鸡场除臭的方法，优选的，通过喷洒的方式将除臭剂喷洒于鸡场中。
所述的除臭益生菌制剂用于鸡场除臭的方法，优选的，直接喷洒甲基营养型芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）GBacillus-9菌株发酵液于鸡场中。
本发明的除臭益生菌制剂具有绿色、安全、无污染、无残留、无公害、效果稳定的优点；可以减少鸡粪对环境的危害，减少蚊蝇、疫情的传播；可以提升鸡生长环境舒适度，增加鸡产值。有利于鸡养殖业发展，具有良好的社会效益和经济效益。
具体实施方式
以下结合本发明具体的实施例做进一步解释，但本发明并不局限于以下实施例。
除臭益生菌制剂制备：1）温度：甲基营养型芽孢杆菌（Bacillusmethylotrophicus）GBacillus-9菌株在16℃-40℃均可良好生长，其最适生长温度为37℃。
2）时间：在37℃条件下，通过生长曲线试验，甲基营养型芽孢杆菌（Bacillusmethylotrophicus）GBacillus-9菌株在6h后进入稳定期，10h后进入衰亡期，因此采用发酵6h左右的菌液最合适，其处于对数生长期的末期，既具有较高活力，又有较多细菌数量。
3）pH：调节LB液体培养基的pH为3-10，每隔0.5设置一个梯度，接种甲基营养型芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）GBacillus-9菌株后置于37℃摇床培养6h，结果显示该菌株在pH为6.5-7.5均可良好生长，pH为7时生长最好。
4）接种量与装液量：甲基营养型芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）GBacillus-9菌株为需氧菌，生长繁殖过程中需要氧气，因此装液量为发酵罐体积的60%～70%，接种量为1%适合其生长。
5）转速：甲基营养型芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）GBacillus-9菌株发酵过程中转速过快或是过慢都会抑制其自身的生长，在转速达到220rpm时为最佳。
将获得的甲基营养型芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）GBacillus-9菌株发酵液在鸡场中喷洒，检验场内氨气含量变化，获得一种新型生物除臭益生菌制剂。
对本除臭益生菌制剂进行动物实验：将GBacillus-9发酵液喷洒在鸡场内，测定其氨气含量：
在鸡场内选取两个条件相同的鸡圈，在其中一个鸡圈直接均匀喷洒本益生菌发酵液作为实验组，另一鸡圈不做处理做对照组，每次喷洒时间为上午7点，喷洒当天记为第1天，在每个鸡圈内选取12个试点，从第一天开始每天不同时间检测其空气中氨气含量，并计算出12各点的平均氨气浓度，连续检测6天。
表1 除臭益生菌制剂实验鸡场氨气浓度检测实验数据
实验结果：实验组区域的空气中氨气含量始终显著低于对照组，在喷洒本除臭制剂后的第一、二、三、四、五、六天，实验组平均比对照组空气中氨气含量低了52.4%、50.4%、39.2%、40.2%、45.5%和44.0%，经六天的检测，实验组相较于对照组氨气含量降低46.8%，证明本发明能够较大幅度降低养鸡场圈舍中氨气的浓度，除臭效果明显。
Claims (10)
1.一种除臭益生菌制剂，其特征在于，所述益生菌制剂以甲基营养型芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）GBacillus-9菌株为主要成分，所述菌种来源于条纹斑竹鲨肠道菌群。
2.根据权利要求1所述的除臭益生菌制剂，其特征在于，所述益生菌制剂为液体状态。
3.根据权利要求1或2任一项所述的除臭益生菌制剂，其特征在于，所述益生菌制剂为甲基营养型芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）GBacillus-9菌株的发酵液。
4.根据权利要求1-3中仍一项所述的除臭益生菌制剂的制备方法，其特征在于，将甲基营养型芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）GBacillus-9菌株在pH为3-10，发酵温度为16-40℃条件下，将接种量为0.5-3%接种至装液量为发酵罐体积的60%～70%的发酵罐，发酵时间5-10小时，获得甲基营养型芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）GBacillus-9菌株发酵液作为益生菌制剂。
5.根据权利要求4所述的除臭益生菌制剂的制备方法，其特征在于，基营养型芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）GBacillus-9菌株接种至发酵罐中的pH 为7，发酵温度为37℃，发酵时间为6h。
6.根据权利要求4所述的除臭益生菌制剂的制备方法，其特征在于，基营养型芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）GBacillus-9菌株的接种量为1%。
7.根据权利要求5-6任一项所述的除臭益生菌制剂的制备方法，其特征在于，基营养型芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）GBacillus-9菌株发酵过程中发酵罐转速为220rpm。
8.根据权利要求5-6任一项所述的除臭益生菌制剂的制备方法，其特征在于，所述益生菌制剂为甲基营养型芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）GBacillus-9菌株发酵后将发酵液直接进行装罐密封形成除臭剂。
9.根据权利要求1-3任一项所述的除臭益生菌制剂用于鸡场除臭的方法，其特征在于，通过喷洒的方式将除臭剂喷洒于鸡场中。
10.根据权利要求1-3任一项所述的除臭益生菌制剂用于鸡场除臭的方法，其特征在于，直接喷洒甲基营养型芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）GBacillus-9菌株发酵液于鸡场中。
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