CN110903375A - 一种肝素结合蛋白生产提纯方法 - Google Patents
一种肝素结合蛋白生产提纯方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110903375A CN110903375A CN201910969105.0A CN201910969105A CN110903375A CN 110903375 A CN110903375 A CN 110903375A CN 201910969105 A CN201910969105 A CN 201910969105A CN 110903375 A CN110903375 A CN 110903375A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- binding protein
- heparin
- blood vessel
- blood sample
- purifying
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 102100030009 Azurocidin Human genes 0.000 title claims abstract description 76
- 101710154607 Azurocidin Proteins 0.000 title claims abstract description 76
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 39
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 39
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 claims abstract description 39
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 16
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims abstract description 14
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 claims abstract description 10
- 101710162629 Trypsin inhibitor Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 229940122618 Trypsin inhibitor Drugs 0.000 claims abstract description 8
- 239000002753 trypsin inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims abstract description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 6
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims abstract description 5
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims abstract description 5
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims abstract description 5
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 28
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 27
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 13
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 11
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 claims description 8
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 claims description 8
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 claims description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 claims description 7
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 5
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 5
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 claims description 4
- 239000004503 fine granule Substances 0.000 claims 1
- 210000004565 granule cell Anatomy 0.000 claims 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract description 5
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 abstract description 5
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 21
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 6
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 6
- 230000036303 septic shock Effects 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 4
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 2
- 241001052560 Thallis Species 0.000 description 2
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 2
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 2
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 102000016942 Elastin Human genes 0.000 description 1
- 108010014258 Elastin Proteins 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003388 anti-hormonal effect Effects 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N aspartic acid group Chemical group N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 102000023732 binding proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 229920002549 elastin Polymers 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000002433 mononuclear leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000012521 purified sample Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种肝素结合蛋白生产提纯方法，涉及医学生产相关领域，为解决现有技术中的对肝素结合蛋白的提取纯度不够，还需要进行重组生产来提高肝素结合蛋白含量，对于较大规模生产不利的问题。包括如下步骤：S1：从感染区域内的血管中抽取定量的血液样本；S2：将血液样本静置1h；S3：将静置后的血液样本于室温下静置4‑5h后，通过离心机进行血浆与血清的分离；S4：将胰蛋白酶抑制剂与琼脂糖凝胶偶联，得到中间物质；S5：将S4得到的中间物质加入S3制得的血浆中，通过层析法将肝素结合蛋白从血浆中吸附出来，此时得到含有肝素结合蛋白的吸附液；S6：通过解吸剂将肝素结合蛋白从吸附液中吸附出来。
Description
技术领域
本发明涉及医学生产相关领域，具体为一种肝素结合蛋白生产提纯方法。
背景技术
肝素结合蛋白(heparin-binding protein,HBP)，是中性粒细胞来源的颗粒蛋白，其结构包含222个氨基酸的单链蛋白，含有8个半胱氨酸残基，在第100、114或145位天冬氨酸残基上具有糖基化位点，结构类似于中性粒细胞弹性蛋白，与其同源性为45％。肝素结合蛋白是一种多功能的蛋白,可以通过结血管上皮细胞,改变透性,诱导血浆渗漏和炎症反素结合蛋白还能够趋化和激活单核白细胞和巨噬细胞,应对细菌感染,参与调节免疫反应。
肝素结合蛋白能够应对细菌感染,参与调节免疫反应，所以对于肝素结合蛋白的生产研究越来越重视，因肝素结合蛋白在一般感染时达到20-30ng/ml，严重感染时还可能超过100ng/ml，但现有对肝素结合蛋白的提取纯度不够，还需要进行重组生产来提高肝素结合蛋白含量，对于较大规模生产不利；因此市场急需研制一种肝素结合蛋白生产提纯方法来帮助人们解决现有的问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种肝素结合蛋白生产提纯方法，以解决上述背景技术中提出的对肝素结合蛋白的提取纯度不够，还需要进行重组生产来提高肝素结合蛋白含量，对于较大规模生产不利的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种肝素结合蛋白生产提纯方法，包括如下步骤：
S1：从感染区域内的血管中抽取定量的血液样本；
S2：将血液样本静置1h；
S3：将静置后的血液样本于室温下静置4-5h后，通过离心机进行血浆与血清的分离；
S4：将胰蛋白酶抑制剂与琼脂糖凝胶偶联，得到中间物质；
S5：将S4得到的中间物质加入S3制得的血浆中，通过层析法将肝素结合蛋白从血浆中吸附出来，此时得到含有肝素结合蛋白的吸附液；
S6：通过解吸剂将肝素结合蛋白从吸附液中吸附出来。
优选的，所述的血管内含有炎症感染细菌菌体。
优选的，所述的血管为人类的血管。
优选的，所述的血管为与人类基因同源性高的哺乳动物的血管，所述血液样本从已有感染症状的哺乳动物血管中抽取，或者向人工饲养哺乳动物的血管中打入含感染病菌的菌液，等待12小时后检测哺乳动物已感染炎症后抽取血液样本，此时菌体已刺激中细粒细胞释放肝素结合蛋白。
优选的，所述S2中，血液样本放置于一灭菌容器内，将容器放在37℃的温水中隔水静置。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
1、该发明中，血液样本不仅仅使用人类感染区域血管中抽取的血液样本，还能采用与人类基因同源性高的有炎症哺乳动物的血液样本，在前期，通过类感染区域血管中抽取的血液样本与哺乳动物的血液样本的提纯对比实验来确定提取的有效性，并根据不同哺乳动物同样血液含量提取的肝素结合蛋白的含量不同来确定人工饲养哺乳动物的品种，后通过人工干预哺乳动物感染炎症，以此将提纯的样本内含量最大化，规模生产中肝素结合蛋白的含量才能有效增加；
2、该发明中，将胰蛋白酶抑制剂与琼脂糖凝胶偶联，得到中间物质，将中间物质加入去血清处理后的血浆中，通过层析法将肝素结合蛋白从血浆中吸附出来，此时得到含有肝素结合蛋白的吸附液，通过解吸剂将肝素结合蛋白从吸附液中吸附出来，通过胰蛋白酶抑制剂与琼脂糖凝胶的结合作为肝素结合蛋白的亲和物实现肝素结合蛋白的分离，而琼脂糖凝胶是以琼脂糖为支持介质制备的凝胶，其使用成本低，孔径大，与胰蛋白酶抑制剂作为亲和色谱法的中间吸附物质对肝素结合蛋白有良好的吸附效果，能够有效的进行肝素结合蛋白的提纯，直接在提取阶段进行提纯，相比于现有重组生产来提纯的方式，中间过程少，在琼脂糖凝胶使用成本低的前提下，整个过程步骤更加简单，能够适应较大规模生产。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。
实施例1
本发明提供的一种实施例：一种肝素结合蛋白生产提纯方法，包括如下步骤：
S1：从感染区域内的血管中抽取定量的血液样本，血管内含有炎症感染细菌菌体；
HBP主要是由PMN受外界刺激所释放，所以正常人血中HBP含量很低，一般不超过10ng/ml，当有感染发生时，部分细菌侵入到血管内，菌体本身或者细菌释放的毒素等物质刺激中细粒细包释放HBP从而导致血中HBP含量升高，HBP在一般感染时能达到20-30ng/ml，ICU中严重感染会更高，可能超过100ng/ml，所以血管中有刺激用菌体才可能出现HBP，但不是所有有感染症状的病人体内HBP含量都会升高；
血管为人类的血管，从已感染病患的体内抽取血液，因现有对患有非脓毒性休克和脓毒性休克患者的检测基本是通过检测体内HBP含量来确定的，脓毒性休克患者体内HBP含量都会升高；
血管为与人类基因同源性高的哺乳动物的血管，与人类基因同源性高，其生存机制等与人类接近，血液样本从已有感染症状的哺乳动物血管中抽取，或者向人工饲养哺乳动物的血管中打入含感染病菌的菌液，人工饲养哺乳动物为标准哺乳动物，没有基因缺陷，除了炎症外没有其他患病症状，等待12小时后检测哺乳动物已感染炎症后抽取血液样本，此时菌体已刺激中细粒细胞释放肝素结合蛋白；
虽然肝素结合蛋白原材料来源可以为多种，但一次提纯效果下需要是同种来源，因此在较大规模生产作用下，是通过人工饲养动物，并干预其生长使其患病后提取肝素结合蛋白，对现有患病病患和哺乳动物血液的抽取主要是在于前期少量提纯试验与对比实验中；
S2：将血液样本放置于一灭菌容器内静置1h，将容器放在37℃的温水中隔水静置，进行自然沉降；
S3：将静置后的血液样本于室温下静置4h后，通过离心机进行血浆与血清的分离；
S4：将胰蛋白酶抑制剂与琼脂糖凝胶偶联，得到中间物质；
S5：将S4得到的中间物质加入S3制得的血浆中，通过层析法将肝素结合蛋白从血浆中吸附出来，此时得到含有肝素结合蛋白的吸附液；
S6：通过解吸剂将肝素结合蛋白从吸附液中吸附出来。
实施例2
本发明提供的一种实施例：一种肝素结合蛋白生产提纯方法，包括如下步骤：
S1：从感染区域内的血管中抽取定量的血液样本，血管内含有炎症感染细菌菌体；
HBP主要是由PMN受外界刺激所释放，所以正常人血中HBP含量很低，一般不超过10ng/ml，当有感染发生时，部分细菌侵入到血管内，菌体本身或者细菌释放的毒素等物质刺激中细粒细包释放HBP从而导致血中HBP含量升高，HBP在一般感染时能达到20-30ng/ml，ICU中严重感染会更高，可能超过100ng/ml，所以血管中有刺激用菌体才可能出现HBP，但不是所有有感染症状的病人体内HBP含量都会升高；
血管为人类的血管，从已感染病患的体内抽取血液，因现有对患有非脓毒性休克和脓毒性休克患者的检测基本是通过检测体内HBP含量来确定的，脓毒性休克患者体内HBP含量都会升高；
血管为与人类基因同源性高的哺乳动物的血管，与人类基因同源性高，其生存机制等与人类接近，血液样本从已有感染症状的哺乳动物血管中抽取，或者向人工饲养哺乳动物的血管中打入含感染病菌的菌液，人工饲养哺乳动物为标准哺乳动物，没有基因缺陷，除了炎症外没有其他患病症状，等待12小时后检测哺乳动物已感染炎症后抽取血液样本，此时菌体已刺激中细粒细胞释放肝素结合蛋白；
虽然肝素结合蛋白原材料来源可以为多种，但一次提纯效果下需要是同种来源，因此在较大规模生产作用下，是通过人工饲养动物，并干预其生长使其患病后提取肝素结合蛋白，对现有患病病患和哺乳动物血液的抽取主要是在于前期少量提纯试验与对比实验中；
S2：将血液样本放置于一灭菌容器内静置1h，将容器放在37℃的温水中隔水静置，进行自然沉降；
S3：将静置后的血液样本于室温下静置5h后，通过离心机进行血浆与血清的分离；
S4：将胰蛋白酶抑制剂与琼脂糖凝胶偶联，得到中间物质；
S5：将S4得到的中间物质加入S3制得的血浆中，通过层析法将肝素结合蛋白从血浆中吸附出来，此时得到含有肝素结合蛋白的吸附液；
S6：通过解吸剂将肝素结合蛋白从吸附液中吸附出来。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
Claims (5)
1.一种肝素结合蛋白生产提纯方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1：从感染区域内的血管中抽取定量的血液样本；
S2：将血液样本静置1h；
S3：将静置后的血液样本于室温下静置4-5h后，通过离心机进行血浆与血清的分离；
S4：将胰蛋白酶抑制剂与琼脂糖凝胶偶联，得到中间物质；
S5：将S4得到的中间物质加入S3制得的血浆中，通过层析法将肝素结合蛋白从血浆中吸附出来，此时得到含有肝素结合蛋白的吸附液；
S6：通过解吸剂将肝素结合蛋白从吸附液中吸附出来。
2.根据权利要求1所述的一种肝素结合蛋白生产提纯方法，其特征在于：所述的血管内含有炎症感染细菌菌体。
3.根据权利要求2所述的一种肝素结合蛋白生产提纯方法，其特征在于：所述的血管为人类的血管。
4.根据权利要求2所述的一种肝素结合蛋白生产提纯方法，其特征在于：所述的血管为与人类基因同源性高的哺乳动物的血管，所述血液样本从已有感染症状的哺乳动物血管中抽取，或者向人工饲养哺乳动物的血管中打入含感染病菌的菌液，等待12小时后检测哺乳动物已感染炎症后抽取血液样本，此时菌体已刺激中细粒细胞释放肝素结合蛋白。
5.根据权利要求1所述的一种肝素结合蛋白生产提纯方法，其特征在于：所述S2中，血液样本放置于一灭菌容器内，将容器放在37℃的温水中隔水静置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910969105.0A CN110903375A (zh) | 2019-10-12 | 2019-10-12 | 一种肝素结合蛋白生产提纯方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910969105.0A CN110903375A (zh) | 2019-10-12 | 2019-10-12 | 一种肝素结合蛋白生产提纯方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN110903375A true CN110903375A (zh) | 2020-03-24 |
Family
ID=69815349
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201910969105.0A Pending CN110903375A (zh) | 2019-10-12 | 2019-10-12 | 一种肝素结合蛋白生产提纯方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN110903375A (zh) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1995028949A1 (en) * | 1994-04-21 | 1995-11-02 | Novo Nordisk A/S | Heparin-binding protein for the treatment of sepsis and processes for its preparation |
| US5814602A (en) * | 1988-03-17 | 1998-09-29 | Novo Nordisk A/S | Heparin-binding proteins |
| CN107167589A (zh) * | 2017-06-23 | 2017-09-15 | 宁波艾科生物科技有限公司 | 一种快速检测血液中肝素结合蛋白浓度的方法 |
| CN108267592A (zh) * | 2017-01-03 | 2018-07-10 | 普迈德（北京）科技有限公司 | 一种免疫微球层析法检测肝素结合蛋白检测试纸 |
-
2019
- 2019-10-12 CN CN201910969105.0A patent/CN110903375A/zh active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5814602A (en) * | 1988-03-17 | 1998-09-29 | Novo Nordisk A/S | Heparin-binding proteins |
| WO1995028949A1 (en) * | 1994-04-21 | 1995-11-02 | Novo Nordisk A/S | Heparin-binding protein for the treatment of sepsis and processes for its preparation |
| CN108267592A (zh) * | 2017-01-03 | 2018-07-10 | 普迈德（北京）科技有限公司 | 一种免疫微球层析法检测肝素结合蛋白检测试纸 |
| CN107167589A (zh) * | 2017-06-23 | 2017-09-15 | 宁波艾科生物科技有限公司 | 一种快速检测血液中肝素结合蛋白浓度的方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 刘继业等: "《饲料安全工作手册上》", 30 April 2001, 中国农业科技出版社 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4342828A (en) | Method for producing substance capable of stimulating differentiation and proliferation of human granulopoietic stem cells | |
| US9738882B2 (en) | Method for removing endotoxin from proteins | |
| CN105601736B (zh) | 一种抗呼吸道合胞病毒人免疫球蛋白及其制备方法 | |
| CN114989254B (zh) | 一种多肽及其设计方法和在制备抑制具核梭杆菌产品或预防结直肠癌药物中的应用 | |
| Lee et al. | Oxidative DNA and mitochondrial DNA change in patients with SLE | |
| JP5908496B2 (ja) | トランスジェニックイネの子実からヒト血清アルブミンを抽出する方法 | |
| CN110903375A (zh) | 一种肝素结合蛋白生产提纯方法 | |
| CN107446905B (zh) | 一种重组人溶菌酶纯化方法 | |
| CN115947829A (zh) | 基于凝血酶亲和磁性微球的水蛭素分离纯化方法及其应用 | |
| US3905870A (en) | Purification of kallikrein | |
| JPS6041615A (ja) | コロニ−形成刺激因子の製造方法 | |
| CN109265553B (zh) | 一种细胞珠蛋白与方格星虫纤溶酶的融合蛋白 | |
| CA3200066A1 (en) | Method for purifying recombinant protein | |
| EP3307346A1 (en) | Composition and method for inducing anti-inflammatory response | |
| CN111848784B (zh) | 一种高浓度静注人免疫球蛋白的分离纯化方法 | |
| CN109485711B (zh) | 一种蚁狮小分子肽及其分离纯化方法和应用 | |
| KR20020057960A (ko) | 칼슘 이온-결합 단백질의 정제 방법 | |
| JPS62244441A (ja) | 抗体固定化担体 | |
| EP2511288B1 (en) | Method of obtaining inhibitors of cysteine peptidases with an electrophoretic purity from biological materials | |
| KR930008097B1 (ko) | 콜로니 형성 자극 인자의 정제방법 | |
| JPS5848159B2 (ja) | ウロキナ−ゼの精製方法 | |
| CN117338820A (zh) | 一种副拟杆菌外泌体的治疗急性肺损伤的用途 | |
| CN113045634A (zh) | 一种补体h因子制备方法 | |
| AU2014201943B2 (en) | Method for removing endotoxin from proteins | |
| JPS5841823A (ja) | 尿の保存方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20200324 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |