CN110894529A - 一种与结直肠癌早期诊断相关的环状rna标志物、检测引物、试剂盒及其应用 - Google Patents

一种与结直肠癌早期诊断相关的环状rna标志物、检测引物、试剂盒及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种与结直肠癌早期诊断相关的环状RNA标志物、检测引物、试剂盒及其应用，属于基因工程及肿瘤学领域。本发明中与结直肠癌早期诊断相关的环状RNA标志物为has‑circ‑007667，该circRNA在结直肠癌组织中呈特异性低表达，而在正常组织中没有这种特异性低表达，说明has‑circ‑007667可以作为特异的分子标志物来提高结直肠癌的诊断效率，用于临床结直肠癌的早期辅助诊断。根据has‑circ‑007667序列设计合成的特异性检测引物可以检测样本中has‑circ‑007667的表达量，提高临床结直肠癌早期诊断的敏感性和特异性，检测结果准确、稳定。

Description

一种与结直肠癌早期诊断相关的环状RNA标志物、检测引物、 试剂盒及其应用
技术领域
本发明涉及一种与结直肠癌早期诊断相关的环状RNA标志物，针对该环状RNA标志物设计的检测引物、试剂盒及其应用，属于基因工程及肿瘤学领域。
背景技术
环状RNA(circRNA)是一类由反向剪切力产生的内源性非编码RNA分子，呈共价闭合的环状结构，不具有5’末端帽子和3’末端poly(A)尾巴。由于环状RNA的特殊结构，导致其对核酸酶具有更高的耐受性，比线性RNA更为稳定，不易降解，可在真核生物的细胞浆中大量而稳定的存在，其丰度有时甚至比相应的线性mRNA高10余倍。环状RNA在不同物种中起到miRNA海绵的作用，称之为竞争性內源RNA(ceRNA)，能竞争性结合miRNA，从而调控靶基因的表达。
结直肠癌是世界上常见的三大恶性肿瘤之一，致死率居第四位。预计到2030年，其全球将新增加220万病例和110万病例死亡。确定一些新的分子标记物以提高结直肠癌诊断效率至关重要。已有研究发现，circRNA和结直肠癌有关，例如公布号CN108949985A的中国发明专利公开了一种结直肠癌诊断标志物circ-WHSC1及其引用，circ-WHSC1在结直肠癌肿瘤中呈特异性高表达，而在正常组织中没有这种特异性高表达，可作为结直肠癌诊断生物标志物或药物治疗靶点；通过检测受试者体内的circ-WHSC1表达，可以快速、准确地确定结直肠癌的发生及转移。然而，目前关于circRNA及其与结直肠癌之间的关系仍知之甚少。
发明内容
本发明的目的是提供一种与结直肠癌早期诊断相关的环状RNA标志物，该标志物在结直肠癌组织中呈特异性低表达，而在正常组织中没有这种特异性低表达，可作为结直肠癌早期诊断生物标志物或药物治疗靶点。
本发明还提供一种上述环状RNA标志物在制备结直肠癌早期诊断产品中的应用。
本发明还提供一种能特异性识别上述环状RNA标志物并检测其表达水平的引物。
本发明还提供一种包含上述检测引物的试剂盒。
为了实现以上目的，本发明所采用的技术方案是：
一种与结直肠癌早期诊断相关的环状RNA标志物，所述标志物为has-circ-007667，具有如SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列。
上述环状RNA标志物在制备结直肠癌早期诊断产品中的应用。
所述应用为根据has-circ-007667序列设计合成特异性检测试剂(如引物、DNA探针等)，该试剂能基于定量PCR方法和/或高通量测序方法和/或探针杂交方法等检测样本中has-circ-007667的表达水平，或者基于免疫学方法检测has-circ-007667调控的靶基因的表达水平，并以此作为结直肠癌早期诊断的有效信息。
所述结直肠癌早期诊断产品可以为制剂、试剂盒、芯片等。
本发明通过试验发现has-circ-007667在结直肠癌组织中呈特异性低表达，而在正常组织中没有这种特异性低表达，说明has-circ-007667可以作为一个特异的分子标志物来提高结直肠癌的诊断效率，用于临床结直肠癌的早期辅助诊断。
用于检测与结直肠癌早期诊断相关的环状RNA标志物的表达水平的引物，所述引物根据has-circ-007667序列设计合成。
优选的，所述引物的序列如下所示：
has-circ-007667 Primer F：5’-AGAGCCTCTGAGGAAAGCATC-3’；
has-circ-007667 Primer R：5’-GTACTGGTGCAGGCTCCAA-3’。
本发明的检测引物能特异性识别has-circ-007667并检测组织中has-circ-007667的表达量，为临床结直肠癌的早期诊断提供有效信息。
试剂盒，包括上述用于检测与结直肠癌早期诊断相关的环状RNA标志物表达水平的引物。
进一步的，所述试剂盒中还包括聚合酶链反应试剂及其反应缓冲液、dNTP、内参引物(如GAPDH管家基因的特异性检测引物)和荧光染料(如SYBR-Green染料)等。
本发明的试剂盒使用方便、定量准确，检测结果稳定可靠，可以提高临床结直肠癌早期诊断的敏感性和特异性。该试剂盒结合常用的RNA提取试剂和通用的逆转录试剂，可以特异地检测组织中has-circ-007667的表达量，有效地用于结直肠癌早期辅助诊断。
本发明中与结直肠癌早期诊断相关的环状RNA标志物为临床治疗结直肠癌提供了新的药物靶点，可通过干扰该环状RNA标志物的表达抑制结直肠癌的生长和转移。
附图说明
图1为试验例2中10例结直肠癌病人has-circ-007667相对表达量；
图2为试验例3中5种细胞系has-circ-007667相对表达量。
具体实施方式
下述实施例仅对本发明作进一步详细说明，但不构成对本发明的任何限制。除特殊说明的外，以下各实施例及试验例中所用细胞系、试剂等均为市售商品。结直肠癌细胞系均来自于ATCC细胞库。
试验例1
筛选与结直肠癌早期诊断相关的环状RNA标志物，包括以下步骤：
1)选取胃肠外科收治的结直肠癌患者的肿瘤组织和邻近5cm以外正常结肠组织作为对照，病人肿瘤分型确定，病人未经任何放疗和化疗，使用环状RNA测序检测差异表达的环状RNA；
2)使用Trizol，提取总RNA；
3)总RNA质量检测，浓度及纯度采用nanodrop2000检测，完整性采用RNA专用琼脂糖电泳(或是2100生物分析仪)检测；
4)使用Ribo-Zero rRNA Removal Kit去除总RNA中的核糖体RNA；
利用RNase R消化线性RNA；
利用带有oligo-dT的磁珠调取带有PolyA尾的RNA，以最大程度消除线性RNA；
5)对纯化后的RNA通过离子打断的方式，打断到200-300bp片段；
6)第一链cDNA的合成：通过随机引物和逆转录酶的作用合成第一链cDNA；
第二链cDNA的合成：以第一链cDNA为模板进行第二链cDNA的合成(注：第二链cDNA合成时，其中的碱基T，被替换成U，从而达到链特异性文库的目的)；
对双链cDNA进行末端修复补平，再在3’端加个A，然后在链接酶的作用下加上测序接头；
7)通过磁珠的方式对上述加好接头的产物进行片段的选择，去除多余的接头序列；
8)PCR扩增富集文库片段，扩增完后进行一个片段大小的选择，文库大小在300-400bp；
9)文库质检：2100检测文库大小，荧光定量检测文库总浓度；
10)文库的稀释与混合：根据文库的有效浓度、文库需要得到的数据量，将含有不同index序列的文库按比例进行混合；
混合文库统一稀释到2nM，通过碱变性，形成单链文库；
11)Nextseq/Hiseq上机测序：根据文库的不同，选择最佳的上样量上机，以单链文库为模板进行PCR扩增、测序引物退火、边合成边测序。
测序结果表明，与临近正常结肠组织相比，结直肠癌组织中hascirc-007667的表达水平显著降低(p＜0.01)。
试验例2
结直肠癌组织与正常组织中has-circ-007667的表达量检测，包括以下步骤：
1)选取胃肠外科收治的10名结直肠癌患者的肿瘤组织和邻近5cm以外正常结肠组织作为对照，病人肿瘤分型确定，病人未经任何放疗和化疗。选取的肿瘤组织应尽可能避免纤维结缔组织或坏死的瘤组织，并立刻放入液氮中。
10例结直肠癌患者资料如表1所示。
表1 10例结直肠癌患者资料
病人 性别 年龄 疾病 肿瘤分型
1 男 65 结直肠癌 T3
2 女 61 结直肠癌 T4a
3 男 30 结直肠癌 T4a
4 男 65 结直肠癌 T2
5 女 68 结直肠癌 T4b
6 男 66 结直肠癌 T4a
7 男 70 结直肠癌 T3
8 女 67 结直肠癌 T2
9 女 70 结直肠癌 T2
10 女 78 结直肠癌 T3
2)提取RNA
采用TRIzol一步法提取结直肠癌肿瘤组织和正常结肠组织的总RNA，操作按照RNA提取试剂盒(Invitrogen，USA)说明书进行。采用NanoDrop2000c分别测定波长230、260、280nm处的吸光度值，确定总RNA的纯度和浓度。琼脂糖凝胶电泳检测总RNA样品，鉴定其纯度和完整度。
3)逆转录
逆转录体系如表2所示。
表2逆转录体系
Figure BDA0002320220290000051
4)RT qPCR
qPCR反应体系如表3所示。
表3 SYBR Green PCR体系
Figure BDA0002320220290000052
qPCR反应条件如表4所示。
表4 qPCR反应条件
Figure BDA0002320220290000053
Figure BDA0002320220290000061
5)RT-qPCR结果分析
以GAPDH管家基因作为内参，采用相对定量法，计算基因的相对表达量。基因的相对表达量F＝2-△△ct，F值越小意味着相对表达量降低越多。其中△△ct＝(待测样本中目的基因的ct的平均值-待测样本中管家基因的ct的平均值)-(对照样本中目的基因的ct的平均值-对照样本中管家基因的ct的平均值)。
结果发现，在10例结直肠癌病人中has-circ-007667相对表达量均有明显的降低。在病例1中has-circ-007667相对表达量降低了17.398倍，在病例2中降低了1.912倍，在病例3中降低了9.870倍，在病例4中降低了6.612倍，在病例5中降低了5.788倍，在病例6中降低了86.857倍，在病例7中降低了11.778倍，在病例8中降低了12.193倍，在病例9中降低了17.988倍，在病例10中降低了11.885倍。10例结直肠癌病人has-circ-007667相对表达量见图1。
试验例3
5种细胞系中has-circ-007667的表达量检测，包括以下步骤：
1)选取5种细胞系，其中HT-29、HCT-116和CaCo2是结肠癌细胞系；SW1463是直肠癌细胞系；NCM460是正常人结肠粘膜上皮细胞系。
5种细胞系具体信息见表5。
表5结直肠癌和正常人结肠粘膜上皮细胞系
ATCC<sup>@</sup>No. 名称 组织 疾病 生物
HTB-38<sup>TM</sup> HT-29 结肠 结直肠腺癌 人
CCL-247<sup>TM</sup> HCT-116 结肠 结直肠癌 人
HTB-37<sup>TM</sup> CaCo-2 结肠 结直肠腺癌 人
CCL-234<sup>TM</sup> SW1463 直肠 结直肠腺癌C型 人
NCM460 结肠 正常人结肠粘膜上皮 人
2)提取RNA
采用TRIzol一步法提取结直肠癌和正常人结肠粘膜上皮细胞系的总RNA，操作按照RNA提取试剂盒(Invitrogen，USA)说明书进行。采用NanoDrop2000c分别测定波长230，260，280nm处的吸光度值，确定总RNA的纯度和浓度。琼脂糖凝胶电泳检测总RNA样品，鉴定其纯度和完整度。
3)逆转录
逆转录体系如表6所示。
表6逆转录体系
Figure BDA0002320220290000071
4)RT qPCR
qPCR反应体系如表7所示。
表7 SYBR Green PCR体系
Figure BDA0002320220290000072
Figure BDA0002320220290000081
qPCR反应条件如表8所示。
表8 qPCR反应条件
Figure BDA0002320220290000082
5)RT-qPCR结果分析
以GAPDH管家基因作为内参，采用相对定量法，计算基因的相对表达量。基因的相对表达量F＝2-△△ct，F值越小意味着相对表达量降低越多。其中△△ct＝(待测样本中目的基因的ct的平均值-待测样本中管家基因的ct的平均值)-(对照样本中目的基因的ct的平均值-对照样本中管家基因的ct的平均值)。
结果发现，在4种结直肠癌细胞系中has-circ-007667相对表达量均有明显的降低(P＜0.01)。在HT29细胞系中has-circ-007667相对表达量降低了18.172倍，在SW1640细胞系中降低了24.820倍，在HCT116细胞系中降低了13.062倍，在CaCo2细胞系中降低了16.485倍。5种细胞系中has-circ-007667相对表达量见图2。
实施例1
本实施例中与结直肠癌早期诊断相关的环状RNA标志物为has-circ-007667，具有如SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列。
实施例2
本实施例中用于检测与结直肠癌早期诊断相关的环状RNA标志物的表达水平的引物，根据has-circ-007667序列设计合成，引物序列如下所示：
has-circ-007667 Primer F(SEQ ID NO.1)：5’-AGAGCCTCTGAGGAAAGCATC-3’；
has-circ-007667 Primer R(SEQ ID NO.2)：5’-GTACTGGTGCAGGCTCCAA-3’。
上述引物可用于检测样本中has-circ-007667的表达量，作为结直肠癌早期诊断的有效信息。
实施例3
本实施例中用于结直肠癌早期诊断的circRNA试剂盒(用于30次反应)，组成如下：
Figure BDA0002320220290000091
使用本实施例的试剂盒，结合常用的RNA提取试剂和通用的逆转录试剂，可以特异地检测组织中has-circ-007667的表达量，有效地用于结直肠癌早期辅助诊断。
本实施例中circRNA试剂盒的效果检查：
选取新乡医学院第一附属医院胃肠外科2018-2019年50例结直肠癌病例，提取新鲜组织标本中的总RNA，采用试验例3的方法检测has-circ-007667的相对表达量。
结果显示，circRNA试剂盒能够特异、有效地扩增出has-circ-007667序列。统计分析结果表明，在50例结直肠癌病人中has-circ-007667相对表达量均有明显的降低，平均降低了16.131倍(P＜0.01)。因此，has-circ-007667可以作为一个特异的分子标志物来提高结直肠癌的诊断效率。
实施例4
本实施例中与结直肠癌早期诊断相关的环状RNA标志物在制备结直肠癌早期诊断试剂盒中的应用，所述应用为根据has-circ-007667序列(如SEQ ID NO.3所示)设计合成特异性检测引物(如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示)，作为结直肠癌早期诊断试剂盒中的检测试剂。该检测试剂(或试剂盒)能基于高通量测序方法检测样本中has-circ-007667的表达水平，并以此作为结直肠癌早期诊断的有效信息。
需要说明的是，说明书中所列实施例仅用于理解发明的技术方案，不具有任何限制作用。除了上述实施例外，还可以有其他的实施方式。凡是采用等同替换或等效变换形成的任何技术方案，均落在本发明要求的保护范围内。
序列表
SEQUENCE LISTING
<110> 新乡医学院
<120> 一种与结直肠癌早期诊断相关的环状RNA标志物、检测引物、试剂盒及其应用
<160> 3
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<221> has-circ-007667 Primer F
<400> 1
agagcctctg aggaaagcat c 21
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列
<221> has-circ-007667 Primer R
<400> 2
gtactggtgc aggctccaa 19
<211> 732
<212> RNA
<213> 人
<221> has-circ-007667
<400> 3
cgcctgagaa ggagtttgcc tcctggcttg ttgagacgag tttcttccac ttggaccacc 60
accacctcgg ccacaggtct acccaccttg gagcctgcac cagtacggag agaccgcagc 120
accagcatca aactgcagga agcaccttca tccagtcctg attcttggaa taatccagtg 180
atgatgaccc tcaccaaaag cagatccttt acttcatcct atgctatttc tgcagctaac 240
catgtaaagg ctaaaaagca aagtcgacca ggtgccctcg ctaaaatttc acctctttca 300
tcgccctgct cctcacctct ccaagggact cctgccagca gcctggtcag caaaatttct 360
gcagtgcagt ttccagaatc tgctgacaca actgccaaac aaagcctagg ttctcacagg 420
gccttaactt acactcagag tgccccagac ctatcccctc aaatcctgac tccacctgtt 480
atatgtagca gctgtggcag accatattcc caagggaatc ctgctgatga gcccctggag 540
agaagtgggg tagccactcg gacaccaagt agaacagatg acactgctca agttacctct 600
gattatgaaa ccaataacaa cagtgacagc agtgacattg tacagaatga agatgaaaca 660
gagtgcctga gagagcctct gaggaaagca tcggcttgca gcacctatgc tcctgagacc 720
atgatgtttc tg 732

Claims (8)

1.一种与结直肠癌早期诊断相关的环状RNA标志物，其特征在于：所述环状RNA标志物为has-circ-007667，具有如SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列。
2.如权利要求1中所述的环状RNA标志物在制备结直肠癌早期诊断产品中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：根据所述的环状RNA标志物序列设计合成特异性检测试剂，用于制备结直肠癌早期诊断产品。
4.根据权利要求2或3所述的应用，其特征在于：所述产品为制剂、试剂盒或芯片。
5.检测引物，其特征在于：所述检测引物根据权利要求1中所述的环状RNA标志物序列设计合成。
6.根据权利要求5所述的检测引物，其特征在于：所述检测引物的序列如下所示：
has-circ-007667Primer F：5’-AGAGCCTCTGAGGAAAGCATC-3’；
has-circ-007667Primer R：5’-GTACTGGTGCAGGCTCCAA-3’。
7.试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中包括如权利要求5或6中所述的检测引物。
8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中还包括聚合酶链反应试剂及其反应缓冲液、dNTP、内参引物和荧光染料。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111485022A (zh) * 2020-04-27 2020-08-04 新乡医学院 一种lncRNA标志物在制备结直肠癌早期诊断产品中的应用、检测引物、试剂盒
CN112662776A (zh) * 2021-01-19 2021-04-16 广东医科大学 检测环状rna和/或所述环状rna表达量的制剂在制备结直肠癌辅助诊断试剂中的应用
CN114752676A (zh) * 2022-05-31 2022-07-15 广州市番禺区中心医院 检测hsa_circ_0099132的试剂在制备人结直肠癌辅助诊断试剂盒中的应用
CN114934120A (zh) * 2022-06-20 2022-08-23 柳州市人民医院 一种快速鉴定早期结直肠癌的环状rna标志物的应用及诊断试剂盒

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2017055487A2 (en) * 2015-09-29 2017-04-06 Max-Delbrück-Centrum Für Molekulare Medizin In Der Helmholtz-Gemeinschaft A METHOD FOR DIAGNOSING A DISEASE BY DETECTION OF circRNA IN BODILY FLUIDS
CN108883112A (zh) * 2016-02-05 2018-11-23 拜耳医药股份公司 用于癌症患者分级和癌症治疗的化合物、组合物和方法
CN109055563A (zh) * 2018-08-27 2018-12-21 新乡医学院 结直肠癌相关环状rna基因、结直肠癌分子标志物及其应用

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2017055487A2 (en) * 2015-09-29 2017-04-06 Max-Delbrück-Centrum Für Molekulare Medizin In Der Helmholtz-Gemeinschaft A METHOD FOR DIAGNOSING A DISEASE BY DETECTION OF circRNA IN BODILY FLUIDS
CN108883112A (zh) * 2016-02-05 2018-11-23 拜耳医药股份公司 用于癌症患者分级和癌症治疗的化合物、组合物和方法
CN109055563A (zh) * 2018-08-27 2018-12-21 新乡医学院 结直肠癌相关环状rna基因、结直肠癌分子标志物及其应用

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BERRISCH S ET AL.: ""NM_000921.4 Homo sapiens phosphodiesterase 3A (PDE3A), transcript variant 1, mRNA"", 《GENBANK》 *
XIANG-NAN LI ET AL.: ""RNA sequencing reveals the expression profiles of circRNA and indicates that circDDX17 acts as a tumor suppressor in colorectal cancer"", 《JOURNAL OF EXPERIMENTAL & CLINICAL CANCER RESEARCH》 *
黄亮等: ""结直肠癌中 hsa_circ_0006156 RNA 的低表达及其临床意义"", 《解放军医学院学报》 *

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111485022A (zh) * 2020-04-27 2020-08-04 新乡医学院 一种lncRNA标志物在制备结直肠癌早期诊断产品中的应用、检测引物、试剂盒
CN111485022B (zh) * 2020-04-27 2022-07-08 新乡医学院 一种lncRNA标志物在制备结直肠癌早期诊断产品中的应用、检测引物、试剂盒
CN112662776A (zh) * 2021-01-19 2021-04-16 广东医科大学 检测环状rna和/或所述环状rna表达量的制剂在制备结直肠癌辅助诊断试剂中的应用
CN112662776B (zh) * 2021-01-19 2022-06-21 广东医科大学 检测环状rna和/或所述环状rna表达量的制剂在制备结直肠癌辅助诊断试剂中的应用
CN114752676A (zh) * 2022-05-31 2022-07-15 广州市番禺区中心医院 检测hsa_circ_0099132的试剂在制备人结直肠癌辅助诊断试剂盒中的应用
CN114752676B (zh) * 2022-05-31 2023-05-19 广州市番禺区中心医院 检测hsa_circ_0099132的试剂在制备人结直肠癌辅助诊断试剂盒中的应用
CN114934120A (zh) * 2022-06-20 2022-08-23 柳州市人民医院 一种快速鉴定早期结直肠癌的环状rna标志物的应用及诊断试剂盒

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