CN110865184B - Srsp蛋白和srsp抗原表位肽的应用及诊断和治疗肿瘤的产品 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种SRSP蛋白和SRSP抗原表位肽的应用及诊断和治疗肿瘤的产品，涉及生物技术领域，本发明提供了一种用于肿瘤预后评估判断的新标记物和抗癌药物干预靶标：SRSP。临床研究证实，SRSP在肿瘤组织中高表达与肿瘤患者预后差呈正相关。癌组织中SRSP表达水平与肿瘤患者分期呈正相关，癌组织中SRSP高水平的患者具有更短的生存期和更高的死亡率。据此，SRSP作为生物标志物有效的提高了临床中进行肿瘤预后判断的阳性率。

Description

SRSP蛋白和SRSP抗原表位肽的应用及诊断和治疗肿瘤的产品

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其是涉及一种SRSP蛋白和SRSP抗原表位肽的应用及诊断和治疗肿瘤的产品。

背景技术

癌症在发病率和死亡率方面已经成为威胁健康与生命的主要疾病。我国癌症的发病率正在逐年提升，同时伴有年轻化的趋势。实体恶性肿瘤发病较隐匿、大多数无明显的特异性症状，一旦发现常已进入癌症晚期，约80％以上的实体恶性肿瘤患者在首次诊疗中即为中晚期，失去了最佳的治疗机会。

实体恶性肿瘤的发生发展是多因子、多步骤的过程，目前实体恶性肿瘤的病因尚未完全清楚。尽管对恶性肿瘤发病机制不断有新的认识，医疗技术手段也在不断提升，但晚期的恶性肿瘤患者的预后依然很差，其中，缺乏具体的预后标志物是至关重要的原因。因此，亟需更有效、更敏感的预后标志物，来促进诊断、预测恶性肿瘤患者的预后，并合理的制定治疗方案，从而提高患者的生存率。

非编码RNA，包括长链非编码RNA，被认为以RNA分子方式发挥功能，例如调控肿瘤发生发展的功能。我们研究发现有某些长链非编码RNA能够产生多肽或蛋白质分子。这些长链非编码RNA编码产生的多肽或蛋白质可能是一个新的肿瘤等疾病的标志物、药物靶标的资源库。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一个目的在于提供SRSP蛋白和/或SRSP抗原表位肽在制备用于肿瘤诊断和/或预后评估的产品中的应用，以至少缓解现有技术中存在的技术问题之一。

本发明的第二个目的在于提供一种诊断肿瘤的试剂，本发明的第三个目的在于提供一种诊断肿瘤的试剂盒，以实现肿瘤的有效诊断。

本发明的第四个目的在于提供一种治疗肿瘤的药物靶标，以实现肿瘤的靶向治疗。

本发明提供了SRSP蛋白和/或SRSP抗原表位肽在制备用于肿瘤诊断和/或预后评估的产品中的应用；

所述SRSP蛋白具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列；

所述SRSP抗原表位肽具有如SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列。

进一步地，所述肿瘤为实体瘤；

优选地，所述实体瘤包括胰腺癌、膀胱癌、结肠直肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肾癌、肝细胞癌、肺癌、卵巢癌、宫颈癌、胃癌、食管癌、头颈部癌、黑素瘤、神经内分泌癌、CNS癌、脑肿瘤、骨癌或软组织肉瘤中的一种或多种。

进一步地，所述产品包括试剂、试剂盒或药物。

本发明还提供了一种用于肿瘤诊断和/或预后评估的试剂，所述试剂包括用于检测SRSP蛋白和/或SRSP抗原表位肽的生物大分子。

进一步地，所述的生物大分子包括：抗体或抗体功能片段；

优选地，所述生物大分子为抗体。

进一步地，所述抗体的制备方法包括：以SRSP蛋白和/或SRSP抗原表位肽为免疫原免疫动物，收集被免疫动物的血清，得到抗体。

本发明还提供了一种用于肿瘤诊断和/或预后评估的试剂盒，所述试剂盒包括上述的试剂。

与现有技术相比，本发明至少具有如下有益效果：

本发明提供了一种用于肿瘤诊断和/或预后评估判断的新标记物：SRSP。临床研究证实，SRSP在肿瘤组织中高表达与肿瘤患者预后差呈正相关。癌组织中SRSP表达水平与肿瘤患者分期呈正相关，癌组织中SRSP高水平的患者具有更短的生存期和更高的死亡率。据此，SRSP作为生物标志物有效的提高了临床中进行肿瘤预后判断的阳性率。

本发明提供的试剂或试剂盒包括用于检测SRSP蛋白和/或SRSP抗原表位肽的生物大分子，本发明通过采用针对SRSP的特异性的生物大分子来检测SRSP在组织切片中的表达强弱，可有助于判断肿瘤的发生及其恶性程度和转移倾向以及肿瘤患、患者预后评估。

附图说明

为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1所示为本发明实施例2提供的SRSP-GFP融合蛋白的表达情况的结果图；

图2为本发明实施例3提供的在同一来源不同侵袭转移潜能癌细胞中SRSP表达的结果；

图3a为本发明实施例4提供的肝癌组织与其对应癌旁组织中SRSP表达的结果；

图3b为本发明实施例4提供的胃癌组织与其对应癌旁组织中SRSP表达的结果；

图4本发明实施例5提供的在结肠癌和对应癌旁正常结肠组织中SRSP表达的示意图；

图5为本发明实施例5提供的SRSP在101例结肠癌组织与癌旁正常结肠组织石蜡切片中表达的统计分析结果(N：癌旁组织，T：癌组织)；

图6为本发明实施例5提供的SRSP表达水平高、低与结肠癌患者分期关联的结果；

图7为本发明实施例5提供的SRSP表达水平高、低与结肠癌患者死亡率关联的结果；

图8为本发明实施例5提供的SRSP高、低表达水平影响结肠癌患者预后判断的Kaplan-Meier生存分析曲线图。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

除非本文另有定义，连同本发明使用的科学和技术术语应具有本领域普通技术人员通常理解的含义。术语的含义和范围应当清晰，然而，在任何潜在不明确性的情况下，本文提供的定义优先于任何字典或外来定义。在本申请中，除非另有说明，术语“包括”及其他形式的使用是非限制性的。

一般地，连同本文描述的细胞和组织培养、分子生物学、免疫学、微生物学、遗传学以及蛋白和核酸化学和杂交使用的命名法和其技术是本领域众所周知和通常使用的那些。除非另有说明，本发明的方法和技术一般根据本领域众所周知，且如各种一般和更具体的参考文献中所述的常规方法来进行，所述参考文献在本说明书自始至终引用和讨论。酶促反应和纯化技术根据制造商的说明书、如本领域通常实现的或如本文所述来进行。连同本文描述的分析化学、合成有机化学以及医学和药物化学使用的命名法、以及其实验室程序和技术是本领域众所周知和通常使用的那些。

根据本发明的一个方面，提供了SRSP蛋白和/或SRSP抗原表位肽在制备用于肿瘤诊断和/或预后评估的产品中的应用；

所述SRSP蛋白具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列；

所述SRSP的抗原表位肽具有如SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列。

在本发明之前，还没有出现涉及本发明的SRSP以及本发明的SRSP抗原表位肽可用于肿瘤预后评估及诊断的公开报道，基于此，本发明提供了一种用于肿瘤诊断和/或预后评估判断的新标记物：SRSP。临床研究证实，SRSP在肿瘤组织中高表达与肿瘤患者预后差呈正相关。癌组织中SRSP表达水平与肿瘤患者分期呈正相关，癌组织中SRSP高水平的患者具有更短的生存期和更高的死亡率。据此，SRSP作为生物标志物有效的提高了临床中进行肿瘤预后判断的阳性率。

需要说明的是，增加的SRSP蛋白和/或SRSP抗原表位肽的表达量是肿瘤的指征和/或肿瘤预后不良的指征。

肿瘤诊断和/或预后评估，指的是本发明提供的SRSP蛋白和/或SRSP抗原表位肽可以用于诊断肿瘤，或者用于对肿瘤进行预后评估，或者同时用于肿瘤的诊断和预后评估。

其中，本发明中涉及的SRSP可以为：与SEQ ID NO.1所示序列完全相同的序列，或者含有SEQ ID NO.1所示序列的序列，或者SEQ ID NO.1所示序列的生物活性功能片段，或者SEQ ID NO.1所示序列的变体。凡是具备SEQ ID NO.1所示序列功能的序列，都应当理解为本发明的保护范围，而不应当仅理解为与SEQ ID NO.1所示序列完全相同的序列。

同样地，本发明中涉及的SRSP抗原表位肽可以为：与SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示序列完全相同的序列，或者含有SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示序列的序列，或者SEQID NO.2或SEQ ID NO.3所示序列的生物活性功能片段，或者SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示序列的变体。凡是具备SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示序列功能的序列，都应当理解为本发明的保护范围，而不应当仅理解为与SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示序列完全相同的序列。

在一些优选的实施方式中，所述肿瘤为实体瘤；

优选地，所述实体瘤包括胰腺癌、膀胱癌、结肠直肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肾癌、肝细胞癌、肺癌、卵巢癌、宫颈癌、胃癌、食管癌、头颈部癌、黑素瘤、神经内分泌癌、CNS癌、脑肿瘤、骨癌或软组织肉瘤中的一种或多种。

在一些优选的实施方中，所述产品包括试剂、试剂盒或药物。

根据本发明的第二个方面，提供了一种用于肿瘤诊断和/或预后评估的试剂，所述试剂包括用于检测SRSP蛋白和/或SRSP抗原表位肽的生物大分子。

蛋白或蛋白多肽的检测剂可选用本领域技术人员所公知的试剂，例如能够与该蛋白或蛋白多肽发生抗原抗体反应，且标记有荧光标记的生物大分子等。

在一些优选的实施方式中，所述的生物大分子包括：抗体或抗体功能片段；

优选地，所述生物大分子为抗体。

在一些优选的实施方式中，所述抗体的制备方法包括：以SRSP蛋白和/或SRSP抗原表位肽为免疫原免疫动物，收集被免疫动物的血清，得到抗体。

其中，可以以SRSP蛋白为抗原免疫动物，也可以以SRSP抗原表位肽为抗原免疫动物，或者也可以同时以SRSP蛋白和SRSP抗原表位肽为抗原免疫动物。优选地，以SRSP抗原表位肽为抗原免疫动物制备抗原，SRSP抗原表位肽能够有效刺激被免疫动物产生免疫反应得到抗体，且特异性强，成本更低。

根据本发明的第三个方面，提供了一种用于肿瘤诊断和/或预后评估的试剂盒，所述试剂盒包括上述的试剂。

本发明提供的试剂或试剂盒包括用于检测SRSP蛋白和/或SRSP抗原表位肽的生物大分子，本发明通过采用针对SRSP的特异性的生物大分子来检测SRSP在组织切片中的表达强弱，可有助于判断肿瘤的发生及其恶性程度和转移倾向。

下面通过具体的实施例进一步说明本发明，但是，应当理解为，这些实施例仅仅是用于更详细地说明之用，而不应理解为用于以任何形式限制本发明。

实施例1制备抗SRSP抗体

具体操作流程如下：

(1)通过化学合成的方法对设计的针对SRSP的抗原表位肽进行合成(吉尔生化(上海)有限公司)，随后将合成的抗原表位肽与钥孔戚血蓝蛋白偶联作为免疫抗原，采用高压液相色谱(HPLC)对该免疫抗原进行分离纯化，使其纯度＞85％。

取2只体重大于2kg健康的新西兰兔，分别命名为1号兔和2号兔。2只兔子采集2～3ml兔耳动脉血液，分离获得血清，将该血清作为阴性对照血清。

(2)将上述经分离纯化后的免疫抗原对新西兰1号兔和2号兔进行免疫抗原多点注射。具体过程如下：

第一步，将钥孔戚血蓝蛋白偶联的SRSP抗原表位肽在PBS缓冲液中溶解。然后按照质量1：1等比与弗氏完全佐剂(Freund’s complete adjuvant,FCA)，或者弗氏不完全佐剂(Freund’s incomplete adjuvant,FIA)混合乳化。

第二步，将500μg经FCA乳化免疫抗原在新西兰1号和2号的兔背部进行多点注射。2周后，用相同的方式重新注射一次FCA乳化的500μg免疫抗原。2周后，改用FIA乳化的250μg免疫抗原在新西兰1号和2号兔的背部进行多点注射。之后每隔1周，用250μg经FIA乳化的免疫抗原在1号和2号兔的背部进行多点注射，共进行4次。

(3)免疫抗原多点注射过程结束前的1周，收集新西兰1号和2号兔耳动脉的血液各2～3ml，分离纯化出血清，进行酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbentassay,ELISA)分析，判断所制备针对SRSP抗体的效价。

随后，将上述分离纯化得到的1号和2号兔耳血清与上述的SRSP免疫抗原进行亲和纯化，从而获得抗SRSP抗体。

(4)用PBS缓冲液将SRSP免疫抗原稀释到5μg/ml。在96孔板的相应孔中每孔加入100μl稀释好的免疫抗原，4℃孵化过夜。次日，弃掉96孔板液体，用蒸馏水润洗96孔板3次。润洗后每孔加200μl封闭液(含PBS缓冲液，1％BSA，0.05％TWEEN-20)，之后放置于37℃恒温箱孵育2小时。弃掉96孔板孔中液体，用蒸馏水润洗96孔板5次。每孔加100μl样品稀释液(2％BSA溶液)，然后按照1:3125，1:6250，1:12500，1:25000，1:50000的比例进行梯度稀释。上述阴性对照血清按照稀释比例1:3000进行稀释，将稀释后的阴性对照血清加入96孔板，每孔加100μl，37℃恒温箱孵育1小时。随后，用蒸馏水润洗96孔板5次，弃掉废液。之后，每孔加入100μl辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔IgG(HRP-labeled goat anti-rabbit IgG)稀释液(稀释比例为1：5000)，放置于37℃恒温箱孵育45分钟。用蒸馏水润洗96孔板5次，丢弃废液。每孔加100μl底物四甲基联苯胺(TMB)显色液，室温下放置5～8分钟，加2M硫酸终止反应。然后在酶标仪上扫板。

由表1结果可知，基于新西兰兔1号和兔2号制备的抗SRSP的抗体效价均大于1：50000，效价的测定结果符合梯度稀释规律，兔1号和兔2号抗体效价均比较高。据此，获得了高效价的抗SRSP抗体。

表1.ELISA法检测抗SRSP抗体效价测定结果

实施例2抗SRSP抗体对SRSP的特异性检测实验

第一步，构建SRSP-GFP融合基因表达载体。首先，将野生型GFP(GFPwt)基因翻译启动子ATGGTG序列定点突变为ATTGTT(GFPmut)。因此破坏了GFP基因的启动子，阻碍GFP利用自身启动子进行翻译，变成利用SRSP基因上的启动子ATG进行翻译，从而表达产生SRSP-GFP融合蛋白。利用脂质体Lipo2000(Life technology)转染HeLa细胞(ATCC,Number:CCL-2)48小时后，收集细胞裂解制备蛋白样品。分别利用抗GFP抗体和本发明的抗SRSP的抗体，采用WESTERN BLOT免疫印迹的方法，检测SRSP-GFP融合蛋白的表达情况。结果如图1所示，SRSP-GFP融合蛋白分子量约41KD，借助抗GFP抗体和本发明的抗SRSP抗体均分别可以在41KD的位置特异性检测到此SRSP-GFP融合蛋白的表达。然而采用阴性对照血清(pre-serum)进行相应的WESTERN BLOT免疫印迹检测，则不能检测到蛋白条带。并且抗SRSP抗体检测到的SRSP-GFP融合蛋白条带位置与抗GFP抗体检测到的SRSP-GFP融合蛋白条带位置完全一致，说明抗SRSP抗体特异性检测到了SRSP。本实验以检测β-actin作为内参。

实施例3

采用WESTERN BLOT免疫印迹的方法，利用本发明制备的抗SRSP抗体在同一来源不同侵袭转移潜能结肠癌细胞中检测SRSP的表达水平，具体流程如下：

收集2对同一来源不同侵袭转移潜能结肠癌细胞SW480与SW620(ATCC,Number:分别为CCL-228和CCL-227)、HTC-116(ATCC,Number:CCL-247)和HTC-116high(此细胞由本实验室前期筛选建立)，裂解细胞制备蛋白样品。利用WESTERN BLOT免疫印迹方法，采用本发明制备的抗SRSP抗体检测了2对细胞之间SRSP水平的差异。结果如图2所示，SRSP水平在高侵袭转移潜能结肠癌细胞SW620和HTC-116high中明显上调。本实验以β-actin作为内参。

实施例4

收集2018年在广州医科大学附属第三医院确诊为胃癌、肝癌并手术切除的胃癌、肝癌患者各3名。获取其新鲜的肿瘤组织及对应癌旁正常组织。所有胃癌、肝癌患者术前均未接受任何抗肿瘤治疗，并且未患有其它肿瘤疾病。

采用液氮研磨法分别研磨胃癌、肝癌组织和对应的癌旁正常胃组织/肝组织，加入蛋白裂解液，裂解研磨后的组织，提取组织总蛋白。采用WESTERN BLOT免疫印迹的方法，利用本发明制备的抗SRSP抗体检测SRSP在此3对胃癌、肝癌组织及其对应癌旁正常胃组织/肝组织中的水平差异。

结果如图3a和3b所示，相对于癌旁正常胃组织/肝组织，SRSP水平在胃癌、肝癌组织中明显上调。本实验以β-actin作为内参。

实施例5

为进一步证明大规模临床样品中SRSP水平与癌症患者病理学特征和癌症患者生存时间之间的关系，选取101例结肠癌患者行免疫组化分析，具体过程如下：

采集确诊为结肠癌患者的(男55例，女44例)结肠癌组织以及癌旁正常结肠组织，并制作成石蜡组织芯片(上海芯超公司，HColA180Su15)。

免疫组化采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结SP(streptavidin-perosidase)法。具体步骤如下：将结肠癌组织及癌旁正常结肠组织的组织芯片常规烤片、脱蜡水化，置入1mM EDTA(pH 8.0)缓冲液中，用高压蒸汽修复法进行抗原修复。然后，冷却至室温，利用3％的H₂O₂阻断灭活内源性过氧化物酶，孵育15min。2％PBS缓冲液冲洗切片3次，每次3min。然后，滴加山羊血清封闭液，室温下孵育25min。再滴加50μl本发明制备的抗SRSP抗体(1：300)，4℃孵育过夜。次日，用2％PBS缓冲液冲洗5次，每次5min。再滴加50ulHRP标记的羊抗兔Ig G(二抗)(1：2000)，室温孵育45min。之后用2％PBS缓冲液冲洗5次，每次5min。随后，使用二氨基联苯胺(Diaminobenzidine,DAB)显色1～3min，苏木素复染，常规脱水透明，中性树胶封片。

依据本实验室前期建立的半定量免疫组化结果判断方法，分析免疫组化染色图片。

具体为：依据染色强度，无棕黄色为0分；淡棕黄色为1分；棕黄色为2分；棕褐色为3分。依据相同物镜下观察阳性细胞数，阳性细胞数≤10％为0分；阳性细胞数11％～50％为2分；阳性细胞数51％～80％为3分；阳性细胞数＞80％为4分。

将癌细胞染色强度得分和阳性细胞数百分比的得分相加，即为此样品的SRSP表达水平的总得分。依据SRSP在结肠癌组织样品得分与对应癌旁正常结肠组织得分相比进行分组：1)比值大于1，即表示SRSP在结肠癌组织中高表达(high)，2)其余，则为低表达(low)。结果如图4所示，图4是本发明实施例5的SRSP在结肠癌组织和其对应癌旁正常结肠组织中的表达水平结果。其中，图4中的a表示对应癌旁正常结肠组织，图4中的b表示结肠癌组织。

对石蜡切片SRSP染色强度分值及临床信息进行统计分析。采用SPSS12.0统计软件包分析，GraphPad Prism 5软件绘图。SRSP在101例结肠癌组织与癌旁正常结肠组织得分用Mann-Whitney U test方法进行统计分析。结果如图5所示，与癌旁正常结肠组织(N)相比，SRSP水平在结肠癌组织(T)中显著上调(p<0.001)。

在此基础上，进一步评估了SRSP水平与结肠癌病理学指标的相关性，包括病人的性别，年龄，组织分级(Histological Grade)，T分期(pT status)，N分期(pN status)，临床分期(Clinical stage)。结果如表2所示，本实施例发现SRSP高水平组具有更差的临床分期(p＝0.004)。SRSP在不同临床分期的卵巢癌组织得分用Mann-Whitney U test方法进行统计分析。结果如图6所示，与第一，第二期结肠癌组织相比，SRSP表达水平在第三，第四期的结肠癌组织中显著上调。随后本实施例通过Cox比例风险回归模型分析发现，SRSP高表达(即癌/癌旁＞1)是影响患者总生存期的独立危险因素(表3，HR(95％CI)＝9.905(4.232-23.180)，p＝0.0001)。

表2.SRSP水平与结肠癌病理学特征之间的相关性

表3.SRSP表达高水平是影响患者总生存期的独立危险因素

对SRSP表达水平进行高、低分组，本实施例发现SRSP高表达(high)结肠癌患者有84.38％的死亡率，而SRSP低表达(low)结肠癌患者只有16.22％的死亡率。SRSP高表达结肠癌患者组的死亡率是SRSP低表达结肠癌组死亡率的5倍(结果见图7)。采用Kaplan-Meier法和log-rank检验，分析了SRSP表达高低与结肠癌患者生存期的相关性。结果如图8所示，SRSP高表达结肠癌患者组存活率更低、预后更差(p＜0.0001)；SRSP低表达结肠癌患者平均存活时间为96.8个月，SRSP高表达结肠癌患者平均存活时间仅仅为44.6个月。SRSP高表达结肠癌患者平均存活时间较低表达组缩短52.2个月。

最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

SEQUENCE LISTING

<110> 广州医科大学附属第三医院（广州重症孕产妇救治中心、广州柔济医院）

<120> SRSP蛋白和SRSP抗原表位肽的应用及诊断和治疗肿瘤的产品

<160> 3

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 130

<212> PRT

<213> 人工序列

<400> 1

Met Arg Thr Lys Pro Gln Arg Pro Arg Ala Thr Arg Ser Tyr Leu Gly

1               5                   10                  15

Gln Pro Cys Gly Ser Pro Arg Arg Thr Glu Glu Thr Gly Glu Thr Trp

            20                  25                  30

Glu Arg Val Ala Phe Ser Leu Phe Thr His Thr Cys Thr Gln Pro Leu

        35                  40                  45

Ala Gly Thr Val Asp Thr His Leu Pro Ser Leu Leu Leu Pro Val Ile

    50                  55                  60

Leu His Pro Leu Gly Ala Ala Ser Ala Gly Arg Ala Leu Glu Pro Lys

65                  70                  75                  80

Ala Asp Pro His Thr Cys Pro Tyr Gly Arg Lys Glu Ser Arg Gly Glu

                85                  90                  95

Lys Val Arg Arg Gly Arg Ala Lys Ser Asn Ser Gly Pro Asn Val Pro

            100                 105                 110

Gly Pro Pro Ala Ala Pro Gln Ser Leu Lys Ser Gly Ser Pro Ser Thr

        115                 120                 125

Arg Arg

    130

<210> 2

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<400> 2

Met Arg Thr Lys Pro Gln Arg Pro Arg Ala Thr Arg

1               5                   10

<210> 3

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<400> 3

Gln Ser Leu Lys Ser Gly Ser Pro Ser Thr Arg Arg

1               5                   10

Claims (7)

1.SRSP蛋白和/或SRSP抗原表位肽在制备用于肿瘤预后评估的产品中的应用；

所述SRSP蛋白具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列；

所述SRSP抗原表位肽具有如SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列；

所述肿瘤为结肠癌。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品包括试剂、试剂盒或药物。

3.一种用于肿瘤预后评估的试剂，其特征在于，所述试剂包括用于检测SRSP蛋白和/或SRSP抗原表位肽的生物大分子；

所述SRSP蛋白具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列；

所述SRSP抗原表位肽具有如SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列；

所述肿瘤为结肠癌。

4.根据权利要求3所述的试剂，其特征在于，所述的生物大分子包括：抗体或抗体功能片段。

5.根据权利要求4所述的试剂，其特征在于，所述生物大分子为抗体。

6.根据权利要求5所述的试剂，其特征在于，所述抗体的制备方法包括：以SRSP蛋白和/或SRSP抗原表位肽为免疫原免疫动物，收集被免疫动物的血清，得到抗体。

7.一种用于肿瘤预后评估的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求3-6任一项所述的试剂；

所述肿瘤为结肠癌。

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