CN110776537A

CN110776537A - 一种从甜叶菊中制备甜菊糖或ra的方法

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Publication number: CN110776537A
Application number: CN201910992951.4A
Authority: CN
Inventors: 王丽; 谢宁; 郭永彬; 魏文润; 郭玉孝; 关丽辉
Original assignee: Forestry And Grassland Bureau Of Linxia Hui Autonomous Prefecture
Current assignee: Forestry And Grassland Bureau Of Linxia Hui Autonomous Prefecture
Priority date: 2019-10-18
Filing date: 2019-10-18
Publication date: 2020-02-11
Anticipated expiration: 2039-10-18
Also published as: CN110776537B

Abstract

本发明公开了一种从甜叶菊中制备甜菊糖或RA的方法，用水浸提，采用单宁进行絮凝，然后经过多柱串联脱盐脱色以及大孔树脂吸附，得到甜菊糖，再经过结晶，得到纯度较高的RA。本发明采用天然高分子物质单宁作絮凝剂，反应快，絮凝容易成团，易过滤，产生的絮团能够自然降解，不会产生二次污染，而且还具有良好的脱色效果，使后续脱盐脱色、吸附工序过柱速度加快，且脱盐脱色阶段经过多柱串联，不需要经过反复结晶，即可获得较高含量和收率的甜菊糖或RA，因此，本发明提供的甜菊糖和RA制备方法稳定可靠，安全有效，而且生产周期短，由此获得的甜菊糖颜色白净，口感好，品质优异。

Description

一种从甜叶菊中制备甜菊糖或RA的方法

【技术领域】

本发明属于功能成分制备技术领域，具体涉及一种从甜叶菊中制备甜菊糖或RA的方法。

【背景技术】

甜叶菊又名甜菊、糖草，是目前已知甜度较高的糖料植物之一。甜菊糖(SGs)是一种天然、高甜度、低热量不致龋甜味剂，是从甜叶菊的叶子和根茎中提取精制得到的几种甜菊苷混合物。到目前为止，已从甜叶菊中分离出至少8种不同甜度的甜菊苷，各种成分的含量、口感和甜度各不相同，其中甜菊糖甙(stevioside)(St)是主要成分，含量最高，占60％～70％，在叶的提取物中的含量约为6％-12％，最高可达15％，甜度为蔗糖的300倍，但具有一定的苦味和不愉快的后味，严重影响了甜叶菊糖的味质。其次是莱鲍迪甙A(rebaudioside A)(RA)，占15％～20％，甜度为蔗糖的450倍，且甜味最接近蔗糖，莱鲍迪甙A的甜味比甜菊糖甙更为甘醇，涩味少，是理想的甜味成分。从目前国际国内大面积种植的甜叶菊品种分析来看，绝大多数甜菊叶中相对含量占前三位的糖甙顺序都为甜菊糖甙(stevioside)(St)、莱鲍迪甙A(rebaudioside A)(RA)、莱鲍迪甙C(rebaudioside C)(RC)，其余还有甜菊醇双糖甙(steviolbioside)、莱鲍迪甙B(rebaudioside B)(RB)、莱鲍迪甙D(rebaudioside D)(RD)、莱鲍迪甙E(rebaudioside E)(RE)、杜尔可甙A(dulcoside A)(DA)。目前比较有经济价值的主要为St、RA、RC、DA，尤其是RA，其经济价值为St的数倍(RA每吨300万左右，St每吨40万左右)，其含量的高低直接影响着甜菊糖的品质。

现有技术中从甜叶菊中提取、纯化结晶得到的甜菊糖(SGs)含量一般为60-85％，但是其中St含量较高，RA含量一般为20-40％左右，高纯度的RA一般需要经过反复结晶制备获得，而RA重结晶的制备比较困难，对工艺条件控制比较严苛，而且经过反复结晶的RA品质也容易发生变化。

另外一方面，目前甜菊糖的提取过程中，絮凝是重要的工序之一，以除去蛋白质、着色物质、树胶及有机酸等无机物，现有技术中的絮凝剂多采用高分子聚合物，如硫酸亚铁、硫酸铁、氯化亚铁、十二水硫酸铝钾等，或采用聚合物与有机合成高分子聚丙烯酰胺的组合物，然而上述絮凝剂存在絮凝反应较慢、絮凝颗粒细小不易过滤等问题，且采用的高分子聚合物和有机合成高分子聚合物具有一定的毒性，既对人体健康有不利影响，又造成了二次污染。

基于上述问题，急需一种安全、可靠、快速且RA含量较高的从甜叶菊中制备甜菊糖或RA的方法。

【发明内容】

本发明的目的就在于为解决现有技术的不足而提供一种从甜叶菊中制备甜菊糖或RA的方法。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种从甜叶菊中制备甜菊糖及RA的方法，包括如下步骤：

S1提取：取甜叶菊加水浸提，得到甜菊糖提取液；

S2絮凝：将步骤S1得到的甜菊糖提取液加入单宁絮凝，分离沉淀，得到絮凝液，每100mL甜菊糖提取液中单宁的加入量为0.25～0.35g；

S3脱盐脱色：将步骤S2得到的絮凝液依次过阳离子交换树脂115、阴离子交换树脂762、至少一次阳离子交换树脂015、阴离子交换树脂338，收集得到过柱液；

S4吸附：将步骤S3得到的过柱液过大孔吸附树脂，然后用体积百分含量为65～75％乙醇洗脱，得到洗脱液；

S5干燥或结晶：

干燥：将步骤S4得到的洗脱液，浓缩，干燥，得到甜菊糖；

结晶：将步骤S4得到的洗脱液浓缩，浓缩液加入4～6倍体积的乙醇和丁酮混合溶液进行结晶，乙醇和丁酮混合溶液中乙醇与丁酮的体积比为(90～100):5，所述乙醇为体积百分含量在95％以上乙醇水溶液；然后将晶体干燥得到精制RA。

优选的，所述步骤S1中甜叶菊和水的质量体积比为1:(10～30)，浸提时间为1.5～3h。

优选的，所述步骤S3絮凝液的上柱速度为1.8～2.2ml/min。

优选的，所述步骤S5结晶时间为12～48h。

优选的，步骤S3之前还包括对所述阳离子交换树脂115和阳离子交换树脂015的处理步骤：装柱后水洗，然后用质量体积浓度为4％的氢氧化钠洗至碱性并用其浸泡2h，再用水洗至中性，再用质量百分含量为4％的盐酸洗至酸性，浸泡，使用前水洗至中性。

优选的，步骤S3之前还包括对所述阴离子交换树脂338和阴离子交换树脂762的处理步骤：装柱后水洗，然后用质量百分含量为4％的盐酸洗至酸性，并用其浸泡2h，再用水洗至中性，再用质量体积浓度为4％的氢氧化钠洗至碱性，浸泡，使用前水洗至中性。

优选的，所述大孔吸附树脂为LX-22吸附树脂。

优选的，对所述LX-22吸附树脂的处理步骤：装柱前用体积百分含量70％乙醇浸泡过夜后装柱，装柱后用质量百分含量4％的盐酸洗至酸性，用水洗至中性，再用质量体积浓度4％的氢氧化钠洗至碱性，浸泡，使用前水洗至中性。

本发明提供的从甜叶菊中制备甜菊糖或RA的方法，采用天然高分子物质单宁作絮凝剂，反应快，絮凝容易成团，易过滤，产生的絮团能够自然降解，不会产生二次污染，而且还具有良好的脱色效果，使后续脱盐脱色、吸附工序过柱速度加快，且脱盐脱色阶段经过多柱串联，不需要经过反复结晶，即可获得较高含量和收率的甜菊糖或RA，因此，本发明提供的甜菊糖或RA制备方法稳定可靠，安全有效，而且生产周期短，由此获得的甜菊糖颜色白净，口感好，品质优异。

【具体实施方式】

下面结合具体实施方式对本发明作进一步说明。

本发明提供的一种从甜叶菊中制备甜菊糖或RA的方法，包括如下步骤：

S1提取：取甜叶菊加水浸提，将残渣分离，得到甜菊糖提取液；

S4吸附：将步骤S3得到的过柱液过大孔吸附树脂，然后用体积百分含量为65～75％乙醇水溶液洗脱，得到洗脱液；

S5干燥或结晶：

干燥：将步骤S4得到的洗脱液，浓缩，干燥，得到甜菊糖，其中甜菊糖总甙含量最高可达到97％左右，RA含量在60％左右；

结晶：将步骤S4得到的洗脱液浓缩，浓缩液加入4～6倍体积的乙醇和丁酮混合溶液进行结晶，乙醇和丁酮混合溶液中乙醇与丁酮的体积比为(90～100):5，乙醇采用体积百分含量在95％以上乙醇水溶液；然后将晶体干燥得到精制RA。通过结晶，RA含量得到大幅提高，结晶后RA纯度最高可提高到95％左右。

本发明首先采用水溶剂将甜菊糖从甜叶菊中浸提出来，水浸提方法简单，收率高，但是浸提液中杂质含量也较高，尤其是色素物质较多，对后续脱色纯化精制造成一定的难度，因此本发明采用单宁作为絮凝剂，不但具有较好的絮凝效果，而且具有较好的脱色效果，使后续多柱串联及大孔树脂吸附效率提高。同时每100mL甜菊糖提取液中单宁的加入量在0.25～0.35g之间，单宁用量小于此范围时，会使絮凝不彻底，增加了后续处理的难度，而用量大于此范围时，会导致部分甜菊糖也同时被絮凝沉淀，降低甜菊糖收率。采用单宁絮凝以后，絮凝液中仍然含有无机盐等小分子物质及少量色素，需采用树脂对其进一步纯化，本发明首先采用多柱串联对其脱盐脱色，然后采用大孔吸附树脂吸附纯化，取得了良好的效果。经过试验验证，阴离子交换树脂338既有脱盐的效果，也有脱色的效果，而且单根阴离子交换树脂338和阴离子交换树脂762的脱色效果较显著，并且在酸性条件比在碱性条件下效果好，多根串联的阳离子交换树脂015所得的甜菊糖的含量比单根明显增高，另外，过完阳离子交换树脂115、阳离子交换树脂015柱后，得到的过柱液呈现酸性；过完阴离子交换树脂338、阴离子交换树脂762柱后，过柱液呈现碱性，而且阳离子交换树脂115为大孔隙树脂，其脱盐效果较阳离子交换树脂015显著、且容易再生，阳离子交换树脂015为小孔隙树脂，不容易洗脱再生，因此将阳离子交换树脂115设置在第一位，可提高生产效率，而阴离子交换树脂338既有脱盐的效果，也有脱色的效果，所以将阴离子交换树脂338设置在最后，可获得较好的脱盐脱色效果。

因此，综合考虑脱盐脱色效果及速率，最终得到的多柱串联的排序依次为阳离子交换树脂115-阴离子交换树脂762-至少一次阳离子交换树脂015-338。经过絮凝、脱盐脱色、吸附，干燥，最终获得的甜菊糖色泽洁白，甜菊糖总甙含量最高可达97％左右，RA含量最高可达60％左右。经过絮凝、脱盐脱色、吸附、结晶，最终获得的RA含量最高可达到95％左右。

优选的，步骤S1中甜叶菊和水的质量体积比为1:(10～30)，浸提时间为1.5～3h，可采用室温进行提取，采用合适体积的浸提液和浸提时间进行浸提，可提高浸提效率，经研究，水体积过量时，蛋白、色素等非甜菊糖水溶性物质溶出较多，增大了后续处理的难度，而水体积较小时，会导致甜菊糖提取不完全；浸提时间过长时，也会导致非甜菊糖水溶性物质溶出较多，浸提时间过短时，也会导致甜菊糖提取不完全，因此甜叶菊和水的质量体积比在1:(10～30)之间时，浸提时间为1.5～3h时，非甜菊糖水溶性物质溶出较少，甜菊糖提取也比较完全，原料利用率高。而且，在室温下提取甜菊糖或RA，即可获得较好的提取效率，若采用加温方式，虽然在一定程度上可提高提取速率，但是也会溶出更多的非甜菊糖水溶性物质，而且还会对甜菊糖的性能产生一定的影响。

优选的，步骤S3絮凝液的上柱速度为1.8～2.2ml/min。上柱速度过小时，影响过柱速率，而速度过大时，影响脱盐脱色效果。

优选的，步骤S5结晶时间为12～48h。结晶时间过短时，会导致RA结晶不完全，而时间过长时，不但会影响生产效率，而且使RA长时间处于有机溶剂下，容易造成RA性能变差。

优选的，步骤S3阳离子交换树脂115、阳离子交换树脂015使用前还需要进行前处理的步骤：装柱后水洗，然后用质量体积浓度4％的氢氧化钠洗至碱性并用其浸泡2h，再用水洗至中性，再用质量百分含量4％的盐酸洗至酸性，浸泡，使用前水洗至中性。

如本领域技术人员可以理解的，本发明实施例中，阳离子交换树脂115、阳离子交换树脂015的前处理还可采用其他本领域常用的方法。

优选的，步骤S3阴离子交换树脂338、阴离子交换树脂762使用前还需要进行前处理的步骤：装柱后水洗，然后用质量百分含量4％的盐酸洗至酸性，并用其浸泡2h，再用水洗至中性，再用质量体积浓度4％的氢氧化钠洗至碱性，使用前水洗至中性。

如本领域技术人员可以理解的，本发明实施例中，阴离子交换树脂338、阴离子交换树脂762的前处理还可采用其他本领域常用的方法。

优选的，步骤S4大孔吸附树脂优选为LX-22吸附树脂。

LX-22吸附树脂为购自西安蓝晓科技新材料股份有限公司的大孔吸附树脂，具有对甜菊糖吸附量大，选择性高的优点。在使用前也需要进行前处理：装柱前用体积百分含量为70％乙醇浸泡过夜后装柱，装柱后用质量百分含量4％的盐酸洗至酸性，用水洗至中性，再用质量体积浓度4％的氢氧化钠洗至碱性，使用前水洗至中性。

如本领域技术人员可以理解的，本发明实施例中，LX-22吸附树脂的前处理还可采用其他本领域常用的方法。

实施例1

本实施例提供的一种从甜叶菊中制备RA的方法，包括如下步骤：

S1提取：将甜菊糖叶经过去杂处理后，经检验合格，进行干燥处理；将干燥的甜菊糖叶加水浸提，分离残渣，得到甜菊糖提取液；甜叶菊叶和水的质量体积比为1:20，浸提时间为2h，浸提温度为常温；

S2絮凝：将步骤S1得到的甜菊糖提取液加入单宁絮凝，分离沉淀，得到絮凝液，每100mL甜菊糖提取液加入0.3g单宁；

S3脱盐脱色：将步骤S2得到的絮凝液依次过阳离子交换树脂115、阴离子交换树脂762、连续三次阳离子交换树脂015、阴离子交换树脂338，收集得到过柱液；絮凝液的上柱速度为2ml/min；

S4吸附：将步骤S3得到的过柱液过吸附树脂Lx-22，然后用70％乙醇洗脱，得到洗脱液(本发明中涉及的阳离子交换树脂115、阴离子交换树脂762、阳离子交换树脂015、阴离子交换树脂338、吸附树脂Lx-22均购买于西安蓝晓科技新材料股份有限公司)；经过测定，洗脱液中电导率下降到0，吸光值也下降到0(检测波长为370nm)，证明其脱盐脱色效果显著；

S5结晶：将步骤S4得到的洗脱液浓缩，浓缩液加入5倍体积的乙醇和丁酮混合溶液进行结晶，结晶时间为24h，乙醇和丁酮混合溶液中乙醇与丁酮的体积比为95:5；乙醇采用体积百分含量为95％乙醇水溶液；然后将晶体干燥得到RA，其中RA纯度为97.5％(本发明中RA纯度的检测方法可参考国标GB8270-2014方法)。

实施例2

本实施例提供的一种从甜叶菊中制备甜菊糖的方法，包括如下步骤：

S4吸附：将步骤S3得到的过柱液过吸附树脂Lx-22，然后用70％乙醇洗脱，得到洗脱液；

S5干燥：将步骤S4得到的洗脱液，浓缩，喷雾干燥，得到甜菊糖粉，其中甜菊糖总甙含量为98.3％，RA含量61％。

实施例3

S2絮凝：将步骤S1得到的甜菊糖提取液加入单宁絮凝，分离沉淀，得到絮凝液，每100mL甜菊糖提取液加入0.25g单宁；

S3脱盐脱色：将步骤S2得到的絮凝液依次过阳离子交换树脂115、阴离子交换树脂762、阳离子交换树脂015、阴离子交换树脂338，收集得到过柱液；絮凝液的上柱速度为1.8ml/min；

S5结晶：将步骤S4得到的洗脱液浓缩，浓缩液加入5倍体积的乙醇和丁酮混合溶液进行结晶，结晶时间为26h，乙醇和丁酮混合溶液中乙醇与丁酮的体积比为92:5；乙醇采用体积百分含量为98％乙醇水溶液；然后将晶体干燥得到RA，其中RA纯度为90.5％。

实施例4

S1提取：将甜菊糖叶经过去杂处理后，经检验合格，进行干燥处理；将干燥的甜菊糖叶加水浸提，分离残渣，得到甜菊糖提取液；甜叶菊叶和水的质量体积比为1:15，浸提时间为2h，浸提温度为常温；

S3脱盐脱色：将步骤S2得到的絮凝液依次过阳离子交换树脂115、阴离子交换树脂762、阳离子交换树脂015、阴离子交换树脂柱338，收集得到过柱液；絮凝液的上柱速度为2ml/min；

S5干燥：将步骤S4得到的洗脱液，浓缩，喷雾干燥，得到甜菊糖粉，其中甜菊糖总甙含量为92.3％，RA含量58％。

实施例5

S1提取：将甜菊糖叶经过去杂处理后，经检验合格，进行干燥处理；将干燥的甜菊糖叶加水浸提，分离残渣，得到甜菊糖提取液；甜叶菊叶和水的质量体积比为1:25，浸提时间为1.5h，浸提温度为常温；

S4吸附：将步骤S3得到的过柱液过吸附树脂Lx-22，然后用75％乙醇洗脱，得到洗脱液；

S5干燥：将步骤S4得到的洗脱液，浓缩，喷雾干燥，得到甜菊糖粉，其中甜菊糖总甙含量为94％，RA含量58％。

实施例6

S1提取：将甜菊糖叶经过去杂处理后，经检验合格，进行干燥处理；将干燥的甜菊糖叶加水浸提，分离残渣，得到甜菊糖提取液；甜叶菊叶和水的质量体积比为1:15，浸提时间为3h，浸提温度为常温；

S3脱盐脱色：将步骤S2得到的絮凝液依次过阳离子交换树脂柱115、阴离子交换树脂762、连续两次阳离子交换树脂柱015、阴离子交换树脂338，收集得到过柱液；絮凝液的上柱速度为2ml/min；

S5干燥：将步骤S4得到的洗脱液，浓缩，喷雾干燥，得到甜菊糖粉，其中甜菊糖总甙含量为92.1％，RA含量56％。

实施例7

S1提取：将甜菊糖叶经过去杂处理后，经检验合格，进行干燥处理；将干燥的甜菊糖叶加水浸提，分离残渣，得到甜菊糖提取液；甜叶菊叶和水的质量体积比为1:30，浸提时间为1.5h，浸提温度为常温；

S2絮凝：将步骤S1得到的甜菊糖提取液加入单宁絮凝，分离沉淀，得到絮凝液，每100mL甜菊糖提取液加入0.35g单宁；

S3脱盐脱色：将步骤S2得到的絮凝液依次过阳离子交换树脂115、阴离子交换树脂762、连续三次阳离子交换树脂015、阴离子交换树脂338，收集得到过柱液；絮凝液的上柱速度为1.8ml/min；

S5结晶：将步骤S4得到的洗脱液浓缩，浓缩液加入5倍体积的乙醇和丁酮混合溶液进行结晶，结晶时间为48h，乙醇和丁酮混合溶液中乙醇与丁酮的体积比为100:5，乙醇采用无水乙醇；然后将晶体干燥得到RA，其中RA纯度为89.6％。

实施例8

S1提取：将甜菊糖叶经过去杂处理后，经检验合格，进行干燥处理；将干燥的甜菊糖叶加水浸提，分离残渣，得到甜菊糖提取液；甜叶菊叶和水的质量体积比为1:10，浸提时间为2.5h，浸提温度为常温；

S3脱盐脱色：将步骤S2得到的絮凝液依次过阳离子交换树脂115、阴离子交换树脂762、两次阳离子交换树脂015、阴离子交换树脂338，收集得到过柱液；絮凝液的上柱速度为1.8ml/min；

S4吸附：将步骤S3得到的过柱液过吸附树脂Lx-22，然后用65％乙醇洗脱，得到洗脱液；

S5结晶：将步骤S4得到的洗脱液浓缩，浓缩液加入5倍体积的乙醇和丁酮混合溶液进行结晶，结晶时间为16h，乙醇和丁酮混合溶液中乙醇与丁酮的体积比为95:5，乙醇采用95％乙醇水溶液；然后将晶体干燥得到RA，其中RA纯度为90.2％。

对比例1

步骤S2的絮凝剂采用聚合硫酸铁和聚丙烯酰胺组合，具体方法为：将步骤S1得到的甜菊糖提取液先加入0.8％的聚合硫酸铁(g/100mL)，然后加入Ca(OH)₂调pH10，然后加入0.5％的聚丙烯酰胺(g/100mL)絮凝，分离沉淀，得到絮凝液，其他步骤同实施例1。

对比例2

步骤S2的絮凝剂采用聚合硫酸铁和聚丙烯酰胺组合，具体方法为：将步骤S1得到的甜菊糖提取液先加入0.8％的聚合硫酸铁，然后加入Ca(OH)₂调pH10，然后加入0.5％的聚丙烯酰胺(g/100mL)絮凝，分离沉淀，得到絮凝液，其他步骤同实施例2。

对比例3

步骤S2的絮凝剂采用聚合氯化铝铁和聚丙烯酰胺组合，具体方法为：将步骤S1得到的甜菊糖提取液先加入0.2％的聚合硫酸铁，然后加入Ca(OH)₂调pH10，然后加入0.5％的聚丙烯酰胺(g/100mL)絮凝，分离沉淀，得到絮凝液，其他步骤同实施例1。

对比例4

步骤S2的絮凝剂采用聚合氯化铝铁和聚丙烯酰胺组合，具体方法为：将步骤S1得到的甜菊糖提取液先加入0.2％的聚合硫酸铁，然后加入Ca(OH)₂调pH10，然后加入0.5％的聚丙烯酰胺絮凝，分离沉淀，得到絮凝液，其他步骤同实施例2。

对比例5

步骤S3多柱串联顺序为：连续两次阳离子交换树脂015-连续两次阴离子交换树脂762-连续两次阳离子交换树脂115-连续两次阴离子交换树脂，其他步骤同实施例1。

对比例6

步骤S3多柱串联顺序为：连续两次阳离子交换树脂015-连续两次阴离子交换树脂762-连续两次阳离子交换树脂115-连续两次阴离子交换树脂，其他步骤同实施例2。

对比例1-6得到的甜菊糖或RA结果如表1所示。从表1中可知，对比例1-4采用聚合硫酸铁或聚合氯化铝铁所得到的絮凝液电导率和吸光值均大于采用本发明采用单宁得到的絮凝液，说明采用单宁作絮凝剂絮凝更彻底，且脱色效果更好；且相比于对比例1-4，实施例1-2所得到的甜菊糖粉中甜菊糖总甙和RA含量更高，或RA纯度更好。另外，对比例5-6虽然采用多柱串联的方式进行脱盐脱色，但由于与本发明实施例1-2中采用的柱串联顺序不同，所以，与实施例1-2相比，对比例5-6中获得的甜菊糖粉中甜菊糖总甙和RA含量较低，结晶后得到的RA纯度也较差。

表1

以上所述的仅是本发明的实施方式，在此应当指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明创造构思的前提下，还可以做出改进，但这些均属于本发明的保护范围。

Claims

1.一种从甜叶菊中制备甜菊糖或RA的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1提取：取甜叶菊加水浸提，得到甜菊糖提取液；

S5干燥或结晶：

干燥：将步骤S4得到的洗脱液，浓缩，干燥，得到甜菊糖；

2.如权利要求1所述的从甜叶菊中制备甜菊糖或RA的方法，其特征在于，

所述步骤S1中甜叶菊和水的质量体积比为1:(10～30)，浸提时间为1.5～3h。

3.如权利要求1所述的从甜叶菊中制备甜菊糖或RA的方法，其特征在于，

所述步骤S3絮凝液的上柱速度为1.8～2.2ml/min。

4.如权利要求1所述的从甜叶菊中制备甜菊糖或RA的方法，其特征在于，

所述步骤S5结晶时间为12～48h。

5.如权利要求1所述的从甜叶菊中制备甜菊糖或RA的方法，其特征在于，

步骤S3之前还包括对所述阳离子交换树脂115和阳离子交换树脂015的处理步骤：装柱后水洗，然后用质量体积浓度为4％的氢氧化钠洗至碱性并用其浸泡2h，再用水洗至中性，再用质量百分含量为4％的盐酸洗至酸性，浸泡，使用前水洗至中性。

6.如权利要求1所述的从甜叶菊中制备甜菊糖或RA的方法，其特征在于，

步骤S3之前还包括对所述阴离子交换树脂338和阴离子交换树脂762的处理步骤：装柱后水洗，然后用质量百分含量为4％的盐酸洗至酸性，并用其浸泡2h，再用水洗至中性，再用质量体积浓度为4％的氢氧化钠洗至碱性，浸泡，使用前水洗至中性。

7.如权利要求1所述的从甜叶菊中制备甜菊糖或RA的方法，其特征在于，

步骤S4中，所述大孔吸附树脂为LX-22吸附树脂。

8.如权利要求7所述的从甜叶菊中制备甜菊糖或RA的方法，其特征在于，

S4之前还包括对所述LX-22吸附树脂的处理步骤：装柱前用体积百分含量为70％乙醇浸泡过夜后装柱，装柱后用质量百分含量为4％的盐酸洗至酸性，用水洗至中性，再用质量体积浓度为4％的氢氧化钠洗至碱性，浸泡，使用前水洗至中性。