CN110772462A - 红车轴草提取物用作黑色素生成抑制剂的用途 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了红车轴草提取物用作黑色素生成抑制剂的用途。体外试验结果表明：红车轴草水提取物和不同浓度乙醇提取物对黑色素生成均有一定的抑制活性，因此，红车轴草提取物是一种优良的黑色素生成抑制剂，有进一步开发成美容化妆品或雀斑、黄褐斑、黑色素瘤等疾病治疗药物的潜力。

Description

红车轴草提取物用作黑色素生成抑制剂的用途
技术领域
本发明涉及红车轴草提取物的一种新用途，尤其是在用作黑色素生成抑制剂的新用途。
背景技术
红车轴草(Trifolium pretense L.)为豆科蝶形花亚科车轴草属(Trifoliumlinn.)植物，为一年或多年生的草本植物，又名三叶草、红花苜蓿、红三叶、红荷兰翘摇等。红车轴草分布于世界各地，在我国主要散布于湖北、新疆、云南等地，资源较为丰富。我国民间将红车轴草花序入药，主要用于止咳、止喘以及解痉等，将其制成软膏后可治疗局部溃疡。该植物主要含异黄酮、黄酮、香豆素、有机酸等化学成分，其主要成分异黄酮具有雌激素样作用，对人体内的激素水平具有双向调节功能，从而能治疗多种与雌激素水平紊乱有关的妇科疾病如更年期综合征和骨质疏松。随着对红车轴草化学成分及药理活性研究的不断深入，还发现其对抗癌、抗疟、祛痰、解痉等有一定作用，可用于治疗百日咳及支气管炎等症。
皮肤的颜色取决于黑色素的含量及分布，黑色素形成的生理过程基本可概括为：黑色素细胞产生黑色素，黑色素通过细胞树枝状突起向角质形成细胞转移，然后随表皮细胞上行至角质层，并随角质层脱落而排泄。根据黑色素形成的理论基础，现有美白剂主要通过阻断黑色素形成而发挥作用，包括抑制酪氨酸酶活性和阻断二羟基吲哚聚合成黑色素等。化学美白剂存在安全性问题，从天然植物中寻找安全高效的美白活性物质已成为化妆品研究的热点。目前化妆品中使用最广泛的天然美白剂有熊果苷、果酸类、动物胎盘提取物、植物提取物等。
发明内容
本发明的一个目的是提供红车轴草提取物用作黑色素生成抑制剂的新用途。
体外试验结果表明：红车轴草水提取物和不同浓度乙醇提取物对黑色素生成均有一定的抑制活性，其中乙醇提取物的活性高于水提取物，而40％乙醇提取物的抑制率更是高达32.7％，已经接近于洋甘菊。
以上结果表明：红车轴草提取物是一种优良的黑色素生成抑制剂，有进一步开发成美容化妆品、日化用品或雀斑、黄褐斑、黑色素瘤等疾病治疗药物的潜力。
本发明的另一个目的是提供一种黑色素生成抑制剂。
红车轴草提取物既可单独作为活性成分用于黑色素生成抑制剂，也可与其它具有相同活性的成分如洋甘菊提取物、熊果苷等一起作为活性成分用于黑色素生成抑制剂，从而进一步提高对黑色素生成的抑制活性。所述黑色素生成抑制剂中除了含有活性成分，还含有药学上可接受的载体。
优选地，所述红车轴草提取物是红车轴草醇提取物，所述醇包括但不限于乙醇、甲醇、丙二醇、正丁醇、异丁醇等一元或多元醇。
本发明优选地是20-80％乙醇。
本发明进一步优选地是40％乙醇。
基于以上发明，本发明进一步提供一种化妆品或日化用品，所述化妆品或日化用品中含有美白剂，所述美白剂是红车轴草提取物。所述化妆品包括面膜、乳液、霜膏等剂型，所述日化用品包括香皂、沐浴露等产品剂型。所述化妆品或日化用品的主要功能是美白。
基于以上发明，本发明再进一步提供一种治疗黑色素沉着所导致疾病的药物，该药物的活性成分是红车轴草提取物。所述黑色素沉着所导致的疾病包括但不限于雀斑、黄褐斑、黑色素瘤。
当然，本发明的用途远不局限于此，鉴于黑色素在细菌、微生物、植物、动物中都广泛存在且发挥重要作用，本发明所提供的抑制剂在农业、畜牧业等领域也具有重大应用潜力，只要是与抑制黑色素生成有关的用途都在本发明的保护范围之内。
更详尽的方案请参阅具体实施例。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明进行详细地说明。
实施例1红车轴草提取物的制备
取红车轴草药材，分别用水、20％、40％、60％、80％(均为体积浓度)乙醇提取，将提取液浓缩、干燥，得到红车轴草水提取物和不同浓度乙醇提取物。
实施例2红车轴草提取物抑制黑色素生成活性试验
将红车轴草水提取物和不同浓度乙醇提取物分别用DMEM培养基稀释，均配制成5mg/mL的溶液，作为样品溶液。同时将洋甘菊提取物(商业途径购买)按同法制成样品溶液，作为对照。另设空白。
黑色素生成抑制活性试验参照文献方法，将B16F10小鼠黑色素瘤细胞消化后，用DMEM培养基稀释细胞并计数，稀释到5×104细胞/well，然后将细胞稀释液接种到酶标板中，每孔为2ml，即1×105细胞/well，在37℃，5％CO2的培养箱中培养24小时，然后加入样品溶液1ml，放入37℃，5％CO2的培养箱中继续培养24小时。
分别收集培养基和细胞，采用分光光度法检测培养基和细胞中的黑色素含量，计算抑制率，具体方法如下：
(1)制备标准曲线：将黑色素标准品配制成浓度为1-100ppm的溶液，分别检测标准品溶液在波长415nm的吸光度，得到浓度和吸光度线性关系；
(2)将培养基离心，取上清液在波长415nm处检测吸光度；
(3)将B16F10小鼠黑色素瘤细胞消化后离心，弃掉上清液，底部残渣中加入细胞裂解液，80℃水浴1小时，然后将裂解液冷却后离心，在波长415nm处检测上清液的吸光度；
(4)根据步骤(1)中的线性关系得出培养基和细胞中的黑色素含量，二者之和即为黑色素总量。
表1红车轴草提取物对黑色素的抑制率
样品种类 黑素素总量(μg/well) 抑制率(％)
空白 263.5 －
红车轴草水提取物 226.6 14.0
红车轴草20％乙醇提取 192.7 26.9
红车轴草40％乙醇提取 177.3 32.7
红车轴草60％乙醇提取 195.4 25.8
红车轴草80％乙醇提取 211.8 19.6
洋甘菊提取物 161.1 38.9
结果分析：洋甘菊提取物是目前最常用的美容护肤品美白成分，已有大量文献报道洋甘菊具有抑制黑色素生成的活性。从以上试验可以看出，红车轴草水提取物和不同浓度乙醇提取物对黑色素生成均有一定的抑制活性，其中乙醇提取物的活性高于水提取物，而40％乙醇提取物的抑制率更是高达32.7％，已经接近于洋甘菊。

Claims (5)

1.红车轴草提取物用作黑色素生成抑制剂的用途。
2.一种黑色素生成抑制剂，其活性成分中含有红车轴草提取物。
3.如权利要求2所述的黑色素生成抑制剂，其特征在于：所述红车轴草提取物是红车轴草醇提取物。
4.如权利要求3所述的黑色素生成抑制剂，其特征在于：所述醇是20-80％乙醇。
5.如权利要求4所述的黑色素生成抑制剂，其特征在于：所述醇是40％乙醇。
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