CN110742964A - 一种治疗肺癌的药物组合物及其制备方法 - Google Patents

一种治疗肺癌的药物组合物及其制备方法 Download PDF

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Abstract

一种治疗肺癌的药物组合物，包括海藻多糖，具有抑制肿瘤的能力，并能够增强机体免疫力；南板蓝叶，清热解毒；胡桃仁，温肺定喘；黄芪，补气固表；玉竹，养阴润燥；冬菇，解毒补虚，一种治疗肺癌的药物组合物的制备方法，包括以下步骤，制备海藻多糖；备料；提取；冷却以及混合。本发明中，海藻多糖拥有独特的空间架构，与其他原药组分配合后，增加了海藻多糖的稳定性与抗肿瘤活性，能够更好的抑制肿瘤的生长，显著提高肺癌患者的免疫力；同时，本发明组合物的原料药均为植物提取物，无毒，能够有效的延长肺癌患者的生存时间和提高患者的生存质量。

Description

一种治疗肺癌的药物组合物及其制备方法
技术领域
本发明涉及医药技术领域，尤其是涉及一种治疗肺癌的药物组合物及其制备方法。
背景技术
在全球范围内，肺癌是发病率和死亡率增长最快，对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。近年来，许多国家都报道肺癌的发病率和死亡率均明显增高。据相关报道，肺癌晚期5年生存率低于20％，形势严峻。目前治疗肺癌主要还是依靠手术、放疗和治疗，但手术后再进行化疗会导致患者体质下降，身体虚弱，抵抗力差等，这样反而会使癌细胞急速扩散转移，大大降低患者的生命存活力。虽也有一些抗癌的中成药，但其组方复杂，成本较高，且疗效不明显，患者无力承受。
因此，有必要提供一种新的技术方案以克服上述缺陷。
发明内容
本发明的目的在于提供一种可有效解决上述技术问题的治疗肺癌的药物组合物及其制备方法。
为达到本发明之目的，采用如下技术方案：
一种治疗肺癌的药物组合物，其原料药组分及其重量份分别为：海藻多糖1份-20份，南板蓝叶1.5份-14份，胡桃仁1份-10份，冬菇1份-20 份，黄芪1.5份-15份，玉竹1份-8份。
进一步的：其原料药组分及其重量份分别为：海藻多糖10份，南板蓝叶9份，胡桃仁5份，冬菇10份，黄芪8份，玉竹5份。
进一步的：所述海藻多糖由海藻总多糖降解制备而得。
一种治疗肺癌的药物组合物的制备方法，包括以下步骤：
步骤S1：制备海藻多糖：降解海藻总多糖，制备海藻多糖；
步骤S2：备料：按重量份准备以下原料药组分：海藻多糖1份-20份，南板蓝叶1.5份-14份，胡桃仁1份-10份，冬菇1份-20份，黄芪1.5 份-15份，玉竹1份-8份，或，按重量份准备以下原料药组分：海藻多糖 10份，南板蓝叶9份，胡桃仁5份，冬菇10份，黄芪8份，玉竹5份；
步骤S3：提取：将步骤S2中的原料药组分放入容器中，并加入原料药组分10倍的蒸馏水，并对混合物搅拌，加热至105℃，并在此温度下回流 3小时，过滤去除不溶物，得到原药溶液；
步骤S4：冷却：冷却至60℃，并调节压力至10kPa，得到原药浓缩液，将原药浓缩液冷却至2℃，并在常压的条件下，静置12小时，过滤去除不溶物，将温度调节至60℃，并调节压力至10kPa，去除液相，得到原药固体；
步骤S5：混合：在步骤S4中得到的原药固体中加入45％甲醇水溶液50ml 溶解，冷却至2℃，常压下静置10小时，过滤去除不溶物，得到药物溶液，然后升温至50℃，并调节压力至10kPa，将药物溶液浓缩至糖浆状，加入蒸馏水将糖浆状药物溶解，然后在温度为-50℃，压力为10Pa的条件下去除液相，得到固体粉末。最后与步骤S1制备的海藻多糖粉末按重量比2:1 混合均匀，即得药物组合物。
进一步的：所述步骤S1中，制备海藻多糖的具体方法包括以下步骤：
步骤X1：取海藻总多糖用5倍重量的蒸馏水溶解，完全溶解后加入2 倍重量的45％—50％乙醇中，冷却至10℃，静置3小时，过滤去除不溶物，得到糖浆；
步骤X2：步骤X1中的糖浆用乙酸溶解，直至糖浆浓度为0.01g/ml，加入与海藻总多糖质量相同的含酶量66u的纤维素酶与菠萝蛋白酶组成的混合酶水解，得到混合物；
步骤X3：将步骤X2中的混合物，在50℃—60℃中水解40mim后调节 pH值至6.8，升温至60℃继续降解2h，升温至110℃灭酶15min，离心获得上清液，对上清液进行温度为-50℃，压力为10Pa的条件下去除液相，得固体粉末。
进一步的：纤维素酶与菠萝蛋白酶的重量百分比为32：68，选用这个比例的混合酶，可以提高酶降解效率和海藻多糖产率。
进一步的：海藻多糖的硫酸根含量在3％-35％之间。
进一步的：海藻多糖的平均分子量在1KDa-30KDa范围内，这个范围内的海藻多糖生理活性佳、水溶性好、性质稳定，易于与其他组分制成各种剂型，更利于临床应用。
进一步的：所述海藻多糖平均分子量为7850Da。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
1.本发明治疗肺癌的药物组合物，海藻多糖，具有抑制肿瘤的能力，并能够增强机体免疫力；南板蓝，叶清热解毒；胡桃仁，温肺定喘；黄芪，补气固表；玉竹，养阴润燥；冬菇，解毒补虚，海藻多糖拥有独特的空间架构，与其他原药组分配合后，增加了海藻多糖的稳定性与抗肿瘤活性，能够更好的抑制肿瘤的生长，显著提高肺癌患者的免疫力；同时，本发明组合物的原料药均为植物提取物，无毒，能够有效的延长肺癌患者的生存时间和提高患者的生存质量。
2.本发明治疗肺癌的药物组合物的制备方法，制备方法简单，宜于工业化生产。
具体实施方式
海藻总多糖、南板蓝叶、胡桃仁、冬菇、黄芪、玉竹等原料均可通过市场购得，蒸馏水自制。
为了使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整的描述，显然，所描述的实施例是本发明的部分实施例，而不是全部实施例。
实施例1海藻多糖的制备
步骤X1：取海藻总多糖20g，100ml蒸馏水溶解，完全溶解后加入200ml 45％乙醇中，冷却至10℃，静置3小时，过滤去除不溶物，得到糖浆；
步骤X2：步骤X1中的糖浆用乙酸溶解，直至糖浆浓度为0.01g/ml，加入20ml含酶量66u的纤维素酶与菠萝蛋白酶按重量百分比为32：68，组成的混合酶水解，得到混合物；
步骤X3：将步骤X2中的混合物，在50℃中水解40mim后调节pH值至 6.8，升温至60℃继续降解2h，升温至110℃灭酶15min，离心获得上清液，对上清液进行温度为-50℃，压力为10Pa的条件下去除液相，得固体粉末15.4g。
经FT-IR和NMR测试，确认其为海藻多糖，平均分子量为7850Da。
实施例2药物组合物的制备
步骤S1：备料：按重量份准备以下原料药组分：南板蓝叶9g、胡桃仁 5g、冬菇10g、黄芪8g以及玉竹5g；所述海藻多糖由实施例1所制备；
步骤S2：提取：将步骤S1中的原料药组分放入容器中，并加入原料药组分500ml的蒸馏水，并对混合物搅拌，加热至105℃，并在此温度下回流3小时，过滤去除不溶物，得到原药溶液；
步骤S3：冷却：冷却至60℃，并调节压力至10kPa，得到原药浓缩液，将原药浓缩液冷却至2℃，并在常压的条件下，静置12小时，过滤去除不溶物，将温度调节至60℃，并调节压力至10kPa，去除液相，得到原药固体；
步骤S4：混合：在步骤S3中得到的原药固体中加入45％甲醇水溶液50ml 溶解，冷却至2℃，常压下静置10小时，过滤去除不溶物，得到药物溶液，然后升温至50℃，并调节压力至10kPa，将药物溶液浓缩至糖浆状，加入蒸馏水将糖浆状药物溶解，然后在温度为-50℃，压力为10Pa的条件下去除液相，得到固体粉末1g。最后与与海藻多糖粉末2g混合均匀，即得药物组合物。
实施例3药物组合物的制备
步骤S1：备料：海藻多糖3份，南板蓝叶10份，胡桃仁8份，冬菇 15份，黄芪3份，玉竹2份。所述海藻多糖由实施例1所制备；
步骤S2：提取：将步骤S1中的原料药组分放入容器中，并加入原料药组分500ml的蒸馏水，并对混合物搅拌，加热至105℃，并在此温度下回流3小时，过滤去除不溶物，得到原药溶液；
步骤S3：冷却：冷却至60℃，并调节压力至10kPa，得到原药浓缩液，将原药浓缩液冷却至2℃，并在常压的条件下，静置12小时，过滤去除不溶物，将温度调节至60℃，并调节压力至10kPa，去除液相，得到原药固体；
步骤S4：混合：在步骤S3中得到的原药固体中加入45％甲醇水溶液50ml 溶解，冷却至2℃，常压下静置10小时，过滤去除不溶物，得到药物溶液，然后升温至50℃，并调节压力至10kPa，将药物溶液浓缩至糖浆状，加入蒸馏水将糖浆状药物溶解，然后在温度为-50℃，压力为10Pa的条件下去除液相，得到固体粉末1.5g。最后与与海藻多糖粉末3g混合均匀，即得药物组合物。
实施例4药物组合物的制备
步骤S1：备料：海藻多糖4份，南板蓝叶3份，胡桃仁4份，冬菇12 份，黄芪5份，玉竹8份。所述海藻多糖由实施例1所制备；
步骤S2：提取：将步骤S1中的原料药组分放入容器中，并加入原料药组分500ml的蒸馏水，并对混合物搅拌，加热至105℃，并在此温度下回流3小时，过滤去除不溶物，得到原药溶液；
步骤S3：冷却：冷却至60℃，并调节压力至10kPa，得到原药浓缩液，将原药浓缩液冷却至2℃，并在常压的条件下，静置12小时，过滤去除不溶物，将温度调节至60℃，并调节压力至10kPa，去除液相，得到原药固体；
步骤S4：混合：在步骤S3中得到的原药固体中加入45％甲醇水溶液50ml 溶解，冷却至2℃，常压下静置10小时，过滤去除不溶物，得到药物溶液，然后升温至50℃，并调节压力至10kPa，将药物溶液浓缩至糖浆状，加入蒸馏水将糖浆状药物溶解，然后在温度为-50℃，压力为10Pa的条件下去除液相，得到固体粉末2g。最后与与海藻多糖粉末3g混合均匀，即得药物组合物。
实施例5药物组合物的制备
步骤S1：备料：海藻多糖3份，南板蓝叶5份，胡桃仁10份，冬菇 18份，黄芪2份，玉竹7份。所述海藻多糖由实施例1所制备；
步骤S2：提取：将步骤S1中的原料药组分放入容器中，并加入原料药组分500ml的蒸馏水，并对混合物搅拌，加热至105℃，并在此温度下回流3小时，过滤去除不溶物，得到原药溶液；
步骤S3：冷却：冷却至60℃，并调节压力至10kPa，得到原药浓缩液，将原药浓缩液冷却至2℃，并在常压的条件下，静置12小时，过滤去除不溶物，将温度调节至60℃，并调节压力至10kPa，去除液相，得到原药固体；
步骤S4：混合：在步骤S3中得到的原药固体中加入45％甲醇水溶液50ml 溶解，冷却至2℃，常压下静置10小时，过滤去除不溶物，得到药物溶液，然后升温至50℃，并调节压力至10kPa，将药物溶液浓缩至糖浆状，加入蒸馏水将糖浆状药物溶解，然后在温度为-50℃，压力为10Pa的条件下去除液相，得到固体粉末1.5g。最后与与海藻多糖粉末3g混合均匀，即得药物组合物
以下为对照实施例。
对照实施例1急性毒性实验
一.试验材料
实验动物：昆明小鼠70只，体重17—22g，雌雄各半，购自上海斯莱克实验动物有限公司。
实验样品：实施例2中制得的药物组合物。
二.试验方法
1.LD50测定
动物分组：采用雌雄分别随机均衡分组法，共分为5组，每组10只，其中一组为空白对照组。
剂量确定：剂量设计为3mg/kg，10mg/kg，50mg/kg，100mg/kg。
给药：一次性灌胃给药：给药前禁食3—5h，给药后禁食1—2h，禁食不禁水。采用分批给药，空白对照组、3mg/kg组、10mg/kg组第一批给药，给药后确定所设剂量合适，再给予50mg/kg组和100mg/kg组。给药后连续观察7天以上，随后每天上下午各观察一次，连续观察14天。详细记录各项观察指标。
2.最大耐受剂量(MTD值)测定
取小鼠20只，雌雄各10只。将试验样品加蒸馏水溶解，配成最高浓度，按动物的最大耐受量，以注射灌喂器能抽动为准。在动物禁食(不禁水)18小时后，一日内分两次腹腔注射给药(间隔半小时)，给药后连续观察14天。
试验数据如表1所示：
Figure RE-GDA0002312028250000091
Figure RE-GDA0002312028250000101
表1
三.试验结论
在LD50计算中当用最大允许浓度和最大允许容量给予小鼠时 (100ml/kg)，未见小鼠死亡，即未测出LD50。在14天观察期中，动物其食欲、活动、毛色、精神状态等皆正常，发育正常，未见有死亡，表明急性毒性极小，可视为无毒。
对照实施例2体外实验
肿瘤细胞：人肺肿瘤细胞A549、LH-7、H460、H292。
培养液：本试验采用RPMll640完全培养液，其组成为：RPMll640培养液、10％胎牛血清、100ug/ml的青霉素、100ug/ml的链霉素、5.6％碳酸氢钠(pH7.4)。
培养条件：37℃饱和湿度，含5％CO2浓度的孵箱中培养。
细胞培养：将上述细胞按上述条件培养于5％CO2浓度的孵箱中，细胞呈现贴壁状态，隔天换液，细胞长满单层后用0.25％胰蛋白酶消化传代，每3天传1代。实验用处于对数生长期的细胞。
MTT法测定细胞活性：将实验细胞接种于96孔培养板中，加入实验药物组合物，作用12h-72h后，计算抑瘤率。
结果如表2所示：
Figure RE-GDA0002312028250000102
表2
结论：药物组合物有对各种肿瘤细胞均有强抑制作用。
对照实施例3动物实验
实验动物：C57小鼠，雄性，16-18g，购自上海斯莱克实验动物有限责任公司。合格证号：SCXK(沪)2015－0005。饲养环境：SPF级。
实验药物：实施例2制得药物组合物，环磷酰胺(CTX)。环磷酰胺(CTX) 购自江苏恒瑞医药股份有限公司。
实验分组：共分为5组，每组10只小鼠，分别为空白组、实验组1 (25mg/kg)、实验组2(50mg/kg)、实验组3(75mg/kg)、对照组(CTX， 50mg/kg)。
实验步骤：小鼠皮下接种A549肿瘤细胞，接种7天后可见肿瘤长出，约200-400mg,接种后第8天开始给药，每天1次，连用7天，期间每天观察小鼠对治疗的反应,活动情况,精神状态、脱毛等情况。第15天最后1 次给药后24小时引颈脱臼处死动物，解剖取肿瘤组织并称重，计算抑瘤率。抑瘤率＝(对照组瘤重-治疗组瘤重)/对照组瘤重×100％。
实验数据如表3所示：
Figure RE-GDA0002312028250000112
Figure RE-GDA0002312028250000121
表3
实验结果：
1.对小鼠状态和体重的影响
给药后,空白组小鼠毛顺滑有光泽,精神佳；对照组毒副反应较大,小鼠活动量减少,精神萎靡；实验组则体毛较顺滑,精神尚可,活动量较对照为多。结合表3中小鼠体重数据，可知实验组小鼠体重没有随着给药剂量的增加出现明显变化，而对照组体重比较轻，这说明实验组毒性很小、对动物活动影响小。
2.小鼠给药后的瘤重及抑瘤率
从表3可以看出，随着给药剂量的增加，实验组动物的平均瘤重依次减小，抑瘤率逐渐升高。同时，在相同给药剂量下，实验组2的平均瘤重和抑瘤率都优于对照组。
结论：受试药物组合物在中等给药剂量下的抑瘤率已优于对照组，说明药物组合物肿瘤细胞有强效作用，可用于治疗肺癌。
本发明治疗肺癌的药物组合物进行了急性毒性实验，结果显示本发明治疗肺癌的药物组合物可视为无毒；进行的细胞实验，证实其对肺癌细胞有很强的抑制能力；动物实验说明对治疗肺部肿瘤有显著的效果。因而，本发明治疗肺癌的药物组合物可用于制备治疗肺癌药物。
本发明具有如下有益效果：
1.本发明治疗肺癌的药物组合物，海藻多糖，具有抑制肿瘤的能力，并能够增强机体免疫力；南板蓝，叶清热解毒；胡桃仁，温肺定喘；黄芪，补气固表；玉竹，养阴润燥；冬菇，解毒补虚，海藻多糖拥有独特的空间架构，与其他原药组分配合后，增加了海藻多糖的稳定性与抗肿瘤活性，能够更好的抑制肿瘤的生长，显著提高肺癌患者的免疫力；同时，本发明组合物的原料药均为植物提取物，无毒，能够有效的延长肺癌患者的生存时间和提高患者的生存质量。
2.本发明治疗肺癌的药物组合物的制备方法，制备方法简单，宜于工业化生产。

Claims (9)

1.一种治疗肺癌的药物组合物，其特征在于：其原料药组分及其重量份分别为：海藻多糖1份-20份，南板蓝叶1.5份-14份，胡桃仁1份-10份，冬菇1份-20份，黄芪1.5份-15份，玉竹1份-8份。
2.如权利要求1所述的治疗肺癌的药物组合物，其特征在于：其原料药组分及其重量份分别为：海藻多糖10份，南板蓝叶9份，胡桃仁5份，冬菇10份，黄芪8份，玉竹5份。
3.如权利要求1或2所述的治疗肺癌的药物组合物，其特征在于：所述海藻多糖由海藻总多糖降解制备而得。
4.一种治疗肺癌的药物组合物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤S1：制备海藻多糖：降解海藻总多糖，制备海藻多糖；
步骤S2：备料：按重量份准备以下原料药组分：海藻多糖1份-20份，南板蓝叶1.5份-14份，胡桃仁1份-10份，冬菇1份-20份，黄芪1.5份-15份，玉竹1份-8份，或，按重量份准备以下原料药组分：海藻多糖10份，南板蓝叶9份，胡桃仁5份，冬菇10份，黄芪8份，玉竹5份；
步骤S3：提取：将步骤S2中的原料药组分放入容器中，并加入原料药组分10倍的蒸馏水，并对混合物搅拌，加热至105℃，并在此温度下回流3小时，过滤去除不溶物，得到原药溶液；
步骤S4：冷却：冷却至60℃，并调节压力至10kPa，得到原药浓缩液，将原药浓缩液冷却至2℃，并在常压的条件下，静置12小时，过滤去除不溶物，将温度调节至60℃，并调节压力至10kPa，去除液相，得到原药固体；
步骤S5：混合：在步骤S4中得到的原药固体中加入45％甲醇水溶液50ml溶解，冷却至2℃，常压下静置10小时，过滤去除不溶物，得到药物溶液，然后升温至50℃，并调节压力至10kPa，将药物溶液浓缩至糖浆状，加入蒸馏水将糖浆状药物溶解，然后在温度为-50℃，压力为10Pa的条件下去除液相，得到固体粉末。最后与步骤S1制备的海藻多糖粉末按重量比2:1混合均匀，即得药物组合物。
5.如权利要求4所述的治疗肺癌的药物组合物的制备方法，其特征在于：所述步骤S1中，制备海藻多糖的具体方法包括以下步骤：
步骤X1：取海藻总多糖用5倍重量的蒸馏水溶解，完全溶解后加入2倍重量的45％—50％乙醇中，冷却至10℃，静置3小时，过滤去除不溶物，得到糖浆；
步骤X2：步骤X1中的糖浆用乙酸溶解，直至糖浆浓度为0.01g/ml，加入与海藻总多糖质量相同的含酶量66u的纤维素酶与菠萝蛋白酶组成的混合酶水解，得到混合物；
步骤X3：将步骤X2中的混合物，在50℃—60℃中水解40mim后调节pH值至6.8，升温至60℃继续降解2h，升温至110℃灭酶15min，离心获得上清液，对上清液进行温度为-50℃，压力为10Pa的条件下去除液相，得固体粉末。
6.如权利要求5所述的治疗肺癌的药物组合物，其特征在于：纤维素酶与菠萝蛋白酶的重量百分比为32：68。
7.如权利要求5所述的治疗肺癌的药物组合物及其制备方法，其特征在于：
海藻多糖的硫酸根含量在3％-35％之间。
8.如权利要求7所述的治疗肺癌的药物组合物及其制备方法，其特征在于：
海藻多糖的平均分子量在1KDa-30KDa范围内。
9.如权利要求8所述的治疗肺癌的药物组合物及其制备方法，其特征在于：所述海藻多糖平均分子量为7850Da。
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孟靓靓 等主编: "《肺部疾病药食宜忌》", 31 December 2016 *

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