CN110742833A - 一种祛痘美白抗衰老的精油组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

一种祛痘美白抗衰老的精油组合物及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种祛痘美白抗衰老的精油组合物及其制备方法和应用。所述精油组合物的制备原料按重量份计包含：乳香1‑40份、没药1‑40份、苏合香1‑30份和安息香1‑30份。本发明通过低温减压蒸馏的方法从中药原料中得到精油组合物，所得精油组合物纯度较高且稳定性较好，同时通过对原料的科学配比，各精油成分之间协同增效，使所得精油组合物具有疏通毛孔、抗菌、活血和美白的功效，并能够对痤疮皮肤进行综合调理。

Description

一种祛痘美白抗衰老的精油组合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种精油组合物及其制备方法和应用，尤其涉及一种祛痘美白抗衰老的精油组合物及其制备方法和应用。
背景技术
皮肤是人体抵御外来侵害的第一道防线，是最容易遭受外界侵害、侵害频率高且损伤较大的组织。由于自身生理状态的下滑，导致皮肤细胞生存环境改变，使得皮肤细胞结构破坏、死亡，皮肤就会显现出干燥、粗糙、松弛等衰老现象。另外，皮肤也是体现人体外在美感和特征的重要部分，因此恢复和维持一个良好的皮肤状态是非常重要的。
青春痘又称粉刺或暗疮，在医学上统称为痤疮，其发生主要与皮脂分泌过多、毛囊皮脂腺导管堵塞、细菌感染和炎症反应等因素密切相关，因此从疏通皮肤毛孔、抗菌、活血或美白等方面对皮肤进行综合治理，是开发祛痘护肤产品的重要方向。传统的美容护肤产品中添加的化学合成物、溶剂对皮肤的剌激性大，易损伤皮肤，而且随着对美容护肤产品的要求不断提高，消费者更加崇尚“天然”护肤，更加倾向于选择具有“自然”属性的护肤品。
近年来，美容护肤产品中都会添加一种或几种的植物提取物，它们来源于植物的不同组织器官，如根、叶、花和全草等，大部分的植物提取物中含有多酚类、黄酮类、三萜类、多糖类、氨基酸类和精油类物质。然而，只以树脂类等中药为原料获得的精油组合物却很少见，树脂类来源的提取物通常只作为组方中的一小部分原料。
CN109010134A公开了一种美白淡斑日常家用自我护理型纯天然植物复配油，该复配油包括摩洛哥仙人掌籽油、藏红花浸泡油、鼠尾草浸泡油、百里香浸泡油、橙花浸泡油、乳香精油、芹菜籽精油、玫瑰草精油、永久花精油、焕颜草精油和胡萝卜籽精油。此发明采用纯天然成分调配而成，是天然安全的复方油，其对面部的调理具有很明显的作用，且对均匀肤色、祛斑淡斑也很有成效。然而，从树脂类原料中提取精油的方法为采用有机溶剂直接提取，采用有机溶剂会使一些不具有挥发性的成分混杂在精油提取物中，影响其纯度，容易让使用者产生过敏反应。
CN109260059A公开一种具有祛痘和皮肤修复功效的精油组合物及应用。该精油组合物由如下重量百分比的组分制成：茶树精油0.05-15.0％、松针精油0.1-6.0％、没药精油0.1-7.0％、当归精油0.05-6.0％、牡丹精油0.1-6.0％、安息香精油0.1-6.0％，基础油为余量。各种组分按照特定比例进行搭配，从疏通皮肤毛孔、抗菌、等方面对痊疮皮肤进行综合治疗。然而采用水蒸气蒸馏提取在高温条件下会影响精油成分的稳定性，且提取时间长。
因此，开发一种只以中药为原料的精油组合物，并提供一种有效的精油提取方法是本领域亟需解决的问题。
发明内容
针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种具有祛痘美白抗衰老功效的精油组合物及其制备方法和应用。本发明中的精油皆来源于中药原料，各种组分按照特定比例进行搭配，从而达到疏通皮肤毛孔、抗菌和调理痤疮皮肤的目的，同时还能够实现活血和美白的功效。为达此目的，本发明采用以下技术方案：
第一方面，本发明提供一种祛痘美白抗衰老的精油组合物，所述精油组合物的制备原料按重量份计包含：乳香1-40份、没药1-40份、苏合香1-30份和安息香1-30份。
本发明提供的精油组合物以乳香、没药、苏合香和安息香为原料制备得到，包含多种精油，其中乳香精油具有抗菌、促进伤口结疤、淡化疤痕和皱纹，增强细胞活性、调理干燥、老化、暗沉的肌肤，恢复肌肤弹性和收紧毛孔的作用。
没药精油具有杀菌功效，且消毒力强，可以抑制皮肤炎症，滋润干裂和冻疮皮肤，对皱纹也有淡化功效。
苏合香精油具有活血祛瘀、抑菌、抗炎的功效，且有助于受伤的组织再生愈合。
安息香精油具有改善皮肤弹性的功效，对龟裂、干燥皮肤非常有用，能使皮肤恢复弹性。
以上四种成分合用，相互配合，协同增效，具有很好的疏通皮肤毛孔、促进细胞新陈代谢、抗菌活血、提高肌肤免疫力、增强皮肤弹性、清除自由基抑制抑制黑色素生成的功效，从而达到良好的祛痘、美白和抗衰老的目的。
作为本发明优选的技术方案，所述精油组合物的制备原料按重量份计包含：乳香1-40份、没药1-40份、苏合香1-30份和安息香1-30份。
本发明中，乳香的质量份数为1-40份，例如可以是1份、5份、10份、15份、20份、25份、30份、32份、35份、36份、38份或40份等。
没药的质量份数为1-40份，例如可以是1份、5份、10份、15份、20份、25份、30份、32份、35份、36份、38份或40份等。
苏合香的质量份数为1-30份，例如可以是1份、5份、8份、10份、11份、12份、13份、14份、15份、20份、25份或30份等。
安息香的质量份数为1-30份，例如可以是1份、5份、8份、10份、11份、12份、13份、14份、15份、20份、25份或30份等。
作为本发明优选的技术方案，所述精油组合物的制备原料按重量份计包含：乳香30-40份，没药30-40份，苏合香10-15份和安息香10-15份。
第二方面，本发明还提供了一种如第一方面所述的精油组合物的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：
(1)将配方量的制备原料粉碎后过筛，再进行低温减压提取，得到芳香水；
(2)用萃取剂萃取所述芳香水，分离后得到萃取液，再将所述萃取液中的萃取剂除去得到所述精油组合物。
本发明使用的低温减压提取法，相比较传统的有机溶剂直接提取或采用水蒸气蒸馏法提取法，所得精油的纯度更高，且反应不需要较高的温度，不影响精油的稳定性，提供使用安全性，具有节能、环保和高效率等特点。
作为本发明优选的技术方案，步骤(1)中所述原料粉末过40-80目筛，例如可以是40目、45目、48目、50目、55目、58目、60目、62目、65目、70目、75目或80目等。
优选地，步骤(1)中所述低温减压提取所用的提取溶剂为水，优选为去离子水。
优选地，步骤(1)中所述低温减压提取时，所述提取溶剂与制备原料的粉末的液料比为20-60mL/g，例如可以是20mL/g、25mL/g、30mL/g、32mL/g、35mL/g、38mL/g、40mL/g、42mL/g、45mL/g、48mL/g、50mL/g、55mL/g或60mL/g等，优选为30-50mL/g。
优选地，步骤(1)中所述低温减压提取时温度为40-60℃，例如可以是40℃、42℃、45℃、48℃、50℃、52℃、55℃、58℃或60℃等，优选为50-60℃。
优选地，步骤(1)中所述低温减压提取时压力为1-200Pa，例如可以是1Pa、5Pa、10Pa、15Pa、20Pa、30Pa、40Pa、50Pa、60Pa、70Pa、80Pa、90Pa、100Pa、110Pa、130Pa、150Pa、180Pa或200Pa等，优选为1-100Pa。
优选地，步骤(1)中所述低温减压提取时间为2-4h，例如可以是2h、2.1h、2.2h、2.5h、2.6h、2.7h、2.9h、3h、3.2h、3.5h或4h等，优选为2-3h。
作为本发明优选的技术方案，步骤(2)中所述萃取剂为正己烷。
优选地，所述芳香水与正己烷的体积比为(80-100):1，例如可以是80:1、82:1、85:1、88:1、90:1、92:1、93:1、94:1、95:1、98:1或100:1等，优选为100:1。
优选地，步骤(2)中所述萃取的时间为2-5min，例如可以是2min、2.2min、2.5min、3min、3.2min、3.5min、4min、4.5min或5min等。
作为本发明优选的技术方案，步骤(2)中所述分离为离心分离。
优选地，所述离心分离的转速为8000-12000转/分钟，例如可以是8000转/分钟、8500转/分钟、9000转/分钟、9500转/分钟、10000转/分钟、10500转/分钟、10800转/分钟、11000转/分钟、11500转/分钟、11800转/分钟或12000转/分钟等，优选为10000-12000转/分钟；时间为4-10min，例如可以是4min、4.5min、5min、5.5min、6min、6.5min、7min、7.5min、8min、8.5min、9min或10min等，优选为6-8min。
作为本发明优选的技术方案，所述制备方法包括如下步骤：
(1)将配方量的制备原料粉碎后过40-80目筛，再使用水作为提取溶剂进行低温减压提取，所述提取溶剂与制备原料的粉末的液料比为20-60mL/g，所述提取温度为40-60℃，提取时间为2-4h，压力1-200Pa，得到芳香水；
(2)将所述芳香水加入正己烷中进行萃取。所述芳香水与正己烷的体积比为(80-100):1，而后在8000-12000转/分钟下离心4-10分钟得到萃取液，在30-40℃下除去正己烷得到所述精油组合物。
第三方面，本发明还提供一种化妆品，所述化妆品包含如第一方面所述的精油组合物。
优选地，所述精油组合物在化妆品中的添加量按质量分数计为0.1-30％，例如可以是0.1％、0.5％、1％、1.5％、2％、5％、8％、9％、10％、12％、14％、18％、20％、22％、25％、28％或30％等，优选为1-20％。
优选地，所述化妆品为乳液类、霜膏类、水剂、精华类或皂类中任意一种。
优选地，所述化妆品为精华油。
优选地，所述精华油按质量百分比计包括35-40％(例如可以是35％、36％、37％、38％、39％或40％等)角鲨烷、25-30％(例如可以是25％、26％、27％、28％、39％或40％等)葵酸甘油三酯、12-18％(例如可以是12％、13％、14％、15％、16％、17％或18％等)异壬酸异壬酯、5-10％(例如可以是5％、6％、7％、8％、9％或10％等)葡萄籽油、5-10％(例如可以是5％、6％、7％、8％、9％或10％等)霍霍巴油和2-8％(例如可以是2％、3％、4％、5％、6％、7％或8％等)第一方面所述的精油组合物。
本发明所述的数值范围不仅包括上述例举的点值，还包括没有例举出的上述数值范围之间的任意的点值，限于篇幅及出于简明的考虑，本发明不再穷尽列举所述范围包括的具体点值。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
(1)本发明的精油组合物中各种组分按照特定比例进行搭配，达到协同增效的目的，使所得精油组合物能够从疏通皮肤毛孔、抗菌、活血和美白等多个方面对痤疮皮肤进行综合调理；
(2)本发明中使用低温减压提取不需要使用较高的反应温度，能保持中药树脂原料中的精油成分不受破坏，减少精油组合物中的杂质，提高使用安全性，具有节能、环保、高效率的优点。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。
实施例1
本实施例提供一种祛痘美白抗衰老的精油组合物及其制备方法，所述精油组合物的制备原料包括：15.0g乳香、15.0g没药、5.0g苏合香和5.0g安息香。
所述精油组合物的制备方法为：
(1)将上述原料混合后粉碎，过50目筛，加入去离子水1600mL，提取温度为60℃，提取时间为2小时，压力为100Pa；
(2)蒸馏完成后把收集到的芳香水按照100:1的体积加入正己烷进行萃取，正己烷萃取液在12000转/分钟下离心6分钟，所得正己烷提取液在30℃下挥去正己烷，得到所述精油提取物。
实施例2
本实施例提供一种祛痘美白抗衰老的精油组合物及其制备方法，所述精油组合物的制备原料包括：15.0g乳香、15.0g没药、7.5g苏合香和7.5g安息香。
所述精油组合物的制备方法为：
(1)将上述原料混合后粉碎过40目筛，加入去离子水1800mL，提取温度为50℃，提取时间为2.5小时，压力为150Pa；
(2)蒸馏完成后把收集到的芳香水按照100:1的体积加入正己烷进行萃取，正己烷萃取液在10000转/分钟下离心8分钟，所得正己烷提取液在30℃下挥去正己烷，得到所述精油组合物。
实施例3
本实施例提供一种祛痘美白抗衰老的精油组合物及其制备方法，所述精油组合物的制备原料包括：15.0g乳香、15.0g没药、10.0g苏合香和10.0g安息香。
所述精油组合物的制备方法为：
(1)将上述原料混合后粉碎，过80目筛，加入去离子水2000mL，提取温度为60℃，提取时间为4小时，压力为50Pa；
(2)蒸馏完成后把收集到的芳香水按照100:1的体积加入正己烷进行萃取，正己烷萃取液在8000转/分钟下离心6分钟，所得正己烷提取液在35℃下挥去正己烷，得到所述精油组合物。
对比例1
本对比例提供一种精油组合物及其制备方法，所述精油组合物的制备原料包括：15.0g乳香、15.0g没药和5.0g苏合香。
所述精油组合物的制备方法为：
(1)将上述原料混合后粉碎，所得粉末过50目筛，加入去离子水1400mL，提取温度为60℃，提取时间为2小时，压力为100Pa；
(2)蒸馏完成后把收集到的芳香水按照100:1的体积加入正己烷进行萃取，正己烷萃取液在12000转/分钟下离心6分钟，所得正己烷提取液在30℃下挥去正己烷，得到所述精油组合物。
对比例2
本对比例提供一种精油组合物及其制备方法，所述精油组合物的制备原料包括：15.0g乳香、15.0g没药和5.0g安息香。
所述精油组合物的制备方法为：
(1)将上述原料混合后粉碎，所得粉末过50目筛，加入去离子水1400mL，提取温度为60℃，提取时间为2小时，压力为100Pa；
(2)蒸馏完成后把收集到的芳香水按照100:1的体积加入正己烷进行萃取，正己烷萃取液在12000转/分钟下离心6分钟，所得正己烷提取液在30℃下挥去正己烷，得到所述精油组合物。
对比例3
本对比例提供一种精油组合物及其制备方法，所述精油组合物的制备原料包括：15.0g乳香、5.0g苏合香和5.0g安息香。
所述精油组合物的制备方法为：
(1)将上述原料混合后粉碎，所得粉末过50目筛，加入去离子水1000mL，提取温度为60℃，提取时间为2小时，压力为100Pa；
(2)蒸馏完成后把收集到的芳香水按照100:1的体积加入正己烷进行萃取，正己烷萃取液在12000转/分钟下离心6分钟，所得正己烷提取液在30℃下挥去正己烷，得到所述精油组合物。
对比例4
本对比例提供一种精油组合物及其制备方法，所述精油组合物的制备原料包括：15.0g没药、5.0g苏合香和5.0g安息香。
所述精油组合物的制备方法为：
(1)将上述原料混合后粉碎，所得粉末过50目筛，加入去离子水1000mL，提取温度为60℃，提取时间为2小时，压力为100Pa；
(2)蒸馏完成后把收集到的芳香水按照100:1的体积加入正己烷进行萃取，正己烷萃取液在12000转/分钟下离心6分钟，所得正己烷提取液在30℃下挥去正己烷，得到所述精油组合物。
对比例5
本对比例提供一种精油组合物及其制备方法，所述精油组合物的制备原料包括：20.0g乳香和20.0g没药；其制备方法同实施例1。
对比例6
本对比例提供一种精油组合物及其制备方法，所述精油组合物的制备原料包括：30.0g乳香和10.0g苏合香；其制备方法同实施例1。
对比例7
本对比例提供一种精油组合物及其制备方法，所述精油组合物的制备原料包括：30.0g乳香和10.0g安息香；其制备方法同实施例1。
对比例8
本对比例提供一种精油组合物及其制备方法，所述精油组合物的制备原料包括：30.0g没药和10.0g苏合香；其制备方法同实施例1。
对比例9
本对比例提供一种精油组合物及其制备方法，所述精油组合物的制备原料包括：30.0g没药和10.0g安息香；其制备方法同实施例1。
对比例10
本对比例提供一种乳香精油及其制备方法，所述精油组合物的制备原料为40.0g的乳香，制备方法同实施例1。
对比例11
本对比例提供一种没药精油及其制备方法，所述没药精油的制备原料为40.0g没药，制备方法同实施例1。
对比例12
本对比例提供一种苏合香精油及其制备方法，所述苏合香精油的制备原料为40.0g苏合香，制备方法同实施例1。
对比例13
本对比例提供一种安息香精油及其制备方法，所述安息香精油的制备原料为40.0g安息香，制备方法同实施例1。
对比例14
本对比例提供一种精油组合物及其制备方法，其制备原料同实施例1；
上述精油组合物使用水蒸气蒸馏提取法制备：将原料混合后粉碎，所得粉末过50目筛，加入去离子水1600mL，提取温度为100℃，提取时间为4小时，蒸馏完成后把收集到的芳香水按照10:1的体积加入正己烷进行萃取，正己烷在12000转/分钟下离心6分钟，所得正己烷提取液在30℃下挥去正己烷，得到精油提取物。
对比例15
本对比例提供一种精油组合物及其制备方法，其制备原料同实施例1；
上述精油组合物使用正己烷加热回流提取法制备：将上述原料混合后粉碎，所得粉末过50目筛，加入正己烷800mL，提取温度为65℃，提取时间为2小时，提取液过滤后在35℃下挥去正己烷，得到精油提取物。
对比例16
本对比例提供一种精油组合物及其制备方法，其制备原料同实施例1；
上述精油组合物使用索氏提取法制备：将上述原料混合后粉碎，所得粉末过50目筛，加入正己烷600mL，提取温度为75℃，提取时间为5小时，提取液在35℃下挥去正己烷，得到精油提取物。
对比例17
本对比例提供一种精油组合物及其制备方法。
所述精油组合物的制备原料包括：20.0g乳香和20.0g没药。
上述精油组合物使用正己烷加热回流提取法制备：将上述原料混合后粉碎，所得粉末过50目筛，加入正己烷600mL，提取温度为65℃，提取时间为2小时，提取液过滤后在35℃下挥去正己烷，得到精油提取物。
对比例18
本对比例提供一种精油组合物及其制备方法。
所述精油组合物的制备原料包括：20.0g乳香和20.0g没药。
上述精油组合物使用索氏提取法制备：将上述原料混合后粉碎过50目筛，所得加入正己烷600mL，提取温度为75℃，提取时间为5小时，提取液在35℃下挥去正己烷，得到精油提取物。
试验例1
红细胞溶血性评价
红细胞溶血实验是兔眼刺激性实验(Draizetest)替代方法之一，基本原理是通过测定血红蛋白溶出量及变性程度来评价化学品对眼组织细胞的损伤。国际上主要将RBC实验用于评价化妆品及原料等化学品的眼刺激性研究。
将实施例1-3和对比例1-18制得精油提取物和组合物进行红细胞溶血实验，本实验依照欧洲替代方法验证中心(ECVAM)的RBC实验测试方法及分级标准。其中HD50为50％红细胞发生溶血时的样品浓度，DI为蛋白质变性指数，L/D为HD50与DI的比值，具体判断标准见表1：
表1
Figure BDA0002294465130000121
Figure BDA0002294465130000131
各待测样品的刺激性判断结果如表2所示：
表2
样品 L/D 分级 样品 L/D 分级
实施例1 323 无刺激性 对比例9 280 无刺激性
实施例2 345 无刺激性 对比例10 271 无刺激性
实施例3 308 无刺激性 对比例11 295 无刺激性
对比例1 289 无刺激性 对比例12 264 无刺激性
对比例2 227 无刺激性 对比例13 253 无刺激性
对比例3 223 无刺激性 对比例14 233 无刺激性
对比例4 284 无刺激性 对比例15 0.4 中度刺激性
对比例5 213 无刺激性 对比例16 26 微刺激性
对比例6 301 无刺激性 对比例17 4.3 轻度刺激性
对比例7 235 无刺激性 对比例18 0.8 中度刺激性
对比例8 228 无刺激性
由表2可知，实施例1-3提供的精油组合物安全无刺激，而对比例15-18所得的精油组合物刺激性较大，不宜使用。
试验例2
提取效率测定
精密称定实施例1-3和对比例1-18的精油提取物的重量，并计算精油组合物提取率，计算公式为：
精油组合物提取率(％)＝提取物重量(g)/药材重量(g)×100％，所得提取率如表3所示。
表3
样品 提取率(％) 样品 提取率(％)
实施例1 3.78 对比例9 2.76
实施例2 3.96 对比例10 2.92
实施例3 3.57 对比例11 2.89
对比例1 2.77 对比例12 2.73
对比例2 3.02 对比例13 2.77
对比例3 2.12 对比例14 2.75
对比例4 2.39 对比例15 8.01
对比例5 3.01 对比例16 7.28
对比例6 2.99 对比例17 8.74
对比例7 3.06 对比例18 9.12
对比例8 3.14
由实施例1与对比例14比较可知，低温减压提取方法的效率高于有机溶剂提取法，而且低温减压提取方法得到的是易挥发性成分，并且树脂类非挥发性成分含量较少，比有机溶剂提取法获得的提取物更加的安全；同时，由实施例1与对比例15和16比较可知，在原料相同的情况下，虽然正己烷加工回流提取与索氏提取法的提取效率较高，但是所用温度较高，时间较长。
因此，由表2中各实施例与对比例的提取率结果可知，低温减压提取方法在提取过程中的所用的温度较低、且时间较短，使用的有机溶剂非常少，且结合试验例1可知所得产品的刺激性明显低于正己烷加工回流提取与索氏提取方法，所以本发明中所用的低温减压提取方法提取植物精油具有节能、环保、高效率且产品刺激性小的优点。
试验例3
抑菌活性评价
测试方法为牛津杯法(管碟法)，此方法是国内外测定抗生素效价通用方法，也是多国药典规定的方法。通过抑菌圈测试，判断待测样品对痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes ATCC11827)的抑制作用。
测试样品：实施例1-3和对比例1-14制备的精油组合物，用二甲基亚砜(DMSO)稀释为质量分数5％的待测样品，进行下面试验。
以无菌操作，将经过高温灭菌的培养基倒入直径9cm的无菌培养皿中，使每个培养皿有15-20mL的培养基，冷却后，加入0.2mL痤疮丙酸杆菌菌悬液(浓度为1.0×106个/mL)，用涂布棒将培养基表面涂布均匀，用镊子将牛津杯垂直放上相应培养基表面，轻轻加压，使其与培养基接触无空隙，每个平板可放3支小管，分别向各小管中滴加0.1mL的各种待测样品，并做好标记，勿使其外溢。痤疮丙酸杆菌置37℃培养箱厌氧培养3天后，观察结果。
在培养时，一方面试验菌开始生长，另一方面待测样以牛津杯为原点向四周扩散，形成菌落不能生长的圆形区域，即“抑菌圈”。抑菌圈越大，祛痘效果越好。实验结果按抑菌圈直径大小判定抑菌活性，判断标准参考下表4：
表4
Figure BDA0002294465130000151
Figure BDA0002294465130000161
实施例1-3和对比例1-14制备的精油或精油组合物的抑菌活性实验结果如表5所示：
表5
样品 抑菌活性 样品 抑菌活性
实施例1 ++++ 对比例7 ++
实施例2 ++++ 对比例8 ++
实施例3 ++++ 对比例9 ++
对比例1 +++ 对比例10 ++
对比例2 ++ 对比例11 +++
对比例3 ++ 对比例12 ++
对比例4 ++ 对比例13 ++
对比例5 +++ 对比例14 +++
对比例6 ++
结果表明，本发明中的实施例1、2和3的精油组合物抑制痤疮丙酸杆菌效果非常显著，均比单一、两种或三种药材得到的精油组合物效果好，说明四种药材得到的精油组合物对痤疮丙酸杆菌抑制有协同增效作用。
试验例4
抑制酪氨酸酶活性评价
以实施例1-3和对比例1-14制备的精油组合物为样品，用二甲基亚砜(DMSO)稀释为质量分数5％的待测样品，进行下面试验：
按表6各个实验组的试剂组成准确吸取待测样品、pH值为6.8的磷酸盐缓冲溶液(PBS)和质量分数为0.1％的多巴溶液，充分混合，于30℃孵育5min后，加入活度为100U/mL的酪氨酸酶溶液，再在30℃下孵育10min，迅速转移至比色皿中，在475nm处测定吸光度。
表6
组别 1组 2组 3组 4组
待测样品(mL) 0 0 1.0 1.0
磷酸盐缓冲溶液(mL) 2.0 2.5 1.0 1.5
多巴溶液(mL) 1.0 1.0 1.0 1.0
酪氨酸酶溶液(mL) 0.5 0 0.5 0
总体积(mL) 3.5 3.5 3.5 3.5
计算样品对酪氨酸酶的相对抑制率I：
式中：A1、A2、A3、A4分别为1-4组溶液的吸光度，所得实验结果如表7所示。
试验例5
抑制黑色素合成活性评价
以实施例1-3和对比例1-14制备的精油组合物为样品，用DMSO稀释为质量分数5％的待测样品，进行如下试验：将B16黑色素瘤细胞(1.0×105个/mL)接种于96孔板中，每孔90μL，CO2孵箱中孵育24小时后，每孔加入待测样品，同时设立培养基和细胞的空白对照组。
将培养板置于孵箱中孵育72小时后，弃去上清液，PBS洗涤两遍，然后每孔加入0.5mL胰酶消化细胞3min，每孔加入2.0mL维持液终止消化。混匀后，每种浓度取出0.5mL做细胞计数。其余细胞悬液以2500r/min离心分离5min，弃去上清液，于沉淀中加入NaOH溶液，加热使黑色素溶解，选择490nm波长在酶联免疫检测仪下测定吸光度值。计算样品对黑色素合成抑制率(I')：
Figure BDA0002294465130000181
式中A5为样品溶液孔吸光度值；P1为样品溶液孔细胞密度；A6为对照孔吸光度值；P2为对照孔细胞密度，所得实验结果如表7所示。
试验例6
羟自由基的清除能力评价
以实施例1-3和对比例1-14制备的精油组合物为样品，用DMSO稀释为质量分数5％的待测样品，进行下面试验。
反应体系中先加入1.0mL FeSO4溶液(9.0mmol/L)、1mL水杨酸-乙醇溶液(9.0mmol/mL)、1.0mL样品试液，再加入1.0mL H2O2(8.8mmol/mL)，于37℃水浴反应30min，以无水乙醇为空白对照，于510nm处测定其吸光度，计算各反应体系中羟自由基OH的清除率：
Figure BDA0002294465130000182
式中A7为加入待测样品的反应体系的吸光度；A8为不加H2O2的样品的吸光度(以无水乙醇代替H2O2)；A9为空白对照无水乙醇的吸光度，所得实验结果如表7所示。
试验例7
DPPH自由基清除能力评价
清除DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基能力在一定程度上反应物质的抗氧化能力。自由基清除率越大，表明抗氧化能力越强，抗衰老能力越强。因此，可以通过中药组合物对清除DPPH自由基能力的研究来判断其抗衰老效果。
以实施例1-3和对比例1-14制备的精油组合物为样品，用DMSO稀释为质量分数2％的待测样品，进行下面试验：
向试管中加入质量浓度为45.8mg/L的DPPH测试液2.0mL和一定量的待测样品，总体积用无水乙醇补充至3mL，摇匀，避光反应30min后，用1cm比色皿在517nm波长处测定吸光度，记为A10；向试管中加入无水乙醇2mL和相应体积的待测样品，总体积用无水乙醇补充至3mL，测得的吸光度记为A11；向试管中加入DPPH测试液2mL和无水乙醇1mL，测得的吸光度记为A12，计算待测液对DPPH自由基清除率(Y’)；
DPPH自由基清除率的计算公式为：
Figure BDA0002294465130000191
式中A10为待测样品清除DPPH后体系的吸光度值，A11为样品空白对照清除DPPH后体系的吸光度值，A12为未加药品前反应体系的吸光度值，所得实验结果如表7所示。
表7
Figure BDA0002294465130000192
Figure BDA0002294465130000201
表7实验结果表明，实施例1-3的精油组合物能很好的抑制酪氨酸酶活性和黑色素合成、有清除羟基自由基和DPPH自由基的功能，由实施例1与对比例1-4比较可知，在组合物中含有任意三种精油成分时，其效果较四种精油同时存在时效果较差。综上所述，在总用量一定的情况下，本发明的精油组合物比单种精油提取物的美白抗衰老效果有显著提升，说明不同精油间发挥了协同增效作用。
应用实施例1
本应用实施例1提供一种含有实施例1提供的的精油组合物的精华油，其具体配方如表8所示：
表8
组分名称 质量分数(％)
角鲨烷 37
葵酸甘油三酯 27
异壬酸异壬酯 16
葡萄籽油 8
霍霍巴油 7
实施例1提供的精油组合物 5
应用实施例2
与应用实施例1的区别在于，将其中实施例1提供的精油组合物替换为实施例2提供的精油组合物。
应用实施例3
与应用实施例1的区别在于，将其中实施例1提供的精油组合物替换为实施例3提供的精油组合物。
应用对比例1
与应用实施例1的区别在于，将其中实施例1提供的精油组合物替换为对比例1提供的精油组合物。
应用试验例1
祛痘测试
效果评价对象：选取双侧面部有明显痤疮，正处于新生或炎症期，且颜面部皮肤属于易长粉刺类型志愿者90例，分为3组实验组，每组有男性18例，女性12例。
评价方法：采用双盲法，每天早晚洗完脸后取应用实施例1-3和应用对比例1所制备的精华油2g分别涂抹到脸上有痤疮的部位。以实验组1为例，实验组1的志愿者使用应用实施例1提供的精华油涂抹于左脸痤疮部位，使用应用对比例1提供的精华油涂抹于右脸痤疮部位，观察涂抹28天待测样品后志愿者面部痤疮情况。实验组2和实验组3分别使用应用实施例2和3提供的精华油，其余操作与实验组1相同。实验结果如表9所示：
表9
Figure BDA0002294465130000221
表9所示的实验结果说明使用本发明提供的精油组合物制备的得到的精华油对痤疮有良好的治疗和消除效果。
应用试验例2
皮肤白度和紧致度的改善情况评价
效果评价对象：选取志愿者90名，年龄在20-45岁，男女各半随机分为3组。左侧使用应用实施例1-3所制备的护肤精华油，右侧使用应用对比例1精油所制备的护肤精华油，每天早午晚各使用一次，每次各涂抹2g产品于脸部，并按摩2分钟，持续使用30天，使用一个月后观察左脸和右脸的肤色。
30天后志愿者分别对左脸和右脸的皮肤白度和紧致度的改善情况进行评价，其中最高分为5分，最低分为1分，评价结果如表10所示：
表10
评级指标 应用实施例1 应用实施例2 应用实施例3 应用对比例1
白度 4.2 4.0 4.0 3.7
紧致度 3.8 3.7 3.8 3.1
结果表明，使用者认为使用本发明的应用实施例1-3精华油后，皮肤白度和紧致度得到显著改善，比使用应用对比例1精华油的效果明显，说明本发明的精油组合物应用到化妆品中具有显著的美白抗衰老的功效。
申请人声明，以上所述仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，所属技术领域的技术人员应该明了，任何属于本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。

Claims (10)

1.一种祛痘美白抗衰老的精油组合物，其特征在于，所述精油组合物的制备原料按重量份计包含：乳香1-40份、没药1-40份、苏合香1-30份和安息香1-30份。
2.根据权利要求1所述的精油组合物，其特征在于，所述精油组合物的制备原料按重量份计包含：乳香30-40份，没药30-40份，苏合香10-15份和安息香10-15份。
3.一种如权利要求1或2所述的精油组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
(1)将配方量的制备原料粉碎后过筛，再进行低温减压提取，得到芳香水；
(2)用萃取剂萃取所述芳香水，分离后得到萃取液，再将所述萃取液中的萃取剂除去得到所述精油组合物。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述制备原料粉碎后过40-80目筛。
5.根据权利要求3或4所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述低温减压提取所用的提取溶剂为水，优选为去离子水；
优选地，步骤(1)中所述低温减压提取时，所述提取溶剂与制备原料的粉末的液料比为20-60mL/g，优选为30-50mL/g；
优选地，步骤(1)中所述低温减压提取时温度为40-60℃，优选为50-60℃；
优选地，步骤(1)中所述低温减压提取时压力为1-200Pa，优选为1-100Pa；
优选地，步骤(1)中所述低温减压提取时间为2-4h，优选为2-3h。
6.根据权利要求3-5任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述萃取剂为正己烷；
优选地，所述芳香水与正己烷的体积比为(80-100):1，优选为100:1；
优选地，步骤(2)中所述萃取的时间为2-5min。
7.根据权利要求3-6任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述分离为离心分离；
优选地，所述离心分离的转速为8000-12000转/分钟，优选为10000-12000转/分钟，时间为4-10min，优选为6-8min。
8.根据权利要求3-7任一项所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
(1)将配方量的制备原料粉碎后过40-80目筛，再以水为提取溶剂进行低温减压提取，所述提取溶剂与制备原料的粉末的液料比为20-60mL/g，所述提取温度为40-60℃，时间为2-4h，压力1-200Pa，提取后得到芳香水；
(2)将所述芳香水加入正己烷中进行萃取，所述芳香水与正己烷的体积比为(80-100):1，而后在8000-12000转/分钟下离心4-10min得到萃取液，在30-40℃下除去所述正己烷得到所述精油组合物。
9.一种化妆品，其特征在于，所述化妆品包含如权利要求1或2所述的精油组合物。
10.根据权利要求9所述的化妆品，其特征在于，所述精油组合物在化妆品中的添加量按质量分数计为0.1-30％，优选为1-20％；
优选地，所述化妆品为乳液类、霜膏类、水剂、精华类或皂类中任意一种；
优选地，所述化妆品为精华油；
优选地，所述精华油按质量百分比计包括35-40％角鲨烷、25-30％葵酸甘油三酯、12-18％异壬酸异壬酯、5-10％葡萄籽油、5-10％霍霍巴油和2-8％权利要求1或2所述的精油组合物。
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