CN110699479A - 一种与西瓜蔓长相关的caps标记引物组及其应用 - Google Patents
一种与西瓜蔓长相关的caps标记引物组及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110699479A CN110699479A CN201911121060.8A CN201911121060A CN110699479A CN 110699479 A CN110699479 A CN 110699479A CN 201911121060 A CN201911121060 A CN 201911121060A CN 110699479 A CN110699479 A CN 110699479A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- watermelon
- vine
- primer set
- pcr
- enzyme
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241000219109 Citrullus Species 0.000 title claims abstract description 65
- 235000012828 Citrullus lanatus var citroides Nutrition 0.000 title claims abstract description 65
- 239000003550 marker Substances 0.000 title claims abstract description 35
- 238000009395 breeding Methods 0.000 claims abstract description 23
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 claims abstract description 23
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims abstract description 10
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims abstract description 10
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 24
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 24
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 17
- 238000001976 enzyme digestion Methods 0.000 claims description 14
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 13
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 claims description 12
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 claims description 11
- 230000003321 amplification Effects 0.000 claims description 8
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 claims description 8
- 230000007017 scission Effects 0.000 claims description 8
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 claims description 7
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 7
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 claims description 7
- 238000000137 annealing Methods 0.000 claims description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 4
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 claims description 4
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 claims description 4
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 claims description 4
- 239000012154 double-distilled water Substances 0.000 claims description 4
- 238000012257 pre-denaturation Methods 0.000 claims description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 3
- 240000001717 Vaccinium macrocarpon Species 0.000 claims 2
- 235000012545 Vaccinium macrocarpon Nutrition 0.000 claims 2
- 235000002118 Vaccinium oxycoccus Nutrition 0.000 claims 2
- 235000004634 cranberry Nutrition 0.000 claims 2
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 claims 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 abstract description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 2
- 208000029713 Catastrophic antiphospholipid syndrome Diseases 0.000 description 29
- 208000022993 cryopyrin-associated periodic syndrome Diseases 0.000 description 29
- 239000000463 material Substances 0.000 description 9
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 8
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 7
- 239000003147 molecular marker Substances 0.000 description 6
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 5
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 241000219112 Cucumis Species 0.000 description 3
- 235000015510 Cucumis melo subsp melo Nutrition 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 3
- 238000009394 selective breeding Methods 0.000 description 3
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 2
- 102000004533 Endonucleases Human genes 0.000 description 2
- FJJCIZWZNKZHII-UHFFFAOYSA-N [4,6-bis(cyanoamino)-1,3,5-triazin-2-yl]cyanamide Chemical compound N#CNC1=NC(NC#N)=NC(NC#N)=N1 FJJCIZWZNKZHII-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 201000004569 Blindness Diseases 0.000 description 1
- 241000233855 Orchidaceae Species 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 230000009418 agronomic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 238000009402 cross-breeding Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 239000012160 loading buffer Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
- C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
- C12Q1/6895—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms for plants, fungi or algae
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/13—Plant traits
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/156—Polymorphic or mutational markers
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Botany (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种与西瓜蔓长相关的CAPS标记引物组及其应用，属于生物技术领域。所述CAPS标记引物组包括正向引物F和反向引物R，所述正向引物F的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述反向引物R的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。利用所述CAPS标记引物组对165份F2分离群体进行蔓长鉴定，结果显示长蔓和短蔓的西瓜鉴定的准确率为100％。本发明不需要经过西瓜伸蔓期鉴定，在苗期就可以准确快速的鉴定出西瓜蔓长，可以提高育种效率，缩短鉴定时间，且还具有工作量小、生产成本低等优点。本发明适用于西瓜的遗传鉴定与育种。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，涉及西瓜育种技术，具体涉及一种与西瓜蔓长相关的CAPS标记引物组及其应用。
背景技术
在传统的选择育种中，因为难以确定后代的基因型，选择的依据通常是植物的表现型而不是基因型，选择时间较长，且表现型易受环境因素的影响，导致选择的不准确和效率较低。分子标记辅助育种以与目标形状紧密连锁分子标记为工具对目标性状进行筛选，通过分子标记以基因型进行种质资源的筛选，具有准确、快速、不受环境条件干扰的优点，避免了传统育种过程中性状选择的盲目性，提高了育种效率。
CAPS标记是对扩增产物进行酶切分析的一种分子标记，具有高通量、简单、稳定、灵敏度高等特定，是目前分子标记辅助育种工作中极具发展前景的分子标记。西瓜是一种重要的园艺作物，我国是世界第一大的西瓜生产和消费大国，然而在西瓜育种过程中，可用的分子标记较少，仍以传统的选择育种为主，效率较低，难以快速获得满足市场需求的新品种。蔓长是西瓜重要的农艺性状，节间较短的短蔓植株，株型紧凑，适于高密度栽培，在一定程度上能节约土地资源，提高单位面积产量，因此短蔓西瓜是西瓜育种中很重要的种质资源。
发明内容
为解决上述西瓜育种过程中的技术问题，本发明基于西瓜蔓长的研究，开发一种可用于西瓜育种的分子标记，以缩短育种进程，提高育种效率。具体地，本发明给出一种与西瓜蔓长相关的CAPS标记引物组，利用该CAPS标记引物组能够在苗期准确、快速地鉴定出西瓜蔓长，具有通量大、扩增产物稳定、检测快速等优点，可显著提高西瓜蔓长选择育种效率。
一种与西瓜蔓长相关的CAPS标记引物组，所述CAPS标记引物组包括正向引物F和反向引物R，所述正向引物F的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述反向引物R的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
优选地，所述与西瓜蔓长相关的CAPS标记酶切位点位于西瓜第9号染色体第1850884bp处，多态性表现为T/C碱基差异。
本发明还给出了所述CAPS标记引物组在西瓜育种中的应用。
本发明还进一步给出了所述CAPS标记引物组在鉴定短蔓西瓜资源中的应用。
本发明还进一步给出了所述CAPS标记引物组在鉴定短蔓西瓜基因型中的应用。
作为本发明所述CAPS标记引物组应用的优选，所述CAPS标记引物组通过PCR方法进行应用。
本发明给出了所述PCR方法，具体包括：
以西瓜基因组DNA为模板DNA进行PCR反应，得PCR扩增产物；
将所述部分扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，剩余部分扩增产物进行酶切反应；
酶切所述PCR产物后琼脂糖凝胶电泳；
根据所述酶切产物的带型判断蔓长性状的等位基因型；
扩增片段经HhaI酶切，短蔓纯合子酶切成600bp的条带，长蔓纯合子酶切成226bp和374bp的两条带，长蔓杂合子酶切成226bp、374bp和600bp的三条带。
作为本发明所述CAPS标记引物组应用的优选，所述PCR反应体系以20μL计，包括10μL 2×Taq PCR MasterMix，2μL模板DNA，正、反向引物各1μL和6μL ddH2O。
作为本发明所述CAPS标记引物组应用的优选，所述PCR反应程序为：95℃预变性5min；95℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸50s，30个循环；72℃延伸10min，4℃保存。
作为本发明所述CAPS标记引物组应用的优选，所述酶切的反应体系以15μL计，包括0.3μL限制酶、1.5μL buffer、3.2μL ddH2O和10μL PCR产物。
与现有技术相比，本发明所述与西瓜蔓长相关的CAPS标记引物组及其应用，具有的有益效果或优点包括：本发明不需要经过西瓜伸蔓期鉴定，在苗期就可以准确快速的鉴定出西瓜蔓长，可以提高育种效率，缩短鉴定时间，且还具有工作量小、生产成本低等优点。利用本发明所述引物组进行西瓜育种，检测方法准确可靠，操作简便，能够更简单检测西瓜蔓长，从而更好的服务西瓜品种的选育或是改良，在分子辅助育种领域，为短蔓西瓜品种选育或改良提供了科学依据。
附图说明
图1是本发明所述与西瓜蔓长相关的CAPS标记引物组PCR扩增产物电泳图。
图2是本发明所述酶切产物电泳图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明提供的与西瓜蔓长相关的CAPS标记引物组及其应用进行详细的说明。
一种与西瓜蔓长相关的CAPS标记引物组，包括正向引物F和反向引物R，所述正向引物F的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述反向引物R的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。CAPS标记引物组的信息见表1。
表1，CAPS标记引物组信息
| 引物名称 | 引物序列(5’-3’) | SEQ ID NO |
| F | TGACCCCAAATTTGCATGCG | 1 |
| R | AGGTGGTGTTTGGCTTTAGAT | 2 |
在本发明中，所述控制西瓜蔓长基因的CAPS标记酶切位点位于西瓜第9号染色体第1850884bp处，多态性表现为T/C碱基差异。
本发明提供了上述CAPS标记引物组在西瓜育种中的应用，具体地，所述应用包括西瓜杂交育种中短蔓后代的筛选。通过用短蔓西瓜资源与常规西瓜品种杂交后，在F2群体中的大批量筛选，以及将短蔓性状转育到现有的栽培种的后代筛选，借助分子标记跟踪检测，可以快速、准确选育出具有短蔓性状的西瓜新品种。
本发明所述鉴定通过PCR的方式进行，PCR方法具体包括：
以西瓜基因组DNA为模板DNA进行PCR反应，得PCR扩增产物；
将所述部分扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，剩余部分扩增产物进行酶切反应；
酶切所述PCR产物后琼脂糖凝胶电泳；
根据所述酶切产物的带型判断蔓长性状的等位基因型；
扩增片段经HhaI酶切，短蔓纯合子酶切成600bp的条带，长蔓纯合子酶切成226bp和374bp的两条带，长蔓杂合子酶切成226bp、374bp和600bp的三条带。
本发明利用PCR进行基因型鉴定时，以西瓜基因组DNA为模板DNA进行PCR，得PCR产物。本发明对所述西瓜基因组DNA的来源并没有特殊限定。本发明以所述西瓜基因组DNA为模板DNA进行PCR，所述PCR的反应体系以20μL计，包括10μL 2×Taq PCR MasterMix，2μL模板DNA，正、反向引物各1μL和6μL ddH2O。本发明所述PCR的反应程序为：95℃预变性5min；95℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸50s，30个循环；72℃延伸10min，4℃保存。得扩增产物后，本发明将所述部分扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，剩余部分扩增产物进行酶切反应。本发明对所述琼脂糖凝胶电泳的方法并没有特殊限定。在本发明实施例中，PCR扩增产物电泳图如图1所示。
本发明酶切所述PCR产物后琼脂糖凝胶电泳。本发明所述酶切与进行所述PCR时所用引物具有相同的酶切位点。本发明所述酶切的体系以15μL计，优选包括0.3μL限制酶、1.5μL buffer、3.2μL ddH2O和10μLPCR产物，之后再37℃酶切过夜，用1％琼脂糖凝胶电泳进行多态性检测，在凝胶成像系统中拍照。本发明根据所述酶切产物的带型判断蔓长性状的等位基因型，在本发明实施例中酶解结果的条带如图2所示，扩增片段经HhaI酶切，结果为短蔓纯合子得到600bp的条带，长蔓纯合子酶切成226p和374bp的两条带，长蔓杂合子则显示出226bp、374bp和600bp的三条带。
本发明还提供了上述CAPS标记引物组在西瓜育种中的应用。本发明所述CAPS标记引物组在西瓜育种中的应用，可以采用与上述相同的PCR方法进行。
本发明还提供了上述CAPS标记引物组在西瓜杂交育种中短蔓后代筛选的应用，本发明所述西瓜杂交育种中短蔓后代的筛选，可以采用与上述相同的PCR方法进行。
实施例1，与西瓜蔓长相关的CAPS标记引物组的开发
将西瓜短蔓基因定位在第9号染色体上物理位置9433-34418608区间内，以其中1850884处SNP位点为中心向两侧各扩大了50bp，利用BatchPrimer3对其进行引物设计。针对该标记，以SNP位点具有差异的5份西瓜短蔓种质材料“短125长果”、“短126花”、“短127绿”、“短128黄”和“短117”，及其他10个长蔓西瓜种质材料进行标记检测验证(表2)。具体操作步骤如下：
1、提取待测样品的基因组DNA。
2、扩增含SNP位点的核苷酸片段。PCR的反应体系总体积为20μL，包括10μL 2×TaqPCR MasterMix，2μL模板DNA，正、反向引物各1μL和6μL ddH2O。PCR的反应程序为：95℃预变性5min；95℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸50s，30个循环；72℃延伸10min，4℃保存。
3、扩增产物质量检测。取5μL扩增产物与1μL Loading buffer混合后，在1％琼脂糖凝胶上电泳，在凝胶成像系统中拍照。
4、酶切反应。酶切反应参照TaKaRa的内切酶操作指南，用限制性核酸内切酶酶切PCR产物，15μL酶切体系包括0.3μL限制酶、1.5μL buffer、3.2μL ddH2O和10μLPCR产物，37℃酶切过夜。
5、酶切产物电泳及其判断。1％的琼脂糖凝胶电泳检测，点样后，在250V直流电压电泳20min左右，在凝胶成像系统中拍照，读取各样品的PCR带型；根据所述酶切产物的带型判断蔓长性状的等位基因型；扩增片段经HhaI酶切，结果为短蔓纯合子得到600bp的条带，长蔓纯合子酶切成226bp和374bp的两条带，长蔓杂合子则显示出226bp、374bp和600bp的三条带。
利用上述方法可准确的鉴定西瓜短蔓和长蔓性状，准确率为100％。
表2，试验材料及表型
| 实验材料 | 表型 | 实验材料 | 表型 | 实验材料 | 表型 |
| 短125长果 | 短蔓 | 三白瓜 | 长蔓 | 太古花圆 | 长蔓 |
| 短126花 | 短蔓 | 柳条青 | 长蔓 | 发黑 | 长蔓 |
| 短127绿 | 短蔓 | 抚州瓜 | 长蔓 | 红灯 | 长蔓 |
| 短128黄 | 短蔓 | 久比例 | 长蔓 | 冰糖脆 | 长蔓 |
| 短117 | 短蔓 | 克伦生 | 长蔓 | 橙兰 | 长蔓 |
实施例2，与西瓜蔓长相关的CAPS标记引物组的应用
1、选择短蔓西瓜资源“短125”与长蔓西瓜资源“郑州籽瓜”杂交，得到F1，F1自交得到F2，165份F2分离群体植株为待测样品，提取待测群体的基因组DNA。
2、针对实施例1中的SNP位点，以待测样品基因组DNA为模板，扩增出SNP所在的核苷酸片段。
3、PCR扩增反应条件及酶切方法均同实施例1。根据内切酶酶切产物电泳结果，若仅得到600bp的条带，则待测材料为短蔓类型；做仅得到226bp和374bp的两条带，则判定待测材料为长蔓；若呈现出三条带，则待测材料为杂合类型，当代表现为长蔓。
4、鉴定结果
对165份F2代分离群体植株的检测结果显示，120个为长蔓，45个为短蔓。
综上所述，本发明提供的CAPS标记引物组可以准确快速的鉴定出西瓜蔓长，可以提高育种效率，缩短鉴定时间，适于西瓜的遗传鉴定与育种。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用于限制本发明，凡在本发明的技术启示和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种与西瓜蔓长相关的CAPS标记引物组，其特征在于，所述CAPS标记引物组包括正向引物F和反向引物R，所述正向引物F的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述反向引物R的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.根据权利要求1所述的CAPS标记引物组，其特征在于，所述与西瓜蔓长相关的CAPS标记酶切位点位于西瓜第9号染色体第1850884bp处，多态性表现为T/C碱基差异。
3.权利要求1所述的CAPS标记引物组在西瓜育种中的应用。
4.权利要求1所述的CAPS标记引物组在鉴定短蔓西瓜资源中的应用。
5.权利要求1所述的CAPS标记引物组在鉴定短蔓西瓜基因型中的应用。
6.根据权利要求3至5中任一项所述的应用，其特征在于，所述CAPS标记引物组通过PCR方法进行应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述PCR方法包括：
以西瓜基因组DNA为模板DNA进行PCR反应，得PCR扩增产物；
将所述部分扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，剩余部分扩增产物进行酶切反应；
酶切所述PCR扩增产物后琼脂糖凝胶电泳；
根据所述酶切产物的带型判断蔓长性状的等位基因型；
扩增片段经HhaI酶切，短蔓纯合子酶切成600bp的条带，长蔓纯合子酶切成226bp和374bp的两条带，长蔓杂合子酶切成226bp、374bp和600bp的三条带。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述PCR反应体系以20μL计，包括10μL 2×Taq PCR MasterMix，2μL模板DNA，正、反向引物各1μL和6μL ddH2O。
9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述PCR反应程序为：95℃预变性5min；95℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸50s，30个循环；72℃延伸10min，4℃保存。
10.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述酶切的反应体系以15μL计，包括0.3μL限制酶、1.5μL buffer、3.2μL ddH2O和10μL PCR产物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201911121060.8A CN110699479A (zh) | 2019-11-15 | 2019-11-15 | 一种与西瓜蔓长相关的caps标记引物组及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201911121060.8A CN110699479A (zh) | 2019-11-15 | 2019-11-15 | 一种与西瓜蔓长相关的caps标记引物组及其应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN110699479A true CN110699479A (zh) | 2020-01-17 |
Family
ID=69206327
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201911121060.8A Pending CN110699479A (zh) | 2019-11-15 | 2019-11-15 | 一种与西瓜蔓长相关的caps标记引物组及其应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN110699479A (zh) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2013120781A1 (en) * | 2012-02-13 | 2013-08-22 | Nunhems B. V. | Triploid watermelon plants with a bush growth habit |
| CN106609298A (zh) * | 2015-10-21 | 2017-05-03 | 北京市农林科学院 | 鉴定或辅助鉴定印度南瓜蔓长性状的成套试剂与印度南瓜蔓长分子标记 |
| CN110079629A (zh) * | 2019-05-09 | 2019-08-02 | 西北农林科技大学 | 一种西瓜短蔓紧密连锁的snp标记、检测方法及应用 |
| CN110157831A (zh) * | 2019-05-23 | 2019-08-23 | 河南农业大学 | 与西瓜短蔓基因Cldw1共分离的分子标记 |
-
2019
- 2019-11-15 CN CN201911121060.8A patent/CN110699479A/zh active Pending
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2013120781A1 (en) * | 2012-02-13 | 2013-08-22 | Nunhems B. V. | Triploid watermelon plants with a bush growth habit |
| EP2814316A1 (en) * | 2012-02-13 | 2014-12-24 | Nunhems B.V. | Triploid watermelon plants with a bush growth habit |
| CN106609298A (zh) * | 2015-10-21 | 2017-05-03 | 北京市农林科学院 | 鉴定或辅助鉴定印度南瓜蔓长性状的成套试剂与印度南瓜蔓长分子标记 |
| CN110079629A (zh) * | 2019-05-09 | 2019-08-02 | 西北农林科技大学 | 一种西瓜短蔓紧密连锁的snp标记、检测方法及应用 |
| CN110157831A (zh) * | 2019-05-23 | 2019-08-23 | 河南农业大学 | 与西瓜短蔓基因Cldw1共分离的分子标记 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| SHI LIU: "Development of cleaved amplified polymorphic sequence markers and a CAPS-based genetic linkage map in watermelon (Citrullus lanatus [Thunb.] Matsum. and Nakai) constructed using whole-genome re-sequencing data", 《BREED SCI》 * |
| 孙蕾 等: "基于CAPS标记的西瓜遗传连锁图谱构建及3个性状定位分析", 《中国瓜菜》 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106755483B (zh) | 一种鉴定嘎拉苹果后代植株的ssr分子标记ii及其应用 | |
| CN107630099B (zh) | 一种与油菜粒重或角果长多效性主效qtl紧密连锁分子标记及应用 | |
| CN111793710B (zh) | 与花椰菜花球底部花梗分枝角度连锁的snp标记及方法和应用 | |
| CN100494403C (zh) | 一种辅助筛选耐冷水稻的方法及其专用引物 | |
| CN111549172B (zh) | 西瓜叶片后绿基因连锁位点及caps标记 | |
| CN110184378B (zh) | 三裂棉细胞质雄性不育恢复基因的分子鉴定方法 | |
| CN104073488B (zh) | 一种矮化小麦标记基因的分子标记及其引物和应用 | |
| CN107794261B (zh) | 油菜每角粒数主效qtl位点紧密连锁的分子标记及其应用 | |
| CN111518945A (zh) | 一种与西瓜叶片颜色相关的caps标记及其应用 | |
| CN110724755B (zh) | 一种与西瓜节间长度连锁的caps标记引物组及其应用 | |
| CN111394502B (zh) | 鉴定大豆RN型CMS恢复基因的InDel标记及方法 | |
| CN110699479A (zh) | 一种与西瓜蔓长相关的caps标记引物组及其应用 | |
| CN115058536A (zh) | 与西瓜叶片黄化性状相关的InDel分子标记及其应用 | |
| CN106676176A (zh) | 一种利用多重pcr对四倍体紫花苜蓿进行ssr分析的方法 | |
| CN104004758B (zh) | 一种与玉米光周期敏感性主效qtl连锁的分子标记及其应用 | |
| CN107699630B (zh) | 与小麦抗病基因Pm21连锁的分子标记及其在育种上的应用 | |
| CN105671039A (zh) | 大豆始花期主效QTL的分子标记indel15-1及其应用 | |
| CN114807409B (zh) | 一种与西瓜卷须退化和自封顶相关的分子标记及其应用 | |
| CN111100946A (zh) | 一种油菜粒重性状主效基因位点的分子标记引物及应用 | |
| CN115961068B (zh) | 一种与甜瓜单果重性状主效QTL-sfw2.2紧密连锁的分子标记及其应用 | |
| CN116024373B (zh) | 一种与葡萄抗寒性相关的snp分子标记及其应用 | |
| CN115896323B (zh) | 与玉米种子萌发能力紧密连锁的分子标记及其应用 | |
| CN114369674B (zh) | 一种与印度南瓜短蔓基因CmDw-1连锁的SNP标记及其引物、试剂盒与应用 | |
| CN117305511B (zh) | 一种与小麦籽粒宽度相关的kasp引物组与应用 | |
| CN114032330B (zh) | 一种快速鉴定苹果炭疽叶枯病的snp分子标记 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20200117 |