CN110699364B

CN110699364B - 一种负向调控十字花科黑腐病菌三型分泌系统的基因

Info

Publication number: CN110699364B
Application number: CN201911046944.1A
Authority: CN
Inventors: 姜伟; 唐纪良; 姚任之; 薛双; 尹朝群; 何勇强; 姜伯乐
Original assignee: Guangxi University
Current assignee: Guangxi University
Priority date: 2019-10-30
Filing date: 2019-10-30
Publication date: 2021-05-28
Anticipated expiration: 2039-10-30
Also published as: CN110699364A

Abstract

本发明公开了一种负向调控十字花科黑腐病菌三型分泌系统的基因。是下列核苷酸序列之一：1)序列表中序列1的DNA序列；2)与序列表中序列1限定的DNA序列具有80％以上同源性的DNA序列。序列表中序列1的DNA的自5’端的第1～3441位核苷酸为编码区。由1141个核苷酸组成，自5’端的第1～3位核苷酸为该基因的起始密码子ATG,自5’端的第3438～3441位核苷酸为该基因的终止密码子TGA。该基因为防治植物病害的防治提供药物靶标。

Description

一种负向调控十字花科黑腐病菌三型分泌系统的基因

技术领域

本发明属于植物病原细菌致病基因技术领域，具体涉及一种负向调控十字花科黑腐病菌三型分泌系统的基因。

背景技术

三型分泌系统是多种动、植物病原菌中最重要的致病系统(He et al.,1998)，该系统能将病原菌的蛋白质直接输送到寄(宿)主细胞内，在病原菌在寄主中的致病过程和在非寄主中引起高敏反应起决定性作用。十字花科黑腐病菌的三型分泌系统由hrp基因簇编码，hrpG和hrpX位于hrp基因簇旁侧(Qian et al.,2005)，也是三型分泌系统上游最关键的调控基因，HrpG调控hrpX(Wengelnik et al.,1996)，HrpX调控三型分泌系统及其下游效应物的表达(

et al.,2001；

et al.,2002；

et al.,2003)。目前十字花科黑腐病菌中已发表的调控子基本都是正向调控hrpG和hrpX及三型分泌系统的表达(Li et al.,2004)，负向调控三型分泌系统的上游基因还未见报道。

发明内容

本发明的目的提供一种新的三型分泌系统调控相关基因，提供可能的防治植物病害的药物靶标。

本发明具体通过以下技术方案实现：

一种负向调控十字花科黑腐病菌三型分泌系统的基因，其核苷酸序列为以下之一：

1)序列表中序列1的DNA序列；

2)与序列表中序列1限定的DNA序列具有80％以上同源性的DNA序列。

所述的序列1的DNA是十字花科黑腐病菌8004菌株的DNA，由3441个碱基组成。含完整的感受子基因，自5’端的第1～3441位核苷酸为该基因的编码区，自5’端的第1～3位核苷酸为该基因的起始密码子ATG，自5’端的第3437～3441位核苷酸为终止密码子TGA。

上述基因的编码蛋白，其氨基酸序列如序列表中序列2所示，由1146个氨基酸组成。

在本发明的另一方面，提供了所述的基因在植物病害防治中的应用。可作为防治植物病害的药物靶标。

本发明的有益效果为：

本发明提供了一种新的三型分泌系统调控相关基因，其可负向调控三型分泌系统，从而影响十字花科黑腐病菌，为防治植物病害的防治提供药物靶标。

附图说明

图1是本发明XC1965基因PCR电泳凝胶图；M：GeneRuler 100bp Plus DNALadder；1：XC1965 PCR产物；

图2是本发明SDS-PAGE检测XC1965蛋白；M：Blue PlusⅡProtein marker；1：未诱导总蛋白；2：诱导总蛋白；3：诱导蛋白上清；4：XC1965蛋白；

图3是本发明不同菌株的电导率检测；

图4是本发明利用β-葡糖苷酸酶(GUS)活性检测野生型和XC1965基因缺失突变体中hrpG、hrpX及hrp基因簇中的A、B、C、D、E 5个操纵子的表达情况。

具体实施方式

下面将结合本发明具体的实施例，对本发明技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

在本发明的实施例中所用到的材料包括：大肠杆菌(Escherichia coli)株系JM109；载体为pGEM-3Zf(+)购自Promega公司，pLAFR1、pLAFR3为本研究室保存的柯斯质粒；限制性内切酶、修饰酶等试剂购自Promega、Stratagene、QIAGEN公司。

实施例1负向调控三型分泌系统基因XC1965的克隆及序列测定

根据XC1965的基因序列，设计引物，以十字花科黑腐病菌总DNA为模板，用PCR法扩增该基因序列，并将其克隆至克隆载体pU C19中，获得了含该基因的重组质粒pXC1965。该序列的PCR电泳图谱为一条3441bp的条带(见图1)。用双脱氧核苷酸法在ABI 377DNA自动测序仪上测定DNA核苷酸序列。

实施例2XC1965原核表达载体的构建及蛋白纯化

将实施例1的序列克隆到原核表达载体pET32a并导入大肠杆菌BL21中，过夜培养携带有目的蛋白的质粒的大肠杆菌BL21，次日以1:100转接至新鲜的培养基，4-5h后加入终浓度为0.5mM的IPTG诱导下超量表达携带有6个连续组氨酸残基的重组氯霉素酰基转移酶蛋白，在16℃培养过夜。以未诱导总蛋白作对照，SDS-PAGE检测XC1965蛋白是否表达，然后在纯化层析柱中加入商品化的1ml Ni介质，酒精流出后使用超纯水和裂解缓冲液清洗，冰浴融化菌体沉淀，超声破胞，4℃，12000rpm，离心30min，转移上清至新的容器，弃沉淀，上清进行挂柱，重复两次，洗脱杂蛋白后洗脱目的蛋白，SDS-PAGE电泳分析表明能纯化到目的蛋白(见图2)。

实施例3电导率法检测不同菌株在非寄主植物ECW10R上的电导率

将待测菌株从-80℃活化于新鲜的NYGA平板上，在最适温度下活化三天；将菌株从NYGA平板上转接至10ml的NYBG培养基中，培养至菌株对数生长期，浓度调至OD600＝0.01；将菌液从非寄主辣椒的背面压入叶片，处于温度适宜、光照良好的温室中培养。在接种后观察过敏反应，分别在接种后8小时、16小时、24小时记录结果。并于不同时段测定电导率并绘制曲线(见图3)。

实验结果表明，在8小时、16小时、24小时，突变体DM1965的电导率相对野生型菌株Xcc 8004和突变体DM1965的互补菌株CDM1965显著提高，而以水为对照的叶片的电导率基本不变，说明突变体DM1965能够加强三型效应物的分泌。

实施例4利用β-葡糖苷酸酶(GUS)活性检测野生型和XC1965基因缺失突变体中hrpG、hrpX及hrp基因簇中的A、B、C、D、E 5个操纵子的表达情况

绘制标准曲线：配制浓度梯度为0.01-0.06mg/ml的对硝基苯酚，测定OD₄₁₅的吸光度，绘制标准曲线，每个浓度重复三次；将待测菌株接种至培养基中震荡培养，将浓度调至一致，按1％接种量转接至培养基中，28℃摇床培养18h；取2ml空白培养基，作为对照，2ml菌液测OD₆₀₀；取40μl甲苯加入1ml测过OD₆₀₀的菌液中，震荡7min；37℃下，将375μl GUS反应液预热，取取震荡后的菌液125μl，水浴10min，将二者混合均匀，继续水浴10min；加入反应终止液，200μl，静置后离心，转速12000rpm，时间5min；以培养基加各溶液为对照，取500μl上清液测OD₄₁₅的吸光度；利用公式算出酶活并绘制曲线(见图4)。

酶活计算公式：

公式中OD₆₀₀为所测菌液在波长600nm下测定的光吸收值；反应时间为10min，反应菌液量为0.125ml；酶反应体积为0.5ml；a，b为标准曲线中的系数。

结果表明，在突变体DM1965中，hrpX及hrp基因簇中的B、C2个操纵子的表达显著提高，hrpG及hrp基因簇中的A、D、E 3个操纵子的表达无显著变化。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

序列表

<110> 广西大学

<120> 一种负向调控十字花科黑腐病菌三型分泌系统的基因

<160> 2

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 3441

<212> DNA

<213> 十字花科黑腐病菌8004菌株DNA(XC1965)

<400> 1

atggccatcg ccgcgccggc cattgttgag ttgctgccag agcatcgcga aaccacagcg 60

ctattgccgc atgcggacga aagcgccctc gccctgctga gcgaaagtcc tgcgctgtcg 120

acagcgcttt cgctttgcct gcatgcacag gtgccgatgg tgctggtgtg tggcgaggcc 180

tcgcactgcc tgtacaacga tgcctgcatc ccgctcctcg gtgcgctgca tccgcacgtg 240

ttcggccagc cgctcgctac agttaccgcc caacgcctgg tgctggcggg agcgacagac 300

agacagcagc accccgagcc atcggcatgg tcgtgcagcc cggtgctcga aagcggcagg 360

ccgttgggcc agctgtatat cgccgcccat ccgcgcggac agccgtcgca gtggcacggc 420

aatacgcttg cggcaacaac cctggctctg ccgtcgccca cagacgaacg cagccacgac 480

agctttctat tgcatctgga agatgccctg cagcatgtct ccgaaccgcg cgcgatcgtg 540

gacaccagcg tgcgcctgct cggcgagcat ctgcgggtca accgctgcgc attcggcctg 600

gcggcggagg accacagtgt gatgcacgtg atcagcgact acgtgcagga catgcctagc 660

ctcaagggag attttccgtt ggaagccgcg caggggctgc gcgatgcgct gctggaaaac 720

cgcacctggt tcaccaccga cgcgatggcc cccggcgcgc cggactacgt agtcgagcaa 780

taccggcatt ccggcctgcg cgcgtcgctg gcgattccgt tgcacaagca tggccaactg 840

gtggcggcaa tcggcgtgca tcaacgtgca ccgcggcaat gggcctcgac cgacatcgaa 900

ctggtgcggc tggtggtggc acggtgctgg gaatcgatgc agcgggccaa ggcgcagcgc 960

cagttggcgg ccagcgaggg gcggctgcgg cggctggccg acacggtgcc gcagatcatc 1020

ttcatcgccg atccggcagg ccagccggac tatttcaatc aacgctggta cgaatacacc 1080

ggcctgaatc cagacacgga ggccagcgcc gcgtggcagc aggcacattc ggccgcaggc 1140

ttgcgcatgt ccggccaggc gtgggcgctg gcgctcaatg gcgagcgcgc ctacgagatc 1200

gaatgtgagc tgcgccgcca cgatgggcag acccgctggc acctggcgcg tgccctgccc 1260

gtccgcgacg aacatggacg catcagcgag tggatcggca cctacaccga tatccacgac 1320

cgccgcgggt tcgagcacaa gctgcgcgaa agcgaggcgc gcttccgcgc attgtgcgag 1380

acggtgccgg cgatgatctg gatggcggac gtggacggca actgcgtcta ctggaacccg 1440

caatggtatg agttcaccgg ccagggcgag gaacaggccc tggaccaggg ctggtggaat 1500

gcgatgcatc ccgatgatgc ggcgcgtgtg cgacatgcct tcgagcaggc gctcgatgca 1560

cgcggcgcgt tcatcgccga ataccgcatc cgccgccacg atgggcagta ccgctggtgt 1620

atcgacaccg cgtcgccgca cttcggcagc gacgggcgct tcctgggcca catcggttcg 1680

ctgaccgata tttccgaccg caagcggatc gaagatgcca ccgcatccga ccgcgcgatc 1740

ctgagcctga tcacgaccgg tgcgccattg acggtggtgc tcgatgccat cgcgctgagc 1800

gtggaagcgc gcggcgaaac accgctgtat tgcgcagtga tggtgctgga tgaggagcac 1860

cagaccttgc agtttgcggc ggccccgcat ctgccgcgcg attacagcgg cgatttcgag 1920

aatgcgccga tcgggccctc tggcccgccg tgcgcgcgct cggcccatag cggcctgcag 1980

gtgatttgtg aggacatcgc caacgatccg cgctttgaag accaccgcgc actctcggca 2040

gcgatgggga ttgccgcctg ctgcgtcacg ccgattctgg gcagcaatgg cgccgtgctg 2100

ggcacgctca acatctatta cgcgcaaccg catctggcct cgctgcgcga acaggccatg 2160

gcacgctcgg cctcccatct agccggcatc gtgatcgagc gcacgcgcgt ggatgccaaa 2220

ctcaaggcct cgctgcaggc tgaaaccgct gcacgcaatc aggccgaaca cgccagccgg 2280

gtcaaggatg aattcctggc cacgctcagc cacgaactgc gcacgccgct caatgcgatc 2340

ctgggatggt cgcgcttgat gcaggccgat gccttcgagc cggccaagct gggcaaggga 2400

ctggtggtga tcgagcgcag tgcgcgcgcg caaacgcaga tcatcgacga cctgctggat 2460

atgagtgcga tcctgtccgg caagatccgc ctgcagcccg aacacttcga catcgccggg 2520

ctggcgcgca gcaccgtgga attgatgcag cccaccgcac aggcgcgcca gatccggctg 2580

gaactggatg cgccgctgca aggcagcctg tggttcttcg gcgatgccgg gcgcctccag 2640

caggtgctga ccaacctgat cagcaacgcg ctcaagttca ccgcacccga gggcgatgtg 2700

cgcgtgagcc tggaggtgga agagcagcgc ctgcgcctgt gcgtacgcga tactggcatc 2760

ggcattgccg ccgacttcct gccgcatgtg ttcgaccgct tccgtcaggc cgatgccggc 2820

accacccgcc gcgtgggcgg attggggctg ggactgtcga tttcgcgcca gctgatcgat 2880

ctgcacggcg gcagcctggg cgcgtccagc gacggcgaag gtcatggcgc aacgttcacc 2940

gtggtgctgc cgttccagca cggcgtcagc gaccagcgtc ccgcaccaga gcctgcccac 3000

accggcccgc tgcccaccgc cgcacatggc cggctcgatg gcgtgcgcct gctgctggtg 3060

gacgacgacc aggactcacg cgaggcggtg atgcatttcc tgatgctggc cggcgcgcag 3120

gtgcaggccg ccggctcggt ggatgcagcg gaagcgcacc tggccgcggc gcattacgac 3180

gtgctggtga gcgatatcgc catgccgctg cgcgatggct acgacctgat ccgcagcgtg 3240

cgctcgggcc ggccggaact gccgcggcac atccgcgcga ttgccctcac cgcctacgtg 3300

cgcgaagagg accgcgaccg cgccatcgtg gctggcttcg acgcgcacat gggcaagccg 3360

gtggagccac ctgggctgat cgacctgatc gaacgcctgg tgctgcccgc cggtgcggta 3420

cgcaccgacc catccgcctg a 3441

<210> 2

<211> 1146

<212> PRT

<213> 编码蛋白(XC1965)

<400> 2

Met Ala Ile Ala Ala Pro Ala Ile Val Glu Leu Leu Pro Glu His Arg

1 5 10 15

Glu Thr Thr Ala Leu Leu Pro His Ala Asp Glu Ser Ala Leu Ala Leu

20 25 30

Leu Ser Glu Ser Pro Ala Leu Ser Thr Ala Leu Ser Leu Cys Leu His

35 40 45

Ala Gln Val Pro Met Val Leu Val Cys Gly Glu Ala Ser His Cys Leu

50 55 60

Tyr Asn Asp Ala Cys Ile Pro Leu Leu Gly Ala Leu His Pro His Val

65 70 75 80

Phe Gly Gln Pro Leu Ala Thr Val Thr Ala Gln Arg Leu Val Leu Ala

85 90 95

Gly Ala Thr Asp Arg Gln Gln His Pro Glu Pro Ser Ala Trp Ser Cys

100 105 110

Ser Pro Val Leu Glu Ser Gly Arg Pro Leu Gly Gln Leu Tyr Ile Ala

115 120 125

Ala His Pro Arg Gly Gln Pro Ser Gln Trp His Gly Asn Thr Leu Ala

130 135 140

Ala Thr Thr Leu Ala Leu Pro Ser Pro Thr Asp Glu Arg Ser His Asp

145 150 155 160

Ser Phe Leu Leu His Leu Glu Asp Ala Leu Gln His Val Ser Glu Pro

165 170 175

Arg Ala Ile Val Asp Thr Ser Val Arg Leu Leu Gly Glu His Leu Arg

180 185 190

Val Asn Arg Cys Ala Phe Gly Leu Ala Ala Glu Asp His Ser Val Met

195 200 205

His Val Ile Ser Asp Tyr Val Gln Asp Met Pro Ser Leu Lys Gly Asp

210 215 220

Phe Pro Leu Glu Ala Ala Gln Gly Leu Arg Asp Ala Leu Leu Glu Asn

225 230 235 240

Arg Thr Trp Phe Thr Thr Asp Ala Met Ala Pro Gly Ala Pro Asp Tyr

245 250 255

Val Val Glu Gln Tyr Arg His Ser Gly Leu Arg Ala Ser Leu Ala Ile

260 265 270

Pro Leu His Lys His Gly Gln Leu Val Ala Ala Ile Gly Val His Gln

275 280 285

Arg Ala Pro Arg Gln Trp Ala Ser Thr Asp Ile Glu Leu Val Arg Leu

290 295 300

Val Val Ala Arg Cys Trp Glu Ser Met Gln Arg Ala Lys Ala Gln Arg

305 310 315 320

Gln Leu Ala Ala Ser Glu Gly Arg Leu Arg Arg Leu Ala Asp Thr Val

325 330 335

Pro Gln Ile Ile Phe Ile Ala Asp Pro Ala Gly Gln Pro Asp Tyr Phe

340 345 350

Asn Gln Arg Trp Tyr Glu Tyr Thr Gly Leu Asn Pro Asp Thr Glu Ala

355 360 365

Ser Ala Ala Trp Gln Gln Ala His Ser Ala Ala Gly Leu Arg Met Ser

370 375 380

Gly Gln Ala Trp Ala Leu Ala Leu Asn Gly Glu Arg Ala Tyr Glu Ile

385 390 395 400

Glu Cys Glu Leu Arg Arg His Asp Gly Gln Thr Arg Trp His Leu Ala

405 410 415

Arg Ala Leu Pro Val Arg Asp Glu His Gly Arg Ile Ser Glu Trp Ile

420 425 430

Gly Thr Tyr Thr Asp Ile His Asp Arg Arg Gly Phe Glu His Lys Leu

435 440 445

Arg Glu Ser Glu Ala Arg Phe Arg Ala Leu Cys Glu Thr Val Pro Ala

450 455 460

Met Ile Trp Met Ala Asp Val Asp Gly Asn Cys Val Tyr Trp Asn Pro

465 470 475 480

Gln Trp Tyr Glu Phe Thr Gly Gln Gly Glu Glu Gln Ala Leu Asp Gln

485 490 495

Gly Trp Trp Asn Ala Met His Pro Asp Asp Ala Ala Arg Val Arg His

500 505 510

Ala Phe Glu Gln Ala Leu Asp Ala Arg Gly Ala Phe Ile Ala Glu Tyr

515 520 525

Arg Ile Arg Arg His Asp Gly Gln Tyr Arg Trp Cys Ile Asp Thr Ala

530 535 540

Ser Pro His Phe Gly Ser Asp Gly Arg Phe Leu Gly His Ile Gly Ser

545 550 555 560

Leu Thr Asp Ile Ser Asp Arg Lys Arg Ile Glu Asp Ala Thr Ala Ser

565 570 575

Asp Arg Ala Ile Leu Ser Leu Ile Thr Thr Gly Ala Pro Leu Thr Val

580 585 590

Val Leu Asp Ala Ile Ala Leu Ser Val Glu Ala Arg Gly Glu Thr Pro

595 600 605

Leu Tyr Cys Ala Val Met Val Leu Asp Glu Glu His Gln Thr Leu Gln

610 615 620

Phe Ala Ala Ala Pro His Leu Pro Arg Asp Tyr Ser Gly Asp Phe Glu

625 630 635 640

Asn Ala Pro Ile Gly Pro Ser Gly Pro Pro Cys Ala Arg Ser Ala His

645 650 655

Ser Gly Leu Gln Val Ile Cys Glu Asp Ile Ala Asn Asp Pro Arg Phe

660 665 670

Glu Asp His Arg Ala Leu Ser Ala Ala Met Gly Ile Ala Ala Cys Cys

675 680 685

Val Thr Pro Ile Leu Gly Ser Asn Gly Ala Val Leu Gly Thr Leu Asn

690 695 700

Ile Tyr Tyr Ala Gln Pro His Leu Ala Ser Leu Arg Glu Gln Ala Met

705 710 715 720

Ala Arg Ser Ala Ser His Leu Ala Gly Ile Val Ile Glu Arg Thr Arg

725 730 735

Val Asp Ala Lys Leu Lys Ala Ser Leu Gln Ala Glu Thr Ala Ala Arg

740 745 750

Asn Gln Ala Glu His Ala Ser Arg Val Lys Asp Glu Phe Leu Ala Thr

755 760 765

Leu Ser His Glu Leu Arg Thr Pro Leu Asn Ala Ile Leu Gly Trp Ser

770 775 780

Arg Leu Met Gln Ala Asp Ala Phe Glu Pro Ala Lys Leu Gly Lys Gly

785 790 795 800

Leu Val Val Ile Glu Arg Ser Ala Arg Ala Gln Thr Gln Ile Ile Asp

805 810 815

Asp Leu Leu Asp Met Ser Ala Ile Leu Ser Gly Lys Ile Arg Leu Gln

820 825 830

Pro Glu His Phe Asp Ile Ala Gly Leu Ala Arg Ser Thr Val Glu Leu

835 840 845

Met Gln Pro Thr Ala Gln Ala Arg Gln Ile Arg Leu Glu Leu Asp Ala

850 855 860

Pro Leu Gln Gly Ser Leu Trp Phe Phe Gly Asp Ala Gly Arg Leu Gln

865 870 875 880

Gln Val Leu Thr Asn Leu Ile Ser Asn Ala Leu Lys Phe Thr Ala Pro

885 890 895

Glu Gly Asp Val Arg Val Ser Leu Glu Val Glu Glu Gln Arg Leu Arg

900 905 910

Leu Cys Val Arg Asp Thr Gly Ile Gly Ile Ala Ala Asp Phe Leu Pro

915 920 925

His Val Phe Asp Arg Phe Arg Gln Ala Asp Ala Gly Thr Thr Arg Arg

930 935 940

Val Gly Gly Leu Gly Leu Gly Leu Ser Ile Ser Arg Gln Leu Ile Asp

945 950 955 960

Leu His Gly Gly Ser Leu Gly Ala Ser Ser Asp Gly Glu Gly His Gly

965 970 975

Ala Thr Phe Thr Val Val Leu Pro Phe Gln His Gly Val Ser Asp Gln

980 985 990

Arg Pro Ala Pro Glu Pro Ala His Thr Gly Pro Leu Pro Thr Ala Ala

995 1000 1005

His Gly Arg Leu Asp Gly Val Arg Leu Leu Leu Val Asp Asp Asp Gln

1010 1015 1020

Asp Ser Arg Glu Ala Val Met His Phe Leu Met Leu Ala Gly Ala Gln

1025 1030 1035 1040

Val Gln Ala Ala Gly Ser Val Asp Ala Ala Glu Ala His Leu Ala Ala

1045 1050 1055

Ala His Tyr Asp Val Leu Val Ser Asp Ile Ala Met Pro Leu Arg Asp

1060 1065 1070

Gly Tyr Asp Leu Ile Arg Ser Val Arg Ser Gly Arg Pro Glu Leu Pro

1075 1080 1085

Arg His Ile Arg Ala Ile Ala Leu Thr Ala Tyr Val Arg Glu Glu Asp

1090 1095 1100

Arg Asp Arg Ala Ile Val Ala Gly Phe Asp Ala His Met Gly Lys Pro

1105 1110 1115 1120

Val Glu Pro Pro Gly Leu Ile Asp Leu Ile Glu Arg Leu Val Leu Pro

1125 1130 1135

Ala Gly Ala Val Arg Thr Asp Pro Ser Ala

1140 1145

Claims

1.如SEQ ID NO.1所示基因在防治十字花科黑腐病菌引起的植物病害中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述基因作为防治植物病害的药物靶标。