CN110692518A - 一种粤草组织培养快速繁殖育种方法 - Google Patents
一种粤草组织培养快速繁殖育种方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110692518A CN110692518A CN201910960725.8A CN201910960725A CN110692518A CN 110692518 A CN110692518 A CN 110692518A CN 201910960725 A CN201910960725 A CN 201910960725A CN 110692518 A CN110692518 A CN 110692518A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- culture
- tissue culture
- grass
- guangdong
- culture medium
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
- A01H4/001—Culture apparatus for tissue culture
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
- A01H4/008—Methods for regeneration to complete plants
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Botany (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
本发明涉及一种粤草组织培养快速繁殖育种方法，具体是以粤草为材料，取其带节的茎段作为外植体，采用组织培养的方法，以MS+6‑BA4‑5mg/L+NAA0.05‑0.1mg/L为分化（启动）培养基，以MS+6‑BA2‑4 mg/L+NAA0.1‑0.2 mg/L为增殖培养基，以MS+NAA0.2 mg/L+活性碳1‑3mg/L为生根培养基，在温度25‑28℃，相对湿度50‑70%条件下，经分化培养（光照强度150lx左右）、增殖培养（光照2000‑4000lux，10小时/天）、生根阶段培养（光照4000‑8000lux，10小时/天）、炼苗后得到可移栽的优质粤草组培苗，该发明通过建立和优化粤草组织培养快速繁殖技术体系，为粤草的组培快繁生产提供操作流程和数据参考，为批量生产粤草组培苗并应用于人工湿地建设和园林水景建设提供技术指导。
Description
技术领域
本发明涉及一种粤草组织培养快速繁殖育种方法，属于种植技术领域。
背景技术
粤草( Pennisetum Siness Roxb) 是一种多功能型巨菌草新品种，属禾本科，形似芦苇又似细竹。粤草植株高大，根系发达，生物量大，耐寒、耐旱、耐高温、耐污、耐涝、耐盐碱，具有很强的环境适应能力，可以适应比较恶劣的环境条件，在沙地、荒地、盐碱地等均可种植。粤草是优质饲草，可作为可食用菌的优质菌料，也是优质密度板、可纺原纤维、造纸、生物质燃料发电的原料，同时能治理水土流失、净化水体。目前，尚缺乏简便易行成本低廉的快速繁殖的方法。因此，探索粤草的组培育苗方法是非常有必要的。
组培技术的应用很广泛，很多种植物都实现了利用组培育苗的方法进行快繁。目前花叶芦竹组培试验中取材多为秋季植物茎秆的侧芽为外植体，取材受季节和材料的限制，在春季不能进行有效组培快繁。本发明以茎段作为外植体，取材方便，不受季节限制，筛选合适的培养基使茎段在节处产生侧芽，进而生出新根形成组培苗，建立和优化粤草的组培快繁技术体系，为粤草的组培快繁生产提供操作流程和数据参考，为批量生产粤草组培苗并应用于生产牧草、生物质燃料、治理荒漠、改良土壤、改善生态环境等方面提供技术指导。
发明内容
本发明涉及一种粤草组织培养快速繁殖育种方法，具体是以粤草为材料，取其带节的茎段作为外植体，采用组织培养的方法，经分化培养（光照强度150lx左右）、增殖培养（光照2000-4000lux，10小时/天）、生根阶段培养（光照4000-8000lux，10小时/天）、炼苗后得到可移栽的优质粤草组培苗，以期通过建立和优化粤草组织培养快速繁殖技术体系，为粤草的组培快繁生产提供操作流程和数据参考，为批量生产粤草组培苗并应用于生产牧草、生物质燃料、治理荒漠、改良土壤、改善生态环境等方面提供技术指导。
为了达到上述目的，本发明所采用的技术方案是：
一种粤草组织培养快速繁殖育种方法，包括以下步骤：
（1）外植体的消毒：取粤草带节的茎段作为外植体，用无菌水洗3 次，用70%乙醇消毒30s，无菌水冲洗3 次，0.1% 氯化汞消毒5 min，无菌水冲洗5 次，冲洗过的外植体放在已灭菌的滤纸上吸干水分，待用；
（2）接种：将消毒后的外植体在组培室内剪成长约1.5cm 的小段，接入分化（启动）培养基中；
（3）分化培养：在温度为25-28℃、湿度50%-70%、弱光照（光照强度150lux左右）的条件下培养25 d后，观察，观察节段的侧芽生长情况；
（4）增殖培养：将分化后的侧芽剪成1.5cm小段，接种至增殖培养基，在培养温度为25-28℃，湿度50%-70%，光照强度为2000-4000lux，每天光照10h的条件下培养 25 d后记录阶段侧芽的分化数及生长情况；
（5）生根培养：将增殖培养后所得粗壮侧芽切成1.5cm小段转入生根培养基，培养温度为 25-28℃，湿度50%-70%，光照强度为4000-8000lux，每天光照 10h，25 d后，观察外植体的生根情况；
（6）移栽：当组培苗长到6～7 cm 的时候，根系能主动吸收环境中的营养和水分，可以进行移栽，把组培苗移栽到含有腐殖质和沙土的营养袋里，注意保湿保温和光照。
所述所用分化（启动）培养基为MS+6-BA4-5mg/L+NAA0.05 -0.1mg/L，所述增殖培养基为MS+6-BA2-4 mg/L+NAA0.1-0.2 mg/L，所述生根培养基为MS+NAA0.2 mg/L +活性碳1-3mg/L。
本发明具有如下优点：
本发明以茎段作为外植体，取材方便，不受季节限制，筛选合适的培养基使茎段在节处产生侧芽，进而生出新根形成组培苗，建立和优化粤草的组培快繁技术体系，为粤草的组培快繁生产提供操作流程和数据参考，为批量生产粤草组培苗并应用于人工湿地建设和园林水景建设提供技术指导。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明做进一步详细说明，这些实施例仅用来说明本发明，并不限制本发明的范围。
实施例1
一种粤草组织培养快速繁殖育种方法，包括以下步骤：
（1）外植体的消毒：取粤草带节的茎段作为外植体，用无菌水洗3 次，用70%乙醇消毒30s，无菌水冲洗3 次，0.1% 氯化汞消毒5 min，无菌水冲洗5 次，冲洗过的外植体放在已灭菌的滤纸上吸干水分，待用；
（2）接种：将消毒后的外植体在组培室内剪成长约1.5cm 的小段，接入分化（启动）培养基中；
（3）分化培养：在温度为27℃、湿度65%、弱光照（光照强度150lux左右）的条件下培养25d后，观察，观察节段的侧芽生长情况；
（4）增殖培养：将分化后的侧芽剪成1.5cm小段，接种至增殖培养基，在培养温度为27℃，湿度65%，光照强度为3500lux，每天光照10h的条件下培养 25 d后记录阶段侧芽的分化数及生长情况；
（5）生根培养：将增殖培养后所得粗壮侧芽切成1.5cm小段转入生根培养基，培养温度为 27℃，湿度65%，光照强度为5000lux，每天光照 10h，25 d后，观察外植体的生根情况；
（6）移栽：当组培苗长到6cm 的时候，根系能主动吸收环境中的营养和水分，可以进行移栽，把组培苗移栽到含有腐殖质和沙土的营养袋里，注意保湿保温和光照。
所述所用分化（启动）培养基为MS+6-BA4-5mg/L+NAA0.05 -0.1mg/L为增殖培养基，所述增殖培养基为MS+6-BA2-4 mg/L+NAA0.1-0.2 mg/L，所述生根培养基为MS+NAA0.2mg/L +活性碳1-3mg/L。
实施例2
一种粤草组织培养快速繁殖育种方法，包括以下步骤：
（1）外植体的消毒：取粤草带节的茎段作为外植体，用无菌水洗3 次，用70%乙醇消毒30s，无菌水冲洗3 次，0.1% 氯化汞消毒5 min，无菌水冲洗5 次，冲洗过的外植体放在已灭菌的滤纸上吸干水分，待用；
（2）接种：将消毒后的外植体在组培室内剪成长约1.5cm 的小段，接入分化（启动）培养基中；
（3）分化培养：在温度为28℃、湿度70%、弱光照（光照强度150lux左右）的条件下培养25d后，观察，观察节段的侧芽生长情况；
（4）增殖培养：将分化后的侧芽剪成1.5cm小段，接种至增殖培养基，在培养温度为28℃，湿度70%，光照强度为4000lux，每天光照10h的条件下培养 25 d后记录阶段侧芽的分化数及生长情况；
（5）生根培养：将增殖培养后所得粗壮侧芽切成1.5cm小段转入生根培养基，培养温度为 28℃，湿度70%，光照强度为7000lux，每天光照 10h，25 d后，观察外植体的生根情况；
（6）移栽：当组培苗长到6 cm 的时候，根系能主动吸收环境中的营养和水分，可以进行移栽，把组培苗移栽到含有腐殖质和沙土的营养袋里，注意保湿保温和光照。
所述所用分化（启动）培养基为MS+6-BA4-5mg/L+NAA0.05 -0.1mg/L为增殖培养基，所述增殖培养基为MS+6-BA2-4 mg/L+NAA0.1-0.2 mg/L，所述生根培养基为MS+NAA0.2mg/L +活性碳1-3mg/L。
实施例3
一种粤草组织培养快速繁殖育种方法，包括以下步骤：
（1）外植体的消毒：取粤草带节的茎段作为外植体，用无菌水洗3 次，用70%乙醇消毒30s，无菌水冲洗3 次，0.1% 氯化汞消毒5 min，无菌水冲洗5 次，冲洗过的外植体放在已灭菌的滤纸上吸干水分，待用；
（2）接种：将消毒后的外植体在组培室内剪成长约1.5cm 的小段，接入分化（启动）培养基中；
（3）分化培养：在温度为26℃、湿度60%、弱光照（光照强度150lux左右）的条件下培养25d后，观察，观察节段的侧芽生长情况；
（4）增殖培养：将分化后的侧芽剪成1.5cm小段，接种至增殖培养基，在培养温度为26℃，湿度60%，光照强度为2000lux，每天光照10h的条件下培养 25 d后记录阶段侧芽的分化数及生长情况；
（5）生根培养：将增殖培养后所得粗壮侧芽切成1.5cm小段转入生根培养基，培养温度为 26℃，湿度60%，光照强度为8000lux，每天光照 10h，25 d后，观察外植体的生根情况；
（6）移栽：当组培苗长到6cm 的时候，根系能主动吸收环境中的营养和水分，可以进行移栽，把组培苗移栽到含有腐殖质和沙土的营养袋里，注意保湿保温和光照。
所述所用分化（启动）培养基为MS+6-BA4-5mg/L+NAA0.05 -0.1mg/L为增殖培养基，所述增殖培养基为MS+6-BA2-4 mg/L+NAA0.1-0.2 mg/L，所述生根培养基为MS+NAA0.2mg/L +活性碳1-3mg/L。
实施例4
一种粤草组织培养快速繁殖育种方法，包括以下步骤：
（1）外植体的消毒：取粤草带节的茎段作为外植体，用无菌水洗3 次，用70%乙醇消毒30s，无菌水冲洗3 次，0.1% 氯化汞消毒5 min，无菌水冲洗5 次，冲洗过的外植体放在已灭菌的滤纸上吸干水分，待用；
（2）接种：将消毒后的外植体在组培室内剪成长约1.5cm 的小段，接入分化（启动）培养基中；
（3）分化培养：在温度为25℃、湿度50%、弱光照（光照强度150lux左右）的条件下培养25d后，观察，观察节段的侧芽生长情况；
（4）增殖培养：将分化后的侧芽剪成1.5cm小段，接种至增殖培养基，在培养温度为25℃，湿度50%，光照强度为4000lux，每天光照10h的条件下培养 25 d后记录阶段侧芽的分化数及生长情况；
（5）生根培养：将增殖培养后所得粗壮侧芽切成1.5cm小段转入生根培养基，培养温度为 25℃，湿度50%，光照强度为8000lux，每天光照 10h，25 d后，观察外植体的生根情况；
（6）移栽：当组培苗长到7 cm 的时候，根系能主动吸收环境中的营养和水分，可以进行移栽，把组培苗移栽到含有腐殖质和沙土的营养袋里，注意保湿保温和光照。
所述所用分化（启动）培养基为MS+6-BA4-5mg/L+NAA0.05 -0.1mg/L，所述增殖培养基为MS+6-BA2-4 mg/L+NAA0.1-0.2 mg/L，所述生根培养基为MS+NAA0.2 mg/L +活性碳1-3mg/L。
Claims (4)
1.一种粤草组织培养快速繁殖育种方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）外植体的消毒：取粤草带节的茎段作为外植体，用无菌水洗3 次，用70%乙醇消毒30s，无菌水冲洗3 次，0.1% 氯化汞消毒5 min，无菌水冲洗5 次，冲洗过的外植体放在已灭菌的滤纸上吸干水分，待用；
（2）接种：将消毒后的外植体在组培室内剪成长约1.5cm 的小段，接入分化启动培养基中；
（3）分化培养：在温度为25-28℃、湿度50%-70%、弱光照，光照强度150lux的条件下培养25 d后，观察，观察节段的侧芽生长情况；
（4）增殖培养：将分化后的侧芽剪成1.5cm小段，接种至增殖培养基，在培养温度为25-28℃，湿度50%-70%，光照强度为2000-4000lux，每天光照10h的条件下培养 25 d后记录阶段侧芽的分化数及生长情况；
（5）生根培养：将增殖培养后所得粗壮侧芽切成1.5cm小段转入生根培养基，培养温度为 25-28℃，湿度50%-70%，光照强度为4000-8000lux，每天光照 10h，25 d后，观察外植体的生根情况；
（6）移栽：当组培苗长到6～7 cm 的时候，根系能主动吸收环境中的营养和水分，可以进行移栽，把组培苗移栽到含有腐殖质和沙土的营养袋里，注意保湿保温和光照。
2.根据权利要求1中所述一种粤草组织培养快速繁殖育种方法，其特征在于：步骤（2）所述的分化启动培养基为MS+6-BA4-5mg/L+NAA0.05-0.1mg/L。
3.根据权利要求1中所述一种粤草组织培养快速繁殖育种方法，其特征在于：步骤（4）所述的增殖培养基为MS+6-BA2-4 mg/L+NAA0.1-0.2 mg/L。
4.根据权利要求1中所述一种粤草组织培养快速繁殖育种方法，其特征在于：步骤（5）所述的生根培养基为MS+NAA0.2 mg/L +活性碳1-3mg/L。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910960725.8A CN110692518A (zh) | 2019-10-11 | 2019-10-11 | 一种粤草组织培养快速繁殖育种方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910960725.8A CN110692518A (zh) | 2019-10-11 | 2019-10-11 | 一种粤草组织培养快速繁殖育种方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN110692518A true CN110692518A (zh) | 2020-01-17 |
Family
ID=69199219
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201910960725.8A Pending CN110692518A (zh) | 2019-10-11 | 2019-10-11 | 一种粤草组织培养快速繁殖育种方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN110692518A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112655556A (zh) * | 2020-12-22 | 2021-04-16 | 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所 | 一种王草的组织培养脱毒快繁方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101869054A (zh) * | 2009-04-23 | 2010-10-27 | 上海上房园林植物研究所 | 紫叶狼尾草的组织培养方法 |
-
2019
- 2019-10-11 CN CN201910960725.8A patent/CN110692518A/zh active Pending
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101869054A (zh) * | 2009-04-23 | 2010-10-27 | 上海上房园林植物研究所 | 紫叶狼尾草的组织培养方法 |
Non-Patent Citations (8)
| Title |
|---|
| 刘红美等: "第3代杂交狼尾草优质种苗快速繁育技术研究", 《种子》 * |
| 夏振平: "紫叶狼尾草的繁殖培养研究", 《现代农业科技》 * |
| 宣朴等: "皇竹草组织培养再生植株研究", 《中国草地》 * |
| 苏艳等: "杂交狼尾草腋芽的离体培养与组培快繁技术", 《山西农业科学》 * |
| 谢妤等: "杂交狼尾草离体培养植株再生体系的建立", 《宜春学院学报》 * |
| 郑建铃: "红色狼尾草的离体培养及产业化生产", 《防护林科技》 * |
| 陈志彤等: "‘闽牧6号’狼尾草组织培养再生体系的建立", 《福建农业学报》 * |
| 魏进莉等: "紫叶狼尾草的组织培养与快速繁殖", 《植物生理学报》 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112655556A (zh) * | 2020-12-22 | 2021-04-16 | 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所 | 一种王草的组织培养脱毒快繁方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103058729A (zh) | 一种叶菜类专用育苗基质 | |
| CN102301951B (zh) | 一种广豆根组织培养快速繁殖方法 | |
| CN101401549B (zh) | 甘蔗组培一次成苗快速繁殖方法 | |
| CN104542283A (zh) | 一种高效的白芷繁种育苗体系 | |
| CN101622955B (zh) | 一种适宜蕙兰种子无菌萌发培养基组合物及其方法 | |
| CN103858771A (zh) | 一种玉米转基因组培苗的移栽方法 | |
| CN106613079B (zh) | 一种半夏种茎生产方法 | |
| CN111631133A (zh) | 快速培育耐盐芦竹种苗的方法 | |
| CN111480578B (zh) | 一种箭叶淫羊藿种胚组培快繁方法 | |
| CN104686335A (zh) | 一种半夏组织培养快繁方法 | |
| CN102763592B (zh) | 一种芍药胚培养方法 | |
| CN110692518A (zh) | 一种粤草组织培养快速繁殖育种方法 | |
| CN104798581B (zh) | 一种椒蒿穴盘育苗栽培方法 | |
| CN103039362A (zh) | 油茶组培苗繁殖用继代培养基及其繁殖方法 | |
| CN103477976A (zh) | 一种铁皮石斛茎段组培育苗法 | |
| CN103039363A (zh) | 油茶组培苗繁殖用生根培养基及其繁殖方法 | |
| CN103535280B (zh) | 一种水栎组织培养繁殖方法 | |
| CN106613933A (zh) | 一种诱导苹果矮化砧木组培苗生根的方法 | |
| CN116058281A (zh) | 一种沙木蓼组织快繁方法 | |
| CN1319436C (zh) | 补血草工厂化试管快速繁殖方法 | |
| CN115136857A (zh) | 一种采用分段补光培育黄瓜壮苗的方法 | |
| CN104381128A (zh) | 一种提高绒毛白蜡组培快繁增殖率的方法 | |
| CN101112174B (zh) | 一种袋鼠花组培快繁的方法 | |
| CN102960169A (zh) | 一种使用有机固态肥的无土栽培方法 | |
| CN104221851B (zh) | 一种大叶蚁塔离体培养和快速繁殖的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20200117 |