CN110628753A - 一种用天然高分子固定化微藻保种技术 - Google Patents
一种用天然高分子固定化微藻保种技术 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110628753A CN110628753A CN201810650035.8A CN201810650035A CN110628753A CN 110628753 A CN110628753 A CN 110628753A CN 201810650035 A CN201810650035 A CN 201810650035A CN 110628753 A CN110628753 A CN 110628753A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- natural polymer
- microalgae
- algae
- solution
- distilled water
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
- C12N11/04—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier entrapped within the carrier, e.g. gel or hollow fibres
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
- C12N11/10—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a carbohydrate
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明提供了微藻保种技术邻域内的一种用天然高分子固定化微藻保种技术,其先定量称取天然高分子固定剂、氯化钠、藻液,然后将天然高分子固定剂和氯化钠分别加入蒸馏水,配成一定浓度的凝胶溶液,将天然高分子固定剂凝胶溶液煮沸消毒,再将天然高分子固定剂凝胶溶液与藻液按一定比例充分混匀,注射器均匀的速率滴入CaCl2溶液中,边滴边摇动,一定时间后形成固化的微藻胶珠,形成的微藻酸钙胶珠用消毒蒸馏水洗涤数次,得到固定藻细胞,保存培养,最后定时取样进行复活试验,室温下培养10天,先目测,后镜检,以判断是否存活;本发明的备方法简单,操作简单,不易污染,保种时间较长。
Description
技术邻域
本发明涉及一种保种技术,特别涉及一种用天然高分子固定化微藻保种技术。
背景技术
微藻的营养丰富,在人们的生活和生产实践中具有很广援的应用,在微藻的培养和应用中,保种技术十分重要,大规模微藻产业仅仅靠培养微藻是不够的,必须将藻种保存起来备用,才能满足需要,但微藻个体小,难分离,容易在保种过程中出现藻种单细胞纯种随环境变化发生变异,丧失自身的生理活性和遗传特性,所以藻种保存就显得尤为重要困,目前藻种保种方法常采用继代保种方法,操作重复且繁琐,不断传代过程藻种易污染,保种时间较短。
发明内容
针对现有技术中的缺陷,本发明的目的在于克服上述现有技术中的不足之处,提供一种用天然高分子固定化微藻保种技术,制备方法简单,操作简单,不易污染,保种时间较长。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的:一种用天然高分子固定化微藻保种技术,所述制备方法包括以下步骤:
(A1)称量配液:定量称量天然高分子固定剂、氯化钠、藻液,将天然高分子固定剂和氯化钠分别加入蒸馏水,配成凝胶溶液;
(A2)固定:将天然高分子固定剂凝胶溶液消毒,天然高分子固定剂凝胶溶液与藻液按一定比例充分混匀,用注射器以6ml/min的速率滴入2%的CaCl2溶液中,边滴边摇动,一定时间后形成固化的微藻胶珠,得到固定藻细胞;
(A3)保藏:将形成的微藻酸钙胶珠用消毒蒸馏水洗涤数次,保存培养;
(A4)检测:定时取样进行复活试验,室温下培养10天,先目测,后镜检,以判断是否存活。
本发明挑选出天然高分子固定剂,天平定量称取天然高分子固定剂、氯化钠、藻液,然后将天然高分子固定剂和氯化钠分别加入蒸馏水,配成一定浓度的凝胶溶液,将天然高分子固定剂凝胶溶液煮沸消毒备用,然后再天然高分子固定剂凝胶溶液与藻液按一定比例充分混匀,用注射器均匀的速率滴入CaCl2溶液中,边滴边摇动,使游离的微藻细胞包埋在多糖或多聚化合物制成的网状支持物中,一定时间后形成固化的微藻胶珠,形成的微藻酸钙胶珠用消毒蒸馏水洗涤数次,得到固定藻细胞,保存培养,最后定时取样进行复活试验,室温下培养10天,先目测,后镜检,以判断是否存活;与现有技术相比,本发明的有益效果在于:该方法制备方法简单,操作简单,不易污染,保种时间较长。
作为本发明的进一步改进,所述天然高分子天然高分子固定剂包括褐藻酸盐、琼脂、琼脂糖、角叉藻聚糖、明胶的一种。
作为本发明的进一步改进,所述天然高分子固定剂浓度为1%~5%。
作为本发明的进一步改进,所述天然高分子固定剂与藻液混合比例为1:1~4:1。
具体实施方式
实施例1
一种用天然高分子固定化微藻保种技术,为制备微藻保种,其按如下步骤进行:
(A1)称量配液:挑选出天然高分子固定剂褐藻酸钠,天平定量称取天然高分子固定剂褐藻酸钠2.5g、氯化钠2g、量筒量取藻液25mL,蒸馏水100mL,然后将褐藻酸钠和氯化钠分别加入到100mL蒸馏水中,玻璃棒搅拌配成浓度为2.5%(W/V)的凝胶溶液;
(A2)固定:将褐藻酸钠凝胶溶液煮沸消毒备用,然后再天然高分子固定剂凝胶溶液与藻液按4:1的比例进行接种,充分混匀后制成胶-藻混悬液,用9号针头的注射器以6mL/min的速率滴入2%的CaCl2溶液中,边滴边摇动,约30min后形成固化的褐藻酸钙胶珠,从而使藻细胞得以固定,得到固定藻细胞;
(A3)保藏:将形成的褐藻酸钙胶珠用消毒蒸馏水洗涤两次,置于250ml的三角烧瓶内保存培养;
(A4)检测:定时取样进行复活试验,室温下培养10天,先目测,后镜检,以判断是否存活。
实施例2
一种用天然高分子固定化微藻保种技术,为制备微藻保种,其按如下步骤进行:
(A1)称量配液:挑选出天然高分子固定剂琼脂,天平定量称取天然高分子固定剂琼脂5g、氯化钠2g、量筒量取藻液100mL,蒸馏水100mL,然后将琼脂和氯化钠分别加入到100mL蒸馏水中,玻璃棒搅拌配成浓度为5%(W/V)的凝胶溶液;
(A2)固定:将琼脂凝胶溶液煮沸消毒备用,然后再天然高分子固定剂凝胶溶液与藻液按4:1的比例进行接种,充分混匀后制成胶-藻混悬液,用9号针头的注射器以6mL/min的速率滴入2%的CaCl2溶液中,边滴边摇动,约30min后形成固化的琼脂胶珠,从而使藻细胞得以固定,得到固定藻细胞;
(A3)保藏:将形成的琼脂胶珠用消毒蒸馏水洗涤两次,置于250ml的三角烧瓶内保存培养;
(A4)检测:定时取样进行复活试验,室温下培养10天,先目测,后镜检,以判断是否存活。
实施例3
一种用天然高分子固定化微藻保种技术,为制备微藻保种,其按如下步骤进行:
(A1)称量配液:挑选出天然高分子固定剂琼脂糖,天平定量称取天然高分子固定剂琼脂糖1g、氯化钠2g、量筒量取藻液50mL,蒸馏水100mL,然后将琼脂糖和氯化钠分别加入到100mL蒸馏水中,玻璃棒搅拌配成浓度为5%(W/V)的凝胶溶液;
(A2)固定:将琼脂糖凝胶溶液煮沸消毒备用,然后再天然高分子固定剂凝胶溶液与藻液按4:1的比例进行接种,充分混匀后制成胶-藻混悬液,用9号针头的注射器以6mL/min的速率滴入2%的CaCl2溶液中,边滴边摇动,约30min后形成固化的琼脂糖胶珠,从而使藻细胞得以固定,得到固定藻细胞;
(A3)保藏:将形成的琼脂糖胶珠用消毒蒸馏水洗涤两次,置于250ml的三角烧瓶内保存培养;
(A4)检测:定时取样进行复活试验,室温下培养10天,先目测,后镜检,以判断是否存活。
本发明并不局限于上述实施例,在本发明公开的技术方案的基础上,本邻域的技术人员根据所公开的技术内容,不需要创造性的劳动就可以对其中的一些技术特征作出一些替换和变形,这些替换和变形均在本发明保护范围内。
Claims (4)
1.一种用天然高分子固定化微藻保种技术,其特征在于,制备方法包括以下步骤:
(A1)称量配液:定量称量天然高分子固定剂、氯化钠、藻液,将天然高分子固定剂和氯化钠分别加入蒸馏水,配成凝胶溶液;
(A2)固定:将天然高分子固定剂凝胶溶液消毒,天然高分子固定剂凝胶溶液与藻液按一定比例充分混匀,用注射器以6mL/min的速率滴入2%的CaCl2溶液中,边滴边摇动,一定时间后形成固化的微藻胶珠,得到固定藻细胞;
(A3)保藏:将形成的微藻酸钙胶珠用消毒蒸馏水洗涤数次,保存培养;
(A4)检测:定时取样进行复活试验,室温下培养10天,先目测,后镜检,以判断是否存活。
2.根据权利要求1所述的一种用天然高分子固定化微藻保种技术,其特征在于步骤(A1)中,天然高分子天然高分子固定剂包括褐藻酸盐、琼脂、琼脂糖、角叉藻聚糖、明胶的一种。
3.根据权利要求1所述的一种用天然高分子固定化微藻保种技术,其特征在于步骤(A1)中,天然高分子固定剂浓度为1%~5%。
4.根据权利要求1所述的一种用天然高分子固定化微藻保种技术,其特征在于步骤(A2)中,天然高分子固定剂与藻液混合比例为1:1~4:1。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201810650035.8A CN110628753A (zh) | 2018-06-22 | 2018-06-22 | 一种用天然高分子固定化微藻保种技术 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201810650035.8A CN110628753A (zh) | 2018-06-22 | 2018-06-22 | 一种用天然高分子固定化微藻保种技术 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN110628753A true CN110628753A (zh) | 2019-12-31 |
Family
ID=68966949
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201810650035.8A Pending CN110628753A (zh) | 2018-06-22 | 2018-06-22 | 一种用天然高分子固定化微藻保种技术 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN110628753A (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN114438071A (zh) * | 2022-02-15 | 2022-05-06 | 广东海纳川生物科技股份有限公司 | 一种悬挂式固体微藻及其制备方法、养殖池和应用 |
-
2018
- 2018-06-22 CN CN201810650035.8A patent/CN110628753A/zh active Pending
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN114438071A (zh) * | 2022-02-15 | 2022-05-06 | 广东海纳川生物科技股份有限公司 | 一种悬挂式固体微藻及其制备方法、养殖池和应用 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN107937382B (zh) | 一种固定化微藻的制备方法 | |
CN106085997A (zh) | 一种固定化藻菌球及其制备方法和应用 | |
CN101979517B (zh) | 一种利用生物反应器大规模生产流感病毒的方法 | |
CN103275923B (zh) | 一种细胞培养用gf微载体及其制备方法 | |
CN107935344A (zh) | 一种改善鸡粪厌氧发酵产沼气特性的方法 | |
CN113151247A (zh) | 一种盐藻-嗜盐菌的固定化微球及其制备方法和应用 | |
CN103289948A (zh) | 一种细胞培养用gf微载体在贴壁依赖型细胞培养中的应用 | |
CN102127524B (zh) | 细胞载体生物反应器大量繁殖禽流感病毒的方法 | |
CN110628753A (zh) | 一种用天然高分子固定化微藻保种技术 | |
CN110628752A (zh) | 一种用有机合成高分子固定化微藻保种技术 | |
CN102304476A (zh) | 三维细胞动态培养反应器 | |
CN107974411B (zh) | 一种固定化菌藻微球的制备方法 | |
CN112063611B (zh) | 一种固定化藻球及其制备方法及应用 | |
CN110628627A (zh) | 一种包埋脱水法微藻保种技术 | |
CN102586195B (zh) | 一种利用Vero传代细胞制备禽流感病毒及其灭活疫苗的方法 | |
CN103329801A (zh) | 一种甘蔗组培苗生根培养的方法 | |
CN111175112A (zh) | 一种改良的微载体活细胞荧光染色方法 | |
CN104531662A (zh) | 包埋法固定大肠杆菌谷氨酸脱羧酶的方法 | |
CN114540195A (zh) | 一种基于生物组织脱水机的微藻包埋保种方法 | |
CN115094029A (zh) | 复合明胶冷冻凝胶细胞3d培养微载体及其大体积制备方法 | |
Fahimizadeh et al. | Sustainable biologically self-healing concrete by smart natural nanotube-hydrogel system | |
CN108159412A (zh) | 一种生产细胞源鸡新城疫、禽流感二联灭活疫苗的方法及其产品 | |
JP2009011270A (ja) | 微生物検査用培地および微生物検査器具 | |
CN104593321A (zh) | 一种复合式细胞悬浮培养基及其制备方法与应用 | |
CN104046588A (zh) | Mdck细胞的生物反应器微载体培养方法及其应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20191231 |