CN110621664B

CN110621664B - 新型哌啶-2,6-二酮衍生物及其用途

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Publication number: CN110621664B
Application number: CN201880031388.8A
Authority: CN
Inventors: 黃宗渊; 河在斗; 赵成伦; 金珌虎; 尹昌洙; 朴志勋; 李廷玉; 催祥云; 李周莲; 安璇珠
Original assignee: Korea Research Institute of Chemical Technology KRICT
Current assignee: Korea Research Institute of Chemical Technology KRICT
Priority date: 2017-05-12
Filing date: 2018-05-11
Publication date: 2023-08-01
Anticipated expiration: 2038-05-11
Also published as: JP7157764B2; EP3623366A4; CN110621664A; JP2020519582A; KR20190100139A; KR102014478B1; US11192878B2; EP3623366B1; US20200062730A1; EP3623366B9; KR20180124694A; EP3623366A1

Abstract

本发明涉及一种新型哌啶‑2,6‑二酮衍生物及其用途，更具体地说，涉及一种具有沙利度胺类似物结构的哌啶‑2,6‑二酮衍生物。根据本发明的化学式1的化合物与CRBN蛋白特异性结合，并参与其功能。因此，本发明的化合物可有利地用于预防或治疗由CRBN蛋白的作用引起的麻风病、慢性移植物抗宿主病、炎性疾病或癌症。

Description

新型哌啶-2,6-二酮衍生物及其用途

技术领域

本公开涉及一种新型哌啶-2,6-二酮衍生物及其用途，更具体地说，涉及一种显示出预防或治疗麻风病、慢性移植物抗宿主病、炎性疾病或癌症的效果的哌啶-2,6-二酮衍生化合物。

背景技术

沙利度胺是一种外消旋化合物，其以商标名THALOMID(注册商标)销售，并且化学名为α-(N-苯二甲酰亚氨基)戊二酰亚胺或2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮。沙利度胺最初开发用来治疗孕妇晨吐，但由于致畸效应而被停止使用。沙利度胺目前在美国被批准治疗人麻风结节性红斑(《医师案头参考》(Physician's DeskReference)(注册商标)，1081-1085(第55版，2001))。

另外，已报道沙利度胺用于麻风病、慢性移植物抗宿主病、类风湿性关节炎、结节病、一些炎性皮肤病和炎性肠病的患者，并且已报道沙利度胺与其他药物联合用于治疗心脏和脑动脉闭塞相关的缺血/再灌注(美国专利No.5,643,915)。

最近，沙利度胺已被用于治疗某些类型的癌症。这包括难治性多发性骨髓瘤、脑癌、黑素瘤、乳腺癌、结肠癌、间皮瘤和肾细胞癌(参见Singhal，S.等人，341(21)NewEngland J.Med.，1565-1571(1999)；和Marx，G.M.等人，18 Proc.Am.Soc.Clin.Oncology，454a(1999))。沙利度胺还被报道用于预防大鼠中由阿霉素引起的慢性心肌病的表现(Costa，P.T.，等人，92(10：增刊1)Blood，235b(1998))。涉及使用沙利度胺治疗某种癌症的另一篇报道包括当治疗多形性成胶质细胞瘤时与卡铂联合使用(McCann，J.，Drug Topics41-42(1999年6月21日))。沙利度胺也已被报道在治疗星形细胞瘤时用作止吐药(Zwart，D.，16(12)Arzneim.-Forsch.，1688-1689(1966))。

此外，沙利度胺被以各种方式用于预防或治疗狼疮性肾炎、纤维肌痛、精神分裂症、中枢神经系统疾病、糖尿病、炎性疾病等目的，但它有由于在服用它的孕妇中导致畸形的致死性副作用而在1961年末退出市场的历史。

已在积极进行研究以开发解决严重副作用的问题、同时保留沙利度胺的各种生理效用的衍生物。

发明内容

【技术问题】

本发明人试图开发一种保留沙利度胺本身的生理活性并且没有沙利度胺的副作用的新型衍生化合物，并且特别地，已经开发了基于哌啶-2,6-二酮的新型沙利度胺衍生物并且已经评价了其活性，从而完成本公开。

因此，本公开的目的是提供由以下化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐。

[化学式1]

在化学式1中，

X是氮(N)或碳(C)；并且

R₁或R₂各自独立地被一种或多种选自由下列所组成的组中的取代基取代：氢，羟基，卤素，氰基，氨基，硝基，-NR₅R₆，-N(SO₂)R₇，-CONR₅R₆，-OR₅，-SR₅，-SO₂R₅，-SO₂NR₅R₆，-CR₅R₆，-CR₅NR₆R₇，-P(O)(OR₅)R₆，-P(O)R₅R₆，-OP(O)(OR₅)R₆，-OP(O)R₅R₆，-CF₃，-NR₅SO₂NR₅R₆，-CONR₅COR₆，-NR₅C(＝N-CN)NR₅R₆，-C(＝N-CN)NR₅R₆，-NR₅C(＝N-CN)R₆，-NR₅C(＝C-NO₂)NR₅R₆，-SO₂NR₅COR₆，-CO₂R₅，-C(C＝N-OR₅)R₆，-CR₅＝CR₅R₆，-CCR₅，-S(C＝O)(C＝N-R₅)R₆，-SF₅，-OCF₃，-NHCOR₅，未取代或取代的C₁-C₁₀直链或支链烷基，未取代或取代的C₁-C₁₀直链或支链烯基，未取代或取代的C₁-C₁₀直链或支链炔基，未取代或取代的C₁-C₁₀直链或支链烷氧基，未取代或取代的C₃-C₁₀环烷基，包含一个或多个选自由N、O和S组成的组中的杂原子的未取代或取代C₃-C₁₀杂环烷基，未取代或取代的C₃-C₁₀环烯基，包含一个或多个选自由N、O和S组成的组中的杂原子的未取代或取代C₃-C₁₀杂环烯基，未取代或取代的C₆-C₁₄芳基，未取代或取代的C₆-C₂₄芳基烷基，包含一个或多个选自由N、O和S组成的组中的杂原子的未取代或取代C₆-C₁₄杂芳基；以及

R₃被一种或多种选自由氢、氘、或者未取代或取代的C₁-C₁₀直链或支链烷基组成的组中的取代基取代；并且

R₄被一种或多种选自由氢、-(CH₂)_nOCOR₈、或者未取代或取代的C₁-C₁₀直链或支链烷基组成的组中的取代基取代；并且

R₅至R₈各自独立地被一种或多种选自由下列所组成的组中的取代基取代：氢，未取代或取代的氨基，未取代或取代的C₁-C₁₀直链或支链烷基，未取代或取代的C₁-C₁₀直链或支链烯基，未取代或取代的C₁-C₁₀直链或支链炔基，未取代或取代的C₃-C₁₀环烷基，包含一个或多个选自由N、O和S组成的组中的杂原子的未取代或取代C₃-C₁₀杂环烷基，未取代或取代的C₆-C₁₄芳基，或者包含一个或多个选自由N、O和S组成的组中的杂原子的未取代或取代C₆-C₁₄杂芳基；以及

n是1至5的整数。

另外，本公开的另一个目的是提供一种方法，包括：

(a)使以下化学式2表示的化合物与以下化学式3表示的化合物反应，以制备以下化学式4表示的化合物；以及

(b)使以下化学式4表示的化合物与NaNO₂反应，以制备以下化学式5表示的化合物。

[化学式2]

[化学式3]

[化学式4]

[化学式5]

本公开的另一个目的是提供一种用于预防或治疗麻风病、慢性移植物抗宿主病、炎性疾病或癌症的药物组合物，其包含所述化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分。

【技术方案】

为了实现本公开的上述目的，本公开提供了以下化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐。

[化学式1]

在化学式1中，

X是氮(N)或碳(C)；并且

R₁或R₂各自独立地被一种或多种选自由下列所组成的组中的取代基取代：氢，羟基，卤素，氰基，氨基，硝基，-NR₅R₆，-N(SO₂)R₇，-CONR₅R₆，-OR₅，-SR₅，-SO₂R₅，-SO₂NR₅R₆，-CR₅R₆，-CR₅NR₆R₇，-P(O)(OR₅)R₆，-P(O)R₅R₆，-OP(O)(OR₅)R₆，-OP(O)R₅R₆，-CF₃，-NR₅SO₂NR₅R₆，-CONR₅COR₆，-NR₅C(＝N-CN)NR₅R₆，-C(＝N-CN)NR₅R₆，-NR₅C(＝N-CN)R₆，-NR₅C(＝C-NO₂)NR₅R₆，-SO₂NR₅COR₆，-CO₂R₅，-C(C＝N-OR₅)R₆，-CR₅＝CR₅R₆，-CCR₅，-S(C＝O)(C＝N-R₅)R₆，-SF₅，-OCF₃，-NHCOR₅，未取代或取代的C₁-C₁₀直链或支链烷基，未取代或取代的C₁-C₁₀直链或支链烯基，未取代或取代的C₁-C₁₀直链或支链炔基，未取代或取代的C₁-C₁₀直链或支链烷氧基，未取代或取代的C₃-C₁₀环烷基，包含一个或多个选自由N、O和S组成的组中的杂原子的未取代或取代C₃-C₁₀杂环烷基，未取代或取代的C₃-C₁₀环烯基，包含一个或多个选自由N、O和S组成的组中的杂原子的未取代或取代C₃-C₁₀杂环烯基，未取代或取代的C₆-C₁₄芳基，未取代或取代的C₆-C₂₄芳基烷基，包含一个或多个选自由N、O和S组成的组中的杂原子的未取代或取代的C₆-C₁₄杂芳基；以及

n是1至5的整数。

除非另有说明，否则本公开中的以下术语具有以下含义。任何未定义的术语具有本领域中所理解的含义。

“卤素”在本公开中是指氟(F)、氯(Cl)、溴(Br)和碘(I)。

本公开中使用的术语“氨基”是指伯氨基基团、仲氨基基团或叔氨基基团，其单独地或组合地通过氮原子键合(在本文中，仲氨基基团具有烷基或环烷基取代基，而叔氨基基团具有两个相似或不同的烷基或环烷基取代基、或具有两个一起形成环的氮取代基)，例如它是-NH₂、甲基氨基、乙基氨基、二甲基氨基、二乙基氨基、甲基-乙基氨基、-NR₅R₆、-N(SO₂)R₇、-NR₅SO₂NR₅R₆、-NR₅CONR₅R₆、-NR₅C(＝N-CN)NR₅R₆、-NR₅C(＝N-CN)R₆、-NR₅C(＝C-NO₂)NR₅R₆、吡咯烷-1-基或哌啶基等，并优选它是伯氨基、C₁-C₁₀烷基氨基。

除非另有说明，否则本公开中使用的术语“取代的”是指包含至少一个取代基，例如，卤素原子、硝基、羟基、氰基、氨基、硫醇基、羧基、酰胺、腈基、硫化物、二硫化物、磺酰基、甲酰基、甲酰氧基、甲酰氨基、芳基或取代芳基中的一种或两种以上。除非另有说明，或者当通过这样的取代获得的结构对本公开的化学式1表示的化合物的性质没有明显不利影响时，所描述的任何基团或结构都可以用于取代本公开的化学式1表示的化合物。

除非另有说明，否则本公开中使用的术语“烷基”是指包含直链或支链的碳数为1～10(C₁-C₁₀)，更优选碳数为1～6(C₁-C₆)，更加优选碳数1～4(C₁-C₄)的烃基。例如，它可以包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、环丁基、环丙基甲基、正戊基、异戊基、新戊基、叔戊基、环戊基、环丁基甲基、正己基、异己基、环己基、环戊基甲基等。烷基可以是取代或未取代的烷基。

本公开中使用的术语“烯基”或“炔基”是指包括分别含有一个或多个双键或三键的直链或支链的碳数为1～10，更优选为碳数1～6，更加优选碳数为1～4的烃基。烯基或炔基分别可以是取代或未取代的烯基或炔基。

本公开中使用的术语“烷氧基”是指-O-烷基基团，并且烷基如上所述。例如，它可以包括甲氧基、三氟甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、正戊氧基等。烷氧基可以是取代或未取代的烷氧基。

本公开中使用的术语“环烷基”是指环状烷基基团，并由具有3至10个碳原子的单环形成。例如，它可以包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基等。环烷基可以是取代或未取代的环烷基。

本公开中使用的术语“环烯基”是指环状烯基基团，并由具有3至10个碳原子的单环形成。例如，它可以包括环己烯基、环戊烯基和环丁烯基等。环烯基可以是取代或未取代的环烯基。

本公开中使用的术语“芳基”是指芳族部分，并且是碳环官能团，并由具有6至14个碳原子的单环(例如，苯基)或多个稠合环(例如，萘基、蒽基、菲基)形成。芳基可以是取代或未取代的芳基。

本公开中使用的术语“芳基烷基”是指被烷基基团取代的芳基基团，并且芳基和烷基如上所述。

“杂环烷基”、“杂环烯基”和“杂芳基”分别是指具有单环或多个稠合环并具有3至12个环原子并具有至少一个被相同或不同种类的杂原子(例如氮、硫或氧)取代的环原子的“环烷基”、“环烯基”和“芳基”。

在本公开中，药学上可接受的盐是指保留优选的生物活性的化学式1的盐或络合物。这种盐的例子包括由无机酸[例如，盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、硝酸等]形成的酸加成盐，以及由有机酸例如乙酸、草酸、酒石酸、琥珀酸、苹果酸、富马酸、马来酸、抗坏血酸、苯甲酸、鞣酸、帕莫酸、藻酸、聚谷氨酸、萘磺酸、萘二磺酸和聚半乳糖醛酸形成的盐，但不限于此。所述化合物也可以作为本领域技术人员已知的药学上可接受的季盐施用，并且特别地，它包括氯化物、溴化物、碘化物、-O-烷基、甲苯磺酸盐、甲基磺酸盐、磺酸盐、磷酸盐或羧酸盐(例如、苯甲酸盐、琥珀酸盐、乙酸盐、乙醇酸盐、马来酸盐、苹果酸盐、富马酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、抗坏血酸盐、肉桂酸盐、扁桃酸盐和二苯基乙酸盐)。本公开的化学式1的化合物可以包括药学上可接受的盐，以及可以通过常规方法制备的所有的盐、水合物和溶剂化物。

另外，本公开的化合物可以含有一个或多个不对称碳原子，并且它可以以外消旋和旋光形式存在。所有这些化合物和非对映异构体都包括在本公开的范围内。

优选地，在化学式1中，

R₁或R₂可以各自独立地被一种或多种选自由下列所组成的组中的取代基取代：氢，羟基，卤素，氰基，氨基，硝基，-CH₃，-OCF₃，-OCH₃，-NHCOCH₃，-COOH，-CONH₂，-CONHCH₃或-NHCOC₆H₅；并且

R₄可以被一种或多种选自由下列所组成的组中的取代基取代：-CH₂OCOC(CH₃)₃，-CH₂OCOC₆H₅，-CH₂COC₅H₁₀N，-CH₂OCOC₄H₈N，-CH₂OCOCH(NH₂)CH(CH₃)CH₂CH₃，-CH₂OCOCH₂CH₂CH₃或-CH₂OCOC₄H₇NBoc；并且更优选R₄可以是

另外，更加优选地，在化学式1中，X是氮(N)，

并且最优选地，在化学式1中，X是氮(N)；并且

R₁或R₂各自独立地被一种或多种选自由下列所组成的组中的取代基取代：氢，羟基，卤素，氰基，氨基，硝基，-CH₃，-OCF₃，-OCH₃，-NHCOCH₃，-COOH，-CONH₂，-CONHCH₃或-NHCOC₆H₅；并且

R₄被一种或多种选自由下列所组成的组中的取代基取代：-CH₂OCOC(CH₃)₃，-CH₂OCOC₆H₅，-CH₂COC₅H₁₀N，-CH₂OCOC₄H₈N，-CH₂OCOCH(NH₂)CH(CH₃)CH₂CH₃，-CH₂OCOCH₂CH₂CH₃或-CH₂OCOC₄H₇NBoc。

此外，本公开提供了一种方法，包括：

[化学式2]

[化学式3]

[化学式4]

[化学式5]

在化学式2中，

R₁或R₂可以各自独立地被一种或多种选自由下列所组成的组中的取代基取代：氢，羟基，卤素，氰基，氨基，硝基，-CH₃，-OCF₃，-OCH₃，-NHCOCH₃，-COOH，-CONH₂，-CONHCH₃或-NHCOC₆H₅。

本公开的步骤(a)中使用的溶剂没有特别的限制，只要它是溶解起始材料且不抑制反应的溶剂即可，例如，可以使用诸如四氢呋喃、1,2-二甲氧基乙烷、乙醚或二恶烷等的醚类溶剂；诸如苯、甲苯或二甲苯等的芳族烃类溶剂；诸如N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺或N-甲基吡咯烷酮等的酰胺类溶剂；诸如二甲基亚砜等的有机溶剂；诸如甲醇、乙醇、丙醇、正丁醇或叔丁醇等的醇类溶剂；或其混合物或者溶剂和水的混合溶剂。优选地，可以使用二甲基甲酰胺，但不限于此。

另外，为了容易进行步骤(a)中的反应，可以使用适当的碱。作为碱，例如，可以使用氢化钠、叔丁醇钾、甲醇钠、乙醇钠、N,N-二异丙胺、二异丙基乙胺、2,4-二氨基丁酸(DBU)等，并且优选地，可以使用二异丙基乙胺，但不限于此。

在步骤(a)中，化学式2的化合物与化学式3的化合物的反应摩尔比可以为1:3-5，并且最优选地，反应以1:4的摩尔比进行。

步骤(b)是向步骤(a)中产生的化学式4的化合物添加氮化钠以进行环化反应的步骤，并且它优选在轻度酸性和室温条件下进行反应。

本公开还提供了一种用于预防或治疗麻风病、慢性移植物抗宿主病、炎性疾病或癌症的药物组合物，其包含化学式1的化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分。

本公开的此类效应在本公开的实施例中很好地显示。

在本公开中，治疗是指逆转使用该术语的疾病或病症、或疾病或病症的一种或多种症状，将其减轻，抑制其进展，或对其预防，并且本公开中使用的术语治疗是指治疗的作用。

根据本公开的一个试验例，证实其与CRBN(celebron)蛋白结合以降解Ikaros/Aiolos，GSPI1。CRBN蛋白是一种E3泛素连接酶，并且已知它具有结合沙利度胺及其衍生物、泊马度胺、来那度胺等的活性，以将泛素附着于底物蛋白例如Ikaros/Aiolos蛋白、GSPT1蛋白等。

在本公开中，癌症可以选自由下列所组成的组：乳腺癌，结肠直肠癌，肺癌，小细胞肺癌，胃癌，肝癌，血癌，骨癌，胰腺癌，皮肤癌，头颈癌，皮肤或眼内黑色素瘤，子宫癌，卵巢癌，直肠癌，肛区癌，结肠癌，乳腺癌，输卵管癌，子宫内膜癌，宫颈癌，阴道癌，外阴癌，霍奇金病(Hodgkin disease)，食道癌，小肠癌，内分泌腺癌，甲状腺癌，甲状旁腺癌，肾上腺癌，软组织肉瘤，尿道癌，阴茎癌，前列腺癌，慢性或急性白血病，淋巴细胞性淋巴瘤，膀胱癌，肾或输尿管癌，肾细胞癌，肾盂癌，CNS肿瘤，原发性CNS淋巴瘤，脊髓肿瘤，脑干胶质瘤，和垂体腺瘤；但不限于此。

另外，本公开的化学式1的化合物可以更具体地是化学式6的化合物。

[化学式6]

最优选地，本公开的化学式1的化合物可以选自以下化合物。

[化学式7]

3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

[化学式8]

3-(5-氟-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

[化学式9]

3-(5-硝基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

[化学式10]

3-(5-氯-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

[化学式11]

3-(5-甲基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

[化学式12]

3-(6-氯-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

[化学式13]

3-(6-溴-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

[化学式14]

3-(6-碘-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

[化学式15]

3-(8-溴-6-甲基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

[化学式16]

3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-6-甲腈

[化学式17]

3-(5-碘-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

[化学式18]

3-(4-氧代-6-(三氟甲氧基)苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

[化学式19]

3-(6-甲氧基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

[化学式20]

N-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-5-基)乙酰胺

[化学式21]

3-(8-硝基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

[化学式22]

3-(8-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

[化学式23]

N-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-6-基)乙酰胺

[化学式24]

3-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)哌啶-2,6-二酮

[化学式25]

3-(4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

[化学式26]

3-(7-硝基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

[化学式27]

3-(6-硝基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

[化学式28]

3-(7-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

[化学式29]

3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-5-羧酸

[化学式30]

3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)-3-甲基哌啶-2,6-二酮

[化学式31]

3-(8-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)哌啶-2,6-二酮

[化学式32]

3-(7-(氨甲基)-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

[化学式33]

3-(6-(氨甲基)-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

[化学式34]

3-(5-(氨甲基)-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

[化学式35]

3-(6-(氨甲基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)哌啶-2,6-二酮

[化学式36]

3-(7-(氨甲基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)哌啶-2,6-二酮

[化学式37]

1-(3-氯-4-甲基苯基)-3-((3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-7-基)甲基)脲

[化学式38]

1-(3-氯-4-甲基苯基)-3-((3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-6-基)甲基)脲

[化学式39]

1-(3-氯-4-甲基苯基)-3-((3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-5-基)甲基)脲

[化学式40]

1-(3-氯苯基)-3-((3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-7-基)甲基)脲

[化学式41]

1-(4-氯苯基)-3-((3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-7-基)甲基)脲

[化学式42]

1-(3,4-二氯苯基)-3-((3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-7-基)甲基)脲

[化学式43]

1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-3-((3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-7-基)甲基)脲

[化学式44]

1-(3-氯-4-甲氧基苯基)-3-((3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-7-基)甲基)脲

[化学式45]

3-氯-N-((3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-6-基)甲基)苯甲酰胺

[化学式46]

3-氯-N-((3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-6-基)甲基)-4-甲基苯甲酰胺

[化学式47]

1-(3-氯-4-甲基苯基)-3-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)甲基)脲

[化学式48]

1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-3-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)甲基)脲

[化学式49]

1-(3-氯-4-甲氧基苯基)-3-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)甲基)脲

(*Me：甲基基团)

[化学式50]

1-(3-氯-4-甲基苯基)-3-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-6-基)甲基)脲

[化学式51]

1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-3-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-6-基)甲基)脲

[化学式52]

1-(3-氯苯基)-3-((3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-7-基)甲基)硫脲

[化学式53]

2-(3-氯苯基)-N-((3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-7-基)甲基)乙酰胺

[化学式54]

3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-5-甲酰胺

[化学式55]

3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-N-甲基-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-5-甲酰胺

[化学式56]

N-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-5-基)苯甲酰胺

[化学式57]

3-(5-羟基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

[化学式58]

新戊酸(3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)-2,6-二氧代哌啶-1-基)甲酯

[化学式59]

苯甲酸(3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)-2,6-二氧代哌啶-1-基)甲酯

[化学式60]

哌啶-4-羧酸(3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)-2,6-二氧代哌啶-1-基)甲酯盐酸盐

[化学式61]

D-脯氨酸(3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)-2,6-二氧代哌啶-1-基)甲酯盐酸盐

[化学式62]

L-异亮氨酸(3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)-2,6-二氧代哌啶-1-基)甲酯盐酸盐

[化学式63]

丁酸(3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)-2,6-二氧代哌啶-1-基)甲酯

[化学式64]

2-((3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)-2,6-二氧代哌啶-1-基)甲基)1-(叔丁基)(2R)-吡咯烷-1,2-二羧酸酯

[化学式65]

3-(6-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

在根据本公开的药物组合物中，化学式1的化合物或其药学上可接受的盐可以在临床施用期间以各种口服制剂和肠胃外制剂施用，并且在制备的情况下，可以使用常用的稀释剂或赋形剂例如填充剂、增量剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂和表面活性剂来制备。

用于口服施用的固体制剂包括片剂、丸剂、粉末剂、颗粒剂、胶囊、锭剂等，并且这样的固体制剂可以通过将至少一种赋形剂例如淀粉、碳酸钙、蔗糖或乳糖或明胶等与至少一种本公开的化学式1的化合物或其药学上可接受的盐混合来制备。另外，除了单纯的赋形剂以外，还可以使用诸如硬脂酸镁、滑石粉等的润滑剂。用于口服施用的液体制剂包括悬液、内用液体、乳剂或糖浆剂等，并且在常用的单纯稀释剂、水和液体石蜡之外还可以包含各种赋形剂，例如润湿剂、甜味剂、芳香剂、防腐剂等。

用于肠胃外施用的制剂包括无菌水溶液、非水溶剂、悬浮剂、乳剂、冻干制剂和栓剂。作为非水溶剂和悬浮剂，可以使用丙二醇、聚乙二醇、植物油例如橄榄油、注射用酯例如油酸乙酯等。作为栓剂的基础材料，可以使用witepsol、聚乙二醇(macrogol)、吐温61、可可脂、月桂油(laurin butter)、甘油、明胶等。

此外，本公开的化学式1的化合物或其药学上可接受的盐对人的剂量可以取决于患者的年龄、体重、性别、施用形式、健康状况和疾病严重程度而异，基于体重70kg的成年患者，一般为0.1-1000毫克/天，优选为1-500毫克/天，并且此外，取决于医生或药剂师的判断，可以一天一次至以规律的间隔分成多剂施用。

本公开的药物组合物可以单独使用，或与手术、激素治疗、化疗和使用生物响应改性剂的方法联合使用。

另一方面，根据本公开的化合物可以取决于目的制备成各种形式，下面例示了本发明的组合物的制备例。

<制备例1>药物制剂的制备

1.粉末剂的制备

根据本公开的化学式1的化合物2g

乳糖1g

将上述成分混合并填充到气密包装中以制备粉末剂。

2.片剂的制备

根据本公开的化学式1的化合物100㎎

玉米淀粉100㎎

乳糖100㎎

硬脂酸镁2㎎

将上述成分混合，然后通过常规片剂制备方法压片以制备片剂。

3.胶囊的制备

根据本公开的化学式1的化合物100㎎

玉米淀粉100㎎

乳糖100㎎

硬脂酸镁2㎎

将上述成分混合，然后通过常规的胶囊制备方法填充到明胶胶囊中以制备胶囊。

4.丸剂的制备

根据本公开的化学式1的化合物1㎎

乳糖1.5g

甘油1g

木糖醇0.5g

将上述成分混合，然后按常规方法制备以使每1丸4g。

5.颗粒剂的制备

根据本公开的化学式1的化合物150㎎

大豆提取物50㎎

葡萄糖200㎎

淀粉600㎎

将上述成分混合，然后添加100mg的30％乙醇，并将其在60℃干燥以形成颗粒，然后填充到包装中。

【有益效果】

根据本公开的化学式1的化合物特异性结合CRBN蛋白并参与其功能。因此，本公开的化合物可有效地用于预防或治疗由CRBN蛋白的作用引起的麻风病、慢性移植物抗宿主病、炎性疾病或癌症。

附图说明

图1是当用本公开的化学式7的化合物处理6小时对Aiolos的降解活性的测量结果。

图2是当用本公开的化学式37或38的化合物处理6小时或24小时时对GSPT1和Aiolos的降解活性的测量结果。

具体实施方式

以下，将详细地描述本公开。

然而，以下实施例仅旨在举例说明本公开，但是本公开的内容不受以下实施例限制。

[实施例1]

3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(化学式7)的合成

[1-1]合成2-氨基-N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-6-氟苯甲酰胺(化合物<1-2>)

将2-氨基-6-氟苯甲酸(394mg，2.54mmol)溶解在DMF(12ml)中并添加EDCl-HCl(540mg，2.8mmol)和HOBt(429mg，2.8mmol)。在室温(rt)搅拌30分钟后，添加胺(361mg，2.8mmol)，并添加DIPEA(1.4ml，8.12mmol)，并将其在室温搅拌16小时。将反应混合物用水稀释，然后用乙酸乙酯萃取。将有机层用Na₂SO₄干燥，并通过柱色谱法纯化，得到纯的2-氨基-N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-6-氟苯甲酰胺化合物406mg(60％)，为白色固体。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ10.90(s,1H),8.53(d,J＝6.0Hz,1H),7.09(dd,J＝14.9,8.1Hz,1H),6.52(d,J＝8.2Hz,1H),6.42-6.26(m,1H),6.00(s,2H),4.84-4.61(m,1H),2.97-2.70(m,1H),2.56-2.54(m,1H),2.24-1.94(m,2H)；

MS实测的(M+H)⁺(m/z)：266.09；计算的C₁₂H₁₂FN₃O₃ m/z：266.10。

[1-2]合成3-(5-氟-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(化学式8)

向溶解在乙酸(12ml)中的2-氨基-N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-6-氟苯甲酰胺(406mg，1.5mmol)添加氮化钠(179mg，2.6mmol)。在室温搅拌1.5小时后，将混合物用水稀释，收集沉淀的白色产物，用水洗涤并干燥，得到3-(5-氟-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮280mg。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.21(s,1H),8.26-8.02(m,2H),8.00-7.67(m,1H),6.06-5.81(m,1H),3.08-2.53(m,3H),2.36-2.17(m,1H)；

MS实测的(M+H)⁺(m/z)：277.09；计算的C₁₂H₉FN₄O₃ m/z：277.10。

[1-3]合成3-(5-((4-甲氧基苄基)氨基)-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(化合物<1-3>)

在室温向3-(5-氟-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(50mg，0.18mmol)溶解在DMF(1ml)中的溶液中添加4-甲氧基苄胺(47μl，0.36mmol)和DIPEA(62μl，0.36mmol)，并将其在90℃下搅拌过夜。将反应混合物用水稀释，然后用乙酸乙酯萃取。将有机层用无水Na₂SO₄干燥，并通过柱色谱法纯化，得到3-(5-((4-甲氧基苄基)氨基)-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(12mg，17％)，为白色固体。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ8.55(s,1H),8.25(s,1H),7.64(t,J＝8.1Hz,1H),7.29-7.27(m,2H),6.88(d,J＝8.4Hz,2H),6.76(d,J＝8.4Hz,1H),5.76-5.61(m,1H),4.39(d,J＝5.3Hz,2H),3.80(s,3H),3.00-2.71(m,3H),2.49-2.28(m,1H)；

MS实测的(M+H)⁺(m/z)：394.9；计算的C₂₀H₁₉N₅O₄ m/z：394.10。

[1-4]合成3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

在室温向溶解在甲苯(1ml)中的3-(5-((4-甲氧基苄基)氨基)-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮溶液(10mg，0.025mmol)添加DDQ(6.9mg，0.03mmol)，并将其搅拌过夜。将反应混合物用乙酸乙酯稀释，并用NaHCO₃(水溶液)洗涤。将有机层用无水MgSO₄干燥，并通过柱色谱法纯化，得到纯化合物3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮1.6mg(23％)，为白色固体。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ8.00(s,1H),7.72-7.57(m,1H),7.36(d,J＝7.8Hz,2H),7.01-6.75(m,2H),6.13(s,1H),5.83-5.61(m,1H),3.10-2.67(m,3H),2.46-2.34(m,1H)；

MS实测的(M+H)⁺(m/z)：274.9；计算的C₁₂H₁₁N₅O₃ m/z：274.10。

[实施例2]

3-(5-硝基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(化学式9)的合成

[2-1]合成2-氨基-N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-6-硝基苯甲酰胺(化合物<2-2>)

向溶解在DMF(90ml)中的2-氨基-6-硝基苯甲酸(7g，38mmol)添加EDCl-HCl(8g，42mmol)和HOBt(6.5g，42mmol)。在室温搅拌30分钟后，添加3-氨基哌啶-2,6-二酮盐酸盐(25g，152mmol)和DIPEA(21ml，121.6mmol)，并将其在室温搅拌16小时。用水稀释反应混合物，并将其用乙酸乙酯萃取。将有机层用无水Na₂SO₄干燥，然后减压浓缩得到2-氨基-N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-6-硝基苯甲酰胺，为黄色固体(15g)，它未经纯化即用于下一步骤。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.01(s,1H),9.03(d,J＝8.3Hz,1H),7.38-7.14(m,2H),7.06(d,J＝7.2Hz,1H),6.02(s,2H),4.80-4.65(m,1H),2.89-2.58(m,2H),2.33-1.87(m,2H)。

[2-2]合成3-(5-硝基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

向2-氨基-N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-6-硝基苯甲酰胺溶解在乙酸中的溶液中添加氮化钠(2.7g，40mmol)。在室温搅拌1.5小时后，将混合物用水稀释，收集沉淀的白色产物，用水洗涤，并干燥得到3-(5-硝基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮7g(60％，2步收率)。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.26(s,1H),8.52(dd,J＝7.6,1.5Hz,1H),8.45-8.20(m,2H),6.00(dd,J＝12.4,5.3Hz,1H),3.04-2.87(m,1H),2.78-2.58(m,2H),2.44-2.17(m,1H)。

[2-3]合成3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

向3-(8-硝基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(1g，3.2mmol)溶解在AcOH/THF(25ml/25ml)中的溶液中，添加铁(Fe，1g)并将其在室温搅拌过夜。过滤反应混合物，并用乙酸乙酯萃取。将有机层用Na₂SO₄干燥，并将其通过柱色谱法纯化，得到0.5g(57％)纯的3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮，为黄绿色固体。

MS实测的(M+H)⁺(m/z)：274.9；计算的C₁₂H₁₁N₅O₃ m/z：274.10.

[实施例3]

3-(5-氯-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(化学式10)的合成

[3-1]合成5-氯-2H-苯并[d][1,3]恶嗪-2,4(1H)-二酮(化合物<3-2>)

向2-氨基-6-氯苯甲酸(1g，5.8mmol)溶解在1,4-二恶烷(10ml)中的溶液中，添加三光气(570mg，1.9mmol)，并将该溶液回流2小时。然后，将反应物在冰上冷却。用己烷洗涤固体，并真空干燥，获得1.1g(99％)纯化合物，为棕色固体。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ¹H NMR(300MHz,甲醇-d₄)δ7.63(t,J＝8.1Hz,1H),7.40-7.24(m,1H),7.10(d,J＝8.2Hz,1H)；

MS实测的(M+H)⁺(m/z)：198.09；计算的C₈H₄ClNO₃ m/z：198.10。

[3-2]合成2-氨基-6-氯-N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)苯甲酰胺(化合物<3-3>)

向5-氯-2H-苯并[d][1,3]恶嗪-2,4(1H)-二酮(200mg，1.01mmol)溶解在DMF(4ml)中的溶液中添加3-氨基哌啶-2,6-二酮(194mg，1.5mmol)和DMAP(12mg，0.10mmol)，并将温度从60℃升高过夜。将反应混合物用乙酸乙酯萃取，并将有机层用Na₂SO₄干燥。获得粗品化合物，为蓝色固体(75mg)，其未经进一步纯化即用于下一步骤。

MS实测的(M+H)⁺(m/z)：282.09；计算的C₁₂H₉ClN₄O₃ m/z：282.10。

[3-3]合成3-(5-氯-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

向2-氨基-6-氯-N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)苯甲酰胺(75mg，0.26mmol)溶解在乙酸(2ml)中的溶液中，添加NaNO₂(31mg，0.45mmol)，并将其在室温下搅拌1小时。用水稀释反应混合物，并收集沉淀的产物，得到18mg(24％)纯化合物，为白色固体。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.22(s,1H),8.21(d,J＝7.9Hz,1H),8.12-8.01(m,2H),6.02-5.88(m,1H),3.03-2.88(m,1H),2.84-2.60(m,2H),2.42-2.14(m,1H)；

MS实测的(M+H)⁺(m/z)：293.09；计算的C₁₂H₉ClN₄O₃ m/z：293.10。

[实施例4]

3-(5-甲基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(化学式11)的合成

[4-1]合成5-甲基-2H-苯并[d][1,3]恶嗪-2,4(1H)-二酮(化合物<4-2>)

向2-氨基-6-甲基苯甲酸(876mg，5.8mmol)溶解在1,4-二恶烷(10ml)中的溶液中添加三光气(570mg，1.9mmol)，并将溶液回流2小时。然后，将该溶液在冰上冷却。将固体用己烷洗涤，并真空干燥，得到880mg(85％)的纯化合物，为棕色固体。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ9.02(brs,1H),7.56(t,J＝7.8Hz,1H),7.12(d,J＝7.7Hz,1H),6.94(d,J＝8.1Hz,1H),2.77(s,3H)。

[4-2]合成2-氨基-N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-6-甲基苯甲酰胺(化合物<4-3>)

向5-甲基-2H-苯并[d][1,3]恶嗪-2,4[1h]-二酮(178mg，1.01mmol)溶解在DMF(4ml)中的溶液中添加3-氨基哌啶-2,6-二酮(194mg，1.5mmol)和DMAP(12mg，0.104mmol)，并将混合物在60℃加热过夜。将反应混合物用乙酸乙酯萃取，并将有机层用Na₂SO₄干燥。得到粗品化合物，为蓝色固体(50mg)，其未经进一步纯化即用于下一步骤。

[4-3]合成3-(5-甲基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

向2-氨基-N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-6-甲基苯甲酰胺(50mg，0.19mmol)溶解在乙酸(2ml)中的溶液中添加NaNO₂(22mg，0.32mmol)，并将其在室温搅拌1小时。将反应混合物用水稀释，并收集沉淀的产物，得到16mg(31％)的纯化合物，为棕色固体。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.19(s,1H),8.07(d,J＝7.8Hz,1H),7.99(t,J＝7.7Hz,1H),7.75(d,J＝7.1Hz,1H),5.99-5.87(m,1H),3.03-2.85(m,1H),2.83(s,3H),2.76-2.56(m,2H),2.35-2.19(m,1H)。

[实施例5]

3-(6-氯-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(化学式12)的合成

[5-1]合成6-氯-2H-苯并[d][1,3]恶嗪-2,4(1H)-二酮(化合物<5-2>)

向2-氨基-5-氯苯甲酸(500mg，2.0mmol)溶解在1,4-二恶烷(5ml)中的溶液添中加三光气(285mg，0.96mmol)，并将溶液回流2小时。将反应混合物在冰容器中冷却。洗涤固体，并真空干燥，得到400mg(70％)的纯化合物，为棕色固体。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.88(s,1H),7.89(d,J＝2.4Hz,1H),7.80(dd,J＝8.7,2.5Hz,1H),7.19(d,J＝8.7Hz,1H)。

[5-2]合成2-氨基-5-氯-N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)苯甲酰胺(化合物<5-3>)

向6-氯-2H-苯并[d][1,3]恶嗪-2,4(1H)-二酮(200mg，1.01mmol)溶解在DMF(3ml)中的溶液中添加3-氨基哌啶-2,6-二酮(129mg，1.01mmol)和DMAP(12.3mg，0.101mmol)，并将反应混合物溶液在60℃加热过夜。将反应混合物用乙酸乙酯萃取，将有机层用Na₂SO₄干燥。得到粗产物，为蓝色固体(70㎎)，其未经进一步纯化即用于下一步骤。

[5-3]合成3-(6-氯-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

向2-氨基-N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-6-甲基苯甲酰胺(50mg，0.19mmol)溶解在乙酸(3ml)中的溶液中添加NaNO₂(22mg，0.32mmol)，并将其在室温下搅拌1小时。将反应混合物用水稀释，并收集沉淀的产物，得到28mg(39％)的纯化合物，为棕色固体。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.21(br s,1H),8.38-8.25(m,2H),8.24-8.12(m,1H),6.00(dd,J＝12.2,5.4Hz,1H),3.05-2.91(m,1H),2.83-2.58(m,2H),2.39-2.15(m,2H).

[实施例6]

3-(6-溴-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(化学式13)的合成

[6-1]合成6-溴-2H-苯并[d][1,3]恶嗪-2,4(1H)-二酮(化合物<6-2>)

向2-氨基-5-溴苯甲酸(626mg，2.9mmol)溶解在1,4-二恶烷(5ml)中的溶液中添加三光气(285mg，0.96mmol)，并将溶液回流2小时。然后，将反应混合物在冰上冷却。用己烷洗涤固体并真空干燥，得到630mg(90％)纯的棕色固体化合物。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.87(s,1H),8.00(d,J＝2.3Hz,1H),7.91(dd,J＝8.7,2.3Hz,1H),7.11(d,J＝8.7Hz,1H)。

[6-2]合成2-氨基-5-溴-N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)苯甲酰胺(化合物<6-3>)

向6-溴-2H-苯并[d][1,3]恶嗪-2,4(1H)-二酮(244mg，1.01mmol)溶解在DMF(3ml)中的溶液中添加3-氨基哌啶-2,6-二酮(129mg，1.01mmol)和DMAP(12.3mg，0.101mmol)，并将混合物在60℃加热过夜。将反应混合物用乙酸乙酯萃取，将有机层用Na₂SO₄干燥。得到粗品化合物，为蓝色固体(80mg)，其未经进一步纯化即用于下一步骤。

[6-3]合成3-(6-溴-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

向2-氨基-5-溴-N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)苯甲酰胺(80mg，0.25mmol)溶解在乙酸(3ml)中的溶液中添加NaNO₂(28mg，0.41mmol)，并将其在室温搅拌1小时。将反应混合物用水稀释，并收集沉淀的产物，得到42mg(51％)的纯化合物，为乳白色固体。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.21(br s,1H),8.40(d,J＝2.0Hz,1H),8.32(dd,J＝8.6,2.2Hz,1H),8.21(d,J＝8.6Hz,1H),6.07-5.99(m,1H),3.00-2.85(m,1H),2.78-2.55(m,2H),2.34-2.16(m,1H)。

[实施例7]

3-(6-碘-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(化学式14)的合成

[7-1]合成6-碘-2H-苯并[d][1,3]恶嗪-2,4(1H)-二酮(化合物<7-2>)

向2-氨基-5-碘苯甲酸(762mg，2.9mmol)溶解在1,4-二恶烷(5ml)中的溶液中添加三光气(285mg，0.96mmol)，并将溶液回流2小时。然后，将反应混合物在冰上冷却。用己烷洗涤固体并真空干燥，得到680mg(81％)纯的棕色固体化合物。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.83(s,1H),8.14(d,J＝2.0Hz,1H),8.03(dd,J＝8.5,2.0Hz,1H),6.97(d,J＝8.6Hz,1H).

[7-2]合成2-氨基-N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-碘苯甲酰胺(化合物<7-3>)

向6-碘-2H-苯并[d][1,3]恶嗪-2,4(1H)-二酮(291mg，1.01mmol)溶解在DMF(3ml)中的溶液中添加3-氨基哌啶-2,6-二酮(129mg，1.01mmol)和DMAP(12.3mg，0.101mmol)，并将混合物在60℃加热过夜。将反应混合物用乙酸乙酯萃取，将有机层用Na₂SO₄干燥。得到粗品化合物，为蓝色固体(80mg)，其未经进一步纯化即用于下一步骤。

[7-3]合成3-(6-碘-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

向2-氨基-N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-碘苯甲酰胺(130mg，0.35mmol)溶解在乙酸(5ml)中的溶液中添加NaNO₂(40mg，0.59mmol)，并将其在室温搅拌1小时。将反应混合物用水稀释，并收集沉淀的产物，得到20mg(15％)的纯化合物，为乳白色固体。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.20(br s,1H),8.58(s,1H),8.47(d,J＝8.3Hz,1H),8.02(d,J＝8.6Hz,1H),6.14-5.84(m,1H),3.02-2.83(m,1H),2.85-2.63(m,2H),2.40 2.01(m,1H)。

[实施例8]

3-(8-溴-6-甲基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(化学式 15)的合成

[8-1]合成8-溴-6-甲基-2H-苯并[d][1,3]恶嗪-2,4(1H)-二酮(化合物<8-2>)

向2-氨基-3-溴-5-甲基苯甲酸(667mg，2.9mmol)溶解在1,4-二恶烷(5ml)中的溶液中添加三光气(285mg，0.96mmol)，并将溶液回流2小时。然后，将反应混合物在冰上冷却。用己烷洗涤固体并真空干燥，得到720mg(97％)纯的棕色固体化合物。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.01(s,1H),7.89(d,J＝1.4Hz,1H),7.77(s,1H),3.57(s,3H)。

[8-2]合成2-氨基-3-溴-N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-甲基苯甲酰胺(化合物<8-3>)

向8-溴-6-甲基-2H-苯并[d][1,3]恶嗪-2,4(1H)-二酮(258mg，1.01mmol)溶解在DMF(3ml)中的溶液中添加3-氨基哌啶-2,6-二酮(129mg，1.01mmol)和DMAP(12.3mg，0.101mmol)，并将混合物在60℃加热过夜。将反应混合物用乙酸乙酯萃取，将有机层用Na₂SO₄干燥。得到粗品化合物，为蓝色固体(170mg)，其未经进一步纯化即用于下一步骤。

[8-3]合成3-(8-溴-6-甲基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

向2-氨基-3-溴-N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-甲基苯甲酰胺(170mg，0.5mmol)溶解在乙酸(6ml)中的溶液中添加NaNO₂(59mg，0.85mmol)，并将其在室温搅拌1小时。将反应混合物用水稀释，并收集沉淀的产物，得到120mg(69％)的纯化合物，为乳白色固体。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.21(br s,1H),8.31(d,J＝1.3Hz,1H),8.13-8.03(m,1H),6.00(dd,J＝12.1,5.3Hz,1H),2.99-2.91(m,1H),2.78-2.59(m,1H),2.55(s,2H),2.40-2.21(m,1H)。

[实施例9]

3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-6-甲腈(化学式16)的合成

添加溶解在丙腈(0.04ml)中的3-(6-碘-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(10mg，0.038mmol，在实施例7中合成)，并使用微波反应器将其搅拌1小时。将混合物用DCM过滤，浓缩，并通过柱色谱法纯化，得到4.1mg(40％)的纯化合物，为粉红色固体。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ8.71(s,1H),8.35(d,J＝8.4Hz,1H),8.22(dd,J＝8.4,1.5Hz,1H),8.12(s,1H),5.88(dd,J＝12.2,5.3Hz,1H),3.15-2.79(m,3H),2.60-2.39(m,1H)。

[实施例10]

3-(5-碘-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(化学式17)的合成

在氩气存在下于0℃向3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(10mg，0.036mmol，在实施例1中合成)溶解在0.12ml浓盐酸中的溶液中添加包含在0.02ml水中的NaNO₂(5mg,0.073mmol)。添加后，将溶液搅拌30分钟，并在氩气存在下于0℃添加溶解在10ml水中的KI(碘化钾，12mg，0.073mmol)。然后，将其搅拌过夜。将溶液用100mlAcOEt稀释，并用100ml水再次稀释。分离水层，并用EtOAc萃取。合并有机层，将其用盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥，并真空浓缩。将残余物通过凝胶色谱法纯化，得到3-(5-碘-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮。

¹H NMR(300MHz,MeOD)δ8.50(d,J＝7.7Hz,1H),8.20(d,J＝8.2Hz,1H),7.69(t,J＝7.5Hz,1H),6.04-5.82(m,1H),3.04-2.75(m,3H),2.49-2.21(m,1H)。

[实施例11]

3-(4-氧代-6-(三氟甲氧基)苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(化学式18)的合成

[11-1]合成6-(三氟甲氧基)-2H-苯并[d][1,3]恶嗪-2,4(1H)-二酮(化合物<11-2>)

向2-氨基-5-(三氟甲氧基)苯甲酸(0.2g，0.904mmol)溶解在1,4-二恶烷(5ml)中的溶液中添加三光气(0.09g，0.3mmol)，并将溶液回流2小时。将反应混合物在冰容器中冷却。用己烷洗涤固体并真空干燥，得到0.2g(90％)的纯化合物，为乳白色固体。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.92(s,1H),7.82-7.76(m,2H),7.25(d,J＝8.8Hz,1H)。

[11-2]合成2-氨基-N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(三氟甲氧基)苯甲酰胺(化合物<11-3>)

向溶解在DMF(2ml)中的6-(三氟甲氧基)-2H-苯并[d][1,3]恶嗪-2,4(1H)-二酮(0.2g，0.81mmol)添加3-氨基哌啶-2,6-二酮(0.156g，1.22mmol)和DMAP(0.015g，0.122mmol)，并将混合物在60℃加热过夜。将反应混合物用乙酸乙酯萃取，将有机层用Na₂SO₄干燥。收集粗品化合物，为蓝色固体(0.2g)，其未经进一步纯化即用于下一步骤。

[11-3]合成3-(4-氧代-6-(三氟甲氧基)苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

向2-氨基-N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(三氟甲氧基)苯甲酰胺(0.1g，0.32mmol)溶解在乙酸(2ml)中的溶液中添加NaNO₂(37mg，0.54mmol)，并将其在室温搅拌1小时。将反应混合物用水稀释，并收集沉淀的产物，得到76mg(70％)纯化合物，为乳白色固体。

¹H NMR(500MHz,CD₃OD)δ8.36(d,J＝8.9Hz,1H),8.15(s,1H),7.99(d,J＝8.8Hz,1H),6.01-5.97(m,1H),2.89-2.83(m,3H),2.41-2.37(m,1H)；

MS实测的(M+H)⁺(m/z)：342.8；计算的C₁₃H₉F₃N₄O₄ m/z：342.06。

[实施例12]

3-(6-甲氧基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(化学式19) 的合成

[12-1]合成6-甲氧基-2H-苯并[d][1,3]恶嗪-2,4(1H)-二酮(化合物<12-2>)

向2-氨基-5-甲氧基苯甲酸(0.5g，3mmol)溶解在1,4-二恶烷(5ml)中的溶液中添加三光气(0.3g，1mmol)，并将溶液回流2小时。将反应混合物在冰容器中冷却。用己烷洗涤固体并真空干燥，得到0.53g(92％)的纯化合物，为棕色固体。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.61(s,1H),7.38(dd,J＝8.8,2.9Hz,1H),7.34(d,J＝2.8Hz,1H),7.11(d,J＝8.8Hz,1H),3.80(s,3H)。

[12-2]合成2-氨基-N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-甲氧基苯甲酰胺(化合物<12-3>)

向溶解在DMF(2ml)中的6-甲氧基-2H-苯并[d][1,3]恶嗪-2,4(1H)-二酮(0.2g，1.04mmol)添加3-氨基哌啶-2,6-二酮(0.2g，1.56mmol)和DMAP(0.013g，0.104mmol)，并将混合物在60℃加热过夜。将反应混合物用乙酸乙酯萃取，将有机层用Na₂SO₄干燥。得到粗品化合物，为蓝色固体(0.2g)，其未经进一步纯化即用于下一步骤。

[12-3]合成3-(6-甲氧基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

向2-氨基-N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-甲氧基苯甲酰胺(0.13g，0.5mmol)溶解在乙酸(2ml)中的溶液中添加NaNO₂(60mg，0.85mmol)，并将其在室温搅拌1小时。将反应混合物用水稀释并收集沉淀的产物，得到42mg(30％)的纯化合物，为粉红色固体。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.20(s,1H),8.20(d,J＝8.9Hz,1H),7.69(dd,J＝8.9,2.9Hz,1H),7.61(d,J＝2.8Hz,1H),6.00-5.94(m,1H),3.04-2.91(m,1H),2.77-2.63(m,2H),2.31-2.23(m,1H)；

MS实测的(M+H)⁺(m/z)：288.9；计算的C₁₃H₁₂N₄O₄ m/z：288.09。

[实施例13]

N-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-5-基)乙酰胺(化学式20)的合成

在0℃向3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(22mg，0.081mmol，在实施例1中合成)溶解在DCM(5ml)中的溶液中添加三甲胺(0.013ml，0.09mmol)和乙酰氯(0.006ml，0.081mmol)，并将混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物用DCM萃取。将有机层用Na₂SO₄干燥，并通过柱色谱法纯化，得到0.012g(47％)的纯化合物，为白色固体。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ11.46(s,1H),9.06(d,J＝8.5Hz,1H),8.06(s,1H),7.96(t,J＝8.2Hz,1H),7.86(d,J＝8.1Hz,1H),5.76-5.71(m,1H),3.03-2.84(m,1H),2.44-2.37(m,1H),2.28(s,3H)；

MS实测的(M+H)⁺(m/z)：315.9；计算的C₁₄H₁₃N₅O₄ m/z：315.10。

[实施例14]

3-(8-硝基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(化学式21)和 3-(8-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(化学式22)的合成

[14-1]合成8-硝基-2H-苯并[d][1,3]恶嗪-2,4(1H)-二酮(化合物<14-2>)

向2-氨基-3-硝基苯甲酸(1.0g，5.5mmol)溶解在1,4-二恶烷(10ml)中的溶液中添加三光气(0.54g，1.82mmol)并将溶液回流过夜。将反应混合物在冰容器中冷却。用己烷洗涤固体并真空干燥，得到0.945g(83％)的纯化合物，为黄色固体。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.13(s,1H),8.49(d,J＝8.2Hz,1H),8.34(d,J＝6.6Hz,1H),7.43(t,J＝8.0Hz,1H)。

[14-2]合成2-氨基-N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-硝基苯甲酰胺(化合物<14-3>)

向溶解在DMF(2ml)中的8-硝基-2H-苯并[d][1,3]恶嗪-2,4(1H)-二酮(0.216g，1.04mmol)添加3-氨基哌啶-2,6-二酮(0.2g，1.56mmol)和DMAP(0.013g，0.104mmol)，并将混合物在90℃加热过夜。将反应混合物用乙酸乙酯萃取，将有机层用Na₂SO₄干燥。得到粗品化合物，为黄色固体(0.2g)，其未经进一步纯化即用于下一步骤。

[14-3]合成3-(8-硝基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

向2-氨基-N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-硝基苯甲酰胺(0.128g，0.46mmol)溶解在乙酸(2ml)中的溶液中，添加NaNO₂(54mg，0.78mmol)，并将其在室温搅拌1小时。将反应混合物用水稀释，并收集沉淀的产物，得到55mg(39％)的纯化合物，为黄色固体。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.26(s,1H),8.64(d,J＝7.8Hz,1H),8.53(d,J＝8.2Hz,1H),8.14(t,J＝8.0Hz,1H),6.09-6.03(m,1H),3.03 2.93(m,1H),2.73-2.65(m,2H),2.33-2.27(m,2H)；

MS实测的(M+H)⁺(m/z)：303.8；计算的C₁₂H₉N₅O₅ m/z：303.06。

[14-4]合成3-(8-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮

向3-(8-硝基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(0.02g，0.066mmol)溶解在AcOH/THF(2ml/2ml)中的溶液中添加铁(Fe，0.02g)，并将其在室温搅拌过夜。过滤反应混合物，并用乙酸乙酯萃取。将有机层用Na₂SO₄干燥，并通过柱色谱法纯化，得到0.004g(22％)的纯化合物，为黄绿色固体。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.16(s,1H),7.56(t,J＝7.9Hz,1H),7.23-7.17(m,2H),6.69(s,2H),5.92-5.86(m,1H),3.02-2.91(m,1H),2.74-2.61(m,1H),2.29-2.20(m,1H)；

MS实测的(M+H)⁺(m/z)：274.0；计算的C₁₂H₁₁N₅O₃ m/z：273.09。

[实施例15]

N-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-6-基)乙酰胺(化学式23)的合成

向3-(6-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(0.02g，0.07mmol)溶解在THF(5ml)中的溶液中添加乙酰氯(0.005ml，0.07mmol)，并将其在室温搅拌过夜。用乙酸乙酯萃取反应混合物。将有机层用Na₂SO₄干燥，并通过柱色谱法纯化，得到0.01g(45％)的纯化合物，为白色固体。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.18(s,1H),10.71(s,1H),8.61(d,J＝2.2Hz,1H),8.23-8.13(m,2H),5.98-5.93(m,1H),3.02-2.90(m,1H),2.70-2.63(m,2H),2.30-2.23(m,1H),2.15(s,3H)；

[实施例16]

3-(8-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)哌啶-2,6-二酮(化学式31)的合成

[16-1]合成化合物<16-1>

向2-甲基-6-硝基苯甲酸(15g，82.8mmol)溶解在丙酮(350ml)中的溶液中添加碘甲烷(25.8ml，414.0mmol)和碳酸钾(57.2g，414.0mmol)，将反应混合物回流15小时并搅拌。将反应混合物冷却至室温并过滤。将滤液浓缩，稀释残余物，然后用EtOAc(250ml×2次)萃取。将合并的有机层用MgSO₄干燥，并真空除去溶剂，得到黄色的油状物。将合并的有机层减压浓缩，得到2-甲基-6-硝基苯甲酸甲酯(化合物<16-1>)(15.9g，81.5mmol，98％)，为白色固体。

[16-2]合成化合物<16-2>

在室温向化合物<16-1>(15.9g，81.5mmol)溶解在二氯乙烷(150ml)中的溶液中添加N-溴代琥珀酰亚胺(16.9g，122.2mmol)和过氧化苯甲酰(197mg，0.815mmol)，并将混合物在回流下搅拌8小时。将反应混合物冷却至室温并过滤。浓缩滤液。将残余物通过硅胶柱色谱法使用EA/Hx(8％)作为洗脱剂纯化，得到柠檬黄的化合物<16-2>(15.9g，58.0mmol，71％)。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ3.98(s,3H),4.57(s,2H),7.59(dd,1H,J＝7.8,8.4Hz),7.78(d,1H,J＝7.8Hz),8.1(d,1H,J＝8.4Hz).

[16-3]合成化合物<16-3>

向火焙干燥的分子筛溶解在乙腈(150ml)中的经搅拌的悬液添加NMO(15.6g，133.4mmol)。在5分钟内，添加溶解在乙腈(20ml)中的LDH-17-081(15.9g，58.0mmol)。将反应混合物在室温搅拌1.5小时，将其通过硅胶过滤，用EtOAc洗脱，真空浓缩，获得红棕色油状物。将其通过硅胶柱色谱法(MPLC，0至30％EA/Hx)纯化，得到化合物<16-3>(8.12g，38.8mmol，67％)，为白色固体。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ10.08(s,1H),8.44(dd,J＝8.2,1.2Hz,1H),8.26(dd,J＝7.7,1.2Hz,1H),7.81(t,J＝8.0Hz,1H),4.06(s,3H)。

[16-4]合成化合物<16-4>

在冰容器中在N₂下，向(甲氧基甲基)三苯基氯化鏻(1.22g，3.59mmol)溶解在THF(24ml)中的经搅拌的悬液中分小份添加氢化钠(192mg，4.78mmol)。将该红色溶液在室温搅拌30分钟，然后滴加溶解在THF(6ml)中的化合物<16-3>(500mg，2.39mmol)。将反应物在室温搅拌12小时。用水稀释混合物，并用EtOAc(50ml)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO₄干燥，并真空除去溶剂，得到深色油状物。将粗品化合物通过硅胶柱色谱法使用EtOAc/Hex(30％)作为洗脱剂纯化，得到化合物<16-4>(372mg，1.57mmol，66％)，为黄色油状物(1.7:1E/Z异构体的混合物)。

[16-5]合成化合物<16-5>

在室温，向化合物<16-4>(360mg，1.52mmol)溶解在MeOH(4ml)、H₂O(4ml)和THF(12ml)中的溶液中，添加一水合锂(638mg，15.2mmol)，并将反应混合物在70℃搅拌过夜。浓缩反应混合物以除去THF和甲醇。随后，添加水(40ml)。将合并的有机层减压浓缩，得到化合物<16-5>(332mg，1.49mmol，98％)，为黄色固体(1.7:1E/Z异构体的混合物)。

[16-6]合成化合物<16-7>

在室温，向化合物<16-5>(332mg，1.49mmol)、3-氨基哌啶-2,6-二酮盐酸盐(1.08g，6.55mmol)、EDCI HCl(314mg，1.64mmol)和HOBt H₂O(221mg，1.64mmol)溶解在DMF(10ml)中的溶液中，添加DIPEA(1.71ml，9.82mmol)，并将反应混合物在室温搅拌4小时。将反应混合物用水稀释并用EtOAc(50ml×2次)萃取。将合并的有机层用MgSO₄干燥，并真空除去溶剂，得到黄色油状物。将粗品化合物通过柱色谱法使用MeOH/DCM(5％)作为洗脱剂纯化，得到E-产物(219mg，0.658mmol，44％)和Z-产物(43mg，0.129mmol，9％)，为柠檬黄色的固体。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.98-7.86(m,2H),7.69(d,J＝7.9Hz,1H),7.47(t,J＝8.1Hz,1H),7.12(d,J＝12.8Hz,1H),6.47(d,J＝6.5Hz,1H),6.06(d,J＝12.8Hz,1H),4.87-4.76(m,1H),3.73(s,3H),2.97-2.71(m,3H),2.16-1.97(m,1H)。

[16-7]合成化合物<16-8>

将化合物<16-7>(100mg，0.300mmol)溶解在TFA(6ml)中的溶液中，将反应混合物在单波(monowave)辅助条件下，在150℃搅拌90分钟。将反应所得物蒸发干燥。将残余物通过硅胶柱色谱法使用MeOH/DCM(5％)作为洗脱剂纯化，得到化合物<16-8>，为乳白色固体。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.98(s,1H),7.82-7.67(m,2H),7.47(d,J＝7.3Hz,1H),7.06(d,J＝7.5Hz,1H),6.67(d,J＝7.4Hz,1H),5.61-5.48(m,1H),2.98-2.69(m,3H),2.37-2.23(m,1H)。

[16-8]合成化学式31的化合物

向化合物<16-8>(20mg，0.066mmol)和Zn(63mg，0.957mmol)溶解在THF(0.5ml)中的溶液，添加2M HCl(0.5ml)水溶液，并将反应混合物在室温搅拌30分钟。将混合物过滤，并在乙酸乙酯和饱和NaHCO₃水溶液之间分配。将合并的有机层用MgSO₄干燥，真空除去溶剂，得到化学式31的化合物(17mg，0.063mmol，94％)，为黄色固体。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ10.99(s,1H),7.29(t,J＝7.8Hz,2H),7.19(d,J＝7.4Hz,2H),6.65-6.54(m,2H),6.40(d,J＝7.5Hz,1H),5.33(s,1H),2.91-2.70(m,1H),2.70-2.53(m,2H),2.07-1.93(m,1H)。

[实施例17]

3-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)哌啶-2,6-二酮(化学式24)的合成

[17-1]合成5-硝基-1H-异色烯-1-酮

将起始材料(1g，5.1mmol)溶解在DMF(8.2ml)和DMFDMA(2.3ml)中，并将其在115℃搅拌17小时。反应完成时，将其浓缩除去溶剂，并溶解在EA中，然后添加硅胶(80g)，并将其在室温搅拌3小时。过滤反应物，用EA洗涤，然后浓缩，得到目标化合物，5-硝基-1H-异色烯-1-酮(800mg，棕色固体，82％)。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ8.62(d,J＝7.8Hz,1H),8.47(d,J＝8.1Hz,1H),7.65(m,1H),7.42(d,J＝6.3Hz,1H),7.36(d,J＝6.3Hz,1H)。

[17-2]合成3-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)哌啶-2,6-二酮

将5-硝基-1H-异色烯-1-酮(1g，5.2mmol)和3-氨基哌啶-2,6-二酮(0.67g，5.2mmol)溶解在MeOH(10ml)中，然后将其加热回流5小时，然后添加TEA(1.45ml)，并使反应进行过夜。当反应完成时，加水使其稀释，然后用EA萃取并减压浓缩。将浓缩物溶解在甲苯中，然后添加PPTS(0.1g)，并然后加热回流。当反应完成时，将其用饱和NaHCO₃水溶液中和，用EA萃取，干燥并分离纯化，得到目标化合物，3-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)哌啶-2,6-二酮。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ8.78(d,J＝8.3Hz,1H),8.48(d,J＝6.6Hz,1H),8.03(s,1H),7.65(t,J＝8.0Hz,1H),7.44(d,J＝7.8Hz,1H),7.17(d,J＝7.9Hz,1H),5.45-5.37(m,1H),3.04-2.57(m,3H),2.48-2.17(m,1H)。

[17-3]合成3-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)哌啶-2,6-二酮

将3-(5-硝基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)哌啶-2,6-二酮溶解在EA中，然后添加甲酸铵和10％Pd/C，并将其加热回流。当反应完成时，将其滤过硅藻土，并用EA洗涤，然后将滤液减压浓缩，获得目标化合物3-(5-氨基-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)哌啶-2,6-二酮。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ9.68(s,1H),7.90(d,J＝8.0Hz,1H),7.40-7.27(m,1H),7.19-6.87(m,2H),6.53(dd,J＝17.0,7.4Hz,1H),5.42(dd,J＝42.5,18.5Hz,1H),4.27-3.86(m,2H),3.07-2.14(m,4H)；

LC/MS(m/z)272.1(M+H)。

[实施例18]

3-(7-(氨甲基)-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(化学式 32)和1-(3-氯-4-甲基苯基)-3-((3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d] [1,2,3]三嗪-7-基)甲基)脲(化学式37)的合成

[18-1]合成4-氯-2-硝基苯甲酸甲酯

将4-氯-2-硝基苯甲酸(10g，50mmol)悬浮在无水甲醇(5ml/1mmol)中，并将其冷却至0℃。缓慢添加SOCl₂(22ml，250mmol)，然后将悬液在50℃加热16小时。将产生的溶液减压浓缩，将残余物溶解在饱和NaHCO₃水溶液(2.5ml/1mmol)中。将溶液用乙酸乙酯(2.5ml×3次/1mmol)萃取。将合并的有机层用饱和NaCl水溶液(7.5ml/1mmol)洗涤，并将其用Na₂SO₄干燥以过滤，然后将溶液减压浓缩，得到9g(70％)的纯化合物，为乳白色固体。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.86(d,J＝1.8Hz,1H),7.73(d,J＝8.3Hz,1H),7.64(dd,J＝8.3,1.9Hz,1H),3.92(s,3H)。

[18-2]合成4-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-2-硝基苯甲酸甲酯

将[[(叔丁氧羰基)氨基]甲基]三氟硼酸钾(2.6g，11mmol)、4-氯-2-硝基苯甲酸甲酯(2g，9.28mmol)、Pd(OAc)₂(0.104g，0.464mmol)、SPhos配体(0.38g，0.928mmol)和K₂CO₃(4g，28mmol)填充到密封管中。将混合物用N₂洗涤3次。随后，向反应管添加甲苯/H₂O(4∶1，20ml/5ml)并用N₂脱气30分钟。将反应混合物在85℃搅拌4小时，然后冷却至室温。将产生的混合物用EtOAc萃取，然后合并有机层，将其干燥(MgSO₄)并过滤。真空除去溶剂，并通过柱色谱法纯化产物，获得2.5g(87％)的纯化合物，为乳白色固体。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.79(s,1H),7.72(d,J＝7.9Hz,1H),7.58(d,J＝7.9Hz,1H),5.04(s,1H),4.41(d,J＝5.9Hz,2H),3.91(s,3H),1.46(s,9H)。

[18-3]合成4-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-2-硝基苯甲酸

向4-((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-2-硝基苯甲酸酯(1.5g，4.8mmol)溶解在THF/MeOH(10ml/10ml)中的溶液中，添加溶解在H₂O(2.5ml)中的LiOH(0.480g，20mmol)，并将其在室温搅拌2小时。反应完成后，蒸发溶剂，并将其用H₂O萃取。向水层添加HCl，并用EA萃取。将有机层用Na₂SO₄干燥，得到1.4g(98％)的纯化合物，为棕色固体。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ13.81(s,1H),7.82(d,J＝7.9Hz,1H),7.78(s,1H),7.62(d,J＝8.5Hz,1H),7.58(t,J＝6.2Hz,1H),4.24(d,J＝6.1Hz,2H),1.39(s,9H)。

[18-4]合成(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基甲酰基)-3-硝基苄基)氨基甲酸叔丁酯

向4-((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-2-硝基苯甲酸(1.4g，3.85mmol)添加EDCI-HCl(0.813mg，4.24mmol)和HOBt(0.649mg，4.24mmol)，并将其在室温搅拌30分钟。向反应混合物添加3-氨基哌啶-2,6-二酮盐酸盐(1.3g，7.7mmol)和DIPEA(2.7ml，15.4mmol)，并将其在室温搅拌16小时。反应完成后，将混合物用EA萃取。将有机层用Na₂SO₄干燥，并通过柱色谱法纯化，得到纯化合物1.05g(67％)，为白绿色固体。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ10.88(s,1H),9.01(d,J＝8.3Hz,1H),7.89(s,1H),7.67(d,J＝8.0Hz,1H),7.61-7.58(m,2H),4.75-4.70(m,1H),4.24(d,J＝6.1Hz,2H),2.82-2.75(m,1H),2.57-2.49(m,1H),2.06-1.99(m,2H)。

[18-5]合成(3-氨基-4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基甲酰基)苄基)氨基甲酸叔丁酯

向溶解在MeOH/EA(50ml/50ml)中的(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基甲酰基)-3-硝基苄基)氨基甲酸叔丁酯(1g，2.5mmol)添加1Pd/C(0.1g)，并将反应混合物在氢气环境下于室温搅拌16小时。将溶液通过硅藻土过滤，真空干燥，得到932mg(99％)的纯化合物，为灰白色固体。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ10.83(s,1H),8.40(d,J＝8.3Hz,1H),7.46(d,J＝8.2Hz,1H),7.32(t,J＝6.3Hz,1H),6.55(d,J＝1.6Hz,1H),6.49(s,2H),6.40(d,J＝8.1Hz,1H),4.76-4.67(m,1H),4.00(d,J＝6.3Hz,2H),2.84-2.72(m,1H),2.56-2.54(m,1H),2.16-2.03(m,1H),1.99-1.90(m,1H)。

[18-6]合成((3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-7-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯

向(3-氨基-4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基甲酰基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(0.922g，2.45mmol)溶解在冰乙酸(10ml)中的溶液中添加亚硝酸钠(0.288g，4.17mmol)，并将其在室温搅拌1小时。将反应混合物用EA萃取。将有机层用Na₂SO₄干燥，并通过柱色谱法纯化，获得0.613g(65％)的纯化合物，为白色固体。

¹H NMR(300MHz,氯仿-d)δ8.32(d,J＝8.2Hz,1H),8.09(s,1H),8.02(s,1H),7.77(d,J＝8.2Hz,1H),5.86-5.80(m,1H),5.11(s,1H),4.56(d,J＝6.3Hz,2H),3.04-2.83(m,3H),2.44-2.37(m,1H),1.48(s,9H)。

[18-7]合成3-(7-(氨甲基)-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐

向((3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-7-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.605mg，1.56mmol)溶解在DCM(10ml)中的溶液中，添加与1,4-二恶烷(2ml)混合的4M HCl，并将其在室温搅拌16小时。真空干燥溶剂，得到0.545g(定量)(化学式32)的化合物，为乳白色固体。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ11.22(s,1H),8.65(s,3H),8.40(d,J＝1.5Hz,1H),8.33(d,J＝8.1Hz,1H),8.06(dd,J＝8.2,1.6Hz,1H),6.02 5.99(m,1H),4.35(q,J＝5.7Hz,2H),3.02-2.94(m,1H),2.75-2.66(m,2H),2.32-2.27(m,1H)。

[18-8]合成1-(3-氯-4-甲基苯基)-3-((3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-7-基)甲基)脲(化学式37)

将3-(7-(氨甲基)-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(0.2g，0.62mmol)、3-氯-4-甲基苯基异氰酸酯(0.104g，0.62mmol)和TEA(0.2ml，1.24mmol)溶解在THF(10ml)中的混合物从室温加热到40℃历时2小时。将混合物用EA萃取并通过柱色谱法纯化，获得0.134g(48％)的化学式37的纯化合物，为乳白色固体。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ11.19(s,1H),8.92(s,1H),8.25(d,J＝8.2Hz,1H),8.11(s,1H),7.90(d,J＝8.1Hz,1H),7.66(d,J＝2.0Hz,1H),7.20-7.14(m,2H),7.00(t,J＝6.1Hz,1H),6.00-5.96(m,1H),4.56(d,J＝6.0Hz,2H),3.00-2.93(m,1H),2.73-2.66(m,2H),2.30-2.25(m,1H),2.23(s,3H)。

[实施例19]

1-(3-氯-4-甲基苯基)-3-((3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并 [d][1,2,3]三嗪-5-基)甲基)脲(化学式39)的合成

根据实施例18的制备方法制备化学式39的化合物。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.21(s,1H),8.97(s,1H),8.17-8.07(m,2H),7.88(d,J＝7.1Hz,1H),7.64(d,J＝2.1Hz,1H),7.17(d,J＝8.3Hz,1H),7.09(dd,J＝8.2,2.2Hz,1H),6.81(t,J＝6.3Hz,1H),6.03-5.98(m,1H),4.84(d,J＝6.1Hz,2H),3.04-2.93(m,1H),2.79-2.65(m,2H),2.34-2.25(m,1H),2.22(s,3H)。

[实施例20]

1-(3-氯苯基)-3-((3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2, 3]三嗪-7-基)甲基)脲(化学式40)的合成

根据实施例18的制备方法制备化学式40的化合物。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.17(s,1H),9.01(s,1H),8.26(d,J＝8.2Hz,1H),8.11(s,1H),7.91(dd,J＝8.2,1.6Hz,1H),7.68(s,1H),7.25-7.23(m,2H),7.02(t,J＝6.1Hz,1H),6.98-6.93(m,1H),6.01-5.95(m,1H),4.57(d,J＝6.0Hz,2H),3.03-2.92(m,1H),2.77-2.64(m,2H),2.31-2.24(m,1H)。

[实施例21]

1-(4-氯苯基)-3-((3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2, 3]三嗪-7-基)甲基)脲(化学式41)的合成

根据实施例18的制备方法制备化学式41的化合物。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.18(s,1H),8.93(s,1H),8.25(d,J＝8.2Hz,1H),8.11(s,1H),7.90(dd,J＝8.2,1.6Hz,1H),7.48-7.43(m,2H),7.29-7.24(m,2H),6.97(t,J＝6.0Hz,1H),6.01-5.95(m,1H),4.57(d,J＝5.9Hz,2H),3.03-2.92(m,1H),2.77-2.63(m,2H),2.31-2.24(m,1H)。

[实施例22]

1-(3,4-二氯苯基)-3-((3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d] [1,2,3]三嗪-7-基)甲基)脲(化学式42)的合成

根据实施例18的制备方法制备化学式42的化合物。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.18(s,1H),9.13(s,1H),8.26(d,J＝8.2Hz,1H),8.11(s,1H),7.90(dd,J＝8.2,1.6Hz,1H),7.85(d,J＝2.5Hz,1H),7.46(d,J＝8.8Hz,1H),7.30(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),7.09(t,J＝6.1Hz,1H),6.01-5.95(m,1H),4.57(d,J＝6.0Hz,2H),3.03-2.91(m,1H),2.77-2.64(m,2H),2.31-2.23(m,1H)。

[实施例23]

1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-3-((3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-7-基)甲基)脲(化学式43)的合成

根据实施例18的制备方法制备化学式43的化合物。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.17(s,1H),9.34(s,1H),8.26(d,J＝8.2Hz,1H),8.12(s,1H),8.07(d,J＝2.5Hz,1H),7.91(dd,J＝8.2,1.6Hz,1H),7.63(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),7.55(d,J＝8.7Hz,1H),7.17(t,J＝6.2Hz,1H),6.01-5.95(m,1H),4.58(d,J＝5.9Hz,2H),3.03-2.90(m,1H),2.76-2.63(m,2H),2.31-2.23(m,1H)。

[实施例24]

1-(3-氯-4-甲氧基苯基)-3-((3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并 [d][1,2,3]三嗪-7-基)甲基)脲(化学式44)的合成

根据实施例18的制备方法制备化学式44的化合物。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.17(s,1H),8.78(s,1H),8.25(d,J＝8.2Hz,1H),8.11(s,1H),7.90(dd,J＝8.1,1.6Hz,1H),7.63(d,J＝2.6Hz,1H),7.23(dd,J＝8.9,2.6Hz,1H),7.03(d,J＝9.0Hz,1H),6.95(t,J＝6.0Hz,1H),6.01-5.95(m,1H),4.56(d,J＝6.0Hz,2H),3.03-2.91(m,1H),2.77-2.63(m,2H),2.32-2.24(m,1H)。

[实施例25]

其他化合物的合成

[25-1]3-氯-N-((3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3] 三嗪-6-基)甲基)-4-甲基苯甲酰胺(化学式46)的合成

根据实施例18的制备方法制备化学式46的化合物。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.20(s,1H),9.35(t,J＝5.9Hz,1H),8.26(d,J＝8.1Hz,1H),8.14(s,1H),7.98(d,J＝1.7Hz,1H),7.93(d,J＝8.2Hz,1H),7.81(dd,J＝8.0,1.8Hz,1H),7.50(d,J＝7.9Hz,1H),5.99(dd,J＝12.3,5.4Hz,1H),4.74(d,J＝5.5Hz,2H),3.07-2.88(m,1H),2.75-2.63(m,2H),2.40(s,3H),2.35-2.22(m,1H)。

[25-2]3-(6-(氨甲基)-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮 (化学式33)的合成

根据实施例14的制备方法制备化学式33的化合物。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ11.22(s,1H),8.57(s,3H),8.44(d,J＝1.9Hz,1H),8.33(d,J＝8.4Hz,1H),8.22(dd,J＝8.5,1.9Hz,1H),6.05-6.00(m,1H),4.32(q,J＝5.9Hz,2H),3.02-2.94(m,1H),2.76-2.67(m,2H),2.32-2.28(m,1H)。

[25-3]3-(5-(氨甲基)-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮 (化学式34)的合成

根据实施例14的制备方法制备化学式34的化合物。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ11.24(s,1H),8.36(s,3H),8.32(d,J＝8.1Hz,1H),8.19(t,J＝7.8Hz,1H),7.99(d,J＝7.5Hz,1H),6.04-6.01(m,1H),4.66-4.55(m,2H),3.01-2.93(m,1H),2.73-2.63(m,2H),2.29-2.23(m,1H)。

[25-4]1-(3-氯苯基)-3-((3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d] [1,2,3]三嗪-7-基)甲基)硫脲(化学式52)的合成

根据实施例18的制备方法制备化学式52的化合物。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ11.20(s,1H),10.00(s,1H),8.60(s,1H),8.26(d,J＝8.2Hz,1H),8.12(s,1H),7.92(dd,J＝8.2,1.6Hz,1H),7.68(s,1H),7.36(d,J＝5.1Hz,2H),7.19-7.17(m,1H),6.00-5.97(m,1H),5.01(d,J＝5.8Hz,2H),3.00-2.93(m,1H),2.74-2.63(m,2H),2.30-2.27(m,1H).

[25-5]2-(3-氯苯基)-N-((3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d] [1,2,3]三嗪-7-基)甲基)乙酰胺(化学式53)的合成

根据实施例18的制备方法制备化学式53的化合物。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ11.20(s,1H),8.85(t,J＝6.0Hz,1H),8.22(d,J＝8.1Hz,1H),8.04(s,1H),7.83(dd,J＝8.3,1.3Hz,1H),7.36-7.30(m,3H),7.26(d,J＝7.4Hz,1H),5.99-5.96(m,1H),4.55(d,J＝6.0Hz,2H),3.58(s,2H),3.00-2.92(m,1H),2.73-2.64(m,2H),2.29-2.25(m,1H).

[25-6]3-(4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(化学式25)的合成

根据实施例14的制备方法制备化学式25的化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ8.40(d,J＝7.1Hz,1H),8.23(d,J＝8.2Hz,1H),8.09(s,1H),8.03(t,J＝7.7Hz,1H),7.88(t,J＝7.6Hz,1H),5.89-5.83(m,1H),3.08-2.83(m,3H),2.52-2.31(m,1H).

[25-7]3-(7-硝基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(化学式26)的合成

根据实施例14的制备方法制备化学式26的化合物。

¹H NMR(300MHz,甲醇-d₄)δ9.03(s,1H),8.70(d,J＝8.7Hz,1H),8.58(d,J＝8.8Hz,1H),6.14-5.99(m,1H),3.12-2.85(m,3H),2.54-2.38(m,1H)。

[25-8]3-(6-硝基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(化学式27)的合成

根据实施例14的制备方法制备化学式27的化合物。

¹H NMR(300MHz,甲醇-d₄)δ9.11(d,J＝2.5Hz,1H),8.85(d,J＝11.5Hz,1H),8.46(d,J＝8.7Hz,1H),6.29-5.87(m,1H),3.33-2.71(m,3H),2.52-2.31(m,1H)。

[25-9]3-(7-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(化学式28)的合成

根据实施例14的制备方法制备化学式28的化合物。

¹H NMR(500MHz,甲醇-d₄)δ7.99(d,J＝8.3Hz,1H),7.20-7.10(m,2H),5.89(dd,J＝12.2,5.4Hz,1H),3.02-2.79(m,3H),2.39-2.32(m,1H).

[25-10]3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-5-羧酸(化学式29)的合成

根据实施例14的制备方法制备化学式29的化合物。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ13.50(s,1H),11.23(s,1H),8.33(dd,J＝8.2,1.1Hz,1H),8.17(t,J＝7.8Hz,1H),7.94(dd,J＝7.4,1.1Hz,1H),6.03-5.97(m,1H),3.03-2.90(m,1H),2.75-2.60(m,2H),2.34-2.25(m,1H)。

[25-11]3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)-3-甲基哌啶-2,6-二酮(化学式30)的合成

根据实施例14的制备方法制备化学式30的化合物。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ11.03(s,1H),7.68(t,J＝8.0Hz,1H),7.18-7.17(m,3H),6.97(d,J＝7.9Hz,1H),2.96-2.88(m,1H),2.73-2.67(m,1H),2.63-2.58(m,1H),2.01-1.97(m,1H),1.95(s,3H)。

[25-12]1-(3-氯-4-甲基苯基)-3-((3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-6-基)甲基)脲(化学式38)的合成

根据实施例18的制备方法制备化学式38的化合物。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.19(s,1H),8.90(s,1H),8.23(d,J＝8.3Hz,1H),8.17(s,1H),8.05(d,J＝8.5Hz,1H),7.65(s,1H),7.207.13(m,2H),6.98(t,J＝6.1Hz,1H),6.01-5.95(m,1H),4.52(s,2H),3.03-2.90(m,1H),2.76-2.63(m,2H),2.32-2.23(m,1H),2.23(s,3H)。

[25-13]3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-5-甲酰胺(化学式54)的合成

根据实施例14的制备方法制备化学式54的化合物。

¹H NMR(500MHz,氯仿-d)δ8.29(d,J＝8.1Hz,1H),8.16(s,1H),8.04(t,J＝7.8Hz,1H),7.95(d,J＝7.4Hz,1H),6.24(s,1H),5.96(s,1H),5.82-5.79(m,1H),3.02-2.93(m,2H),2.87-2.79(m,1H),2.42-2.37(m,1H)。

[25-14]3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-N-甲基-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-5-甲酰胺(化学式55)的合成

根据实施例14的制备方法制备化学式55的化合物。

¹H NMR(500MHz,氯仿-d)δ8.26(d,J＝8.0Hz,1H),8.13(s,1H),8.01(t,J＝7.8Hz,1H),7.86(d,J＝7.3Hz,1H),6.11(d,J＝5.2Hz,1H),5.84-5.81(m,1H),3.07(d,J＝4.9Hz,3H),3.00-2.91(m,2H),2.84-2.77(m,1H),2.39-2.34(m,1H)。

[25-15]N-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪- 5-基)苯甲酰胺(化学式56)的合成

根据实施例14的制备方法制备化学式56的化合物。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ12.49(s,1H),11.26(s,1H),9.12(d,J＝8.0Hz,1H),8.20(t,J＝8.2Hz,1H),8.02-7.99(m,3H),7.73-7.61(m,3H),6.17-6.11(m,1H),3.02-2.94(m,1H),2.77-2.67(m,2H),2.37-2.30(m,1H)。

[实施例26]

3-氯-N-((3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-6- 基)甲基)-4-甲基苯甲酰胺(化学式45)的合成

向3-氯-4-甲基苯甲酸(16mg，0.093mmol)添加EDCI-HCl(20mg，0.102mmol)和HOBt(16mg，0.102mmol)，并将其在室温搅拌30分钟。向反应混合物加入3-(6-(氨甲基)-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(30mg，0.093mmol)和DIPEA(0.03ml，0.186mmol)，并将其在室温搅拌16小时。反应完成后，将混合物用EA萃取。将有机层用Na₂SO₄干燥，并通过柱色谱法纯化，获得24mg(60％)纯化合物，为白色固体。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.19(s,1H),9.34(t,J＝5.9Hz,1H),8.24(d,J＝8.3Hz,1H),8.18(s,1H),8.08(d,J＝8.2Hz,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝8.0Hz,1H),7.49(d,J＝8.0Hz,1H),6.00-5.95(m,1H),4.70(d,J＝5.9Hz,2H),3.01-2.86(m,1H),2.76-2.63(m,2H),2.39(s,3H),2.30-2.23(m,1H)。

[实施例27]

1-(3-氯-4-甲基苯基)-3-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)甲基)脲(化学式47)的合成

[27-1]合成5-溴-2-甲基苯甲酸甲酯(化合物<27-2>)

在室温向化合物<27-1>(5g，23.3mmol)溶解在DMF(60ml)中的溶液中添加碘甲烷(7.24ml，116.3mmol)和碳酸钾(16.1g，116.3mmol)，并将反应混合物在室温搅拌4小时。将反应混合物冷却至室温并过滤。浓缩滤液。将残余物用水稀释，并将其用EtOAc(250ml×2次)萃取。将合并的有机层用MgSO₄干燥，真空除去溶剂，得到化合物<27-2>(5-溴-2-甲基苯甲酸甲酯)(5.34g，23.3mmol，99％)，为黄色油状物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.78(d,J＝8.3Hz,1H),7.49-7.31(m,2H),3.88(s,3H),2.58(s,3H)。

[27-2]合成5-溴-2-(溴甲基)苯甲酸甲酯(化合物<27-3>)

在室温向化合物<27-2>(2g，8.74mmol)溶解在二氯甲烷(45ml)中的溶液中添加N-溴代琥珀酰亚胺(1.81g，13.12mmol)和过氧化苯甲酰(22mg，0.087mmol)，并将其回流7小时。将反应混合物冷却至室温。将残余物通过硅胶柱色谱法使用EA/Hx(8％)作为洗脱剂进行纯化，得到化合物<27-3>(5-溴-2-(溴甲基)苯甲酸甲酯)(2.06g，6.69mmol，77％)，为白色固体。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.84(d,J＝8.4Hz,1H),7.63(d,J＝1.9Hz,1H),7.51(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),4.90(s,2H),3.94(s,3H)。

[27-3]5-溴-2-甲酰基苯甲酸甲酯(化合物<27-4>)

向烘干的分子筛乙腈(30ml)中的经搅拌的悬液中添加NMO(1.80g，15.4mmol)。在5分钟内，添加溶解在乙腈(10ml)中的化合物3(2.06g，6.69mmol)。将反应混合物在室温搅拌1.5小时，并将其通过硅胶过滤、用EtOAc洗脱和真空浓缩，获得红棕色油状物。将残余物通过硅胶柱色谱法使用EA/Hx(10％)作为洗脱剂进行纯化，得到化合物<27-4>(5-溴-2-甲酰基苯甲酸甲酯)(977mg，4.02mmol，60％)，为白色固体。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ10.61(s,1H),8.06(d,J＝2.1Hz,1H),7.88(d,J＝8.3Hz,1H),7.77(dd,J＝8.3,2.1Hz,1H),3.98(s,3H).

[27-4]合成(E)-5-溴-2-(2-甲氧基乙烯基)苯甲酸甲酯(化合物<27-5>)

在冰容器中在N₂下向(甲氧基甲基)三苯基氯化鏻(1.06g，3.09mmol)溶解在THF(24ml)中的经搅拌的悬液中，分小份添加氢化钠(165mg，4.12mmol)。将红色溶液在室温搅拌30分钟，然后滴加溶解在THF(6ml)中的化合物<27-4>(500mg，2.06mmol)。将反应物在室温搅拌2小时。将混合物用水稀释，并用EtOAc(50ml)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO₄干燥，并真空除去溶剂，得到深色油状物。将粗品化合物通过硅胶柱色谱法使用EtOAc/Hex(30％)作为洗脱剂进行纯化，得到化合物<27-5>((E)-5-溴-2-(2-甲氧基乙烯基)苯甲酸甲酯)(348mg，1.28mmol，61％)，为黄色油状物(约5:1E/Z异构体的混合物)。

化合物<27-5-1>：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.76(d,J＝8.5Hz,1H),7.56(d,J＝2.0Hz,1H),7.32(dd,J＝8.5,2.0Hz,1H),7.00(d,J＝12.9Hz,1H),6.72(d,J＝12.9Hz,1H),3.88(s,3H),3.73(s,3H)。

化合物<27-5-2>：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ8.25(d,J＝2.0Hz,1H),7.69(d,J＝8.4Hz,1H),7.30(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),6.26(d,J＝7.3Hz,1H),6.07(d,J＝7.3Hz,1H),3.87(s,3H),3.80(s,3H)。

[27-5]合成(E)-5-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-2-(2-甲氧基乙烯基)苯甲酸甲酯(化合物<27-6>)

将(叔丁氧羰基)氨基)甲基)三氟硼酸盐(105mg，0.443mmol)、化合物<27-5>(300mg，1.11mmol)、Pd(OAc)₂(12mg，0.055mmol)、SPhos(45mg，0.111mmol)和碳酸钾(459mg，3.32mmol)装入密封管中。然后，向反应管添加甲苯/H₂O，并用N₂脱气30分钟。将反应混合物在85℃搅拌过夜，然后冷却至室温。将产生的混合物用EtOAc萃取，合并有机层，将其用MgSO₄干燥，并过滤。真空除去溶剂，并将混合物通过硅胶柱色谱法(MPLC)使用EA/Hx(10％)作为洗脱剂进行纯化，得到化合物<27-6>((E)-5-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-2-(2-甲氧基乙烯基)苯甲酸甲酯)(233mg，0.725mmol，65％)，为无色油状物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.86(d,J＝8.1Hz,1H),7.29(d,J＝1.7Hz,1H),7.10(dd,J＝8.1,1.7Hz,1H),6.98(d,J＝12.9Hz,1H),6.75(d,J＝12.9Hz,1H),4.93(s,1H),4.31(d,J＝6.1Hz,2H),3.88(s,3H),3.72(s,3H),1.46(s,9H)；

LC/MS(ESI)m/z[M+H]+：322.0。

[27-6]合成(E)-5-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-2-(2-甲氧基乙烯基)苯甲酸(化合物<27-7>)

在室温向化合物<27-6>(233mg，0.725mmol)溶解在MeOH(1.5ml)、H₂O(1.5ml)和THF(4.5ml)中的溶液中添加一水氢氧化锂(152mg，3.63mmol)，并将其在50℃搅拌过夜。浓缩反应混合物以除去THF和甲醇。随后，添加水(50mL)，并用1N HCl(水溶液)将pH调节至3，并将其用EtOAc(50ml×2次)萃取。将合并的有机层减压浓缩，得到<27-7>((E)-5-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)-2-(2-甲氧基乙烯基)苯甲酸)(232mg，0.725mmol，定量)，为黄色凝胶。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.99(d,J＝8.3Hz,1H),7.31(s,1H),7.14(d,J＝8.0Hz,1H),6.99(d,J＝12.8Hz,1H),6.81(d,J＝12.9Hz,1H),5.00 4.83(m,1H),4.33(s,2H),3.73(s,3H),1.47(s,9H)；

LC/MS(ESI)m/z[M-H]^-：306.0。

[27-7]合成(E)-(3-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基甲酰基)-4-(2-甲氧基乙烯基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(化合物<27-8>)

在室温向化合物<27-7>(223mg，0.798mmol)、3-氨基哌啶-2,6-二酮盐酸盐(239mg，1.45mmol)、EDCI HCl(153mg，0.798mmol)和HOBt H₂O(108mg，0.798mmol)溶解在DMF(10ml)中的溶液中，添加DIPEA(0.505ml，2.90mmol)，并将反应混合物在室温搅拌3小时。将反应混合物用水稀释，并用EtOAc(50ml×2次)萃取。将合并的有机层用MgSO₄干燥，真空除去溶剂，得到黄色油状物。将粗品化合物通过硅胶柱色谱法使用MeOH/DCM(5％)作为洗脱剂进行纯化，得到化合物<27-8>((E)-(3-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基甲酰基)-4-(2-甲氧基乙烯基)苄基)氨基甲酸叔丁酯)(124mg，0.297mmol，41％)，为天蓝色固体。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ10.85(s,1H),8.51(d,J＝8.4Hz,1H),7.47-7.36(m,2H),7.28(d,J＝7.7Hz,1H),7.17(d,J＝12.9Hz,1H),7.05(d,J＝7.9Hz,1H),6.28(d,J＝12.8Hz,1H),4.78-4.68(m,1H),4.11(d,J＝6.3Hz,2H),3.65(s,3H),2.81-2.72(m,1H),2.14-1.92(m,3H),1.40(s,9H)；

LC/MS(ESI)m/z[M+H]+：417.9，[M-H]-：416.0。

[27-8]合成3-(7-(氨甲基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(化合物<27-9>)

向化合物<27-8>(30mg，0.072mmol)溶解在1,4-二恶烷(1ml)中的溶液中，添加与1,4-二恶烷(0.180ml，0.720mmol)混合的4N HCl，并将其在室温搅拌2小时。然后，在单波辅助条件下将反应混合物在150℃搅拌1小时。将反应物蒸发。将残余物通过硅胶柱色谱法使用MeOH/DCM(5％)作为洗脱剂进行纯化，得到化合物<27-9>(3-(7-(氨甲基)-1-氧代异喹啉-2(1H)-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐)(26mg，0.072mmol，定量)，为乳白色固体。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.06(s,1H),8.40(s,3H),8.24(d,J＝8.2Hz,1H),7.74(s,1H),7.61(d,J＝8.3Hz,1H),7.48(d,J＝7.3Hz,1H),6.67(d,J＝7.4Hz,1H),5.62-5.43(m,1H),4.20(s,2H),2.95-2.79(m,1H),2.77-2.58(m,2H),2.13-1.98(m,1H)；

LC/MS(ESI)m/z[M+H]+：286.9，[M-H]-：284.9.

[27-9]合成1-(3-氯-4-甲基苯基)-3-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)甲基)脲(化合物<27-10>)

在室温向化合物<27-9>(23mg，0.071mmol)溶解在THF(0.5ml)中的溶液中添加3-氯-4-甲基苯基异氰酸酯(12mg，0.071mmol)和TEA(0.020ml，0.142mmol)，并将其在40℃搅拌过夜。真空除去溶剂，并将混合物通过硅胶柱色谱法(MPLC)使用MeOH/DCM(6％)作为洗脱剂进行纯化，得到<化学式47>(1-(3-氯-4-甲基苯基)-3-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)甲基)脲)(18mg，0.040mmol，56％)，为白色固体。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.06(s,1H),8.81(s,1H),8.17(d,J＝8.3Hz,1H),7.68(s,1H),7.55(s,1H),7.49-7.38(m,2H),7.22-7.12(m,2H),6.84(t,J＝5.8Hz,1H),6.67(d,J＝7.4Hz,1H),5.62-5.39(m,1H),4.44(d,J＝5.8Hz,2H),2.90-2.78(m,1H),2.67-2.57(m,2H),2.24(s,3H),2.10-1.98(m,1H)；

LC/MS(ESI)m/z[M+H]+：454.9，[M-H]-：452.8。

[实施例28]

1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-3-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)甲基)脲(化学式48)的合成

根据实施例27的制备方法制备化学式48的化合物。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.05(s,1H),9.26(s,1H),8.17(d,J＝8.3Hz,1H),8.10(s,1H),7.63(d,J＝9.1Hz,1H),7.56(d,J＝6.4Hz,2H),7.44(dd,J＝15.5,7.9Hz,2H),7.04(s,1H),6.67(d,J＝7.4Hz,1H),5.60-5.42(m,1H),4.46(d,J＝5.9Hz,2H),2.88-2.78(m,1H),2.74-2.59(m,2H),2.12-1.94(m,1H)。

[实施例29]

1-(3-氯-4-甲氧基苯基)-3-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-7-基)甲基)脲(化学式49)的合成

根据实施例27的制备方法制备化学式49的化合物。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ11.05(s,1H),8.70(s,1H),8.17(d,J＝8.6Hz,1H),7.65(s,1H),7.55(s,1H),7.49-7.37(m,2H),7.26-7.18(m,1H),7.04(d,J＝8.7Hz,1H),6.81(s,1H),6.67(d,J＝7.0Hz,1H),5.61-5.40(m,1H),4.44(s,2H),3.79(s,3H),2.93-2.78(m,1H),2.76-2.63(m,2H),2.10-1.93(m,1H)。

[实施例30]

3-(5-羟基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(化学式57)的合成

[30-1]步骤1反应

将2-羟基-6-硝基苯甲酸(100mg，0.55mmol)、2-氨基谷氨酰胺盐酸盐(180mg，1.1mmol)、EDCI-HCl(116mg，0.605mmol)、HOBt(93mg，0.605mmol)和DIEA(0.4ml，2.2mmol)的混合溶液在室温搅拌30分钟。将反应物通过水和乙酸乙酯分离，然后将有机层用盐水洗涤，将残留的水通过无水硫酸镁干燥，并减压浓缩，然后通过柱色谱法分离和纯化，得到化合物<30-1>(41mg，25％)。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ10.85(s,1H),8.83(d,J＝7.3Hz,1H),7.50-7.41(m,2H),7.23(dd,J＝7.6,1.6Hz,1H),4.78-4.70(m,1H),2.79-2.68(m,1H),2.59-2.54(m,1H),2.14-2.09(m,1H),1.96-1.85(m,1H)。

[30-2]步骤2反应

将化合物<30-1>(34mg)溶解在甲醇/二甲基甲酰胺的混合溶液(5/1)(6ml)中后，使其在10％Pd/C(15mg)和氢气下于室温反应2小时。用硅藻土过滤反应物，然后浓缩滤液，得到目标JYR-17-187(22mg，70％，白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ10.88(s,1H),10.55(s,2H),8.98(s,1H),6.89(t,J＝8.0Hz,1H),6.62(s,2H),6.17(d,J＝8.1Hz,1H),6.04(d,J＝7.8Hz,1H),4.72-4.67(m,2H),2.79-2.72(m,1H),2.55-2.53(m,1H),2.20-2.15(m,1H),2.03-1.95(m,1H)。

[30-3]步骤3反应

将化合物<30-2>(20mg，0.076mmol)溶解在乙酸(2ml)中之后，添加亚硝酸钠(9mg，0.13mmol)，然后将其在室温搅拌1小时。将反应物通过水和乙酸乙酯分离，然后将有机层用盐水洗涤，将残留的水通过无水硫酸镁干燥，并减压浓缩，然后通过柱色谱法分离和纯化，得到化学式57的化合物(2.7mg，13％，乳白色固体)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ11.24(s,1H),10.85(s,1H),8.00(t,J＝8.2Hz,1H),7.72(d,J＝8.0Hz,1H),7.35(d,J＝8.3Hz,1H),5.99-5.95(m,1H),3.01-2.93(m,1H),2.74-2.65(m,2H),2.33-2.28(m,1H)。

[实施例31]

新戊酸(3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)-2,6-二氧代哌啶-1- 基)甲酯(化学式58)的合成

将3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(20mg，0.066mmol)和碳酸铯(30mg，0.099mmol)溶解在二甲基甲酰胺中之后，添加新戊酸氯甲酯(0.014ml，0.099mmol)，并将其在室温搅拌20分钟。通过加水完成反应物的反应，并用乙酸乙酯萃取。将有机层用盐水洗涤，将残留的水通过无水硫酸镁干燥，并减压浓缩，然后通过柱色谱法分离和纯化，得到化学式58的目标化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.65(t,J＝8.0Hz,1H),7.37(dd,J＝7.8,0.9Hz,1H),6.88(dd,J＝8.3,0.9Hz,1H),6.14(s,2H),5.88(s,2H),5.82-5.74(m,1H),3.17-2.87(m,3H),2.45-2.32(m,1H),1.21(s,9H)。

[实施例32]

苯甲酸(3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)-2,6-二氧代哌啶-1- 基)甲酯(化学式59)的合成

通过与实施例31的方法相同的方法，不同之处在于，使用苯甲酸氯甲酯代替新戊酸氯甲酯，合成化学式59的化合物(17mg，63％)。

¹H NMR(300MHz,氯仿-d)δ8.06-7.99(m,2H),7.62(t,J＝8.0Hz,1H),7.59-7.52(m,1H)7.46-7.39(m,2H),7.34(dd,J＝7.8,0.9Hz,1H),6.85(dd,J＝8.3,0.9Hz,1H),6.19-6.03(m,4H),5.83-5.74(m,1H),3.19-2.85(m,3H),2.45-2.33(m,1H)。

[实施例33]

哌啶-4-羧酸(3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)-2,6-二氧代哌啶-1-基)甲酯盐酸盐(化学式60)的合成

[33-1]步骤1反应

除了使用1-(叔丁基)-4-(氯甲基)哌啶-1,4-二羧酸酯代替新戊酸氯甲酯以外，通过与实施例31的方法相同的方法，合成化合物(16mg，51％，黄色固体)。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.65(t,J＝8.0Hz,1H),7.36(dd,J＝7.8,0.9Hz,1H),6.88(dd,J＝8.3,0.9Hz,1H),6.17(s,2H),5.90(s,2H),5.79-5.70(m,1H),4.01(d,J＝13.4Hz,2H),3.17-3.06(m,1H),2.93(d,J＝3.6Hz,1H),2.85(t,J＝13.0Hz,2H),2.54-2.35(m,2H),1.88(d,J＝13.0Hz,2H),1.74-1.64(m,2H),1.47(s,9H)。

[33-2]步骤2反应

将步骤1中获得的化合物溶解在二氯甲烷中之后，添加4N HCl 1,4-二恶烯溶液，并将其在室温搅拌1小时。将反应物浓缩，得到化学式60的目标化合物(80％)。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.63(t,J＝8.0Hz,1H),7.37-7.33(m,1H),6.89-6.81(m,1H),6.14(s,2H),5.87(s,2H),5.78-5.72(m,1H),3.82-3.58(m,1H),3.19-3.01(m,3H),2.99-2.82(m,2H),2.70-2.57(m,2H),2.55-2.29(m,2H),1.89(d,J＝13.3Hz,2H),1.75-1.55(m,2H)。

[实施例34]

D-脯氨酸(3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)-2,6-二氧代哌啶- 1-基)甲酯盐酸盐(化学式61)和2-((3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)- 2,6-二氧代哌啶-1-基)甲基)1-(叔丁基)(2R)-吡咯烷-1,2-二羧酸酯(化学式64)的合成

[34-1]步骤1反应

除了使用1-(叔丁基)2-(氯甲基)(R)-哌啶-1,2-二羧酸酯代替新戊酸氯甲酯以外，通过与实施例31的方法相同的方法，合成化学式64的化合物。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.66(t,J＝8.0Hz,1H),7.37(d,J＝7.8Hz,1H),6.89(d,J＝8.2Hz,1H),6.15(s,2H),5.93(s,1H),5.80-5.69(m,1H),3.15-2.85(m,4H),2.38(d,J＝6.6Hz,1H),2.23-1.99(m,1H),1.91(dd,J＝13.5,7.1Hz,1H),1.84-1.78(m,3H)。

[34-2]步骤2反应

将步骤1中获得的化合物溶解在二氯甲烷中之后，添加4N HCl 1,4-二恶烯溶液，并将其在室温搅拌1小时。将反应物浓缩，得到化学式61的目标化合物。

[实施例35]

L-异亮氨酸(3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)-2,6-二氧代哌啶-1-基)甲酯盐酸盐(化学式62)的合成

[35-1]步骤1反应

除了使用(叔丁氧羰基)-D-异亮氨酸酯代替新戊酸氯甲酯以外，通过与实施例31的方法相同的方法，合成化合物。

[35-2]步骤2反应

将步骤1中获得的化合物溶解在二氯甲烷中之后，添加4N HCl 1,4-二恶烯溶液，并将其在室温搅拌1小时。将反应物浓缩，得到化学式62的目标化合物。

¹H NMR(300MHz,氯仿-d)δ7.69-7.61(m,1H),7.36(d,J＝7.8Hz,1H),6.88(d,J＝8.3Hz,1H),6.16(s,2H),5.92(s,2H),5.83-5.71(m,1H),3.37(d,J＝5.0Hz,1H),3.18-2.82(m,3H),2.48-2.30(m,1H),1.54-1.38(m,1H),1.27-1.08(m,2H),0.95(d,J＝6.8Hz,2H),0.94-0.85(m,4H)。

[实施例36]

丁酸(3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)-2,6-二氧代哌啶-1-基)甲酯(化学式63)的合成

除了使用丁酸氯甲酯代替新戊酸氯甲酯以外，通过与实施例31的方法相同的方法，合成化学式63的化合物(44％，黄色固体)。

¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.62(t,J＝8.1Hz,1H),7.37-7.31(m,1H),6.89-6.82(m,1H),6.14(s,2H),5.86(d,J＝2.2Hz,2H),5.81-5.71(m,1H),3.16-3.03(m,1H),2.98-2.86(m,2H),2.44-2.33(m,1H),2.29(t,J＝7.4Hz,2H),1.71-1.63(m,2H),0.93(t,J＝7.4Hz,3H)。

[实施例37]

3-(6-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮(化学式65)的合成

根据实施例7的制备方法制备化学式65的化合物。

¹H NMR(500MHz,甲醇-d₄)δ7.88(d,J＝10.0Hz,1H),7.30-7.28(m,2H),5.87(m,1H),3.02-2.79(m,3H),2.39-2.32(m,1H)。

[试验例1]

评价对CRBN的底物蛋白水解活性

为了证实本公开的化合物是否能通过特异性结合CRBN(celebron)来抑制CRBN的功能，研究了本化合物对Ikaros/Aiolos蛋白(Nat Struct Mol Biol.2014年9月；21(9):803-9)或GSPT1蛋白(Nature 535，252257(2016年7月14日))(被当与沙利度胺及其衍生物结合时的CRBN蛋白降解)的蛋白水解活性的效应。

通过与CRBN结合而抑制该功能的泊马度胺或CC-885化合物用作阳性对照组。

为了评价根据本发明的化合物对Ikaros/Aiolos蛋白或GSPT1蛋白的降解活性，进行了如下实验。

将5×10⁵OCI-LY3细胞接种在12孔板上，然后将各化合物以规定的浓度处理到每个孔中。在6小时或24小时内，使用TBSN缓冲液收集细胞裂解物。使用抗Aiolos蛋白的抗体评价Ikaros/Aiolos蛋白的蛋白水解活性，使用抗GSPT1蛋白的抗体通过Western印迹评价GSPT1的蛋白水解活性，为此，将相同量的蛋白加载至4-15％梯度凝胶的每个孔中，然后在电泳后将蛋白转移到PVDF膜上，并结合抗每种蛋白的一抗。之后，结合附有HRP的二抗，并使用HRP底物进行显影。

结果，如图1所示，可以看出，与用阴性对照组DMSO处理的组相比，当用本公开的化合物处理时，Ikaros/Aiolos蛋白以浓度依赖性方式降解，并且它倾向于与阳性对照组泊马度胺相似。

另外，如图2所示，作为在OCI-LY3细胞系中分别处理6小时或24小时的结果，可以证实本公开的化合物促进了GSPT1蛋白和Aiolos蛋白的降解。

[试验例2]

细胞毒性实验

为了证实本公开的化合物对癌细胞和正常细胞的效应，如下进行细胞毒性实验。

将NCI-H929细胞接种到96孔板上使成为10,000个细胞/孔后，将各化合物以预定浓度处理。在72小时内添加WST-1试剂，并在1小时内用spectramax分光光度计在450nm处测量吸光度，以测量细胞死亡程度。使用测量值，用graphpad prism程序计算IC₅₀，结果如表1所示。

【表1】

结果，如表1所示，可以看出本公开的化合物在肿瘤细胞NCI-H929中具有足够的细胞毒性。

特别地，可以证实在本公开的化学式1中其中X为N的作为三嗪衍生物的化合物7～9、11、12、19～21、23、25～27、29～31、37、38、56～63和65，与其中X为C的作为吡啶衍生物的化合物24和31相比，对癌细胞具有优异的细胞毒活性。

Claims

1.一种由以下化学式1表示的化合物：

[化学式1]

或其药学上可接受的盐，

在所述化学式1中，

X是氮N；并且

R₁或R₂各自独立地为一种或多种选自由下列所组成的组中的取代基：氢，羟基，卤素，氰基，氨基，硝基，-OR₅，-CF₃，-CO₂R₅，-OCF₃，-NHCOR₅，未取代的C₁-C₁₀直链或支链烷基，未取代的C₂-C₁₀直链或支链烯基，未取代的C₂-C₁₀直链或支链炔基；以及

R₃为一种或多种选自由氢、氘、或者未取代的C₁-C₁₀直链或支链烷基组成的组中的取代基；并且

R₄为一种或多种选自由氢、-(CH₂)_nOCOR₈、或者未取代的C₁-C₁₀直链或支链烷基组成的组中的取代基；以及

R₅至R₈各自独立地为一种或多种选自由下列所组成的组中的取代基：氢，未取代的氨基，未取代的C₁-C₁₀直链或支链烷基，未取代的C₂-C₁₀直链或支链烯基，未取代的C₂-C₁₀直链或支链炔基，或者未取代的C₆-C₁₄芳基；并且

n是1至5的整数。

2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，

其中在所述化学式1中，

R₁或R₂各自独立地为一种或多种选自由下列所组成的组中的取代基：氢，羟基，卤素，氰基，氨基，硝基，-CH₃，-OCF₃，-OCH₃，-NHCOCH₃，-COOH，-CONH₂，-CONHCH₃或-NHCOC₆H₅；并且

R₄为一种或多种选自由下列所组成的组中的取代基：-CH₂OCOC(CH₃)₃，-CH₂OCOC₆H₅，-CH₂OCOC₅H₁₀N，-CH₂OCOC₄H₈N，-CH₂OCOCH(NH₂)CH(CH₃)CH₂CH₃或-CH₂OCOCH₂CH₂CH₃。

3.根据权利要求1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐，

其中所述化学式1的化合物选自由下列所组成的组：

3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮，

3-(5-氟-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮，

3-(5-硝基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮，

3-(5-氯-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮，

3-(5-甲基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮，

3-(6-氯-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮，

3-(6-溴-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮，

3-(6-碘-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮，

3-(8-溴-6-甲基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮，

3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-6-甲腈，

3-(5-碘-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮，

3-(4-氧代-6-(三氟甲氧基)苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮，

3-(6-甲氧基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮，

N-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-5-基)乙酰胺3-(8-硝基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮，

3-(8-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮，

N-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-6-基)乙酰胺3-(4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮，

3-(7-硝基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮，

3-(6-硝基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮，

3-(7-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮，

3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-5-羧酸，

3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)-3-甲基哌啶-2,6-二酮，

3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-5-甲酰胺，

3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-N-甲基-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-5-甲酰胺，

N-(3-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢苯并[d][1,2,3]三嗪-5-基)苯甲酰胺，

3-(5-羟基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮，

新戊酸(3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)-2,6-二氧代哌啶-1-基)甲酯，

苯甲酸(3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)-2,6-二氧代哌啶-1-基)甲酯，

哌啶-4-羧酸(3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)-2,6-二氧代哌啶-1-基)甲酯盐酸盐，

D-脯氨酸(3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)-2,6-二氧代哌啶-1-基)甲酯盐酸盐，

L-异亮氨酸(3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)-2,6-二氧代哌啶-1-基)甲酯盐酸盐，

丁酸(3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)-2,6-二氧代哌啶-1-基)甲酯，

2-((3-(5-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)-2,6-二氧代哌啶-1-基)甲基)1-(叔丁基)(2R)-吡咯烷-1,2-二羧酸酯，和

3-(6-氨基-4-氧代苯并[d][1,2,3]三嗪-3(4H)-基)哌啶-2,6-二酮。

4.一种用于制备以下化学式5表示的化合物的方法，包括：

(b)使以下化学式4表示的化合物与NaNO₂反应，以制备以下化学式5表示的化合物，

[化学式2]

[化学式3]

[化学式4]

[化学式5]

在所述化学式2中，

R₁或R₂各自独立地为一种或多种选自由下列所组成的组中的取代基：氢，羟基，卤素，氰基，氨基，硝基，-CH₃，-OCF₃，-OCH₃，-NHCOCH₃，-COOH，-CONH₂，-CONHCH₃或-NHCOC₆H₅。

5.包含根据权利要求1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分的药物组合物在制备用于预防或治疗麻风病、慢性移植物抗宿主病、炎性疾病或癌症的药物中的用途。

6.根据权利要求5所述的用途，

其中所述癌症选自由下列所组成的组：乳腺癌，肺癌，胃癌，肝癌，血癌，骨癌，胰腺癌，皮肤癌，头颈癌，眼内黑色素瘤，子宫癌，卵巢癌，直肠癌，肛区癌，结肠癌，输卵管癌，子宫内膜癌，宫颈癌，阴道癌，外阴癌，霍奇金病，食道癌，小肠癌，内分泌腺癌，甲状腺癌，甲状旁腺癌，肾上腺癌，软组织肉瘤，尿道癌，阴茎癌，前列腺癌，膀胱癌，肾或输尿管癌，CNS肿瘤，脊髓肿瘤，脑干胶质瘤和垂体腺瘤。