CN110592070A - 一种利用超声波破碎微藻的处理方法 - Google Patents
一种利用超声波破碎微藻的处理方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110592070A CN110592070A CN201910905361.3A CN201910905361A CN110592070A CN 110592070 A CN110592070 A CN 110592070A CN 201910905361 A CN201910905361 A CN 201910905361A CN 110592070 A CN110592070 A CN 110592070A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- microalgae
- cell
- crushing
- solution
- ultrasonic
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 22
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 31
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 12
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims abstract description 11
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 abstract description 39
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 abstract description 25
- 238000012545 processing Methods 0.000 abstract description 7
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 abstract description 5
- 238000003672 processing method Methods 0.000 abstract description 4
- 230000007547 defect Effects 0.000 abstract description 3
- 210000005056 cell body Anatomy 0.000 abstract description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 abstract description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 abstract 1
- 238000010008 shearing Methods 0.000 abstract 1
- 235000016425 Arthrospira platensis Nutrition 0.000 description 20
- 240000002900 Arthrospira platensis Species 0.000 description 20
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 18
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 11
- 241000238557 Decapoda Species 0.000 description 10
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 description 6
- 241000206732 Skeletonema costatum Species 0.000 description 5
- 229940082787 spirulina Drugs 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 241000091751 Chaetoceros muellerii Species 0.000 description 3
- 241001501885 Isochrysis Species 0.000 description 3
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 3
- 238000004506 ultrasonic cleaning Methods 0.000 description 3
- 240000009108 Chlorella vulgaris Species 0.000 description 2
- 235000007089 Chlorella vulgaris Nutrition 0.000 description 2
- 241000206751 Chrysophyceae Species 0.000 description 2
- 241000237891 Haliotidae Species 0.000 description 2
- 241000192710 Microcystis aeruginosa Species 0.000 description 2
- 241000159660 Nannochloropsis oculata Species 0.000 description 2
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000206733 Skeletonema Species 0.000 description 2
- 241000196316 Tetraselmis subcordiformis Species 0.000 description 2
- XKMRRTOUMJRJIA-UHFFFAOYSA-N ammonia nh3 Chemical compound N.N XKMRRTOUMJRJIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 2
- 230000029052 metamorphosis Effects 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000029553 photosynthesis Effects 0.000 description 2
- 238000010672 photosynthesis Methods 0.000 description 2
- 235000015170 shellfish Nutrition 0.000 description 2
- 241001443610 Aschersonia Species 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241001086210 Chaetoceros gracilis Species 0.000 description 1
- 241000195649 Chlorella <Chlorellales> Species 0.000 description 1
- 241000195628 Chlorophyta Species 0.000 description 1
- 208000035240 Disease Resistance Diseases 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 241001501873 Isochrysis galbana Species 0.000 description 1
- 241001078425 Isochrysis zhanjiangensis Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 241000224474 Nannochloropsis Species 0.000 description 1
- 241000502321 Navicula Species 0.000 description 1
- 241000565675 Oncomelania Species 0.000 description 1
- 241000514008 Oocystis Species 0.000 description 1
- 241000206744 Phaeodactylum tricornutum Species 0.000 description 1
- 241000196317 Platymonas Species 0.000 description 1
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 1
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 1
- 241001491691 Thalassiosira Species 0.000 description 1
- 241001491687 Thalassiosira pseudonana Species 0.000 description 1
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 description 1
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000009360 aquaculture Methods 0.000 description 1
- 244000144974 aquaculture Species 0.000 description 1
- 230000001651 autotrophic effect Effects 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000021466 carotenoid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001747 carotenoids Chemical class 0.000 description 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 229930002875 chlorophyll Natural products 0.000 description 1
- 235000019804 chlorophyll Nutrition 0.000 description 1
- ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M chlorophyll a Chemical compound C1([C@@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC(C(CC)=C3C)=[N+]4C3=CC3=C(C=C)C(C)=C5N3[Mg-2]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 1
- 239000013505 freshwater Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 238000010297 mechanical methods and process Methods 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 1
- 238000000053 physical method Methods 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 235000020777 polyunsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 239000013535 sea water Substances 0.000 description 1
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N13/00—Treatment of microorganisms or enzymes with electrical or wave energy, e.g. magnetism, sonic waves
Landscapes
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开一种利用超声波破碎微藻的处理方法，将富集有微藻的浓缩藻液与PBS缓冲液混合后，置于超声发生仪中处理20‑40min，得到长度为2‑30μm的微藻；所述微藻的形态为聚合群体、丝状体、长条带状中的任意一种。本发明克服了传统物理机械破碎方法因产生切力不匀和过大会导致微藻细胞体完整性受损的技术缺陷，本方法不破坏藻体的细胞壁，只是将形态为聚合群体、丝状体、长条带状的微藻联生体进行细胞之间的破碎分离，使成列、成群或成簇的细胞群破碎成长度更短的细胞列或细胞群，甚至是破碎成单个藻体细胞，而藻细胞内营养成分得以有效保留，本方法获得的微藻破碎液，满足水产动物育苗早期的摄食口径和育苗早期的营养需求。
Description
技术领域
本发明涉及一种利用超声波破碎微藻的处理方法。
背景技术
藻类是植物界最低等的一个门类，因为它们的细胞内含有叶绿素或其他色素，能进行光合作用，自我合成所需营养，营独立生活并主要以细胞分裂的方式进行繁殖生长，所以藻类属于自养型真核生物，其中微藻由于它们的个体微小，肉眼难以看到，一般需要借助显微镜观察。微藻有2万多种，且是水体生态系统中主要的初级生产者，占比达40％，为海洋生物提供了最初级的生产力。特殊的生长环境使其含有多种生物活性物质，如活性蛋白、维生素、矿物质、类胡萝卜素、微藻多糖和多不饱和脂肪酸等。
随着对淡海水环境中各类经济微藻生物学特性和规模化培育方面研究的突破，微藻在水产动物，包括海水鱼类、贝类、虾蟹类等水产养殖品种的规模化育苗和养殖中均获得广泛的应用，已经成为各类水产养殖动物育苗成败的关键性生物饵料。目前国际上在水产育苗中得到广泛使用的各类微藻有20多种。我国在水产育苗行业中常用的微藻主要包括：硅藻类的纤细角毛藻(Chaetoceros gracilis)，牟氏角毛藻(Chaetoceros muelleri)，威氏海链藻(Conticribra weissflogii)，假微型海链藻(Thalassiosira pseudonana)，三角褐指藻(Phaeodactylum trecornutum)、中肋骨条藻(Skeletonema costatum)、底栖舟形藻(Navicula sp.)、底栖卵形藻(Cocconeis sp.)；金藻类的湛江等鞭金藻(Isochrysiszhangjiangensis)，球等鞭金藻(Isochrysis galbana)；绿藻类的亚心形扁藻(Platymonassubcordiformis)，小球藻(Chlorella vulgaris)，波吉卵囊藻(Oocystis borgei)，微绿球藻(Nannochloris oculata)和蓝藻类的钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)等。
海洋微藻对海水鱼贝虾蟹幼体早期发育，特别是在对虾类育苗从无节幼体变态为蚤状幼体时具有重要作用。扁藻、金藻等可维持对虾、蟹类的发育和蜕皮变态；杂色蛤仔浮游幼虫阶段的面盘幼虫阶段优先摄食小球藻；鲍浮游幼体发育生长至稚鲍过程中，通过利用易消化的硅藻细胞内含物可进入快速生长阶段；中肋骨条藻在培育对虾幼体时广泛使用，效果显著。此外，微藻所含有或产生的生物活性物质如抗生素，可杀死水中的致病菌，提高养殖动物的抗病力；同时，微藻对养殖水体的水质改善、调控水体微生态环境平衡方面也具有重要作用，在育苗水体中投放饵料微藻，不但可以直接吸收利用氨氮、亚盐等物质，同时光合作用放出的氧气还可促进微生物对氨氮、亚盐的硝化作用。在对虾养殖水环境中，人工引入波吉卵囊藻和微绿球藻，能改善养殖水体的水质，使对虾的血细胞数目、血清蛋白含量以及酚氧化酶、超氧化物歧化酶、溶菌酶、抗菌酶的活性都较对照组显著提高。
但是，为了适应对虾幼体各变态期的最佳摄食口径，需要将长度较大的微藻破碎之后再进行投喂。如何破碎至合适长度，且破碎后保持微藻的细胞完整性，保留生物活性，是本领域技术人员亟需解决的一个技术问题。
目前有关微藻的破碎，均是利用物理机械的方法针对微藻的细胞进行破碎，将微藻的细胞壁破坏之后，使细胞内的生物活性物质释放出来加以利用。目前对于微藻细胞的破碎方法存在操作繁琐、破碎效果差、细胞内生物活性成分损失严重的问题。
目前尚未发现将形态为聚合群体、丝状体、长条带状的微藻在细胞与细胞之间进行破碎，而不破坏细胞壁和影响细胞内生物活性成分的相关报道。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术存在的缺陷，提供一种利用超声波破碎微藻的处理方法。
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
本发明的利用超声波破碎微藻的处理方法，包括如下步骤：将富集有微藻的浓缩藻液与PBS缓冲液混合后，将该混合物料置于超声发生仪中处理20-40min，超声功率为40-80W，处理过程中保持该混合物料的温度为24-35℃，经过处理后的微藻的长度为2-30μm；所述微藻的形态为聚合群体、丝状体、长条带状中的任意一种。
优选地，所述浓缩藻液中微藻的细胞密度不少于1.0×107个/mL。
优选地，所述浓缩藻液中微藻的细胞密度为1.0-6.0×107个/mL。
优选地，所述浓缩藻液与PBS缓冲液混合时，每克浓缩藻液中加入300-400mLPBS缓冲液。
优选地，所述浓缩藻液是将经过无菌培养的微藻培养液经过离心等浓缩处理后收集的藻体细胞。
优选地，所述微藻培养液离心处理时，转速为5000-6000rpm，离心时间为5-10min。
优选地，所述形态为长条带状的微藻为骨条藻属中的任意一种。
优选地，所述形态为聚合群体或丝状体的微藻为螺旋藻属中的任意一种。
本发明由于采用了上述技术方案，具有以下有益效果：
1、本发明克服了微藻破碎会破坏微藻细胞的技术缺陷，实现了形态为聚合群体、丝状体、长条带状的微藻在细胞与细胞之间的破碎，使细胞内的生物活性成分保留在细胞内，避免了生物活性成分的损失，尽可能保留微藻的营养成分。
2、本发明在破碎微藻的过程中，添加了保护剂均匀分布在微藻颗粒周围，形成一层隔离屏障，降低了氧气同微藻细胞体的接触，保护了微藻活性成分不被氧化分解，进一步确保微藻生物活性成分不被氧化破坏。
3、本发明通过超声波处理，对超声波处理时间、超声波处理功率、处理温度、藻液浓度等因子进行多次试验筛选，优化出一套破碎效率高稳定性好的技术工艺，有效破碎率可达95％以上。
4、本发明由于不破坏藻体的细胞壁，只是将形态为聚合群体、丝状体、长条带状的微藻联生体进行细胞之间的破碎分离，使成列、成群或成簇的细胞群破碎成长度更短的细胞列或细胞群，甚至是破碎成单个藻体细胞，而藻细胞内营养成分得以有效保留，本方法获得的微藻破碎液，不仅满足对虾等水产动物育苗早期幼体各变态期的摄食口径，而且充分供给了水产动物育苗早期的营养需求，从而达到提高水产动物育苗和养殖经济效益的目的。
附图说明
图1为钝顶螺旋藻藻体在不同超声波处理时间下的显微图片。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下举出优选实施例，对本发明进一步详细说明。然而，需要说明的是，说明书中列出的许多细节仅仅是为了使读者对本发明的一个或多个方面有一个透彻的理解，即便没有这些特定的细节也可以实现本发明的这些方面。
实施例1
一种利用超声波破碎钝顶螺旋藻的处理方法，包括如下步骤：将经过5d无菌培养的钝顶螺旋藻培养液在5000rpm的转速下离心10min，收集下层的藻细胞富集液，得到细胞密度为1.0×107个/mL的浓缩藻液，在每克浓缩藻液中加入300mLPBS缓冲液，将该混合物料置于超声波清洗仪中处理20min，超声功率为80W，处理过程中保持该混合物料的温度为24℃，经过处理后，长度为4-8μm的钝顶螺旋藻占钝顶螺旋藻总量的88％。
实施例2
一种利用超声波破碎中肋骨条藻的处理方法，包括如下步骤：将经过2d无菌培养的中肋骨条藻培养液在5200rpm的转速下离心8min，收集下层的藻细胞富集液，得到细胞密度为2.6×107个/mL的浓缩藻液，在每克浓缩藻液中加入320mLPBS缓冲液，将该混合物料置于超声波清洗仪中处理28min，超声功率为65W，处理过程中保持该混合物料的温度为28℃，经过处理后该混合物料中的中肋骨条藻85％以上以单细胞的形式存在。
实施例3
一种利用超声波破碎热带骨条藻的处理方法，包括如下步骤：将经过2d无菌培养的牟氏角毛藻培养液在5400rpm的转速下离心7min，收集下层的藻细胞富集液，得到细胞密度为3.7×107个/mL的浓缩藻液，在每克浓缩藻液中加入340mLPBS缓冲液，将该混合物料置于超声波清洗仪中处理32min，超声功率为70W，处理过程中保持该混合物料的温度为30℃，经过处理后该混合物料中的牟氏角毛藻90％以上以单细胞的形式存在。
实施例4
一种利用超声波破碎曼氏骨条藻的处理方法，包括如下步骤：将经过3d无菌培养的铜绿微囊藻培养液在5700rpm的转速下离心6min，收集下层的藻细胞富集液，得到细胞密度为4.8×107个/mL的浓缩藻液，在每克浓缩藻液中加入380mLPBS缓冲液，将该混合物料置于超声波清洗仪中处理35min，超声功率为75W，处理过程中保持该混合物料的温度为33℃，经过处理后该混合物料中的铜绿微囊藻92％以上以单细胞的形式存在。
实施例5
一种利用超声波破碎钝顶螺旋藻的处理方法，包括如下步骤：将经过4d无菌培养的钝顶螺旋藻培养液在6000rpm的转速下离心5min，收集下层的藻细胞富集液，得到细胞密度为6.0×107个/mL的浓缩藻液，在每克浓缩藻液中加入400mLPBS缓冲液，将该混合物料置于超声波清洗仪中处理40min，超声功率为40W，处理过程中保持该混合物料的温度为34℃，经过处理后，长度为4-5μm的钝顶螺旋藻占钝顶螺旋藻总量的82％。
微藻破碎效果试验分析
为验证本发明的方法中，超声波处理时间、超声波功率、处理温度对微藻破碎效果的影响，发明人设计单因素试验，分别以超声波处理时间、超声波功率、PBS缓冲液温度为因子，测试它们对微藻破碎的效果。
以实施例1的钝顶螺旋藻的浓缩藻液为原料，以实施例1的方法进行破碎处理，并每间隔5分钟，观察钝顶螺旋藻的状态，结果见表1和图1。
表1超声波处理时间对微藻破碎效果的影响
| 超声波处理时间/min | 破碎程度 | 超声波处理时间 | 破碎程度 |
| 0 | - | 25 | 良好 |
| 5 | 良好 | 30 | 良好 |
| 10 | 良好 | 35 | 一般 |
| 15 | 良好 | 40 | 较碎 |
| 20 | 良好 | 45 | 破碎 |
如表1和图1所示，初始阶段，随着超声波处理时间的加大，钝顶螺旋藻的长度逐渐变小，破碎程度良好，藻丝段完整，生物活性物质未从细胞内泄漏，处理30min以后，随着钝顶螺旋藻的破碎程度越来越高，有生物活性物质泄漏，说明细胞壁被破坏，生物活性物质从细胞膜透过，钝顶螺旋藻的整体有效活性时间变短。因此，超声波处理30min为较佳选择。
发明人还进行了超声波功率、PBS缓冲液温度的影响试验，微藻破碎效果最好的条件为：超声波处理30min，超声波处理功率50W，PBS缓冲液温度为28℃，在此条件下经破碎之后长度为3-5μm钝顶螺旋藻占钝顶螺旋藻总量的95％以上，且藻丝段完整，有效活性时间长。
Claims (4)
1.一种利用超声波破碎微藻的处理方法，其特征在于，包括如下步骤：将富集有微藻的浓缩藻液与PBS缓冲液混合后，将该混合物料置于超声发生仪中处理20-40min，超声功率为40-80W，处理过程中保持该混合物料的温度为24-35℃，经过处理后的微藻的长度为2-30μm；所述微藻的形态为聚合群体、丝状体、长条带状中的任意一种。
2.根据权利要求1所述的利用超声波破碎微藻的处理方法，其特征在于，所述浓缩藻液中微藻的细胞密度不少于1.0×107个/mL。
3.根据权利要求1所述的利用超声波破碎微藻的处理方法，其特征在于，所述浓缩藻液中微藻的细胞密度为1.0-6.0×107个/mL。
4.根据权利要求1所述的利用超声波破碎微藻的处理方法，其特征在于，所述浓缩藻液与PBS缓冲液混合时，每克浓缩藻液中加入300-400mLPBS缓冲液。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910905361.3A CN110592070A (zh) | 2019-09-24 | 2019-09-24 | 一种利用超声波破碎微藻的处理方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910905361.3A CN110592070A (zh) | 2019-09-24 | 2019-09-24 | 一种利用超声波破碎微藻的处理方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN110592070A true CN110592070A (zh) | 2019-12-20 |
Family
ID=68862991
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201910905361.3A Pending CN110592070A (zh) | 2019-09-24 | 2019-09-24 | 一种利用超声波破碎微藻的处理方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN110592070A (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112452506A (zh) * | 2020-11-06 | 2021-03-09 | 五原县沃丰生物科技有限责任公司 | 一种培养基粉末的生产方法 |
| CN113237817A (zh) * | 2021-05-07 | 2021-08-10 | 山东大学 | 一种底栖蓝藻藻垫的解聚观察方法及应用 |
| CN113812543A (zh) * | 2020-06-19 | 2021-12-21 | 国投生物科技投资有限公司 | 藻粉型育苗饵料及其应用和对虾溞状体期育苗的方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104498397A (zh) * | 2014-12-05 | 2015-04-08 | 中国科学院南京地理与湖泊研究所 | 获取无菌微囊藻纯种的方法 |
| CN107299059A (zh) * | 2017-08-22 | 2017-10-27 | 南京农业大学 | 一种制备斜生栅藻细胞原生质体的方法 |
-
2019
- 2019-09-24 CN CN201910905361.3A patent/CN110592070A/zh active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104498397A (zh) * | 2014-12-05 | 2015-04-08 | 中国科学院南京地理与湖泊研究所 | 获取无菌微囊藻纯种的方法 |
| CN107299059A (zh) * | 2017-08-22 | 2017-10-27 | 南京农业大学 | 一种制备斜生栅藻细胞原生质体的方法 |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| 王妮等: "钝顶螺旋藻单细胞的制备与再生研究", 《食品工业科技》 * |
| 王妮等: "钝顶螺旋藻单细胞的制备与再生研究", 《食品工业科技》, vol. 30, no. 7, 31 December 2009 (2009-12-31), pages 1 - 6 * |
| 王霞等: "松花湖铜绿微囊藻无菌株的分离及其生长特征", 《中国环境科学》, no. 05, 20 October 2004 (2004-10-20) * |
| 秦松等: "钝顶螺旋藻部分原生质体及单细胞的制备与培养", 《海洋与湖沼》 * |
| 秦松等: "钝顶螺旋藻部分原生质体及单细胞的制备与培养", 《海洋与湖沼》, no. 1, 31 December 1995 (1995-12-31) * |
| 郑建仙等: "《功能性食品 第2卷》", 中国轻工业出版社 , pages: 558 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113812543A (zh) * | 2020-06-19 | 2021-12-21 | 国投生物科技投资有限公司 | 藻粉型育苗饵料及其应用和对虾溞状体期育苗的方法 |
| CN112452506A (zh) * | 2020-11-06 | 2021-03-09 | 五原县沃丰生物科技有限责任公司 | 一种培养基粉末的生产方法 |
| CN113237817A (zh) * | 2021-05-07 | 2021-08-10 | 山东大学 | 一种底栖蓝藻藻垫的解聚观察方法及应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN110592070A (zh) | 一种利用超声波破碎微藻的处理方法 | |
| CN109618997A (zh) | 牡蛎养殖的生态净化方法 | |
| CN113278557A (zh) | 共生菌组合物及其制备方法和微藻的培养方法 | |
| Zmora et al. | 20 Microalgae for Aquaculture | |
| CN113308377A (zh) | 一种微藻培养基及其培养方法和养殖水体的净化方法 | |
| CN110451657A (zh) | 一种水产养殖水质改良剂 | |
| CN113662124A (zh) | 一种微藻保鲜组合物、保鲜剂及其保存方法 | |
| CN102994417B (zh) | 短小芽孢杆菌及其在防控水产霍乱弧菌中的应用 | |
| KR101768577B1 (ko) | 로티퍼를 먹이생물로 하는 한해성 양식품종의 양식방법 | |
| CN104743672A (zh) | 基于大型水蚤驯化方法的水体富营养化治理技术 | |
| CN108048327A (zh) | 一种高效分离硅藻的新方法 | |
| WO2023035437A1 (zh) | 一种微藻培养基及降解藻毒素的方法 | |
| CN103999763A (zh) | 一种清除大型经济海藻生活史微观阶段杂藻污染的方法 | |
| CN101082027B (zh) | 肥参菌的制备和修复海参养殖池环境的方法 | |
| CN109020667A (zh) | 一种利用黑水虻养殖粪渣生产肥水料的方法及肥水料 | |
| CN1657444A (zh) | 超浓缩藻菌微生态平衡悬浮型水质改良剂及制备方法 | |
| CN103651201B (zh) | 一种防治对虾病毒害提高对虾养殖产量的方法 | |
| CN110467266A (zh) | 一种藻类活性高效养虾池塘调水技术 | |
| CN102428896A (zh) | 一种淡水轮虫休眠卵的快速生产方法 | |
| CN107986458A (zh) | 一种固定化藻类细胞处理水产品养殖废水的方法 | |
| Soedibya et al. | Tofu wastewater industry with urea fertilizer as a cultivation medium for the microalga Spirulina plantensis | |
| CN111018127A (zh) | 一种藻类处理养殖废水的方法 | |
| CN111254080A (zh) | 一株Nanochlorum sp.微藻及其作为水产饵料的应用 | |
| CN104813914B (zh) | 藻类幼体培养中病虫害的防治方法 | |
| Matsumura | Efficient isolation and culture of viable protoplasts from Laminaria longissima Miyabe (Phaeophyceae) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20191220 |