CN110585317A - 一种法半夏的炮制方法及其工艺筛选方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种法半夏的炮制方法，其特征在于，按照如下方法炮制：称取干净生半夏，用水浸泡至内无干心；另取甘草于容器中，加水煎煮得到煎煮液；将甘草煎煮液倒入由生石灰(CaO)制成的石灰液中，用玻璃棒搅匀，加入上述已浸透的生半夏进行炮制，炮制完后取出，洗净，阴干得到法半夏，生石灰的加入量为每100g生半夏加入生石灰13.36g，炮制时间为31.03h。法半夏的炮制方法的工艺筛选，采用星点设计‑效应面法，自变量为每100g半夏CaO的用量、炮制时间，效应变量为草酸钙的含量和多糖的含量。保证法半夏科学、合理的用药。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种法半夏的炮制方法及其工艺筛选方法。
背景技术
半夏为天南星科植物半夏Pinellia ternate(Thunb.)Breit.的干燥块茎，具有降逆止呕，消痞散结，燥湿化痰的功效。半夏生品(Pinelliae Rhizoma)具有强烈刺激性,表现为“戟人咽喉”，有针样刺痛感，失音等。临床上多炮制入药，加生石灰和甘草炮制可得法半夏(Pinelliae Praeparatum Rhizoma)。现有文献报道生半夏的刺激性可能与含有的大量极细而坚韧的草酸钙针晶有关。《中国药典》2015年版中法半夏的炮制中提及生石灰的用量为100kg药材用10kg生石灰。未提及具体炮制时间和毒性成分，对炮制程度的控制靠的是口尝微有麻舌感为止，如果是不同的人进行炮制或者在经验判断上的差别就会造成炮制程度的差异，不同的炮制工艺会引起炮制品中有效成分或者毒性成分含量的不同而影响药物的疗效，不能保证法半夏科学、合理的用药。
关于半夏炮制的文献有不少的报道，但多采用正交设计法，仅以有效成分为指标，未对毒性成分进行测定评价，不能保证法半夏安全、有效地用药。
发明内容
针对上述技术问题，本发明的第一目的在于提供一种法半夏的炮制方法，第二目的在于提供一种法半夏的炮制方法的工艺筛选方法。保证法半夏安全有效地用药。
为了实现上述第一目的，本发明所采用的技术方案为：一种法半夏的炮制方法，其特征在于，按照如下方法炮制：称取干净生半夏，用水浸泡至内无干心；另取甘草于容器中，加水煎煮得到煎煮液；将甘草煎煮液倒入由生石灰(CaO)制成的石灰液中，用玻璃棒搅匀，加入上述已浸透的生半夏进行炮制，炮制完后取出，洗净，阴干得到法半夏，生石灰的加入量为每100g生半夏加入生石灰13.36g，炮制时间为31.03h。
所述甘草的量为每100g生半夏加15g甘草，煎煮两次，每次煎煮时间30min，合并煎煮液。
采用超纯水洗净炮制后的半夏。生半夏选直径为1cm左右的生半夏。
采用该最佳工艺条件下，草酸钙的含量为2.02％，多糖的含量为18.83％。毒性成分小，有效成分含量高。
本发明的第二目的是这样实现的：一种权利要求所述法半夏的炮制方法的工艺筛选，采用星点设计-效应面法，其特征在于：自变量为每100g生半夏CaO的用量、炮制时间，效应变量为法半夏中草酸钙的含量和多糖的含量。
包括以下步骤：
(1)按照权利要求3所述的方法，称取多份干净生半夏，加入不同量的生石灰制成的石灰液，用玻璃棒搅拌，炮制不同的时间，得到不同的法半夏；
(2)测定不同法半夏的草酸钙和多糖的含量，以草酸钙和多糖的含量为指标，将每个指标标准化为0-1之间的“归一值”，各指标的“归一值”计算几何平均数，即为OD，OD＝(DlD2…Dn)1/n，n为指标数；由于草酸钙的含量越小越好，多糖的含量越大越好，对考察因素草酸钙的含量与多糖的含量根据以下方法求“归一值”Dmin和Dmax，Dmin＝(Ymax-Y1)/(Ymax-Ymin)，Dmax＝(Y1-Ymin)/(Ymax-Ymin)；
(3)采用Design-Expert 8.0软件对实验数据进行处理，以OD为指标进行多元非线性回归拟合，得到二元一次方程，
草酸钙含量(Y1％)：
Y1＝2.11+0.034X1+0.011X2-0.060X1X2+0.071X1 2+0.014X2 2
多糖含量(Y2％)：
Y2＝17.75+0.79X1+1.90X2-0.41X1X2+0.18X1 2-0.16X2 2
OD：Y3＝0.53+0.027X1+0.010X2-0.15X1X2+0.10X1 2-0.19X2 2
其中X1炮制时间，X2CaO的用量；根据响应曲面分析绘出各因素变量的曲面图，分析效应面筛选工艺条件。
有益效果：本发明采用星点设计-效应面法结合总评归一值法对法半夏炮制过程中生石灰用量和炮制时间进行优化，同时以毒性成分和有效成分为指标，在减少毒性成分的同时尽可能的保留有效成分，得到最佳炮制工艺，达到了减毒增效的炮制目的，保证法半夏安全有效地的用药。
附图说明
图1为草酸含量测定HPLC色谱图，A.草酸标准溶液；B.PPR溶液；1草酸。
图2为炮制时间(X1)和每100g生半夏CaO用量(X2)对法半夏OD值的影响曲面图。
具体实施方式
下面通过实施例，对本发明作进一步说明：
实施例1
1仪器与试药
F2102型植物粉碎机(天津市泰斯特仪器有限公司)；Agilent1100型液相色谱仪(美国Agilent公司)；AG135型电子分析天平(瑞士Mettler Toledo仪器公司)；DF101S型集热式恒温加热磁力搅拌器(郑州长城科工贸有限公司)；Milli-Q型超纯水仪(美国Millipore公司)。
半夏药材、生姜药材和甘草药材均购自重庆中药材批发市场，并经重庆太极集团质检部杨修齐研究员鉴定为真品。草酸对照品(中国食品药品检定研究院，批号:100328-201010)；氧化钙(成都科龙化工试剂厂)；甲醇为色谱纯(美国天地试剂公司)，实验用水为超纯水，其他试剂均为分析纯。
2星点设计
本实验采用Design-Expert 8.0中的Central Composite试验设计方法，选取每100g生半夏的生石灰用量(X2，CaO，g)和炮制时间(X1，T，h)为试验的两个自变量因素，5个水平，同时以毒性成分草酸钙(Y1)和有效成分多糖(Y2)为响应值。因素水平表见表1。
表1PPR炮制因素水平表
法半夏炮制样品的制备
称取直径1cm左右的100g干净生半夏13份，用水浸泡至内无干心。另取甘草15g于1000mL烧杯中，加水煎煮两次，每次30min，合并煎煮液，按照表1中的因素水平设计，倒入由不同量生石灰制成的饱和石灰液中，用玻璃棒搅匀，加入上述已浸透的生半夏按照不同的炮制时间进行炮制，取出完成炮制的样品，用超纯水洗净，阴干得到法半夏。
3毒性成分草酸钙含量测定试验
3.1流动相的配制
精密称取5g磷酸氢二铵置于1000mL量瓶中，用磷酸调节pH 2.8后定容。再经0.45μm混合纤维树脂膜抽真空过滤、脱气后使用。
3.2对照品溶液的配制
精密称取草酸对照品17.70mg，置50mL量瓶，加纯水溶解，混匀，定容至刻度，使含H2C2O4 252.86mg·L-1。精密吸取该溶液3.0mL置50mL量瓶，加纯水溶解，混匀，定容至刻度，使成含H2C2O4 15.17mg·L-1。
3.3供试品溶液的配制
草酸钙作为一种不溶于水的盐存在于半夏的块茎中，在供试品的制备过程中，通过下列反应：2HCl+CaC2O4＝H2C2O4+CaCl2，将草酸钙转化成草酸的形式，才能采用高效液相色谱法测定，所以含量测定时测定的是草酸的量，再换算成半夏中草酸钙的含量。
精密称取PPR药材粉末0.1g，置4mL离心管中，加入3mL蒸馏水混匀，涡旋5min，然后置60℃水浴加热并搅拌10min，3000rpm离心5min，残渣以热纯水洗涤2次，每次2mL，混匀离心。取药材残渣，加0.2mL HCI(1:1)溶液，3.0mL纯水混匀，置70℃水浴，边搅拌边加热，10min，离心，条件同上，分离沉淀与上清液，沉淀用0.1mol·L-1的HCI，同上法处理2次，每次2mL，离心，合并上清液，置10mL量瓶，纯水定容至刻度，待测。
3.4色谱条件及系统适应性
色谱柱为HypersilODS-C18(4.6mm×250mm,5μm)，流动相0.5％(NH4)2HPO4水溶液(以磷酸调节pH＝2.8)，流速1.0mL·min-1，柱温为室温，检测波长210nm。取混合对照品溶液和样品溶液各20μL进样，结果见色谱图1，草酸色谱峰峰形好，理论塔板数不低于4000。
3.5草酸线性关系考察
精密量取草酸对照品溶液1，2，3，4，5，6mL，置25ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得系列对照品溶液。按上述色谱条件测定，以峰面积Y对浓度X(μg·mL-1)进行线性回归。草酸的线性方程为Y＝4997.36X+929.07(r＝0.9997)。结果表明，草酸浓度在15.92～95.52μg·mL-1范围内与峰面积呈良好的线性关系。
3.6精密度试验
取草酸对照品溶液(浓度为39.8μg/mL)，按“3.4”项下方法连续进样6次，测定草酸峰面积，结果RSD为0.63％。精密度符合分析要求。
3.7稳定性实验
取对法半夏样品溶液，室温下放置0，2，4，6，8，10小时，按“3.4”项下色谱条件分别进样20μL测定峰面积。结果峰面积基本不变，RSD为0.75％，表明溶液在10小时内基本稳定。
3.8重复性实验
按法半夏样品溶液配制方法平行配制6份，按“3.4”项下方法进样分析，按外标法以峰面积计算含量，结果RSD为0.79％。
3.9加样回收率实验
精密称取PPR药材粉末0.05g，按照“3.3”项下方法制备，加0.2mL HCI(1:1)溶液同时，加入适量草酸对照品溶液，测定峰面积，计算回收率，草酸平均加样回收率为97.82％，RSD为0.91％。
4PPR多糖测定实验
4.1标准曲线绘制
苯酚硫酸法测定总糖的标准曲线绘制
精密吸取葡萄糖对照品溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1、1.2、1.4mL置于10mL的比色管中，体积不足2.0mL的用蒸馏水补足，分别精密加入5％的苯酚溶液1.0mL，涡旋10s摇匀，立即加入浓硫酸5mL涡旋10s摇匀，放置于冰水浴中5min，再置于沸水浴中15min，取出置冰水水浴中放置5min，取出，以试剂空白作为参比，于490nm波长处测定吸光度，以浓度X(mg/mL)为横坐标,吸光度Y为纵坐标绘制标准曲线，标准曲线为Y＝43.8788X+0.0114r＝0.9995，葡萄糖浓度在0.00416～0.02912mg/mL浓度范围内与吸光值呈良好的线性关系。
二硝基水杨酸法测定还原糖的标准曲线绘制
精密吸取葡萄糖储备液0.2、0.6、1.0、1.4、1.8mL置于10mL的容量瓶中，体积不足4.0mL的用蒸馏水补足，分别精密加入新鲜配制的DNS溶液5.0mL，置于沸水浴中5min，取出置冰水水浴中放置5min，取出，定容至10mL，以蒸馏水作为空白，于540nm波长处测定吸光度，以浓度X(mg/mL)为横坐标,吸光度Y为纵坐标绘制标准曲线，标准曲线为Y＝6.3528X－0.1032r＝0.9995，葡萄糖浓度在0.0214～0.1926mg/mL浓度范围内与吸光值呈良好的线性关系。
4.2加样回收率试验
分别称取总糖与还原糖含量已知的法半夏粉末共9份，加入葡萄糖对照品适量，分别按照4.1和4.2方法制备供试品溶液，分别在490nm、540nm处测定吸光度，测定其总糖和还原糖的含量，计算平均加样回收率，苯酚浓硫酸法与3,5-二硝基水杨酸法的加样回收率分别为100.1％，100.7％，RSD分别为1.18％，1.31％。
4.3精密度试验
分别精密吸取还原糖供试品溶液5mL和总糖供试品溶液0.5mL，各按照“4.1”项下的操作方法进行测定，考察DNS法和苯酚硫酸法的精密度，结果RSD分别为0.98％，1.27％，符合分析要求。
4.4稳定性试验
分别精密吸取还原糖供试品溶液5mL和总糖供试品溶液0.5mL，各按照“4.1”项下的操作方法进行测定，分别在0，30，60，90，120min测定吸光度，考察DNS法和苯酚硫酸法的精密度，结果RSD分别为0.11％，0.76％，稳定性试验符合分析要求。
4.5重复性试验
分别取法半夏药材粉末6份，按照供试品溶液的制备方法，再根据DNS法测定用的还原糖供试品溶液，苯酚-硫酸法测定用总糖供试品溶液，结果RSD分别为1.08％，0.87％，重复性试验符合要求。
5星点设计与效应面分析
按照炮制因素水平表，测定各炮制的法半夏中草酸钙和多糖的含量，两种指标的数据处理采用归一法，将每个指标标准化为0～1之间的“归一值”，各指标得“归一值”计算几何平均数，即为OD，OD＝(DlD2…Dn)1/n，n为指标数。对考察因素草酸钙与多糖的含量根据以下方法求“归一值”Dmin和Dmax，Dmin＝(Ymax-Y1)/(Ymax-Ymin)，Dmax＝(Y1-Ymin)/(Ymax-Ymin)，再计算得到OD值。法半夏炮制工艺草酸钙和多糖测定结果以及OD值计算结果见表2。三维效应面图见图2。
表2法半夏星点设计试验结果
由表2可知，在法半夏不同炮制品中草酸钙的含量在2.004～2.255％之间，多糖的含量在15.18～20.79％之间，OD值在0.000～0.748之间。采用Design-Expert 8.0对表2中数据进行处理，以OD为指标进行多元非线性回归拟合，分别用线性，多元线性，二元一次方程拟合OD值与炮制因素之间的关系，各模型方程与相关系数结果见表3，结果表明，二元一次方程的拟合度要优于线性和多元线性方程。
表3拟合方程及相关系数
6FBX的工艺验证：
按最佳工艺对生半夏进行炮制(生石灰的加入量为每100g生半夏加入生石灰13.36g，炮制时间为31.03h)。分别测定最佳工艺法半夏中草酸钙和多糖的含量，计算OD值，将得到的结果用与预测值比较，并计算偏差，
偏差＝(预测值-实测值)/预测值×100％，结果见表4。
表4验证工艺中OD值的预测值和实际观测值
Claims (6)
1.一种法半夏的炮制方法，其特征在于，按照如下方法炮制：称取干净生半夏，用水浸泡至内无干心；另取甘草于容器中，加水煎煮得到煎煮液；将甘草煎煮液倒入由生石灰(CaO)制成的石灰液中，用玻璃棒搅匀，加入上述已浸透的生半夏进行炮制，炮制完后取出，洗净，阴干得到法半夏，生石灰的加入量为每100g生半夏加入生石灰13.36g，炮制时间为31.03h。
2.根据权利要求1所述法半夏的炮制方法，其特征在于：所述甘草的量为每100g生半夏加15g甘草，煎煮两次，每次煎煮时间30min，合并煎煮液。
3.根据权利要求2所述法半夏的炮制方法，其特征在于：采用超纯水洗净炮制后的半夏。
4.根据权利要求1所述法半夏的炮制方法，其特征在于：生半夏选直径为1cm左右的生半夏。
5.一种权利要求1-4任一项所述法半夏的炮制方法的工艺筛选，采用星点设计-效应面法，其特征在于：自变量为每100g生半夏CaO的用量、炮制时间，效应变量为法半夏中草酸钙的含量和多糖的含量。
6.根据权利要求5所述法半夏的炮制方法的工艺筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)按照权利要求3所述的方法，称取多份干净生半夏，加入不同量的生石灰制成的石灰液，用玻璃棒搅拌，炮制不同的时间，得到不同的法半夏；
(2)测定不同法半夏的草酸钙和多糖的含量，以草酸钙和多糖的含量为指标，将每个指标标准化为0-1之间的“归一值”，各指标的“归一值”计算几何平均数，即为OD，OD＝(DlD2…Dn)1/n，n为指标数；由于草酸钙的含量越小越好，多糖的含量越大越好，对考察因素草酸钙的含量与多糖的含量根据以下方法求“归一值”Dmin和Dmax，Dmin＝(Ymax－Y1)/(Ymax－Ymin)，Dmax＝(Y1－Ymin)/(Ymax－Ymin)；
(3)采用Design-Expert 8.0软件对实验数据进行处理，以OD为指标进行多元非线性回归拟合，得到二元一次方程，
草酸钙含量(Y1％)：
Y1＝2.11+0.034X1+0.011X2-0.060X1X2+0.071X1 2+0.014X2 2
多糖含量(Y2％)：
Y2＝17.75+0.79X1+1.90X2－0.41X1X2+0.18X1 2－0.16X2 2
OD：Y3＝0.53+0.027X1+0.010X2－0.15X1X2+0.10X1 2－0.19X2 2
其中X1炮制时间，X2 CaO的用量；根据响应曲面分析绘出各因素变量的曲面图，分析效应面筛选工艺条件。
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Cited By (2)
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|---|---|---|---|---|
| CN113075159A (zh) * | 2021-03-26 | 2021-07-06 | 重庆医药高等专科学校 | 一种基于太赫兹光谱的切片检查细胞成像系统 |
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Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103623240A (zh) * | 2013-09-27 | 2014-03-12 | 重庆桐君阁股份有限公司 | 一种石斛炮制方法及其工艺筛选方法 |
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Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103623240A (zh) * | 2013-09-27 | 2014-03-12 | 重庆桐君阁股份有限公司 | 一种石斛炮制方法及其工艺筛选方法 |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| 冯年平等: "《中药经皮给药及功效性化妆品》", 31 May 2019, 中国医药科技出版社 * |
| 刘英等: "《药物分析方法的进展与应用》", 31 May 2002, 山西科学技术出版社 * |
| 张琳等: "多指标综合加权评分法优选法半夏炮制工艺 ", 《中药材》 * |
| 蔡宝昌: "《中药炮制学》", 30 September 2008, 中国中医药出版社 * |
| 赖庆水等: ""半夏炮制前后多糖含量的测定"", 《陕西中医》 * |
| 魏来等: "法半夏炮制工艺的Box-Behnken响应面法优化 ", 《时珍国医国药》 * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113075159A (zh) * | 2021-03-26 | 2021-07-06 | 重庆医药高等专科学校 | 一种基于太赫兹光谱的切片检查细胞成像系统 |
| CN113075159B (zh) * | 2021-03-26 | 2022-10-14 | 重庆医药高等专科学校 | 一种基于太赫兹光谱的切片检查细胞成像系统 |
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