CN110536688B

CN110536688B - 创伤修复促进剂

Info

Publication number: CN110536688B
Application number: CN201880025450.2A
Authority: CN
Inventors: 吉冈龙藏; 田中阳子; 矢口学; 田中贵志
Original assignee: Nahls Corp; Nihon University; RIKEN Institute of Physical and Chemical Research
Current assignee: Nahls Corp; Nihon University; RIKEN Institute of Physical and Chemical Research
Priority date: 2017-04-17
Filing date: 2018-04-13
Publication date: 2023-12-26
Anticipated expiration: 2038-04-13
Also published as: JP7177444B2; WO2018194000A1; EP3613422A4; JPWO2018194000A1; US20200121700A1; EP3613422A1; US11090318B2; CN110536688A

Abstract

本发明提供一种具有组织创伤的修复促进效果的制剂。本发明的创伤修复促进剂包含选自下述式(1)所示的化合物、其盐和它们的水合物中的至少1种作为有效成分。下述式中，R¹、R²相同或不同，表示氢原子或任选具有1个或2个以上的选自卤素原子、‑COOR³、‑CONR³ ₂、‑COR³、‑CN、‑NO₂、‑NHCOR³、‑OR³、‑SR³、‑OCOR³、‑SO₃R³和‑SO₂NR³ ₂中的基团作为取代基的烃基(上述R³相同或不同，表示氢原子或任选具有取代基的脂肪族烃基)。n表示1以上的整数。

Description

创伤修复促进剂

技术领域

本发明涉及具有组织创伤的修复促进效果的制剂。本申请要求于2017年4月17日向日本提出申请的日本特愿2017-081239号的优先权，将其内容援引于此。

背景技术

如何在老龄化加剧的社会中抑制医疗费用的高涨已成为国家财政的巨大课题。并且，作为解决上述课题的手段，预防医疗(preemptive medicine，抑制或延迟疾病发病的医疗)的必要性日益增加。

例如，牙周病是由构成牙周病细菌的细胞外膜的LPS引起的牙周组织(牙齿和支撑牙齿的组织)的各种疾病的总称，是经历牙龈炎、牙周炎、牙槽骨吸收直至失去牙齿的疾病，不仅给饮食生活带来不便，而且被指出与糖尿病、肝炎、可致心肌梗塞的动脉硬化、慢性肾病、吸入性肺炎有关。因此，预防或治疗牙周病对于预防上述疾病的发生而言非常重要。

作为牙周病的预防，已知通过清洁牙面而除去牙周病的病原菌、除去成为其温床的牙垢、牙石的方式是有效的。但是，在由于老化等而导致生物体功能下降时，仅通过牙面清洁难以预防牙周病的发病。另外，除了外科手术以外，没有已知的恢复牙周组织的方法。

专利文献1记载了：如果使用包含抑制LPS活性的特定表面活性剂的组合物作为洁齿剂，则可以抑制牙周病。但是，并不能修复已然丧失的牙周组织。

创伤是指擦伤、裂伤、切创、挫伤、溃疡、褥疮、糖尿病性溃疡、烧伤、炎症、细胞坏死等由某种因素导致的组织表面缺损的状态。创伤修复是最有组织化的免疫或炎症反应之一，大致分为(1)炎症期、(2)肉芽组织形成期、(3)重构期这3个过程。在炎症期内，伴随着组织损伤而引起局部炎症反应，嗜中性粒细胞、巨噬细胞逐渐迁移到创伤部位。巨噬细胞分泌各种炎症性细胞因子、趋化因子，从而进一步增强炎症反应。接着，在肉芽组织形成期，通过血管内皮细胞的增殖而诱导血管新生，并且逐渐浸润到创部的成纤维细胞增殖，产生胶原等胞外基质，从而形成肉芽组织而实现组织再生。另外，肉芽组织内的成纤维细胞分化成含有较多肌动蛋白、富有收缩力的肌成纤维细胞。在该时期观察到的创面收缩是以该肌成纤维细胞为主而引起的现象，是用来高效地缩小创面面积的有用方法。并且，在重构期内，诱导在肉芽组织的上部形成上皮细胞，原来的正常结构得以重构。

以往的研究表明，在进行创伤修复时TGF-β是最重要的细胞因子，当TGF-β与受体结合时，介由Smad而进行信号转导，通过TGFβ/Smad信号来精细调控创伤治愈关联基因(非专利文献1)。但是，“调控”包括促进和抑制两个方向的作用，实际上简单地促进TGF-β/Smad信号并不意味着创伤修复反应上调。例如，作为Smad在创伤治愈中的作用，已知下述方面：通过Smad3的缺损而显示出创伤治愈的促进、无TGF-β介导的信号转导时促进创伤修复(非专利文献2、3)。而且也有报道指出，在过度表达TGF-β1的转基因小鼠中，创伤治愈是延迟的，表明TGF-β1对创伤治愈具有负面作用(非专利文献4)。

PDLIM2(PDZ和LIM结构域蛋白-2)是从属于LIM蛋白家族的核内泛素连接酶，具有PDZ和LIM结构域。PDLIM2在核内与作为T细胞中的Th1细胞分化所需的转录因子之一的STAT4结合，将其泛素化和分解，从而终止由STAT4介导的信号转导(非专利文献5)。另外，专利文献2中记载了通过抑制PDLIM2的表达来促进皮肤缺损的修复。

近年已经明确，各种细胞生长因子在创伤治愈过程中发挥重要的作用，对皮肤创伤治疗的有效性备受期待。特别是成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor：FGF)家族中的FGF2(人碱性成纤维细胞生长因子-2、也被称为“bFGF”)，发现其为具有显著促进成纤维细胞增殖的效果和促进血管新生效果的蛋白质。因此，将FGF2作为褥疮、皮肤溃疡等难治性创伤的治疗剂来使用。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2011-1387号公报

专利文献2：日本特开2010-280651号公报

非专利文献

非专利文献1：Ashcroft GS et al.，Nat Cell Biol，1，p260(1999)

非专利文献2：Falanga V et al.，Wound repair and Regeneration，12，p320(2004)

非专利文献3：Wang Y，et al.，Experimental Neurology，203，p168(2007)

非专利文献4：Wang X et al.，J Investig Dermatol Symp Proc，11，p112(2006)

非专利文献5：Tanaka et al.，Immunity，22，p729(2005)

发明内容

发明要解决的课题

因此，本发明的目的在于，提供具有组织创伤的修复促进效果的制剂。

本发明的另一目的在于，提供具有粘膜创伤的修复促进效果的制剂。

本发明的另一目的在于，提供具有包含成纤维细胞的组织的创伤的修复促进效果的制剂。

本发明的另一目的在于，提供具有预防由牙周病所致的牙周组织丧失、具有修复由于牙周病而丧失的牙周组织这一作用的制剂。

用于解决课题的方案

本发明人等为了解决上述课题而进行了深入研究，结果发现，在将下述式(1)所示的化合物用于发生了炎症反应的成纤维细胞时，

[1]使具有通过提高嗜中性粒细胞的趋化性而提高生物体细胞自身的防御功能这一效果的IL-8的产生增加；

[2]使溶解坏死组织蛋白、将创伤清洁化的基质金属蛋白酶(MMP)的产生增加；

[3]使具有刺激成纤维细胞的增殖、促进上皮形成这一效果的上皮生长因子(EGF)的产生增加；

[4]使通过减少具有抑制创伤部位收缩这一效果的PDLIM2的产生而具有显著促进成纤维细胞增殖的效果和促进血管新生的效果的FGF2的产生增加。

并且发现，通过上述效果[1]～[4]的组合，从而发挥使炎症在早期终结、促进创伤修复、缩短治愈所需时间的效果。本发明是基于这些见解而完成的。

即，本发明提供一种创伤修复促进剂，其包含选自下述式(1)所示的化合物、其盐和它们的水合物中的至少1种作为有效成分。

[化1]

[式中，R¹、R²相同或不同，表示氢原子或任选具有1个或2个以上的选自卤素原子、-COOR³、-CONR³ ₂、-COR³、-CN、-NO₂、-NHCOR³、-OR³、-SR³、-OCOR³、-SO₃R³和-SO₂NR³ ₂中的基团作为取代基的烃基(上述R³相同或不同，表示氢原子或任选具有取代基的脂肪族烃基)。n表示1以上的整数。]

本发明另外提供上述创伤修复促进剂，其为粘膜的创伤修复促进剂。

本发明另外提供上述创伤修复促进剂，其为包含成纤维细胞的组织的创伤修复促进剂。

本发明另外提供上述创伤修复促进剂，其为牙周病的预防或治疗用制剂。

本发明另外提供上述创伤修复促进剂，其为包含选自下述式(1)所示的化合物、其盐和它们的水合物中的至少1种作为有效成分的洁齿剂、洁口剂、口腔喷雾剂、含漱剂、咀嚼片、口含剂、滴剂、压片剂、糖果、口香糖、涂布剂、贴剂、滴鼻剂或滴眼剂。

[化2]

发明的效果

上述式(1)所示的化合物不具有细胞毒性，安全性优异。并且，在将含有上述(1)所示化合物的制剂用于创伤部位时，上述式(1)所示的化合物与用于控制创伤部位的炎症反应的由免疫活性细胞分泌的细胞因子(例如TGF-β等抗炎症性细胞因子)协调地进行作用，从而一次性地增加IL-8、MMP、FGF和EGF的产生，并且利用该化合物抑制PDLIM2的产生，从而增加具有显著促进成纤维细胞的增殖效果和促进血管新生效果的FGF2的产生，由此可以发挥使炎症在早期终结、促进创伤的修复、缩短治愈所需时间的效果。

因此，对创伤部位使用上述制剂可以加速治愈，在由于老化、疾病而导致生物体功能下降时，可以提高生物体的屏障功能，得到预防由生物体的屏障功能下降而引起的各种疾病的效果。需要说明的是，上述制剂不限于人类，在动物中也可以发挥同样的效果。

例如，将上述制剂用于口腔粘膜时，可以提高屏障功能，从而能够抑制牙周病的发病，可以预防由牙周病所致的牙周组织丧失。另外，即使是已然丧失的牙周组织，也可以进行修复而使其恢复。因此，上述制剂作为牙周病的预防或治疗用制剂极为有效。

附图说明

图1是示出实施例中得到的制剂的安全性评价结果的图。

图2是示出实施例中得到的制剂的初始IL-8产生促进效果的图。

图3是示出使用实施例中得到的制剂后的IL-8产生量的经时变化的图。

图4是示出使用实施例中得到的制剂后的IL-8基因表达量的经时变化的图。

图5是示出使用实施例中得到的制剂和TGF-β中的一者或两者后的TGF-β、双调蛋白和MMP3的表达量的图。纵轴表示将不存在TGF-β和D-AP6的条件下的各基因的表达量设为1时的相对量。

图6是示出使用D-AP6和TGF-β中的一者或两者后或者使用Nalsgen和TGF-β中的一者或两者后的MMP9、MMP13、HAS2和PDLIM2的表达量的图。纵轴表示将不存在TGF-β、D-AP6和Nalsgen的条件下的各基因的表达量设为1时的相对量。

图7是示出使用Nalsgen和TGF-β中的一者或两者后的FGF2的表达量的图。纵轴表示将不存在TGF-β和Nalsgen的条件下的FGF2的表达量设为1时的相对量。

具体实施方式

本说明书中，“创伤”表示擦伤、裂伤、切创、挫伤、溃疡、褥疮、糖尿病性溃疡、烧伤、炎症、细胞坏死等由某种因素导致的组织表面缺损的状态。上述组织包括例如皮肤、粘膜。另外，上述皮肤包括表皮、真皮和皮下组织。上述粘膜包括上皮(或粘膜上皮)、粘膜固有层和粘膜下层。

[创伤修复促进剂]

本发明的创伤修复促进剂包含选自下述式(1)所示的化合物、其盐和它们的水合物中的至少1种作为有效成分。需要说明的是，下述式(1)所示的化合物具有至少1个不对称原子。因此，下述式(1)所示的化合物存在至少2种光学异构体。本发明的创伤修复促进剂中，作为下述式(1)所示的化合物，可以使用光学异构体(或镜像异构体)的等量混合物(＝外消旋体)，也可以使用对上述光学异构体的等量混合物进行光学拆分而得到的光学活性体(或镜像异构体中的一者)。需要说明的是，外消旋体的光学拆分可以采用非对映体盐法、使用手性柱的拆分法等公知惯用的方法。

[化3]

上述R¹、R²中的烃基包括脂肪族烃基、脂环式烃基、芳香族烃基和它们介由单键键合而成的基团。

作为脂肪族烃基，优选C_1-20(＝碳数1～20)的脂肪族烃基，可列举例如：甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基、癸基、十二烷基等碳数C_1-20(优选为C_1-10、特别优选为C_1-3)左右的烷基；乙烯基、烯丙基、1-丁烯基等C_2-20(优选为C_2-10、特别优选为C_2-3)左右的烯基；乙炔基、丙炔基等C_2-20(优选为C_2-10、特别优选为C_2-3)左右的炔基等。

作为脂环式烃基，优选C_3-20脂环式烃基，可列举例如：环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环辛基等C_3-20(优选为C_3-15、特别优选为C_5-8)左右的环烷基；环戊烯基、环己烯基等C_3-20(优选为C_3-15、特别优选为C_5-8)左右的环烯基；全氢萘-1-基、降冰片基、金刚烷基、三环[5.2.1.0^2，6]癸烷-8-基、四环[4.4.0.1^2，5.1^7，10]十二烷-3-基等桥环式烃基等。

作为芳香族烃基，优选C_6-14(特别是C_6-10)芳香族烃基，可列举例如苯基、萘基等。

脂肪族烃基与脂环式烃基键合而成的基团包括环戊基甲基、环己基甲基、2-环己基乙基等环烷基取代烷基(例如C_3-20环烷基取代C_1-4烷基等)等。另外，脂肪族烃基与芳香族烃基键合而成的基团包括芳烷基(例如C_7-18芳烷基等)、烷基取代芳基(例如取代有1～4个左右的C_1-4烷基的苯基或萘基等)等。

作为上述R³中的脂肪族烃基，可列举与上述R¹、R²中的脂肪族烃基同样的例子。

作为上述R³中的脂肪族烃基任选具有的取代基，可列举例如：卤素原子、氧代基、羟基、取代的氧基(例如C_1-4烷氧基、C_6-10芳氧基、C_7-16芳烷氧基、C_1-4酰氧基等)、羧基、取代的氧基羰基(例如C_1-4烷氧基羰基、C_6-10芳氧基羰基、C_7-16芳烷氧基羰基等)、取代或非取代的氨甲酰基(例如氨甲酰基、甲基氨甲酰基等C_1-4烷基取代氨甲酰基、苯基氨甲酰基等C_6-10芳基取代氨甲酰基)、氰基、硝基、取代或非取代氨基(例如甲基氨基、二甲基氨基、乙基氨基、二乙基氨基等单或二C_1-4烷基氨基；1-吡咯烷基、哌啶基、吗啉基等5～8元的环状氨基；乙酰基氨基、丙酰基氨基、苯甲酰基氨基等C_1-10酰基氨基；苯磺酰基氨基、对甲苯磺酰基氨基等磺酰基氨基)、磺基、杂环式基团等。另外，上述羟基、羧基可以被有机合成领域中惯用的保护基保护。

n表示1以上的整数，例如1～10的整数。

作为式(1)所示的化合物，包括下述[I]、[II]。

[I]式(1)中的OR¹基和OR²基均为OH基的化合物(化合物(I))

[II]式(1)中的OR¹基和OR²基中的至少一者为OH基以外的基团的化合物(化合物(II))

作为化合物(I)中的n，优选为2～10的整数，特别优选为2～8的整数。

作为化合物(II)中的n，优选为1～8的整数，特别优选为2～6的整数。

作为化合物(II)中的OR¹基与OR²基的组合，优选为下述[II-i]～[II-v]的组合。特别是在式(1)中的n为1或2的情况下，优选为下述[II-i]～[II-iv]的组合，在式(1)中的n为3以上的整数的情况下，优选为下述[II-v]的组合。

[II-i]下述式(i-1)所示的基团与下述式(i-2)所示的基团的组合

[化4]

[式(i-1)中，R⁴表示任选具有取代基的芳香族烃基或任选具有取代基的杂环式基团]

[式(i-2)中，R⁵～R⁷相同或不同，表示选自氢原子、任选具有取代基的脂肪族烃基、任选具有取代基的芳香族烃基、卤素原子、-COOR⁸、-CONR⁸ ₂、-COR⁸、-OCOR⁸、-CF₃、-CN、-SR⁸、-SOR⁸、-SO₂R⁸、-SO₂NR⁸ ₂、-PO(OR⁸)₂和-NO₂中的基团。上述R⁸表示氢原子、烷基或烯基。选自R⁵～R⁷中的两个基团任选相互键合，在式(i-2)所示的基团中与这些基团上键合的碳原子一起形成环。]

作为上述脂肪族烃基、芳香族烃基，可列举与上述R¹、R²中的脂肪族烃基、芳香族烃基同样的例子。

构成上述杂环式基团的杂环包括芳香族性杂环和非芳香族性杂环。作为这种杂环，可列举构成环的原子包含碳原子和至少1种杂原子(例如氧原子、硫原子、氮原子等)的3～10元环(优选为4～6元环)和它们的稠合环。具体而言，可列举：包含氧原子作为杂原子的杂环(例如环氧乙烷环等3元环；氧杂环丁环等4元环；呋喃环、四氢呋喃环、噁唑环、异噁唑环、γ-丁内酯环等5元环；4-氧代-4H-吡喃环、四氢吡喃环、吗啉环等6元环；苯并呋喃环、异苯并呋喃环、4-氧代-4H-色烯环、色满环、异色满环等稠合环；3-氧杂三环[4.3.1.1^4，8]十一烷-2-酮环、3-氧杂三环[4.2.1.0^4，8]壬烷-2-酮环等桥环)、包含硫原子作为杂原子的杂环(例如噻吩环、噻唑环、异噻唑环、噻二唑环等5元环；4-氧代-4H-噻喃环等6元环；苯并噻吩环等稠合环等)、包含氮原子作为杂原子的杂环(例如吡咯环、吡咯烷环、吡唑环、咪唑环、三唑环等5元环；异氰脲环、吡啶环、哒嗪环、嘧啶环、吡嗪环、哌啶环、哌嗪环等6元环；吲哚环、二氢吲哚环、喹啉环、吖啶环、萘啶环、喹唑啉环、嘌呤环等稠合环等)等。杂环式基团是从上述杂环的结构式中除去1个氢原子而成的基团。

作为上述R⁴～R⁷中的脂肪族烃基、芳香族烃基和杂环式基团任选具有的取代基，可列举与上述R³中的脂肪族烃基任选具有的取代基同样的例子。

[II-ii]下述式(ii-1)所示的基团与下述式(ii-2)所示的基团的组合

[化5]

[式(ii-1)中，R⁹表示氢原子、任选具有取代基的烷基或任选具有取代基的芳基，R¹⁰表示氢原子或下述式(r10)所示的基团，

[化6]

(式中，R¹¹表示氢原子、甲基或乙基。n1表示0～4的整数，n2表示0或1，n3表示0～4的整数。选自n1～n3中的2个以上可以相同。X¹表示酰胺键或亚烯基，X²表示选自-COOR³、-CONR³ ₂、-COR³、-CN、-NO₂、-NHCOR³、-OR³、-SR³、-OCOR³、-SO₃R³和-SO₂NR³ ₂中的基团(上述R³与上述相同))]

[式(ii-2)中，Y¹表示选自氢原子、烷基、烯基、烷氧基、烯氧基、卤素原子、-COOR⁸、-CONR⁸ ₂、-COR⁸、-OCOR⁸、-CF₃、-CN、-SR⁸、-SOR⁸、-SO₂R⁸、-SO₂NR⁸ ₂、-PO(OR⁸)₂和-NO₂中的基团。R⁸与上述相同。Y²表示选自氢原子、任选具有取代基的烷基、任选具有取代基的烯基、-COOR³、-CONR³ ₂、-COR³、-CN、-NO₂、-NHCOR³、-OR³、-SR³、-OCOR³、-SO₃R³和-SO₂NR³ ₂中的基团(上述R³与上述相同)。Y¹与Y²任选相互键合并与式(ii-2)中的构成苯环的碳原子一起形成环。]

[II-iii]任选具有取代基的烷氧基与选自下述式(iii-1)～(iii-4)所示的基团中的基团的组合

[化7]

(式中，R¹²表示氢原子、甲基或乙基。Y¹、Y²与上述相同。Y¹与Y²任选相互键合并与式中的构成芳香环的碳原子一起形成环。)

[II-iv]OR¹基与OR²基相同或不同的、下述式(iv-1)所示的基团的组合

[化8]

(式中，Y¹、Y²与上述相同。Y¹与Y²任选相互键合并与式中的构成苯环的碳原子一起形成环。)

[II-v]羟基与任选具有取代基的脂肪族烃氧基(优选为C_1-6烷氧基)的组合

作为上述烷基、烯基、芳基、烷氧基和脂肪族烃氧基任选具有的取代基，可列举与上述R³中的脂肪族烃基任选具有的取代基同样的例子。

作为构成上述脂肪族烃氧基的脂肪族烃基，可列举与上述R¹、R²中的脂肪族烃基同样的例子。

作为上述化合物(I)，优选下述式(I-1)～(I-5)所示的化合物(包括光学异构体)。

[化9]

作为上述化合物(II)，优选下述式(II-1)～(II-2)所示的化合物(包括光学异构体)。

[化10]

式(1)所示的化合物可以是水合物，另外，式(1)所示的化合物或其水合物也可以形成盐。作为式(1)所示的化合物或其水合物的盐，可列举例如：钠盐、钾盐等碱金属盐；镁盐、钙盐、钡盐等碱土金属盐；与铵的盐；与三甲胺、三乙胺、三丁胺、吡啶、喹啉、哌啶、咪唑、甲基吡啶、二甲基氨基吡啶、N，N-二甲基苯胺、N-甲基哌啶、N-甲基吗啉、二乙胺、环己胺、普鲁卡因、二苄基胺、N-苄基-β-苯乙胺、1-二苯羟甲胺(1-ephenamine)、N，N’-二苄基乙二胺、N-甲基-D-葡糖胺等含氮有机碱的盐；与赖氨酸、精氨酸、鸟氨酸等碱性氨基酸的盐；过渡金属盐；与盐酸、硫酸、硝酸、磷酸、硼酸等无机酸的盐；与草酸、乙酸、对甲苯磺酸等有机酸的盐等。

上述式(1)所示的化合物中，化合物(I)例如可以经过下述工序[1]～[4]而制造。另外，化合物(II)例如可以经过下述工序[1]～[10]而制造。

下述式中，n与上述相同。X表示卤素原子(氟原子、氯原子、溴原子或碘原子)，R、R’相同或不同，表示碳数1～10的烷基。R”表示氨基的保护基。DPR表示被保护基保护的氨基的脱保护剂。需要说明的是，作为氨基的保护基，可列举例如：碳数1～10的烷基、碳数7～18的芳烷基、酰基(R^aC(＝O)基；R^a为碳数1～10的烷基)、烷氧基羰基(R^bOC(＝O)基；R^b为碳数1～10的烷基)、任选具有取代基的苄氧基羰基、任选具有取代基的苯基亚甲基、任选具有取代基的二苯基亚甲基等。另外，作为上述取代基，可列举例如卤素原子、碳数1～3的烷氧基、硝基等。

[化11]

[化12]

[化13]

工序[1]的反应是使式(3)所示的亚磷酸酯与式(2)所示的二卤代烷烃反应而得到式(4)所示的膦酰基烷酸的反应(Michaelis-Arbuzov反应；Michaelis-ArbuzovReaction)。上述式(3)所示的亚磷酸酯的使用量相对于式(2)所示的二卤代烷烃1摩尔为例如0.1～1.0摩尔左右。

工序[1]的反应的反应温度优选为例如130～140℃左右。反应时间为例如0.5～2小时左右。

工序[2]的反应是使式(5)所示的化合物与经过工序[1]的反应而得到的式(4)所示的膦酰基烷酸反应从而得到式(6)所示的化合物的反应。上述式(5)所示的化合物的使用量相对于式(4)所示的膦酰基烷酸1摩尔为例如0.7～13摩尔左右。

从得到促进反应进行的效果的观点出发，优选在碱存在下进行工序[2]的反应。作为上述碱，可列举例如：碳酸氢钾、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸钠等碳酸盐类(特别是碱金属的碳酸盐类)；氢氧化钠、氢氧化钾等碱金属的氢氧化物；氢氧化钙、氢氧化镁等碱土金属的氢氧化物；磷酸二氢钠、磷酸二氢钾等磷酸盐类(特别是碱金属的磷酸盐类)：乙酸钠、乙酸钾等羧酸盐类(特别是碱金属的羧酸盐类)；三乙胺、吡啶等有机碱类；甲醇钠、乙醇钠等金属醇盐类(特别是碱金属的醇盐类)；氢化钠等金属氢化物类等。它们可以单独使用一种，也可以将两种以上组合使用。碱的使用量相对于式(4)所示的膦酰基烷酸1摩尔为例如0.9～1.1摩尔左右。

优选在溶剂存在下进行工序[2]的反应。作为上述溶剂，可列举例如：丙酮、甲乙酮等酮类；四氢呋喃、二噁烷等醚类；乙腈等腈类；二甲基亚砜等亚砜类；环丁砜等砜类；乙酸乙酯等酯类；二甲基甲酰胺等酰胺类；甲醇、乙醇、叔丁醇等醇类；戊烷、己烷、石油醚等烃类；苯、甲苯、二甲苯等芳香族烃类；二氯甲烷、氯仿、溴仿、氯苯、溴苯等含卤素的化合物；碳酸二甲酯、碳酸二乙酯、碳酸甲乙酯等链状碳酸酯；碳酸亚乙酯、碳酸亚丙酯等环状碳酸酯等。它们可以单独使用一种，也可以将两种以上组合使用。

工序[2]的反应的反应温度优选为例如100～110℃左右。反应时间为例如6～24小时左右。

工序[3]的反应是对经过工序[2]的反应而得到的式(6)所示的化合物的被保护基保护的羧基(-COOR’)、被保护基保护的氨基(-NHR″)和被保护基保护的膦酸基(-P(＝O)(OR)₂)进行脱保护而得到式(7)所示的化合物的反应。被保护基保护的基团的脱保护可以通过使脱保护剂反应来进行。作为上述脱保护剂(上述式中用“DPR”表示)，可以适宜使用强碱(例如氢氧化钠)或强酸(例如盐酸)。

工序[3]的反应的反应温度优选为例如90～100℃左右。反应时间为例如20～24小时左右。

工序[4]的反应是使具有捕获脱保护剂这一作用的化合物与经过工序[3]的反应而得到的式(7)所示的化合物反应从而得到化合物(I)的反应。作为具有捕获脱保护剂这一作用的化合物，例如在脱保护剂为盐酸时，可以使用环氧丙烷。具有捕获脱保护剂这一作用的化合物的使用量相对于式(7)所示的化合物1摩尔为例如3.0～6.0摩尔左右。

工序[5]是对化合物(I)的羧基导入保护基的工序，例如，可以通过使化合物(I)与R^COH(R^C表示任选具有取代基的芳基或芳烷基，优选为苄基、4-硝基苄基)反应来导入保护基。该反应优选在酸催化剂(例如盐酸等)的存在下、在室温附近的温度环境下进行。反应时间为例如12～24小时左右。

工序[6]是对化合物(I)的氨基导入保护基的工序，例如，可以通过向溶解于溶剂的化合物(I)中滴加R”X、使其反应来导入保护基。该反应优选在碱(例如碳酸氢钠等)的存在下进行。

作为上述溶剂，可以使用例如水、卤代烃系溶剂、饱和或不饱和烃系溶剂、芳香族烃系溶剂、醚系溶剂等中的一种或两种以上。

滴加时的温度优选为室温以下，特别优选为0℃附近。反应时间为例如0.5～2小时左右。另外，滴加结束后，优选例如在保温至25～30℃的状态下边搅拌例如10～24小时左右边使其熟化。

工序[7]是用卤素原子取代磷酸基的两个羟基的工序，例如，可以通过在催化剂和溶剂的存在下使卤化剂与经过工序[5]、[6]而得到的化合物反应来进行。作为上述催化剂，可以使用例如N，N-二甲基甲酰胺等。另外，作为上述溶剂，可以使用卤代烃系溶剂、醚系溶剂等中的一种或两种以上。作为上述卤化剂，可列举例如草酰氯、亚硫酰氯、五氯化磷、磷酰氯等。这些可以单独使用一种，也可以将两种以上组合使用。该反应优选在室温附近的温度下进行1小时左右。

工序[8]是使R¹OH发生反应而将经过工序[7]而得到的键合于磷原子的卤素原子中的一个取代为OR¹的工序。该反应优选在碱存在下进行，作为碱，可列举例如三乙胺、三丁胺、二异丙基乙胺、N-甲基哌啶、N-甲基吗啉、二乙基异丙胺、N-甲基咪唑、吡啶等。另外，该反应优选在溶剂存在下进行，作为溶剂，优选使用干燥的二氯甲烷。反应优选如下进行：在-65℃附近搅拌30分钟左右后，缓慢升温到室温，然后在保持室温的状态下搅拌1～3小时左右来进行。

工序[9]是使R²OH发生反应而将键合于磷原子的卤素原子中的另一个取代为OR²的工序。工序[9]除了使用R²OH来代替R¹OH以外，可以通过与工序[8]同样的方法来进行。

工序[10]是对被保护基保护的羧基和氨基进行脱保护的工序，例如可以通过接触氢还原法、使用氯化铝的脱保护法等来进行。上述接触氢还原法是在使钯担载于活性碳、硫酸钡等载体而成的钯系催化剂、铂系催化剂的存在下向经过工序[9]而得到的化合物中鼓入氢气的方法。另外，上述使用氯化铝的脱保护法是在加入了三氯化铝的溶剂(例如干燥硝基甲烷等高极性溶剂)中使经过工序[9]而得到的化合物与茴香醚发生反应的方法。

作为各工序的反应气氛，只要不抑制反应则没有特别限定，可以是例如空气气氛、氮气气氛、氩气气氛等中的任一者。另外，反应可以在常压、减压或加压下进行。而且，反应也可以通过间歇式、半间歇式、连续式等中的任一方法来进行。

各工序结束后，可以对得到的反应产物实施例如过滤、浓缩、蒸馏、萃取、结晶、吸附、重结晶、柱色谱等分离手段、这些手段组合而成的分离手段来进行纯化。

式(1)所示的化合物的水合物可以通过将用上述方法得到的化合物(I)或化合物(II)供于使用了水和水溶性溶剂的结晶处理来制造。

作为上述水溶性溶剂，优选为在室温(25℃)时与水以任意的比例混溶的有机溶剂，优选在水中的溶解度为50％以上(优选为80％以上、特别优选为95以上)的有机溶剂。

作为上述水溶性溶剂，优选使用醇(例如甲醇、乙醇等碳数1～5的低级醇)。

式(1)所示的化合物的盐可以使下述物质与通过上述方法得到的化合物(I)或化合物(II)反应而制造，所述物质为例如：氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化镁、氢氧化钙、氢氧化钡等碱性化合物；铵；三甲胺、三乙胺、三丁胺、吡啶、喹啉、哌啶、咪唑、甲基吡啶、二甲基氨基吡啶、N，N-二甲基苯胺、N-甲基哌啶、N-甲基吗啉、二乙胺、环己胺、普鲁卡因、二苄基胺、N-苄基-β-苯乙胺、1-二苯羟甲胺、N，N’-二苄基乙二胺、N-甲基-D-葡糖胺等含氮有机碱；赖氨酸、精氨酸、鸟氨酸等碱性氨基酸；盐酸、硫酸、硝酸、磷酸、硼酸等无机酸；草酸、乙酸、对甲苯磺酸等有机酸等。

本发明的创伤修复促进剂中，作为有效成分，包含选自上述式(1)所示的化合物(例如化合物(I)和/或化合物(II))、其盐和它们的水合物中的至少1种，优选为选自上述式(I-1)～(I-5)、(II-1)～(II-2)所示的化合物、其盐和它们的水合物中的至少1种(包括光学异构体)。

本发明的创伤修复促进剂中的上述式(1)所示的化合物、其盐和它们的水合物的含量(含有两种以上时为其总量)可以根据用途适当调整。例如，在将本发明的创伤修复促进剂用于牙周病的预防或治疗用途时，为例如0.001～500μg/mL、优选为0.005～300μg/mL、更优选为0.01～200μg/mL、进一步优选为0.01～100μg/mL、特别优选为0.01～10μg/mL、最优选为0.01～1.0μg/mL、尤其优选为0.01～0.5μg/mL。

本发明的创伤修复促进剂中，除了上述式(1)所示的化合物、其盐和它们的水合物以外，还可以含有其它成分。其它成分可以根据用途适当调整。例如，在将本发明的创伤修复促进剂用于牙周病的预防或治疗用途时，可列举洁齿剂、洁口剂、口腔喷雾剂、口腔涂布剂(例如口腔凝胶剂、口腔软膏)、咽喉用喷雾、含漱剂、膏剂、软膏剂、咽喉用涂布剂、咀嚼片、口含剂、滴剂等中通常含有的成分。

在将本发明的创伤修复促进剂用于创伤部时，与不使用本发明的创伤修复促进剂时相比，可促进作为抗炎症细胞因子之一的TGF-β的产生。需要说明的是，即使将本发明的创伤修复促进剂用于正常的上皮，也不会增加TGF-β的产生。因此，本发明的创伤修复促进剂不具有细胞毒性，安全性优异。

在将本发明的创伤修复促进剂用于创伤部(例如由于LPS刺激等而引起了炎症反应的成纤维细胞)时，与不使用本发明的创伤修复促进剂时相比，初始(例如使用后0.5～60小时、优选使用后1～48小时、特别优选使用后2～36小时)时促进IL-8产生，然后IL-8的产生变为减少的倾向。IL-8产生量也是表示炎症程度的指标，IL-8产生的减少表示炎症的程度得到改善。由此可知：本发明的创伤修复促进剂具有通过促进IL-8产生而提高嗜中性粒细胞的趋化性，从而使炎症在早期终结、加速创伤治愈的效果。

另外，即使将本发明的创伤修复促进剂用于正常的上皮(或未产生炎症反应的成纤维细胞)，也不会增加IL-8的产生。因此，本发明的创伤修复促进剂不具有细胞毒性，安全性优异。

当将本发明的创伤修复促进剂用于创伤部时，与不使用本发明的创伤修复促进剂时相比，可促进溶解坏死组织蛋白、使创伤清洁化的MMP(例如选自MMP3、MMP9、MMP13中的至少1种)的产生。需要说明的是，即使将本发明的创伤修复促进剂用于正常的上皮(或未添加TGF-β的成纤维细胞)，也不会增加MMP的产生。

另外，当将本发明的创伤修复促进剂用于创伤部时，与不使用本发明的创伤修复促进剂时相比，可促进FGF(具体为FGF2)的产生，该FGF具有促进成纤维细胞和血管内皮细胞的增殖、促进肉芽组织形成的效果。需要说明的是，即使将本发明的创伤修复促进剂用于不存在TGF-β的组织或细胞，也不会增加FGF的产生。由于生物体的创伤部为存在TGF-β的生理状态，因此，可以通过将本发明的创伤修复促进剂用于创伤部来促进FGF的产生。

另外，当将本发明的创伤修复促进剂用于创伤部时，与不使用本发明的创伤修复促进剂时相比，可促进EGF(例如双调蛋白)的产生，该EGF具有刺激成纤维细胞的增殖而促进上皮形成的效果。需要说明的是，即使将本发明的创伤修复促进剂用于正常的上皮，也不会增加EGF的产生。

另外，当将本发明的创伤修复促进剂用于创伤部时，与不使用本发明的创伤修复促进剂时相比，PDLIM2的产生得到抑制。并且，通过抑制PDLIM2的产生而诱导FGF的产生，刺激成纤维细胞的增殖。

而且，当将本发明的创伤修复促进剂用于创伤部时，与不使用本发明的创伤修复促进剂时相比，促进透明质酸(例如选自HAS1、HAS2、HAS3中的至少1种)的产生。需要说明的是，即使将本发明的创伤修复促进剂用于正常的上皮，也不会增加透明质酸的产生。

当将本发明的创伤修复促进剂用于创伤部位时，上述式(1)所示的化合物与用于控制创伤部位的炎症反应的由免疫活性细胞分泌的细胞因子(例如TGF-β等抗炎症性细胞因子)协调地进行作用，从而一次性地增加IL-8、MMP、FGF、EGF和透明质酸的产生，抑制PDLIM2的产生，由此可以发挥使炎症在早期终结、促进创伤的修复、缩短治愈所需时间的效果。

本发明的创伤修复促进剂例如可以以糊剂状、凝胶状、液状、乳液状、乳霜状的制剂形式使用。另外，可以封入容器而以气溶胶状的制剂、喷雾状的制剂形式使用。

本发明的创伤修复促进剂作为创伤(例如擦伤、裂伤、切创、挫伤、溃疡、烫伤、褥疮、糖尿病性溃疡、烧伤、炎症、细胞坏死等)的修复促进剂是有用的，可以适宜作为皮肤、粘膜[例如眼部粘膜(角膜、角膜上皮、结膜等)、鼻粘膜、口腔粘膜、胃粘膜、肠道粘膜、子宫内膜、嗅上皮等]的创伤修复促进剂来使用。

本发明的创伤修复促进剂还可以适宜地作为包含成纤维细胞的组织的创伤修复促进剂来使用。

本发明的创伤修复促进剂可以适宜地用于皮肤(表皮、真皮和皮下组织)的创伤修复，在创伤不仅伤及表皮、且连真皮的一部分也缺损之类的严重情况下，也可以发挥优异的创伤修复促进效果。即，本发明的创伤修复促进剂也可以适宜地作为真皮的创伤修复促进剂来使用。

在将本发明的创伤修复促进剂用于皮肤的创伤(优选为真皮的创伤)时，可以制备成涂布剂(软膏剂、乳霜剂、洗剂、凝胶剂等)、贴剂(绊创膏、胶带剂等)、滴鼻剂、滴眼剂等形式来使用。需要说明的是，它们可以利用常规方法来制备。

特别是在将本发明的创伤修复促进剂用于口腔粘膜时(例如用于牙周病的预防或治疗用途时)，可以制备成牙膏、液体牙膏、液状牙膏、湿牙粉(tooth wet powder)等洁齿剂、洁口剂、口腔喷雾剂、口腔涂布剂(例如口腔凝胶剂、口腔软膏)、咽喉用喷雾、含漱剂、膏剂、软糊剂、咽喉用涂布剂、咀嚼片、口含剂、滴剂、压片剂、糖果、口香糖等形式而使用。需要说明的是，它们可以按照常规方法来制备。

实施例

以下，通过实施例更具体地说明本发明，但本发明不受这些实施例的限定。

制备例1(D-2-氨基-6-膦酰基己酸一水合物的制备)

向1，4-二溴丁烷(25g、116mmol)中加入亚磷酸三乙酯(5ml、29mmol)，在搅拌下用油浴升温到140℃，在同一温度下加热30分钟后，自然冷却。在冷却到40℃附近时减压到1mmHg左右，并加热到120℃附近，由此馏去过量的二溴丁烷。作为其残渣，得到无色无异味的油状的4-溴丁基膦酸二乙酯(7.4g、收率：93％)。

向4-溴丁基膦酸二乙酯(7.4g，27mmol)中加入甲苯(20mL)、碳酸二乙酯(10mL)、乙酰胺基丙二酸二乙酯(4.4g、20mmol)和60％氢化钠(1.1g、26mmol)用己烷洗涤后的物质，在110℃下回流。回流24小时后，冷却到室温，用硅藻土滤去固体，将滤液减压浓缩，从而得到褐色油状物的2-乙酰胺基-2-[4-(二乙氧基磷酰基)丁基]丙二酸二乙酯(10.1g、收率：定量)。

将2-乙酰胺基-2-[4-(二乙氧基磷酰基)丁基]丙二酸二乙酯(10.1g)溶解于6N盐酸(50mL)，回流24小时。然后减压浓缩，得到褐色油状物的DL-2-氨基-6-膦酰基己酸·盐酸盐(3.3g、收率：65％)。

将DL-2-氨基-6-膦酰基己酸·盐酸盐(3.3g、13mmol)溶解于水(3.5mL)，在冷却至5～10℃的条件下边剧烈搅拌边滴加环氧丙烷(3.5mL、50mmol)，同时一点一点地滴加乙醇(18mL)后，在室温下搅拌3天。滤出所析出的晶体，用乙醇洗涤后，在40℃下真空干燥，得到无色粉末状的DL-2-氨基-6-膦酰基己酸一水合物(1.6g、收率：55％)。

将DL-2-氨基-6-膦酰基己酸一水合物(1.6g)和L-对羟基苯基甘氨酸(HPGM、1.4g)和水(18mL)加热溶解，在70℃下缓慢加入甲醇(30mL)后，缓慢冷却，在25℃下搅拌3小时。滤出所析出的晶体，洗涤并干燥，得到无色的粗结晶D-2-氨基-6-膦酰基己酸·L-HPGM盐一水合物(1g)。

向该粗结晶D-2-氨基-6-膦酰基己酸·L-HPGM盐一水合物(1g)中加入水(6mL)，在75℃下加热搅拌，滴加甲醇(26mL)。缓慢冷却，在15℃下搅拌3小时后，滤出所析出的晶体，洗涤并干燥，得到重结晶的D-2-氨基-6-膦酰基己酸·L-HPGM盐一水合物(0.8g)。

将重结晶的D-2-氨基-6-膦酰基己酸·L-HPGM盐一水合物(0.8g)溶解于纯水，缓慢地通入离子交换树脂(商品名“Amberlite IR-120(H+)”、Organo公司制)(5mL)中，用纯水充分洗涤后，将流出液和洗液合并，并进行浓缩。向固体残渣中加入甲醇(5mL)并分散、过滤，用甲醇洗涤后，进行干燥，得到下述式(I-3′)所示的无色晶体的D-2-氨基-6-膦酰基己酸一水合物(此后有时称为“D-AP6”)(0.4g)。

[化14]

(式中，*表示不对称原子)

实施例1～5

将下述式(II-2)所示的化合物(商品名“GGsTop”、和光纯药工业公司制、此后有时称为“Nalsgen”)用水稀释，得到制剂(1)(浓度：0.01μg/mL)、制剂(2)(浓度：0.1μg/mL)、制剂(3)(浓度：1.0μg/mL)、制剂(4)(浓度：10.0μg/mL)、制剂(5)(浓度：100μg/mL)。

[化15]

(安全性评价)

将实施例1～5中得到的制剂使用于牙龈成纤维细胞(临床样品(健康牙龈)传代数7-10次)，通过测定IL-8产生量来确认有无毒性。需要说明的是，将使用水来代替实施例1～5中得到的制剂的例子作为对照。

其结果是，实施例中得到的制剂的IL-8产生量均未超过对照，因此可确认不具有毒性(参照图1)。

(治愈促进效果的评价)

将来自牙龈红棕色单胞菌(Porphyromonas gingivalis)(P.gingivalis)的LPS(浓度：1.0μg/mL)与实施例1中得到的制剂的混合物(此后有时称为“混合物(1)”。需要说明的是，图中以“LPS+(0.01)”示出)、或者来自P.gingivalis的LPS(浓度：1.0μg/mL)与实施例2中得到的制剂的混合物(此后有时称为“混合物(2)”。需要说明的是，图中以“LPS+(0.1)”示出)用于牙龈成纤维细胞(临床样品(健康牙龈)传代数7-10次)，测定24小时后的IL-8产生量。需要说明的是，将仅使用来自P.gingivalis的LPS(浓度：1.0μg/mL)(此后有时称为“仅LPS”。需要说明的是，图中以“LPS”示出)来代替来自P.gingivalis的LPS与实施例中得到的制剂的混合物的例子作为比较例。另外，将仅使用水的例子作为对照。

其结果确认：与仅使用LPS的情况相比，使用混合物(1)或混合物(2)时确认到IL-8产生量上升(参照图2)。通过IL-8的产生上升，作为免疫活性细胞的嗜中性粒细胞的趋化性提高，从而促进治愈，由此可知混合物(1)、混合物(2)具有治愈促进效果。

(IL-8产生量的经时变化)

将来自P.gingivalis的LPS(浓度：1.0μg/mL)与实施例2中得到的制剂的混合物(＝混合物(2))用于牙龈成纤维细胞(临床样品(健康牙龈)传代数7-10次)，测定在使用起4小时后、24小时后和72小时后的IL-8产生量。另外，将仅使用LPS来代替混合物(2)的例子作为比较例，将仅使用实施例2中得到的制剂的例子(图3中称为(0.1))作为参考例，将仅使用水的例子作为对照。需要说明的是，IL-8产生量的测定通过用ELISA法测定上清液蛋白量来进行。

其结果是，4小时后和24小时的情况下，与仅使用LPS的情况相比，使用混合物(2)时的IL-8产生量高，此后使用混合物(2)时的IL-8产生变为减少倾向，72小时后，与仅使用LPS时相比，使用混合物(2)时的IL-8产生量变低(参照图3)。

(IL-8基因表达量的经时变化)

将来自P.gingivalis的LPS(浓度：1.0μg/mL)与实施例2中得到的制剂的混合物(＝混合物(2))用于牙龈成纤维细胞(临床样品(健康牙龈)传代数7-10次)，测定在使用起4小时后、8小时后和24小时后的IL-8产生量。另外，将仅使用LPS来代替混合物(2)的例子作为比较例，将仅使用实施例2中得到的制剂的例子(图4中称为(0.1))作为参考例，将仅使用水的例子作为对照。需要说明的是，IL-8基因表达量的测定中使用实时PCR法。

其结果是，4小时后和8小时的情况下，与仅使用LPS时相比，使用混合物(2)时IL-8基因表达量高，但此后，使用混合物(2)时的IL-8基因表达量变为减少倾向，24小时后，与仅使用LPS时相比，使用混合物(2)时的IL-8基因表达量变低(参照图4)。

由以上可知，本发明的创伤修复促进剂具有如下效果：在受到LPS刺激的牙龈成纤维细胞中，通过一次性地增大IL-8的产生量而使炎症在早期终结，且缩短创伤治愈所需的时间。

实施例6

将来自胎鼠的成纤维细胞播种在含有10％FCS的DMEM培养基中，培养24小时。然后，除去含有10％FCS的DMEM培养基，加入不含FCS的DMEM培养基，进一步培养24小时。然后，将Nalsgen或制备例1中得到的D-AP6以达到10μg/mL的方式添加到上述DMEM培养基中，培养5小时，然后再加入TGF-β，进一步培养5小时。培养后回收RNA或蛋白质，进行实时PCR法来定量MMP3、MMP9、MMP13、FGF、TGF-β、双调蛋白、PDLIM2和透明质酸(HSA2)。

其结果是，MMP3、MMP9、MMP13、FGF、TGF-β、双调蛋白和透明质酸在单独添加TGF-β时表达增加，但在单独添加Nalsgen或D-AP6时表达量没有变化。另外，在添加TGF-β和Nalsgen、或者TGF-β和D-AP6时，与单独添加TGF-β时相比表达量显著增大(参照图5、6、7)。

由以上可知，产生创伤时，局部性地产生TGF-β，因此，在将本发明的创伤修复促进剂使用于创伤部位时，具有TGF-β和创伤修复促进剂协调地加速创伤治愈速度这一效果的基因的表达显著亢进，使具有加快创伤治愈速度这一效果的因子增加，从而提高创伤的治愈速度。

另外，PDLIM2由于Nalsgen或D-AP6的添加而使表达受到抑制(参照图6)。

PDLIM2通过抑制成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化而抑制创伤治愈速度的过度亢进，抑制创伤部位的收缩、纤维化。

因此可知，本发明的创伤治愈促进剂通过抑制PDLIM2，结果促进创伤治愈(包含成纤维细胞的组织的创伤修复、特别是真皮的创伤修复)。

实施例7

将“Nalsgen”用水稀释，得到制剂(6)(浓度：0.005％)。

对于罹患结膜炎的家犬，将下述操作1天2次地进行5天，所述操作为：通过滴眼方式给药所得到的制剂(6)，30分钟后进行抗生剂(头孢甲肟盐酸盐0.5％)的滴眼，其结果，眼的中央部表面的白浊部分变为透明。另外，发红消退，化脓、眼眵急剧减少。

需要说明的是，上述家犬患有干眼症的症状，屡次由于细菌感染而罹患结膜炎。在开始制剂(6)的滴眼前，以1天2次的方式持续用上述抗生剂滴眼1年以上，但未得到治疗效果，眼的中央部由于白色脓而变得白浊，出现大量眼眵。

由该结果可以确认：本发明的创伤修复促进剂首先促进眼部粘膜的创伤修复，改善眼部粘膜的状态，通过在此处施加抗生素，从而能够使抗生剂的抗菌效果显著发挥，得到高治疗效果。

作为以上的总结，将本发明的构成和其变形附于以下。

[1]一种创伤修复促进剂，其包含选自式(1)所示的化合物、其盐和它们的水合物中的至少1种作为有效成分。

[2]根据[1]所述的创伤修复促进剂，其中，式(1)所示的化合物为选自式(I-1)～(I-5)所示的化合物(包括光学异构体)中的至少1种。

[3]根据[1]所述的创伤修复促进剂，其中，式(1)所示的化合物为选自式(II-1)～(II-2)所示的化合物(包括光学异构体)中的至少1种。

[4]根据[1]～[3]中任一项所述的创伤修复促进剂，其为粘膜的创伤修复促进剂。

[5]根据[1]～[3]中任一项所述的创伤修复促进剂，其为包含成纤维细胞的组织的创伤修复促进剂。

[6]根据[1]～[5]中任一项所述的创伤修复促进剂，其为牙周病的预防或治疗用制剂。

[7]根据[1]～[5]中任一项所述的创伤修复促进剂，其为包含选自式(1)所示的化合物、其盐和它们的水合物中的至少1种作为有效成分的洁齿剂、洁口剂、口腔喷雾剂、含漱剂、咀嚼片、口含剂、滴剂、压片剂、糖果、口香糖、涂布剂、贴剂、滴鼻剂或滴眼剂。

[8]一种洁齿剂、洁口剂、口腔喷雾剂、含漱剂、咀嚼片、口含剂、滴剂、压片剂、糖果、口香糖、涂布剂、贴剂、滴鼻剂或滴眼剂，其含有式(1)所示的化合物、其盐和它们的水合物。

[9]一种洁齿剂、洁口剂、口腔喷雾剂、含漱剂、咀嚼片、口含剂、滴剂、压片剂、糖果、口香糖、涂布剂、贴剂、滴鼻剂或滴眼剂，其含有0.001～500μg/mL的式(1)所示的化合物、其盐和它们的水合物。

[10]一种洁齿剂、洁口剂、口腔喷雾剂、含漱剂、咀嚼片、口含剂、滴剂、压片剂、糖果、口香糖、涂布剂、贴剂、滴鼻剂或滴眼剂，其含有选自式(I-1)～(I-5)、(II-1)～(II-2)所示的化合物、其盐和它们的水合物中的至少1种(包括光学异构体)。

[11]一种洁齿剂、洁口剂、口腔喷雾剂、含漱剂、咀嚼片、口含剂、滴剂、压片剂、糖果、口香糖、涂布剂、贴剂、滴鼻剂或滴眼剂，其含有0.001～500μg/mL的选自式(I-1)～(I-5)、(II-1)～(II-2)所示的化合物、其盐和它们的水合物中的至少1种(包括光学异构体)。

[12]一种糊剂状、凝胶状、液状、乳液状、乳霜状、气溶胶状或喷雾状制剂，其含有式(1)所示的化合物、其盐和它们的水合物。

[13]一种糊剂状、凝胶状、液状、乳液状、乳霜状、气溶胶状或喷雾状制剂，其含有0.001～500μg/mL的式(1)所示的化合物、其盐和它们的水合物。

[14]一种糊剂状、凝胶状、液状、乳液状、乳霜状、气溶胶状或喷雾状制剂，其含有选自式(I-1)～(I-5)、(II-1)～(II-2)所示的化合物、其盐和它们的水合物中的至少1种(包括光学异构体)。

[15]一种糊剂状、凝胶状、液状、乳液状、乳霜状、气溶胶状或喷雾状制剂，其含有0.001～500μg/mL的选自式(I-1)～(I-5)、(II-1)～(II-2)所示的化合物、其盐和它们的水合物中的至少1种(包括光学异构体)。

[16]根据[1]～[3]中任一项所述的创伤修复促进剂，其为眼部粘膜的创伤修复促进剂。

[17]根据[1]～[3]中任一项所述的创伤修复促进剂，其为结膜的创伤修复促进剂。

[18]根据[1]～[3]中任一项所述的创伤修复促进剂，其为角膜的创伤修复促进剂。

Claims

1.包含选自下述式(1’)所示的化合物、其碱金属盐、碱土金属盐、与碱性氨基酸的盐、与无机酸的盐和与有机酸的盐中的至少1种作为有效成分的组合物在制备眼部粘膜的创伤修复促进剂中的应用，

式(1’)中，R¹表示C_1-4烷基取代苯基，R²表示氢原子或碳原子数1-3的烷基，所述C_1-4烷基取代苯基及碳原子数1-3的烷基任选具有1个或2个以上的选自卤素原子、-COOH、-SO₃H和-SO₂NH₂中的基团作为取代基，n表示1～6的整数。

2.包含选自下述式(1”)所示的化合物、其碱金属盐、碱土金属盐、与碱性氨基酸的盐、与无机酸的盐和与有机酸的盐以及它们的一水合物中的至少1种作为有效成分的组合物在制备口腔粘膜的创伤修复促进剂中的应用，

式(1”)中，R¹、R²相同或不同，表示氢原子或碳原子数1-3的烷基，所述碳原子数1-3的烷基任选具有1个或2个以上的选自卤素原子、-COOH、-SO₃H和-SO₂NH₂中的基团作为取代基，n表示1～6的整数。

3.包含选自下述式(1”)所示的化合物、其碱金属盐、碱土金属盐、与碱性氨基酸的盐、与无机酸的盐和与有机酸的盐以及它们的一水合物中的至少1种作为有效成分的组合物在制备牙周病的预防或治疗用制剂中的应用，

4.包含选自下述式(1)所示的化合物、其碱金属盐、碱土金属盐、与碱性氨基酸的盐、与无机酸的盐和与有机酸的盐、以及由下述式(1)表示、且式(1)中的R¹、R²相同或不同地表示氢原子或碳原子数1-3的烷基的化合物或其所述盐的一水合物中的至少1种作为有效成分的组合物在制备结膜的创伤修复促进剂中的应用，

式(1)中，R¹、R²相同或不同，表示氢原子、碳原子数1-3的烷基或C_1-4烷基取代苯基，所述碳原子数1-3的烷基和C_1-4烷基取代苯基任选具有1个或2个以上的选自卤素原子、-COOH、-SO₃H和-SO₂NH₂中的基团作为取代基，n表示1～6的整数。

5.包含选自下述式(1)所示的化合物、其碱金属盐、碱土金属盐、与碱性氨基酸的盐、与无机酸的盐和与有机酸的盐、以及由下述式(1)表示、且式(1)中的R¹、R²相同或不同地表示氢原子或碳原子数1-3的烷基的化合物或其所述盐的一水合物中的至少1种作为有效成分的组合物在制备角膜的创伤修复促进剂中的应用，