CN110530997B - 9-(2-羟丙基)腺嘌呤对映体的检测方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了9‑(2‑羟丙基)腺嘌呤对映体的检测方法，利用高效液相色谱分析对(R)‑(+)‑9‑(2‑羟丙基)腺嘌呤以及其对映体进行检测，包括以下步骤：将流动相与样品进行混合，上样后利用流动相进行洗脱；其中，色谱柱是以多糖涂敷型硅胶为填充剂形成的手性色谱柱。该检测方法能够实现R‑HPA及其对映体的有效分离和检测，能够更好地实现对中间体R‑HPA的质量控制，从而提高了最终产品的品质，保证了其临床用药的安全有效。同时，该检测方法操作简便、成本低和分析时间短，为产品的研发和生产提供了简便、稳定、可靠的分析检测方法。

Description

9-(2-羟丙基)腺嘌呤对映体的检测方法
技术领域
本发明涉及对映体分析技术领域，具体而言，涉及9-(2-羟丙基)腺嘌呤对映体的检测方法。
背景技术
(R)-(+)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤：分子量为193.21，简称R-HPA，其化学结构式为：
Figure BDA0002197750240000011
(S)-(-)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤：分子量为193.21，简称S-HPA，其化学结构式为：
Figure BDA0002197750240000012
富马酸替诺福韦二吡呋酯(TDF)是一种新型核苷酸类逆转录酶抑制剂，由吉利德公司研究开发，美国FDA分别于2001年和2008年批准其用于治疗艾滋病(HIV)和成人的慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B，CHB)。国内外的多项研究显示，TDF具有强大的抗HBV作用及低耐药性，对多种NAs治疗失败的CHB患者均有效，被美国肝病学会及欧洲肝病学会指南等国内外众多指南推荐为一线治疗药物。
R-HPA是富马酸替诺福韦二吡呋酯合成过程中的第一步关键中间体，它的质量好坏直接影响成品富马酸替诺福韦二吡呋酯的质量好坏。对于富马酸替诺福韦二吡呋酯，目前进口注册标准中规定其对映体的含量不得超过1.0％，该对映体刚好是在R-HPA反应这一步引入，所以在合成过程中，开发具有专属性的方法来检测控制R-HPA中间体的对映体含量，并制定合理可行的对映体杂质限度，是R-HPA中间体质量控制的重要部分，也是保证富马酸替诺福韦二吡呋酯及其制剂产品质量的重要部分。
但是目前还没有合适的分析手段来控制R-HPA其对映体含量，也就无法控制R-HPA对映体含量，不利于企业对产品质量的把控，所以目前亟需一种对R-HPA及其对映体的分离分析的常规方法。
鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本发明的目的在于提供9-(2-羟丙基)腺嘌呤对映体的检测方法，其能够有效分离和检测R-HPA及其对映体，能够更好地实现对中间体R-HPA的质量控制，从而提高了最终产品的品质，保证了其临床用药的安全有效。
本发明是这样实现的：
第一方面，本发明实施例提供一种9-(2-羟丙基)腺嘌呤对映体的检测方法，利用高效液相色谱分析对(R)-(+)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤以及其对映体进行检测，包括以下步骤：将流动相与样品进行混合，上样后利用流动相进行洗脱；其中，色谱柱是以多糖涂敷型硅胶为填充剂形成的手性色谱柱。
在可选的实施方式中，流动相包括正己烷、正丁醇和二乙胺；
优选地，流动相为正己烷、正丁醇和二乙胺混合形成的混合溶液。
在可选的实施方式中，所述正己烷和所述正丁醇的体积比为(75：25)-(85:15)；优选为80:20。
在可选的实施方式中，所述二乙胺的添加量为所述正己烷和所述正丁醇的总添加量的0.1-0.2％，优选为0.1％。
在可选的实施方式中，所述色谱柱的型号为DAICEL CHIRALPAK OZ-H，内径为4.6mm，长度为250mm，填充剂粒径为5μm。
在可选的实施方式中，洗脱为等梯度洗脱；
优选地，洗脱的条件为：流动相的流速为1.0-1.5ml/min，优选为1.0ml/min；
优选地，洗脱时间为20-35分钟，优选为25分钟。
在可选的实施方式中，样品浓度为0.1mg/ml，(S)-(-)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤的浓度为≥0.06ug/ml；优选为1ug/ml。
在可选的实施方式中，进行高效液相色谱分析检测的(R)-(+)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤和(S)-(-)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤的分离度大于1.25，优选为1.81以上，更优选为18.1-1.86。
在可选的实施方式中，高效液相色谱分析检测是利用波长为255～265纳米的紫外光进行检测，优选地，波长为260纳米。
在可选的实施方式中，检测后，根据色谱图，采用峰面积归一化法计算待测品中(R)-(+)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤及其对映体的含量。
本发明具有以下有益效果：通过本发明的检测方法能够实现R-HPA及其对映体的有效分离和检测，能够更好地实现对中间体R-HPA的质量控制，从而提高了最终产品的品质，保证了其临床用药的安全有效。同时，该检测方法操作简便、成本低和分析时间短，为产品的研发和生产提供了简便、稳定、可靠的分析检测方法。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为本发明实施例1提供的HPLC分析图；
图2为本发明实施例2提供的HPLC分析图；
图3为本发明实施例3提供的HPLC分析图；
图4为本发明实验例1提供的HPLC分析图；
图5为本发明实验例2提供的HPLC分析图；
图6为本发明实验例3提供的HPLC分析图；
图7为本发明实验例4提供的HPLC分析图；
图8为本发明实验例5提供的HPLC分析图；
图9为本发明实验例6提供的HPLC分析图；
图10为本发明实验例7提供的HPLC分析图；
图11为本发明实验例8提供的HPLC分析图；
图12为本发明实验例9提供的HPLC分析图；
图13为本发明实验例10提供的HPLC分析图；
图14为本发明实验例11提供的HPLC分析图；
图15为本发明实验例12提供的S-HPA对照品溶液的HPLC分析图；
图16为本发明实验例12提供的R-HPA对照品溶液的HPLC分析图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
本发明实施例提供了一种9-(2-羟丙基)腺嘌呤对映体的检测方法，其利用高效液相色谱分析对(R)-(+)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤以及其对映体进行检测，具体地，包括以下步骤：
首先，配制流动相；
流动相包括正己烷、正丁醇和二乙胺；
优选地，流动相为正己烷、正丁醇和二乙胺混合形成的混合溶液。
进一步地优选地，所述正己烷和所述正丁醇的体积比为(75：25)-(85:15)；优选为80:20。
二乙胺的添加量为所述正己烷和所述正丁醇的总添加量的0.1-0.2％，优选为0.1％。
正己烷、正丁醇和二乙胺上述比例能够良好的溶解样品，同时，有良好的洗脱能力，有利于(R)-(+)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤和(S)-(-)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤的分离，继而保证检测的准确性。
而后利用流动相与样品进行混合，而后进行上样，也就是将样品溶液注入到高效色谱仪中的手性色谱柱中，其中，色谱柱是以多糖涂敷型硅胶为填充剂形成的手性色谱柱，采用该特定的色谱柱，能够保证(R)-(+)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤和(S)-(-)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤的分离，继而保证检测的准确性。
进一步地，色谱柱的型号为DAICEL CHIRALPAK OZ-H，内径为4.6mm，长度为250mm，填充剂粒径为5μm。采用上述色谱柱，能够更有利于将对映异构体进行分离，保证分离效果，提升检测结果的准确性。
上样后利用流动相进行洗脱，洗脱为等梯度洗脱；
优选地，洗脱的条件为：流动相的流速为1.0-1.5ml/min，优选为1.0ml/min；
优选地，洗脱时间为20-35分钟，优选为25分钟。
采用上述方式进行洗脱，有利于(R)-(+)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤和(S)-(-)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤的分离，保证检测的准确性。
并使用波长为255～265纳米的紫外光进行检测，优选地，波长为260纳米。
检测后，根据色谱图，采用峰面积归一化法计算待测品中(R)-(+)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤及其对映体的含量。
进行高效液相色谱分析检测的(R)-(+)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤和(S)-(-)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤的分离度大于1.25，优选为1.81以上，更优选为1.81-1.86。
其具有良好的分离度，进一步说明了该检测方法可以实现(R)-(+)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤和(S)-(-)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤的分离，保证检测的准确性。
进一步地，(S)-(-)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤的浓度为≥0.06ug/ml；优选为1ug/ml。采用上述检测线能够保证检测的准确性。
实施例1
进行反应合成R-HPA，向500mL三口瓶中加入N,N-二甲基乙酰胺300mL、腺嘌呤60.0g、R-(+)-碳酸丙烯酯60.0g及氢氧化钠1.5g后，搅拌升温至130～140℃反应4～5h(HPLC监测反应腺嘌呤含量低于0.5％)。
降温，60℃～80℃搅拌下加入异丙醇360mL，有大量白色固体析出，继续降温至0～5℃搅拌3h，抽滤。
滤饼60～70℃鼓风干燥，得白色或类白色固体即为R-HPA。
检测方法：
仪器：Agilent 1200高效液相色谱仪，采用DAICEL CHIRALPAK OZ-H型手性色谱柱，内径为4.6mm，长度为250mm，该手性色谱柱以多糖涂敷型硅胶为填充剂，填充剂粒径为5μm。
试剂：正己烷、正丁醇和二乙胺均为色谱级纯。
采用上述合成方法合成得到的中间体作为样品，而后称取样品5毫克，置于50ml量瓶中，加流动相使溶解并稀释至刻度，摇匀即得；流动相中正己烷和正丁醇的体积比为80:20，乙二胺的用量为正己烷和正丁醇总用量的0.1％。
开启紫外光吸收检测器，将待测品溶液注入到高效色谱仪中的手性色谱柱中，再用流动相进行冲洗，具体色谱条件如下：
检测波长：UV-260纳米；流速：1.0ml/min；冲洗时间：32min；进样量：10μl；柱温：35℃。
所得HPLC如图1所示，根据色谱峰算出R-HPA及其对映体的分离度以及采用峰面积归一化法计算R-HPA其对映异构体的含量；
S-HPA的保留时间为14.7min，含量为0.14％；R-HPA的保留时间为16.1min，含量为99.86％，二者之间的分离度为1.81。
实施例2-实施例3
重复实施例1提供的合成方法合成得到样品，实施例2-实施例3的检测方法也是重复实施例1的检测方法，检测结果分别参见图2和图3。
根据图2可知，实施例2的检测结果为：S-HPA的保留时间为14.3min，含量为0.16％；R-HPA的保留时间为15.7min，含量为99.84％，二者之间的分离度为1.84。
根据图3可知，实施例3的检测结果为：S-HPA的保留时间为14.3min，含量为0.17％；R-HPA的保留时间为15.6min，含量为99.83％，二者之间的分离度为1.86。
实施例2和实施例3为实施例1的重复操作，检测后分离度均高于1.81，说明本发明的检测方法可以有效检测合成的中间体中R-HPA和S-HPA的含量，二者能够良好的分离。
实验例
实验例1-实验例10
仪器：Agilent 1200高效液相色谱仪，采用DAICEL CHIRALPAK OZ-H型手性色谱柱，内径为4.6mm，长度为250mm，该手性色谱柱以多糖涂敷型硅胶为填充剂，填充剂粒径为5μm。
试剂：正己烷、正丁醇和二乙胺均为色谱级纯。
R-HPA对照品和S-HPA对照品采购自TLC Pharmaceutical Standards，纯度分别为99.7％和99.40％。
流动相的配制方法如下：配制正己烷和正丁醇的混合溶液，其体积比为(75:25)～(85:15)，并加入一定量的二乙胺，二乙胺的用量占正己烷和正丁醇总用量的0.1％～0.2％。
混合对照品溶液的配制方法如下：
1、R-HPA对照品贮备液的配制：称取R-HPA对照品约10mg，置于10ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀即得；
2、S-HPA对照品贮备液的配制：称取S-HPA对照品约1mg，置于100ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀即得；
3、混合对照品溶液的配制：精密移取R-HPA对照品贮备液和S-HPA对照品贮备液各1ml置于同一10ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀即得。
实验例1
1、开启紫外光吸收检测器，将混合对照品溶液注入到高效色谱仪中的手性色谱柱中，再用流动相进行冲洗，具体色谱条件如下：
检测波长：UV-260纳米；
流动相：正己烷：正丁醇＝75:25，二乙胺的用量占正己烷和正丁醇总用量的0.1％；
流速：1.0ml/min；
冲洗时间：20min；
进样量：10μl；
柱温：30℃。
2、所得HPLC如图4所示，根据色谱峰算出R-HPA及其对映体的出峰时间和分离度。
3、结果如下：
S-HPA的保留时间为11.7min，含量为0.96％；R-HPA的保留时间为12.6min，含量为99.04％，二者之间的分离度为1.25。
实验例2
1、开启紫外光吸收检测器，将混合对照品溶液注入到高效色谱仪中的手性色谱柱中，再用流动相进行冲洗，具体色谱条件如下：
检测波长：UV-260纳米
流动相：正己烷：正丁醇＝80:20，二乙胺的用量占正己烷和正丁醇总用量的0.1％；
流速：1.0ml/min；
冲洗时间：35min；
进样量：10μl；
柱温：30℃。
2、所得HPLC如图5所示，根据色谱峰算出R-HPA及其对映体的出峰时间和分离度。
3、结果如下：
S-HPA对照品的保留时间为16.4min，含量为0.98％；R-HPA对照品的保留时间为18.0min，含量为99.02％，二者之间的分离度为1.46。
实验例3
1、开启紫外光吸收检测器，将混合对照品溶液注入到高效色谱仪中的手性色谱柱中，再用流动相进行冲洗，具体色谱条件如下：
检测波长：UV-260纳米
流动相：正己烷：正丁醇＝85:15，二乙胺的用量占正己烷和正丁醇总用量的0.1％；
流速：1.0ml/min；
冲洗时间：35min；
进样量：10μl；
柱温：30℃。
2、所得HPLC如图6所示，根据色谱峰算出R-HPA及其对映体的出峰时间和分离度。
3、结果如下：
S-HPA对照品的保留时间为24.9min，含量为1.02％；R-HPA对照品的保留时间为27.3min，含量为98.98％，二者之间的分离度为1.46。
实验例4：
1、开启紫外光吸收检测器，将混合对照品溶液注入到高效色谱仪中的手性色谱柱中，再用流动相进行冲洗，具体色谱条件如下：
检测波长：UV-260纳米
流动相：正己烷：正丁醇＝80:20，二乙胺的用量占正己烷和正丁醇总用量的0.2％；
流速：1.0ml/min；
冲洗时间：25min；
进样量：10μl；
柱温：30℃。
2、所得HPLC如图7所示，根据色谱峰算出R-HPA及其对映体的出峰时间和分离度。
3、结果如下：
S-HPA对照品的保留时间为16.1min，含量为1.02％；R-HPA对照品的保留时间为17.7min，含量为98.98％，二者之间的分离度为1.49。
实验例5
1、开启紫外光吸收检测器，将混合对照品溶液注入到高效色谱仪中的手性色谱柱中，再用流动相进行冲洗，具体色谱条件如下：
检测波长：UV-260纳米
流动相：正己烷：正丁醇＝80:20，二乙胺的用量占正己烷和正丁醇总用量的0.1％；
流速：1.2ml/min；
冲洗时间：20min；
进样量：10μl；
柱温：30℃。
2、所得HPLC如图8示，根据色谱峰算出R-HPA及其对映体的出峰时间和分离度。
3、结果如下：
S-HPA对照品的保留时间为13.3min，含量为0.99％；R-HPA对照品的保留时间为14.7min，含量为99.01％，二者之间的分离度为1.49。
实验例6
1、开启紫外光吸收检测器，将混合对照品溶液注入到高效色谱仪中的手性色谱柱中，再用流动相进行冲洗，具体色谱条件如下：
检测波长：UV-260纳米
流动相：正己烷：正丁醇＝80:20，二乙胺的用量占正己烷和正丁醇总用量的0.1％；
流速：1.5ml/min；
冲洗时间：20min；
进样量：10μl；
柱温：30℃。
2、所得HPLC如图9示，根据色谱峰算出R-HPA及其对映体的出峰时间和分离度。
3、结果如下：
S-HPA对照品的保留时间为10.8min，含量为0.98％；R-HPA对照品的保留时间为11.9min，含量为99.02％，二者之间的分离度为1.31。
实验例7
1、开启紫外光吸收检测器，将混合对照品溶液注入到高效色谱仪中的手性色谱柱中，再用流动相进行冲洗，具体色谱条件如下：
检测波长：UV-260纳米
流动相：正己烷：正丁醇＝80:20，二乙胺的用量占正己烷和正丁醇总用量的0.1％；
流速：1.0ml/min；
冲洗时间：25min；
进样量：10μl；
柱温：25℃。
2、所得HPLC如图10，根据色谱峰算出R-HPA及其对映体的出峰时间和分离度。
3、结果如下：
S-HPA对照品的保留时间为17.4min，含量为0.97％；R-HPA对照品的保留时间为19.0min，含量为99.03％，二者之间的分离度为1.27。
实验例8
1、开启紫外光吸收检测器，将混合对照品溶液注入到高效色谱仪中的手性色谱柱中，再用流动相进行冲洗，具体色谱条件如下：
检测波长：UV-260纳米
流动相：正己烷：正丁醇＝80:20，二乙胺的用量占正己烷和正丁醇总用量的0.1％；
流速：1.0ml/min；
冲洗时间：25min；
进样量：10μl；
柱温：35℃。
2、所得HPLC如图11示，根据色谱峰算出R-HPA及其对映体的出峰时间和分离度。
3、结果如下：
S-HPA对照品的保留时间为14.9min，含量为0.98％；R-HPA对照品的保留时间为16.3min，含量为99.02％，二者之间的分离度为1.64。
实验例9
1、开启紫外光吸收检测器，将混合对照品溶液注入到高效色谱仪中的手性色谱柱中，再用流动相进行冲洗，具体色谱条件如下：
检测波长：UV-255纳米
流动相：正己烷：正丁醇＝80:20，二乙胺的用量占正己烷和正丁醇总用量的0.1％；
流速：1.0ml/min；
冲洗时间：22min；
进样量：10μl；
柱温：35℃。
2、所得HPLC如图12示，根据色谱峰算出R-HPA及其对映体的出峰时间和分离度。
3、结果如下：
S-HPA对照品的保留时间为14.8min，含量为1.00％；R-HPA对照品的保留时间为16.3min，含量为99.00％，二者之间的分离度为1.66。
实验例10
1、开启紫外光吸收检测器，将混合对照品溶液注入到高效色谱仪中的手性色谱柱中，再用流动相进行冲洗，具体色谱条件如下：
检测波长：UV-265纳米
流动相：正己烷：正丁醇＝80:20，二乙胺的用量占正己烷和正丁醇总用量的0.1％；
流速：1.0ml/min；
冲洗时间：22min；
进样量：10μl；
柱温：35℃。
2、所得HPLC如图13示，根据色谱峰算出R-HPA及其对映体的出峰时间和分离度。
3、结果如下：
S-HPA对照品的保留时间为14.8min，含量为0.98％；R-HPA对照品的保留时间为16.3min，含量为99.02％，二者之间的分离度为1.67。
实验例11
混合对照品溶液的配制方法如下：
1、R-HPA对照品贮备液的配制：称取R-HPA对照品约10mg，置于10ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀即得。
2、S-HPA对照品贮备液的配制：称取S-HPA对照品约1mg，置于100ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，再精密移取上述溶液2ml，置于10ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀即得。
3、混合对照品溶液的配制：精密移取R-HPA对照品贮备液和S-HPA对照品贮备液各1ml置于同一10ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀即得。
开启紫外光吸收检测器，将待测品溶液注入到高效色谱仪中的手性色谱柱中，再用流动相进行冲洗，具体色谱条件如下：
检测波长：UV-260纳米；流速：1.0ml/min；冲洗时间：32min；进样量：10μl；柱温：35℃。
所得HPLC如图14所示，根据色谱峰算出R-HPA及其对映体的分离度以及采用峰面积归一化法计算R-HPA其对映异构体的含量；
S-HPA的保留时间为14.7min，含量为0.19％；R-HPA的保留时间为16.1min，含量为99.91％，二者之间的分离度为1.81。
实验例12
在实验例1的检测条件下分别对实验例1提供的S-HPA对照品溶液和R-HPA对照品溶液进行高效液相色谱分析检测，检测结果参见图15和图16。
采用本发明的检测方法实现R-HPA及其对映体的有效分离和检测，能够更好地实现对中间体R-HPA的质量控制，从而提高了最终产品的品质，保证了其临床用药的安全有效。同时，该检测方法操作简便、成本低和分析时间短，为产品的研发和生产提供了简便、稳定、可靠的分析检测方法。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (14)

1.一种9-(2-羟丙基)腺嘌呤对映体的检测方法，其特征在于，利用高效液相色谱分析对(R)-(+)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤以及其对映体进行检测，包括以下步骤：将流动相与样品进行混合，上样后利用流动相进行洗脱；其中，色谱柱是以多糖涂敷型硅胶为填充剂形成的手性色谱柱;且所述色谱柱的型号为DAICELCHIRALPAKOZ-H，流动相为正己烷、正丁醇和二乙胺混合形成的混合溶液,所述正己烷和所述正丁醇的体积比为（75：25）-（85:15）；所述二乙胺的添加量为所述正己烷和所述正丁醇的总添加量的0.1-0.2%。
2.根据权利要求1所述的9-(2-羟丙基)腺嘌呤对映体的检测方法，其特征在于，所述正己烷和所述正丁醇的体积比为80:20。
3.根据权利要求1所述的9-(2-羟丙基)腺嘌呤对映体的检测方法，其特征在于，所述二乙胺的添加量为所述正己烷和所述正丁醇的总添加量的0.1%。
4.根据权利要求1所述的9-(2-羟丙基)腺嘌呤对映体的检测方法，其特征在于，所述色谱柱的内径为4.6mm，长度为250mm，填充剂粒径为5μm。
5.根据权利要求1所述的9-(2-羟丙基)腺嘌呤对映体的检测方法，其特征在于，洗脱为等梯度洗脱，洗脱的条件为：流动相的流速为1.0-1.5ml/min，洗脱时间为20-35分钟。
6.根据权利要求5所述的9-(2-羟丙基)腺嘌呤对映体的检测方法，其特征在于，洗脱的条件为：流动相的流速为1.0ml/min；洗脱时间为25分钟。
7.根据权利要求1所述的9-(2-羟丙基)腺嘌呤对映体的检测方法，其特征在于，(S)-(-)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤的浓度为≥0.06ug/ml。
8.根据权利要求7所述的9-(2-羟丙基)腺嘌呤对映体的检测方法，其特征在于，(S)-(-)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤的浓度为1ug/ml。
9.根据权利要求1所述的9-(2-羟丙基)腺嘌呤对映体的检测方法，其特征在于，进行高效液相色谱分析检测的(R)-(+)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤和(S)-(-)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤的分离度大于1.25。
10.根据权利要求1所述的9-(2-羟丙基)腺嘌呤对映体的检测方法，其特征在于，进行高效液相色谱分析检测的(R)-(+)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤和(S)-(-)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤的分离度为1.81以上。
11.根据权利要求1所述的9-(2-羟丙基)腺嘌呤对映体的检测方法，其特征在于，进行高效液相色谱分析检测的(R)-(+)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤和(S)-(-)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤的分离度为1.81-1.86。
12.根据权利要求1所述的9-(2-羟丙基)腺嘌呤对映体的检测方法，其特征在于，高效液相色谱分析检测是利用波长为255~265纳米的紫外光进行检测。
13.根据权利要求12所述的9-(2-羟丙基)腺嘌呤对映体的检测方法，其特征在于，波长为260纳米。
14.根据权利要求12所述的9-(2-羟丙基)腺嘌呤对映体的检测方法，其特征在于，检测后，根据色谱图，采用峰面积归一化法计算待测品中(R)-(+)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤及其对映体的含量。
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