CN110522713A - 一种抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜，其组成成分及重量份数如下：奶基质脂质体10‑60份，活性多肽0.1‑1份，人参皂苷0.1‑1份，酵母精华0.002‑0.01份，甜杏仁油3‑10份，吐温800.1‑2份，司盘800.1‑2份，黄原胶0.2‑2份，海藻酸钠0.1‑1份，α‑红没药醇0.2‑1份，茶多酚1‑3份，维生素E 0.1‑5份，透明质酸0.01‑1份，海藻糖1‑5份，ε‑聚赖氨酸0.01‑3份，蒸馏水补足至100份。本眼霜具有淡化眼部黑眼圈，抗皱和祛除脂肪粒的效果。除此之外，本发明首次将红没药醇和聚赖氨酸联合使用，替代化学防腐剂，消除对于敏感肌肤的刺激作用。

Description

一种抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜及其制备 方法

技术领域

本发明属于化妆品技术领域，尤其是一种抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜及其制备方法。

背景技术

活性多肽，是从植物中提取的一种水溶性蛋白，具有强效减除肌肤黑色素，淡化及阻止黑色素的形成，显著增加肌肤的保温锁水能力，减除皮肤表面的老化细胞，软化皮肤角质化细胞，促进细胞新陈代谢，加速毛细血管的微循环，增强细胞之间的胶原带白的连接力，令肌肤净白，柔软，晶莹，充满弹性，是国内外公认的氧自由基的专一清除剂。具有抗衰老作用，可直接被人体迅速吸收、参与调节新陈代谢过程，是护肤美容化妆品中必不可少的重要原料。

人参皂苷是从人参中提取的天然成分，具有强效减除肌肤黑色素，淡化及阻止黑色素的形成，显著增加肌肤锁水能力，软化皮肤角质化细胞，促进细胞新陈代谢，加速毛细血管的微循环，增强细胞之间的胶原带白的连接力，令肌肤净白，柔软，晶莹，充满弹性的功能。

酵母精华多做皮肤调理剂使用，该成分含有丰富的天然氨基酸中的各种营养成分，能够抑制酪氨酸酶活性，从而达到抑制黑色素、美白、长效保湿以及加速老化角质层细胞更新换代的作用，并且具有良好的安全性和稳定性，常用于化妆品中。

皮肤分为表皮和真皮。表皮是皮肤的浅层结构，由复层扁平上皮构成。从基底层到表面可分为五层，即基底层、棘层、颗粒层、透明层和角质层。基底层：位于表皮的最深层，借基膜与深层的真皮相连。基底层是一层矮柱状上皮细胞。细胞较小、排列整齐，核呈卵圆形胞质中常含有黑色素颗粒。矮柱状上皮细胞之间有黑色素细胞。黑色素细胞略呈圆形，有树枝状突起，胞核较小，能产生黑色素颗粒。基底层的细胞分裂比较活跃，不断产生新细胞并向浅层推移，以补充衰老、脱落的角质细胞。因此，也称生发层。普通眼霜仅能起到滋润角质层的作用，难以将活性成分递送至基底层发挥作用。

纳米技术为美容化妆品行业带来了巨大的变化，其中脂质体粒径在50～200nm。包覆油溶性和水溶性的各种活性成分和营养物质的脂质体，由于其结构组成类似于生物膜，磷脂双分子层形成的囊泡结构具有弹性，可穿过皮肤而渗透到深层，被包覆的有效成分在表皮、真皮内沉积而形成存储库，作用于皮肤基底层，在细胞内外直接、持久地发挥作用，从而实现对皮肤的润湿、防皱、抗衰老、去雀斑、防粉刺等各种保健美容作用。脂质体在皮肤学和化妆品学方面的研究正蓬勃发展，含脂质体的化妆品具有传统化妆品不可比拟的优点，它的通透性、缓释性、保湿性、安全性将使化妆品向高质量、高档次的方向发展，而包载活性多肽、人参皂苷、酵母精华的脂质体，可直接携带活性成分进入皮肤深处，作用于黑色素细胞，具有减少皮肤色素沉着，提亮眼周，抗皱去脂肪粒的作用。

ε-聚赖氨酸是一种具有抑菌功效的多肽，这种生物防腐剂在80年代就首次应用于食品防腐。ε-聚赖氨酸能在人体内分解为赖氨酸，而赖氨酸是人体必需的8种氨基酸之一，因此ε-聚赖氨酸安全性高于其他化学防腐剂。ε-聚赖氨酸作为一种食品防腐剂可以食用，作为防腐剂应用于皮肤时其安全性要高于其他类型的防腐剂。ε-聚赖氨酸抑菌谱广，对于酵母属的尖锐假丝酵母菌、法红酵母菌、产膜毕氏酵母、玫瑰掷孢酵母；革兰氏阳性菌中的耐热脂肪芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌；革兰氏阴性菌中的产气节杆菌、大肠杆菌等都有明显的抑制和杀灭作用。

随着现代生物技术的进步及市场的发展，原奶和奶制品及其提取物已越来越广泛地应用在化妆品中。比如牛奶因含有丰富的营养成分及天然来源等特点受到爱美人士的喜爱，其良好的保湿、美白、抗衰老、修复等功效可美容养颜，应用在化妆品中，赋予产品各种功效。酪蛋白主要来源于牛乳的磷蛋白，可作为保湿剂、营养剂和调理剂添加到化妆品中，同时有增加其他活性成分的作用。牛奶中含有丰富的烟酸、抗坏血酸、乳清酸、维生素A。其中在皮肤用品中加入烟酸可显著减轻一些合成化合物对皮肤的刺激感，有活血和增进血液流通的功效；抗坏血酸对酪氨酸酶有不可逆的抑制作用；乳清酸用于护肤品中，不仅有营养和调理作用，与维生素A等协同使用可防止皮肤色素沉着。从牛乳中分离得到的乳铁蛋白对过氧化物自由基有一定的清除作用，也可协助其他物质更好的发挥作用；牛奶中的乳铁蛋白也是很好的天然抑菌剂，具有广谱抑菌作用，既抑制需铁的革兰氏阴性菌，也可抑制革兰氏阳性菌，它在化妆品中发挥护肤功效的同时还具有抑菌防腐作用。

黄原胶是由甘蓝黑腐病黄单胞菌发酵产生的一种大分子细胞外杂多糖，在水溶液中形成刚性的双螺旋构象，稳定性高。黄原胶溶液是典型的假塑性流体，其粘度随剪切速率的增加而急剧下降。在高剪切速率时，黄原胶溶液粘度较低，使其很容易被混合；在低剪切速率时，溶液具有高粘度，具有良好的增稠性，可作为增稠剂应用于化妆品中。

海藻酸钠是从褐藻类的海带或马尾藻中提取碘和甘露醇之后的副产物，是一种天然多糖，具有稳定性、溶解性、粘性和安全性。海藻酸钠用于化妆品中能增加肌肤的保水性、紧缩性及弹性，使松弛的肌肤回复年轻状态，并可因此达到祛除皱纹的目的。

α-红没药醇是存在于春黄菊花中的一种成分，具有降低皮肤炎症、抑菌抗刺激、活血止痛等多种生物活性，而且有很好的稳定性和皮肤相容性，主要应用在皮肤保护和皮肤护理化妆品中。

茶多酚具有很好地抗氧化性、抗衰老、抑菌、清除自由基、改善异味等性能。它被认为是绿色环保的天然成品，在化妆品灵域应用广泛。

海藻糖是一种天然的糖类，有较好的配伍性、相容性和稳定性，几乎可以添加到任何化妆品中。它能够抑制化妆品中脂肪酸及酯类的氧化酸败，保持各种蛋白质及多肽类活性成分的功效，还具有优异的保水性和吸湿性，透明质酸与海藻糖联合应用，互补增效，兼具生物保鲜和智能保湿作用，可以始终保持组织和皮肤及化妆品本身的“新鲜”。

以奶、豆奶或奶制品为基质制备脂质体，包载多种活性成分，一方面脂质体本身对于皮肤具有滋润营养作用，另一方面可以携带活性成分进入皮肤深层发挥作用，从根本上改善眼周皮肤状况，具有十分重要的意义。

现有眼霜产品中活性成分仅停留于皮肤角质层，难以进入基底层细胞，发挥抗氧化抗皱、去黑眼圈、去脂肪粒、改善皮肤状态的根本作用，大多只能在角质层起到保湿润肤的效果。活性成分因为缺乏好的皮肤深层递送系统而大多被浪费，不能达到理想效果。

通过检索，发现如下一篇与本发明专利申请相关的专利公开文献：

一种具有皮肤修复功能的复合多肽纳米囊泡及其制备方法和应用(CN109875910A)，所述复合多肽纳米囊泡，包括如下重量份的组分：再生修复活性多肽0.01～1份、抗氧化活性多肽0.01～1份、天然保湿活性因子0.1～5份、促进微循环活性成分0.01～1份、类脂壁材5～20份、胆甾醇0.1～5份、多元醇10～45份和水30～98份。本发明针对皮肤屏障不同修复机理，提供了作用于不同靶点的修复组分，同时，采用纳米囊泡包裹各种亲水、亲油性活性成份，并利用其独特的闭合脂质双层结构，显著提高修复组合物的稳定性，促进皮肤渗透量，有效控制活性成分缓释并提高修复效果。

通过对比，本发明专利申请与上述专利公开文献存在本质不同。

发明内容

本发明目的在于克服现有技术中治疗角膜损伤方式的局限性的不足之处，提供一种抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜及其制备方法，该眼霜含有奶基质脂质体，可携带各种活性成分渗透进入皮肤基底层作用于细胞中的黑色素颗粒；同时，以原奶或奶制品为原料，利用奶中的营养成分及润肤效果，发挥护肤养颜的功效。本发明中脂质体基质为天然成分，具有淡化眼部黑眼圈，抗皱和祛除脂肪粒的效果。除此之外，本发明首次将红没药醇和聚赖氨酸联合使用，替代化学防腐剂，消除对于敏感肌肤的刺激作用，以解决目前眼霜在抗肌肤老化、提亮肤色、肌肤细纹和干燥方面存在的问题。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜，其组成成分及重量份数如下：

奶基质脂质体10-60份，活性多肽0.1-1份，人参皂苷0.1-1份，酵母精华0.002-0.01份，甜杏仁油3-10份，吐温800.1-2份，司盘800.1-2份，黄原胶0.2-2份，海藻酸钠0.1-1份，α-红没药醇0.2-1份，茶多酚1-3份，维生素E 0.1-5份，透明质酸0.01-1份，海藻糖1-5份，ε-聚赖氨酸0.01-3份，蒸馏水补足至100份。

而且，所述奶基质脂质体的制备方法为：

先将奶基质于32-36℃孵育5-10分钟，持续搅拌；

接着，以薄膜分散法旋干水分，成蜂窝状膜；

然后，均质2-8分钟，压力为1000-5000psi，制得奶基质脂质体。

而且，所述奶基质为原奶或奶制品中的一种或两种。

而且，所述原奶或奶制品为牛奶、马奶、羊奶、豆奶、奶粉或酸奶。

而且，所述奶基质脂质体在与其他活性成分混合前，以蒸馏水稀释10-100倍。

而且，所述活性多肽的制备方法如下：

取核桃10-25重量份、核桃粕10-15重量份、藜麦10-30重量份、荞麦10-25重量份、糙米15-30重量份，粉碎，加入水后调节pH值至8.5-9.0，用碱溶酸沉法提取蛋白并冷冻干燥，经蛋白酶酶解，8000-10000rpm离心5-10分钟，上清液冷冻干燥获得活性多肽提取物。

而且，所述所述ε-聚赖氨酸和红没药醇的作用为协同防腐作用。

而且，所述人参皂苷的制备方法如下：

取人参，粉碎，加入10倍体积乙醇，80-85℃加热回流提取2h，冷却至室温后，真空抽滤；取滤液55-70℃加热抽真空，旋转蒸发，得浓缩液，经-20℃、-80℃预冻后放入冷冻干燥机以-80℃冻干，12h后得人参皂苷干粉。

一种如上所述的抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜的制备方法，步骤如下：

S1，首先，将活性多肽、人参皂苷和酵母精华与奶基质脂质体搅拌混合均匀，32-36℃孵育5-10分钟，持续搅拌；

接着，以薄膜分散法旋干水分，成蜂窝状膜；

然后，加入茶多酚，溶解蜂窝状膜，均质2-8分钟，压力为1000-5000psi，制得包载活性成分的奶基质脂质体；

最后，将包载活性成分的奶基质脂质体加热至50-80℃；

S2，按比例将油相中的甜杏仁油、吐温80、司盘80、α-红没药醇、维生素E在50-80℃混合均匀，得油相；

S3，按比例将黄原胶和海藻酸钠加入水中，搅拌使成混合均匀的凝胶基质，在50-80℃的条件下，将包载活性成分的奶基质脂质体加入凝胶基质，搅拌至均匀后再加入油相，继续搅拌至均匀，保温5-10min；

S4，待温度降至30-45℃，按比例将透明质酸、ε-聚赖氨酸、海藻糖加入蒸馏水中制得的水溶液加入其中，搅拌至均匀，即得抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜。

一种如上所述的抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜的制备方法，步骤如下：

S1，首先，将活性多肽、人参皂苷和酵母精华与奶基质脂质体搅拌混合均匀，32-36℃孵育5-10分钟，持续搅拌；

接着，以薄膜分散法旋干水分，成蜂窝状膜；

然后，加入茶多酚，溶解蜂窝状膜，均质2-8分钟，压力为1000-5000psi，制得包载活性成分的奶基质脂质体；

最后，将包载活性成分的奶基质脂质体加热至70℃；

S2，按比例将油相中的甜杏仁油、吐温80、司盘80、α-红没药醇、维生素E在70℃混合均匀，得油相；

S3，按比例将黄原胶和海藻酸钠加入水中，搅拌使成混合均匀的凝胶基质，在50-80℃的条件下，将包载活性成分的奶基质脂质体加入凝胶基质，搅拌至均匀后再加入油相，继续搅拌至均匀，保温10min；

S4，待温度降至35℃，按比例将透明质酸、ε-聚赖氨酸、海藻糖加入蒸馏水中制得的水溶液加入其中，搅拌至均匀，即得抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜。

本发明取得的优点和积极效果为：

1、本发明眼霜包含奶基质脂质体、活性多肽、人参皂苷、酵母精华、黄原胶、海藻酸钠、α-红没药醇、茶多酚、维生素E、透明质酸、海藻糖、ε-聚赖氨酸和蒸馏水。本发明眼霜含有奶基质脂质体，可携带各种活性成分渗透进入皮肤基底层作用于细胞中的黑色素颗粒；同时，以原奶或奶制品为原料，利用奶中的营养成分及润肤效果，发挥护肤养颜的功效。本发明中脂质体基质为天然成分，具有淡化眼部黑眼圈，抗皱和祛除脂肪粒的效果。除此之外，本发明首次将红没药醇和聚赖氨酸联合使用，替代化学防腐剂，消除对于敏感肌肤的刺激作用。

2、本发明以奶、豆奶或奶制品为基质制备脂质体，包载多种活性成分，一方面脂质体本身对于皮肤具有抗衰老、滋润营养作用，另一方面可以携带活性成分进入皮肤深层发挥作用，渗透快、吸收好、营养丰富，从根本上改善脸部皮肤状况，具有十分重要的意义。本发明具有原创性，不再采用传统的有机防腐剂，而利用可食用的生物防腐剂ε-聚赖氨酸，配合红没药醇起到抗菌防腐的作用。除此之外，本发明涉及到的脂质体首次单纯以奶为原料进行制备，赋予脂质体奶基质所具有的营养和滋润的功效，继而携带递送活性成分进入皮肤深层，具有双重功效。

3、本发明眼霜中仅添加α-红没药醇或ε-聚赖氨酸时，眼霜仍会有不同程度的染菌现象，将二者共同使用，可能具有某种协同抗菌能力，而使得眼霜的染菌现象显著改善，与市售添加有机防腐剂的对照组眼霜相当。而且ε-聚赖氨酸的添加量为0.6％时，两者抑菌效果最佳。

4、本发明眼霜利用脂质体将活性成分包裹后，活性成分的结构可以保持相对稳定，抗氧活活性相对较高。本领域已知，加入胆固醇制备脂质体可增加包封率同时可增加皮 肤的渗透性，但相应地也影响了囊泡的大小。而利用奶基质制备的脂质体的脂质层膜结构与皮肤细胞的细胞膜结构更加类似，根据相似相容原理，奶基质脂质休与角质层细胞融合后，一方面奶基质脂质体的疏水端结构被打乱，皮肤角质层的细胞结构也发生了相容性的变化，被包封的活性成分可以更好的通过扩散作用进入皮肤屏障，其较胆固醇具有一定的优势。

附图说明

图1为本发明中豆奶脂质体三次测量的粒径分布图，每条曲线为测量一次的结果；

图2为本发明中豆奶脂质体三次测量的Zeta电势分布图，每条曲线为测量一次的结果；

图3为本发明中牛奶脂质体三次测量的粒径分布图，每条曲线为测量一次的结果；

图4为本发明中牛奶脂质体三次测量的Zeta电势分布图，每条曲线为测量一次的结果；

图5为本发明中L-DOPA氧化酶抑制和DPPH自由基清除实验结果图。

具体实施方式

下面详细叙述本发明的实施例，需要说明的是，本实施例是叙述性的，不是限定性的，不能以此限定本发明的保护范围。

本发明中所使用的原料，如无特殊说明，均为常规的市售产品；本发明中所使用的方法，如无特殊说明，均为本领域的常规方法。

一种抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜，其组成成分及重量份数如下：

奶基质脂质体10-60份，活性多肽0.1-1份，人参皂苷0.1-1份，酵母精华0.002-0.01份，甜杏仁油3-10份，吐温800.1-2份，司盘800.1-2份，黄原胶0.2-2份，海藻酸钠0.1-1份，α-红没药醇0.2-1份，茶多酚1-3份，维生素E 0.1-5份，透明质酸0.01-1份，海藻糖1-5份，ε-聚赖氨酸0.01-3份，蒸馏水补足至100份。

较优地，所述奶基质脂质体的制备方法为：

先将奶基质于32-36℃孵育5-10分钟，持续搅拌；

接着，以薄膜分散法旋干水分，成蜂窝状膜；

然后，均质2-8分钟，压力为1000-5000psi，制得奶基质脂质体。

较优地，所述奶基质为原奶或奶制品中的一种或两种。

较优地，所述原奶或奶制品为牛奶、马奶、羊奶、豆奶、奶粉或酸奶。

较优地，所述奶基质脂质体在与其他活性成分混合前，以蒸馏水稀释10-100倍。

较优地，所述活性多肽的制备方法如下：

取核桃10-25重量份、核桃粕10-15重量份、藜麦10-30重量份、荞麦10-25重量份、糙米15-30重量份，粉碎，加入水后调节pH值至8.5-9.0，用碱溶酸沉法提取蛋白并冷冻干燥，经蛋白酶酶解，8000-10000rpm离心5-10分钟，上清液冷冻干燥获得活性多肽提取物。

较优地，所述所述ε-聚赖氨酸和红没药醇的作用为协同防腐作用。

较优地，所述人参皂苷的制备方法如下：

取人参，粉碎，加入10倍体积乙醇，80-85℃加热回流提取2h，冷却至室温后，真空抽滤；取滤液55-70℃加热抽真空，旋转蒸发，得浓缩液，经-20℃、-80℃预冻后放入冷冻干燥机以-80℃冻干，12h后得人参皂苷干粉。

一种如上所述的抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜的制备方法，步骤如下：

S1，首先，将活性多肽、人参皂苷和酵母精华与奶基质脂质体搅拌混合均匀，32-36℃孵育5-10分钟，持续搅拌；

接着，以薄膜分散法旋干水分，成蜂窝状膜；

然后，加入茶多酚，溶解蜂窝状膜，均质2-8分钟，压力为1000-5000psi，制得包载活性成分的奶基质脂质体；

最后，将包载活性成分的奶基质脂质体加热至50-80℃；

S2，按比例将油相中的甜杏仁油、吐温80、司盘80、α-红没药醇、维生素E在50-80℃混合均匀，得油相；

S3，按比例将黄原胶和海藻酸钠加入水中，搅拌使成混合均匀的凝胶基质，在50-80℃的条件下，将包载活性成分的奶基质脂质体加入凝胶基质，搅拌至均匀后再加入油相，继续搅拌至均匀，保温5-10min；

S4，待温度降至30-45℃，按比例将透明质酸、ε-聚赖氨酸、海藻糖加入蒸馏水中制得的水溶液加入其中，搅拌至均匀，即得抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜。

一种如上所述的抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜的制备方法，步骤如下：

S1，首先，将活性多肽、人参皂苷和酵母精华与奶基质脂质体搅拌混合均匀，32-36℃孵育5-10分钟，持续搅拌；

接着，以薄膜分散法旋干水分，成蜂窝状膜；

然后，加入茶多酚，溶解蜂窝状膜，均质2-8分钟，压力为1000-5000psi，制得包载活性成分的奶基质脂质体；

最后，将包载活性成分的奶基质脂质体加热至70℃；

S2，按比例将油相中的甜杏仁油、吐温80、司盘80、α-红没药醇、维生素E在70℃混合均匀，得油相；

S3，按比例将黄原胶和海藻酸钠加入水中，搅拌使成混合均匀的凝胶基质，在50-80℃的条件下，将包载活性成分的奶基质脂质体加入凝胶基质，搅拌至均匀后再加入油相，继续搅拌至均匀，保温10min；

S4，待温度降至35℃，按比例将透明质酸、ε-聚赖氨酸、海藻糖加入蒸馏水中制得的水溶液加入其中，搅拌至均匀，即得抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜。

本发明的相关实施例：

实施例1

一种抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜，是由如下重量百分比的原料和方法得到的：

原料：豆奶脂质体50％、活性多肽0.3％、人参皂苷0.2％、酵母精华0.01％、甜杏仁油6％、吐温800.5％、司盘800.75％、黄原胶0.5％、海藻酸钠0.25％、α-红没药醇0.5％、茶多酚1％、维生素E 0.5％、透明质酸0.1％，海藻糖4％，ε-聚赖氨酸0.6％、蒸馏水余量。

制备方法如下：

S1，将活性多肽、人参皂苷和酵母精华与豆奶脂质体搅拌混合均匀，33℃孵育8分钟，持续搅拌；接着，以薄膜分散法旋干水分，成蜂窝状膜；然后，加入茶多酚水溶液，溶解蜂窝状膜，均质6分钟，压力为2500psi，制得包载活性成分的豆奶脂质体，图1和2为其粒径分布和zeta电势分布图，可见三次测量脂质体粒径分布均匀，平均粒径约为140nm，zeta电位约为-30mV，加热至70℃；

S2，按比例将油相中的甜杏仁油、吐温80、司盘80、α-红没药醇、维生素E在70℃混合均匀；

S3，按比例将黄原胶和海藻酸钠加入水中，搅拌使成混合均匀的凝胶基质，在70℃的条件下，将包载活性成分的豆奶脂质体加入凝胶基质，搅拌至均匀后再加入油相，继续搅拌至均匀，保温10min；

最后待温度降至35℃，按比例将透明质酸、ε-聚赖氨酸、海藻糖加入蒸馏水中制得的水溶液加入其中，搅拌至均匀。

实施例2

一种抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜，是由如下重量百分比的原料和方法得到的：

原料：牛奶脂质体50％、活性多肽0.3％、人参皂苷0.2％、酵母精华0.01％、甜杏仁油6％、吐温800.5％、司盘800.75％、黄原胶0.5％、海藻酸钠0.25％、α-红没药醇0.5％、茶多酚1％、维生素E 0.5％、透明质酸0.1％，海藻糖4％，ε-聚赖氨酸0.6％、蒸馏水余量。

制备方法如下：

S1，将活性多肽、人参皂苷和酵母精华与牛奶脂质体搅拌混合均匀，33℃孵育8分钟，持续搅拌；接着，以薄膜分散法旋干水分，成蜂窝状膜；然后，加入茶多酚水溶液，溶解蜂窝状膜，均质6分钟，压力为2500psi，制得包载活性成分的牛奶脂质体，图3和4为其粒径分布和zeta电势分布图，可见三次测量脂质体粒径分布均匀，平均粒径约为120nm，zeta电位约为-30mV，加热至70℃；

S2，按比例将油相中的甜杏仁油、吐温80、司盘80、α-红没药醇、维生素E在70℃混合均匀；

S3，按比例将黄原胶和海藻酸钠加入水中，搅拌使成混合均匀的凝胶基质，在70℃的条件下，将包载活性成分的牛奶脂质体加入凝胶基质，搅拌至均匀后再加入油相，继续搅拌至均匀，保温10min；

最后待温度降至35℃，按比例将透明质酸、ε-聚赖氨酸、海藻糖加入蒸馏水中制得的水溶液加入其中，搅拌至均匀。

实施例3

一种眼霜，是由如下重量百分比的原料和方法得到的：

原料：活性多肽0.3％、人参皂苷0.2％、酵母精华0.01％、甜杏仁油6％、吐温800.5％、司盘800.75％、黄原胶0.5％、海藻酸钠0.25％、α-红没药醇0.5％、茶多酚1％、维生素E 0.5％、透明质酸0.1％，海藻糖4％，ε-聚赖氨酸0.6％、蒸馏水余量。

制备方法如下：

S1，按比例将油相中的甜杏仁油、吐温80、司盘80、α-红没药醇、维生素E在70℃混合均匀；

S2，按比例将黄原胶和海藻酸钠加入水中，搅拌使成混合均匀的凝胶基质，在70℃的条件下，将人参皂苷、活性多肽和茶多酚水溶液加入凝胶基质，搅拌至均匀后再加入油相，继续搅拌至均匀，保温10min；

最后待温度降至35℃，按比例将透明质酸、ε-聚赖氨酸、海藻糖加入蒸馏水中制得的水溶液加入其中，搅拌至均匀。

实施例4

一种眼霜，是由如下重量百分比的原料和方法得到的：

原料：牛奶脂质体50％、活性多肽0.3％、人参皂苷0.2％、酵母精华0.01％、甜杏仁油6％、吐温800.5％、司盘800.75％、黄原胶0.5％、海藻酸钠0.25％、α-红没药醇0.5％、茶多酚1％、维生素E 0.5％、透明质酸0.1％，海藻糖4％，ε-聚赖氨酸0.6％、蒸馏水余量。

制备方法如下：

S1，将牛奶33℃孵育8分钟，持续搅拌；接着，以薄膜分散法旋干水分，成蜂窝状膜；然后，加入茶多酚水溶液，溶解蜂窝状膜，均质6分钟，压力为2500psi，制得牛奶脂质体，加热至70℃；

S2，按比例将油相中的甜杏仁油、吐温80、司盘80、α-红没药醇、维生素E在70℃混合均匀；

S3，按比例将黄原胶和海藻酸钠加入水中，搅拌使成混合均匀的凝胶基质，在70℃的条件下，将人参皂苷、茶多酚、活性多肽和牛奶脂质体加入凝胶基质，搅拌至均匀后再加入油相，继续搅拌至均匀，保温10min；

最后待温度降至35℃，按比例将透明质酸、ε-聚赖氨酸、海藻糖、酵母精华加入蒸馏水中制得的水溶液加入其中，搅拌至均匀。

实施例5

一种眼霜，是由如下重量百分比的原料和方法得到的：

原料：牛奶脂质体50％、活性多肽0.3％、人参皂苷0.2％、酵母精华0.01％、甜杏仁油6％、吐温800.5％、司盘800.75％、黄原胶0.5％、海藻酸钠0.25％、α-红没药醇0.5％、茶多酚1％、维生素E 0.5％、透明质酸0.1％，海藻糖4％、蒸馏水余量。

制备方法如下：

S1，将活性多肽、人参皂苷和酵母精华与牛奶脂质体搅拌混合均匀，33℃孵育8分钟，持续搅拌；接着，以薄膜分散法旋干水分，成蜂窝状膜；然后，加入茶多酚水溶液，溶解蜂窝状膜，均质6分钟，压力为2500psi，制得包载活性成分的牛奶脂质体，加热至70℃；

S2，按比例将油相中的甜杏仁油、吐温80、司盘80、α-红没药醇、维生素E在70℃混合均匀；

S3，按比例将黄原胶和海藻酸钠加入水中，搅拌使成混合均匀的凝胶基质，在70℃的条件下，将包载活性成分的牛奶脂质体加入凝胶基质，搅拌至均匀后再加入油相，继续搅拌至均匀，保温10min；

最后待温度降至35℃，按比例将透明质酸、海藻糖、酵母精华加入蒸馏水中制得的水溶液加入其中，搅拌至均匀。

实施例6

一种抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜，是由如下重量百分比的原料和方法得到的：

原料：牛奶脂质体50％、活性多肽0.3％、人参皂苷0.2％、酵母精华0.01％、甜杏仁油6％、吐温800.5％、司盘800.75％、黄原胶0.5％、海藻酸钠0.25％、α-红没药醇0.5％、茶多酚1％、维生素E 0.5％、透明质酸0.1％，海藻糖4％，ε-聚赖氨酸0.3％、蒸馏水余量。

制备方法如下：

S1，将活性多肽和人参皂苷与牛奶脂质体搅拌混合均匀，33℃孵育8分钟，持续搅拌；接着，以薄膜分散法旋干水分，成蜂窝状膜；然后，加入茶多酚水溶液，溶解蜂窝状膜，均质6分钟，压力为2500psi，制得包载活性成分的牛奶脂质体，加热至70℃；

S2，按比例将油相中的甜杏仁油、吐温80、司盘80、α-红没药醇、维生素E在70℃混合均匀；

S3，按比例将黄原胶和海藻酸钠加入水中，搅拌使成混合均匀的凝胶基质，在70℃的条件下，将包载活性成分的奶基质脂质体加入凝胶基质，搅拌至均匀后再加入油相，继续搅拌至均匀，保温10min；

最后待温度降至35℃，按比例将透明质酸、ε-聚赖氨酸、海藻糖加入蒸馏水中制得的水溶液加入其中，搅拌至均匀。

实施例7

一种眼霜，是由如下重量百分比的原料和方法得到的：

原料：牛奶脂质体50％、活性多肽0.3％、人参皂苷0.2％、酵母精华0.01％、甜杏仁油6％、吐温800.5％、司盘800.75％、黄原胶0.5％、海藻酸钠0.25％、茶多酚3％、维生素E0.5％、透明质酸0.1％，海藻糖4％，ε-聚赖氨酸0.6％、蒸馏水余量。

制备方法如下：

S1，将活性多肽和人参皂苷与牛奶脂质体搅拌混合均匀，33℃孵育8分钟，持续搅拌；接着，以薄膜分散法旋干水分，成蜂窝状膜；然后，加入茶多酚水溶液，溶解蜂窝状膜，均质6分钟，压力为2500psi，制得包载活性成分的牛奶脂质体，加热至70℃；

S2，按比例将油相中的甜杏仁油、吐温80、司盘80、维生素E在70℃混合均匀；

S3，按比例将黄原胶和海藻酸钠加入水中，搅拌使成混合均匀的凝胶基质，在70℃的条件下，将包载活性成分的奶基质脂质体加入凝胶基质，搅拌至均匀后再加入油相，继续搅拌至均匀，保温10min；

最后待温度降至35℃，按比例将透明质酸、ε-聚赖氨酸、海藻糖加入蒸馏水中制得的水溶液加入其中，搅拌至均匀。

实施例效果测试：

以实施例1-4为实验组1-4，市售Lavera Naturkosmeti脂质体为对照组。选择志愿者(25-55岁，女性)30人，随机平均分为6组，每天清洁皮肤后将实验组和对照组涂在脸部，30天后观察效果。根据皮肤变化分别对不同项目进行打分(0-100分)，具体评分结果(平均值)如下：

表1评分结果(平均值)

由表1的实验结果可知，添加了脂质体的实验组1和实验组2在渗透性、除皱纹、提亮肤色、减小脂肪粒方面的效果优于未添加脂质体的实验组3和未将活性成分包载进脂质体的实验组4，可见脂质体携带活性成分进入皮肤深层发挥的作用。而且，实验组1和实验组2的保湿性好，水肿有明显消退，使用更舒适。由于牛奶易得，容易实现产业化，故选择牛奶作为脂质体的原材料。

实施例抑菌作用测试：

以实施例2、5、6和7为实验组2、5、6和7，市面普通眼霜为对照组。各无菌制备20mL眼霜敞口室温置于空气中，分别于第0、10、15天取出3mL进行细菌培养后菌落计数。

表2不同天数菌落计数结果

由表2的实验结果可知，处方中仅添加α-红没药醇或ε-聚赖氨酸时，眼霜仍会有不同程度的染菌现象，将二者共同使用，可能具有某种协同抗菌能力，而使得眼霜的染菌现象显著改善，与市售添加有机防腐剂的对照组眼霜相当。而且ε-聚赖氨酸的添加量为0.6％时，两者抑菌效果最佳。

本发明分别采用本领域通用的L-DOPA体外氧化酶抑制实验以及DPPH自由基清除实验对本发明实施例1和对比样品的抗氧化能力进行单因素考察，以此评价本发明的抗衰老功效。

对比例1

原料：胆固醇脂质体50％、活性多肽0.3％、人参皂苷0.2％、酵母精华0.01％、甜杏仁油6％、吐温800.5％、司班800.75％、黄原胶0.5％、海藻酸钠0.25％、α-红没药醇0.5％、茶多酚1％、维生素E 0.5％、透明质酸0.1％，海藻糖4％，ε-聚赖氨酸0.6％、蒸馏水余量。

活性多肽的制备方法为：取核桃粉碎，加入10倍蒸馏水后调节pH值至8.8，用碱溶酸沉法提取蛋白并冷冻干燥，经蛋白酶酶解，8000rpm离心5分钟，上清液冷冻干燥获得活性多肽提取物。

制备方法如下：

S1，将人参皂苷、酵母精华、活性多肽和茶多酚与胆固醇搅拌混合均匀，均质6分钟，压力为2500psi，制得包载活性成分的胆固醇脂质体，加热至70℃；

S2，按比例将油相中的甜杏仁油、吐温80、司盘80、α-红没药醇、维生素E在70℃混合均匀；

S3，按比例将黄原胶和海藻酸钠加入水中，搅拌使成混合均匀的凝胶基质，在70℃的条件下，将包载活性成分的胆固醇脂质体加入凝胶基质，搅拌至均匀后再加入油相，继续搅拌至均匀，保温10min；

最后待温度降至35℃，按比例将透明质酸、ε-聚赖氨酸、海藻糖加入蒸馏水中制得的水溶液加入其中，搅拌至均匀。

对比例2

原料：牛奶脂质体50％、人参皂苷0.5％、酵母精华0.01％、甜杏仁油6％、吐温800.5％、司班800.75％、黄原胶0.5％、海藻酸钠0.25％、α-红没药醇0.5％、茶多酚1％、维生素E 0.5％、透明质酸0.1％，海藻糖4％，ε-聚赖氨酸0.6％、蒸馏水余量。

制备方法同实施例1。

对比例3

原料：牛奶脂质体50％、活性多肽0.5％、酵母精华0.01％、甜杏仁油6％、吐温800.5％、司班800.75％、黄原胶0.5％、海藻酸钠0.25％、α-红没药醇0.5％、茶多酚1％、维生素E 0.5％、透明质酸0.1％，海藻糖4％，ε-聚赖氨酸0.6％、蒸馏水余量。

制备方法同实施例1。

对比例4

原料：活性多肽0.3％、人参皂苷0.2％、酵母精华0.01％、甜杏仁油6％、吐温800.5％、司班800.75％、黄原胶0.5％、海藻酸钠0.25％、α-红没药醇0.5％、茶多酚1％、维生素E 0.5％、透明质酸0.1％，海藻糖4％，ε-聚赖氨酸0.6％、其余为蒸馏水。

制备方法如下：

S1，将人参皂苷、活性多肽和茶多酚搅拌混合均匀，均质6分钟，压力为2500psi，加热至70℃；

S2，按比例将油相中的甜杏仁油、吐温80、司盘80、α-红没药醇、维生素E在70℃混合均匀；

S3，按比例将黄原胶和海藻酸钠加入水中，搅拌使成混合均匀的凝胶基质，在70℃的条件下，将步骤1活性成分加入凝胶基质，搅拌至均匀后再加入油相，继续搅拌至均匀，保温10min；

最后待温度降至35℃，按比例将透明质酸、ε-聚赖氨酸、海藻糖、酵母精华加入蒸馏水中制得的水溶液加入其中，搅拌至均匀。

溶液的配制：

称取39.45mg的L-DOPA原料于50mL容量瓶，蒸馏水定容即得到4mM的L-DOPA溶液；称取4mg DPPH，用无水乙醇溶解，再于10ml容量瓶中以无水乙醇定容，摇匀，取该溶液1ml至10ml容量瓶中，乙醇稀释定容，得0.04g/LDPPH溶液。

称取1.25mg酪氨酸酶原料于50ml容量瓶，蒸馏水定容即得到25μg/ml酪氨酸酶溶液；准确量取摩尔浓度为1M的磷酸氢二钠46.3ml，量取摩尔浓度为1M的磷酸二氢钠53.7ml，混合定容1L，即得到磷酸缓冲溶液。

抑制L-DOPA氧化酶实验：

在5份2.7ml磷酸缓冲溶液中分别加入实施例1以及对比例1-4样品的100μl，充分混匀，加入400μl上述酪氨酸酶溶液及800μl上述L-DOPA溶液，充分混匀，水浴37℃反应10分钟，在475nm处测定紫外吸光度(B)。

L-DOPA氧化酶抑制率(％)＝(1-B/A)×100

其中，A:空白吸光度；B：样品吸光度。

表3 L-DOPA氧化酶抑制率实验结果(n＝5)

n	实施例1	对比例1	对比例2	对比例3	对比例4
						1	79.74	63.99	58.98	36.21	18.66
2	76.93	71.92	64.09	39.62	20.36
						3	75.93	67.60	68.10	35.31	16.65
4	76.63	69.31	66.30	34.80	18.56
						5	69.81	71.71	61.08	34.90	15.55
平均值	75.81±3.65	68.91±3.28	63.71±3.72	36.17±2.01	17.95±1.88

清除DPPH自由基实验：

在5份2.3ml 70％乙醇溶液中分别加入实施例1以及对比例1-4样品的100μl，充分混匀，加入1.6ml上述DPPH溶液，室温条件反应20分钟，在517nm测定紫外吸光度(B)。

DPPH自由基清除率(％)＝(1-B/A)×100

其中，A:空白吸光度；B：样品吸光度。

表4 DPPH自由基清除率实验结果(n＝5)

n	实施例1	对比例1	对比例2	对比例3	对比例4
						1	63.49	59.68	46.34	29.59	22.47
2	60.58	64.39	63.89	27.48	21.26
						3	62.69	60.78	69.91	26.58	19.76
4	64.69	55.27	64.49	31.59	16.65
						5	66.10	56.77	55.67	29.79	17.25
平均值	63.51±2.08	59.38±3.57	60.06±1.05	29.01±1.99	19.48±2.51

结果见表3、表4和图5，由上述实验结果可知，利用脂质体将活性成分包裹后，活性成分的结构可以保持相对稳定，抗氧活活性相对较高。本领域已知，加入胆固醇制备脂质体 可增加包封率同时可增加皮肤的渗透性，但相应地也影响了囊泡的大小。而利用奶基质制备的脂质体的脂质层膜结构与皮肤细胞的细胞膜结构更加类似，根据相似相容原理，奶基质脂质休与角质层细胞融合后，一方面奶基质脂质体的疏水端结构被打乱，皮肤角质层的细胞结构也发生了相容性的变化，被包封的活性成分可以更好的通过扩散作用进入皮肤屏障，其较胆固醇具有一定的优势。

尽管为说明目的公开了本发明的实施例，但是本领域的技术人员可以理解：在不脱离本发明及所附权利要求的精神和范围内，各种替换、变化和修改都是可能的，因此，本发明的范围不局限于实施例和附图所公开的内容。

Claims (10)

1.一种抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜，其特征在于：其组成成分及重量份数如下：

奶基质脂质体10-60份，活性多肽0.1-1份，人参皂苷0.1-1份，酵母精华0.002-0.01份，甜杏仁油3-10份，吐温800.1-2份，司盘800.1-2份，黄原胶0.2-2份，海藻酸钠0.1-1份，α-红没药醇0.2-1份，茶多酚1-3份，维生素E0.1-5份，透明质酸0.01-1份，海藻糖1-5份，ε-聚赖氨酸0.01-3份，蒸馏水补足至100份。

2.根据权利要求1所述的抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜，其特征在于：所述奶基质脂质体的制备方法为：

先将奶基质于32-36℃孵育5-10分钟，持续搅拌；

接着，以薄膜分散法旋干水分，成蜂窝状膜；

然后，均质2-8分钟，压力为1000-5000psi，制得奶基质脂质体。

3.根据权利要求1和2所述的抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜，其特征在于：所述奶基质为原奶或奶制品中的一种或两种。

4.根据权利要求3所述的抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜，其特征在于：所述原奶或奶制品为牛奶、马奶、羊奶、豆奶、奶粉或酸奶。

5.根据权利要求1所述的抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜，其特征在于：所述奶基质脂质体在与其他活性成分混合前，以蒸馏水稀释10-100倍。

6.根据权利要求1所述的抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜，其特征在于：所述活性多肽的制备方法如下：

取核桃10-25重量份、核桃粕10-15重量份、藜麦10-30重量份、荞麦10-25重量份、糙米15-30重量份，粉碎，加入水后调节pH值至8.5-9.0，用碱溶酸沉法提取蛋白并冷冻干燥，经蛋白酶酶解，8000-10000rpm离心5-10分钟，上清液冷冻干燥获得活性多肽提取物。

7.根据权利要求1所述的抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜，其特征在于：所述所述ε-聚赖氨酸和红没药醇的作用为协同防腐作用。

8.根据权利要求1至7所述的抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜，其特征在于：所述人参皂苷的制备方法如下：

取人参，粉碎，加入10倍体积乙醇，80-85℃加热回流提取2h，冷却至室温后，真空抽滤；取滤液55-70℃加热抽真空，旋转蒸发，得浓缩液，经-20℃、-80℃预冻后放入冷冻干燥机以-80℃冻干，12h后得人参皂苷干粉。

9.一种如权利要求1至8任一项所述的抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜的制备方法，其特征在于：步骤如下：

S1，首先，将活性多肽、人参皂苷和酵母精华与奶基质脂质体搅拌混合均匀，32-36℃孵育5-10分钟，持续搅拌；

接着，以薄膜分散法旋干水分，成蜂窝状膜；

然后，加入茶多酚，溶解蜂窝状膜，均质2-8分钟，压力为1000-5000psi，制得包载活性成分的奶基质脂质体；

最后，将包载活性成分的奶基质脂质体加热至50-80℃；

S2，按比例将油相中的甜杏仁油、吐温80、司盘80、α-红没药醇、维生素E在50-80℃混合均匀，得油相；

S3，按比例将黄原胶和海藻酸钠加入水中，搅拌使成混合均匀的凝胶基质，在50-80℃的条件下，将包载活性成分的奶基质脂质体加入凝胶基质，搅拌至均匀后再加入油相，继续搅拌至均匀，保温5-10min；

S4，待温度降至30-45℃，按比例将透明质酸、ε-聚赖氨酸、海藻糖加入蒸馏水中制得的水溶液加入其中，搅拌至均匀，即得抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜。

10.一种如权利要求1至8任一项所述的抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜的制备方法，其特征在于：步骤如下：

S1，首先，将活性多肽、人参皂苷和酵母精华与奶基质脂质体搅拌混合均匀，32-36℃孵育5-10分钟，持续搅拌；

接着，以薄膜分散法旋干水分，成蜂窝状膜；

然后，加入茶多酚，溶解蜂窝状膜，均质2-8分钟，压力为1000-5000psi，制得包载活性成分的奶基质脂质体；

最后，将包载活性成分的奶基质脂质体加热至70℃；

S2，按比例将油相中的甜杏仁油、吐温80、司盘80、α-红没药醇、维生素E在70℃混合均匀，得油相；

S3，按比例将黄原胶和海藻酸钠加入水中，搅拌使成混合均匀的凝胶基质，在50-80℃的条件下，将包载活性成分的奶基质脂质体加入凝胶基质，搅拌至均匀后再加入油相，继续搅拌至均匀，保温10min；

S4，待温度降至35℃，按比例将透明质酸、ε-聚赖氨酸、海藻糖加入蒸馏水中制得的水溶液加入其中，搅拌至均匀，即得抗皱去脂肪粒和黑眼圈的奶基质脂质体眼霜。