CN110498844B - 小反刍兽疫诊断试剂盒 - Google Patents
小反刍兽疫诊断试剂盒 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110498844B CN110498844B CN201810480834.5A CN201810480834A CN110498844B CN 110498844 B CN110498844 B CN 110498844B CN 201810480834 A CN201810480834 A CN 201810480834A CN 110498844 B CN110498844 B CN 110498844B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- seq
- carrier
- pharmaceutically acceptable
- polypeptide
- acceptable carrier
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 208000007634 Peste-des-Petits-Ruminants Diseases 0.000 title claims abstract description 38
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 title claims abstract description 20
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims abstract description 65
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 64
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 64
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 12
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 40
- 241001428894 Small ruminant morbillivirus Species 0.000 claims description 26
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 claims description 15
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 13
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims description 9
- 241000283707 Capra Species 0.000 claims description 8
- 241001494479 Pecora Species 0.000 claims description 8
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 4
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 abstract description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 description 27
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 16
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 13
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 7
- 230000010530 Virus Neutralization Effects 0.000 description 5
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 3
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 3
- 241000282849 Ruminantia Species 0.000 description 3
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 3
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 3
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 3
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 206010035148 Plague Diseases 0.000 description 2
- 206010035742 Pneumonitis Diseases 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 2
- 239000006180 TBST buffer Substances 0.000 description 2
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 2
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 239000004205 dimethyl polysiloxane Substances 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 2
- 229920000435 poly(dimethylsiloxane) Polymers 0.000 description 2
- -1 polydimethylsiloxane Polymers 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000011343 solid material Substances 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010068327 4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase Proteins 0.000 description 1
- BUANFPRKJKJSRR-ACZMJKKPSA-N Ala-Ala-Gln Chemical compound C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C([O-])=O)CCC(N)=O BUANFPRKJKJSRR-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- PVSNBTCXCQIXSE-JYJNAYRXSA-N Arg-Arg-Phe Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 PVSNBTCXCQIXSE-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- NABSCJGZKWSNHX-RCWTZXSCSA-N Arg-Arg-Thr Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N NABSCJGZKWSNHX-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- OTCJMMRQBVDQRK-DCAQKATOSA-N Arg-Asp-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O OTCJMMRQBVDQRK-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- FEZJJKXNPSEYEV-CIUDSAMLSA-N Arg-Gln-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O FEZJJKXNPSEYEV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- KXOPYFNQLVUOAQ-FXQIFTODSA-N Arg-Ser-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O KXOPYFNQLVUOAQ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- ULRPXVNMIIYDDJ-ACZMJKKPSA-N Asn-Glu-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N ULRPXVNMIIYDDJ-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- NYGILGUOUOXGMJ-YUMQZZPRSA-N Asn-Lys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O NYGILGUOUOXGMJ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- QXOPPIDJKPEKCW-GUBZILKMSA-N Asn-Pro-Arg Chemical compound C1C[C@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O QXOPPIDJKPEKCW-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- YQPSDMUGFKJZHR-QRTARXTBSA-N Asn-Trp-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N YQPSDMUGFKJZHR-QRTARXTBSA-N 0.000 description 1
- RYKWOUUZJFSJOH-FXQIFTODSA-N Asp-Gln-Glu Chemical compound C(CC(=O)N)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N RYKWOUUZJFSJOH-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- ORRJQLIATJDMQM-HJGDQZAQSA-N Asp-Leu-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O ORRJQLIATJDMQM-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- KESWRFKUZRUTAH-FXQIFTODSA-N Asp-Pro-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O KESWRFKUZRUTAH-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- PRVVCRZLTJNPCS-FXQIFTODSA-N Cys-Arg-Asn Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N)CN=C(N)N PRVVCRZLTJNPCS-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- SMYXEYRYCLIPIL-ZLUOBGJFSA-N Cys-Cys-Cys Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O SMYXEYRYCLIPIL-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- OGMQXTXGLDNBSS-FXQIFTODSA-N Glu-Ala-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O OGMQXTXGLDNBSS-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- ITYRYNUZHPNCIK-GUBZILKMSA-N Glu-Ala-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ITYRYNUZHPNCIK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- SRZLHYPAOXBBSB-HJGDQZAQSA-N Glu-Arg-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O SRZLHYPAOXBBSB-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- UPOJUWHGMDJUQZ-IUCAKERBSA-N Gly-Arg-Arg Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O UPOJUWHGMDJUQZ-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- FFALDIDGPLUDKV-ZDLURKLDSA-N Gly-Thr-Ser Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FFALDIDGPLUDKV-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 1
- GWCJMBNBFYBQCV-XPUUQOCRSA-N Gly-Val-Ala Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O GWCJMBNBFYBQCV-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 1
- 108060003393 Granulin Proteins 0.000 description 1
- 101710154606 Hemagglutinin Proteins 0.000 description 1
- UKTUOMWSJPXODT-GUDRVLHUSA-N Ile-Asn-Pro Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N UKTUOMWSJPXODT-GUDRVLHUSA-N 0.000 description 1
- BSWLQVGEVFYGIM-ZPFDUUQYSA-N Ile-Gln-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N BSWLQVGEVFYGIM-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- JRYQSFOFUFXPTB-RWRJDSDZSA-N Ile-Gln-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N JRYQSFOFUFXPTB-RWRJDSDZSA-N 0.000 description 1
- CNMOKANDJMLAIF-CIQUZCHMSA-N Ile-Thr-Ala Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O CNMOKANDJMLAIF-CIQUZCHMSA-N 0.000 description 1
- YCKPUHHMCFSUMD-IUKAMOBKSA-N Ile-Thr-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N YCKPUHHMCFSUMD-IUKAMOBKSA-N 0.000 description 1
- WNGVUZWBXZKQES-YUMQZZPRSA-N Leu-Ala-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O WNGVUZWBXZKQES-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- BKTXKJMNTSMJDQ-AVGNSLFASA-N Leu-His-Gln Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N BKTXKJMNTSMJDQ-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- RTIRBWJPYJYTLO-MELADBBJSA-N Leu-Lys-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N RTIRBWJPYJYTLO-MELADBBJSA-N 0.000 description 1
- KLSUAWUZBMAZCL-RHYQMDGZSA-N Leu-Thr-Pro Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O KLSUAWUZBMAZCL-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- LPAJOCKCPRZEAG-MNXVOIDGSA-N Lys-Glu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN LPAJOCKCPRZEAG-MNXVOIDGSA-N 0.000 description 1
- GQZMPWBZQALKJO-UWVGGRQHSA-N Lys-Gly-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O GQZMPWBZQALKJO-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- YRNRVKTYDSLKMD-KKUMJFAQSA-N Lys-Ser-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O YRNRVKTYDSLKMD-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- 101710169105 Minor spike protein Proteins 0.000 description 1
- 101710081079 Minor spike protein H Proteins 0.000 description 1
- 101710141454 Nucleoprotein Proteins 0.000 description 1
- 102000011931 Nucleoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010061100 Nucleoproteins Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 101710093908 Outer capsid protein VP4 Proteins 0.000 description 1
- 101710135467 Outer capsid protein sigma-1 Proteins 0.000 description 1
- 102000007982 Phosphoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010089430 Phosphoproteins Proteins 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- XQLBWXHVZVBNJM-FXQIFTODSA-N Pro-Ala-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 XQLBWXHVZVBNJM-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- JMVQDLDPDBXAAX-YUMQZZPRSA-N Pro-Gly-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCCN1 JMVQDLDPDBXAAX-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- 101710176177 Protein A56 Proteins 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- FZXOPYUEQGDGMS-ACZMJKKPSA-N Ser-Ser-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O FZXOPYUEQGDGMS-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZUUDNCOCILSYAM-KKHAAJSZSA-N Thr-Asp-Val Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O ZUUDNCOCILSYAM-KKHAAJSZSA-N 0.000 description 1
- NIEWSKWFURSECR-FOHZUACHSA-N Thr-Gly-Asp Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O NIEWSKWFURSECR-FOHZUACHSA-N 0.000 description 1
- MSIYNSBKKVMGFO-BHNWBGBOSA-N Thr-Gly-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)NCC(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N)O MSIYNSBKKVMGFO-BHNWBGBOSA-N 0.000 description 1
- BDGBHYCAZJPLHX-HJGDQZAQSA-N Thr-Lys-Asn Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O BDGBHYCAZJPLHX-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- MXDOAJQRJBMGMO-FJXKBIBVSA-N Thr-Pro-Gly Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O MXDOAJQRJBMGMO-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 1
- SLLKXDSRVAOREO-KZVJFYERSA-N Val-Ala-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O SLLKXDSRVAOREO-KZVJFYERSA-N 0.000 description 1
- COYSIHFOCOMGCF-WPRPVWTQSA-N Val-Arg-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CCCN=C(N)N COYSIHFOCOMGCF-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 1
- COYSIHFOCOMGCF-UHFFFAOYSA-N Val-Arg-Gly Natural products CC(C)C(N)C(=O)NC(C(=O)NCC(O)=O)CCCN=C(N)N COYSIHFOCOMGCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CVUDMNSZAIZFAE-TUAOUCFPSA-N Val-Arg-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N CVUDMNSZAIZFAE-TUAOUCFPSA-N 0.000 description 1
- CVUDMNSZAIZFAE-UHFFFAOYSA-N Val-Arg-Pro Natural products NC(N)=NCCCC(NC(=O)C(N)C(C)C)C(=O)N1CCCC1C(O)=O CVUDMNSZAIZFAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VMRFIKXKOFNMHW-GUBZILKMSA-N Val-Arg-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N VMRFIKXKOFNMHW-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- OQWNEUXPKHIEJO-NRPADANISA-N Val-Glu-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N OQWNEUXPKHIEJO-NRPADANISA-N 0.000 description 1
- CELJCNRXKZPTCX-XPUUQOCRSA-N Val-Gly-Ala Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O CELJCNRXKZPTCX-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 1
- SSYBNWFXCFNRFN-GUBZILKMSA-N Val-Pro-Ser Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O SSYBNWFXCFNRFN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- 238000012459 agar diffusion assay Methods 0.000 description 1
- 108010005233 alanylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010044940 alanylglutamine Proteins 0.000 description 1
- 108010047495 alanylglycine Proteins 0.000 description 1
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 description 1
- KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N alpha-L-glutamyl-L-glutamic acid Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 108010013835 arginine glutamate Proteins 0.000 description 1
- 108010040443 aspartyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010038633 aspartylglutamate Proteins 0.000 description 1
- 238000010009 beating Methods 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010055341 glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 1
- JYPCXBJRLBHWME-UHFFFAOYSA-N glycyl-L-prolyl-L-arginine Natural products NCC(=O)N1CCCC1C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(O)=O JYPCXBJRLBHWME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010027668 glycyl-alanyl-valine Proteins 0.000 description 1
- 108010025801 glycyl-prolyl-arginine Proteins 0.000 description 1
- 108010089804 glycyl-threonine Proteins 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000013408 indirect enzyme-linked immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000002198 insoluble material Substances 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 108010090333 leucyl-lysyl-proline Proteins 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- JRZJOMJEPLMPRA-UHFFFAOYSA-N olefin Natural products CCCCCCCC=C JRZJOMJEPLMPRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 1
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 108010029020 prolylglycine Proteins 0.000 description 1
- 238000011896 sensitive detection Methods 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 108010026333 seryl-proline Proteins 0.000 description 1
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000011895 specific detection Methods 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010072986 threonyl-seryl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 1
- 239000000273 veterinary drug Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56983—Viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/18011—Paramyxoviridae
- C12N2760/18411—Morbillivirus, e.g. Measles virus, canine distemper
- C12N2760/18422—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/005—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from viruses
- G01N2333/08—RNA viruses
- G01N2333/115—Paramyxoviridae, e.g. parainfluenza virus
- G01N2333/12—Mumps virus; Measles virus
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2469/00—Immunoassays for the detection of microorganisms
- G01N2469/20—Detection of antibodies in sample from host which are directed against antigens from microorganisms
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Virology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
本发明涉及小反刍兽疫诊断试剂盒。本发明的检测试剂盒包括基底，以及独立地连接于所述基底上的特定多肽或特定多肽组合。
Description
技术领域
本发明主要涉及兽用诊断试剂盒及诊断方法。具体而言，本发明涉及用于检测对象生物来源的生物样本中是否存在抗小反刍兽疫病毒的抗体(IgG)的试剂盒。
背景技术
小反刍兽疫(Peste des Petits Ruminants，PPR)，也称羊瘟、小反刍兽伪牛瘟、卡他肺炎、肺肠炎以及肺肠炎综合症，是由小反刍兽疫病毒(Peste des Peties RuminantsVirus,PPRV)引起的一种严重危害山羊、绵羊等小反刍类动物的传染病，山羊高度易感，且发病率和病死率均较高。PPR在世界上被认为是十分重要的烈性传染病之一，在我国也被列为一类动物传染病。
1942年，小反刍疫首次在西非的科特迪瓦报导，随后几年，尼日利亚、塞拉利昂和加纳等国均发生过此类病，近几年中非、东非、西亚以及南亚的许多国家均发现此种病传染。我国农业部2007年7月26日也发布在西藏自治区日土县发生小反刍疫情。对我国养羊业构成严重威胁。
小反刍兽疫病毒的基因组是单股负链、无节段RNA，其RNA链从3’端至5’端依次分布着N-P-M-F-H-L6个基因，编码6种结构蛋白(核蛋白(N)、磷蛋白(P)、多聚酶大蛋白(L)、基质蛋白(M)、融合蛋白(F)和血凝蛋白(H))和2种非结构蛋白(C和V)。
该病的初步诊断，可根据临床症状和病理变化作出判断，而确诊需进行实验室检查。其中，血清学诊断方法仍为常规采用的方法，包括：琼脂扩散试验(AGID)、沉淀抑制试验(CIEP)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、间接荧光抗体试验(IFA)和病毒中和试验(VNT)、RT-PCR-ELISA等。其中，VNT和ELISA两种方法最为重要，在国际贸易中，前者为指定方法，后者为替代方法。
VNT虽是敏感特异的检测方法，但也存在一些缺点，如(1)费时，一般10～12天才能获得结果。(2)条件严格，涉及细胞培养和试验样品的无菌处理，结果判定要有经验等，在发展中国家，尤其现地基层，没有条件开展。(3)费力，工作量和劳动强度大，不适合大量样品的检测。与此相对，酶联免疫测定的特异性和敏感性较高、检测时间比病毒中和试验短且适合检测大量样品，因此，被广泛应用于小反刍兽疫病毒抗体的检测。
用于小反刍兽疫病毒抗体检测的酶联免疫测定方法主要包括竞争酶联免疫测定(c-ELISA)、阻断酶联免疫测定(b-ELISA)和间接酶联免疫测定(间接ELISA)。c-ELISA和b-ELISA的特异性和敏感性都比较高，是被临床普遍接受的小反刍兽疫病毒抗体检测方法，例如国际上通用的法国BIRAD实验室的小反刍兽疫诊断试剂盒就采用了c-ELISA方法。但是，c-ELISA和b-ELISA均需使用单克隆抗体，这造成检测成本大幅提高；而且，c-ELISA和b-ELISA的操作繁琐、检测时间长(虽然相对于VNT已经有所缩短)、判据复杂。另一方面，传统的间接ELISA使用源自小反刍兽疫病毒的完整蛋白(例如H蛋白、N蛋白、F蛋白等)或重组蛋白作为包被抗原来检测血清中的抗体，其成本低于c-ELISA和b-ELISA；但是，由于该方法使用完整蛋白作为抗原，容易发生抗体的错误识别和非特异性识别，因此，其特异性和敏感性都不及c-ELISA和b-ELISA。
因此，需要开发出检测成本低、检测时间短、操作简便、特异性和敏感性高的小反刍兽疫诊断试剂盒。
发明内容
鉴于上述现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种检测成本低、检测时间短、操作简便、特异性和敏感性高的小反刍兽疫诊断试剂盒，以及能够用于制备该试剂盒的多肽或多肽组合。
基于抗原表位多肽的间接ELISA方法使用抗原表位多肽(20个氨基酸左右的单条多肽通常只包含一个抗原表位)作为包被抗原。发明人发现：该方法的敏感性往往偏低，单条多肽的敏感性一般不会超过50％；而灵敏性高的多肽，假阳性率也高，即特异性低。如果能够通过某种方式同时提高检测的特异性和敏感性，就可以克服传统的间接ELISA的缺点，开发出特异性和敏感性均可媲美c-ELISA和b-ELISA、甚至更高的小反刍兽疫诊断试剂盒。
发明人为解决上述技术问题进行了深入研究，结果发现了下述多肽组合1。当以该下述多肽组合1中的至少任意两条对对象生物来源的生物样本有响应作为指标时，可以以90.2％的敏感性和91.3％的特异性诊断小反刍兽疫，完全可以与c-ELISA方法和b-ELISA方法媲美。
因此，本发明包括：
1.一种小反刍兽疫诊断试剂盒，其包括基底，以及独立地固定于所述基底上的下述多肽组合1；
多肽组合1由SEQ ID NO：1～10所示的多肽组成
SEQ ID NO：1所示的序列为N50：SAEALFRLQAMAKILEDQEE的多肽，
SEQ ID NO：2所示的序列为N49：SSQNPREAQRSAEALFRLQA的多肽，
SEQ ID NO：3所示的序列为F54：LKPDLTGTSKSYVRSL的多肽，
SEQ ID NO：4所示的序列为F13：VATAAQITAGVALHQSLMNS的多肽，
SEQ ID NO：5所示的序列为N41：TGDERTVRGTGPRQAQVSFL的多肽，
SEQ ID NO：6所示的序列为H37：NEANWVVPSTDVRDLQNKGE的多肽，
SEQ ID NO：7所示的序列为N9：VESPGQIQRITDDPDVSIR的多肽，
SEQ ID NO：8所示的序列为F10：TKNVRPIQTLTPGRRTRRFV的多肽，
SEQ ID NO：9所示的序列为F52：CCCKGRCRNKEIPASKINPG的多肽，以及
SEQ ID NO：10所示的序列为F11：TPGRRTRRFVGAVLAGVALG的多肽。
2.根据项1所述的小反刍兽疫诊断试剂盒，其用于通过检测对象生物来源的生物样本中是否存在抗小反刍兽疫病毒的抗体(IgG)，诊断对象生物是否被小反刍兽疫病毒感染或小反刍兽疫疫苗免疫。
3.根据项2所述的小反刍兽疫诊断试剂盒，其中，所述对象生物小反刍动物。
4.根据项2或3所述的小反刍兽疫诊断试剂盒，其中，所述对象生物是山羊或绵羊。
5.根据项2～4中任一项所述的小反刍兽疫诊断试剂盒，其中，所述生物样本是全血、血浆或血清。
6.下述多肽组合1在制备小反刍兽疫诊断试剂盒中的用途；
多肽组合1由SEQ ID NO：1～10所示的多肽组成
SEQ ID NO：1所示的序列为N50：SAEALFRLQAMAKILEDQEE的多肽，
SEQ ID NO：2所示的序列为N49：SSQNPREAQRSAEALFRLQA的多肽，
SEQ ID NO：3所示的序列为F54：LKPDLTGTSKSYVRSL的多肽，
SEQ ID NO：4所示的序列为F13：VATAAQITAGVALHQSLMNS的多肽，
SEQ ID NO：5所示的序列为N41：TGDERTVRGTGPRQAQVSFL的多肽，
SEQ ID NO：6所示的序列为H37：NEANWVVPSTDVRDLQNKGE的多肽，
SEQ ID NO：7所示的序列为N9：VESPGQIQRITDDPDVSIR的多肽，
SEQ ID NO：8所示的序列为F10：TKNVRPIQTLTPGRRTRRFV的多肽，
SEQ ID NO：9所示的序列为F52：CCCKGRCRNKEIPASKINPG的多肽，以及
SEQ ID NO：10所示的序列为F11：TPGRRTRRFVGAVLAGVALG的多肽。
7.根据项6所述的用途，其中，所述小反刍兽疫诊断试剂盒用于通过检测对象生物来源的生物样本中是否存在抗小反刍兽疫病毒的抗体(IgG)，诊断对象生物是否被小反刍兽疫病毒感染或小反刍兽疫疫苗免疫。
8.根据项7所述的用途，其中，所述对象生物小反刍动物。
9.根据项7或8所述的用途，其中，所述对象生物是山羊或绵羊。
10.根据项7～9中任一项所述的用途，其中，所述生物样本是全血、血浆或血清。
上述多肽及试剂盒可以用于检测对象生物来源的生物样本中是否存在抗小反刍兽疫病毒的抗体(IgG)。通常，生物样本中的小反刍兽疫病毒抗体(IgG)是由于对象生物被小反刍兽疫病毒感染或被小反刍兽疫疫苗免疫而产生的，因此，上述多肽及试剂盒可以用于诊断对象生物是否被小反刍兽疫病毒感染或小反刍兽疫疫苗免疫。
发明的具体实施方式
首先，本发明提供下述多肽组合1：
多肽组合1由SEQ ID NO：1～10所示的多肽组成
SEQ ID NO：1所示的序列为N50：SAEALFRLQAMAKILEDQEE的多肽，
SEQ ID NO：2所示的序列为N49：SSQNPREAQRSAEALFRLQA的多肽，
SEQ ID NO：3所示的序列为F54：LKPDLTGTSKSYVRSL的多肽，
SEQ ID NO：4所示的序列为F13：VATAAQITAGVALHQSLMNS的多肽，
SEQ ID NO：5所示的序列为N41：TGDERTVRGTGPRQAQVSFL的多肽，
SEQ ID NO：6所示的序列为H37：NEANWVVPSTDVRDLQNKGE的多肽，
SEQ ID NO：7所示的序列为N9：VESPGQIQRITDDPDVSIR的多肽，
SEQ ID NO：8所示的序列为F10：TKNVRPIQTLTPGRRTRRFV的多肽，
SEQ ID NO：9所示的序列为F52：CCCKGRCRNKEIPASKINPG的多肽，以及
SEQ ID NO：10所示的序列为F11：TPGRRTRRFVGAVLAGVALG的多肽。
与基于抗原表位多肽的间接ELISA方法中，单条多肽的一般不超过50％的敏感性相比，在以该多肽组合1中的至少任意两条对对象生物来源的生物样本有响应作为指标的情况下，可以以90.2％的敏感性和91.3％的特异性诊断小反刍兽疫。
本说明书中，敏感性是指：用“金标准”方法确认的阳性样本中，被其他方法测定为阳性样本的比例。特异性是指：用“金标准”方法确认的阴性样本中，被其他方法测定为阴性样本的比例。对于小反刍兽疫病毒抗体的检测而言，本技术领域的“金标准”是病毒中和试验(VNT)。
上述多肽组合可以作为检测探针用于制备检测对象生物来源的生物样本中是否存在抗小反刍兽疫病毒的抗体(IgG)的试剂盒。通常，生物样本中的小反刍兽疫病毒抗体(IgG)是由于对象生物被小反刍兽疫病毒感染或被小反刍兽疫疫苗免疫而产生的，因此，上述多肽组合及试剂盒可以用于诊断对象生物是否被小反刍兽疫病毒感染或小反刍兽疫疫苗免疫。
因此，本发明还提供一种小反刍兽疫诊断试剂盒，其包括基底，以及独立地连接于所述基底上的上述多肽组合1。
在本说明书中，基底通常为固体，可以是一个，也可以是多个，但优选为一个，即全部多肽独立地连接于同一基底上。在本发明中，对基底没有特殊限制，只要是固体或不溶性材料载体即可。多肽与基底的连接可以采用本领域技术人员公知的多肽与固体材料的连接方法来进行。
在本说明书中，所述对象生物优选为小反刍动物，更优选为山羊或绵羊。
在本说明书中，所述生物样本可以是全血、血浆或血清。
在使用上述试剂盒诊断小反刍兽疫的情况下，当所述多肽组合1中的任意两条或两条以上多肽对对象生物来源的生物样本有响应时，判定该对象生物已被小反刍兽疫病毒感染或小反刍兽疫疫苗免疫(即阳性)；反之，判定该对象生物未被小反刍兽疫病毒感染或小反刍兽疫疫苗免疫(即阴性)。
在本说明书中，“响应”是指：信噪比(SNR)大于或等于2，其中，信噪比＝(多肽点信号值-阴性对照点信号值)/阴性对照点信号值。
实施例
1.多肽的制备与确认
SEQ ID NO：1～10的多肽由吉尔生化(上海)有限公司合成，并通过质谱对其进行了确认。其中，
SEQ ID NO：1的序列为N50：SAEALFRLQAMAKILEDQEE；
SEQ ID NO：2的序列为N49：SSQNPREAQRSAEALFRLQA；
SEQ ID NO：3的序列为F54：LKPDLTGTSKSYVRSL；
SEQ ID NO：4的序列为F13：VATAAQITAGVALHQSLMNS；
SEQ ID NO：5的序列为N41：TGDERTVRGTGPRQAQVSFL；
SEQ ID NO：6的序列为H37：NEANWVVPSTDVRDLQNKGE；
SEQ ID NO：7的序列为N9：VESPGQIQRITDDPDVSIR；
SEQ ID NO：8的序列为F10：TKNVRPIQTLTPGRRTRRFV；
SEQ ID NO：9的序列为F52：CCCKGRCRNKEIPASKINPG；
SEQ ID NO：10的序列为F11：TPGRRTRRFVGAVLAGVALG。
2.试剂盒(多肽芯片)1的制备
试剂盒1
多肽芯片是将SEQ ID NO：1～10的多肽的溶液分别点样在固体支撑材料——“0+X”膜(iPDMS膜)上制备而成的(同时点样一个山羊IgG作为阳性质控点以及一个PB点作为阴性质控点)。“0+X”膜是将带烯烃末端的、表面引发聚合反应的引发剂加入到聚二甲基硅氧烷材料中，随后以热交联(硅氢键键合)的方式固定到聚二甲基硅氧烷的三维结构中，得到的一种材料。其制作过程可参见国际公开专利WO2014/044184。
3.用试剂盒进行检测
将多肽芯片置于室温20min，肉眼观察芯片表面，将有缺损的多肽芯片淘汰，同时确定多肽芯片的正确方向，夹于凸槽，按照血清的数量进行芯片的编号，然后在合格的多肽芯片内注满TBST(0.4M Tris-HCl，2.74M NaCl，2％Tween20，pH7.2±0.2)，室温放置2-4min，检查有无漏夜，将漏液的多肽芯片弃去。填补空缺的多肽芯片，操作同上。将检验合格的多肽芯片夹于凸槽上，每8个芯片为一组，用TBST润洗2次，喷壶淋洗，一孔进一孔出，形成流动，最后在纱布上轻轻拍打，再一个一个取盖甩干，但要注意保持多肽芯片表面湿润，备用。
在超净台内将血清稀释50倍(5μl血清样本+245μl血清稀释液)分别做编号，震荡混匀，使芯片编号与血清编号互相一致，在已经润洗的芯片上上样，200μl/孔，避免产生气泡，加入经稀释后的血清200μl，室温，摇床150rpm，孵育30min。
弃液，淋洗4次(方法同上)，甩干，加入二抗(兔抗山羊IgG)，室温，摇床150rpm，孵育30min。
弃液，弃盖，淋洗4次，甩干，每8个芯片为一组，加20μl/孔的发光液(Thermo，Prod#37074)，曝光2min。使用GenePix Pro6.0采集数据。
对于每一份血清，分别统计该试剂盒中的每一条多肽是否有响应(即，信噪比(SNR)大于等于2)，并进行判定。
对于上述试剂盒1，当检测到SEQ ID NO：1～10所示的多肽中的任意两条或两条以上有响应时，判定为小反刍兽疫阳性；反之，判定为阴性。
其中，信噪比＝(多肽点信号值-阴性对照点信号值)/阴性对照点信号值。多肽点信号值是指软件读取的多肽点的化学发光强度值，阴性对照点信号值是指软件读取的阴性对照点的化学发光强度值。
对于755份来自中国各地区的山羊和绵羊血清样本，分别采用上述步骤2中制备的试剂盒(按上述3的步骤)以及病毒中和试验(VNT，按OIE(2010)《小反刍兽疫病毒中和试验》所述方法)进行检测，检测结果如下所示。
表1
敏感性＝360/399*100％＝90.2％
特异性＝325/356＝91.3％
由以上可知，试剂盒1的敏感性和特异性均在90％以上(且是采用VNT方法验证，不是采用对照试剂盒方法验证)，足以媲美采用c-ELISA方法或b-ELISA方法的试剂盒。
序列表
<110> 中国兽医药品监察所
<120> 小反刍兽疫诊断试剂盒
<130> PB00110
<141> 2018-04-24
<160> 10
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
Ser Ala Glu Ala Leu Phe Arg Leu Gln Ala Met Ala Lys Ile Leu Glu
1 5 10 15
Asp Gln Glu Glu
20
<210> 2
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
Ser Ser Gln Asn Pro Arg Glu Ala Gln Arg Ser Ala Glu Ala Leu Phe
1 5 10 15
Arg Leu Gln Ala
20
<210> 3
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
Leu Lys Pro Asp Leu Thr Gly Thr Ser Lys Ser Tyr Val Arg Ser Leu
1 5 10 15
<210> 4
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 4
Val Ala Thr Ala Ala Gln Ile Thr Ala Gly Val Ala Leu His Gln Ser
1 5 10 15
Leu Met Asn Ser
20
<210> 5
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 5
Thr Gly Asp Glu Arg Thr Val Arg Gly Thr Gly Pro Arg Gln Ala Gln
1 5 10 15
Val Ser Phe Leu
20
<210> 6
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 6
Asn Glu Ala Asn Trp Val Val Pro Ser Thr Asp Val Arg Asp Leu Gln
1 5 10 15
Asn Lys Gly Glu
20
<210> 7
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 7
Val Glu Ser Pro Gly Gln Ile Gln Arg Ile Thr Asp Asp Pro Asp Val
1 5 10 15
Ser Ile Arg
<210> 8
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 8
Thr Lys Asn Val Arg Pro Ile Gln Thr Leu Thr Pro Gly Arg Arg Thr
1 5 10 15
Arg Arg Phe Val
20
<210> 9
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 9
Cys Cys Cys Lys Gly Arg Cys Arg Asn Lys Glu Ile Pro Ala Ser Lys
1 5 10 15
Ile Asn Pro Gly
20
<210> 10
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 10
Thr Pro Gly Arg Arg Thr Arg Arg Phe Val Gly Ala Val Leu Ala Gly
1 5 10 15
Val Ala Leu Gly
20
Claims (6)
1.一种多肽组合1，其由SEQ ID NO：1～10所示的多肽组成，其中，
SEQ ID NO：1的序列为N50：SAEALFRLQAMAKILEDQEE；
SEQ ID NO：2的序列为N49：SSQNPREAQRSAEALFRLQA；
SEQ ID NO：3的序列为F54：LKPDLTGTSKSYVRSL；
SEQ ID NO：4的序列为F13：VATAAQITAGVALHQSLMNS；
SEQ ID NO：5的序列为N41：TGDERTVRGTGPRQAQVSFL；
SEQ ID NO：6的序列为H37：NEANWVVPSTDVRDLQNKGE；
SEQ ID NO：7的序列为N9：VESPGQIQRITDDPDVSIR；
SEQ ID NO：8的序列为F10：TKNVRPIQTLTPGRRTRRFV；
SEQ ID NO：9的序列为F52：CCCKGRCRNKEIPASKINPG；
SEQ ID NO：10的序列为F11：TPGRRTRRFVGAVLAGVALG。
2.一种多肽组合1在制备小反刍兽疫诊断试剂盒中的用途；
所述多肽组合1由SEQ ID NO：1～10所示的多肽组成，
SEQ ID NO：1所示的序列为N50：SAEALFRLQAMAKILEDQEE的多肽，
SEQ ID NO：2所示的序列为N49：SSQNPREAQRSAEALFRLQA的多肽，
SEQ ID NO：3所示的序列为F54：LKPDLTGTSKSYVRSL的多肽，
SEQ ID NO：4所示的序列为F13：VATAAQITAGVALHQSLMNS的多肽，
SEQ ID NO：5所示的序列为N41：TGDERTVRGTGPRQAQVSFL的多肽，
SEQ ID NO：6所示的序列为H37：NEANWVVPSTDVRDLQNKGE的多肽，
SEQ ID NO：7所示的序列为N9：VESPGQIQRITDDPDVSIR的多肽，
SEQ ID NO：8所示的序列为F10：TKNVRPIQTLTPGRRTRRFV的多肽，
SEQ ID NO：9所示的序列为F52：CCCKGRCRNKEIPASKINPG的多肽，以及
SEQ ID NO：10所示的序列为F11：TPGRRTRRFVGAVLAGVALG的多肽。
3.根据权利要求2所述的用途，其中，所述小反刍兽疫诊断试剂盒用于通过检测对象生物来源的生物样本中是否存在抗小反刍兽疫病毒的IgG抗体，诊断对象生物是否被小反刍兽疫病毒感染或小反刍兽疫疫苗免疫。
4.根据权利要求3所述的用途，其中，所述对象生物是山羊或绵羊。
5.根据权利要求3所述的用途，其中，所述生物样本是全血、血浆或血清。
6.一种小反刍兽疫诊断试剂盒，其包括基底，以及独立地固定于所述基底上的下述多肽组合1；
所述多肽组合1由SEQ ID NO：1～10所示的多肽组成，
SEQ ID NO：1所示的序列为N50：SAEALFRLQAMAKILEDQEE的多肽，
SEQ ID NO：2所示的序列为N49：SSQNPREAQRSAEALFRLQA的多肽，
SEQ ID NO：3所示的序列为F54：LKPDLTGTSKSYVRSL的多肽，
SEQ ID NO：4所示的序列为F13：VATAAQITAGVALHQSLMNS的多肽，
SEQ ID NO：5所示的序列为N41：TGDERTVRGTGPRQAQVSFL的多肽，
SEQ ID NO：6所示的序列为H37：NEANWVVPSTDVRDLQNKGE的多肽，
SEQ ID NO：7所示的序列为N9：VESPGQIQRITDDPDVSIR的多肽，
SEQ ID NO：8所示的序列为F10：TKNVRPIQTLTPGRRTRRFV的多肽，
SEQ ID NO：9所示的序列为F52：CCCKGRCRNKEIPASKINPG的多肽，以及
SEQ ID NO：10所示的序列为F11：TPGRRTRRFVGAVLAGVALG的多肽。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201810480834.5A CN110498844B (zh) | 2018-05-18 | 2018-05-18 | 小反刍兽疫诊断试剂盒 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201810480834.5A CN110498844B (zh) | 2018-05-18 | 2018-05-18 | 小反刍兽疫诊断试剂盒 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN110498844A CN110498844A (zh) | 2019-11-26 |
| CN110498844B true CN110498844B (zh) | 2021-03-09 |
Family
ID=68585195
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201810480834.5A Active CN110498844B (zh) | 2018-05-18 | 2018-05-18 | 小反刍兽疫诊断试剂盒 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN110498844B (zh) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110894215B (zh) * | 2019-12-16 | 2021-08-27 | 中国农业大学 | 一种小反刍兽疫病毒抗原以及检测小反刍兽疫病毒抗体的胶体金免疫层析试纸卡 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107098979A (zh) * | 2017-06-22 | 2017-08-29 | 中国动物疫病预防控制中心 | 小反刍兽疫病毒h‑f融合蛋白及其相关生物材料与应用 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20140000615A1 (en) * | 2012-06-27 | 2014-01-02 | Alan Wanderer | System for reduction of air leaks with use of cpap masks |
-
2018
- 2018-05-18 CN CN201810480834.5A patent/CN110498844B/zh active Active
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107098979A (zh) * | 2017-06-22 | 2017-08-29 | 中国动物疫病预防控制中心 | 小反刍兽疫病毒h‑f融合蛋白及其相关生物材料与应用 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Interference in the vaccination of cattle against rinderpest virus by antibodies against peste des petits ruminants (PPR) virus;E. Couacy-Hymann 等;《Vaccine》;20060615;全文 * |
| 小反刍兽疫病毒H和F蛋白多抗原表位的表达及其反应原性;石晓妮 等;《中国兽医科学》;20110520;全文 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN110498844A (zh) | 2019-11-26 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111856027B (zh) | 适用于无明显症状者排查的新冠病毒抗体检测试剂盒 | |
| CN113321715B (zh) | 新型冠状病毒抗原及其检测用途 | |
| CN110498844B (zh) | 小反刍兽疫诊断试剂盒 | |
| CN110498845B (zh) | 小反刍兽疫诊断试剂盒 | |
| CN108802368A (zh) | 一种酶联免疫检测牛流产衣原体的试剂盒 | |
| CN108956986B (zh) | 新城疫病毒抗体检测试剂盒 | |
| KR101329344B1 (ko) | 돼지인플루엔자 바이러스 헤마글루티닌 검출용 항체 및 이의 용도 | |
| CN110501505B (zh) | 小反刍兽疫诊断试剂盒 | |
| KR101032956B1 (ko) | 수청바이러스 유래 뉴클레오캡시드 단백질을 이용하여 신증후출혈열 특이 ＩｇＭ과 ＩｇＧ를 검출하는 신속 진단 키트 | |
| JP6357425B2 (ja) | 干渉ペプチド及び微生物の検出方法 | |
| KR20230087219A (ko) | 사스-코로나바이러스-2 뉴클레오캡시드 단백질에 대한 단클론 항체 및 이의 용도 | |
| CN110488010B (zh) | 新城疫病毒抗体检测试剂盒 | |
| CN110488011B (zh) | 新城疫病毒抗体检测试剂盒 | |
| CN111537713B (zh) | 小反刍兽疫病毒抗体检测试剂盒 | |
| CN110488017B (zh) | 新城疫病毒抗体检测试剂盒 | |
| CN110498842B (zh) | 小反刍兽疫诊断试剂盒 | |
| CN108717124A (zh) | 新城疫病毒抗体检测试剂盒 | |
| CN108693352B (zh) | 新城疫病毒抗体检测试剂盒 | |
| CN110531079B (zh) | 新城疫病毒抗体检测试剂盒 | |
| CN110531081B (zh) | 新城疫病毒抗体检测试剂盒 | |
| CN110531080B (zh) | 新城疫病毒抗体检测试剂盒 | |
| US20220187298A1 (en) | A method of identifying a flavivirus infection, and related peptides, kits and compositions | |
| KR101329342B1 (ko) | 돼지인플루엔자 바이러스 뉴라미니다아제 검출용 항체 및 이의 용도 | |
| KR101341640B1 (ko) | 단백질 미세 구조 분석 방법 및 단백질 미세 구조 분석용 어레이 | |
| CN113030468A (zh) | 降低误检可能性的SARS-CoV-2抗体检测试剂盒 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |